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智能手机辅助双探针比色法检测α-葡萄糖苷酶
1
作者 赵灵芝 赵柳 +2 位作者 张小清 寇张文 魏世楠 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期905-912,共8页
该文以3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)和罗丹明B为比色探针,建立了α-葡萄糖苷酶的比色检测方法,并在此基础上基于智能手机策略,通过RGB值对α-葡萄糖苷酶进行检测。结果表明,Fe^(3+)-TMB-罗丹明B显色体系的吸光度与α-葡萄糖苷... 该文以3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)和罗丹明B为比色探针,建立了α-葡萄糖苷酶的比色检测方法,并在此基础上基于智能手机策略,通过RGB值对α-葡萄糖苷酶进行检测。结果表明,Fe^(3+)-TMB-罗丹明B显色体系的吸光度与α-葡萄糖苷浓度在20~100 U/L范围内呈线性关系,检出限为3.3 U/L。采用photo⁃shop软件分析样品图像和样品荧光图像的RGB值,其与α-葡萄糖苷酶浓度在10~100 U/L范围内呈线性关系,检出限分别为2.5 U/L和1.2 U/L。该法已成功用于α-葡萄糖苷酶抑制剂阿卡波糖抑制率评估和胎牛血清中α-葡萄糖苷酶浓度的测定。所构建的智能手机辅助检测法为α-葡萄糖苷酶的临床分析和酶抑制剂的快速筛选提供了简便、快捷和准确的方法。 展开更多
关键词 Α-葡萄糖苷酶 抗坏血酸 智能手机比色法 3 3' 5 5'-四甲基联苯胺(TMB) 罗丹明B
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金属离子对二甲亚砜依赖的RNA切割型脱氧核酶催化活性的影响
2
作者 崔力 李素慧 +2 位作者 郑星 常天俊 邴涛 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2024年第4期35-42,共8页
在高浓度有机溶剂中工作的RNA切割型脱氧核酶(RNA-cleaving DNAzyme,RCD)及其构筑的分子器件不仅拓展了DNA作为酶的能力,还可将功能核酸推进新的应用领域.本文研究了一个需要二甲亚砜才能工作的RCD(命名为E3)对金属离子的需求,发现二价... 在高浓度有机溶剂中工作的RNA切割型脱氧核酶(RNA-cleaving DNAzyme,RCD)及其构筑的分子器件不仅拓展了DNA作为酶的能力,还可将功能核酸推进新的应用领域.本文研究了一个需要二甲亚砜才能工作的RCD(命名为E3)对金属离子的需求,发现二价金属离子对其催化活性至关重要,活性顺序为Zn^(2+),Mg^(2+)>Fe^(2+)>Pb^(2+)>Mn^(2+)>Co^(2+).以Mg^(2+)或Zn^(2+)为辅因子,表征了E3的速率-pH值关系及其与二者的结合比例.E3的催化速率-pH曲线在Mg^(2+)存在下为“钟形”,高速率的pH值范围为7.0~9.0;Zn^(2+)存在下为“尖峰”,速率最高时pH=7.0;E3与Mg^(2+)和Zn^(2+)的数量结合比例均为1∶1.另外,E3以Fe^(2+)为辅因子时易失活,Fe^(2+)被氧化成Fe^(3+)是失活的关键,加入还原剂可使其复活.进一步研究发现,Cu^(2+),Fe^(3+)和Ni^(2+)等金属离子可抑制Mg^(2+)或Zn^(2+)的作用,使E3的催化活性急剧降低.本文研究结果为理解E3的性质及催化机制提供了有用信息. 展开更多
关键词 RNA切割型脱氧核酶 功能核酸 有机溶剂 金属离子
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氮掺杂Ti_(3)C_(2)MXene量子点荧光探针用于α-葡萄糖苷酶活性检测
3
作者 李军 杨新杰 +6 位作者 罗焰 李泉 宗玉红 张艳丽 王红斌 杨文荣 庞鹏飞 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期674-681,共8页
α-葡萄糖苷酶是生物体糖代谢途径中不可或缺的一类酶,发展简单、灵敏、准确的α-葡萄糖苷酶活性检测及抑制剂筛选方法对于糖尿病的治疗与预防具有重要意义。该文基于氮掺杂Ti_(3)C_(2)MXene量子点(NTi_(3)C_(2)MQDs)荧光探针和内滤效应... α-葡萄糖苷酶是生物体糖代谢途径中不可或缺的一类酶,发展简单、灵敏、准确的α-葡萄糖苷酶活性检测及抑制剂筛选方法对于糖尿病的治疗与预防具有重要意义。该文基于氮掺杂Ti_(3)C_(2)MXene量子点(NTi_(3)C_(2)MQDs)荧光探针和内滤效应(IFE),构建了一种“开-关-开”型荧光传感α-葡萄糖苷酶活性检测及抑制剂筛选的新方法。研究发现,N-Ti_(3)C_(2)MQDs发射蓝色荧光(λem=440 nm),荧光量子产率为15.7%。其检测机理为:α-葡萄糖苷酶水解底物对硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷,水解产物对硝基苯酚通过内滤效应导致NTi_(3)C_(2)MQDs荧光猝灭;而抑制剂阿卡波糖可使α-葡萄糖苷酶的活性受到抑制,水解产物减少,N-Ti_(3)C_(2)MQDs荧光恢复。结果显示,N-Ti3C2 MQDs探针荧光强度与α-葡萄糖苷酶浓度在5~300 U/L范围内呈良好线性关系,检出限为2.5 U/L(S/N=3),对阿卡波糖的半最大抑制浓度(IC_(50))为178.5μmol/L。该方法具有成本低、操作简单、灵敏度高、选择性好等特点,已成功用于人血清中α-葡萄糖苷酶活性的测定。 展开更多
关键词 Α-葡萄糖苷酶 氮掺杂Ti_(3)C_(2)MXene 量子点 荧光探针
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普洱茶中黑曲霉蛋白酶的催化特性
4
作者 许燕 刘玉飞 +4 位作者 庞丹丹 马玉青 汤海昆 赵红艳 孙云南 《贵州农业科学》 CAS 2023年第11期43-48,共6页
【目的】探明普洱茶中黑曲霉蛋白酶的催化特性以及影响蛋白酶催化活性的因素,为普洱茶渥堆发酵过程中高效利用黑曲霉蛋白酶提供依据。【方法】以普洱茶渥堆发酵过程中的优势菌黑曲霉为材料,设置不同pH、不同温度、不同浓度金属离子以及... 【目的】探明普洱茶中黑曲霉蛋白酶的催化特性以及影响蛋白酶催化活性的因素,为普洱茶渥堆发酵过程中高效利用黑曲霉蛋白酶提供依据。【方法】以普洱茶渥堆发酵过程中的优势菌黑曲霉为材料,设置不同pH、不同温度、不同浓度金属离子以及金属络合剂EDTA的环境,采用福林酚法测定普洱茶中黑曲霉蛋白酶的酶活。【结果】黑曲霉产生的蛋白酶是由多种蛋白酶组成的复合蛋白酶系,属于酸性蛋白酶。pH 6.0、反应温度60℃时,黑曲霉产蛋白酶的活性最高;Mn^(2+)具有增强黑曲霉蛋白酶活性的作用;Ca^(2+)具有抑制黑曲霉蛋白酶催化活性的作用。【结论】在合适条件下,黑曲霉蛋白酶将促进普洱茶渥堆发酵过程中茶叶蛋白质的分解。 展开更多
关键词 普洱茶 黑曲霉 蛋白酶 催化特性 酶活性 热力学稳定性
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SBA-15固定化黑曲霉脂肪酶对柚皮苷的区域选择性酰化
5
作者 姜丽艳 董洪举 杜映达 《合成化学》 CAS 2023年第12期925-931,共7页
柚皮苷(Naringin)是一种天然存在的生物类黄酮,分布于较多种类的水果和蔬菜中,具有抗癌症、抗氧化和保护心血管等多种生物活性。但因其较差的生物利用率致使其深度开发和临床治疗应用面临着严重阻碍。为了提高柚皮苷的生物利用价值,采用... 柚皮苷(Naringin)是一种天然存在的生物类黄酮,分布于较多种类的水果和蔬菜中,具有抗癌症、抗氧化和保护心血管等多种生物活性。但因其较差的生物利用率致使其深度开发和临床治疗应用面临着严重阻碍。为了提高柚皮苷的生物利用价值,采用SBA-15固定化黑曲霉脂肪酶(Aspergillus niger lipase,ANL)对柚皮苷进行了酶法转化研究。系统考察了在非水相有机介质中固定化ANL催化柚皮苷酰基化反应的酶活及区域选择性的影响因素。结果表明:酰基供体、反应溶剂、水活度及反应温度对柚皮苷的酰化反应具有不同程度的影响。在最佳催化条件下,酶活最高(153±5μmol·h^(-1)·g^(-1)),酶转化率可达92.00%±2.43%,且固定化ANL对柚皮苷的C-6'位置具有区域选择性(>99%)。 展开更多
关键词 柚皮苷 黑曲霉脂肪酶 酶的固定化 区域选择性 酰化反应
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花生品种对水媒法提取分离蛋白质与脂质及内源性蛋白酶活性的影响 被引量：1
6
作者 范俊燕 张彩猛 +3 位作者 孔祥珍 李兴飞 华欲飞 陈业明 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期20-25,36,共7页
为筛选适合水媒法加工的花生品种,降低花生蛋白的致敏性,收集了5个花生品种,首先比较了其脂质和蛋白质含量,然后采用水媒法提取分离蛋白质与脂质,考察了花生品种对脂质和蛋白质的提取率及脂质和蛋白质的分离效果的影响,最后比较了不同... 为筛选适合水媒法加工的花生品种,降低花生蛋白的致敏性,收集了5个花生品种,首先比较了其脂质和蛋白质含量,然后采用水媒法提取分离蛋白质与脂质,考察了花生品种对脂质和蛋白质的提取率及脂质和蛋白质的分离效果的影响,最后比较了不同品种花生的内源性蛋白酶(内肽酶和外肽酶)活性。结果表明:脂质(46.95%~51.35%)和蛋白质(24.66%~29.68%)含量在花生品种间存在差异;花生品种对于蛋白质提取率(91.86%~97.77%)的影响显著,而对于脂质提取率(98%左右)的影响不大;不同品种花生浆中蛋白质和脂质的离心分离效果不同,蛋白质在蛋白液中的分布比例为85.32%~97.34%,脂质在乳状液中的分布比例为68.75%~81.24%,白沙308的分离效果最好;内源性蛋白酶活性(pH 3~5)在花生品种间存在差异,但是各品种的内肽酶均在pH 3时表现出最强活性,可有效水解花生致敏蛋白Ara h 1;各品种花生的外肽酶活性均随pH的增加而增加,在pH 5时,四粒红最高;对于内肽酶和外肽酶的协同活性,花育在pH 3时最强,而其他4个品种在pH 5时最强。综上,白沙308可作为花生水媒法加工的参考品种,而四粒红的内源性蛋白酶活性最强。 展开更多
关键词 花生品种 蛋白质 脂质 提取分离 内源性蛋白酶 游离氨基酸
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低温β-甘露聚糖酶的酶学性质及破胶性能 被引量：1
7
作者 熊玉华 周蕾 +1 位作者 杨世忠 牟伯中 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期134-145,共12页
页岩油气藏开发过程中返排液的破胶及低温油藏压裂液的破胶是目前页岩油气藏及致密油气藏开发过程中面临的一个难题。由于化学破胶剂使用时需要较高的温度,难以满足低温条件下彻底破胶的要求。为此,针对低温酶破胶剂,采用高通量筛选方法... 页岩油气藏开发过程中返排液的破胶及低温油藏压裂液的破胶是目前页岩油气藏及致密油气藏开发过程中面临的一个难题。由于化学破胶剂使用时需要较高的温度,难以满足低温条件下彻底破胶的要求。为此,针对低温酶破胶剂,采用高通量筛选方法,从油田压裂返排水和魔芋地的混合样品中筛选出高效低温β-甘露聚糖酶产生菌,并对所产低温β-甘露聚糖酶的酶学性质及破胶性能进行了研究。结果表明,在筛选到的40个产酶菌株中,菌株O5鉴定为施氏假单胞菌,其产生β-甘露聚糖酶(ME-O5)的最适温度为50℃,在5~20℃时酶活力仍能保持约60%以上,低温活性突出,在中温区域的热稳定性良好;最适pH=7.0,具有一定的pH适应性和较宽的pH耐受范围。ME-O5在5和20℃下均能将瓜尔胶溶液的粘度降低至5 mPa·s以下,降粘率>99%,降粘效果显著。在10、20和50℃下,压裂液经ME-O5破胶处理3 h后,破胶液的表观粘度<5 mPa·s,表面张力<28 mN/m,界面张力<2 mN/m,残渣量<600 mg/L,均达到或优于我国石油天然气行业标准SY/T 6376-2008的要求,在油田压裂低温破胶方面具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 Β-甘露聚糖酶 低温活性 酶学性质 破胶性能 低温酶破胶剂
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石墨烯负载二氧化锡电化学传感器检测4-碘苯氧乙酸研究
8
作者 王德响 段禹 +6 位作者 孔大彬 王洪 胡民康 张津铭 李胜男 杨文 杜海军 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期729-735,共7页
该文通过水热法合成了珊瑚状的二氧化锡纳米颗粒,将其均匀生长在石墨烯上,构建了石墨烯负载二氧化锡电化学传感器对外源植物激素4-碘苯氧乙酸(4-IPOAA)进行电化学检测的方法。采用方波伏安法对不同浓度的4-IPOAA进行检测,结果显示4-IPOA... 该文通过水热法合成了珊瑚状的二氧化锡纳米颗粒,将其均匀生长在石墨烯上,构建了石墨烯负载二氧化锡电化学传感器对外源植物激素4-碘苯氧乙酸(4-IPOAA)进行电化学检测的方法。采用方波伏安法对不同浓度的4-IPOAA进行检测,结果显示4-IPOAA在0.5~20μmol/L和20~100μmol/L范围内具有良好线性关系,检出限(LOD,S/N=3)为9.86×10^(-2)μmol/L。4-IPOAA的电化学氧化过程受混合控制,有2个电子参与。所制备的传感器具有良好的重现性,相对标准偏差(RSD)不大于3.8%。使用加标回收法对白菜和黄瓜中的4-IPOAA进行检测,回收率分别为91.3%~106%和91.4%~116%,RSD分别为1.1%~5.2%和3.8%~8.0%。表明该传感器对4-IPOAA的实际检测具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 植物激素 4-碘苯氧乙酸(4-IPOAA) 石墨烯 二氧化锡 电化学检测
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气相色谱-质谱联用法同时测定牛奶中的6种天然雌激素 被引量：3
9
作者 孔德明 陈超 +2 位作者 周启动 刘则华 郭鹏然 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期216-220,共5页
天然雌激素是一类内源性激素,但其外源性摄入可能对人体健康造成危害。牛奶是人体外源性天然雌激素的重要来源之一,对牛奶中天然雌激素的准确分析是评价人体外源摄入的重要前提。该研究建立了一种气相色谱-质谱联用(GC-MS)同时测定牛奶... 天然雌激素是一类内源性激素,但其外源性摄入可能对人体健康造成危害。牛奶是人体外源性天然雌激素的重要来源之一,对牛奶中天然雌激素的准确分析是评价人体外源摄入的重要前提。该研究建立了一种气相色谱-质谱联用(GC-MS)同时测定牛奶中雌酮(E1)、17α-雌二醇(17α-E2)、17β-雌二醇(E2)、雌三醇(E3)、16α-羟基雌酮(16αOHE1)和16keto雌二醇(16ketoE2)6种天然雌激素的分析方法。选择不同类型牛奶样品,依次通过液液萃取、固相萃取富集净化,再利用BSTFA+1%TMCS进行衍生化,乙酸乙酯定容后采用GC-MS进行测定。结果显示,6种雌激素在5~100μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r^(2))大于0.995;检出限(LOD)和定量下限(LOQ)分别为0.17~0.51μg/L和0.56~1.68μg/L;平均加标回收率为83.1%~119%,相对标准偏差(RSD)为2.1%~15%,该方法具有较好的准确性及稳定性。利用所建方法对实际牛奶样品中的天然雌激素进行检测,除常见的天然雌激素E1、E2、17α-E2之外,样品中还检测出16αOHE1和16ketoE2。方法适用于牛奶中天然雌激素的检测和质量控制。 展开更多
关键词 牛奶 天然雌激素 气相色谱-质谱法(GC-MS) 液液萃取 固相萃取
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激光诱导石墨烯/酶电极的葡萄糖传感研究 被引量：2
10
作者 陈芳如 张兆康 +2 位作者 何书涵 余羲溪 李艳霞 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期150-157,共8页
葡萄糖水平是糖尿病诊断治疗的一项重要评价指标。该文基于激光诱导石墨烯/酶电极构建了一种新型便携式葡萄糖传感器。通过激光诱导石墨烯(LIG)技术制备微型柔性石墨烯三电极系统(LIG电极),并基于1-芘丁酸的疏水端苯环与石墨烯的六元环... 葡萄糖水平是糖尿病诊断治疗的一项重要评价指标。该文基于激光诱导石墨烯/酶电极构建了一种新型便携式葡萄糖传感器。通过激光诱导石墨烯(LIG)技术制备微型柔性石墨烯三电极系统(LIG电极),并基于1-芘丁酸的疏水端苯环与石墨烯的六元环结构间的π-π叠加效应,对LIG电极表面羧基化,进而共价交联葡萄糖氧化酶(GOx),制得LIG/GOx电极,采用计时电流法,开展葡萄糖传感研究。结果表明,所构建的传感器对葡萄糖的检测范围为5.0×10-5~1.0×10-2mol/L,检出限(S/N=2)为5.0×10-5mol/L。方法表现出较高的选择性、稳定性和良好的重复性,可用于血清、尿样和汗液中葡萄糖的检测。LIG在葡萄糖传感微型电极材料的应用,有利于实现葡萄糖的非临床检测,有望用于便携式传感器的构建。 展开更多
关键词 激光诱导石墨烯 葡萄糖 电化学分析 生物传感器
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α-葡萄糖苷酶的异源表达及应用研究进展 被引量：2
11
作者 李林波 张士双 +2 位作者 杨天佑 王宝石 张明霞 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期325-332,共8页
α-葡萄糖苷酶因其有水解糖苷键和转移糖基的功能,目前在工业上主要用于制备低聚异麦芽糖,同时该酶在合成有生物功能的糖-共轭复合物方面显示出巨大的应用潜力,在化妆品、食品、医药等领域展现出广阔的应用前景。该文综述了不同来源的α... α-葡萄糖苷酶因其有水解糖苷键和转移糖基的功能,目前在工业上主要用于制备低聚异麦芽糖,同时该酶在合成有生物功能的糖-共轭复合物方面显示出巨大的应用潜力,在化妆品、食品、医药等领域展现出广阔的应用前景。该文综述了不同来源的α-葡萄糖苷酶的特征和异源表达的研究进展,探讨了α-葡萄糖苷酶制备低聚异麦芽糖的工业合成途径和合成糖苷类生物活性物质方面的应用潜力,并展望了α-葡萄糖苷酶分子改造的发展方向,为获得符合特殊需求的糖苷合成酶突变体提供参考。 展开更多
关键词 Α-葡萄糖苷酶 异源表达 低聚异麦芽糖 糖苷
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锰/锆-双金属有机骨架纳米酶比色法检测水中痕量氟 被引量：1
12
作者 牟芝梅 邓治臣 +4 位作者 赵静銮 柳敬鱼 丁芯茹 彭文洪 贺锦灿 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1405-1412,共8页
该文设计合成了一种新型锰/锆-双金属有机框架(Mn/Zr-MOF)纳米材料,并用于水中痕量氟的检测。顺磁性金属锰、锆赋予了Mn/Zr-MOF类过氧化物酶活性,而锆金属能选择性识别氟离子(F^(-))。Mn/Zr-MOF可催化过氧化氢氧化3,3',5,5'-四... 该文设计合成了一种新型锰/锆-双金属有机框架(Mn/Zr-MOF)纳米材料,并用于水中痕量氟的检测。顺磁性金属锰、锆赋予了Mn/Zr-MOF类过氧化物酶活性,而锆金属能选择性识别氟离子(F^(-))。Mn/Zr-MOF可催化过氧化氢氧化3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)生成蓝色oxTMB,其最大吸收波长为652 nm。体系中的F^(-)可与锆特异性结合,并抑制Mn/Zr-MOF的催化活性,使体系颜色变浅。F^(-)质量浓度与652 nm处的吸光度呈负相关关系,据此建立了一种检测F^(-)的比色法。方法的线性范围为0.40~5.0 mg/L,检出限为0.16 mg/L。将该方法应用于实际水样中F^(-)测定,加标回收率为97.6%~106%,相对标准偏差为0.27%~5.2%。该方法快速、灵敏、选择性好,在实际样品分析中具有较大潜力。 展开更多
关键词 金属有机框架 氟 比色法 纳米酶 类过氧化物酶活性
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具有过氧化物酶活性的纳米酶及其在生物分子检测中的应用
13
作者 黄秋燕 方渊 王杨 《安徽化工》 CAS 2023年第3期23-27,32,共6页
目前人工合成纳米酶取得了相当大的进展。纳米酶具有合成工艺简单、价格低、储存时间长、环境稳定性高等显著优点。多种具有过氧化物酶活性的纳米酶已被广泛应用于生物传感、免疫分析、癌症诊断和治疗、神经保护、干细胞生长等医学领域... 目前人工合成纳米酶取得了相当大的进展。纳米酶具有合成工艺简单、价格低、储存时间长、环境稳定性高等显著优点。多种具有过氧化物酶活性的纳米酶已被广泛应用于生物传感、免疫分析、癌症诊断和治疗、神经保护、干细胞生长等医学领域。为了突出纳米酶在生物分子检测领域的发展,从具有过氧化物酶活性纳米酶的分类及其在生物分子检测中的应用两方面综述了近年来研究者们取得的突出成果。此外,依据纳米酶的研究现状,讨论了纳米酶技术遇到的挑战,展望了未来的发展方向,并提出了一些思考与建议。 展开更多
关键词 纳米酶 模拟酶 过氧化物酶 比色传感 生物分析
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从酵母细胞中提取超氧化物歧化酶的工艺研究
14
作者 吴文辉 梁保红 +2 位作者 杨辰懿 张喜 李鹏飞 《品牌与标准化》 2023年第2期103-105,109,共4页
超氧化物歧化酶(Superoxide Dimutese,SOD)是一种以金属元素为辅基的蛋白酶,主要功能是清除生物体内由正常代谢产生的有害自由基。本课题SOD的提取来源为酵母,由于酵母细胞不存在被污染的情况,因此将酵母细胞作为SOD的提取源,相较于从... 超氧化物歧化酶(Superoxide Dimutese,SOD)是一种以金属元素为辅基的蛋白酶,主要功能是清除生物体内由正常代谢产生的有害自由基。本课题SOD的提取来源为酵母,由于酵母细胞不存在被污染的情况,因此将酵母细胞作为SOD的提取源,相较于从牲畜血液中提取有着更方便、高效、安全的优点。本文主要对从酵母细胞中提取超氧化物歧化酶(SOD)的工艺进行研究,在实验过程中寻找更易提取SOD的方法以及如何提取出活性更强的SOD。 展开更多
关键词 超氧化物歧化酶 酵母菌 发酵法 超声波细胞破碎提取
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CuTAPc-Fe_3O_4纳米复合粒子及其漆酶固定化研究 被引量：24
15
作者 黄俊 周菊英 +2 位作者 肖海燕 龙胜亚 王军涛 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第14期1343-1347,i005,共6页
漆酶的固定化研究对基于漆酶催化的光纤生物传感器具有十分重要的意义.制备了四氨基酞菁铜(CuTAPc)-Fe3O4纳米复合粒子,并用红外(IR)、场发射扫描电镜(FEG-SEM)、X射线衍射(XRD)、能谱、粒径仪等对其进行了表征.结果表明形成了以CuTAPc... 漆酶的固定化研究对基于漆酶催化的光纤生物传感器具有十分重要的意义.制备了四氨基酞菁铜(CuTAPc)-Fe3O4纳米复合粒子,并用红外(IR)、场发射扫描电镜(FEG-SEM)、X射线衍射(XRD)、能谱、粒径仪等对其进行了表征.结果表明形成了以CuTAPc包覆在Fe3O4纳米粒子表面的纳米复合粒子,粒子呈现不规则球形,且分布均匀,粒子平均粒径在50nm左右.用此纳米复合粒子通过戊二醛交联法固定了漆酶,固定后的酶比游离酶具有更好的贮存稳定性及操作稳定性.这为研制高性能的光纤生物传感器打下了较好的基础. 展开更多
关键词 纳米复合粒子 酶固定化 场发射扫描电镜 光纤生物传感器 戊二醛交联法 X射线衍射 FE3O4 操作稳定性 贮存稳定性 纳米粒子 平均粒径 酶催化 酞菁铜 不规则 游离酶 漆酶
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UPLC-MS法同时测定牛奶中磺胺类、喹诺酮类、甾体激素类及四环素类兽药残留 被引量：47
16
作者 李宁 张玉龙 +2 位作者 林涛 王继良 刘宏程 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期714-718,共5页
建立并优化了同时测定牛奶中10种磺胺类、6种喹诺酮类、8种甾体激素类以及1种四环素类药物共25种兽药残留的超高效液相色谱-串联质谱检测方法。样品中目标药物经5%乙酸乙腈提取,HLB固相萃取小柱净化后,通过UPLC-MS测定,外标法定量。25... 建立并优化了同时测定牛奶中10种磺胺类、6种喹诺酮类、8种甾体激素类以及1种四环素类药物共25种兽药残留的超高效液相色谱-串联质谱检测方法。样品中目标药物经5%乙酸乙腈提取,HLB固相萃取小柱净化后,通过UPLC-MS测定,外标法定量。25种兽药在不同加标浓度下的回收率为61.6%~119.2%,组内相对标准偏差（RSD）为2.5%~13.4%,组间RSD为5.8%~14.2%,方法检出限为0.5~2.0μg/kg。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-串联质谱 牛奶 兽药残留 磺胺类 喹诺酮类 甾体激素类 四环素类
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固相萃取/液相色谱-串联质谱法同时测定面膜类化妆品中非法添加的53种糖皮质激素 被引量：34
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作者 罗辉泰 黄晓兰 +8 位作者 吴惠勤 朱志鑫 黄芳 林晓珊 马叶芬 邓欣 周培才 张秋炎 简艳婷 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期119-126,共8页
建立了固相萃取/液相色谱-串联质谱法（SPE/LC-MS/MS）同时测定面膜类化妆品中53种糖皮质激素的方法。样品经水分散后,加入甲醇涡旋提取,提取液用水稀释后,采用Cleanert PEP（60 mg,3 m L）固相萃取小柱净化。待测物经Waters CORTECS C1... 建立了固相萃取/液相色谱-串联质谱法（SPE/LC-MS/MS）同时测定面膜类化妆品中53种糖皮质激素的方法。样品经水分散后,加入甲醇涡旋提取,提取液用水稀释后,采用Cleanert PEP（60 mg,3 m L）固相萃取小柱净化。待测物经Waters CORTECS C18＋（100 mm×2.1 mm,2.7μm）色谱柱分离,在电喷雾离子源的正离子模式下以动态多反应监测（DMRM）模式采集数据并作定性筛查和定量分析。53种药物在相应的浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99,在3个不同浓度加标水平下,平均回收率为66.8%~106.3%,相对标准偏差（RSD）为3.9%~13.2%,检出限（LOD,S/N≥3）和定量下限（LOQ,S/N≥10）分别为3μg/kg及10μg/kg。该方法操作简便、定性可靠、定量准确、灵敏度高,适用于化妆品中非法添加糖皮质激素的定性确证和准确定量。 展开更多
关键词 化妆品 糖皮质激素 固相萃取 液相色谱-串联质谱法 动态多反应监测 非法添加
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UHPLC-LTQ Orbitrap MS测定鸡肉组织中5种糖皮质激素残留 被引量：21
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作者 严华 云环 +6 位作者 刘鑫 崔凤云 李建辉 高洋洋 张杉 丁双阳 张朝晖 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期909-914,共6页
建立了鸡肉组织中地塞米松、泼尼松、氢化可的松、甲基氢化泼尼松、曲安那德5种糖皮质激素的QuEChERS前处理方法以及超高效液相色谱-高分辨质谱(UHPLC-LTQ Orbitrap MS)检测方法。对QuECh-ERS前处理条件进行优化,结果表明,以乙酸乙酯为... 建立了鸡肉组织中地塞米松、泼尼松、氢化可的松、甲基氢化泼尼松、曲安那德5种糖皮质激素的QuEChERS前处理方法以及超高效液相色谱-高分辨质谱(UHPLC-LTQ Orbitrap MS)检测方法。对QuECh-ERS前处理条件进行优化,结果表明,以乙酸乙酯为提取溶剂,乙二胺-N-丙基(PSA)为净化吸附剂,可达到最佳提取和净化效果。采用Waters AQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×150 mm,1.8μm)色谱柱进行分离,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为250μL/min。通过LTQ Orbitrap MS质谱检测器进行检测,以保留时间和精确质量数进行定性,母离子的峰面积进行定量。5种糖皮质激素的线性范围为1～100μg/L,相关系数均大于0.99,在5、10、20μg/kg 3个加标水平下的回收率为87.5%～119.7%,相对标准偏差(RSDs)为2.0%～11.0%。5种糖皮质激素的检出限(LODs)为0.49～0.78μg/kg,定量下限(LOQs)为1.62～2.57μg/kg。该方法稳定、可靠,可满足鸡肉中地塞米松等糖皮质激素残留的检测与确证要求。 展开更多
关键词 地塞米松 糖皮质激素 鸡肉组织 QuEChERS前处理方法 UHPLC-LTQ ORBITRAP MS
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海藻酸钠固定化根霉脂肪酶的制备及其性质 被引量：25
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作者 杨本宏 蔡敬民 +1 位作者 吴克 潘仁瑞 《催化学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第11期977-981,共5页
研究了以海藻酸钠为载体,用包埋法制备固定化德氏根霉(Rhizopus delemar)脂肪酶的条件.将酶粉和海藻酸钠溶于pH 5.0的HAc-NaAc缓冲溶液,用注射器将此混合液滴入到0.05 mol/L无菌CaCl2溶液中,静置固化45 min,经过滤、洗涤和干燥后得到球... 研究了以海藻酸钠为载体,用包埋法制备固定化德氏根霉(Rhizopus delemar)脂肪酶的条件.将酶粉和海藻酸钠溶于pH 5.0的HAc-NaAc缓冲溶液,用注射器将此混合液滴入到0.05 mol/L无菌CaCl2溶液中,静置固化45 min,经过滤、洗涤和干燥后得到球状固定化酶.固定化酶的活力回收约为34.1%.酶学性质研究表明,此固定化酶的热稳定性较好.游离酶在60℃下保温1 h已完全丧失活力,而固定化酶在100℃下保温1 h仅损失36.2%的活力,在100℃下保温6 h仍可保持46.8%的酶活力.酶经固定化后,其橄榄油水解反应的最适温度由40℃上升至90℃,Km值由13.8 mg/ml下降为8.1 mg/ml.常见有机溶剂对固定化酶的活力影响较小.将该固定化脂肪酶用于非水溶剂中正戊酸异戊酯的合成,重复使用6次后,固定化酶仍保持95%的酶活力. 展开更多
关键词 海藻酸钠 包埋法 固定化 根霉 脂肪酶 生物催化
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多孔球状淀粉接枝共聚物的合成及其性质研究 被引量：18
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作者 葛玉斌 吴永革 +3 位作者 孙文田 周慧 李惟 沈家骢 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1997年第6期978-980,共3页
报道了一种多孔球状淀粉接枝共聚物的合成．此球有很强的机械性能、良好的稳定性和较高的致孔率（30％～40％），平均孔径约为19．5nm．以其为载体固定化精化酶活力为1462IU／g干胶，比活为29．31IU／mg蛋白．
关键词 多孔 球状 淀粉接枝共聚物 酶载体 固定化
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