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鱼类传染性造血器官坏死病病毒糖蛋白的截短表达及免疫原性检测 被引量：5
1
作者 赵景壮 徐黎明 +4 位作者 刘淼 曹永生 尹家胜 刘红柏 卢彤岩 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1238-1242,共5页
目的研究鱼类传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)糖蛋白不同区域对免疫原性的影响。方法本研究通过DNAStar 6.0软件分析糖蛋白跨膜区、疏水性及抗原性后,对其进行截短表达;纯化后的糖蛋白制备兔抗血清,ELISA检测兔抗血清的效价,用间接免疫... 目的研究鱼类传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)糖蛋白不同区域对免疫原性的影响。方法本研究通过DNAStar 6.0软件分析糖蛋白跨膜区、疏水性及抗原性后,对其进行截短表达;纯化后的糖蛋白制备兔抗血清,ELISA检测兔抗血清的效价,用间接免疫荧光技术检测纯化后蛋白的免疫原性。结果 SDS-PAGE结果显示,截短糖蛋白相对分子质量(Mr)为40 000,纯化后的糖蛋白经高效液相色谱检测纯度达到90%。利用纯化后的蛋白制备兔抗血清,ELISA结果显示,所制备的兔抗血清与糖蛋白的反应效价为1∶80 000,与IHNV-Sn株细胞培养物的反应效价为1∶20 000;间接免疫荧光结果显示,兔抗血清与IHNV-Sn分离株及参考毒株均能发生特异性的反应。结论实验所表达的糖蛋白与天然的病毒表面糖蛋白具有几乎相同的免疫原性。 展开更多
关键词 传染性造血器官坏死病毒 蛋白表达 糖蛋白 免疫原性
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IgG和IgE介导的免疫反应在旋毛虫病免疫机理中的作用 被引量：5
2
作者 闫玉文 李鹏 +2 位作者 邢杰 马平 王增田 《武警医学院学报》 CAS 2007年第4期348-351,共4页
【目的】探讨IgG和IgE依赖中性粒细胞（Neu）和单核细胞（Mon）介导的细胞毒效应杀伤旋毛虫肌幼虫的免疫机理。【方法】以雄性Wistar大鼠为旋毛虫病实验动物模型,在动态检测不同感染时相大鼠血清中IgE、IgG的基础上,应用体外培养法观察... 【目的】探讨IgG和IgE依赖中性粒细胞（Neu）和单核细胞（Mon）介导的细胞毒效应杀伤旋毛虫肌幼虫的免疫机理。【方法】以雄性Wistar大鼠为旋毛虫病实验动物模型,在动态检测不同感染时相大鼠血清中IgE、IgG的基础上,应用体外培养法观察经不同温度和时间处理的免疫血清对大鼠血液中Neu和Mon杀伤旋毛虫肌幼虫作用的影响。【结果】大鼠在感染旋毛虫后2～3周,血清中的总IgE和特异性IgE达最高值;总IgG和特异性IgG在5周达高峰。体外培养48 h后,Neus和Mons对旋毛虫肌幼虫的杀伤率分别为42.1%和23.2%。【结论】大鼠感染旋毛虫后,其血清中总IgE与特异性IgE及总IgG与特异性IgG同步增加。当免疫血清存在时,感染鼠和非感染鼠的Neu和Mon均具有杀伤旋毛虫肌幼虫的作用,但感染鼠的作用更强。Neu和Mon在发挥杀伤旋毛虫肌幼虫的作用时,主要依赖的是IgG。 展开更多
关键词 IGG IgE NEU Mon ADCC效应 旋毛虫病
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人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库的建立 被引量：1
3
作者 包国强 马庆久 +2 位作者 邢金良 杨向民 陈志南 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期433-435,共3页
目的　建立人 鼠杂合Fab噬菌体抗体库 ,经过扩增和筛选 ,得到目的抗体。方法　自肝癌患者外周血单个核细胞中扩增全套人抗体Fd片段基因 ,分别克隆入含嵌合轻链的展示载体pComb3和pComb3X中 ,建立人 鼠杂合Fab噬菌体抗体库。然后利用肝... 目的　建立人 鼠杂合Fab噬菌体抗体库 ,经过扩增和筛选 ,得到目的抗体。方法　自肝癌患者外周血单个核细胞中扩增全套人抗体Fd片段基因 ,分别克隆入含嵌合轻链的展示载体pComb3和pComb3X中 ,建立人 鼠杂合Fab噬菌体抗体库。然后利用肝癌抗原HAb18GE进行筛选 ,并对抗体库的扩增和筛选条件进行优化。结果　pComb3展示抗体库在 37℃进行扩增挽救时存在明显的目的片段重组丢失现象。pComb3X展示抗体库在不同的扩增条件下均未发现明显的重组丢失现象。经过 4轮筛选后 ,噬菌体展示抗体ELISA显示 ,鉴定克隆与原核表达GST及无关蛋白存在明显交叉反应 ,而改用诱导表达细菌裂解上清进行ELISA鉴定可以抑制交叉反应的发生。结论　通过建立杂合Fab抗体库 ,并对扩增和筛选条件进行优化 。 展开更多
关键词 抗体库 人源性 肝肿瘤
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TLR21在斑马鱼免疫功能中的作用研究 被引量：3
4
作者 欧阳蒲月 郭成栓 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第3期1258-1260,共3页
[目的]研究斑马鱼TLR21受体家族的作用。[方法]用各种纯组分刺激斑马鱼,研究斑马鱼TLR21受体家族(zTLR21.1、zTLR21.3、zTLR21.4)的表达量变化,推测它们的功能。[结果]zTLR21.1对于LTA刺激无反应,对于LPS、ployI:C和Glucan刺激都有上调... [目的]研究斑马鱼TLR21受体家族的作用。[方法]用各种纯组分刺激斑马鱼,研究斑马鱼TLR21受体家族(zTLR21.1、zTLR21.3、zTLR21.4)的表达量变化,推测它们的功能。[结果]zTLR21.1对于LTA刺激无反应,对于LPS、ployI:C和Glucan刺激都有上调反应。zTLR21.3和zTLR21.4对于LPS、LTA和ployI:C刺激均无反应,对于Glucan刺激有明显上调变化。[结论]zTLR21.1可能是一种能够识别大部分抗原的模式识别受体。zTLR21.3和zTLR21.4的功能很类似,可能都是酵母的特异识别受体。 展开更多
关键词 TLR21 TLRS 斑马鱼
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骨唾液酸蛋白单克隆抗体的性质鉴定
5
作者 彭如意 王捷 +4 位作者 刘增田 刘大志 夏冰 詹纯列 张宏斌 《药物生物技术》 CAS CSCD 2009年第1期72-75,共4页
制备重组人骨唾液酸蛋白(rhBSP)单克隆抗体(mAb)并对其性质进行鉴定。采用杂交瘤技术制备mAb,并测定亚型、效价、亲和常数、抗原表位,同时应用竞争抑制ELISA法分析其特异性。结果:得到2株杂交瘤阳性细胞株AHB2和AHB6,亚型为IgM和IgG1,... 制备重组人骨唾液酸蛋白(rhBSP)单克隆抗体(mAb)并对其性质进行鉴定。采用杂交瘤技术制备mAb,并测定亚型、效价、亲和常数、抗原表位,同时应用竞争抑制ELISA法分析其特异性。结果:得到2株杂交瘤阳性细胞株AHB2和AHB6,亚型为IgM和IgG1,轻链均为κ型;AHB2和AHB6的效价分别为10-4,10-6,亲和常数分别约为3·01×108M-1,2·94×1010M-1。检测发现,AHB2和AHB6均与大鼠血清有弱阳性反应。通过竞争抑制ELISA法分析得出AHB2和AHB6两株抗体针对BSP的相同抗原表位。采用Envision法进行BSP免疫组化的检测研究。成功制备了rhBSP的特异性mAb,为进一步研究BSP的生物学功能和临床诊断实验研究打下基础。 展开更多
关键词 骨唾液酸蛋白 单克隆抗体 亲和常数 抗原表位
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