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ω-转氨酶的筛选和异源表达用于制备S-甲氧基异丙胺
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作者 张涛 周海胜 +1 位作者 徐佳琪 杨立荣 《生物学杂志》 CAS CSCD 2024年第2期8-15,56,共9页
根据转氨酶家族进化分类和底物特异性,构建一个包含36个ω-转氨酶的酶库;将酶库中的基因克隆进大肠杆菌E.coli BL21 (DE3)中进行异源重组表达,考察酶蛋白表达水平并测定相应的酶活以及对映体选择性。通过筛选,获得最佳的ω-转氨酶为来... 根据转氨酶家族进化分类和底物特异性,构建一个包含36个ω-转氨酶的酶库;将酶库中的基因克隆进大肠杆菌E.coli BL21 (DE3)中进行异源重组表达,考察酶蛋白表达水平并测定相应的酶活以及对映体选择性。通过筛选,获得最佳的ω-转氨酶为来源于巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium的ω-转氨酶BmeTA,其重组表达粗酶活为2.0 U/mL,纯酶比活为9.5 U/mg蛋白;酶学性质表征发现其最适温度为35℃,最适pH为8.0。在此基础上进一步优化其催化反应工艺条件,在20 g/L加酶量、0.5 mmol/L辅酶添加量以及1.4的氨基供体/氨基受体比例条件下,反应18 h获得450 mmol/L的S-甲氧基异丙胺,原料转化率达到90%,为实现生物催化制备S-甲氧基异丙胺的工业化奠定基础。 展开更多
关键词 S-甲氧基异丙胺 ω-转氨酶 异源表达 氨基转移 生物催化
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血清胸苷激酶1在甲状腺乳头状癌患者术后监测中的价值
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作者 宋晓龙 秦晋铝 +2 位作者 杨茹 魏龙 周建平 《检验医学》 CAS 2024年第2期155-160,共6页
目的 探讨血清胸苷激酶1(TK1)在甲状腺乳头状癌(PTC)患者术后监测中的价值。方法 选取2020年7月—2021年3月陕西省人民医院PTC患者178例,根据治疗方式分为次全切组(53例,行甲状腺次全切术)、全切组(125例,行甲状腺全切术62例、行甲状腺... 目的 探讨血清胸苷激酶1(TK1)在甲状腺乳头状癌(PTC)患者术后监测中的价值。方法 选取2020年7月—2021年3月陕西省人民医院PTC患者178例,根据治疗方式分为次全切组(53例,行甲状腺次全切术)、全切组(125例,行甲状腺全切术62例、行甲状腺全切术+~(131)I治疗63例)。根据患者术后12个月的恢复情况将178例PTC患者分为疗效满意(ER)组(153例)和疗效不满意(NER)组(25例)。收集所有患者的临床资料,监测患者术前和术后1、3、6、12个月血清TK1、甲状腺球蛋白(Tg)水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清TK1、Tg水平判断PTC患者预后不良的效能。采用二元Logistic回归分析评估PTC患者预后不良的危险因素。结果 ER组与NER组之间年龄、肿瘤多灶性、肿瘤最大直径、T分期、N分期、转移淋巴结数差异均有统计学意义(P<0.05),性别、被膜侵犯情况、治疗方式2个组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。NER组术后各时间节点血清TK1水平均高于ER组(P<0.05)。次全切组和全切组NER患者术后6、12个月血清TK1水平均高于ER患者(P<0.05)。全切组NER患者术前和术后各时间点血清Tg水平均高于ER患者(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,术后12个月血清TK1水平判断次全切PTC患者预后不良的效能最高[曲线下面积(AUC)为0.940],其次为术后6个月血清TK1水平(AUC为0.835);术后12个月TK1和Tg联合检测判断全切PTC患者预后不良的AUC最高(0.964),其次为术后6个月TK1和Tg联合检测(AUC为0.943)。二元Logistic回归分析结果显示,T分期、术前Tg≥62.08 IU·L~(-1)是PTC患者预后不良的危险因素[比值比(OR)值分别为5.060、2.908,95%可信区间(CI)分别为2.593~9.875、1.004~8.421,P<0.05]。结论 动态监测血清TK1有助于评估PTC患者次全切术后疗效,联合检测血清TK1、Tg水平有助于行全切术患者的预后评估。 展开更多
关键词 胸苷激酶 甲状腺球蛋白 甲状腺乳头状癌 预后
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磷酸化修饰介导的病原微生物致病机制研究
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作者 林念念 甄向凯 欧阳松应 《福建师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2024年第1期14-22,33,共10页
病原微生物通过特殊的分泌系统向宿主释放一系列效应蛋白,干扰宿主的先天免疫相关信号通路,引起疾病的发生甚至导致宿主死亡,是病原微生物致病的重要手段。翻译后修饰在病原微生物感染过程中发挥重要功能,受到越来越多重视,其中,磷酸化... 病原微生物通过特殊的分泌系统向宿主释放一系列效应蛋白,干扰宿主的先天免疫相关信号通路,引起疾病的发生甚至导致宿主死亡,是病原微生物致病的重要手段。翻译后修饰在病原微生物感染过程中发挥重要功能,受到越来越多重视,其中,磷酸化修饰是一种常见的翻译后修饰,迄今为止许多效应蛋白被发现具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性。微生物借助于这些具有激酶活性的效应蛋白,将宿主内特异靶蛋白进行磷酸化修饰,进而干扰宿主细胞内的信号转导功能,抑制宿主免疫防御反应,促进病原微生物在宿主体内的繁殖与扩增。对近期发现的具有激酶活性的效应蛋白进行概述,为进一步理解磷酸化修饰介导的病原微生物感染以及药物靶标选择提供参考。 展开更多
关键词 病原微生物 翻译后修饰 效应蛋白 丝氨酸/苏氨酸激酶
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钙离子协同溶氧提高重组β-CGT酶的可溶性表达量
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作者 周媛媛 李兆丰 +4 位作者 顾正彪 班宵逢 洪雁 程力 李才明 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期16-23,共8页
环糊精葡萄糖基转移酶(Cyclodextrin glycosyltransferase,简称CGT酶)能够通过环化反应生成环糊精,但天然菌株发酵产酶的水平较低,使得环糊精的生产成本居高不下,因此旨在通过异源表达以及发酵优化策略来提高CGT酶的表达量。首先将来源... 环糊精葡萄糖基转移酶(Cyclodextrin glycosyltransferase,简称CGT酶)能够通过环化反应生成环糊精,但天然菌株发酵产酶的水平较低,使得环糊精的生产成本居高不下,因此旨在通过异源表达以及发酵优化策略来提高CGT酶的表达量。首先将来源于Bacillus xiaoxiensis STB08的cgt基因插入质粒pET-20b(+)中,在宿主菌Escherichia coli BL21(DE3)中进行分泌表达,在适宜的培养基中发酵96 h后,胞外酶活为34.66 U/mL。然后对发酵条件进行优化,改变溶氧以及添加一定终浓度的Ca^(2+)可使酶活提高到66.86 U/mL及83.15 U/mL,且溶氧与Ca^(2+)协同作用可使酶活提高到105.69 U/mL,相比于优化发酵条件之前提高了204.93%。最后通过蛋白质定位分析及流式细胞分析对溶氧及添加Ca^(2+)影响发酵水平的机理进行了研究。结果表明,较低的溶氧能够减少重组大肠杆菌包涵体的形成,且溶氧较低时细胞活性较高,但溶氧过低时菌体浓度太低,不能满足菌体正常生长及代谢的需求。而添加Ca^(2+)能够减少包涵体的形成,同时Ca^(2+)对细胞有较好的保护作用,因此,在溶氧以及Ca^(2+)的协同作用下,能够保证菌体的高生长浓度,且Ca^(2+)能够增加细胞透性并保护细胞,使得活细胞数目显著增多。该研究提高了CGT酶在大肠杆菌中的可溶性表达量,为该酶的工业化生产提供了新的策略及方法,也可为相关酶的发酵优化提供参考。 展开更多
关键词 环糊精葡萄糖基转移酶 异源表达 发酵优化 溶氧 钙离子
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高聚合度异麦芽寡糖的制备及体外益生功能评价
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作者 许滢 王蕾 +3 位作者 魏贝贝 宿玲恰 陈晟 吴敬 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期66-74,共9页
异麦芽寡糖(isomaltooligosaccharides,IMO)是葡萄糖以α-1,6糖苷键为主连接而成的低聚糖,具有低血糖指数特征和益生菌增殖功能。目前商业化IMO主流制备工艺得率较低,且含大量异麦芽糖,而IMO的益生功能主要归功于三糖及以上的高聚合度... 异麦芽寡糖(isomaltooligosaccharides,IMO)是葡萄糖以α-1,6糖苷键为主连接而成的低聚糖,具有低血糖指数特征和益生菌增殖功能。目前商业化IMO主流制备工艺得率较低,且含大量异麦芽糖,而IMO的益生功能主要归功于三糖及以上的高聚合度组分。利用黑曲霉(Aspergillus niger)来源的α-葡萄糖苷酶和嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus NO2)来源的环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)进行复配制备IMO,以获得得率和聚合度提升的IMO(命名为IMOH)。通过单因素实验,考察了反应pH、温度、时间、底物种类及加酶(α-葡萄糖苷酶)量对产物得率的影响,随后探究了复配酶(CGTase)加酶量及反应时间的影响,结果表明在pH5.5、50℃的反应条件下,以300 g/L的DE值为15~20的麦芽糊精为底物,当α-葡萄糖苷酶加酶量为5 U/g(以底物质量计)、CGTase加酶量为15 U/g(以底物质量计)时,IMOH产物得率达到64.27%,其中三糖及以上的高聚合度产物质量分数为71.57%。在对产物进行结构分析后发现,产物α-1,6糖苷键键型占比为70.67%,平均相对分子质量为706,高于市售IMO50。通过肠道微生物体外发酵实验,IMOH与市售IMO50相较,对青春双歧杆菌更具有增殖效果,同时可以进一步抑制肠道条件致病菌大肠杆菌的生长,具有一定的体外益生功能。该研究提出了一种双酶复配制备IMO的新工艺,为工业制备高得率、高聚合度的IMO提供了新思路。 展开更多
关键词 异麦芽寡糖 Α-葡萄糖苷酶 环糊精葡萄糖基转移酶 制备工艺 益生功能
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非典型腺苷酸激酶AK6/hCINAP的结构和功能
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作者 诸葛瑞鹏 黄新平 郑晓峰 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1122-1132,共11页
腺苷酸激酶广泛存在于各种生物中,在维持细胞中核苷酸的正常含量以及能量代谢活动中发挥重要作用。腺苷酸激酶6 (AK6,又称人coilin相互作用核ATP酶蛋白hCINAP)是一种非典型的腺苷酸激酶,既具有腺苷酸激酶的活性,又具有ATP酶的活性。本... 腺苷酸激酶广泛存在于各种生物中,在维持细胞中核苷酸的正常含量以及能量代谢活动中发挥重要作用。腺苷酸激酶6 (AK6,又称人coilin相互作用核ATP酶蛋白hCINAP)是一种非典型的腺苷酸激酶,既具有腺苷酸激酶的活性,又具有ATP酶的活性。本课题组对AK6/hCINAP的结构、酶学特征和生物学功能开展了长期的研究,证明其在调控基因转录、核糖体质量、早期胚胎发育、细胞衰老、细胞代谢、细胞增殖和凋亡、DNA损伤反应、炎症反应、肿瘤发展等诸多生物学过程中均发挥关键作用。本文对AK6/hCINAP的结构特征、生物学功能及上游调控因子进行了总结,阐明该酶生物学作用和分子机制具有重要的生物学意义,有助于开发AK6/hCINAP选择性抑制剂并应用于临床治疗。 展开更多
关键词 腺苷酸激酶AK6/hCINAP 晶体结构 酶学特征 生物学功能 细胞衰老 胚胎发育 肿瘤发展
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3-O-乙酰转移酶的表达及其酶活特性研究
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作者 谭剑 隋淼 +1 位作者 李凡 李义 《当代化工》 CAS 2023年第2期473-476,480,共5页
将3个不同来源的3-O-乙酰转移酶基因转入大肠杆菌表达宿主,成功实现3种3-O-乙酰转移酶的异源表达,并通过诱导条件优化提高了可溶蛋白表达量。酶活特性研究结果显示,3种不同来源的乙酰转移酶在不同温度及pH条件下活性有着显著差异,其中Fo... 将3个不同来源的3-O-乙酰转移酶基因转入大肠杆菌表达宿主,成功实现3种3-O-乙酰转移酶的异源表达,并通过诱导条件优化提高了可溶蛋白表达量。酶活特性研究结果显示,3种不同来源的乙酰转移酶在不同温度及pH条件下活性有着显著差异,其中Fo1TRI201最适温度及pH分别为40℃及pH=5.0,有着更强的温度及pH耐受性。最后在工业物料中考察了粗酶液的脱毒效果,通过向玉米浸泡液中添加1%的Fo1TRI201粗酶液,在40℃、pH=5.0条件下24 h可将玉米浸泡液中的DON从2000μg·L^(-1)以上降解至500μg·L^(-1)以下,降解率最高达82.64%,为呕吐毒素脱毒产品和技术开发提供了选择和参考,具有一定的商业应用价值。 展开更多
关键词 3-O-乙酰转移酶 呕吐毒素 酶活特性 工业物料
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果聚糖蔗糖转移酶基因的克隆及耐盐转基因烟草的培育 被引量:32
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作者 张慧 董伟 +3 位作者 周骏马 杜宝兴 谷冬梅 陈受宜 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期180-186,共7页
采用PCR方法克隆了枯草杆菌(Bacilussubtilis)果聚糖蔗糖转移酶基因(SacB),将其与克隆自酵母(Saccharomycescerevisiae)的羧肽酶A的液泡引导信号序列连接得到嵌合基因。测序验证... 采用PCR方法克隆了枯草杆菌(Bacilussubtilis)果聚糖蔗糖转移酶基因(SacB),将其与克隆自酵母(Saccharomycescerevisiae)的羧肽酶A的液泡引导信号序列连接得到嵌合基因。测序验证后,插入含NPTⅡ基因的植物双元表达载体pBin438中,经农杆菌介导转化烟草。部分经卡那霉素筛选的抗性芽能在含1%NaCl的MS培养基上正常生根,而未转化芽不能生根或根生长缓慢。转基因小苗移入盛蛭石的花盆并浇灌含1%NaCl的hoagland′s营养液,17d后,其中一些转基因烟草植株生长良好,而未转化苗出现明显萎蔫。PCR扩增及Northern分析证实SacB基因已导入转基因植株并得到转录。此结果表明SacB基因的植物基因工程可提高烟草植株的耐盐性。 展开更多
关键词 果聚糖 蔗糖 转移酶基因 转基因 烟草 耐盐性
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血管紧张素转化酶抑制肽的研究进展 被引量:50
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作者 何海伦 陈秀兰 +1 位作者 孙彩云 张玉忠 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第9期7-11,共5页
血管紧张素转化酶 (angiotensin I convertingenzyme ,ACE)在血压调节方面起着重要的作用 ,当其受到抑制时血压就会降低。许多合成的ACE抑制剂被广泛地应用于临床 ,但会造成多种副作用。近年来 ,对天然ACE抑制肽的研究表明 ,一些来源于... 血管紧张素转化酶 (angiotensin I convertingenzyme ,ACE)在血压调节方面起着重要的作用 ,当其受到抑制时血压就会降低。许多合成的ACE抑制剂被广泛地应用于临床 ,但会造成多种副作用。近年来 ,对天然ACE抑制肽的研究表明 ,一些来源于蛋白酶解产生的活性肽可以对ACE起到有效的抑制作用。综述了血管紧张素转化酶的抑制肽的降压原理 ,种类和来源以及结构特点等的研究进展 。 展开更多
关键词 血管紧张素转化酶 ACE抑制剂 抑制 研究进展 血压调节 临床 副作用 酶解 活性肽 蛋白酶
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罗氏Modular全自动生化分析仪酶学指标检测性能验证 被引量:48
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作者 徐建华 黄宪章 +5 位作者 庄俊华 张秀明 徐宁 陈曲波 林莲英 谢湘媚 《检验医学》 CAS 北大核心 2010年第2期81-85,共5页
目的验证罗氏Modular全自动生化分析仪酶学指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)分析性能。方法根据美国临床实验室标准化研究所(CLSI)系列文件(EP5-A2、EP15-A2、EP6-A2、EP7-A2、C28-A2)和其他相关文献的实验方案,... 目的验证罗氏Modular全自动生化分析仪酶学指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)分析性能。方法根据美国临床实验室标准化研究所(CLSI)系列文件(EP5-A2、EP15-A2、EP6-A2、EP7-A2、C28-A2)和其他相关文献的实验方案,对罗氏Modular全自动生化分析仪检测ALT、AST的精密度、准确度、线性、临床可报告范围、干扰和生物参考区间6大性能进行验证,并与厂商声明的性能或公认的质量标准进行比较。结果精密度均符合罗氏性能标准;对卫生部5份室间质控品检测结果与靶值的相对偏倚(SE%)在-3.94%^-9.09%之间,变异指数得分(VIS)均<50,室内质控(IQC)结果与罗氏全球质控系统(QCS)结果相对SE%在-3.70%~5.85%之间;ALT、AST检测均呈一次线性(r=0.999,P<0.05),线性范围分别为4~1 332 U/L、4~1 031 U/L;ALT、AST的临床可报告范围分别为0~133 200 U/L和0~206 200 U/L;血红蛋白(Hb)对AST检测有正干扰,Hb≤6.025 g/L的干扰效应剂量曲线呈一次线性(P<0.05);ALT、AST生物参考区间验证结果均在本实验室给出的参考区间内。结论罗氏Modular生化分析仪ALT、AST检测的主要分析性能符合质量目标要求,CLSI实验评价方案具有可操作性和实用性。 展开更多
关键词 丙氨酸氨基转移酶 天门冬氨酸氨基转移酶 分析性能 验证
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酶解蚕蛹蛋白制备血管紧张素转换酶抑制肽的工艺优化 被引量:17
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作者 贾俊强 徐金玲 +3 位作者 吴琼英 谭广秀 桂仲争 颜辉 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期872-877,共6页
采用碱性蛋白酶水解蚕蛹蛋白,制备血管紧张素转换酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制肽,是蚕蛹蛋白深度开发的途径之一。以ACE抑制率为响应值,用响应面分析法研究酶解温度、酶解pH和加酶量等因素对酶解产物的ACE抑制活性的影响... 采用碱性蛋白酶水解蚕蛹蛋白,制备血管紧张素转换酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制肽,是蚕蛹蛋白深度开发的途径之一。以ACE抑制率为响应值,用响应面分析法研究酶解温度、酶解pH和加酶量等因素对酶解产物的ACE抑制活性的影响,优化制备工艺。结果表明,各因素对制备ACE抑制肽的活性影响程度由大到小依次为酶解pH、酶解温度、加酶量。获得碱性蛋白酶水解蚕蛹蛋白制备ACE抑制肽的最佳工艺条件为:酶解温度50.8℃,酶解pH 9.0,加酶量3 500 U/g。在此条件下,蚕蛹蛋白酶解产物对ACE的理论抑制率最高可达96.67%,验证值为96.49%±1.75%,IC50值为0.102 mg/mL,预测模型可靠性高,可应用于蚕蛹ACE抑制肽的酶法制备。 展开更多
关键词 酶水解 蚕蛹蛋白 血管紧张素转换酶抑制肽 活性 工艺条件 响应曲面法
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低浓度阿特拉津对鲫鱼谷胱甘肽-S转移酶(GSTs)活性的影响 被引量:15
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作者 陈家长 孟顺龙 +2 位作者 瞿建宏 胡庚东 冷春梅 《生态与农村环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期68-72,共5页
研究不同作用时间和不同暴露浓度下阿特拉津对鲫鱼肝脏、肾脏和肌肉谷胱甘肽-S转移酶(GSTs)活性的影响。结果表明:阿特拉津对鲫鱼各个组织器官GSTs活性产生较强的影响。长期暴露下(24 d),阿特拉津对鲫鱼肝脏和肌肉GSTs活性基本表现为诱... 研究不同作用时间和不同暴露浓度下阿特拉津对鲫鱼肝脏、肾脏和肌肉谷胱甘肽-S转移酶(GSTs)活性的影响。结果表明:阿特拉津对鲫鱼各个组织器官GSTs活性产生较强的影响。长期暴露下(24 d),阿特拉津对鲫鱼肝脏和肌肉GSTs活性基本表现为诱导作用,最大诱导率为110.81%和32.54%,且分别在0.15.0和1.010.0 mg.L-1质量浓度范围内存在剂量-效应关系;对鲫鱼肾脏GSTs活性具有抑制作用,最大抑制率为14.42%,且在所设质量浓度(010 mg.L-1)范围内均表现出剂量-效应关系。在10.0 mg.L-1质量浓度暴露下第6—14天内,阿特拉津与鲫鱼肝脏及肌肉GSTs活性间存在时间-效应关系;其他情况下,任何组织器官在试验期间均未表现出时间-效应关系。 展开更多
关键词 亚急性 阿特拉津 鲫鱼 谷胱甘肽-S转移酶
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谷胱甘肽硫-转移酶研究进展 被引量:46
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作者 聂立红 王声湧 胡毅玲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第11期1240-1243,共4页
Glutathione S-transferases(GSTs) are a family of soluble detoxification enzymes which use reduced glutathione(GSH) in conjugation and reduction reactions.Toxic electrophiles,including a variety of carcinogens,are subs... Glutathione S-transferases(GSTs) are a family of soluble detoxification enzymes which use reduced glutathione(GSH) in conjugation and reduction reactions.Toxic electrophiles,including a variety of carcinogens,are substrates for the GSTs and are more easily excreted into bile or urine after conjugation or reduction .The three-dimensional structures of GSTs from several species,including humans,have been determined.GST activity has been found to present in all human tissues,and expression of the various GST isoenzymes differs in degree in the various tissues. Glutathione S-transferases may play a role in the protection of cells against toxic electrophiles and in the resistance to cancer chemotherapeutic agants.The polymorphisms of GSTs genes are one of the important factors that exercise influence on individual susceptibility to cancer. 展开更多
关键词 谷胱甘肽硫-转移酶 GSTS 分类 结构 功能 肿瘤
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谷氨酰胺转移酶对食物蛋白质成膜性能的影响 被引量:16
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作者 姜燕 温其标 +1 位作者 唐传核 杨晓泉 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第8期110-115,共6页
研究了添加谷氨酰胺转移酶(TGase)对大豆分离蛋白(SPI)、酪蛋白酸(NaCN)、明胶、乳清蛋白浓缩物(WPC)、小麦面筋蛋白(WG)及花生分离蛋白(PPI)6种蛋白质成膜特性的影响.研究结果表明:在成膜溶液中加入TGase,蛋白质膜的抗拉强度和表面疏... 研究了添加谷氨酰胺转移酶(TGase)对大豆分离蛋白(SPI)、酪蛋白酸(NaCN)、明胶、乳清蛋白浓缩物(WPC)、小麦面筋蛋白(WG)及花生分离蛋白(PPI)6种蛋白质成膜特性的影响.研究结果表明:在成膜溶液中加入TGase,蛋白质膜的抗拉强度和表面疏水性有不同程度的改善,其中WG,SPI,NaCN和明胶这4种蛋白质膜的抗拉强度分别增加36.2%,17.7%,13.1%和25.6%(P≤0.05);NaCN,SPI,WPC,WG和明胶这5种蛋白质膜的表面疏水性分别增加216.1%,116.9%,30.5%,26.4%和2.4%(P≤0.05);同时膜的水分含量、总可溶性物质量及透光率也明显降低;明胶膜、NaCN膜和WPC膜的断裂伸长率分别增加16.3%,72.6%和172.3%,SPI膜和WG膜的断裂伸长率则分别降低7.5%和36.2%.电泳分析表明TGase使6种蛋白质均产生了共价交联. 展开更多
关键词 谷氨酰胺转移酶 可食膜 蛋白质 成膜性能
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应用NCCLS EP10-A2文件分别对自建和配套生化检测系统进行初步性能评价 被引量:10
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作者 孙宏华 石凌波 +3 位作者 康红 胡远明 谢进进 沙瑶 《检验医学》 CAS 北大核心 2010年第5期345-348,共4页
目的分别对自建生化检测系统(简称自建系统)和配套生化检测系统(简称配套系统)进行初步性能评价。方法依照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP10-A2文件,使用自建系统(OLYMPUS AU400生化分析仪、罗氏cfas校准品及国产试剂)和配套系统(... 目的分别对自建生化检测系统(简称自建系统)和配套生化检测系统(简称配套系统)进行初步性能评价。方法依照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP10-A2文件,使用自建系统(OLYMPUS AU400生化分析仪、罗氏cfas校准品及国产试剂)和配套系统(OLYMPUS AU 400生化分析仪、OLYMPUS校准品及OLYMPUS原装试剂)测定天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、葡萄糖(Glu)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)4个项目,计算其偏差、总不精密度及其截距、斜率、非线性、互染率、漂移性,并与各项目对应设定值作比较。结果自建系统:ALT的低值偏差和Glu的中、高值偏差超出允许范围,ALT的低值总不精密度超出允许范围,其余项目的偏差和总不精密度均在允许范围之内。GGT、ALT的非线性、截距和斜率以及Glu的斜率差异有统计学意义,其余项目的截距、斜率、非线性、互染率、漂移性差异均无统计学意义。配套系统:ALT的低值总不精密度超出允许范围,其余项目的偏差和总不精密度均在允许范围之内。GGT的截距和斜率差异有统计学意义,其余项目的截距、斜率、非线性、互染率、漂移性差异均无统计学意义。结论无论是使用自建系统测定AST、GGT、ALT,还是使用配套系统检测AST、Glu、GGT、ALT,偏差都在允许范围内,总不精密度小于美国临床实验室改进法案修正案(CLIA′88)能力验证计划中分析质量要求规定的总允许误差的1/3,互染率较低,稳定性较好。自建系统检测Glu的准确度有待加强改善。 展开更多
关键词 天门冬氨酸氨基转移酶 丙氨酸氨基转移酶 Γ-谷氨酰转移酶 葡萄糖 检测系统 评价
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二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)研究进展 被引量:23
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作者 唐桂英 柳展基 单雷 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期320-328,共9页
二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)是生物体内TAG合成过程中的关键酶,它的作用是催化二酰甘油加上脂肪酸酰基形成三酰甘油。本文介绍了DGAT的分类、亚细胞定位、功能、底物特异性和调控,并展望了DGAT研究在油料作物品种改良方面的应用前景。
关键词 二酰基甘油酰基转移酶(DGAT) 三酰甘油(TAG) 分类 功能 调控
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核桃蛋白源血管紧张素转化酶抑制剂的分离纯化 被引量:7
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作者 顾欣 李迪 +2 位作者 侯雅坤 崔洁 王建中 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第9期52-55,共4页
从核桃蛋白源的胃蛋白酶水解物中分离纯化出具有高体外血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性的抑制剂。利用超滤、凝胶色谱、高效液相色谱等方法进行分离纯化,以体外ACE抑制活性为检测指标,并用N端氨基酸测序鉴定其结构为酪氨酸-谷氨酸-脯氨酸... 从核桃蛋白源的胃蛋白酶水解物中分离纯化出具有高体外血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性的抑制剂。利用超滤、凝胶色谱、高效液相色谱等方法进行分离纯化,以体外ACE抑制活性为检测指标,并用N端氨基酸测序鉴定其结构为酪氨酸-谷氨酸-脯氨酸(Tyr-Glu-Pro,YEP),对筛选出的抑制剂进行体外模拟消化稳定性研究。结果表明,胃蛋白酶酶解液通过纯化所得ACE抑制剂的IC50值为0.32μg/mL,该ACE抑制剂在经过体外模拟消化后仍保持良好的ACE抑制活性。 展开更多
关键词 血管紧张素转化酶 胃蛋白酶 纯化 分离 核桃蛋白
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多聚唾液酸转移酶研究进展 被引量:7
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作者 戴功 王丽梅 +1 位作者 杨新颖 耿美玉 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期24-28,共5页
多聚唾液酸(polysialic acid,PSA)是一类线性、均一多聚α2,8连接唾液酸的独特碳水化合物,它主要通过典型的N-连接糖苷键附着在脊椎动物神经系统神经黏附分子(neural cell adhesion molecule,NCAM)上。PSA通过改变NCAM的黏附性调节神经... 多聚唾液酸(polysialic acid,PSA)是一类线性、均一多聚α2,8连接唾液酸的独特碳水化合物,它主要通过典型的N-连接糖苷键附着在脊椎动物神经系统神经黏附分子(neural cell adhesion molecule,NCAM)上。PSA通过改变NCAM的黏附性调节神经细胞发育、神经导向以及突触形成,从而在神经发育中起关键作用。PSA表达的调节具有时间和结构依赖性,NCAM的唾液酸化是由两种多聚唾液酸转移酶(polysialyltrans ferases)-ST8Sia II(STX)和ST8Sia IV(PST)所催化,它们都属于6个基因编码的α2,8唾液酸转移酶家族。STX和PST都可将多个唾液酸残基转移到含有NeuNAcα2-3(或6)Galβ1-4GlcNAcβ1-R结构的N糖链受体上;两种酶共同作用时远远大于一种酶形成的PSA量。总之,多聚唾液酸转移酶可调节PSA的合成并参与了脊椎动物的神经发育。 展开更多
关键词 多聚唾液酸 多聚唾液酸转移酶 神经黏附分子 转移酶 神经系统 脊椎动物 神经发育 碳水化合物 PSA ACID
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ALT和AST参考方法的建立与性能评价 被引量:9
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作者 郑松柏 庄俊华 +6 位作者 林莉 王建兵 林莲英 徐建华 孙蕾 林海标 黄宪章 《检验医学》 CAS 北大核心 2009年第12期869-873,共5页
目的建立测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的参考方法,并评价其主要分析性能。方法按照国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)有关ALT和AST活性测定的要求建立参考方法,并优化其实验条件;根据美国临床实验室标... 目的建立测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的参考方法,并评价其主要分析性能。方法按照国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)有关ALT和AST活性测定的要求建立参考方法,并优化其实验条件;根据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)系列文件(EP5-A2、EP15-A、EP6-A)对建立的参考方法的精密度、准确度、线性范围等性能进行评价。结果紫外分光光度计、分析天平、pH计、电子温度计、移液器和容量瓶均检定合格,不确定度符合方法要求。温控器显示为37.2℃时,比色杯内溶液温度最接近37℃;比色杯内溶液180 s后可达到设定温度;移液器加样模式实验显示吸一档打两档,打时靠壁为精密度最佳的加样模式。ALT和AST参考方法的批内不精密度均<1%,总不精密度均<2%,符合精密度性能要求;日本临床化学会酶参考品及国际参考实验室外部质量评价计划样本检测结果的相对偏倚均符合设定目标;ALT和AST参考方法分析测量范围上限分别为335.8、363.6 U/L,均高于IFCC文献报道。结论ALT和AST参考方法已基本建立,精密度、准确度及线性范围等性能指标均符合方法要求,可应用于临床研究。 展开更多
关键词 丙氨酸氨基转移酶 天门冬氨酸氨基转移酶 参考方法 性能评价
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木聚糖酶基因研究进展 被引量:12
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作者 张世敏 刘寅 +3 位作者 刘新育 陈红歌 王会娟 崔党群 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第4期61-67,共7页
半纤维素分解微生物在自然界碳素循环中起着重要作用,半纤维素是植物多糖的重要成分之一。木聚糖则是半纤维素的主要成分。木聚糖酶(EC3.2.1.8)可催化木聚糖的水解,在各种各样的生物体里都发现有木聚糖酶,如细菌、放线菌、真菌。在过去... 半纤维素分解微生物在自然界碳素循环中起着重要作用,半纤维素是植物多糖的重要成分之一。木聚糖则是半纤维素的主要成分。木聚糖酶(EC3.2.1.8)可催化木聚糖的水解,在各种各样的生物体里都发现有木聚糖酶,如细菌、放线菌、真菌。在过去几十年里,有超过100个木聚糖酶基因被克隆进同源或异源宿主中,其目的是为了超表达木聚糖酶和改变它们的特性以适应商业应用。木聚糖酶的应用极其广泛,可用于生物转化、造纸、食品、饲料、能源、纺织等行业。尤其是迫切的环境问题将进一步促进木聚糖酶研究的开展。 展开更多
关键词 木聚糖酶基因 信号肽 进化树 二硫桥
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