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新型磁性葡聚糖亲和吸附剂的制备及在尿激酶纯化中的应用 被引量:12
1
作者 董聿生 梁峰 +2 位作者 余向阳 郭立安 常建华 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期21-24,共4页
采用反相悬浮包埋技术合成多分散的粒径在 5 0目~ 30 0目的磁性葡聚糖微球 (MDMS)。MDMS经环氧氯丙烷活化后 ,分别键合氨基乙酸、6 氨基己酸和乙二胺作为间隔臂 ,以碳二亚胺为偶联剂 ,分别偶联L 精氨酸甲酯、对氨基苯甲脒和胍基己酸配... 采用反相悬浮包埋技术合成多分散的粒径在 5 0目~ 30 0目的磁性葡聚糖微球 (MDMS)。MDMS经环氧氯丙烷活化后 ,分别键合氨基乙酸、6 氨基己酸和乙二胺作为间隔臂 ,以碳二亚胺为偶联剂 ,分别偶联L 精氨酸甲酯、对氨基苯甲脒和胍基己酸配体 ,制备了 5种磁性亲和吸附剂。研究了分散介质及其粘度和密度、有机相和水相的体积比、表面活性剂的用量、搅拌速度等因素对微球制备的影响。将所制备的磁性亲和吸附剂应用于尿激酶粗品的纯化 ,并讨论了偶联试剂和配体对尿激酶纯化效果的影响。通过测定 ,尿激酶的活性回收率为 40 0 %~ 6 0 7%、纯化倍数为 14 9~ 32 8、吸附容量为 89mg/L~ 12 1mg/L。 展开更多
关键词 葡聚糖 磁性亲和吸附剂 制备 尿激酶 纯化 反相悬浮包埋技术 磁性微球
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离子液体相行为(Ⅱ)双水相的成相规律 被引量:23
2
作者 夏寒松 余江 +2 位作者 胡雪生 刘庆芬 刘会洲 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第9期2149-2151,共3页
研究了影响离子液体双水相形成的主要因素.实验发现,辅助盐对双水相平衡线影响不明显.阴离子对相线的影响主要遵守“Hofmeisterrule”,其水合性越小越利于形成双水相.降低离子液体头部极性以及增加碳链长度都有利于双水相的形成,但效果... 研究了影响离子液体双水相形成的主要因素.实验发现,辅助盐对双水相平衡线影响不明显.阴离子对相线的影响主要遵守“Hofmeisterrule”,其水合性越小越利于形成双水相.降低离子液体头部极性以及增加碳链长度都有利于双水相的形成,但效果比阴离子弱.升高温度将抑制短链离子液体双水相的形成,但能促进长链离子液体双水相体系的形成. 展开更多
关键词 离子液体 双水相 相图
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新型金属蛋白酶ADAMTS家族的研究进展 被引量:25
3
作者 王利 王宪 孔炜 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期49-52,共4页
含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶ADAMTSs(a disintegrin and metallo-proteinase with thrombospondin motifs)是一类新的Zn2+依赖的金属蛋白酶家族,广泛存在于哺乳动物和无脊椎动物体内。从1997年发现第一个ADAMTSs家... 含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶ADAMTSs(a disintegrin and metallo-proteinase with thrombospondin motifs)是一类新的Zn2+依赖的金属蛋白酶家族,广泛存在于哺乳动物和无脊椎动物体内。从1997年发现第一个ADAMTSs家族成员以来,迄今共有19个成员被发现,在保持凝血系统的稳态、器官生成、炎症、生育等方面有重要作用。尽管其中大部分酶的功能尚不清楚,但已有研究显示该家族成员与多种疾病密切相关。ADAMTSs与基质金属蛋白酶MMPs、解聚蛋白样金属蛋白酶ADAMs同属金属蛋白酶家族,但在结构组成、组织细胞分布、底物作用的特异性、酶活性的调节等方面有明显差别。本文综述了其在结构功能及与疾病关系的研究进展。 展开更多
关键词 细胞外基质 金属蛋白酶 ADAMTS
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一种腈水解酶的高通量筛选方法 被引量:4
4
作者 何玉财 周琼 +4 位作者 林春昕 纪俊玲 赵希岳 蔡志强 卢彬 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第5期853-857,共5页
水解腈的酶类(腈水解酶或腈水合酶/酰胺酶)在制药行业中生产有机羧酸及其衍生物方面有着广泛的应用,为了获得较多的酶源,建立高通量筛选方法是非常必要的。今利用改进的羟肟酸铁分光光度比色法建立了一种简单、快速、高通量的筛选方法,... 水解腈的酶类(腈水解酶或腈水合酶/酰胺酶)在制药行业中生产有机羧酸及其衍生物方面有着广泛的应用,为了获得较多的酶源,建立高通量筛选方法是非常必要的。今利用改进的羟肟酸铁分光光度比色法建立了一种简单、快速、高通量的筛选方法,同时利用产酶菌株Rhodococcus sp.CCZU10-1静息细胞催化反应来进行方法的准确性验证。并且通过与液相色谱法检测结果进行对比,结果表明羟肟酸铁比色法对有机羧酸的检测具有较高的准确性。因此,建立的高通量筛选方法在产腈水解酶微生物筛选及应用方面有很大应用前景。 展开更多
关键词 腈水解酶 有机羧酸 高通量筛选 羟肟酸铁比色法
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AmpC β-内酰胺酶及其分子生物学检测 被引量:12
5
作者 赵虎 周庭银 孔宪涛 《中国感染控制杂志》 CAS 2005年第4期377-380,355,共5页
关键词 AMPC酶 基因 分子生物学检测 抗药性 微生物 Β-内酰胺酶
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离子液体相行为(Ⅰ)胶团化特性 被引量:5
6
作者 夏寒松 余江 +2 位作者 胡雪生 刘庆芬 刘会洲 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第9期2145-2148,共4页
研究了离子液体在水相中的自聚规律,从侧链、头部及阴离子类型等方面比较了影响胶团聚集的主要因素.实验发现,增加侧链长度有利于胶团形成,降低阴离子水合性以及采用甲基化头部也利于形成胶团,碳链长度变化的作用最明显,升高温度不利于... 研究了离子液体在水相中的自聚规律,从侧链、头部及阴离子类型等方面比较了影响胶团聚集的主要因素.实验发现,增加侧链长度有利于胶团形成,降低阴离子水合性以及采用甲基化头部也利于形成胶团,碳链长度变化的作用最明显,升高温度不利于离子液体形成胶团. 展开更多
关键词 离子液体 胶团 聚合结构
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大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒β-内酰胺酶的筛选 被引量:18
7
作者 蒋燕群 王坚强 +2 位作者 陈珊珊 李桂兰 倪语星 《上海医学检验杂志》 北大核心 2001年第1期10-12,共3页
目的了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的质粒介导的 β-内酰胺酶的分布、表型及其检测方法。方法经头孢泊肟初筛 ,分别用 NCCL S确证试验检测超广谱 β-内酰胺酶 (ESBL)和用头孢西丁三相试验检测质粒 Am p C。结果 34 1株大肠埃希菌和肺炎... 目的了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的质粒介导的 β-内酰胺酶的分布、表型及其检测方法。方法经头孢泊肟初筛 ,分别用 NCCL S确证试验检测超广谱 β-内酰胺酶 (ESBL)和用头孢西丁三相试验检测质粒 Am p C。结果 34 1株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中经常规药敏试验筛选出 16 4株 (48.1% )头孢泊肟 (CPD)的 MIC>1μg/ m l,对其中的 10 2株进行检测 ,结果产 ESBL 的有 6 4株 ,头孢西丁三相试验阳性者有 6株。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的质粒 β-内酰胺酶以 ESBL 为主 (30 .2 % ) ,质粒 Amp Cs仅占 2 .8%。 展开更多
关键词 超广谱Β-内酰胺酶 质粒AmpC 大肠埃希菌 肺炎克雷伯菌
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有效增强重组腈代谢酶系表达活性的策略 被引量:3
8
作者 史悦 孙旭东 +2 位作者 于慧敏 罗晖 沈忠耀 《现代化工》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期23-26,28,共5页
讨论并提出了有效增强重组腈代谢酶系表达活性的多种策略。根据所选用的载体和宿主的不同表达特性,同时克隆目的基因上、下游的正向调控序列可直接增强酶表达水平;强化翻译后的修饰,可有效提高活性;除了常用的大肠杆菌克隆表达体系外,... 讨论并提出了有效增强重组腈代谢酶系表达活性的多种策略。根据所选用的载体和宿主的不同表达特性,同时克隆目的基因上、下游的正向调控序列可直接增强酶表达水平;强化翻译后的修饰,可有效提高活性;除了常用的大肠杆菌克隆表达体系外,开发新型宿主-载体系统可为重组酶的活性表达提供新的途径;随着生物信息学技术的迅速发展,利用已知三维结构的蛋白对目标酶进行突变位点设计及结构与功能预测,将有望加快腈代谢酶系的定点突变研究进程。 展开更多
关键词 腈水合酶 腈代谢酶系 表达活性 载体 重组酶
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分子筛固定氨基酰化酶I的研究 被引量:11
9
作者 宋锡瑾 王杰 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第5期617-620,共4页
以Y型分子筛为载体,分别采用吸附法、吸附-戊二醛交联法、偶联法和偶联-重氮法4种方法对氨基酰化酶I进行固定化。 研究发现偶联法获得的分子筛固定化酶的活性最高,达0.258 IUmg-1,并对分子筛固定化酶最适pH值、最适反应温度、重复使用... 以Y型分子筛为载体,分别采用吸附法、吸附-戊二醛交联法、偶联法和偶联-重氮法4种方法对氨基酰化酶I进行固定化。 研究发现偶联法获得的分子筛固定化酶的活性最高,达0.258 IUmg-1,并对分子筛固定化酶最适pH值、最适反应温度、重复使用性和米氏常数进行了测定;结果表明该载体适合氨基酰化酶I的固定,可以获得较高的酶活力,分子筛固定化酶的最适pH值、最适反应温度都有所拓宽。 展开更多
关键词 分子筛 氨基酰化酶Ⅰ 固定化 吸附 偶联
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L-天冬酰胺酶B细胞表位研究 被引量:3
10
作者 吴敬 吴梧桐 +2 位作者 王德育 蒋笃孝 袁春伟 《药物生物技术》 CAS CSCD 2002年第4期196-199,共4页
采用ELISA竞争抑制法和光学干涉生物传感器试验对预测的7个段肽进行抗原性鉴定。结果表明7段合成肽中,f(192TPARKHTS199)和g(280AKNGTA286)肽段抗原性较强。研究探索了光学干涉生物传感器在B细胞表位研究中的应用,为进一步抗原位点... 采用ELISA竞争抑制法和光学干涉生物传感器试验对预测的7个段肽进行抗原性鉴定。结果表明7段合成肽中,f(192TPARKHTS199)和g(280AKNGTA286)肽段抗原性较强。研究探索了光学干涉生物传感器在B细胞表位研究中的应用,为进一步抗原位点精细定位打下良好的实验基础。 展开更多
关键词 L-天冬酰胺酶 ELISA 光学干涉生物传感
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离子液体反胶团中青霉素酰化酶的水解反应特性 被引量:3
11
作者 夏寒松 余江 刘会洲 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1932-1935,共4页
Penicillin hydrolysis by penicillin acylase was carried out in reversed micelle with [C14mim]Cl ionic liquids. The experi ment indicated that this catalytic reaction showed better performance in enzymat ic solubility,... Penicillin hydrolysis by penicillin acylase was carried out in reversed micelle with [C14mim]Cl ionic liquids. The experi ment indicated that this catalytic reaction showed better performance in enzymat ic solubility, activity and stability than the reaction in reversed micelle with cetyl trimethyl ammonium bromide (CTAB). For example, the maximum solubility of penicillin acylase in ionic liquids system was twice more than that in CTAB, an d the maximal enzymatic activity in ionic liquids was 1.3 times than that in CT AB.The outstanding properties of ionic liquids, including low charge density and irregular sharpness of head ring,might be attributable to its distinct head gro up. Ionic liquids made it possible to optimize the enzymatic catalysis in rever sed micelle through altering its interfacial structure effectively. 展开更多
关键词 离子液体 反胶团 青霉素酰化酶 青霉素水解反应 6-氨基青霉烷酸
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生物酶法制备D-对羟基苯甘氨酸的研究 被引量:6
12
作者 陈建波 徐毅 《生物学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期8-11,共4页
生物酶法生产D-对羟基苯甘氨酸具有良好的应用前景。通过介绍生物酶法生产D-对羟基苯甘氨酸的研究现状,从酶的分离纯化、酶和细胞的固定化、反应介质研究和反应动力学研究以及基因工程进展几个方面作了总结。
关键词 生物酶 D-对羟基苯甘氨酸 固定化 反应动力学
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微生物脂肪酶分子改造研究进展 被引量:4
13
作者 唐良华 夏黎明 苏敏 《生物技术》 CAS CSCD 2003年第3期42-44,共3页
关键词 微生物脂肪酶 分子改造 蛋白质工程 定向改造
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修饰聚合物-盐水液-固亲和萃取体系分离纯化大豆中的氨基酸 被引量:2
14
作者 李逢雨 孙小梅 +1 位作者 李步海 邹群 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2003年第4期6-8,15,共4页
用亚氨基二乙酸 (IDA )修饰聚乙二醇 60 0 0 (PEG)后 ,再与 Cu SO4反应 ,形成 PEG修饰聚合物 PEG-(IDA-Cu) 2 ,混合吐温 80、磷酸盐 ,即构成液 -固亲和萃取体系 .采用该体系 ,直接从大豆蛋白匀浆中提取了氨基酸 .选定萃取条件 :磷酸盐... 用亚氨基二乙酸 (IDA )修饰聚乙二醇 60 0 0 (PEG)后 ,再与 Cu SO4反应 ,形成 PEG修饰聚合物 PEG-(IDA-Cu) 2 ,混合吐温 80、磷酸盐 ,即构成液 -固亲和萃取体系 .采用该体系 ,直接从大豆蛋白匀浆中提取了氨基酸 .选定萃取条件 :磷酸盐摩尔比 n(K2 HPO4)∶ n(Na H2 PO4) =4.8∶ 1,维持体系 p H值 7.70 ,总盐浓度 1.60 mol·L- 1;吐温 80的体积分数 10 .5% .结果表明 :该体系对大豆蛋白匀浆中氨基酸的二次萃取率为 66.5% 展开更多
关键词 PEG修饰聚合物 液-固亲和萃取体系 氨基酸 大豆
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β-内酰胺酶分子生物学研究进展 被引量:9
15
作者 朱卫民 钱元恕 《国外医药(抗生素分册)》 CAS 2001年第2期57-60,共4页
β-内酰胺酶是细菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因 ,β-内酰胺酶按照各自的底物和抑制轮廓分为4组 ,根据各自的氨基酸序列分属于 A、B、C、D共 4种分子类别。细菌β-内酰胺酶耐药基因突变可引起广泛耐药 ,以TEM和 SHV为代表的 A类... β-内酰胺酶是细菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因 ,β-内酰胺酶按照各自的底物和抑制轮廓分为4组 ,根据各自的氨基酸序列分属于 A、B、C、D共 4种分子类别。细菌β-内酰胺酶耐药基因突变可引起广泛耐药 ,以TEM和 SHV为代表的 A类酶的突变多发生在结构基因上 ,其单点或多点突变衍生出大量的新型超广谱酶。结构基因以外区域的突变多数发生于启动基因或调节基因 ,后者的改变往往造成结构基因的过度表达 ,使产酶量大增而导致耐药。B类金属β-内酰胺酶可通过启动基因上的多点突变产生耐药。C类酶的基因突变一般发生在调节基因上 。 展开更多
关键词 Β-内酰胺酶 耐药机制 分子生物学 基因表达 Β-内酰胺类抗生素
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青霉素酰化酶:固定化及其应用 被引量:2
16
作者 肖正华 张梦军 +2 位作者 王云霞 任建敏 夏仕文 《国外医药(抗生素分册)》 CAS 2004年第4期156-159,187,共5页
青霉素酰化酶广泛应用于 β -内酰胺类抗生素中间体和半合成 β -内酰胺类抗生素的合成。虽然游离酶具有极高的催化活性 ,但其对温度、pH值、溶剂极性等的耐受范围极窄 ,极易失活 ,而且在有机溶剂中发生的失活是不可逆的。为了提高其各... 青霉素酰化酶广泛应用于 β -内酰胺类抗生素中间体和半合成 β -内酰胺类抗生素的合成。虽然游离酶具有极高的催化活性 ,但其对温度、pH值、溶剂极性等的耐受范围极窄 ,极易失活 ,而且在有机溶剂中发生的失活是不可逆的。为了提高其各方面稳定性 ,不断有新的固定化方法提出。 展开更多
关键词 青霉素酰化酶 固定化 Β-内酰胺类 抗生素 交联酶聚集体 交联酶晶体
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质粒介导AmpC酶的研究进展 被引量:4
17
作者 王林峰 王选锭 《中国感染控制杂志》 CAS 2003年第3期231-235,共5页
AmpC酶是革兰阴性杆菌产生的最重要的β-内酰胺酶之一,因其能产生对第三代头孢、单环类、头霉素类等β-内酰胺类抗生素的耐药性,且不受临床常用的β-内酰胺酶抑制剂抑制而受到重视.特别是1988年发现质粒介导的AmpC酶以来,随着越来越多... AmpC酶是革兰阴性杆菌产生的最重要的β-内酰胺酶之一,因其能产生对第三代头孢、单环类、头霉素类等β-内酰胺类抗生素的耐药性,且不受临床常用的β-内酰胺酶抑制剂抑制而受到重视.特别是1988年发现质粒介导的AmpC酶以来,随着越来越多种类的质粒介导AmpC酶在世界各地相继被发现,人们已意识到,AmpC酶对人类健康的威胁不再仅仅局限于引起单个病例的难治性感染,而且有可能通过质粒传递导致AmpC酶基因的广泛传播,造成全球范围耐药菌株流行.本文将详细介绍质粒介导AmpC酶的流行病学、生化特征、检测及防治等. 展开更多
关键词 质粒介导 AMPC酶 研究进展 抗药性 药敏试验 流行病学 生化特征 检测 防治
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植物核糖核酸酶与转基因工程雄性不育系研究进展 被引量:6
18
作者 聂明建 王国槐 《中国农学通报》 CSCD 2006年第3期122-127,共6页
核糖核酸酶(Ribonuclease,RNase)的全名为聚核苷-#-寡核苷酸转移酶,它在植物体内分布广泛,是降解RNA的一类酶的总称。它与植物的衰老、抗逆、自交不亲和、植物雄性不育有密切关系。另一方面,当将从烟草、水稻中分离出的TA29和OsgB6等花... 核糖核酸酶(Ribonuclease,RNase)的全名为聚核苷-#-寡核苷酸转移酶,它在植物体内分布广泛,是降解RNA的一类酶的总称。它与植物的衰老、抗逆、自交不亲和、植物雄性不育有密切关系。另一方面,当将从烟草、水稻中分离出的TA29和OsgB6等花药绒毡层及花粉特异启动子与核糖核酸酶基因(barnase)构建成嵌合基因,转移给正常油菜、烟草、番茄、小麦、水稻等植株时,又会产生雄性不育。因此,植物核糖核酸酶的研究日益受到人们的广泛关注。 展开更多
关键词 核糖核酸酶 雄性不育 自交不亲和 转基因 启动子
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H^+-ISFET型青霉素酶传感器 被引量:2
19
作者 钟丽婵 黎高翔 +1 位作者 汪正孝 刘鲁娜 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第2期145-150,共6页
将SOS型H^+-ISFET与戊二醛交联的牛血清蛋白-青霉素酶膜组合成单管输出式青霉素酶-H^+-ISFET传感器的探头(以下简称青霉素-酶FET),并用于测定溶液中的青霉素含量。青霉素-酶FET在0.005mol/L、0.01mol/L,0.02mol/L磷酸缓冲液中的响应灵... 将SOS型H^+-ISFET与戊二醛交联的牛血清蛋白-青霉素酶膜组合成单管输出式青霉素酶-H^+-ISFET传感器的探头(以下简称青霉素-酶FET),并用于测定溶液中的青霉素含量。青霉素-酶FET在0.005mol/L、0.01mol/L,0.02mol/L磷酸缓冲液中的响应灵敏度分别为11—12mV/m mol/L、7.5—8.0mV/m mol/L以及3.7—4.0mV/m mol/L;响应时间为30s;在0.02mol/L磷酸缓冲液中的标定曲线线性范围为0.5—25mmol/L;相关系数为0.9976。该青霉素-酶FET在青霉素浓度为10mmol/L的0.01mol/L磷酸缓冲液中重复测定8次的标准偏差SD为1.67mV,变异系数CV为2.1%;贮存寿命大于4个月,使用寿命在1个月以上(每天测试一次)。 展开更多
关键词 青霉素酶 固定化酶 生物传感器
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超广谱β-内酰胺酶的检测及临床意义 被引量:5
20
作者 蒋利君 韦晓谋 《中国感染控制杂志》 CAS 2004年第3期282-284,共3页
关键词 超广谱Β-内酰胺酶 实验室技术和方法 抗药性 微生物
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