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苏博美利奴羊S100A11基因序列分析及表达研究
1
作者 付雪峰 刘春洁 +4 位作者 黄锡霞 石刚 徐新明 石晓雷 田可川 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第6期15-19,283,共6页
为了探讨S100A11基因在苏博美利奴羊中不同类型细度的细毛羊中的表达模式,试验以苏博美利奴羊为研究对象,克隆了钙囊素S100A11基因,采用生物信息学方法进行遗传进化分析,对S100A11蛋白的理化性质进行分析,并对其二级蛋白结构进行预测,... 为了探讨S100A11基因在苏博美利奴羊中不同类型细度的细毛羊中的表达模式,试验以苏博美利奴羊为研究对象,克隆了钙囊素S100A11基因,采用生物信息学方法进行遗传进化分析,对S100A11蛋白的理化性质进行分析,并对其二级蛋白结构进行预测,且通过RT-PCR相对定量方法检测S100A11基因在不同绵羊个体中的表达规律。结果表明:绵羊S100A11基因的CDS全长序列为866bp,编码了105个氨基酸,与绵羊、山羊、牛、猪、鼠、兔、鸡、狗和斑马鱼的CDS同源性分别为96%、96%、96%、87%、24%、44%、70%、70%、60%;分别在1bp、220~336bp、415~864bp有3个开放式阅读框(ORF);S100A11基因全长为4798bp。S100A11蛋白含有1个信号肽、19个磷酸化位点;同时S100A11基因在超细型细毛羊皮肤组织表达量极显著高于细型细毛羊的表达量(P〈0.01),差异倍数为2.048。 展开更多
关键词 绵羊 S100A11基因 生物信息学 RT-PCR 显著性表达
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人Dact2基因真核表达载体的构建及其在结肠癌细胞中的表达
2
作者 张晓梅 杨云生 郭明洲 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2011年第10期889-891,共3页
目的构建人Dact2基因真核表达载体。方法以人胎肝cDNA文库为模板,利用RT-PCR方法获得Dact2编码序列,构建并鉴定表达Dact2的pCMV6-Entry-GFP真核表达载体。Lipofectamine 2000转染结肠癌细胞株HT29,荧光显微镜和流式细胞仪观察和分析转... 目的构建人Dact2基因真核表达载体。方法以人胎肝cDNA文库为模板,利用RT-PCR方法获得Dact2编码序列,构建并鉴定表达Dact2的pCMV6-Entry-GFP真核表达载体。Lipofectamine 2000转染结肠癌细胞株HT29,荧光显微镜和流式细胞仪观察和分析转染效率,Western blot检测Dact2蛋白表达。结果通过PCR扩增获得了2 322 bp的Dact2编码序列,通过酶切及测序证实Dact2序列正确插入真核表达载体pCMV6-Entry-GFP;转染空载体和Dact2表达质粒48 h后,荧光显微镜下观察,可见两组细胞均表达绿色荧光蛋白,流式细胞仪分析结果显示瞬时转染效率分别为41.36%和39.88%。Western blot检测证实转染表达质粒组的细胞Dact2蛋白呈阳性表达。结论成功构建了人Dact2真核表达载体,为其功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 Dact2 载体 表达
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小麦HMW-GS 1Bx14基因特异标记体系的建立 被引量:6
3
作者 王欣 范三红 +2 位作者 阎晓华 罗龙海 郭蔼光 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期2189-2192,共4页
比较1B x 14及其它已知HMW-GS基因的启动子和编码区,根据其不同点设计出1B x 14基因特异扩增引物.以8种已知HMW-G S组成的小麦DNA为模板进行PCR扩增,结果表明:具有1Bx14亚基的品种扩增出1条400 bp左右特异条带.结合该特异标记和已报道的... 比较1B x 14及其它已知HMW-GS基因的启动子和编码区,根据其不同点设计出1B x 14基因特异扩增引物.以8种已知HMW-G S组成的小麦DNA为模板进行PCR扩增,结果表明:具有1Bx14亚基的品种扩增出1条400 bp左右特异条带.结合该特异标记和已报道的1Dx5特异标记对2个F2杂交群体进行检测,从184个F2单株中筛选出111个同时含有1B x 14和1D x 5基因的单株.该研究结果可为种质鉴定和亚基整合育种提供参考. 展开更多
关键词 小麦 HMW-GS1Bx14基因 分子标记辅助选择 杂交育种
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利用Clostridium saccharobutylicum DSM 13864连续发酵生产丁醇 被引量:8
4
作者 夏子义 倪晔 +2 位作者 孙志浩 王云 吴香玉 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第1期156-160,173,共6页
为使用廉价糖质原料进行连续发酵生产丁醇提供理论依据和实验指导,以Clostridium saccharobutylicumDSM 13864为发酵菌种,考察了稀释率和温度等因素对以葡萄糖为原料的四级连续发酵生产丁醇的影响。结果表明:高稀释率有利于酸的积累和... 为使用廉价糖质原料进行连续发酵生产丁醇提供理论依据和实验指导,以Clostridium saccharobutylicumDSM 13864为发酵菌种,考察了稀释率和温度等因素对以葡萄糖为原料的四级连续发酵生产丁醇的影响。结果表明:高稀释率有利于酸的积累和菌体的生长,低稀释率有利于溶剂的生产。当稀释率为0.05 h 1,4个发酵罐温度控制在37℃时,总溶剂产量为11.57 g/L,其中丁醇7.29 g/L,生产率为0.145 g/(L.h)。在0.05 h 1稀释率的条件下进行变温连续发酵证实低温有利于溶剂的积累,当一级和二级罐温度控制在37℃,三级和四级罐温度控制在33℃时总溶剂产量最高为13.69 g/L,其中丁醇为8.36 g/L,生产率为0.171 g/(L.h)。 展开更多
关键词 CLOSTRIDIUM saccharobutylicum 连续发酵 丁醇 稀释率 温度
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神经生长因子(NGF)在母牛性腺及性腺外生殖器官中的表达研究 被引量:5
5
作者 马永和 李纯锦 +1 位作者 孙永峰 周虚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第4期153-157,共5页
本研究旨在探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)在母牛卵泡期及黄体期子宫、卵巢、输卵管3种组织中的表达情况。采用FQ-PCR方法和Western blotting技术对成年母牛卵泡期及黄体期的子宫、卵巢、输卵管中的NGF mRNA和蛋白质表达进... 本研究旨在探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)在母牛卵泡期及黄体期子宫、卵巢、输卵管3种组织中的表达情况。采用FQ-PCR方法和Western blotting技术对成年母牛卵泡期及黄体期的子宫、卵巢、输卵管中的NGF mRNA和蛋白质表达进行了检测。结果表明,NGF mRNA和蛋白质在卵泡期和黄体期的子宫、卵巢、输卵管中均有表达,且卵泡期子宫中NGF mRNA表达量显著高于卵泡期卵巢和黄体期输卵管中NGF mRNA表达量(P<0.05),其它组织间无显著差异。 展开更多
关键词 NGF mRNA 表达 子宫 卵巢 输卵管
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CDK1靶向shRNA质粒载体的构建及鉴定 被引量:3
6
作者 赵晶 韩苏夏 +2 位作者 马瑾璐 黄辰 张丹 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1053-1055,1060,共4页
目的:设计并构建CDK1-shRNA质粒表达载体,转染肝癌HepG2细胞,验证shRNA对肝癌HepG2细胞CDK1基因的沉默效应,便于进一步研究CDK1的功能。方法:设计针对CDK1mRNA靶序列的小发夹状RNA,化学合成含茎环结构的正义链与反义链,退火形成带内切酶... 目的:设计并构建CDK1-shRNA质粒表达载体,转染肝癌HepG2细胞,验证shRNA对肝癌HepG2细胞CDK1基因的沉默效应,便于进一步研究CDK1的功能。方法:设计针对CDK1mRNA靶序列的小发夹状RNA,化学合成含茎环结构的正义链与反义链,退火形成带内切酶粘/平末端的双链后,与酶切后的 pSIREN-RetroQ-ZsGreen载体片段进行连接、转化。经测序等方法鉴定重组克隆。将重组载体质粒经脂质体包裹转染肝癌HepG2细胞,realtime PCR及Western blot检测RNA干扰效果。结果:重组克隆经测序证实插入的序列正确,realtime PCR及Western blot检测证实设计的3条RNA干扰序列有效沉默了肝癌HepG2细胞中的内源性CDK1。结论:所制备的CDK1-shRNA在肝癌HepG2细胞中可获得高效转染,并能产生特异性的基因沉默效应,以CDK1为靶向的shRNA能够有效下调CDK1基因的表达,对周期依赖激酶CDK1功能的研究奠定基础。 展开更多
关键词 SHRNA CDK1 基因沉默 肝癌细胞
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贵州穿洞遗址1979年发现的磨制骨器的初步研究 被引量:13
7
作者 毛永琴 曹泽田 《人类学学报》 CSCD 北大核心 2012年第4期335-343,共9页
贵州省普定县穿洞出土的骨器是穿洞文化的重要标志。1979年首次试掘出土的骨器基本为磨制者,类型主要有骨锥、骨铲、骨叉、骨棒及骨针等,多采用较厚的动物骨骼的碎片为原料加工而成。一次性出土数量如此多骨器的遗址在我国非常少见,为... 贵州省普定县穿洞出土的骨器是穿洞文化的重要标志。1979年首次试掘出土的骨器基本为磨制者,类型主要有骨锥、骨铲、骨叉、骨棒及骨针等,多采用较厚的动物骨骼的碎片为原料加工而成。一次性出土数量如此多骨器的遗址在我国非常少见,为研究中国旧石器时代晚期文化的多样性提供了一个重要地点和一批有意义的文化遗物,并对研究我国旧石器时代骨器提供了丰富的材料,增加了我们对骨器工具的制造工艺及用途的了解。 展开更多
关键词 贵州 穿洞遗址 磨制骨器 旧石器时代晚期
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王府井东方广场遗址石制品研究 被引量:5
8
作者 冯兴无 李超荣 郁金城 《人类学学报》 CSCD 北大核心 2006年第4期285-298,共14页
王府井东方广场遗址出土石制品共计1098件,主要来自下文化层。除石锤、石砧和人工石块外,其他石制品的原料几乎全部为黑色燧石。石制品普遍较小,主要为小型和微型。石核数量很少,但石片占石制品总数的一半还多。碎屑在探方中的几个区域... 王府井东方广场遗址出土石制品共计1098件,主要来自下文化层。除石锤、石砧和人工石块外,其他石制品的原料几乎全部为黑色燧石。石制品普遍较小,主要为小型和微型。石核数量很少,但石片占石制品总数的一半还多。碎屑在探方中的几个区域密集分布。石器加工精致,刃缘大部分都比较平齐且其上的修疤排列均匀、整齐,尤其表现在端刮器上。原料、类型与技术特点表明,东方广场遗址石制品组合属于中国旧石器时代晚期的以石片为主要特征的文化系列。这一文化系列与周口店北京猿人遗址、周口店第15地点、许家窑遗址等有较多的相似性,推测东方广场石制品组合是由中国旧石器时代早期和中期石器工业演变而来。 展开更多
关键词 东方广场遗址 石制品 石片文化系列 旧石器时代晚期
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生物活性肽制备方法的研究进展 被引量:8
9
作者 张少斌 张力 +1 位作者 梁玉金 曹慧颖 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第6期39-41,共3页
生物活性肽具有许多重要的生理功能,如抗氧化、抗菌、抗癌、降血压、提高人体免疫力等,因此对活性肽的制备、结构与功能的研究具有重要的理论与应用价值。本文综述了生物活性肽的多种制备方法,包括溶剂提取法、酶解法、微生物发酵法、... 生物活性肽具有许多重要的生理功能,如抗氧化、抗菌、抗癌、降血压、提高人体免疫力等,因此对活性肽的制备、结构与功能的研究具有重要的理论与应用价值。本文综述了生物活性肽的多种制备方法,包括溶剂提取法、酶解法、微生物发酵法、膜法分离技术、固相合成法和重组DNA技术生物合成法,旨在为深入研究活性肽及药品、保健品的开发利用提供条件。 展开更多
关键词 生物活性肽 制备方法 功能
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禽呼肠孤病毒σNS非结构蛋白基因的克隆和表达 被引量:7
10
作者 谢丽基 谢芝勋 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期964-968,共5页
采用RT-PCR技术扩增了禽呼肠孤病毒(ARV)S1133株与广西分离株R2 σNS非结构蛋白基因,将σNS基因克隆到质粒表达载体pGEX-4T-1上,获得的重组质粒经PCR、酶切鉴定以及测序分析,σNS基因的插入位置、大小和阅读框均正确,将阳性克隆命名为pG... 采用RT-PCR技术扩增了禽呼肠孤病毒(ARV)S1133株与广西分离株R2 σNS非结构蛋白基因,将σNS基因克隆到质粒表达载体pGEX-4T-1上,获得的重组质粒经PCR、酶切鉴定以及测序分析,σNS基因的插入位置、大小和阅读框均正确,将阳性克隆命名为pGEX-S1133-σNS和pGEX-R2-σNS.构建好的重组质粒经37 ℃ 1 mmol/L IPTG诱导、SDS-PAGE分析超声裂解后的上清和沉淀,显示目的蛋白以包涵体方式表达,其蛋白质分子质量约为66.2 ku,约占菌体总量的31.5%~34.8%.Western-blotting分析表明,目的蛋白能够与ARV阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有较好的抗原性. 展开更多
关键词 禽呼肠孤病毒 σNS基因 克隆表达 pGEX-4X-1
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高分子量麦谷蛋白1Bx14亚基AS-PCR标记 被引量:1
11
作者 闫华晓 赵辉 +1 位作者 王宪泽 王芳 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1644-1648,共5页
根据已发表的1Bx14亚基的基因序列在不同位点设计了10对特异引物,从中筛选出1对引物,对HMW-GS在Glu-1Bx位点已知的10个小麦品种进行了PCR扩增.结果表明,具有1Bx14亚基的4个品种都能扩增出1条1 256 bp左右的特异带.用这一特异标记对山东... 根据已发表的1Bx14亚基的基因序列在不同位点设计了10对特异引物,从中筛选出1对引物,对HMW-GS在Glu-1Bx位点已知的10个小麦品种进行了PCR扩增.结果表明,具有1Bx14亚基的4个品种都能扩增出1条1 256 bp左右的特异带.用这一特异标记对山东省种植面积较大的40个品种进行PCR扩增(即等位专一PCR,AS-PCR),发现仅有5个品种携带1Bx14亚基.该AS-PCR标记可用于检测小麦品种在该位点的亚基组成,与SDS-PAGE相比,可显著提高检测的准确性和效率,可为种质鉴定和育种工作提供参考. 展开更多
关键词 面包小麦 高分子量谷蛋白亚基 1Bx14 AS-PCR(等位专一PCR) 分子标记
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营养物质对基因表达的调控作用 被引量:5
12
作者 吕丹娜 许丽 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第7期14-17,共4页
营养物质作为调节基因表达的外部因子对基因表达起着非常重要的作用。作者综述了营养物质对基因表达调控的作用机制、调控方式及途径,并列出了几种营养物质对基因表达的调节作用。
关键词 营养物质 基因表达 调控作用
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新型双功能谷胱甘肽合成酶的真核和原核表达 被引量:2
13
作者 李佳慧 杨芳芳 +2 位作者 王珍 张赛南 王首锋 《浙江大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期474-481,共8页
通过裂解无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)菌体细胞得到基因组DNA。根据GenBank上已发表的无乳链球菌(菌种编号ATCC13813)新型双功能谷胱甘肽合成酶基因(gshF)的核酸序列与2种不同表达载体多克隆位点序列,分别设计引物F1、R1和F2、... 通过裂解无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)菌体细胞得到基因组DNA。根据GenBank上已发表的无乳链球菌(菌种编号ATCC13813)新型双功能谷胱甘肽合成酶基因(gshF)的核酸序列与2种不同表达载体多克隆位点序列,分别设计引物F1、R1和F2、R2,再以总DNA为模板,经过特异性PCR扩增出长度约为2200bp的目的基因。随后分别对目的基因gshF和2种表达载体进行双酶切、连接等操作,得到表达载体pPIC9K-gshF与pET-gshF。用SalI线性化表达载体pPIC9K-gshF后电转至毕赤酵母GS115中。经MD平板筛选重组子、菌落PCR鉴定阳性菌株、G418抗性梯度平板筛选多拷贝菌株,最终在4.0mg·mL^-1G418抗性平板上筛选出阳性菌株。用甲醇终浓度为2%的BMMY培养基诱导该阳性菌株表达,每隔12h取样并添加甲醇,96h后离心收集发酵上清,经SDS-PAGE蛋白电泳显示:在85kDa处出现1条明显蛋白带,大小与预期GshF蛋白一致。重组菌BL21-pET-gshF用IPTG诱导表达,先在37℃下培养90min,再加入IPTG至1mmol·L^-1后诱导7h,离心收集表达产物并对重组菌进行超声破碎处理后,进行SDS-PAGE蛋白电泳,同样在85kDa处有1条蛋白带。采用Bradford法测定2种表达产物上清的蛋白量,其中重组酵母表达上清中蛋白量为0.46mg·mL^-1,重组大肠杆菌表达产物破壁后的蛋白量为1.46mg·mL^-1。测定并比较2种不同表达方式所得酶活,发现GshF在毕赤酵母表达中的比酶活仅为14.15U·mL^-1,经原核表达后比酶活可达62.15U·mL^-1。 展开更多
关键词 新型双功能谷胱甘肽合成酶 发酵表达 谷胱甘肽
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蛋清溶菌酶基因的密码子优化及其在毕赤酵母中的分泌表达 被引量:4
14
作者 张赛南 施柳佳 +2 位作者 廖志银 王珍 王首锋 《浙江大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期476-483,共8页
作为一种天然的抑菌物质,溶菌酶对抗生素耐药菌有较强的杀伤作用,具有无耐药性、无残留等特点,被认为在诸如动物饲料、药品等领域可有效代替抗生素,改善滥用抗生素所引起的一系列问题,市场前景巨大。通过微生物发酵大规模生产重组溶菌... 作为一种天然的抑菌物质,溶菌酶对抗生素耐药菌有较强的杀伤作用,具有无耐药性、无残留等特点,被认为在诸如动物饲料、药品等领域可有效代替抗生素,改善滥用抗生素所引起的一系列问题,市场前景巨大。通过微生物发酵大规模生产重组溶菌酶符合市场发展趋势,由于目前生产的菌株表达量偏低,限制了溶菌酶的应用和产业化发展。为提高蛋清溶菌酶的发酵表达量,根据毕赤酵母密码子的偏爱性,对其编码基因进行密码子优化,并构建了真核分泌表达载体pPIC9K-coEWL,经遗传霉素G418抗性筛选后,获得了一株酵母转化子(G-pcoEWL),其对G418的抗性浓度高达15 mg·mL-1。在28℃、pH 6.0、转速240 r·min-1和甲醇浓度1%的诱导条件下,酵母重组子G-p-coEWL经摇瓶培养72 h,实现了蛋清溶菌酶的分泌表达。在发酵上清液中,总蛋白浓度为607 mg·L-1,酶活达到677 U·mL-1。此外,本实验还比较了葡聚糖凝胶柱Sephadex G-50和强酸性阳离子交换柱SP-Sepharose FF两种方法对目的蛋白的分离效果,得到Sephadex G-50的分离效果更好,并在14.4 kDa处得到单一的溶菌酶条带。 展开更多
关键词 蛋清溶菌酶 分泌表达 毕赤酵母 密码子
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我国地区经济国际化水平差异的实证分析 被引量:4
15
作者 古明加 《贵州大学学报(社会科学版)》 2003年第6期23-26,70,共5页
改革开放以来,我国经济对外开放的程度日益拓深,但各地区经济国际化的程度是不同的。通过对目前我国各地区经济国际化水平差异进行实证分析,得出结论:东部地区经济国际化水平遥遥领先,中部西部差距微弱且西部地区的经济国际化进展要略... 改革开放以来,我国经济对外开放的程度日益拓深,但各地区经济国际化的程度是不同的。通过对目前我国各地区经济国际化水平差异进行实证分析,得出结论:东部地区经济国际化水平遥遥领先,中部西部差距微弱且西部地区的经济国际化进展要略快于中部地区;地区间经济国际化差距有扩大趋势。 展开更多
关键词 地区经济国际化 东部地区 中西部地区
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密码子优化的人溶菌酶基因在毕赤酵母中的分泌表达及抗菌活性分析 被引量:1
16
作者 徐艳艳 廖志银 +1 位作者 王珍 王首锋 《浙江大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期753-759,共7页
人溶菌酶(humanlysozyme,hLYZ)是一种天然活性蛋白质,具有抗菌性,目前主要应用于食品添加剂、动物饲料、药物治疗领域。根据毕赤酵母表达偏爱密码子特点,通过优化hlyz基因密码子,人工合成目的基因,构建了分泌表达载体pPIC9K-hlyz。通过... 人溶菌酶(humanlysozyme,hLYZ)是一种天然活性蛋白质,具有抗菌性,目前主要应用于食品添加剂、动物饲料、药物治疗领域。根据毕赤酵母表达偏爱密码子特点,通过优化hlyz基因密码子,人工合成目的基因,构建了分泌表达载体pPIC9K-hlyz。通过电击转化法将pPIC9K-hly质粒重组至毕赤酵母GS115染色体中,经筛选得到重组毕赤酵母GS115-pPIC9K-hlyz。在28℃、pH 6.0、转速240 r·min^(-1)、1%甲醇诱导下表达120 h,发酵液上清酶活达到最高,为(2414.9±108.1)U·mL^(-1),蛋白浓度为166.7μg·mL^(-1)。发酵液上清经过SephadexG50纯化,获得较纯的hLYZ,经SDS-PAGE分析,在近14.7 kDa处显示单一条带。抗菌实验结果表明,重组hLYZ对革兰氏阳性菌的抗菌效果大于革兰氏阴性菌;重组hLYZ的抗菌效果是hLYZ标准品的10~20倍。 展开更多
关键词 人溶菌酶 毕赤酵母 密码子优化 抗菌谱
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我国游泳场馆溺死问题研究进展与思考 被引量:4
17
作者 寇健忠 《三明学院学报》 2010年第2期186-190,共5页
运用文献资料调研法、逻辑分析法对我国游泳场馆溺死问题研究进展情况进行梳理和总结分析,建议对溺死问题进行理论化和系统化的研究,重视交叉学科的运用,发挥保险对防范溺死风险的作用,整合和利用社会资源,尽快制定游泳场所行业的安全... 运用文献资料调研法、逻辑分析法对我国游泳场馆溺死问题研究进展情况进行梳理和总结分析,建议对溺死问题进行理论化和系统化的研究,重视交叉学科的运用,发挥保险对防范溺死风险的作用,整合和利用社会资源,尽快制定游泳场所行业的安全标准和不断完善与之相配套的法律法规。 展开更多
关键词 游泳场馆 溺死 研究进展
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温光变化对西洋杜鹃离体培养的影响
18
作者 顾德峰 王刚 +1 位作者 倪银玲 郭太君 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期14-15,共2页
对西洋杜鹃(Rhododendron hybridum)2个品种(Redjack、Brittania)的试管苗在恒温和变温变光培养条件下进行了离体培养。结果表明,变温变光培养较恒温培养更适于西洋杜鹃的壮苗及生根;2种不同培养条件下的幼苗移栽成活率分别为90.8%和71.... 对西洋杜鹃(Rhododendron hybridum)2个品种(Redjack、Brittania)的试管苗在恒温和变温变光培养条件下进行了离体培养。结果表明,变温变光培养较恒温培养更适于西洋杜鹃的壮苗及生根;2种不同培养条件下的幼苗移栽成活率分别为90.8%和71.0%,差异显著。 展开更多
关键词 西洋杜鹃 组织培养 变温变光 移栽成活率
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抗间质上皮转化因子(c-Met)单价抗体的制备及生物学活性检测
19
作者 郭佳 蒋明 +5 位作者 靳令经 尹衍新 孙慧 于丽华 毛玉婷 房健民 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1544-1548,1553,共6页
目的用抗人间质上皮转化因子(c-Met)阻断型嵌合抗体ch3E1D7表达质粒构建单价抗体慢病毒穿梭质粒,利用慢病毒表达系统实现其在HEK293T细胞中快速表达,并对纯化后抗体的亲和力及中和活性进行检测。方法设计抗c-Met的单价抗体,命名为mono3E... 目的用抗人间质上皮转化因子(c-Met)阻断型嵌合抗体ch3E1D7表达质粒构建单价抗体慢病毒穿梭质粒,利用慢病毒表达系统实现其在HEK293T细胞中快速表达,并对纯化后抗体的亲和力及中和活性进行检测。方法设计抗c-Met的单价抗体,命名为mono3E1D7,利用基因工程技术构建单价抗体三条链的慢病毒表达载体,磷酸钙法转染HEK293T细胞,表达的单价抗体经蛋白A琼脂糖4B亲和层析柱纯化,SDS-PAGE检测抗体完整性,ELISA检测单价抗体在体外阻断c-Met与其配体HGF结合的生物学活性。结果感染单价抗体慢病毒的HEK293T细胞上清纯化后,SDS-PAGE分析可见55 ku的重链、25 ku的轻链以及30 ku的杵状结构链(Knob)三条带。且纯化后的单价抗体能与c-Met抗原结合,同时还具有阻断c-Met与HGF结合的中和活性。结论成功获得抗人c-Met阻断型单价抗体。 展开更多
关键词 C-MET 嵌合抗体 单价抗体 慢病毒表达
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曹妃甸湿地典型植被光谱特征差异性分析 被引量:8
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作者 王美玲 焦琳琳 +2 位作者 王晓红 吴兵 肖星星 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第6期963-969,共7页
运用高光谱遥感技术分析地物特有的光谱特征可以有效地对地物进行识别。以河北省唐山市曹妃甸湿地为研究对象,使用SR2500便携式地物光谱仪测定了2种典型湿地植被——翅碱蓬[ Suaeda salsa (L.) Pall.]和芦苇[ Phragmites australis (Cav... 运用高光谱遥感技术分析地物特有的光谱特征可以有效地对地物进行识别。以河北省唐山市曹妃甸湿地为研究对象,使用SR2500便携式地物光谱仪测定了2种典型湿地植被——翅碱蓬[ Suaeda salsa (L.) Pall.]和芦苇[ Phragmites australis (Cav.)Trin.ex Steud.]的光谱特征,并对2种湿地植被的原始反射率光谱曲线和经过包络线去除法变换后的反射率光谱曲线进行研究。结果显示:由于包络线去除法的限制,在340~380 nm和716~1 020 nm波段范围内,分析芦苇原始光谱曲线更容易区分植被所处的生长期,在340~595 nm和710~920 nm波段范围内,分析翅碱蓬的原始光谱曲线更有利于区分所处的生长期,且2种植被生长旺盛期的反射率均高于生长末期。在508、550、678 nm处利用包络线去除法能够更好地区分芦苇不同生长阶段,在638、678 nm处利用包络线去除法能更好地区分翅碱蓬不同生长阶段。芦苇在绿光波段550 nm处出现明显的反射峰,而翅碱蓬在红光波段638 nm处出现明显的反射峰,这使得2种植被经过包络线去除处理后更好区分。在753~1 020 nm波段范围内,分析原始光谱曲线更适于区分芦苇和翅碱蓬,且芦苇的反射率高于翅碱蓬。 展开更多
关键词 高光谱遥感 芦苇 翅碱蓬 光谱特征 包络线去除
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