剑尾鱼微卫星DNA的筛选 被引量：27

1

作者 李霞 白俊杰 +3 位作者 吴淑勤 叶星 劳海华 简清 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期196-201,共6页

以剑尾鱼(Xiphophorushelleri)为材料,经MboⅠ限制性内切酶消化基因组DNA后,选取500～2000bp的片段连接到经BamHⅠ酶切的pUC18载体上,转化大肠杆菌DH5α构建部分基因组文库。采用设计合成的(AC)7、(GT)7重复序列为引物,PCR筛选部分基因... 以剑尾鱼(Xiphophorushelleri)为材料,经MboⅠ限制性内切酶消化基因组DNA后,选取500～2000bp的片段连接到经BamHⅠ酶切的pUC18载体上,转化大肠杆菌DH5α构建部分基因组文库。采用设计合成的(AC)7、(GT)7重复序列为引物,PCR筛选部分基因组文库,对其中9个重组阳性克隆进行测序,结果共获得24个微卫星序列,其中Perfect(完美型)13个,占54.2%;Imperfect(非完美型)3个,占12.5%;Compound(混合型)8个,占33.3%。表明(AC/GT)n在剑尾鱼的基因组DNA中含量非常丰富。同时,根据其中3个克隆微卫星的侧翼序列设计引物,PCR扩增剑尾鱼基因组DNA,结果均扩增到目的片段。而且,这3对引物扩增出来的微卫星片段在非选育的剑尾鱼中显示出多态性,而在近交系19代则表现为单态,为剑尾鱼的实验动物化遗传研究提供了理论依据。 展开更多

关键词 剑尾鱼 微卫星 序列

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剑尾鱼RW-H近交系20个微卫星位点的遗传结构 被引量：8

2

作者 刘宇飞 白俊杰 +2 位作者 李凯彬 黄志斌 全迎春 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期602-607,共6页

为了对水生实验动物剑尾鱼（Xiphophorus helleri）RW-H系近交15代的遗传结构进行研究，寻找该近交系的标志基因位点，选择20个在野生剑尾鱼群体具多态性的微卫星位点，对剑尾鱼RW-H系（红眼白体）30尾个体进行分析。结果表明，其中有1... 为了对水生实验动物剑尾鱼（Xiphophorus helleri）RW-H系近交15代的遗传结构进行研究，寻找该近交系的标志基因位点，选择20个在野生剑尾鱼群体具多态性的微卫星位点，对剑尾鱼RW-H系（红眼白体）30尾个体进行分析。结果表明，其中有17个位点为单态，有可能作为该近交系的标志基因位点；另外3个位点Msa012、Msa033和Msc036具有多态性，多态信息含量值分别为0．3047、0．3457和0．3648。通过Pop-gene3．2软件分析得知全部基因位点的纯合率达到了95．83％，个体间平均遗传距离为0．0482（0．0000～0．1625），遗传相似系数为0．9518（0．8500～1．0000），说明剑尾鱼RW-H系已经具有很高的近交程度。几个多态性位点的发现，可以指导近交选育，加快选育进度。本研究方法不仅检测出剑尾鱼RW-H系具较低的遗传多样性，而且可为中国建立分子水平的实验动物监测标准提供基础数据。[中国水产科学，2007，14（4）：602—607] 展开更多

关键词 剑尾鱼 近交系 微卫星 遗传结构

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热应激对剑尾鱼HSP70家族两成员基因表达的影响 被引量：6

3

作者 万文菊 石存斌 +2 位作者 王纪亭 柴同杰 吴淑勤 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期929-935,共7页

采用RT-PCR方法扩增实验动物剑尾鱼（Xiphopohorus helleri）纯系RR-B的HSP70家族两个成员的eDNA片段，并将其克隆到PMD18-T载体中测序，将测序结果与GenBank中的核苷酸序列和推导的氨基酸序列进行同源性比较。同时利用RT-PCR半定量方... 采用RT-PCR方法扩增实验动物剑尾鱼（Xiphopohorus helleri）纯系RR-B的HSP70家族两个成员的eDNA片段，并将其克隆到PMD18-T载体中测序，将测序结果与GenBank中的核苷酸序列和推导的氨基酸序列进行同源性比较。同时利用RT-PCR半定量方法研究热应激时两个成员在剑尾鱼组织中的表达。通过克隆获得了剑尾鱼的HSP70家族两个新成员的cDNA片段，两序列均包含HSP70家族的特征性签名序列和热休克蛋白的定位序列；通过对克隆片段与已发表的青锵（Oryzias latipes）等鱼类HSP70的核苷酸序列和其编码的氨基酸序列同源性比较，发现核苷酸序列同源性较高，成员一和成员二分别为85％-89％和82％-99％；氨基酸序列同源性更高，成员一和成员二分别为97％-99％和93％-99％。一般条件下，两成员在剑尾鱼肝脏、脾脏、肾脏和心脏中不表达，但热应激能刺激成员一在剑尾鱼脾脏中表达，成员二在肝脏、脾脏、肾脏和心脏中强烈表达，并可能在参与热应激保护方面起更大作用。 展开更多

关键词 HSP70 热应激 剑尾鱼 克隆 基因表达

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溶藻弧菌感染对剑尾鱼HSP70基因表达的影响 被引量：14

4

作者 万文菊 王纪亭 +1 位作者 石存斌 吴淑勤 《大连水产学院学报》 CSCD 北大核心 2007年第5期330-334,共5页

用溶藻弧菌Vibrio alginolyticus感染剑尾鱼Xiphophorus helleri,取感染后第0、2、5、8、11 d的活鱼及感染后第2 d濒死鱼,采用半定量RT-PCR方法分别检测HSP70基因在肝胰脏、脾脏、头肾和心脏组织中的表达。结果表明:正常条件下,HSP70在... 用溶藻弧菌Vibrio alginolyticus感染剑尾鱼Xiphophorus helleri,取感染后第0、2、5、8、11 d的活鱼及感染后第2 d濒死鱼,采用半定量RT-PCR方法分别检测HSP70基因在肝胰脏、脾脏、头肾和心脏组织中的表达。结果表明:正常条件下,HSP70在检测的剑尾鱼组织中均不表达;在用溶藻弧菌感染第8 d的剑尾鱼肝胰脏内,HSP70基因被诱导强烈表达,HSP70/β-actin的值为1.80±0.03;在感染第2、5 d的剑尾鱼头肾内,HSP70基因被诱导表达,第8 d HSP70基因强烈表达,感染濒死鱼头肾内也检测到HSP70基因的强烈表达,HSP70/β-actin的值分别为0.35±0.02、0.15±0.01、2.00±0.06和0.95±0.05;在剑尾鱼被感染第2、5、8 d,在脾脏内均检测到HSP70基因的表达,感染濒死鱼脾脏内也检测到HSP70基因的强烈表达,HSP70/β-actin的值分别为0.30±0.02、0.15±0.01、0.45±0.03和1.55±0.04;仅在感染濒死鱼的心脏中检测到HSP70基因的表达,HSP70/β-actin的值为0.30±0.02;到第11 d HSP70基因表达消失。 展开更多

关键词 溶藻弧菌 剑尾鱼 HSP70 基因表达

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食蚊鱼卵子发生的组织学观察 被引量：11

5

作者 王志坚 罗虹 张耀光 《重庆师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2008年第3期8-12,共5页

食蚊鱼卵子发育过程分为6个时相。第1时相,卵原细胞细胞质较少,核质比较大。第2时相,卵母细胞体积增加迅速,核质比显著减小,细胞质强嗜碱性,滤泡细胞出现。到晚期,有卵黄核及类生长环的出现,这两种结构均和卵黄物质的形成有关。第3时相... 食蚊鱼卵子发育过程分为6个时相。第1时相,卵原细胞细胞质较少,核质比较大。第2时相,卵母细胞体积增加迅速,核质比显著减小,细胞质强嗜碱性,滤泡细胞出现。到晚期,有卵黄核及类生长环的出现,这两种结构均和卵黄物质的形成有关。第3时相,卵母细胞嗜碱性减弱,卵黄泡从膜内缘开始出现,逐渐充满细胞质。颗粒层滤泡细胞互相堆积成舌状镶嵌入卵膜,并使放射带凹凸不平,称为镶嵌型滤泡。第4时相,卵母细胞体积增加较快,卵黄泡消失,卵黄物质逐渐充满细胞质,细胞核移至边缘。第5时相,滤泡细胞脱落,成为成熟卵,卵黄物质均匀散布,卵膜极薄。第6时相,未受精卵和滤泡细胞逐渐退化,被吸收。 展开更多

关键词 食蚊鱼 卵子发生 组织学 镶嵌型滤泡细胞 卵黄积累和来源

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剑尾鱼热应激蛋白HSP70 cDNA片段的克隆与序列分析 被引量：5

6

作者 万文菊 王纪亭 +2 位作者 石存斌 吴淑勤 柴同杰 《大连水产学院学报》 CSCD 北大核心 2007年第1期1-5,共5页

为了进一步开展剑尾鱼Xiphophorus helleri——标准化实验动物在抗逆方面的相关研究,以及热应激蛋白(HSP70)在抗逆方面的作用,作者用RT-PCR方法首次克隆得到了剑尾鱼的HSP70的cDNA片段,该片段包含HSP70的特征性序列(GAT CTC GGT GGT GGC... 为了进一步开展剑尾鱼Xiphophorus helleri——标准化实验动物在抗逆方面的相关研究,以及热应激蛋白(HSP70)在抗逆方面的作用,作者用RT-PCR方法首次克隆得到了剑尾鱼的HSP70的cDNA片段,该片段包含HSP70的特征性序列(GAT CTC GGT GGT GGC ACT TTT GAT)。通过将克隆片段与已发表的其它鱼类HSP70的核苷酸序列和其编码的氨基酸序列进行同源性比较,发现剑尾鱼核苷酸序列同源性较高,与牙鲆Paralichthys olivaceus HSP70核苷酸序列同源性最高为89%,与川鲽Platichthys flesus、虹鳟Oncorhyn-chus mykiss和黄锡鲷Rhabdosargus sarba的同源性皆在85%以上;与国外学者发表的HSP70的规律类似,所克隆的片段与其它鱼类HSP70基因编码的氨基酸序列同源性较相应核苷酸序列同源性更高,与牙鲆和川鲽的HSP70氨基酸序列同源性最高达到99%,与斑马鱼Danio rerio、虹鳟和黄锡鲷的氨基酸序列同源性均高于97%。不同鱼的HSP70 cDNA核苷酸序列存在一定差异,但氨基酸序列并未受到影响,经对照,这种不同相当一部分存在于密码子的第3个碱基,因为密码子的简并性,编码氨基酸没有发生改变。 展开更多

关键词 热应激蛋白HSP70 CDNA 剑尾鱼 克隆 序列

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神仙鱼胚胎和仔鱼发育的初步观察 被引量：5

7

作者 周玉 杨振国 张俊辉 《上海水产大学学报》 CSCD 2001年第4期370-373,共4页

关键词 神仙鱼 受精卵 胚胎发育 仔鱼发育

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云南青鳉鱼类的分类和分布(鳉形目:青鳉科) 被引量：22

8

作者 陈银瑞 宇和纮 褚新洛 《动物分类学报》 CSCD 1989年第2期239-246,共8页

经研究,云南的青鳉鱼类有2种:(1)分布于西双版纳的小青鏘 Oryzias minutillus Smith为中国境内首次记录;(2)另一种是新亚种,定名中华青鳉 Oryzias latipes sinentis subsp.nov.广泛分布于云南及中国其他地区。本新亚种与产自日本的指名... 经研究,云南的青鳉鱼类有2种:(1)分布于西双版纳的小青鏘 Oryzias minutillus Smith为中国境内首次记录;(2)另一种是新亚种,定名中华青鳉 Oryzias latipes sinentis subsp.nov.广泛分布于云南及中国其他地区。本新亚种与产自日本的指名亚种日本青鳉 Oryzias latipes latipes Temminck et Schlegel的主要区别在于:本新亚种的第一肋骨连接第二而不是第三脊椎骨上;平均脊椎骨数为29.2±0.6而不是30.3±0.5;胸鳍条多数为9而不是多数为10枚;染色体数目2n=46而不是2n=48。这些差异,明显地表示了由于地理隔离而引起的亚种分化。 展开更多

关键词 青Hiang属 鱼类 新亚种 分类

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维生素缺乏对水生实验动物──剑尾鱼的影响 被引量：2

9

作者 吴淑勤 石存斌 +2 位作者 欧阳冰 黄志斌 潘厚军 《中国实验动物学杂志》 1996年第3期129-133,共5页

本研究对剑尾鱼（Ｘｉｐｈｏｐｈｏｒｕｓｈｅｌｌｅｒｉ）施行全生活周期饲喂缺少某类维生素（Ｖｉｔ）的人工配合饲料。结果表明：（１）ＶＥ、ＶＡ添加量不足时对生长不利，（２）各种Ｖｉｔ缺乏对卵巢、胚胎发育有不同程度的影响，... 本研究对剑尾鱼（Ｘｉｐｈｏｐｈｏｒｕｓｈｅｌｌｅｒｉ）施行全生活周期饲喂缺少某类维生素（Ｖｉｔ）的人工配合饲料。结果表明：（１）ＶＥ、ＶＡ添加量不足时对生长不利，（２）各种Ｖｉｔ缺乏对卵巢、胚胎发育有不同程度的影响，其中ＶＥ不足的影响较为显著；（３）畸形在本试验条件下发生率较低，≤５％，但尚可看出多种Ｖｉｔ与畸形有一定的相关性，其中与缺乏ＶＫ、ＶＤ、ＶＣ的关系较为密切；（４）眼白内障发生率以未添加ＶＢ、ＶＫ的两组最高，分别为１２．５％和１１．３％；（５）ＶＣ摄取量不足的剑尾鱼，抗感染力大幅度下降。 展开更多

关键词 发生率 畸形 影响 抗感染力 维生素缺乏 白内障 VD 剑尾鱼 人工配合饲料 VE

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剑尾鱼人工配合饵料中最适蛋白质含量的初步探讨 被引量：2

10

作者 石存斌 吴淑勤 +1 位作者 黄志斌 潘厚军 《中国实验动物学杂志》 2000年第1期11-14,共4页

采用人工配合饵料喂养剑尾鱼 ,以生长率作为评定指标 ,研究了剑尾鱼对蛋白质的需求量。实验表明 ,在一定的范围内 ,剑尾鱼的增重率与饵料中的蛋白质含量成正比 ;饵料中蛋白质的最适含量范围为 35.5%～ 4 1.3% ;

关键词 剑尾鱼 蛋白质含量 人工配合饵料 增重率 生长率 鱼体 评定指标 初步探讨 喂养 相关性

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食蚊鱼 被引量：2

11

作者 倪勇 《水产科技情报》 1985年第2期16-17,共2页

食蚊鱼Gambusia affinis(Baird et Girard)又名柳条鱼。隶属鳉形目Cyprinodontirormes，花鳉科Poeciliidae，食蚊鱼属Gambusia。

关键词 食蚊鱼 柳条鱼 鳉形目 习性 卵胎生鱼类

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贡氏假鳃鳉—新型衰老研究的模式动物

12

作者 王霞 宿烽 《鲁东大学学报（自然科学版）》 2012年第4期332-334,369,共4页

贡氏假鳃鳉属于一年生鳉鱼,繁殖能力强,生命周期短,遗传信息稳定,衰老特征明显.本文对贡氏假鳃鳉作为衰老研究模式动物的优势和研究前景进行了阐述.

关键词 贡氏假鳃鳉 衰老 模式动物

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剑尾鱼线粒体DNA D-环及侧翼tRNA^(thr)和tRNA^(pro)序列与结构分析 被引量：4

13

作者 白俊杰 劳海华 +2 位作者 叶星 简清 吴淑勤 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期89-92,共4页

采用PCR方法从剑尾鱼(Xiphophorushelleri)线粒体基因组中扩增到1段约15.5kb的片段,测定了其中627个碱基的序列。经测序分析表明,该扩增片段包括486bp的D 环的部分序列以及D 环5'端的tRNAthr和tRNApro基因的完整序列。其中486bpD环... 采用PCR方法从剑尾鱼(Xiphophorushelleri)线粒体基因组中扩增到1段约15.5kb的片段,测定了其中627个碱基的序列。经测序分析表明,该扩增片段包括486bp的D 环的部分序列以及D 环5'端的tRNAthr和tRNApro基因的完整序列。其中486bpD环序列包含3段保守的终止相关序列TAS、与TAS互补的序列以及类似其他鱼类线粒体CSB序列。tRNAthr由线粒体DNA的H链编码,长度为72bp。tRNApro由线粒体DNA的L链编码,长度为69bp。并绘制了这2种tRNA的二级结构图。本研究所测定的基因序列已登录国际GenBank数据库,序号为AF489918。 展开更多

关键词 剑尾鱼 线粒体DNA D—环 侧翼 tRNA^trh tRNApro 基因序列 二级结构图

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剑尾鱼IgM基因的克隆及免疫对其组织表达的影响 被引量：7

14

作者 韩进刚 付小哲 +3 位作者 石存斌 李凯彬 潘厚军 吴淑勤 《广东海洋大学学报》 CAS 2007年第6期1-6,共6页

以免疫两周的剑尾鱼为材料,提取脾脏总RNA,通过逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出分泌型免疫球蛋白M(secretory immunoglobulin M,sIgM)重链基因的核心序列,再应用3’和5’快速扩增cDNA末端(RACE)方法扩增其末端序列,拼接后获得剑尾... 以免疫两周的剑尾鱼为材料,提取脾脏总RNA,通过逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出分泌型免疫球蛋白M(secretory immunoglobulin M,sIgM)重链基因的核心序列,再应用3’和5’快速扩增cDNA末端(RACE)方法扩增其末端序列,拼接后获得剑尾鱼sIgM重链全长cDNA序列。全长序列含有免疫球蛋白的信号序列:FKCIANH,得到的5个可变区序列可能来源于4个不同的VH家族。经用半定量RT-PCR分析sIgM在脾脏和头肾的表达变化,初步认为利用剑尾鱼头肾sIgM的mRNA表达变化替代检测血清抗体效价具有可能性。 展开更多

关键词 剑尾鱼 免疫球蛋白M 基因表达:基因克隆

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孔雀鱼雌性生殖器官组织结构及卵子发生的研究 被引量：4

15

作者 王晓艳 王莎莎 +3 位作者 赵玉超 刘永 孙帆 郭恩棉 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期16-20,共5页

应用光镜技术研究了孔雀鱼(Poecilia reticulata)雌性生殖器官组织结构和卵子发生的特点,以期为孔雀鱼的良种繁育工作提供基础资料。结果表明,孔雀鱼雌性生殖器官由卵巢、卵子输送管和泄殖孔构成。卵子发生过程经历了6个时相:第Ⅰ时相... 应用光镜技术研究了孔雀鱼(Poecilia reticulata)雌性生殖器官组织结构和卵子发生的特点,以期为孔雀鱼的良种繁育工作提供基础资料。结果表明,孔雀鱼雌性生殖器官由卵巢、卵子输送管和泄殖孔构成。卵子发生过程经历了6个时相:第Ⅰ时相主要为卵原细胞;第Ⅱ时相是处于小生长期的初级卵母细胞,形成生长环、卵黄核和单层扁平滤泡细胞膜;第Ⅲ时相是进入大生长期的初级卵母细胞,卵黄开始积累,形成2层滤泡细胞膜和2层卵包膜;第Ⅳ时相为发育晚期的初级卵母细胞,细胞发生了极化,卵包膜发育完善;第Ⅴ时相发育成熟,卵黄颗粒凝结呈块状,卵黄泡主要分布于细胞膜内缘,滤泡细胞膜萎缩;第Ⅵ时相是闭锁卵泡,被滤泡细胞消化和吸收转变为卵巢内结缔组织。 展开更多

关键词 孔雀鱼 卵巢 卵子发生

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温度对剑尾鱼性逆转的影响 被引量：4

16

作者 李长有 《松辽学刊（自然科学版）》 2001年第1期70-72,共3页

本文研究了剑尾鱼（Ｘｉｐｈｏｐｈｒｕｓｈｅｌｉｅｒｉ）在体型和性行为方面，雌鱼生殖后在不同温度下转变为雄性的现象．雌剑尾鱼在能生存的温度范围内，都有性逆转现象，但在生存温度的上限和下限内性逆转率较高，其余温度内性逆转... 本文研究了剑尾鱼（Ｘｉｐｈｏｐｈｒｕｓｈｅｌｉｅｒｉ）在体型和性行为方面，雌鱼生殖后在不同温度下转变为雄性的现象．雌剑尾鱼在能生存的温度范围内，都有性逆转现象，但在生存温度的上限和下限内性逆转率较高，其余温度内性逆转率较低，甚至为零． 展开更多

关键词 剑尾鱼 性逆转 温度 生态因子 性逆转变 体形 性行为 性逆转量

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中国鱼类系统分类——Ⅱ.辐鳍鱼纲

17

作者 李明德 《海洋通报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期63-73,共11页

辐鳍鱼纲分2亚纲14总目,36目278科,其中移入种2目9科,土著种34目269科.

关键词 鱼类 系统分类 辐鳍鱼纲 鳍鱼 中国

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孔雀鱼胚后发育的器官组织学发生研究

18

作者 方珍珍 范强 +1 位作者 陶秉春 陈成勋 《江苏农业科学》 2018年第24期168-171,共4页

应用组织学方法,对孔雀鱼的脑、心脏、鳃、头肾、中肾、口腔、皮肤及内脏团等组织器官进行观察。结果表明,孔雀鱼胚胎发育后期,各个器官组织结构都已基本发育成型;消化道开通,产出后即能摄食;肝脏组织结构完善,胆囊内含胆汁,胰脏分散于... 应用组织学方法,对孔雀鱼的脑、心脏、鳃、头肾、中肾、口腔、皮肤及内脏团等组织器官进行观察。结果表明,孔雀鱼胚胎发育后期,各个器官组织结构都已基本发育成型;消化道开通,产出后即能摄食;肝脏组织结构完善,胆囊内含胆汁,胰脏分散于肠系膜上;鳃、伪鳃的组织结构完善;头肾中可见输尿管,中肾内肾小体、肾小管可辨;脾脏内白髓、红髓清晰;胸腺内含皮质、髓质易辨,甲状腺、脑垂体组织结构清晰;嗅觉器官中嗅窝清晰可辨,眼睛的各组织结构完善,后房内含丰富的毛细血管,内耳组织结构发育完善,其听嵴、听斑清晰可辨;鳔的横纤维、纵纤维明显;心脏中心耳、心室完善;脑分化完全,脊髓灰质区、白质区清晰,脊神经节易辨;生骨节较完善;皮肤较薄。 展开更多

关键词 孔雀鱼 器官 组织学 胚后发育

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青鳉鱼早期胚胎中外源DNA的复制行为的研究

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作者 朱健 王燕 +3 位作者 包绍文 沈子威 邱黎明 杨莉 《清华大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 1994年第3期20-26,共7页

利用显微注射技术将外源ＤＮＡ与标有生物素的ｄＡＴＰ一起导入处于１细胞期的青鱼（Ｍｅｄａｋａ）受精卵细胞质中，鱼卵在２５℃孵化一天至胚孔封闭期，从胚胎细胞质中提取ＤＮＡ，经分子杂交发现外源ＤＮＡ在胚胎中可进行复制。ＤＮ... 利用显微注射技术将外源ＤＮＡ与标有生物素的ｄＡＴＰ一起导入处于１细胞期的青鱼（Ｍｅｄａｋａ）受精卵细胞质中，鱼卵在２５℃孵化一天至胚孔封闭期，从胚胎细胞质中提取ＤＮＡ，经分子杂交发现外源ＤＮＡ在胚胎中可进行复制。ＤＮＡ样品再经核酸电镜分析，发现了几种类型的复制分子，并发现多复制叉及成熟前复制现象。由此认为外源ＤＮＡ可以多种方式在青鱼早期胚胎细胞质中进行复制。 展开更多

关键词 青jiang鱼 外源DNA 复制 胚胎 早期

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