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人参皂苷Rg3通过调控E2F1对人胃癌SGC-7901细胞生物行为学的影响 被引量:1
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作者 王建新 王琳茜 +3 位作者 朱波 时沛 孙义长 韩立 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期853-858,共6页
目的探究人参皂苷Rg3通过调控E2F1对人胃癌SGC-7901细胞生物行为学的影响。方法MTT测定不同浓度人参皂苷Rg3(0、80、160、320μmol·L^(-1))对细胞增殖影响;流式细胞术测定不同浓度人参皂苷Rg3对细胞凋亡的影响;划痕愈合实验和Trans... 目的探究人参皂苷Rg3通过调控E2F1对人胃癌SGC-7901细胞生物行为学的影响。方法MTT测定不同浓度人参皂苷Rg3(0、80、160、320μmol·L^(-1))对细胞增殖影响;流式细胞术测定不同浓度人参皂苷Rg3对细胞凋亡的影响;划痕愈合实验和Transwell实验测定不同浓度人参皂苷Rg3对细胞迁移及侵袭的影响;Western blot测定不同浓度人参皂苷Rg3对E2F1、MMP-2、MMP-9、BCL-2、Bax表达的影响。结果80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞存活率与空白对照组比较明显降低,且呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞凋亡率与空白对照组比较明显增加,且呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞迁移数目与空白对照组比较明显降低,且呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞侵袭数目与空白对照组比较明显降低,且呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组E2F1 mRNA与E2F1蛋白表达量相较空白对照组明显减少且,呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞中MMP-2、MMP-9、BCL-2蛋白表达量与空白对照组比较明显降低,BCL-2与空白对照组比较明显升高,且呈浓度依赖性(P<0.05)。结论人参皂苷Rg3能降低胃癌SGC-7901细胞增殖能力,抑制细胞迁移及侵袭能力,同时还促进SGC-7901细胞凋亡,且具有浓度依赖性,其作用机制可能通过E2F1因子下调MMP-2、MMP-9、BCL-2表达,上调Bax表达有关。 展开更多
关键词 人参皂苷RG3 E2F1 胃癌 增殖 迁移和侵袭 凋亡
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生物钟在口腔医学研究中合理应用专家共识
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作者 杨凯 孙沫逸 +27 位作者 李龙江 唐瞻贵 任国欣 郭伟 祝颂松 郑家伟 张杰 孙志军 任杰 郑佳雯 吕晓强 唐洪 陈丹 席庆 黄欣 武和明 马洪 尚伟 孟箭 李吉辰 李春洁 李一 赵宁波 谭雪梅 杨轶昕 吴亚东 尹仕琳 张志伟 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期455-460,共6页
机体生物钟(也称昼夜节律)是地球上所有生物体能适者生存在地球自转环境中的基础。昼夜节律是生命活动最基本的调控机制,在维持人体正常生理生化稳态、疾病发生及治疗中均扮演关键角色。研究表明,生物钟在口腔组织发育生长、口腔疾病发... 机体生物钟(也称昼夜节律)是地球上所有生物体能适者生存在地球自转环境中的基础。昼夜节律是生命活动最基本的调控机制,在维持人体正常生理生化稳态、疾病发生及治疗中均扮演关键角色。研究表明,生物钟在口腔组织发育生长、口腔疾病发生及治疗中具有重要作用。由于目前还没有包括口腔医学在内的生物钟研究方法的指导性文献,研究者主要基于已发表的参考文献进行探讨,致使口腔医学中有关生物钟的研究方法存在争议,如何合理应用昼夜节律的研究方法还存在诸多困惑。该共识在总结生物钟的作用特点以及分析目前生物钟在口腔医学研究中不足的基础上,组织相关专家归纳推荐了生物钟在口腔医学研究中合理实施的10条原则,为生物钟在口腔医学研究中的合理应用提供参考。 展开更多
关键词 生物钟 昼夜节律 口腔医学 医学 专家共识
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LncRNA p21调控Hippo-YAP信号通路对小鼠腹主动脉瘤形成的影响及机制
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作者 陈啸 王晋军 +3 位作者 张林林 郭莲莲 张中旺 张娟子 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期55-62,共8页
目的 探究长链非编码RNA p21(long non-coding RNA,LncRNA p21)调控Hippo-Yes相关蛋白(Hippo-Yes-associated protein, Hippo-YAP)信号通路对小鼠腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm, AAA)形成的影响。方法 C57BL/6 ApoE-/-通过皮下... 目的 探究长链非编码RNA p21(long non-coding RNA,LncRNA p21)调控Hippo-Yes相关蛋白(Hippo-Yes-associated protein, Hippo-YAP)信号通路对小鼠腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm, AAA)形成的影响。方法 C57BL/6 ApoE-/-通过皮下植入渗透性微泵构建血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导小鼠AAA模型。将C57BL/6 ApoE-/-随机分为假手术组(sham)、模型组(model)、LncRNA p21阴性对照组(sh-NC)、LncRNA p21敲低组(sh-LncRNA p21)。HE和血管弹力纤维染色(VVG)观察血管形态变化;qRT-PCR检测LncRNA p21表达;Western blot检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1表达;原位末端标记法(TUNEL)染色检测平滑肌细胞凋亡;Western blot检测caspase-3、cyclinD1及Hippo-YAP信号通路蛋白表达。结果 与sham组相比,model组小鼠血管弹力纤维断裂紊乱,出现明显损伤,且LncRNA p21、MMP-2、MMP-9、caspase-3表达和细胞凋亡率均增加(P<0.01),TIMP-1、cyclinD1和YAP、TAZ表达均降低(P<0.01)。与model组相比,sh-LncRNA p21组小鼠血管弹力纤维断裂及损伤程度减轻,LncRNA p21、MMP-2、MMP-9、caspase-3表达和细胞凋亡率均降低(P<0.01),TIMP-1、cyclinD1和YAP、TAZ表达均增加(P<0.01)。结论 LncRNA p21能够促进小鼠AAA形成,其机制与调控Hippo-YAP信号、促进细胞凋亡、抑制细胞增殖相关。 展开更多
关键词 腹主动脉瘤 长链非编码RNA p21 Hippo-Yes相关蛋白通路 凋亡 增殖 小鼠
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LncRNA FAS-AS1转染对K562细胞生物学行为的影响
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作者 张峰华 张彤如 +2 位作者 祝伟宏 刘敬 孙国文 《西部医学》 2024年第8期1150-1155,共6页
目的探究LncRNA FAS-AS1对K562白血病细胞生物学行为的影响。方法取对数生长期的K562细胞培养分为空白对照组(正常培养,不做任何处理),阴性对照组(转染LncRNA FAS-AS1空质粒),实验组(Lnc RNA FAS-AS1)。MTT法检测细胞增殖情况,Western b... 目的探究LncRNA FAS-AS1对K562白血病细胞生物学行为的影响。方法取对数生长期的K562细胞培养分为空白对照组(正常培养,不做任何处理),阴性对照组(转染LncRNA FAS-AS1空质粒),实验组(Lnc RNA FAS-AS1)。MTT法检测细胞增殖情况,Western blot检测细胞中mTOR、AMPK蛋白含量,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果与空白对照组和阴性对照组相比,实验组K562细胞FAS-AS1 mRNA表达显著上升(P<0.05),但空白组与阴性对照组细胞中FAS-AS1 mRNA表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。随着培养时间的延长,实验组K562细胞的增殖率显著低于对照组(P<0.05),但空白与阴性对照组细胞增殖率比较差异无统计学意义(P>0.05)。实验组凋亡率显著高空白对照和阴性对照组(P<0.05),而空白对照组与阴性对照组凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。实验组K562细胞AMPK蛋白表达水平显著高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05),而空白对照组和阴性对照组K562细胞中表达水平蛋白mTOR、AMPK比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论LncRNA FAS-AS1过表达对K562白血病细胞的生物学行为有显著影响,能够降低细胞的增殖数量及增殖活性,可能与活化AMPK基因进而阻断mTOR活性相关。 展开更多
关键词 LncRNA FAS-AS1 白血病 MTOR AMPK 细胞生物行为
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双模态碳量子点间充质干细胞成像及细胞分化研究
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作者 袁军 常时新 +1 位作者 王乐 周自明 《安徽医药》 CAS 2024年第10期2094-2098,I0008,共6页
目的制备双模态碳量子点(carbon dots,CDs)探针并探索其示踪间充质干细胞(MSCs)的可行性。方法2022年10月至2023年5月,以钆喷酸葡胺、柠檬酸及二乙烯三胺为前驱体,采用水热法合成Gd∶CDs[钆(Gd)掺杂的碳量子点],进行表征并用于MSCs标记... 目的制备双模态碳量子点(carbon dots,CDs)探针并探索其示踪间充质干细胞(MSCs)的可行性。方法2022年10月至2023年5月,以钆喷酸葡胺、柠檬酸及二乙烯三胺为前驱体,采用水热法合成Gd∶CDs[钆(Gd)掺杂的碳量子点],进行表征并用于MSCs标记及成像。检测不同浓度Gd∶CDs(10、25、50 nmol/L)对MSCs成骨分化及成脂肪分化的影响。结果Gd∶CDs生物安全性好,荧光量子产率为76%,纵向弛豫率为5.5727 mmol^(-1)·s^(-1),具备双模态成像潜力,可用于MSCs标记。不同浓度Gd∶CDs(10、25、50 nmol/L)标记的MSCs经成骨诱导后,吸光度[D(λ)]分别为2.368±0.014、2.253±0.084及2.133±0.127,与对照组D(λ)(2.334±0.062)相比,高浓度Gd∶CDs对MSCs成骨分化有少许影响(P<0.05),中低浓度的Gd∶CDs标记对MSCs成骨分化无明显影响(P>0.05)。不同浓度Gd∶CDs(10、25、50 nmol/L)标记的MSCs经成脂肪诱导后,D(λ)分别为0.274±0.036、0.286±0.032、0.262±0.065,与对照组D(λ)(0.254±0.026)相比,各组对MSCs的成脂肪分化无明显影响(P>0.05)。结论采用水热法制备的Gd∶CDs荧光量子产率及纵向弛豫率高,具有示踪MSCs的潜能,且对MSCs的分化影响较小。 展开更多
关键词 示踪物 柠檬酸 二乙烯三胺 显微镜检查 共焦 细胞光度测定法 碳量子点 间充质干细胞 双模态成像 成骨分化 成脂肪分化 探针
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剪切力作用下巨噬细胞和间充质干细胞内皮向分化的相互作用
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作者 黄艳 孟凡哲 +1 位作者 赵江涛 樊瑜波 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第S01期405-405,共1页
目的损伤血管会发生局部力学环境变化,巨噬细胞会大量浸润,间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)可归巢至局部参与早期再内皮化修复,本文主要研究剪切力作用下巨噬细胞和间充质干细胞内皮向分化的相互作用。方法采用transwell直... 目的损伤血管会发生局部力学环境变化,巨噬细胞会大量浸润,间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)可归巢至局部参与早期再内皮化修复,本文主要研究剪切力作用下巨噬细胞和间充质干细胞内皮向分化的相互作用。方法采用transwell直接共培养巨噬细胞和MSCs,通过RT-PCR和免疫组化技术检测细胞表达内皮细胞相关因子基因和蛋白的情况,利用流式细胞术检测巨噬细胞的表型。使用脂多糖、干扰素-γ和白细胞介素4分别诱导获得高纯度M1、M2型巨噬细胞,提取其培养上清制备条件培养基,探究间接共培养下巨噬细胞对MSCs向内皮细胞方向分化的影响。利用实验室自制的细胞力学生物学实验系统加载剪切力,研究剪切力作用下巨噬细胞和间充质干细胞内皮向分化的相互作用。结果直接共培养下,巨噬细胞可以促进MSCs表达内皮细胞相关的基因和蛋白,同时,巨噬细胞自身向M2表型极化。间接共培养下,M1型和M2型巨噬细胞均可以促进MSCs内皮向分化,其中M2型巨噬细胞的促进效果更显著,与间接共培养作用的促进效果无显著差异。剪切力条件下,M2型巨噬细胞可以更好地促进MSCs向内皮细胞方向分化,尤其是较高剪切力组。结论剪切力可以影响巨噬细胞和间充质干细胞内皮向的相互作用,但其规律和机制有待进一步深入研究。 展开更多
关键词 M2型巨噬细胞 间充质干细胞 内皮细胞 白细胞介素4 生物学实验 免疫组化技术 条件培养基 细胞力学
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裙带菜多糖抑制肝癌细胞增殖和迁移的机制
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作者 刘伟萍 陈建芬 +2 位作者 安金琪 罗艺 刘凤斌 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期670-678,共9页
目的探讨裙带菜多糖(sulfated polysaccharide from Undaria pinnatifida,SPUP)对肝癌细胞增殖、迁移的影响及潜在机制。方法MTT和克隆形成实验检测SPUP对肝癌细胞HepG2、SMMC-7721增殖的影响;Hoechst 33258染色和Western blot法检测SPU... 目的探讨裙带菜多糖(sulfated polysaccharide from Undaria pinnatifida,SPUP)对肝癌细胞增殖、迁移的影响及潜在机制。方法MTT和克隆形成实验检测SPUP对肝癌细胞HepG2、SMMC-7721增殖的影响;Hoechst 33258染色和Western blot法检测SPUP干预后对HepG2、SMMC-7721细胞凋亡的影响;Transwell和划痕法检测HepG2、SMMC-7721细胞的迁移和侵袭;免疫荧光和Western blot法检测SPUP对肝癌细胞自噬、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)、MMP-9蛋白的影响。结果SPUP对HepG2、SMMC-7721细胞有短期和长期的抑制增殖作用,对正常肝细胞L-02无明显抑制作用,SPUP可促进两种肝癌细胞凋亡和自噬水平。同时,SPUP可以抑制肝癌细胞的迁移侵袭能力,降低EMT和MMPs水平。结论SPUP通过促进凋亡和自噬、抑制EMT和MMPs,进而抑制肝癌细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 裙带菜多糖 肝细胞癌 增殖 自噬 凋亡 侵袭迁移 上皮间质转化 基质金属蛋白酶
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KLF4通过mTOR/P70S6K途径激活细胞自噬减轻高糖诱导的足细胞损伤
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作者 冯琦 布合力其·麦麦提 +1 位作者 莫颖 张蕾 《中国中西医结合肾病杂志》 2024年第4期304-309,共6页
目的:分析Krüppel样转录因子4(KLF4)对高糖诱导的足细胞损伤的影响及相关分子机制。方法:体外培养MPC5细胞,将MPC5细胞分为对照组(Control组)、高糖组(HG组)、高糖+空载质粒对照组(HG+NC组)、高糖+KLF4过表达组(HG+KLF4组)。采用qR... 目的:分析Krüppel样转录因子4(KLF4)对高糖诱导的足细胞损伤的影响及相关分子机制。方法:体外培养MPC5细胞,将MPC5细胞分为对照组(Control组)、高糖组(HG组)、高糖+空载质粒对照组(HG+NC组)、高糖+KLF4过表达组(HG+KLF4组)。采用qRT-PCR法检测细胞中KLF4 mRNA表达水平,CCK-8法测定细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测细胞中相关蛋白表达水平。结果:与Control组比较,HG组MPC5细胞中KLF4 mRNA和蛋白表达量降低,细胞增殖活性降低,细胞凋亡率升高,细胞中突触足蛋白(synaptopodin)、足蛋白(podocin)、肾蛋白(nephrin)、微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、Beclin1蛋白表达量降低,P62蛋白表达量、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)/mTOR和磷酸化核糖体40S小亚基S6蛋白激酶(p-P70S6K)/P70S6K比值升高;差异均有统计学意义(P<0.05)。与HG组比较,HG+KLF4组MPC5细胞中KLF4 mRNA和蛋白表达量升高,细胞增殖活性升高,细胞凋亡率降低,细胞中synaptopodin、podocin、nephrin、LC3-Ⅱ、Beclin1蛋白表达量升高,P62蛋白表达量、p-mTOR/mTOR和p-P70S6K/P70S6K比值降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:KLF4通过激活足细胞自噬减轻高糖诱导的足细胞损伤,其作用机制可能与调控mTOR/P70S6K信号通路有关。 展开更多
关键词 KLF4 足细胞 自噬 增殖 凋亡 mTOR/P70S6K信号通路
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鼻咽癌组织SNHG15和LINC00261的表达及其临床意义
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作者 曲莉 尹昕 +2 位作者 张蕊 杨妍 裴明阳 《解剖学杂志》 CAS 2024年第4期333-338,共6页
目的:探讨鼻咽癌中小核仁RNA宿主基因15(SNHG15)和LINC00261的表达水平及其临床意义。方法:收集2018年1月至2020年2月本院93例行鼻咽癌根治性切除术患者的鼻咽癌组织和癌旁组织样本以及临床资料;培养鼻咽癌CNE-1细胞和正常鼻咽部上皮NP6... 目的:探讨鼻咽癌中小核仁RNA宿主基因15(SNHG15)和LINC00261的表达水平及其临床意义。方法:收集2018年1月至2020年2月本院93例行鼻咽癌根治性切除术患者的鼻咽癌组织和癌旁组织样本以及临床资料;培养鼻咽癌CNE-1细胞和正常鼻咽部上皮NP69细胞,分为空白对照组、shRNA-NC组(转染SNHG15对照)、SNHG15-shRNA组(转染SNHG15)、pcDNA-NC组(转染LINC00261对照)、LINC00261-pcDNA组(转染LINC00261);采用RT-qPCR检测SNHG15和LINC00261表达水平;采用CCK-8和克隆形成实验检测各组细胞的增殖情况;采用Pearson法分析组织中SNHG15和LINC00261表达水平的相关性;采用Kaplan-Meier法分析鼻咽癌组织SNHG15和LINC00261表达水平与患者预后的关系;采用多因素Cox回归分析影响鼻咽癌患者预后的相关因素。结果:鼻咽癌组织中SNHG15表达水平高于癌旁组织,LINC00261表达水平则低于癌旁组织;鼻咽癌组织中SNHG15和LINC00261表达水平呈负相关。CNE-1细胞中SNHG15表达水平高于NP69细胞,LINC00261表达水平则低于NP69细胞;SNHG15-shRNA组和LINC00261-pcDNA组CNE-1细胞克隆形成数量均低于空白对照组、shRNA-NC组及pcDNA-NC组,细胞增殖能力降低。不同SNHG15和LINC00261表达水平的鼻咽癌患者年龄、肿瘤直径及组织学类型差异无统计学意义,而SNHG15高表达组及LINC00261低表达组发生淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期的患者所占比例显著高于SNHG15低表达组及LINC00261高表达组;SNHG15低表达患者3年生存率(84.78%)显著高于SNHG15高表达患者(65.95%),LINC00261低表达患者3年生存率(63.04%)显著低于LINC00261高表达患者(87.23%)。结论:鼻咽癌组织中SNHG15和LINC00261表达与患者临床病理特征及预后密切相关,淋巴结转移、TNM分期及SNHG15是鼻咽癌患者死亡的危险因素,而LINC00261是鼻咽癌患者死亡的保护因素。 展开更多
关键词 鼻咽癌 长链非编码RNA 小核仁RNA宿主基因15 LINC00261 临床病理特征 预后
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KLF10对微动促进成骨细胞增殖、分化的作用及机制
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作者 刘亚云 刘小丰 +4 位作者 张瑾 彭春光 黄祖泰 丁凌华 冷元曦 《江西医药》 CAS 2024年第4期363-366,403,共5页
目的 本研究探讨锌指蛋白转录因子10(KLF10)在微动对成骨细胞的作用及其机制。方法 利用小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1细胞,经静态或机械力作用培养,通过QPCR和Western blotting检测细胞KLF10的mRNA的表达及蛋白水平;为了建立稳转敲... 目的 本研究探讨锌指蛋白转录因子10(KLF10)在微动对成骨细胞的作用及其机制。方法 利用小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1细胞,经静态或机械力作用培养,通过QPCR和Western blotting检测细胞KLF10的mRNA的表达及蛋白水平;为了建立稳转敲低KLF10细胞系,将对照组及两个KLF10敲低组转入MC3T3-E1细胞内,应用Western blotting检测敲低效率;分成静态培养组、KLF10敲低静态组、机械力组、机械力+KLF10敲低组,通过CCK8、流式细胞仪检测各组细胞增殖和凋亡情况;Western blotting检测各组细胞内骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OCN)及Runt相关转录因子2(Runx-2)蛋白表达情况。结果 与静态培养相比,在机械力作用下,MC3T3-E1细胞中KLF10 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05);与对照组相比,两个敲低组(siRNA KLF10-1,siRNA KLF10-2)KLF10的蛋白表达降低,其中一个siRNA KLF10-2效果明显(P<0.01);与静态组比较,siRNA KLF10-2静态培养组细胞的增殖水平非常显著降低(P<0.001);机械力组细胞的增殖水平升高(P<0.05);机械力+siRNA KLF10-2组细胞的增殖水平显著降低(P<0.01);与静态组比较,siRNA KLF10-2静态培养细胞的凋亡非常显著增多(P<0.001);机械力组细胞的凋亡降低(P<0.05);机械力+siRNA KLF10-2组细胞的凋亡显著增多(P<0.01);与静态组比较,siRNA KLF10-2静态培养组细胞的OPN、OCN、RUNX-2的蛋白表达非常显著降低(P<0.001);机械力组细胞的OPN、OCN、RUNX-2的蛋白表达升高(P<0.05);机械力+siRNA KLF10-2组细胞的OPN、OCN、RUNX-2的蛋白表达降低(P<0.01)。结论KLF10在微动促进成骨细胞增殖、分化的过程中起着重要作用。 展开更多
关键词 蛋白转录因子10 微动 成骨细胞增值及分化
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贵阳地区血小板捐献者HPA-1~6/10/15/21和HLA-A/B基因多态性研究
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作者 王军 侯仕芳 +4 位作者 王娇 雷雨 余娜杰 赵霞 朱思刚 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第5期686-690,共5页
目的研究贵阳地区机采血小板捐献者人类血小板抗原HPA-1~6/10/15/21及人类白细胞抗原HLA-A、B基因分布及多态性。方法采用实时荧光定量PCR法(qPCR)对287名贵阳地区机采血小板捐献者进行HPA-1~6/10/15/21和HLA-A、B基因分型,列举aa\ab\b... 目的研究贵阳地区机采血小板捐献者人类血小板抗原HPA-1~6/10/15/21及人类白细胞抗原HLA-A、B基因分布及多态性。方法采用实时荧光定量PCR法(qPCR)对287名贵阳地区机采血小板捐献者进行HPA-1~6/10/15/21和HLA-A、B基因分型,列举aa\ab\bb基因及HLA-A、B等位基因的分布情况、计算aa\ab\bb基因及HLA-A、B等位基因型频率。结果287名血小板捐献者HPA-1~6/10/15/21系统中,HPA-4和HPA-10的基因型均为aa型,不具有多态性;HPA-1,2,5,6和21主要以aa型为主;仅在HPA-3和HPA-15中检出bb型;杂合度最高的是HPA-15,HPA3杂合度居次;HLA-A位点检出14个等位基因,频率最高的3个是A*02(0.36)、A*11(0.33)和A*24(0.162;HLA-B位点检出23个等位基因,频率最高的4个是B*46(0.19)、B*15(0.149、B*40(0.14)和B*13(0.13)。结论贵阳地区机采血小板捐献者HPA-1~6/10/15/21和HLA-A、B基因存在多态性,需建立该地HPA/HLA基因分型血小板供者库服务于临床。 展开更多
关键词 血小板 人类血小板抗原 人类白细胞抗原 HPA/HLA基因 多态性 基因频率
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水苏碱调节YAP/TAZ信号通路对膀胱癌细胞恶性生物学特征的影响
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作者 袁俊峰 林波 +1 位作者 陈侃 王书龙 《解剖学杂志》 CAS 2024年第4期308-313,共6页
目的:探讨水苏碱(STA)通过调节Yes相关蛋白(YAP)/具有PDZ结合基序的转录辅激活因子(TAZ)信号通路对膀胱癌细胞恶性生物学行为和糖酵解的影响。方法:以膀胱癌T24细胞为研究对象,将T24细胞分为对照组(不加药物处理),STA低(STA-L)、中(STA... 目的:探讨水苏碱(STA)通过调节Yes相关蛋白(YAP)/具有PDZ结合基序的转录辅激活因子(TAZ)信号通路对膀胱癌细胞恶性生物学行为和糖酵解的影响。方法:以膀胱癌T24细胞为研究对象,将T24细胞分为对照组(不加药物处理),STA低(STA-L)、中(STA-M)、高剂量(STA-H)组,YAP/TAZ信号通路激活剂(GA-017)组和GA-017+STA-H组。CCK-8法检测细胞增殖活性;克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;Transwell实验测定细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡;利用试剂盒检测影响糖酵解的因子水平(ATP、乳酸生成量、葡萄糖消耗量);免疫印迹检测caspase-3、Bcl-2、MMP-9、YAP、TAZ蛋白表达。结果:与对照组比较,STA各组及GA-017+STA-H组T24细胞的增殖活性、克隆形成率、侵袭数目、MMP-9蛋白表达、Bcl-2蛋白表达、ATP水平、乳酸生成量、葡萄糖消耗量显著下降,细胞凋亡率及caspase-3表达显著上升,STA-M、STA-H组及GA-017+STA-H的YAP、TAZ蛋白表达下降,差异具有统计学意义;GA-017组上述指标与STA-H组呈现相反的变化趋势;与STA-H组比较,GA-017+STA-H组可在一定程度逆转STA对于T24细胞恶性生物学和糖酵解行为的抑制作用。结论:STA可通过抑制YAP/TAZ信号通路表达,从而抑制膀胱癌细胞T24的增殖、侵袭、糖酵解,促进T24细胞凋亡。 展开更多
关键词 水苏碱 膀胱癌 增殖 侵袭 糖酵解 YAP/TAZ信号通路
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外源性胆红素对大鼠脑缺血再灌注损伤的预防作用及其机制
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作者 李丹 斯依提·阿木提 +2 位作者 恰合班·恩特马合 刘艳梅 孟新玲 《解剖学杂志》 CAS 2024年第3期240-243,F0002,共5页
目的:研究外源性胆红素对脑缺血再灌注损伤(I/R)的作用及其对凋亡的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组(I/R组)、5 mg/kg胆红素组(I/R+5 mg组)、10 mg/kg胆红素组(I/R+10 mg组)和15 mg/kg胆红素组(I/R+15 mg组),造模前连续给药7... 目的:研究外源性胆红素对脑缺血再灌注损伤(I/R)的作用及其对凋亡的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组(I/R组)、5 mg/kg胆红素组(I/R+5 mg组)、10 mg/kg胆红素组(I/R+10 mg组)和15 mg/kg胆红素组(I/R+15 mg组),造模前连续给药7 d,采用线栓法建立大鼠脑I/R模型。造模24 h后取材,氯化三苯基四氮唑染色测定脑梗死面积,H-E染色观察大鼠脑梗死区域病理改变,TUNEL染色检测大鼠脑组织凋亡细胞,免疫荧光组织化学检测大鼠脑p-caspase 3水平。结果:与I/R组相比,I/R+10 mg组脑梗死面积显著降低;与I/R组相比,I/R+5 mg组和I/R+10 mg组脑组织形态较为正常;与I/R组相比,I/R+10 mg组脑组织TUNEL阳性细胞数量显著减少,I/R+5 mg组、I/R+10 mg组和I/R+15 mg组脑组织p-caspase 3阳性细胞数量显著减少。结论:外源性胆红素在一定剂量范围内对大鼠脑缺血再灌注损伤有预防作用,其保护机制与抑制凋亡有关。 展开更多
关键词 缺血再灌注损伤 外源性胆红素 凋亡 大鼠
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Smac多肽对食管鳞状细胞癌耐药性调节机制的研究
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作者 杨勇伟 艾力江·多力坤 金澄宇 《广东医学》 CAS 2024年第4期425-432,共8页
目的探究Smac多肽(Smac-N7)对食管癌鳞状细胞系Eca-109和紫杉醇(PTX)耐药株(Eca-109/PTX)耐药性的影响和作用机制。方法采用小剂量间歇诱导法建立Eca-109/PTX细胞株,CCK-8法检测PTX对Eca-109和Eca-109/PTX的半数抑制浓度(IC_(50))。使用... 目的探究Smac多肽(Smac-N7)对食管癌鳞状细胞系Eca-109和紫杉醇(PTX)耐药株(Eca-109/PTX)耐药性的影响和作用机制。方法采用小剂量间歇诱导法建立Eca-109/PTX细胞株,CCK-8法检测PTX对Eca-109和Eca-109/PTX的半数抑制浓度(IC_(50))。使用PTX和Smac-N7分别或联合处理Eca-109或Eca-109/PTX细胞,并将细胞分为:Eca-109组、Eca-109+PTX组、Eca-109+Smac-N7组、Eca-109+PTX+Smac-N7组;Eca-109/PTX组、Eca-109/PTX+PTX组、Eca-109/PTX+Smac-N7组、Eca-109/PTX+PTX+Smac-N7组。采用流式细胞术、试剂盒和Western blot法分别检测各组Eca-109和Eca-109/PTX细胞的凋亡率和细胞中caspase-3活性与Bcl-2、Bax蛋白的表达水平。结果CCK-8法检测结果显示,随浓度的增加,PTX对Eca-109与Eca-109/PTX的生长抑制率均明显增加(P<0.05),且PTX对Eca-109的IC_(50)[(0.08±0.01)μg/mL]显著低于其对Eca-109/PTX的IC_(50)[(2.47±0.11μg/mL)](P<0.01)。与Eca-109组或Eca-109/PTX组相比,Eca-109+PTX组、Eca-109+PTX+Smac-N7组和Eca-109/PTX+Smac-N7组、Eca-109/PTX+PTX+Smac-N7组细胞中Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),但细胞凋亡率、细胞中caspase-3活性和Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与Eca-109+PTX组或Eca-109/PTX+PTX组相比,Eca-109+PTX+Smac-N7组和Eca-109/PTX+PTX+Smac-N7组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),而细胞凋亡率、细胞中caspase-3活性和Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论Smac-N7可在体外通过促进细胞凋亡来改善Eca-109细胞及其耐药株对PTX的敏感度。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 Smac多肽 耐药性
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莫诺苷抑制铁死亡保护MPP^(+)诱导的PC12细胞模型的机制研究
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作者 徐进 张怀亮 +2 位作者 杨东东 刘美君 李毛 《中医研究》 2024年第6期75-82,共8页
目的:通过体外实验观察莫诺苷对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP^(+))诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(pheochromocytoma cells,PC)12模型的保护作用,阐释其通过激活核因子E-2相关因子2(nuclear factor erythroi... 目的:通过体外实验观察莫诺苷对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP^(+))诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(pheochromocytoma cells,PC)12模型的保护作用,阐释其通过激活核因子E-2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/抗氧化反应原件(antioxidant response element,ARE)通路抑制铁死亡的作用机制。方法:将细胞分为空白对照组、模型组(1 mmol/L MPP^(+))、莫诺苷组(5μmol/L莫诺苷+1 mmol/L MPP^(+))、ML385(Nrf2抑制剂)组(1 mmol/L MPP^(+)+2μmol/L ML385)、莫诺苷+ML385组(5μmol/L莫诺苷+1 mmol/L MPP^(+)+2μmol/L ML385)。CCK-8法检测细胞活力,透射电镜观察细胞超微结构,流式细胞术检测活性氧簇(reactive oxygen species,ROS),酶联免疫吸附法检测铁(ferrum,Fe)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平,Western Blot法检测Nrf2、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)、铁蛋白重链1(ferritin heavy chain 1,FTH1)、膜铁转运蛋白1(ferroportin 1,FPN1)、酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应检测SLC7A11、GPX4 mRNA表达。结果:在1 mmol/L MPP^(+)作用PC12细胞24 h后,细胞活性降低为空白对照组的52.75%,5μmol/L的莫诺苷处理细胞时保护作用最强。透射电镜下见MPP^(+)模型组线粒体大量固缩,嵴间缝隙增宽,膜密度明显增高;与空白对照组相比,模型组Fe、MDA、ROS含量明显增多,Nrf2、HO-1、SLC7A11、GPX4、FTH1、FPN1蛋白表达降低,SLC7A11、GPX4 mRNA及GSH水平降低。莫诺苷能改善MPP^(+)诱导的PC12细胞模型铁死亡的形态变化,促进Nrf2、HO-1、SLC7A11、GPX4、FTH1、FPN1蛋白表达,促进SLC7A11、GPX4 mRNA表达,升高GSH水平,降低Fe、ROS、MDA水平。而这一作用可以被Nrf2抑制剂ML385减弱。结论:莫诺苷在MPP^(+)诱导的PC12细胞帕金森病体外模型中起到神经元保护作用,可能与激活Nrf2/ARE信号通路抑制铁死亡有关。 展开更多
关键词 莫诺苷 铁死亡 Nrf2/ARE通路
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机械刺激通过诱导自噬与初级纤毛的相互作用增强骨细胞活性的研究
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作者 谭磊 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第S01期17-17,共1页
目的机械刺激在骨稳态中起着至关重要的作用,但其如何影响骨细胞的潜在机制仍不清楚。前期研究表明,初级纤毛在低幅度高频振动(LMHFV)诱导的成骨过程中作为机械传感器,伴随着初级纤毛的形态变化。自噬是维持细胞器更新和稳态的重要细胞... 目的机械刺激在骨稳态中起着至关重要的作用,但其如何影响骨细胞的潜在机制仍不清楚。前期研究表明,初级纤毛在低幅度高频振动(LMHFV)诱导的成骨过程中作为机械传感器,伴随着初级纤毛的形态变化。自噬是维持细胞器更新和稳态的重要细胞适应机制。假设LMHFV通过初级纤毛的影响,激活自噬,刺激骨细胞(Ot)的活力。方法和结果使用MLO-Y 4细胞,证明LMHFV诱导自噬,如通过增加的LC 3-II/LC 3-I比率和降低的p62水平以及转染细胞中的大量GFP-LC 3荧光点沿着所证明的。用3-甲基腺嘌呤(3 MA)抑制自噬逆转了LMHFV诱导的细胞活力(CCK-8检测)、Bcl-2表达的增加,以及细胞凋亡(TUNEL染色和流式细胞术分析)、Bax和caspase-3表达的减少,表明自噬参与了LMHFV的促细胞活力作用。沉默的IFFT 88,能够逆转LMHFV诱导的自噬和细胞活力。此外,3 MA阻断了LMHFV诱导的IFFT 88表达上调,并阻止了初级纤毛长度和具有初级纤毛的细胞比例的恢复。结论LMHFV诱导的自噬在增强Ot活力中的重要作用,并发现初级纤毛和自噬之间存在相互作用,以响应机械刺激。 展开更多
关键词 TUNEL染色 机械刺激 成骨过程 骨细胞 细胞活力 初级纤毛 自噬 高频振动
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DPP4^(+)肝细胞中MSR1对代谢的影响及其作用机制研究
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作者 张英 庞凯丹 王胜鹏 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第S01期570-570,共1页
目的肝脏内脂肪的异常积累不仅会损害肝脏功能,还会影响肝脏的力学特性。MSR1是一种机械敏感的受体,并参与多种生理过程,但是DPP4^(+)肝细胞中MSR1对代谢的影响尚不清楚。本研究旨在探究DPP4^(+)肝细胞中MSR1对代谢的调控及作用机制。方... 目的肝脏内脂肪的异常积累不仅会损害肝脏功能,还会影响肝脏的力学特性。MSR1是一种机械敏感的受体,并参与多种生理过程,但是DPP4^(+)肝细胞中MSR1对代谢的影响尚不清楚。本研究旨在探究DPP4^(+)肝细胞中MSR1对代谢的调控及作用机制。方法DPP4-cre ERT2、ROSA-GFP、MSR1-cre ERT2、ROSAGFP等示踪小鼠研究不同区肝细胞的大小,DPP4^(+)细胞和MSR1的分布。利用DPP4^(+)细胞特异性敲除MSR1的小鼠研究其在高脂饮食诱导的肥胖中的作用,高脂喂养后检测糖耐量(GTT),胰岛素耐量(ITT),观察脂肪量及脂肪细胞形态,肝脏脂质堆积情况等,并检测MSR1下游靶点的变化。结果高脂喂养后,2区的肝细胞体积最大,随着喂养时间延长,体积增大。小鼠示踪发现MSR1在肝脏2区高表达,DPP4主要标记肝脏2区的肝细胞,高脂喂养DPP4^(+)细胞特异性敲除MSR1的小鼠后,发现敲除MSR1后小鼠体重增加减少,GTT,ITT改善,脂肪量减少,脂肪细胞体积变小,同时肝脏脂质堆积减少,此外MSR1的缺失导致YAP/TAZ的入核减少,ctgf、lats,amotl2等m RNA的表达也下降。结论DPP4主要标记肝脏2区细胞,高脂喂养后肝脏2区肝细胞体积最大,激活MSR1。DPP4^(+)细胞特异性敲除MSR1后可改善肥胖等代谢性疾病的发生与发展,提示MSR1具有作为治疗肥胖等代谢性疾病靶点的潜力。 展开更多
关键词 脂肪量 高脂喂养 喂养时间 小鼠体重 肝细胞 代谢性疾病 肝脏脂质 肝脏功能
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circ_0114427靶向微小RNA-330-5p调控脂多糖诱导的肺泡上皮细胞凋亡及炎症反应
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作者 杨忠信 周冉 +4 位作者 黄智超 梅笑寒 李一锃 杨学峰 李晓宇 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第6期24-29,36,共7页
目的探讨circ_0114427对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞凋亡和炎症的影响及其机制。方法体外培养人肺泡上皮细胞,分别转染si-circ_0114427、微小RNA(miR)-330-5p mimics或共转染si-circ_0114427与anti-miR-330-5p后,用10 mg/L LPS处理2... 目的探讨circ_0114427对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞凋亡和炎症的影响及其机制。方法体外培养人肺泡上皮细胞,分别转染si-circ_0114427、微小RNA(miR)-330-5p mimics或共转染si-circ_0114427与anti-miR-330-5p后,用10 mg/L LPS处理24 h。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞中circ_0114427和miR-330-5p表达量;采用蛋白免疫印迹评估活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved-caspase3)和活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-9(Cleaved-caspase9)蛋白水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达;采用流式细胞术分析细胞凋亡。采用双荧光素酶报告实验验证circ_0114427和miR-330-5p的互作关系。结果肺泡上皮细胞经LPS处理后,细胞中circ_0114427表达升高,miR-330-5p表达降低(P<0.05)。敲减circ_0114427或上调miR-330-5p可以抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞凋亡、Cleaved-caspase3、Cleaved-caspase9表达以及IL-6和TNF-α水平(P<0.05)。circ_0114427靶向结合并负调控miR-330-5p。miR-330-5p下调可以逆转circ_0114427敲低对LPS诱导的细胞凋亡和炎症的抑制作用。结论敲减circ_0114427可抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞凋亡和炎症,这可能与miR-330-5p上调有关。 展开更多
关键词 肺泡上皮细胞 circ_0114427 微小RNA-330-5p 细胞凋亡 炎症
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NLRP3炎症小体的激活在骨关节疾病中的研究进展
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作者 张浩(综述) 段力军(审校) 《现代医药卫生》 2024年第19期3375-3380,共6页
炎症是对多种刺激的关键反应,细胞因子等炎症分子在包括骨和关节疾病在内的多种疾病的发病机制中发挥核心作用。促炎性细胞因子主要由免疫细胞产生,介导炎症和先天免疫反应。炎症小体是新近公认的先天免疫的重要参与者。最典型的是NOD... 炎症是对多种刺激的关键反应,细胞因子等炎症分子在包括骨和关节疾病在内的多种疾病的发病机制中发挥核心作用。促炎性细胞因子主要由免疫细胞产生,介导炎症和先天免疫反应。炎症小体是新近公认的先天免疫的重要参与者。最典型的是NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体,NLRP3检测外源性致病性侵袭和内源性细胞损伤,并通过形成NLRP3炎症小体做出反应。NLRP3炎症小体的3个主要成分是NLRP3(捕获危险信号并募集下游分子)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1[caspase-1,引起细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-18的成熟以介导细胞因子释放和焦亡]和含有半胱天冬酶募集结构域的细胞凋亡相关斑点样蛋白(ASC,是连接NLRP3和caspase-1的桥梁)。此外,促炎性细胞因子加速骨吸收和软骨破坏,导致骨和关节组织破坏。因此,促炎性细胞因子参与调节骨和关节疾病的发病机制。该文综述了近年来关于NLRP3炎症小体在骨关节疾病中激活和功能等方面的研究进展。 展开更多
关键词 白细胞介素-1 炎症小体 NOD样受体蛋白3 骨关节炎 骨质疏松 骨关节疾病 综述
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清肾颗粒对大鼠NRK-52E细胞转分化模型miR-23b和PINK1/Parkin通路的影响 被引量:1
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作者 金华 张叶青 +4 位作者 呼琴 张磊 陈诺 韩燕全 王亿平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期162-170,共9页
目的 探讨TGF-β1诱导大鼠NRK-52E细胞转分化模型中miR-23b对PINK1/Parkin通路的靶向调节机制,并阐明清肾颗粒含药血清对NRK-52E细胞转分化的干预机理。方法 采用超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱法对清肾颗粒进行全指纹图谱分析。构建TGF-... 目的 探讨TGF-β1诱导大鼠NRK-52E细胞转分化模型中miR-23b对PINK1/Parkin通路的靶向调节机制,并阐明清肾颗粒含药血清对NRK-52E细胞转分化的干预机理。方法 采用超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱法对清肾颗粒进行全指纹图谱分析。构建TGF-β1诱导大鼠NRK-52E细胞转分化模型,转染siRNA后分为模拟物空载对照组、miR-23b-5p模拟物组、抑制剂空载对照组、miR-23b-5p抑制剂组,观察miR-23b-5p对PINK1表达量的影响。再将NRK-52E细胞分组为正常组、TGF-β1组、清肾颗粒组、miR-23b-mimic-NC组、miR-23b-mimic组、miR-23b-mimic+清肾颗粒组,Western blot法检测NRK-52E细胞中Pink1、Parkin、LC3Ⅱ、Beclin-1、P62、α-SMA蛋白表达,RT-qPCR法检测NRK-52E细胞中miR-23b-5p、Pink1、Parkin、Beclin-1、α-SMA mRNA的表达,双荧光素酶报告基因实验检测miR-23b-5p与PINK1的靶向关系。结果 UPLC指纹图谱法鉴定出清肾颗粒中11个活性成分。miR-23b-5p过表达后,PINK1 mRNA表达量也显著增加(P<0.05);而miR-23b-5p表达沉默后,PINK1 mRNA表达量也显著减少(P<0.05)。双荧光素酶报告显示,Rno-miR-23b-5p能显著下调Rno-PINK1-WT荧光素酶活性(P<0.05),但未能下调突变Rno-PINK1-mut荧光素酶活性(P>0.05)。清肾颗粒含药血清干预实验发现,TGF-β1组的miR-23b-5p、Pink1、Parkin、Beclin-1、LC3Ⅱ表达及LC3Ⅱ/Ⅰ比值均明显低于正常组,P62和α-SMA表达明显高于正常组(P<0.05)。清肾颗粒组和miR-23b-mimic组的miR-23b-5p、Pink1、Parkin、Beclin-1、LC3Ⅱ表达及LC3Ⅱ/Ⅰ比值均明显高于TGF-β1组,P62和α-SMA表达明显低于TGF-β1组(P<0.05)。miR-23b-mimic+清肾颗粒组的表现更优于miR-23b-mimic组(P<0.05)。结论 清肾颗粒能够上调NRK-52E细胞内miR-23b-5p表达,并通过增强PINK1/Parkin通路介导的线粒体自噬活性,抑制NRK-52E细胞转分化进程。 展开更多
关键词 miR-23b-5p PINK1/Parkin信号通路 线粒体自噬 NRK-52E细胞 清肾颗粒 上皮细胞转分化
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