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低氧对炎性环境下髓核细胞凋亡的作用及机制
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作者 李磊 王一范 +2 位作者 施强慧 钟华建 曹佳实 《脊柱外科杂志》 2024年第1期37-45,共9页
目的探讨低氧对炎性环境下髓核细胞凋亡的影响及作用机制。方法体外培养大鼠原代髓核细胞,采用低氧小室进行低氧干预,采用促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激髓核细胞模拟炎性环境。通过流式细胞术及TUNEL染色检测髓核细胞凋亡情况,... 目的探讨低氧对炎性环境下髓核细胞凋亡的影响及作用机制。方法体外培养大鼠原代髓核细胞,采用低氧小室进行低氧干预,采用促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激髓核细胞模拟炎性环境。通过流式细胞术及TUNEL染色检测髓核细胞凋亡情况,通过蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白表达水平,明确低氧对髓核细胞凋亡的影响;随后通过荧光定量PCR及酶联免疫吸附试验评估炎性环境下髓核细胞内炎性反应情况,并通过蛋白质印迹法分析髓核细胞内NLRP3炎性小体激活水平;最后采用NLRP3炎性小体激动剂QS-21,通过回复实验明确NLRP3炎性小体在低氧调控髓核细胞凋亡中的作用。结果低氧对正常环境下髓核细胞凋亡无明显影响,但能抑制炎性环境下髓核细胞凋亡。在炎性环境下,髓核细胞炎性细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-8、IL-18的表达及分泌增加,细胞内NLRP3炎性小体激活,而低氧干预能缓解上述改变。回复实验表明,NLRP3炎性小体激动剂QS-21可削弱低氧对炎性环境下髓核细胞凋亡的抑制作用。结论低氧通过抑制NLRP3炎性小体激活缓解炎性环境下髓核细胞凋亡。 展开更多
关键词 细胞低氧 炎症 椎间盘退行性变 细胞凋亡 大鼠
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lncRNA ENST00000452996.1通过ERK/GSK-3β/β-catenin信号通路调控肝癌细胞增殖、迁移及侵袭
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作者 谢群 林丽彬 +2 位作者 郑伟男 徐丽 林扬元 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期679-687,共9页
目的研究一种新的长链非编码RNA ENST00000452996.1对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭等的影响及其调控机制。方法TCGA数据集分析肝癌组织ENST00000452996.1表达;构建ENST00000452996.1的shRNA载体,包装病毒感染Huh-7细胞(shENST00000452996.1... 目的研究一种新的长链非编码RNA ENST00000452996.1对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭等的影响及其调控机制。方法TCGA数据集分析肝癌组织ENST00000452996.1表达;构建ENST00000452996.1的shRNA载体,包装病毒感染Huh-7细胞(shENST00000452996.1组),CCK-8法、克隆形成法、流式细胞术、划痕法和Transwell小室法分别检测细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力;Western blot法检测shENST00000452996.1组、ERK激动剂EGF处理组和GSK-3β抑制剂TDZD-8处理组的ERK/GSK-3β/β-catenin信号分子的表达。结果TCGA分析发现,肝癌组织ENST00000452996.1表达水平明显高于癌旁组织,且与Edmondson-Steiner分级呈正相关,与总生存时间呈负相关;与对照组相比,shENST00000452996.1组细胞增殖、迁移及侵袭能力明显下降,凋亡能力明显增强,p-ERK1/2、p-GSK-3β^(Ser9)和β-catenin表达均下调,GSK-3β和p-β-catenin表达上调,核β-catenin表达下降;与shENST00000452996.1组相比,EGF处理组p-ERK1/2表达升高,EGF处理组和TDZD-8处理组p-GSK-3β^(Ser9)和β-catenin及核β-catenin表达均升高,GSK-3β和p-β-catenin表达均降低。结论干扰ENST00000452996.1表达抑制ERK1/2磷酸化,阻止GSK3β^(Ser9)磷酸化,导致β-catenin磷酸化,抑制β-catenin核转位,推断ENST00000452996.1通过ERK/GSK-3β/β-catenin信号通路增强肝癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,抑制细胞凋亡,从而发挥促进肝细胞癌的作用。 展开更多
关键词 长链非编码RNA ENST00000452996.1 肝细胞癌 增殖 侵袭 ERK GSK-3Β Β-CATENIN
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清肾颗粒对大鼠NRK-52E细胞转分化模型miR-23b和PINK1/Parkin通路的影响
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作者 金华 张叶青 +4 位作者 呼琴 张磊 陈诺 韩燕全 王亿平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期162-170,共9页
目的 探讨TGF-β1诱导大鼠NRK-52E细胞转分化模型中miR-23b对PINK1/Parkin通路的靶向调节机制,并阐明清肾颗粒含药血清对NRK-52E细胞转分化的干预机理。方法 采用超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱法对清肾颗粒进行全指纹图谱分析。构建TGF-... 目的 探讨TGF-β1诱导大鼠NRK-52E细胞转分化模型中miR-23b对PINK1/Parkin通路的靶向调节机制,并阐明清肾颗粒含药血清对NRK-52E细胞转分化的干预机理。方法 采用超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱法对清肾颗粒进行全指纹图谱分析。构建TGF-β1诱导大鼠NRK-52E细胞转分化模型,转染siRNA后分为模拟物空载对照组、miR-23b-5p模拟物组、抑制剂空载对照组、miR-23b-5p抑制剂组,观察miR-23b-5p对PINK1表达量的影响。再将NRK-52E细胞分组为正常组、TGF-β1组、清肾颗粒组、miR-23b-mimic-NC组、miR-23b-mimic组、miR-23b-mimic+清肾颗粒组,Western blot法检测NRK-52E细胞中Pink1、Parkin、LC3Ⅱ、Beclin-1、P62、α-SMA蛋白表达,RT-qPCR法检测NRK-52E细胞中miR-23b-5p、Pink1、Parkin、Beclin-1、α-SMA mRNA的表达,双荧光素酶报告基因实验检测miR-23b-5p与PINK1的靶向关系。结果 UPLC指纹图谱法鉴定出清肾颗粒中11个活性成分。miR-23b-5p过表达后,PINK1 mRNA表达量也显著增加(P<0.05);而miR-23b-5p表达沉默后,PINK1 mRNA表达量也显著减少(P<0.05)。双荧光素酶报告显示,Rno-miR-23b-5p能显著下调Rno-PINK1-WT荧光素酶活性(P<0.05),但未能下调突变Rno-PINK1-mut荧光素酶活性(P>0.05)。清肾颗粒含药血清干预实验发现,TGF-β1组的miR-23b-5p、Pink1、Parkin、Beclin-1、LC3Ⅱ表达及LC3Ⅱ/Ⅰ比值均明显低于正常组,P62和α-SMA表达明显高于正常组(P<0.05)。清肾颗粒组和miR-23b-mimic组的miR-23b-5p、Pink1、Parkin、Beclin-1、LC3Ⅱ表达及LC3Ⅱ/Ⅰ比值均明显高于TGF-β1组,P62和α-SMA表达明显低于TGF-β1组(P<0.05)。miR-23b-mimic+清肾颗粒组的表现更优于miR-23b-mimic组(P<0.05)。结论 清肾颗粒能够上调NRK-52E细胞内miR-23b-5p表达,并通过增强PINK1/Parkin通路介导的线粒体自噬活性,抑制NRK-52E细胞转分化进程。 展开更多
关键词 miR-23b-5p PINK1/Parkin信号通路 线粒体自噬 NRK-52E细胞 清肾颗粒 上皮细胞转分化
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LncRNA p21调控Hippo-YAP信号通路对小鼠腹主动脉瘤形成的影响及机制
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作者 陈啸 王晋军 +3 位作者 张林林 郭莲莲 张中旺 张娟子 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期55-62,共8页
目的 探究长链非编码RNA p21(long non-coding RNA,LncRNA p21)调控Hippo-Yes相关蛋白(Hippo-Yes-associated protein, Hippo-YAP)信号通路对小鼠腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm, AAA)形成的影响。方法 C57BL/6 ApoE-/-通过皮下... 目的 探究长链非编码RNA p21(long non-coding RNA,LncRNA p21)调控Hippo-Yes相关蛋白(Hippo-Yes-associated protein, Hippo-YAP)信号通路对小鼠腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm, AAA)形成的影响。方法 C57BL/6 ApoE-/-通过皮下植入渗透性微泵构建血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导小鼠AAA模型。将C57BL/6 ApoE-/-随机分为假手术组(sham)、模型组(model)、LncRNA p21阴性对照组(sh-NC)、LncRNA p21敲低组(sh-LncRNA p21)。HE和血管弹力纤维染色(VVG)观察血管形态变化;qRT-PCR检测LncRNA p21表达;Western blot检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1表达;原位末端标记法(TUNEL)染色检测平滑肌细胞凋亡;Western blot检测caspase-3、cyclinD1及Hippo-YAP信号通路蛋白表达。结果 与sham组相比,model组小鼠血管弹力纤维断裂紊乱,出现明显损伤,且LncRNA p21、MMP-2、MMP-9、caspase-3表达和细胞凋亡率均增加(P<0.01),TIMP-1、cyclinD1和YAP、TAZ表达均降低(P<0.01)。与model组相比,sh-LncRNA p21组小鼠血管弹力纤维断裂及损伤程度减轻,LncRNA p21、MMP-2、MMP-9、caspase-3表达和细胞凋亡率均降低(P<0.01),TIMP-1、cyclinD1和YAP、TAZ表达均增加(P<0.01)。结论 LncRNA p21能够促进小鼠AAA形成,其机制与调控Hippo-YAP信号、促进细胞凋亡、抑制细胞增殖相关。 展开更多
关键词 腹主动脉瘤 长链非编码RNA p21 Hippo-Yes相关蛋白通路 凋亡 增殖 小鼠
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miR-141-5p/ZNF705A对慢性粒细胞白血病细胞源外泌体调控骨髓间充质干细胞黏附作用的机制
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作者 鲍静 许晗 +3 位作者 汪万杰 许婷婷 戴霁菲 夏瑞祥 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期506-514,共9页
目的探讨慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)细胞源外泌体(exosome,Exo)中miR-141-5p/ZNF705A对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)黏附作用的影响。方法电镜和NTA粒径分析检测CML患者外周血和K... 目的探讨慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)细胞源外泌体(exosome,Exo)中miR-141-5p/ZNF705A对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)黏附作用的影响。方法电镜和NTA粒径分析检测CML患者外周血和K562细胞中的Exo形态大小;qRT-PCR和Western blot检测转染前后K562细胞的Exo、BMSCs标记分子及黏附蛋白的表达情况;细胞黏附实验检测BMSCs的黏附能力;CCK-8法检测BMSCs活性、萤光素酶实验检测miR-141-5p与ZNF705A结合情况等。结果qRT-PCR结果显示,miR-141-5p表达在CML患者和K562细胞源Exo中均明显降低;qRT-PCR和Western blot等结果表明,CML患者中BMSCs的黏附蛋白CD44和CXCL12表达明显降低,且能够吞噬K562细胞源Exo。进一步发现,与CD34^(+)细胞相比,K562源性Exo能够降低Exo促进的BMSCs中CD44和CXCL12表达和黏附作用;同时,双萤光素酶基因报告等验证miR-141-5p与ZNF705A靶向结合;最后发现通过上调K562细胞源Exo中miR-141-5p的表达,靶向抑制ZNF705A,进而促进BMSCs的活性和黏附功能。结论K562细胞下调Exo中miR-141-5p表达,减少对ZNF705A的靶向抑制,进而抑制BMSCs的黏附功能,从而调控CML患者的骨髓造血功能。 展开更多
关键词 miRNA-141-5p K562细胞 骨髓间充质干细胞 ZNF705A 外泌体 慢性粒细胞白血病
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槲皮素通过雌激素受体下调长非编码RNA MALAT-1并发挥抗乳腺癌的作用机制
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作者 赵梓亦 熊小明 +2 位作者 谢雨鹏 张义文 张翠薇 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期499-505,共7页
目的探索槲皮素抑制乳腺癌细胞恶性生物学行为的分子机制。方法以乳腺癌细胞系MCF-7和MB231作为研究对象,用慢病毒LV-ERα、LV-MALAT-1转染乳腺癌MB231细胞和MCF7细胞,RT-qPCR检测MALAT-1表达,Western blot检测肿瘤细胞中ERα蛋白表达,C... 目的探索槲皮素抑制乳腺癌细胞恶性生物学行为的分子机制。方法以乳腺癌细胞系MCF-7和MB231作为研究对象,用慢病毒LV-ERα、LV-MALAT-1转染乳腺癌MB231细胞和MCF7细胞,RT-qPCR检测MALAT-1表达,Western blot检测肿瘤细胞中ERα蛋白表达,CCK-8细胞实验、平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,PI染色法检测细胞周期,通过mRFP-GFP-LC3荧光双标腺病毒转染检测自噬水平,观察槲皮素和雌二醇对乳腺癌细胞增殖能力的影响。结果17β-雌二醇(E2)可以促进乳腺癌细胞MCF-7的增殖,而5μmol·L^(-1)槲皮素可以明显逆转E2对增殖的促进作用(P<0.05)。槲皮素对不表达雌激素受体α(estrogen receptor-α,ERα)的乳腺癌细胞MB231不表现抑制作用;而过表达ERα后,槲皮素则抑制了E2对MB231-ERα的促进作用。同时槲皮素可以抑制E2激活的MALAT-1表达;并且其抑制作用被过表达MALAT-1所逆转,包括细胞增殖,细胞周期进展以及克隆形成能力。结论槲皮素依赖于ERα的表达对乳腺癌的增殖等恶性行为起抑制作用,并且很可能是通过抑制MALAT-1的表达来发挥作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 槲皮素 17Β-雌二醇 雌激素受体 MALAT-1 细胞增殖
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桃红四物汤对大脑中动脉闭塞大鼠环状RNA表达谱的影响
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作者 费长义 张丽娟 +6 位作者 王倪 褚福瑞 余超 薛苏君 潘凌宇 彭代银 段贤春 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期954-963,共10页
目的筛选和研究桃红四物汤(Taohong Siwu Decoction,THSWD)对大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠环状RNA(circular RNA,circRNA)表达的影响,探讨THSWD的可能作用及分子机制。方法采用下一代RNA测序技术检测THSW... 目的筛选和研究桃红四物汤(Taohong Siwu Decoction,THSWD)对大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠环状RNA(circular RNA,circRNA)表达的影响,探讨THSWD的可能作用及分子机制。方法采用下一代RNA测序技术检测THSWD治疗后MCAO大鼠circRNA表达谱,并与MCAO模型组和对照组进行比较。生物信息学分析预测潜在的靶向微小RNA(micro RNA,miRNA)和mRNAs。应用GO富集分析和KEGG通路富集分析方法分析差异表达的circRNAs的潜在作用。对表达差异显著的circRNA进行RT-qPCR验证。结果MCAO组与对照组之间存在87个差异表达的circRNA,MCAO组与THSWD组之间存在86个差异表达的circRNA。其中,THSWD可逆转MCAO模型诱导的17个circRNAs。为了证明DECs靶向的mRNAs的作用,使用了GO和KEGG数据库。进一步分析表明,5个表达差异显著circRNAs表达量与测序结果相似。结论首次确定了THSWD治疗后MCAO大鼠circRNAs的全面表达谱,提示THSWD对MCAO的治疗作用可能是通过调节circRNAs的表达实现的。 展开更多
关键词 桃红四物汤 大脑中动脉闭塞 环状RNA 生物信息学 下一代RNA测序 缺血性卒中
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桃红四物汤对大脑中动脉闭塞大鼠lncRNA表达的影响
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作者 张丽娟 费长义 +6 位作者 余超 薛苏君 李雨朦 李静静 潘凌宇 段贤春 彭代银 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期582-591,共10页
目的研究中药复方桃红四物汤(Tao Hong Si Wu decoction,THSWD)治疗大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)的表达,并确定THSWD治疗MCAO大鼠可能的分子机制。方法从对照... 目的研究中药复方桃红四物汤(Tao Hong Si Wu decoction,THSWD)治疗大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)的表达,并确定THSWD治疗MCAO大鼠可能的分子机制。方法从对照组、MCAO组和MCAO+THSWD组各获得3个大脑半球组织。采用RNA测序技术鉴定三组中的lncRNA基因表达。鉴定了THSWD调节的lncRNA基因,然后构建了THSWD调节的lncRNA-mRNA网络。通过MCODE插件鉴定lncRNA-mRNA网络的模块。基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书数据库(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)用于分析富集的生物功能和信号通路。鉴定了THSWD调节的lncRNA的顺式和反式调控基因。采用逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)验证lncRNA。分子对接用于验证lncRNA-mRNA网络靶点和通路相关蛋白结合能力。结果在MCAO大鼠中,THSWD共调节了302个lncRNA。生物信息学分析表明,一些核心lncRNA可能在THSWD治疗MCAO大鼠中发挥重要作用,此外,我们进一步发现THSWD可能也通过lncRNA-mRNA网络以及网络富集的补体和凝血级联反应等多通路治疗MCAO大鼠。分子对接结果表明,THSWD活性化合物没食子酸和苦杏仁苷与蛋白质靶点具有一定的结合能力。结论THSWD可以通过调节lncRNA保护MCAO大鼠脑损伤,为THSWD治疗缺血性中风提供了新见解。 展开更多
关键词 桃红四物汤 大脑中动脉闭塞 长链非编码RNA lncRNA-mRNA网络 生物信息学 分子对接
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黄连素下调NRAV和PI3K/AKT通路减轻RSV感染致HEp-2细胞的损伤
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作者 崔玉娟 赵辉 +2 位作者 苏东霞 张莹 胡丹东 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期747-755,共9页
目的探讨长链非编码RNA NRAV(LncRNA NRAV)和PI3K/AKT通路在黄连素(berberine,BE)减轻RSV感染致HEp-2细胞损伤中的机制。方法将HEp-2细胞感染RSV,并用BE、PI3K激活剂740Y-P处理或过表达NRAV。qRT-PCR检测NRAV、RSV-F、NS2表达水平;CCK-... 目的探讨长链非编码RNA NRAV(LncRNA NRAV)和PI3K/AKT通路在黄连素(berberine,BE)减轻RSV感染致HEp-2细胞损伤中的机制。方法将HEp-2细胞感染RSV,并用BE、PI3K激活剂740Y-P处理或过表达NRAV。qRT-PCR检测NRAV、RSV-F、NS2表达水平;CCK-8实验检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞的凋亡率和线粒体膜电位;ATP检测试剂盒检测ATP水平;Western blot检测细胞PI3K、AKT、PINK1、Parkin、Beclin1、p62、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、BNIP3、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达;MitoSOX染色检测细胞线粒体ROS(mtROS);ELISA检测细胞IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α分泌水平。结果过表达NARV细胞凋亡率、RSV活性增加,敲低后结果相反;BE能显著抑制NRAV和PI3K/AKT通路(P<0.05),改善线粒体功能、诱导线粒体自噬,提高细胞的活性、降低凋亡率(P<0.05),并降低NLRP3炎性小体活化水平和IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平(P<0.05)。过表达NRAV或740Y-P处理可逆转BE对RSV感染HEp-2细胞的改善作用。结论BE能够减轻RSV感染所致HEp-2细胞损伤,其机制可能与BE下调NRAV和PI3K/AKT通路,诱导线粒体自噬,进而减轻线粒体损伤和炎症反应有关。 展开更多
关键词 黄连素 RSV LncRNA NRAV PI3K/AKT通路 线粒体损伤 HEp-2细胞损伤
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LINC00657对结直肠癌细胞恶性行为影响及机制
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作者 张生军 赵阿静 +3 位作者 张安瑞 李雅微 李小宝 刘敏丽 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2023年第6期860-866,共7页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC00657通过调控miR-26b及其靶基因黏膜相关组织淋巴瘤异位基因1(MALT1)对结直肠癌(CRC)细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常肠上皮细胞(NCM460)、CRC细胞系(HT29、... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC00657通过调控miR-26b及其靶基因黏膜相关组织淋巴瘤异位基因1(MALT1)对结直肠癌(CRC)细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常肠上皮细胞(NCM460)、CRC细胞系(HT29、HCT116和SW620)中LINC00657的表达水平。对HT29细胞转染shRNA-LINC00657或shRNA-CON,分析沉默LINC00657对癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。用双荧光素酶报告基因验证LINC00657、miR-26b和MALT1的靶向作用关系。对HT29细胞分别仅转染shRNA-LINC00657、同时转染shRNA-LINC00657+miR-26b inhibitor、同时转染shRNA-LINC00657+pcDNA-MALT1,分析LINC00657通过miR-26b/MALT1轴对细胞增殖、侵袭和迁移的影响。采用CCK-8法检测细胞增殖能力,通过Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力。应用RT-PCR检测MALT1 mRNA表达水平,Western blot检测MALT1蛋白的表达水平。结果CRC细胞系(HT29、HCT116和SW620)的LINC00657表达水平均高于正常肠上皮细胞(NCM460),差异有统计学意义(F=30.267,P<0.05)。沉默LINC00657可以抑制HT29细胞的增殖、侵袭和迁移(t=9.123~18.456,P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测证实,LINC00657靶向作用于miR-26b并下调其表达,miR-26b可负调控MALT1的表达。沉默LINC00657表达可抑制HT29细胞中MALT1 mRNA和蛋白的表达水平(F=15.893、17.231,P<0.05)。转染shRNA-LINC00657+miR-26b-inhibitor或shRNA-LINC00657+MALT1过表达载体以后,MALT1 mRNA和蛋白的表达水平较仅转染shRNA-LINC00657明显上调(F=15.893、17.231,P<0.05),细胞增殖、侵袭和迁移能力也升高(F=4.783~8.893,P<0.05)。结论LINC00657在CRC细胞中高表达,可通过调控miR-26b/MALT1轴促进癌细胞增殖、侵袭以及迁移。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 RNA 长链非编码 黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤易位1蛋白 细胞增殖 肿瘤浸润
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成纤维细胞生长因子2在椎间盘退行性变中的作用及机制
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作者 李磊 王一范 +1 位作者 施强慧 钟华建 《脊柱外科杂志》 2023年第6期403-410,共8页
目的探讨成纤维细胞生长因子2(FGF2)在椎间盘退行性变(IDD)中的作用及调控机制。方法收集青年(6月龄)小鼠正常椎间盘及老年(24月龄)小鼠发生退行性变的椎间盘组织,通过免疫组织化学染色和蛋白质印迹法检测FGF2在IDD中的表达变化。培养... 目的探讨成纤维细胞生长因子2(FGF2)在椎间盘退行性变(IDD)中的作用及调控机制。方法收集青年(6月龄)小鼠正常椎间盘及老年(24月龄)小鼠发生退行性变的椎间盘组织,通过免疫组织化学染色和蛋白质印迹法检测FGF2在IDD中的表达变化。培养原代大鼠髓核细胞,采用促炎因子白细胞介素-1β(IL-1β)诱导退行性变,并予以FGF2重组蛋白、FGF2中和抗体、FGF2干扰RNA等处理,通过流式细胞术、实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测髓核细胞凋亡、细胞外基质(ECM)代谢相关基因表达及Wnt/β-catenin信号通路活性改变;采用Wnt/β-catenin信号通路抑制剂(PRI-724)处理FGF2重组蛋白刺激后的髓核细胞,明确Wnt/β-catenin信号通路对FGF2调控IDD的影响。结果FGF2表达水平在老年小鼠椎间盘组织及髓核细胞内均高于青年小鼠(P<0.05);FGF2重组蛋白促进正常髓核细胞凋亡及ECM分解相关基因表达,而FGF2中和抗体及干扰RNA在发生退行性变的细胞中作用相反。Wnt/β-catenin信号通路在FGF2重组蛋白或IL-1β刺激的髓核细胞内显著激活,PRI-724抑制该通路活性,可削弱FGF2对髓核细胞凋亡及ECM代谢的调控作用。结论发生IDD时,髓核细胞FGF2表达升高,通过Wnt/β-catenin信号通路促进髓核细胞凋亡及ECM降解,进一步加速IDD进程。 展开更多
关键词 椎间盘退行性变 成纤维细胞生长因子2 细胞凋亡 小鼠
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免疫细胞来源的外泌体在结直肠癌中的研究进展 被引量:1
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作者 杨健 盛康亮 王永中 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期224-228,共5页
外泌体是一种携带蛋白质、RNA、脂质等生物活性物质的囊泡样小体,由胞内向胞外分泌,作用于靶细胞而发挥其生物学功能。结直肠癌是恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率均较高。研究发现,免疫细胞来源的外泌体参与调控结直肠癌的生长、侵袭、... 外泌体是一种携带蛋白质、RNA、脂质等生物活性物质的囊泡样小体,由胞内向胞外分泌,作用于靶细胞而发挥其生物学功能。结直肠癌是恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率均较高。研究发现,免疫细胞来源的外泌体参与调控结直肠癌的生长、侵袭、转移等过程,且在肿瘤的诊断、治疗以及治疗后监测等方面表现出明显的作用。该文将对免疫细胞来源的外泌体在结直肠癌中的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 外泌体 免疫细胞 结直肠癌 免疫调节 研究进展 微小核糖核酸
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LINC00707靶向miR-30c-5p对ox-LDL诱导的人血管平滑肌细胞增殖、迁移及炎症因子的影响
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作者 林云钗 王航 周强 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1829-1835,共7页
目的探讨LINC00707对氧化型低密度脂蛋白(oixidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的人血管平滑肌细胞功能障碍的影响及其作用机制。方法采用ox-LDL诱导人血管平滑肌细胞HVSMCs建立动脉粥样硬化细胞模型,si-NC、si-LINC00707、mi... 目的探讨LINC00707对氧化型低密度脂蛋白(oixidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的人血管平滑肌细胞功能障碍的影响及其作用机制。方法采用ox-LDL诱导人血管平滑肌细胞HVSMCs建立动脉粥样硬化细胞模型,si-NC、si-LINC00707、miR-NC、miR-30c-5p mimic分别转染至HVSMCs后,加入100 mg·L-1 ox-LDL处理细胞,si-LINC00707和anti-miR-NC、si-LINC00707和miR-30c-5p Inhibitor分别共转染至HVSMCs后,加入100 mg·L-1 ox-LDL处理细胞;qRT-PCR法检测LINC00707、miR-30c-5p的表达量;CCK-8法、Transwell实验分别检测细胞增殖及迁移;ELISA法检测IL-6、TNF-α、IL-10的水平;双荧光素酶报告实验检测LINC00707与miR-30c-5p的靶向关系;Western blot检测E-cadherin、N-cadherin蛋白表达量。结果ox-LDL诱导的HVSMCs中LINC00707的表达量升高(P<0.05),miR-30c-5p的表达量降低(P<0.05);转染si-LINC00707或miR-30c-5p mimic后,细胞存活率、N-cadherin蛋白水平和IL-6、TNF-α的水平降低(P<0.05),迁移细胞数减少(P<0.05),E-cadherin蛋白水平和IL-10的水平升高(P<0.05);LINC00707可靶向结合miR-30c-5p;共转染si-LINC00707和miR-30c-5p Inhibitor后,细胞存活率、N-cadherin蛋白水平和IL-6、TNF-α的水平升高(P<0.05),迁移细胞数增多(P<0.05),E-cadherin蛋白水平和IL-10的水平降低(P<0.05)。结论下调LINC00707导致miR-30c-5p表达升高从而抑制ox-LDL诱导的HVSMCs增殖、迁移及炎症反应。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 人血管平滑肌细胞 LINC00707 miR-30c-5p 细胞增殖 迁移
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沉默ciRS-7通过靶向miR-944逆转胃癌细胞顺铂耐药性机制
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作者 魏文娥 郭翠萍 +1 位作者 刁银卓 骆玉霜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1325-1332,共8页
目的 探讨沉默环状RNA(circRNA)ciRS-7对胃癌细胞顺铂耐药性的影响及相关机制。方法 构建顺铂耐药胃癌细胞HGC-27/DDP,沉默ciRS-7并用顺铂处理HGC-27/DDP细胞后,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ciRS-7、微小RNA-944(miR-944)表达水平,... 目的 探讨沉默环状RNA(circRNA)ciRS-7对胃癌细胞顺铂耐药性的影响及相关机制。方法 构建顺铂耐药胃癌细胞HGC-27/DDP,沉默ciRS-7并用顺铂处理HGC-27/DDP细胞后,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ciRS-7、微小RNA-944(miR-944)表达水平,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞存活率、克隆形成实验检测克隆形成数,蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase-3)蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡率,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡指数,双荧光素酶实验验证ciRS-7与miR-944的靶向关系。结果 ciRS-7在顺铂耐药胃癌组织和细胞中高表达,miR-944在顺铂耐药胃癌组织和细胞中低表达,沉默ciRS-7明显降低顺铂处理的HGC-27/DDP细胞存活率、克隆形成数、cyclinD1、PCNA、Bcl-2蛋白表达水平,明显增加顺铂处理的HGC-27/DDP细胞ciRS-7、凋亡率、凋亡指数、Bax、cleaved-caspase-3蛋白表达水平,ciRS-7靶向抑制miR-944的表达。结论 沉默ciRS-7可逆转胃癌细胞对顺铂的耐药性,其机制可能与沉默ciRS-7可促进miR-944的表达有关。 展开更多
关键词 ciRS-7 miR-944 胃癌 顺铂耐药性 增殖 凋亡
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微小RNA调控肝细胞癌索拉非尼耐药的分子机制 被引量:1
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作者 赵彦玉 李凯欣 +1 位作者 刘芳 陈彻 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1205-1209,共5页
肝细胞癌是全球最致命的恶性肿瘤之一,侵袭性强,治愈率低,转移率高,预后极差。索拉非尼是治疗晚期肝细胞癌最主要且有效的一线治疗药物,但原发和获得性耐药,严重限制其临床疗效。微小RNA是一种小非编码RNA,在肝细胞癌的发生、发展,以及... 肝细胞癌是全球最致命的恶性肿瘤之一,侵袭性强,治愈率低,转移率高,预后极差。索拉非尼是治疗晚期肝细胞癌最主要且有效的一线治疗药物,但原发和获得性耐药,严重限制其临床疗效。微小RNA是一种小非编码RNA,在肝细胞癌的发生、发展,以及索拉非尼耐药进展中扮演着关键的调控角色。该文总结了微小RNA在肝细胞癌索拉非尼耐药的起始和发展中的作用,旨在进一步了解索拉非尼抗肝癌的机制,并为肝细胞癌的临床靶向治疗,及预后改善提供有价值的理论依据。 展开更多
关键词 肝细胞癌 微小RNA 索拉非尼 耐药 信号通路 调控机制
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长链非编码RNA在非酒精性脂肪肝病中的研究进展
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作者 张阳 杨森 许丽娜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1213-1217,共5页
长链非编码RNAs (long non-coding RNAs,lncRNAs)是长度大于200个核苷酸的非编码RNA,参与染色质修饰、转录激活、核内运输等多种调控过程,在多种疾病发生发展中发挥重要作用。非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAF... 长链非编码RNAs (long non-coding RNAs,lncRNAs)是长度大于200个核苷酸的非编码RNA,参与染色质修饰、转录激活、核内运输等多种调控过程,在多种疾病发生发展中发挥重要作用。非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)已成为最常见的慢性肝病,发病率不断上升。近年来,研究证实,lncRNAs通过介导胰岛素抵抗、脂质代谢紊乱、炎症等调控NAFLD的发生发展。该文综述了lncRNAs在NAFLD中的调控作用,以期为NAFLD的预防、治疗、临床检测和抗NAFLD创新药物的研发提供理论依据。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 非酒精性脂肪肝 发病机制 炎症 胰岛素抵抗 脂质代谢
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FATP5基因沉默抑制油酸诱导的HepG2细胞脂肪化及炎症作用 被引量:1
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作者 王天琦 孙文龙 +1 位作者 杨馥源 李敬达 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期692-699,共8页
目的 明确FATP5作为脂肪酸转运蛋白家族成员,其基因沉默对肝脏细胞脂肪化及炎症作用的影响,并初步探究该影响可能的机制。方法 设计合成5条shRNA序列,并借助siCHECK^(TM)系统筛选得到FATP5有效干扰序列。将有效干扰序列包装成慢病毒后,... 目的 明确FATP5作为脂肪酸转运蛋白家族成员,其基因沉默对肝脏细胞脂肪化及炎症作用的影响,并初步探究该影响可能的机制。方法 设计合成5条shRNA序列,并借助siCHECK^(TM)系统筛选得到FATP5有效干扰序列。将有效干扰序列包装成慢病毒后,通过细胞感染和嘌呤霉素筛选获得FATP5基因沉默HepG2细胞株。使用Western blot方法检测FATP5基因沉默的效率。之后,利用检测试剂盒、Western blot、核质分离及报告基因方法分别分析FATP5基因沉默细胞中油酸诱导ROS和MDA生成、TNF-α和IL-6蛋白表达与分泌,以及NF-κB活化的变化情况。结果 基因沉默细胞中FATP5蛋白表达水平下降90%,并且脂质蓄积作用也被显著抑制。此外,FATP5基因沉默可减少油酸诱导的ROS及MDA生成,同时还可降低NF-κB的转录活性,并下调其下游炎症因子TNF-α及IL-6的蛋白表达和分泌。结论FATP5基因沉默可减轻脂肪化肝脏细胞的炎症作用,其机制可能与抑制氧化应激和脂质过氧化作用有关。 展开更多
关键词 FATP5受体 shRNA基因干扰 炎症反应 非酒精性脂肪肝 NF-κB TNF-α
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环状RNA在肝癌耐药中的作用及机制研究进展
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作者 黄国林 蓝晓步 +2 位作者 秦艳娥 黎骊 阳洁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期13-17,共5页
环状RNA是一类具有多生物学功能的新型非编码RNA,可参与肝癌的发生、发展、侵袭及转移等生物学过程,也可参与肝癌的耐药。该文综述了环状RNA在肝癌化疗耐药、靶向治疗耐药以及免疫治疗耐药中的作用及其机制,以期为解决肝癌耐药提供新思路。
关键词 肝癌 耐药 环状RNA 化疗耐药 靶向治疗耐药 免疫治疗耐药
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基于生物信息学方法构建肝细胞癌SNHG17-miRNA-CDK4预后预测模型
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作者 刘建东 韩翠云 +1 位作者 钟敬涛 徐慧荣 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2023年第6期850-854,共5页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因17(SNHG17)在肝细胞癌(HCC)发生发展中的作用。方法利用基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库,分析HCC中SNHG17的表达及其与生存的关系;利用基因表达综合(GEO)数据库的数据进行验证,使用GEO2... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因17(SNHG17)在肝细胞癌(HCC)发生发展中的作用。方法利用基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库,分析HCC中SNHG17的表达及其与生存的关系;利用基因表达综合(GEO)数据库的数据进行验证,使用GEO2R、lnCAR和Metascape软件分析SNHG17相关性基因、构建可视化网络并进行GO和KEGG富集分析。根据通路利用多个GEO数据集筛选出细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4);利用数据库平台StarBase、miRBD以及HMDD筛选出同时以SNHG17和CDK4为靶基因的microRNA(miRNA)。结果lncRNA SNHG17在HCC中的表达显著上升(P<0.05),其表达高的病人预后显著变差(P<0.05)。GO和KEGG富集分析结果显示,SNHG17与核蛋白复合物以及细胞周期相关。筛选出高度相关基因CDK4并筛选出以SNHG17和CDK4为靶标的miRNAs。结论SNHG17在HCC中表达增高,并可通过结合多种miRNA发挥竞争性内源RNA的功能,对CDK4发挥调控作用。 展开更多
关键词 肝细胞 RNA 长链非编码 微RNAS 细胞周期蛋白依赖激酶4 预后 计算生物学
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长链非编码RNA在胶质瘤中的研究进展
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作者 王壮壮 刘彦廷 +2 位作者 田春雷 任欢 艾文兵 《临床荟萃》 2023年第11期1053-1056,共4页
长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)主要通过调控编码蛋白基因的表达、染色质重构、组蛋白修饰,以及作为小分子RNA的前体分子,在人类癌症中广泛扩增。lncRNA已被证实能在多种肿瘤细胞中过表达。在胶质瘤中,lncRNA的表达量与胶质... 长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)主要通过调控编码蛋白基因的表达、染色质重构、组蛋白修饰,以及作为小分子RNA的前体分子,在人类癌症中广泛扩增。lncRNA已被证实能在多种肿瘤细胞中过表达。在胶质瘤中,lncRNA的表达量与胶质瘤的分级密切相关,参与调控胶质瘤细胞的增殖、肿瘤新生血管形成,并对胶质瘤细胞的上皮间充质转化(EMT)进行调节,促进胶质瘤干细胞的存活,可能与胶质瘤的异质性存在相关性。本文对lncRNA在胶质瘤发生发展中的研究进展进行综述,探讨lncRNA对胶质瘤的增殖与侵袭、信号传导通路和分子靶向治疗的重要意义。 展开更多
关键词 RNA 长链非编码 神经胶质瘤 细胞增殖 肿瘤浸润 分子靶向治疗
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