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广东烟粉虱传双生病毒的发生种类、分布及动态
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作者 汤亚飞 李正刚 +4 位作者 蓝国兵 佘小漫 于琳 丁善文 何自福 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期255-263,275,共10页
为了监测烟粉虱传双生病毒在广东的发生与扩散动态,2003年-2021年,本课题组对全省烟粉虱传双生病毒进行了长期调查与监测。结果表明,在广东省广州、湛江、惠州等14市均有烟粉虱传双生病毒病的发生,危害的寄主植物有番茄、南瓜、甘薯等24... 为了监测烟粉虱传双生病毒在广东的发生与扩散动态,2003年-2021年,本课题组对全省烟粉虱传双生病毒进行了长期调查与监测。结果表明,在广东省广州、湛江、惠州等14市均有烟粉虱传双生病毒病的发生,危害的寄主植物有番茄、南瓜、甘薯等24种,其中番茄黄化曲叶病发生和危害尤为严重,广泛分布于全省各地;从14市采集的病样中共鉴定出烟粉虱传双生病毒21种,其中广东番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl Guangdong virus,TYLCGdV)、广东番茄曲叶病毒(tomato leaf curl Guangdong virus,ToLCGdV)、黄蝉曲叶病毒(Allamanda leaf curl virus,AllLCV)、广东雾水葛花叶病毒(Pouzolzia mosaic Guangdong virus,PouMGDV)、十萼茄黄花叶病毒(Lycianthes yellow mosaic virus,LyYMV)5种病毒为新种;同时,发现危害不同寄主的病毒种类存在差异,危害同一作物的病毒种类也存在动态变化。本文明确了广东烟粉虱传双生病毒分布广、种类多、危害重,为全省烟粉虱传双生病毒病的防控提供了科学依据。 展开更多
关键词 烟粉虱传双生病毒 广东 发生 分布 种类
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南方番茄病毒在海南省的发生分布及全基因组序列分析
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作者 车海彦 林雅婷 +1 位作者 罗大全 龙海波 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期30-40,共11页
病毒病是海南番茄生产中危害最严重的病害之一,在利用小RNA深度测序技术鉴定海南番茄病毒病病原时发现,南方番茄病毒(Southern tomato virus,STV)在海南省多个市(县)的样品中存在,而且发现1株STV单独侵染的样品。为了解STV在海南省的发... 病毒病是海南番茄生产中危害最严重的病害之一,在利用小RNA深度测序技术鉴定海南番茄病毒病病原时发现,南方番茄病毒(Southern tomato virus,STV)在海南省多个市(县)的样品中存在,而且发现1株STV单独侵染的样品。为了解STV在海南省的发生分布情况,利用RT-PCR技术,对2015—2021年采自海南省的987份疑似病毒侵染的番茄叶片样品进行检测,结果表明:在9个市(县)的142份样品中检测到STV,早在2015年STV就已经在海南番茄上存在,检出率从2015年(8.82%)到2021年(22.45%)呈逐年上升趋势。同时结合RACE和RT-PCR技术扩增到4个STV海南分离物的全长基因组,长度均为3446 nt,包含2个部分重叠的ORFs,ORF1(147~1280 nt)和ORF2(1048~3336 nt)分别编码p42蛋白(377 aa)和RdRp蛋白(762 aa),5′UTR和3′UTR的长度分别为146 nt和110 nt。序列一致性分析表明,4个STV海南分离物间基因组序列一致性为99.86%~100.00%,与目前GenBank公布的所有STV分离物基因组间序列一致性为98.45%~99.94%。基于全基因组序列构建的系统发育树显示,80个STV分离物被明显分为2个组(组Ⅰ和组Ⅱ),组Ⅰ包括亚洲、美洲、欧洲和非洲分离物;组Ⅱ中除1个亚洲分离物外,其他均为欧洲分离物;4个海南分离物被分在组Ⅰ,STV分离物的分组与地域呈一定的相关性,而与寄主无相关性。4个海南分离物与组Ⅰ分离物基因组序列变异度较高的区域位于881~1061 nt和1521~1721 nt,与组Ⅱ分离物基因组序列变异度较高的区域位于2041~2241 nt和2761~2921 nt。STV分离物基因组间未发现重组事件。这是在海南省首次报道发现STV。本研究结果有助于了解STV在海南省的分布、发生趋势及遗传多样性,为病害防控提供科学依据。 展开更多
关键词 南方番茄病毒 小RNA深度测序 RT-PCR检测 基因组
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侵染苘麻的菜豆金色黄花叶病毒的鉴定及基因组结构分析
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作者 杜江 马振男 +2 位作者 崔丽艳 王德富 牛颜冰 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期63-69,共7页
为明确引起我国山西晋中地区苘麻叶片表现皱缩和花叶症状的病原物及其基因组分子特征,本研究利用双生病毒简并引物扩增获得病毒基因组部分序列,经测序、比对后设计特异性引物扩增病毒基因组序列,进而通过生物信息学方法构建系统发育树... 为明确引起我国山西晋中地区苘麻叶片表现皱缩和花叶症状的病原物及其基因组分子特征,本研究利用双生病毒简并引物扩增获得病毒基因组部分序列,经测序、比对后设计特异性引物扩增病毒基因组序列,进而通过生物信息学方法构建系统发育树并进行序列分析。结果表明:引起苘麻叶片皱缩、花叶的病原物为番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV),将该分离物命名为TYLCV-Abu,GenBank登录号为OP293347,但未扩增到β卫星。该病毒DNA-A基因组全长为2782 bp,含有6个开放阅读框。TYLCV-Abu分离物与TYLCV茄子分离物KSQ1-3(GenBank登录号KC428753)的核苷酸序列一致性最高,为98.99%,其中C4和V2编码的蛋白变异较大。重组结果分析显示,分离物TYLCV-Abu是由TYLCV-F(GenBank登录号KY971326)和TYLCV-KSQ1-3重组得到,重组区域为其基因组2617-2782 nt区域。这是首次从苘麻样品中扩增到TYLCV全基因组序列并进行分析。 展开更多
关键词 苘麻 菜豆金色黄花叶病毒属 序列分析
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2012年-2022年TBTV、TVDV、TBTVsatRNA和TVDVaRNA在云南主要烟区的发生与分布
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作者 杨亚辉 杨洁 +6 位作者 罗恒明 刘芳 吕婧 陈平 陈海如 陈小姣 李凡 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期296-302,331,共8页
烟草丛顶病(tobacco bushy top disease,TBTD)是一种由烟草丛顶病毒(tobacco bushy top virus,TBTV)及其卫星RNA(tobacco bushy top virus satellite RNA,TBTVsatRNA)和烟草扭脉病毒(tobacco vein distorting virus,TVDV)及其伴随RNA(to... 烟草丛顶病(tobacco bushy top disease,TBTD)是一种由烟草丛顶病毒(tobacco bushy top virus,TBTV)及其卫星RNA(tobacco bushy top virus satellite RNA,TBTVsatRNA)和烟草扭脉病毒(tobacco vein distorting virus,TVDV)及其伴随RNA(tobacco vein distorting virus associated RNA,TVDVaRNA)共同侵染引起的危险性病害,曾在云南很多烟区造成严重损失。本研究对烟草丛顶病及其相关病原物在云南烟草上的发生情况进行了多年的调查研究,力图对烟草丛顶病及其相关病原物的发生与分布进行追踪和分析。结果表明,2012年-2022年,烟草丛顶病在云南各大烟区仅零星发生,2019年以来已很难发现。烟草丛顶病的相关病原物主要在曾经暴发流行过病害的楚雄、保山和大理发现,且TBTV、TVDV、TBTVsatRNA和TVDVaRNA在烟草上并不总是同时被检出,其中引起烟草丛顶病典型症状的TBTV+TVDV+TBTVsatRNA+TVDVaRNA检出率在5%以下,TVDV的检出率最高,达30.44%,TBTVsatRNA的检出率最低,为7.68%。TBTV、TVDV、TBTVsatRNA和TVDVaRNA不能同时感染同一烟株可能是当前烟草丛顶病很少发生的主要原因。 展开更多
关键词 烟草丛顶病毒 烟草扭脉病毒 烟草丛顶病毒卫星RNA 烟草扭脉病毒伴随RNA 发生与分布
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转录因子NbMYB1R1通过促进活性氧积累抑制病毒侵染
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作者 姜兴林 于连伟 +8 位作者 付涵 艾妞 崔荧钧 李好海 夏子豪 袁虹霞 李洪连 杨雪 施艳 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1490-1505,共16页
[背景]黄瓜绿斑驳花叶病毒(cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是我国重要的检疫性植物病毒,严重降低了世界范围内蔬菜以及瓜类的产量。MYB蛋白家族庞大,功能多样,存在于所有真核生物中。大多数MYB作为转录因子控制植物的发育... [背景]黄瓜绿斑驳花叶病毒(cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是我国重要的检疫性植物病毒,严重降低了世界范围内蔬菜以及瓜类的产量。MYB蛋白家族庞大,功能多样,存在于所有真核生物中。大多数MYB作为转录因子控制植物的发育和代谢,并对植物应对生物和非生物胁迫反应起重要的调控作用。前期研究显示CGMMV侵染后可以显著上调寄主转录因子基因NbMYB1R1的表达。[目的]明确NbMYB1R1参与CGMMV侵染的机制,为CGMMV病害防控提供理论依据。[方法]运用MEGA 7.0构建系统进化树,对NbMYB1R1的氨基酸序列进行系统进化分析;通过构建NbMYB1R1的荧光表达载体,转化GV3101农杆菌后浸润本氏烟叶片,激光共聚焦显微镜观察其亚细胞定位;利用qRT-PCR技术分析NbMYB1R1在CGMMV侵染不同时期的转录水平及NbMYB1R1沉默烟草植株中活性氧(reactive oxygen species,ROS)相关基因的转录变化;通过沉默NbMYB1R1及下游调控基因NbAOX1a和NbAOX1b,分析NbMYB1R1及下游调控基因NbAOX1a和NbAOX1b在CGMMV侵染过程中的作用;瞬时过表达NbMYB1R1和NbMYB1R1关键氨基酸突变体,分析NbMYB1R1对CGMMV侵染的影响;使用台盼蓝染色以及DAB染色观察瞬时过表达NbMYB1R1造成的细胞死亡是否与程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD)以及ROS的积累有关;运用酵母双杂交技术验证NbMYB1R1是否与CGMMV相关蛋白互作。[结果]系统进化树分析表明,NbMYB1R1属于1R MYB大类并与多种烟草的MYB转录因子同源性极高;亚细胞定位结果显示NbMYB1R1定位于细胞核;在CGMMV侵染的烟草植株中,NbMYB1R1的转录水平对比健康植株有明显变化,在CGMMV侵染8、12 d时NbMYB1R1的转录水平显著上调;在沉默内源基因NbMYB1R1的植株上接种CGMMV,3 d后NbMYB1R1沉默植株系统叶出现斑驳、卷曲症状,而对照植株在3.5 d时才出现症状;同时CGMMV CP mRNA水平和蛋白水平检测结果也表明沉默NbMYB1R1可以有效促进CGMMV的积累;在本氏烟叶片瞬时过表达NbMYB1R1及其突变体3 d时检测CGMMV蛋白水平表达量,结果显示过表达NbMYB1R1可以有效抑制CGMMV的侵染,DNA结合结构域缺失后会减轻NbMYB1R1对CGMMV的抑制;台盼蓝和DAB染色结果表明,在瞬时过表达NbMYB1R1蛋白后导致ROS积累并引起细胞死亡;在沉默内源基因NbMYB1R1的植株叶片上检测ROS相关基因的转录水平,发现交替氧化酶基因AOX1a、AOX1b转录水平显著上调;在沉默内源基因NbAOX1a和NbAOX1b的植株上接种CGMMV,4 d后NbAOX1a和NbAOX1b沉默植株系统叶出现斑驳、卷曲症状,而对照植株在3.5 d时就出现症状;同时CGMMV CP mRNA水平和蛋白水平检测结果也表明沉默NbAOX1a和NbAOX1b可以有效抑制CGMMV的积累;酵母双杂交结果显示NbMYB1R1不与CGMMV编码蛋白直接相互作用。[结论]随着CGMMV侵染,防御相关基因NbMYB1R1表达上调,从而抑制下游基因AOX1a、AOX1b的表达并激活细胞内产生ROS抑制病毒侵染,但NbMYB1R1不是通过与CGMMV病毒蛋白直接互作而产生此作用。由此可见,NbMYB1R1在CGMMV侵染过程中发挥了重要作用。 展开更多
关键词 黄瓜绿斑驳花叶病毒 Nb MYB1R1 转录因子 致病机制 活性氧
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梅病毒A新疆蟠桃分离物的全基因组序列分析与侵染性克隆构建
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作者 任彩霞 刘琳 +4 位作者 刘升学 卜方迪 向本春 郑银英 崔百明 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第19期3810-3822,共13页
【目的】梅病毒A(mume virus A,MuVA)是新发现的感染桃树的病毒,其全基因组序列分析研究甚少,国内尚无报道。本研究旨在探明MuVA在我国新疆蟠桃中的感染情况,分析MuVA pp分离物的基因组、系统进化及致病性,为MuVA的防治提供科学依据。... 【目的】梅病毒A(mume virus A,MuVA)是新发现的感染桃树的病毒,其全基因组序列分析研究甚少,国内尚无报道。本研究旨在探明MuVA在我国新疆蟠桃中的感染情况,分析MuVA pp分离物的基因组、系统进化及致病性,为MuVA的防治提供科学依据。【方法】使用RT-PCR方法对田间蟠桃样品进行MuVA检测,采用5′/3′cDNA末端快速扩增(RACE)技术确定MuVA pp分离物的全基因组序列,并运用生物信息学软件分析MuVA pp分离物的基因组序列特征和系统进化关系。利用Gibson组装策略构建该分离物的基因组全长cDNA克隆,并通过农杆菌介导的方法对其侵染性进行接种测试。【结果】RT-PCR检测结果表明,30份疑似病毒病样本中有10份感染了MuVA,不同蟠桃品种感染率由高到低分别为‘七月蟠’(4/9)、‘八一蟠桃’(5/13)、‘中熟八一’(1/8);MuVA pp分离物基因组全长为7 647 nt,基因组由5′非翻译区(5′UTR)、3′UTR和两个重叠的开放阅读框(ORF)组成,编码甲基转移酶(Met)、RNA解旋酶(Hel)、RNA依赖性RNA聚合酶(RdRp)、外壳蛋白(CP)和运动蛋白(MP);序列分析结果显示,MuVA pp分离物与已报道的MuVA pm14分离物基因组的核苷酸和多聚蛋白氨基酸序列一致性分别为80.8%和82.7%,两者的多聚蛋白存在406个氨基酸残基的差异,分布在Met(21个)、Hel(29个)、RdRp(19个)、CP(18个)和其他(319个)。与MuVA pm14分离物显著不同的是5′UTR,核苷酸序列一致性仅为74.6%,编码的蛋白质中,MP变异最大,氨基酸一致性为80.9%,RdRp最保守,氨基酸一致性最高,为94.0%;系统发育分析结果显示,MuVA pp分离物与MuVA pm14分离物的亲缘关系最近,且MuVA有宿主和地理特异性的趋势,李子分离物与梅分离物聚集成簇,而桃分离物单独成支;构建的pCB301-MuVA侵染性克隆可以系统侵染苋色藜,并未引起症状,导致三生烟接种叶产生过敏性坏死,但不能引起系统侵染,也不能侵染昆诺藜、心叶烟、西方烟、本氏烟、番茄、黄瓜和南瓜。【结论】成功获得了蟠桃MuVA pp分离物的全基因组序列,其基因组为单链正义RNA,大小为7 647 nt,不含3′端poly(A)尾,编码两个ORF;通过摩擦接种证实MuVA不能侵染草本植物;构建了具有侵染活性的MuVA pp分离物的全长c DNA侵染性克隆载体pCB301-MuVA,可系统侵染苋色藜,且无明显症状,导致三生烟接种叶产生过敏性坏死,未引起系统侵染,这为进一步研究MuVA的致病分子机理提供了参考依据。 展开更多
关键词 梅病毒A RT-PCR 基因组结构 进化分析 侵染性鉴定
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类病毒及其分类进展
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作者 田夏夏 李世访 张志想 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期230-237,共8页
随着高通量测序技术的发展及其在类病毒研究中的广泛应用,近年来从不同的物种中发现了多种新类病毒以及大量的疑似类病毒的环状RNA,给类病毒的分类和命名带来了新挑战。为此,国际类病毒分类小组更新了类病毒的分类及命名的一些规则。为... 随着高通量测序技术的发展及其在类病毒研究中的广泛应用,近年来从不同的物种中发现了多种新类病毒以及大量的疑似类病毒的环状RNA,给类病毒的分类和命名带来了新挑战。为此,国际类病毒分类小组更新了类病毒的分类及命名的一些规则。为了使大家更清楚地了解类病毒最新的分类及命名情况,本文在简要介绍类病毒的基础上,概述了当前类病毒的分类以及不同分类阶元划分的依据以及变动的原因。 展开更多
关键词 类病毒 分类 命名 双名法 环状RNA 非编码RNA
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在中国广东侵染胜红蓟的中国胜红蓟黄脉病毒的鉴定和全基因组分析
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作者 乔蕊 周雪平 李方方 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期266-271,共6页
2022年9月在广东省罗定市发现了叶片表现为黄色网状症状的胜红蓟病株。为了明确胜红蓟叶片的黄脉症状是否由双生病毒感染引起,本研究使用检测双生病毒的简并引物PA/PB进行PCR扩增,获得约500 bp的片段。根据该序列设计特异性引物扩增并... 2022年9月在广东省罗定市发现了叶片表现为黄色网状症状的胜红蓟病株。为了明确胜红蓟叶片的黄脉症状是否由双生病毒感染引起,本研究使用检测双生病毒的简并引物PA/PB进行PCR扩增,获得约500 bp的片段。根据该序列设计特异性引物扩增并且克隆得到了病毒DNA-A的全基因组序列。通过BLAST比对发现,获得的DNA-A与中国胜红蓟黄脉病毒(ageratum yellow vein China virus,AYVCNV)海南分离物(OQ421190)的DNA-A的相似性最高,相似度为98.11%。系统进化树分析显示,获得的病毒DNA-A与海南分离物(OQ421190)在同一分支,说明具有较近的亲缘关系。以上研究结果表明侵染胜红蓟的病毒是AYVCNV的分离物。这是关于AYVCNV在广东地区侵染胜红蓟的首次报道,可为当地病毒病的防控提供参考。 展开更多
关键词 中国胜红蓟黄脉病毒 PCR技术 基因组序列 系统发育分析
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辣椒轻斑驳病毒RT-RAA-CRISPR/Cas12a可视化检测方法的建立
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作者 赵振兴 范奇璇 +3 位作者 王思元 董铮 胡中泽 张永江 《河南农业科学》 北大核心 2024年第9期80-87,共8页
辣椒是重要的园艺作物,辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus,PMMoV)严重威胁辣椒等茄科园艺作物的生产安全。为提高PMMoV的防控效率,根据其编码外壳蛋白(Coat protein,CP)的基因保守序列,基于重组酶介导等温核酸扩增技术(Recombina... 辣椒是重要的园艺作物,辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus,PMMoV)严重威胁辣椒等茄科园艺作物的生产安全。为提高PMMoV的防控效率,根据其编码外壳蛋白(Coat protein,CP)的基因保守序列,基于重组酶介导等温核酸扩增技术(Recombinase?aided amplification,RAA),设计了特异性RAA引物,实现对PMMoV的快速等温扩增,并基于CRISPR/Cas12a的设计原则,设计了crRNA靶向RT-RAA扩增产物。优化结果显示,总反应体系在报告基因FQ终浓度为400 nmol/L,Cas12a/crRNA比例为1∶5、终浓度为200 nmol/L和1000 nmol/L条件下检测信号最强,最终的RT-RAA反应和CRISPR显色体系分别仅需15 min,即可在便携式蓝光照射设备下直接观察到阳性信号。该方法可特异性检测PMMoV,对携带PMMoV的辣椒样品RNA的检测极限可达到1.34 pg/μL,分别是普通RT-PCR和实时荧光RT-PCR检测灵敏度的1000倍和10倍。对实际样品中的检测结果显示,建立的RT-RAA-CRISPR/Cas12a检测技术可以在PMMoV侵染的辣椒和番茄叶片、果实及土壤中检测到PMMoV,可用于辣椒轻斑驳病毒的快速、灵敏、可视化检测。 展开更多
关键词 辣椒轻斑驳病毒 RT-RAA CRISPR/Cas12a 可视化检测
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Development of a stable attenuated double-mutant of tobacco mosaic virus for cross-protection
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作者 Xiaojie Xu Shaoyan Jiang +7 位作者 Chunju Liu Xujie Sun Qing Zhu Xiuzhai Chen Pengchao Jiang Fenglong Wang Yanping Tian Xiangdong Li 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2024年第7期2318-2331,共14页
Tobacco(Nicotiana tabacum)and tomato(Solanum lycopersicum)are two major economic crops in China.Tobacco mosaic virus(TMV;genus Tobamovirus)is the most prevalent virus infecting both crops.Currently,some widely cultiva... Tobacco(Nicotiana tabacum)and tomato(Solanum lycopersicum)are two major economic crops in China.Tobacco mosaic virus(TMV;genus Tobamovirus)is the most prevalent virus infecting both crops.Currently,some widely cultivated tobacco and tomato cultivars are susceptible to TMV and there is no effective strategy to control this virus.Cross-protection can be a safe and environmentally friendly strategy to prevent viral diseases.However,stable attenuated TMV mutants are scarce.In this study,we found that the substitutions in the replicase p126,arginine at position 196(R^(196))with aspartic acid(D),glutamic acid at position 614(E^(614))with glycine(G),serine at position 643(S^(643))with phenylalanine(F),or D at position 730(D^(730))with S,significantly reduced the virulence and replication of TMV.However,only the mutation of S^(643) to F reduced the RNA silencing suppression activity of TMV p126.A double-mutant TMV-E614G-S643F induced no visible symptom and was genetically stable through six successive passages in tobacco plants.Furthermore,our results showed that TMV-E614G-S643F double-mutant could provide effective protection against the wild-type TMV infection in tobacco and tomato plants.This study reports a promising mild mutant for cross-protection to control TMV in tobacco and tomato plants. 展开更多
关键词 CROSS-PROTECTION double-mutant p126 tobacco mosaic virus VIRULENCE
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A bacterial protein Rhp-PSP inhibits plant viral proliferation through endoribonuclease activity
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作者 Lijie Chen Qianze Peng +6 位作者 Xiaohua Du Weixing Zhang Ju’e Cheng Shu’e Sun Deyong Zhang Pin Su Yong Liu 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2024年第6期1967-1978,共12页
Plant virus causes massive crop losses globally.However,there is currently no effective measure to control plant viral disease.Previously,we identify an antiviral protein Rhp-PSP,produced by the bacterial Rhodopseudom... Plant virus causes massive crop losses globally.However,there is currently no effective measure to control plant viral disease.Previously,we identify an antiviral protein Rhp-PSP,produced by the bacterial Rhodopseudomonas palustris strain JSC-3b.In this study,we discover that the antiviral activity of Rhp-PSP relies on its endoribonuclease activity.Converting the arginine(R)residue at position 129 onto alanine(A)abolishs its endoribonuclease activity on coat protein(CP)RNA of tobacco mosaic virus(TMV),consequentially,compromises the antiviral activity of Rhp-PSP.Further investigation demonstrates that,the mutant Rhp-PSP^(R129A)is unable to form the homotrimer as the wild type,indicating the importance of quaternary junction for the endoribonuclease activity.Overexpression of Rhp-PSP in Nicotiana benthamiana significantly enhances the resistance against TMV of seedlings,while expression of Rhp-PSP^(R129A)did not,confirming that endoribonuclease activity is responsible for the antiviral activity of Rhp-PSP.In addition,foliar spray of Rhp-PSP solution on tomato and pepper plants significantly reduces the disease index of viral diseases,indicating that Rhp-PSP shows potential to develop antiviral agent in practice. 展开更多
关键词 Rhodopseudomonas palustris Rhp-PSP tobacco mosaic virus ENDORIBONUCLEASE antiviral activity
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外泌体及其在病毒感染下的双重作用
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作者 韦芊芊 陈利民 +1 位作者 李玉佳 李世林 《中国输血杂志》 CAS 2024年第7期831-838,共8页
外泌体是1种由细胞内释放到细胞外微环境的胞外体,是1种远距离传输生物学信息的载体,可对机体免疫系统产生双重调节作用,研究表明病毒可以挟持内体——外泌体途径进行传播。本文我们回顾了外泌体在病毒感染时发挥的作用,一方面外泌体可... 外泌体是1种由细胞内释放到细胞外微环境的胞外体,是1种远距离传输生物学信息的载体,可对机体免疫系统产生双重调节作用,研究表明病毒可以挟持内体——外泌体途径进行传播。本文我们回顾了外泌体在病毒感染时发挥的作用,一方面外泌体可以传播抗病毒物质和引发免疫反应,对抗病毒的感染,另一方面外泌体可以作为传播病毒的潜在介质,已经被证明与多种病毒的传播和免疫逃逸息息相关。了解外泌体在病毒感染中的作用,对于检测血液中的病毒,提高血液安全性,以及寻找和研发抗病毒的药物至关重要。 展开更多
关键词 外泌体 病毒 ESCRT 自噬 免疫
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烟草花叶病毒(TMV)免疫诱抗剂的制备与验证
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作者 周向平 邓征宇 +5 位作者 许清孝 周立 郭军 盘先江 李才华 袁志辉 《湖南农业科学》 2024年第4期72-76,共5页
为了制备烟草花叶病毒(TMV)免疫诱抗剂,研究采用壳寡糖、高锰酸钾、内生真菌发酵液、紫外线、银杏叶提取物等试剂处理,筛选出TMV弱毒/无毒株系制备的最优方法,并在室内开展免疫激活效应。结果表明:紫外线、0.1%高锰酸钾溶液、内生真菌... 为了制备烟草花叶病毒(TMV)免疫诱抗剂,研究采用壳寡糖、高锰酸钾、内生真菌发酵液、紫外线、银杏叶提取物等试剂处理,筛选出TMV弱毒/无毒株系制备的最优方法,并在室内开展免疫激活效应。结果表明:紫外线、0.1%高锰酸钾溶液、内生真菌发酵液16倍浓缩液、100μg/mL壳寡糖溶液对TMV表现出良好的钝化效果,钝化液对TMV有较高的抑制率。钝化TMV能引起烟草多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化氢酶(CAT)5种防御酶活性显著升高,从而提高烟株对TMV感染的抗性。烟苗和大田烟叶TMV防控试验也证明钝化TMV在烟叶生产中可以作为TMV免疫诱抗剂使用,提高烟株的TMV免疫力和抵抗力。 展开更多
关键词 TMV 免疫诱抗剂 钝化 防御酶 防控效果
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病毒病害对滇黄精生理生化特性、产量及品质的影响
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作者 杨泽芬 陈泽历 +3 位作者 袁宝怡 李荣基 赵明富 文国松 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1028-1036,共9页
【目的】明确病毒侵染对滇黄精生长发育、根茎产量及品质的影响,为深入研究病毒的致病机理提供依据。【方法】以云南省滇黄精主产区曲靖和玉溪种植的4年生滇黄精田间抗病和感病植株为研究对象,比较病毒侵染后滇黄精叶绿体超微结构、叶... 【目的】明确病毒侵染对滇黄精生长发育、根茎产量及品质的影响,为深入研究病毒的致病机理提供依据。【方法】以云南省滇黄精主产区曲靖和玉溪种植的4年生滇黄精田间抗病和感病植株为研究对象,比较病毒侵染后滇黄精叶绿体超微结构、叶片光合气体交换参数、叶绿素含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物氧化酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)以及块茎生物学性状和药用有效化学成分含量的变化。【结果】(1)滇黄精遭受病毒侵染后,叶片细胞质中散布线状病毒粒子及其聚集形成的大量内含体,细胞内叶绿体结构严重受损,部分已发生解体;(2)感病滇黄精叶绿素发生降解,叶绿素a和b的含量分别极显著降低了22.97%和35.38%,其叶片净光合速率、气孔导度、胞间CO_(2)浓度分别降低了49.75%、11.25%和5.79%,光合作用效率明显减弱;(3)感病滇黄精叶片细胞膜发生强烈的脂膜过氧化反应,MDA含量升高了117.17%,SOD、POD、PPO、PAL活性极显著升高,其中PPO活性平均升高了61.81%;(4)感病滇黄精地下根茎的膨大和嫩芽的生长受阻,单株鲜质量降低了49.47%,根茎中多糖的相对含量减少了6.97%,皂苷、黄酮、总酚含量分别减少了23.31%、15.32%、11.07%。【结论】滇黄精遭受病毒侵染后,抗氧化酶防御反应虽然被激活,但细胞膜仍严重受损,光合作用明显减弱,最终导致根茎产量和药用品质显著降低。 展开更多
关键词 滇黄精 病毒病害 生理生化特性 根茎产量 药用品质
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番茄黄化曲叶病毒安徽分离物的基因组结构特征及变异分析
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作者 蒋磊 徐世强 +2 位作者 徐凯 丁菲 江彤 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2023年第3期446-449,共4页
利用滚环扩增(RCA)技术从安徽淮北番茄温室表现曲叶症状的番茄上获得番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)的2个分离物全基因组。2个TYLCV DNA-A核苷酸序列全长均为2781 nts,共编码6个ORF。序列比对结果表明,2个TYLC... 利用滚环扩增(RCA)技术从安徽淮北番茄温室表现曲叶症状的番茄上获得番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)的2个分离物全基因组。2个TYLCV DNA-A核苷酸序列全长均为2781 nts,共编码6个ORF。序列比对结果表明,2个TYLCV安徽分离物DNA-A核苷酸序列同源性为99.7%,与已报道的国内外其他24个TYLCV各分离物同源性高达97.8%~99.9%。系统进化分析显示,TYLCV安徽分离物与来自吉林、沈阳、天津、邯郸和山东的5个TYLCV分离物亲缘关系最近。 展开更多
关键词 滚环扩增 番茄黄化曲叶病毒 序列分析
原文传递
利用小RNA深度测序技术鉴定白芷病毒病病原
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作者 杜江 姚东作 +3 位作者 王晨燕 崔丽艳 王德富 牛颜冰 《山西农业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2023年第1期75-81,共7页
[目的]白芷(Angelica dahurica)是一种药用历史悠久的传统中药,本研究利用小RNA深度测序技术明确引起山西太谷白芷花叶、褪绿症状的病原,为白芷病毒病的防控提供依据。[方法]将采集的白芷病样进行小RNA深度测序,通过RT-PCR和序列相似性... [目的]白芷(Angelica dahurica)是一种药用历史悠久的传统中药,本研究利用小RNA深度测序技术明确引起山西太谷白芷花叶、褪绿症状的病原,为白芷病毒病的防控提供依据。[方法]将采集的白芷病样进行小RNA深度测序,通过RT-PCR和序列相似性分析明确白芷病毒病的分类地位。[结果]白芷样品经小RNA深度测序共获得22158005个原始序列,将拼接contigs与NCBI中的病毒数据库进行比对注释,结果显示比对到黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)3条正义链RNA 3、RNA 2、RNA 1的比对率分别为2.14%、1.28%和1.10%。利用特异引物克隆了CMV-BZ RNA3的外壳蛋白和移动蛋白基因全序列。通过序列比对分析,发现CMV-BZ CP氨基酸序列和核苷酸序列分别与CMV亚组ⅠB中CMV分离物(CMV-SD-YT和CMV-SXCH)和(CMV-SD-QD)的相似性最高,分别为99.1%和99.5%;MP氨基酸序列和核苷酸序列分别与CMV亚组Ⅰ分离物Ah的相似性最高,为99.3%和99.0%。MP和CP氨基酸序列系统进化分析表明,CMV-BZ与中国大多数CMV分离物聚为一类,属于CMV亚组Ⅰ中的成员。[结论]首次在山西白芷上检测到CMV,该研究有助于深入了解CMV的分子进化,为白芷产业的健康发展提供一定启示,也为病毒病的防治提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 白芷 黄瓜花叶病毒 小RNA深度测序
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苜蓿卷叶病毒山西苜蓿分离物外壳蛋白基因序列分析
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作者 杜江 王晨燕 +4 位作者 崔丽艳 马海会 姚东作 王德富 牛颜冰 《山西农业科学》 2023年第8期846-851,共6页
苜蓿(Medicago sativa L.)中蛋白质、维生素等多种营养成分含量丰富,是一种在世界范围内被广泛种植的重要牧草,然而苜蓿卷叶病毒(Alfalfa leafcurlvirus,ALCV)的侵染严重影响了苜蓿的品质和产量。为了为苜蓿产业的抗病毒育种提供一定启... 苜蓿(Medicago sativa L.)中蛋白质、维生素等多种营养成分含量丰富,是一种在世界范围内被广泛种植的重要牧草,然而苜蓿卷叶病毒(Alfalfa leafcurlvirus,ALCV)的侵染严重影响了苜蓿的品质和产量。为了为苜蓿产业的抗病毒育种提供一定启示,为苜蓿病毒病的防治提供一定的理论依据,研究通过双生病毒通用引物(SPG1/SPG2)在山西省晋中市太谷区山西农业大学植物园中表现出卷曲、皱缩症状的苜蓿样品中检测到ALCV的侵染,并进一步利用PCR技术对ALCV山西苜蓿分离物(ALCV-Taigu)的外壳蛋白(Coatprotein,CP)基因全序列进行克隆和比对分析。结果表明,ALCV-Taigu CP基因与ALCV其他株系核苷酸同源性为82.7%~96.6%,氨基酸同源性为82.4%~97.1%。对ALCV-Taigu CP氨基酸序列系统进化分析表明,ALCV-Taigu与法国、西班牙、意大利等欧洲国家和黎巴嫩、伊朗等中东国家的ALCV分离物距离较远,亲缘关系较远;与中国和阿根廷的ALCV分离物距离较近,聚集为一个大分支,亲缘关系较近;ALCV-Taigu与中国苜蓿ALCV-Helinger/N1分离物距离最近,聚为一簇。这是首次在山西苜蓿上检测到ALCV,该研究结果有助于深入了解ALCV的分子进化。 展开更多
关键词 苜蓿 苜蓿卷叶病毒 序列分析 病原鉴定
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无花果病毒CP基因克隆及遗传多样性分析
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作者 陈伟 薛婷 +2 位作者 李亚娟 王瑞鑫 玉山江·麦麦提 《山西农业科学》 2023年第11期1245-1251,共7页
无花果花叶病毒(Fig mosaic virus,FMV)是一种RNA病毒,严重影响无花果的品质与产量。2019—2020年连续2 a从山西省临汾市无花果基地随机采集被FMV感染的新鲜无花果叶片119份,经RT-PCR获得CP基因,并进行序列分析,通过分析FMV分离株的遗... 无花果花叶病毒(Fig mosaic virus,FMV)是一种RNA病毒,严重影响无花果的品质与产量。2019—2020年连续2 a从山西省临汾市无花果基地随机采集被FMV感染的新鲜无花果叶片119份,经RT-PCR获得CP基因,并进行序列分析,通过分析FMV分离株的遗传变异和种群结构,从多维度分析FMV的遗传多样性,旨在为无花果花叶病毒的分类、分子特征、进化机制以及致病机理的研究奠定基础,为解释FMV病毒分子结构、感染率高和进化程度提供有力证据。RT-PCR鉴定结果证实,53份样品为FMV阳性,从阳性样品中分离、测序、克隆得到12个新的FMV分离物;将12个分离物与在线数据比对,获得在线的37个分离物;对49个分离物进行系统发育分析得出,这些分离物来自10个国家,分布范围广,根据亲缘关系分为6个组,且与地理位置无关。进一步分析核酸和氨基酸一致性,49个CP基因核苷酸一致率和氨基酸一致率分别为91.41%~100%和89.33%~100%。结果发现,CP基因在进化过程中具有高度保守性且突变率较低。偏离中立性检验显示,FMV种群极大可能处于种群扩张状态。选择压和重组分析结果表明,负向选择可能是FMV分子变异的重要原因。 展开更多
关键词 无花果 FMV CP基因 遗传多样性
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浅谈组培苗的脱毒及应用
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作者 樊亚敏 周云帆 《现代园艺》 2023年第5期82-84,共3页
病毒是人们已知的最小生物之一,是影响作物产量和质量的主要因素之一。植物一旦感染病毒,造成的经济损失非常大,获得脱毒苗是目前唯一控制病毒传播的重要途径。研究主要阐述了植物脱毒的方法、脱毒苗的检测,以供参考。
关键词 植物病毒 植物脱毒 脱毒苗检测
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基于基因组序列分析的烟草轻绿花叶病毒江苏辣椒分离物侵染性克隆构建 被引量:1
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作者 高晓晓 涂丽琴 +6 位作者 杨柳 刘亚楠 高丹娜 孙枫 李硕 章松柏 季英华 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1494-1502,共9页
【目的】烟草花叶病毒属(Tobamovirus)是危害辣椒、烟草等茄科作物的主要病毒之一,严重影响蔬菜作物的种植和生产。本研究旨在探明侵染江苏省南京市辣椒的烟草轻绿花叶病毒(tobacco mild green mosaic virus,TMGMV)分离物(TMGMV-JS)的... 【目的】烟草花叶病毒属(Tobamovirus)是危害辣椒、烟草等茄科作物的主要病毒之一,严重影响蔬菜作物的种植和生产。本研究旨在探明侵染江苏省南京市辣椒的烟草轻绿花叶病毒(tobacco mild green mosaic virus,TMGMV)分离物(TMGMV-JS)的基因组结构特征、系统进化关系及其致病性,为TMGMV的防控提供科学依据。【方法】从江苏省南京市采集的辣椒病样,提取总RNA,利用TMGMV特异检测引物确认阳性后,设计病毒特异性全长引物扩增TMGMV-JS全基因序列,通过同源重组的方法克隆至pCB301植物表达载体上,获得TMGMV-JS分离物基因组序列和全长cDNA侵染性克隆。BLAST分析TMGMV-JS分离物与已报道分离物的同源性,利用MEGA7软件的邻接法进行系统进化分析。将侵染性克隆通过农杆菌浸润本氏烟和辣椒,经RT-PCR和Western blot检测验证侵染效果,测定TMGMV-JS分离物的致病性。【结果】侵染江苏省南京市辣椒的TMGMV全长序列为6356 nt,编码4个功能蛋白,分别为126K复制相关蛋白、183K复制酶、运动蛋白MP和外壳蛋白CP。同源性分析结果显示TMGMV-JS与重庆分离物TMGMV-TN29(MF139550)同源性最高,厦门分离物(JX534224)次之,系统进化分析结果也显示TMGMV-JS与其他TMGMV聚于同一大分支,其中与重庆、厦门两个分离物在同一小分支,相对近缘。构建的pCB301-TMGMV-JS侵染性克隆载体可以系统侵染本氏烟,引起叶片黄化,植株系统性坏死;也可以系统侵染辣椒,引起叶片斑驳、卷曲和植株矮化等症状。【结论】侵染江苏省南京市辣椒的TMGMV-JS分离物基因组全长6356 nt,与国内重庆、厦门TMGMV分离物具有较近的亲缘关系,同属于一个分支;构建的TMGMV-JS侵染性克隆可以系统侵染本氏烟和辣椒,在本氏烟上会导致系统性坏死。 展开更多
关键词 烟草轻绿花叶病毒 分子特征 侵染性克隆 致病性分析
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