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哺乳动物小卵泡卵母细胞体外成熟的研究进展
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作者 李有为 程亚倬 +2 位作者 商继勇 张廷龙 孙铭菊 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1171-1182,共12页
体外成熟是哺乳动物胚胎工程获得成熟卵母细胞的主要途径,卵母细胞质量直接影响早期胚胎发育,妊娠的建立及维持,胎儿的发育等。哺乳动物卵巢表面数量众多的小卵泡可以作为胚胎工程卵母细胞的来源,但从哺乳动物卵巢获取的卵母细胞成熟差... 体外成熟是哺乳动物胚胎工程获得成熟卵母细胞的主要途径,卵母细胞质量直接影响早期胚胎发育,妊娠的建立及维持,胎儿的发育等。哺乳动物卵巢表面数量众多的小卵泡可以作为胚胎工程卵母细胞的来源,但从哺乳动物卵巢获取的卵母细胞成熟差异较大,存在处于发育各个时期的卵母细胞,小卵泡卵母细胞体外成熟质量差,发育能力不足。如何提高小卵泡卵母细胞体外成熟的发育能力以充分挖掘优良母畜的遗传资源,提高胚胎工程效率成为研究热点。基于此,文章概述哺乳动物小卵泡卵母细胞体外成熟的研究进展,比较大、小卵泡卵母细胞物质积累差异、卵泡的卵泡液成分及含量差异以及卵泡颗粒细胞和卵丘细胞的差异,分析哺乳动物小卵泡卵母细胞体外成熟质量差的原因,分析总结提高哺乳动物小卵泡体外成熟卵母细胞发育能力的措施,包括抑制核成熟、成熟前培养、颗粒细胞及卵丘细胞与卵母细胞共培养,期望能够为小卵泡卵母细胞发育调控机制的研究及发育能力的提高提供理论指导。 展开更多
关键词 哺乳动物 小卵泡 卵母细胞 体外成熟
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外泌体调控胚胎发育的研究进展
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作者 卢永昌 甘建宇 +1 位作者 黄思秀 洪林君 《家畜生态学报》 北大核心 2024年第2期91-96,共6页
外泌体是胚胎生长发育的重要调控因子之一,在胚胎和母体组织的交流过程中发挥主要作用,并对胚胎的生长发育有着至关重要的影响。不同来源的外泌体在母胚交流、胚胎发育等不同生理阶段中发挥着不同程度的介导作用。外泌体中的一些蛋白质... 外泌体是胚胎生长发育的重要调控因子之一,在胚胎和母体组织的交流过程中发挥主要作用,并对胚胎的生长发育有着至关重要的影响。不同来源的外泌体在母胚交流、胚胎发育等不同生理阶段中发挥着不同程度的介导作用。外泌体中的一些蛋白质、RNA或其他因子通过调节胚胎微环境影响胚胎的生长发育。该文综述了外泌体中RNA及蛋白影响胚胎生长发育的调控作用,为深入探究外泌体对胚胎发育的影响机制提供参考和借鉴。 展开更多
关键词 外泌体 胚胎发育 蛋白质 RNA
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牛体外胚胎冷冻在生产中的应用效果
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作者 孙伟 赵勇超 +8 位作者 张浩波 王超 郭雅欣 王乐群 王飞飞 刘涛 张博钊 乔嘉明 李喜和 《中国农学通报》 2024年第17期142-148,共7页
本研究旨在评估不同牛体外胚胎冷冻保存方案的效率,以优化技术流程。研究比较了仪器玻璃化与手工玻璃化冷冻牛体外胚胎的2 h复苏率、24 h孵化率及45 d初检妊娠率;比较2种程序化冷冻方案冷冻牛体外胚胎的2 h复苏率、24 h孵化率及48 h孵化... 本研究旨在评估不同牛体外胚胎冷冻保存方案的效率,以优化技术流程。研究比较了仪器玻璃化与手工玻璃化冷冻牛体外胚胎的2 h复苏率、24 h孵化率及45 d初检妊娠率;比较2种程序化冷冻方案冷冻牛体外胚胎的2 h复苏率、24 h孵化率及48 h孵化率;对比牛体外鲜胚、体外冻胚以及体内冻胚45 d移植妊娠率。仪器玻璃化冷冻方案与程序化冷冻方案解冻胚胎的2 h复苏率(72.91%±5.52%vs.70.91%±6.75%)、24 h孵化率(60.42%±6.33%vs.58.18%±5.62%)均不具有显著性差异(P>0.05)。程序化冷冻中过蔗糖方案的冷冻-解冻胚胎的24 h孵化率(44.23%±3.33%vs.37.50%±3.58%)显著高于不经过蔗糖的冷冻方案(P<0.05)。牛体外鲜胚、体外冻胚以及体内冻胚移植45 d初检妊娠率分别为56.81%±6.27%、45.00%±6.13%、49.41%±7.55%。在实际应用中,牛体外生产胚胎的冷冻效果与体内胚胎相比仍有一定的差距。综上所述,在牛体外胚胎的冷冻保存中,仪器玻璃化与手工玻璃化的效果相当,而程序化冷冻方案中使用高浓度蔗糖可以显著提升冷冻效率。 展开更多
关键词 牛体外胚胎 玻璃化 程序化 妊娠率 冷冻保存
原文传递
OPU卵母细胞体外成熟体系的优化研究进展 被引量:3
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作者 张培培 郝海生 +4 位作者 杜卫华 朱化彬 李树静 余文莉 赵学明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1359-1369,共11页
近年来,体外胚胎生产(in vitro embryo production,IVP)技术取得了很大进步,尤其是卵母细胞活体采卵(ovum pick-up,OPU)技术得到广泛应用。OPU是20世纪90年代发展起来的一项新型的能获得优秀种母牛卵母细胞的技术,该技术在动物胚胎生产... 近年来,体外胚胎生产(in vitro embryo production,IVP)技术取得了很大进步,尤其是卵母细胞活体采卵(ovum pick-up,OPU)技术得到广泛应用。OPU是20世纪90年代发展起来的一项新型的能获得优秀种母牛卵母细胞的技术,该技术在动物胚胎生产和发育机理研究及人类辅助生育技术临床实践中有着广阔的应用前景。可以提高种母畜和珍贵野生动物的资源保护效率,提高优良母畜的遗传潜力,为奶牛生物技术发展提供必要的支撑技术。卵母细胞的质量是IVP系统取得成功的关键,卵母细胞的体外成熟(in vitro maturation,IVM)是成功受精和胚胎发育必不可少的步骤。卵母细胞IVM完成了卵母细胞的细胞质和核成熟,准备了发育至胚胎基因组激活所必需的所有必要成分。但体外成熟的卵母细胞发育能力低于体内成熟卵母细胞,卵母细胞减数分裂和细胞核质成熟不同步,氧化应激损伤等对卵母细胞成功受精和胚胎发育非常重要,因此,需要进一步提高卵母细胞体外成熟能力,以改善牛体外胚胎生产系统。本文从卵母细胞体外成熟面临的核质成熟不同步,氧化应激等问题进行概述,同时,叙述C型钠肽、褪黑素、FLI等物质对卵母细胞IVM的改善作用,以期为OPU卵母细胞体外成熟体系的优化提供一定的参考。 展开更多
关键词 OPU 卵母细胞 体外成熟
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添加胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠对牛体外胚胎生产、低温保存及常规冷冻效果的影响 被引量:1
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作者 张浩波 赵善江 +7 位作者 王欢 徐茜 冯志强 王婉洁 巩建飞 庞云渭 杜卫华 朱化彬 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期4077-4084,共8页
【目的】探究添加胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠(insulin-transferrin-sodium selenite,ITS)对牛体外胚胎生产、4℃低温保存及常规程序冷冻效果的影响,以期应用ITS提高牛体外胚胎的生产及保存效果。【方法】对屠宰场卵巢来源的牛卵母细胞进... 【目的】探究添加胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠(insulin-transferrin-sodium selenite,ITS)对牛体外胚胎生产、4℃低温保存及常规程序冷冻效果的影响,以期应用ITS提高牛体外胚胎的生产及保存效果。【方法】对屠宰场卵巢来源的牛卵母细胞进行体外受精,①研究在胚胎体外培养后期液M2中添加ITS对囊胚率的影响,试验分为M2中添加ITS组(M2+ITS)和M2中未添加ITS的对照组(M2-control);②研究在M2中添加ITS后进一步在前期培养液M1中添加ITS对早期胚胎发育的影响,试验分为M1和M2中均添加ITS组(M1+M2+ITS)和仅M2中添加ITS的对照组(M1-control);③在三气培养条件下对ITS改善胚胎发育的效果进行评估,试验分为添加ITS组(ITS)和未添加ITS的对照组(control),以上各组均统计卵裂率、7 d囊胚率及总囊胚率;④将获得的7 d牛囊胚在添加ITS的M2保存液(Hypo-ITS组)中低温保存(4℃)24 h后复苏培养,或者在添加ITS(Cryo-ITS组)的冷冻保存液中常规程序冷冻解冻后培养,以低温保存液中未添加ITS(Hypo-control组)和冷冻液中未添加ITS(Cryo-control组)为对照,统计胚胎的存活率和孵化率。【结果】与对照组相比,M2+ITS和M1+M2+ITS组的7 d囊胚率均显著提高(P<0.05);三气培养条件下,ITS组7 d囊胚率显著提高(P<0.05)。Hypo-ITS组4℃低温保存复苏的牛胚胎存活率与对照组差异不显著(P>0.05),但孵化率显著高于对照组(P<0.05);Cryo-ITS组的常规程序冷冻解冻的牛胚胎存活率及孵化率与对照组均无显著差异(P>0.05)。【结论】ITS可作为添加剂及低温保护剂用于提高牛体外胚胎生产及低温保存效果,但在常规程序化冷冻液中添加ITS对牛体外胚胎常规程序冷冻效果的提升并不明显。 展开更多
关键词 牛体外胚胎 胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠(ITS) 低温保存 常规程序冷冻
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动物早期胚胎发育中表观重编程的机制 被引量:1
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作者 张宸艺博 余彤 +3 位作者 任斌斌 郑睿智 朱文治 苏建民 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期4898-4909,共12页
哺乳动物早期胚胎发育过程中,受精卵经历了一系列表观遗传重编程事件,去除了雌雄原核的表观遗传记忆,从而建立了胚胎的全能性。然而,这些重编程事件的进行必须受到种属特异性的精确调控,而相关的调控机制仍需进一步研究。随着分子生物... 哺乳动物早期胚胎发育过程中,受精卵经历了一系列表观遗传重编程事件,去除了雌雄原核的表观遗传记忆,从而建立了胚胎的全能性。然而,这些重编程事件的进行必须受到种属特异性的精确调控,而相关的调控机制仍需进一步研究。随着分子生物学技术的不断发展,特别是微量全基因组染色质分析技术的突破性进展,哺乳动物早期胚胎发育中的表观遗传重编程调控网络研究取得了重大进展。本文旨在介绍模式动物和多种家畜的表观遗传重编程机制的进展,包括DNA甲基化、组蛋白修饰、染色质开放性和染色质三维结构等方面的研究。 展开更多
关键词 早期胚胎发育 表观遗传重编程 DNA甲基化 组蛋白修饰 染色质结构
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微流体技术在家畜体外胚胎生产中的应用进展
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作者 陈思颍 孙雅雯 +6 位作者 李伉 刘硕 郝海生 杜卫华 邹惠影 朱化彬 庞云渭 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期4889-4897,共9页
体外胚胎生产技术是提高良种家畜繁殖效率的关键核心技术之一。然而,由于体内、外环境差异造成的卵母细胞成熟质量差、体外胚胎发育率低等问题严重制约了该技术的产业化应用。微流体技术是利用尺寸为几十到几百微米的微通道精确控制和... 体外胚胎生产技术是提高良种家畜繁殖效率的关键核心技术之一。然而,由于体内、外环境差异造成的卵母细胞成熟质量差、体外胚胎发育率低等问题严重制约了该技术的产业化应用。微流体技术是利用尺寸为几十到几百微米的微通道精确控制和操纵亚微米结构流体的科学与技术,由于其具有样品消耗少、分析速度快、高通量和高集成化等特点,正广泛应用于化学、医学、生命科学等领域。在家畜体外胚胎生产若干技术环节中,微流体技术显示出巨大的应用前景。本文综述了微流体技术在卵母细胞选择培养、精子分选、体外受精、体外胚胎培养以及配子和胚胎超低温冷冻保存中的应用进展,为提升家畜体外胚胎生产效率提供新思路。 展开更多
关键词 微流体 卵母细胞 精子 胚胎 冷冻
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TET去甲基化酶对猪卵母细胞发育的影响
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作者 黎明国 李清春 +14 位作者 陈鑫 卢世豪 何凡 祁梦凡 张化鹏 任玉军 张庆泽 符彬彬 徐梦思 艾子凯 闫坤 冯赟 华再东 黄涛 毕延震 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1907-1917,共11页
【目的】研究TET(ten-eleven translocation)去甲基化酶对猪卵母细胞发育的影响。【方法】将收集的猪卵丘-卵母细胞复合体(COCs)置于不同浓度(0(对照组)、100、200和400μmol/L)Bobcat339抑制剂的体外成熟培养液中培养42 h,测量卵丘扩... 【目的】研究TET(ten-eleven translocation)去甲基化酶对猪卵母细胞发育的影响。【方法】将收集的猪卵丘-卵母细胞复合体(COCs)置于不同浓度(0(对照组)、100、200和400μmol/L)Bobcat339抑制剂的体外成熟培养液中培养42 h,测量卵丘扩展直径,统计成熟率,确定最小有效浓度。在体外成熟培养液中培养27 h后,利用免疫荧光(IF)检测5-甲基胞嘧啶(5mC)与5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)信号强度以及纺锤体组装情况;利用DCFH-DA染料检测卵母细胞活性氧(ROS)水平;利用JC-1染色法检测线粒体膜电位水平(MMP);利用ATP检测试剂检测卵母细胞ATP水平;利用实时荧光定量PCR检测42 h时COCs卵丘扩展相关基因表达水平和27 h时卵母细胞抗氧化相关基因表达水平。【结果】与对照组相比,100、200和400μmol/L组卵丘细胞扩展水平均极显著降低(P<0.01),100、200和400μmol/L组成熟率显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),确定最小有效浓度为100μmol/L,后续试验均用该浓度。IF检测结果显示,与对照组相比,27 h时100μmol/L组卵母细胞中5mC信号强度显著升高(P<0.05),而5hmC信号强度没有显著降低(P>0.05)。与对照组相比,27 h时100μmol/L组卵母细胞纺锤体排列紊乱,组装异常。与对照组相比,ROS水平极显著升高(P<0.01),MMP和ATP水平极显著降低(P<0.01)。与对照组相比,42 h时100μmol/L组COCs中卵丘扩展相关基因透明质酸合成酶2(Has2)表达水平显著降低(P<0.05),穿透素3(Ptx3)基因表达量极显著降低(P<0.01),27 h时100μmol/L组卵母细胞中抗氧化相关基因超氧化物歧化酶1(Sod1)与Sod 2表达水平显著降低(P<0.05)。【结论】TET去甲基化酶通过清除猪卵母细胞中的5mC,降低ROS水平,提高MMP水平来指导纺锤体正常组装排列,维持COCs的正常扩展,保证猪卵母细胞正常成熟。 展开更多
关键词 猪卵母细胞 TET去甲基化酶 甲基化 纺锤体 活性氧 线粒体膜电位
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小鼠体外受精代孕鼠体重和饲料对其生产的影响 被引量:1
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作者 王倩 刘亮亮 《中南农业科技》 2023年第8期251-253,共3页
对C57BL/6J小鼠进行体外受精,将相同数量、质量的胚胎移植至不同体重(22~27 g、28~33 g、34~39 g)的代孕母鼠单侧子宫,并将移植后的代孕母鼠分别饲养繁殖饲料和维持饲料。分析不同体重的代孕母鼠和喂食不同饲料对窝产崽数和妊娠率的影... 对C57BL/6J小鼠进行体外受精,将相同数量、质量的胚胎移植至不同体重(22~27 g、28~33 g、34~39 g)的代孕母鼠单侧子宫,并将移植后的代孕母鼠分别饲养繁殖饲料和维持饲料。分析不同体重的代孕母鼠和喂食不同饲料对窝产崽数和妊娠率的影响。结果表明,相同体重组的代孕母鼠,繁殖饲料组和维持饲料组的窝产崽数及妊娠率未见显著差异(P>0.05)。代孕母鼠组体重在22~27 g的窝产崽数和妊娠率显著低于其他2组(P<0.05)。代孕母鼠组体重在28~33 g的窝产崽数(5.70±1.66)只、妊娠率95%±22%,与34~39 g组的窝产崽数(5.30±2.08)只、妊娠率90%±31%均无显著差异。但是34~39 g代孕母鼠组偶尔会出现幼崽被母鼠压死的情况。由此可知,妊娠期内喂食不同饲料对代孕母鼠的生产影响不大,22~27 g代孕母鼠组的生产效率最低,28~33 g代孕母鼠组的生产效率最高。 展开更多
关键词 小鼠 体外受精 代孕鼠 体重 饲料 生产
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妊娠期牦牛子宫阜组织结构观察
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作者 沈莹莹 付长其 +4 位作者 彭巍 舒适 王国文 黄荣 张君 《青海畜牧兽医杂志》 2023年第1期25-34,共10页
为了研究不同妊娠期牦牛子宫阜组织结构的特征,本实验采用HE染色分别对15 d、30 d、35 d、45 d、60 d、75 d、90 d、100 d、105 d和120 d的妊娠牦牛子宫阜进行切片染色并在显微镜下观察。研究发现牦牛不同妊娠阶段的子宫阜横切和纵切均... 为了研究不同妊娠期牦牛子宫阜组织结构的特征,本实验采用HE染色分别对15 d、30 d、35 d、45 d、60 d、75 d、90 d、100 d、105 d和120 d的妊娠牦牛子宫阜进行切片染色并在显微镜下观察。研究发现牦牛不同妊娠阶段的子宫阜横切和纵切均主要见胎儿—母体连接组织,由呈索状排列的母体纤维构成结构支架,为组织提供支撑作用,其内可见毛细血管分布。随着妊娠时间的延长,子宫阜腔隙内间叶细胞、滋养外胚层和双核巨细胞增多,子宫阜纤维组织间腔隙逐渐扩大,纤维索也逐渐变粗。 展开更多
关键词 牦牛 妊娠期 子宫阜 组织结构
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绵羊胚胎移植技术要点及应用前景 被引量:1
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作者 张丽娟 《河南畜牧兽医》 2023年第10期29-29,共1页
随着科学技术的不断发展,利用绵羊的繁殖生理特点,在绵羊的繁殖过程中采用胚胎移植技术提高绵羊的繁殖和育种工作水平,以繁殖性能较低的品种或个体母羊为受体,用外科的方式将供体所产生的胎儿移植到接收者的子宫中,借助不良的母羊之腹,... 随着科学技术的不断发展,利用绵羊的繁殖生理特点,在绵羊的繁殖过程中采用胚胎移植技术提高绵羊的繁殖和育种工作水平,以繁殖性能较低的品种或个体母羊为受体,用外科的方式将供体所产生的胎儿移植到接收者的子宫中,借助不良的母羊之腹,怀上优秀的个体之胎,从而最大限度地提高养羊的经济效益。 展开更多
关键词 胚胎移植技术 繁殖性能 繁殖过程 生理特点 育种工作 绵羊 养羊 最大限度
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德州驴发情周期中卵泡动力学和激素变化规律的研究 被引量:11
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作者 葛利江 徐常林 +2 位作者 石瑞青 谭景和 罗明久 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1256-1263,共8页
本研究旨在揭示德州母驴发情季节的卵巢卵泡波变化特点以了解其卵泡的募集、选择、优势化、闭锁或者排卵,为驴人工授精和超数排卵提供可靠依据。本研究在德州驴发情季节(5~8月份)用直肠超声探查法每日检测5头德州母驴的10个排卵间隔的... 本研究旨在揭示德州母驴发情季节的卵巢卵泡波变化特点以了解其卵泡的募集、选择、优势化、闭锁或者排卵,为驴人工授精和超数排卵提供可靠依据。本研究在德州驴发情季节(5~8月份)用直肠超声探查法每日检测5头德州母驴的10个排卵间隔的卵泡发育动态。同时每日采血,用放免法(RIA)检测E2、FSH、LH和IGF-1浓度。研究结果发现:(1)驴的排卵间隔平均为(23.22±0.28)d,每个周期中存在2个卵泡波,其中有4个展示主-主卵泡波,有6个展示次-主卵泡波。(2)第1波和第2波开始出现募集的时间分别在排卵后的第1和第(10.2±1.4)天,募集的卵泡数分别为(5.2±1.2)和(4.0±0.3)个,选择的卵泡数分别是(2.3±0.5)和(2.5±0.4)个。第1和第2卵泡波开始优势化的时间分别在排卵后的第(5.8±0.6)和第(18.1±1.4)天。波峰平均出现时间分别为第(7.67±0.24)和第(23.22±0.28)天。波峰时优势卵泡平均最大直径分别为(26.44±2.37)和(40.7±2.45)mm。第1和第2波最大优势卵泡每日平均生长率分别为(2.01±0.5)和(3.15±0.6)mm.d-1。(3)黄体(CL)最大直径平均为(37.61±1.58)mm,CL平均持续时间为(17.30±1.62)d。(4)E2浓度从排卵前3d至排卵后2d的发情期内均很高,平均维持在(46.47±9.53)pg.mL-1,在排卵前2d达到峰值(62.84±4.89)pg.mL-1。(5)由于E2的负反馈作用,FSH浓度到优势卵泡最后阶段(即第7天闭锁或第23或24天排卵时)大幅度下降。(6)LH在排卵前几天迅速升高,在排卵后第2天达到峰值(4.69±0.43)mIU.mL-1。(7)IGF-1的升降状况与E2基本相同,在排卵前1d达到峰值(47.9±3.91)ng.mL-1。通过上述卵泡和激素动态学变化,本研究得出下述结论:驴的卵巢卵泡发育是以卵泡波形式进行的,每个发情周期中最常出现的是2个卵泡波;排卵发生于发情结束前2d;E2和IGF-1调节驴的发情活动;FSH调节小卵泡的募集;LH增高与排卵有关。 展开更多
关键词 德州驴 超声检查 卵泡波 生殖激素 黄体
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昆明小鼠早期胚胎发育时程 被引量:11
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作者 李子义 谭景和 +4 位作者 孙兴参 刘忠华 李光鹏 周琪 贺桂馨 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期597-601,共5页
以昆明种小鼠为对象,在严格控光条件下,对交配后阴道栓形成时间、排卵时间、精子入卵与原核形成时间以及2-细胞至囊胚的发育时程等进行了系统研究。结果如下:(1)从注射hCG 当天(0 d)21:00(hCG后6 h)至次日(第1 天)1:00(hCG 后10 h),有84... 以昆明种小鼠为对象,在严格控光条件下,对交配后阴道栓形成时间、排卵时间、精子入卵与原核形成时间以及2-细胞至囊胚的发育时程等进行了系统研究。结果如下:(1)从注射hCG 当天(0 d)21:00(hCG后6 h)至次日(第1 天)1:00(hCG 后10 h),有84.2% 的超排小鼠形成阴道栓;(2)大部分小鼠(66% ~100% )排卵从hCG后第1 天2:00(hCG 后11 h)开始,至3:00~4:00(hCG后12~13 h)结束;(3)从hCG 后第1 天7:00(hCG后16 h)至11:00(hCG 后20 h),小鼠卵受精率为5.6% ~82.4% ;(4)从hCG后第1 天7:00(hCG 后16 h)至11:00(hCG 后20 h),原核形成率为4.4% ~67.5% ;(5)从hCG 后第1 天21:00(hCG 后30 h)至第2 天1:00(hCG后34 h),2-细胞形成率为14.9% ~83.1% ;hCG后第2 天19:00(hCG后52 h)至23:00(hCG后56 h),4-细胞形成率为12.9% ~85.7% ;hCG 后第3 天6:00(hCG后63 h)至10:00(hCG 后67 h),8-细胞形率为12.8% ~88.2% ;(6)从hCG 后第3 天10:00(hCG 后67 h)至24:00(hCG后81 h),8~16 细胞(早期桑葚胚)形成率由100% 下降到42.9% ;从hCG 后第3 天24:00(hCG 后81 h)至第4 天4:00(hCG后85 h),17~32 细胞(晚期桑葚胚)形成率由57.1% 增加到90.0% ;(7)从hCG 后第4 天6:00(hCG后87 h)至8:00(hCG后89 h),囊胚形成率从11.4% 上升到60.9% 。 展开更多
关键词 发育时程 早期胚胎 小鼠 胚胎发育
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影响体外培养兔胚发育和兔类ES细胞分离的若干因素 被引量:16
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作者 赖良学 郑瑞珍 +1 位作者 秦鹏春 孙方臻 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1996年第1期16-21,共6页
本试验系统地比较了影响兔囊胚体外培养和免类ES细胞系分离的几个主要因素。结果表明,3种不同糖浓度(4.5,1.0,0.2g/L)在48h内对胚胎贴壁均无显著影响。在高糖DMEM中,早期胚胎内细胞团(innercell... 本试验系统地比较了影响兔囊胚体外培养和免类ES细胞系分离的几个主要因素。结果表明,3种不同糖浓度(4.5,1.0,0.2g/L)在48h内对胚胎贴壁均无显著影响。在高糖DMEM中,早期胚胎内细胞团(innercellmass,ICM)增殖速度最快,分化也快;超低糖组,ICM增殖缓慢,分化出现时间较晚;低糖组,ICM既能保持较快的增殖速度,又能维持较长时间的未分化状。高糖组和低糖组的ES细胞样集落的传代能力相似,可达6~7代,超低糖组中不超过2代。胰岛素能促进ICM的增殖,并可提高传代过程中ES细胞样克隆的形成率。在小鼠胚胎原代成纤维细胞(MEF)和一种经白血病抑制因子转化了的小鼠成纤维细胞系(SNL)上,ICM都能维持较快的增殖速度,在家兔胚胎原代成纤维细胞(REF)中ICM增殖较慢,无饲养细胞条件下,ICM存活率低,生长状况不佳。传代能力,REF要比MEF和SNL低,且主要形成上皮样集落。作者根据以上实验结果认为,用低糖DMEM为基本培养基,再加入胰岛素,在MEF或SNL上培养切割胚胎和连续传代的技术路线是较为可行的。 展开更多
关键词 ES细胞 葡萄糖 胰岛素 胚胎发育
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体外受精生产犏牛胚胎与移植试验研究 被引量:10
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作者 孙永刚 徐惊涛 +1 位作者 才让东智 马志杰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期719-726,共8页
旨在探讨牦牛和黄牛种间体外受精和胚胎发育效果。通过研究黄牛和牦牛卵母细胞体外成熟时间、卵母细胞质量、精子处理方式、受精卵培养体系及冷冻—解冻后胚胎活力。结果表明:随着体外培养时间的延长,卵母细胞第一极体排出率增加,A级卵... 旨在探讨牦牛和黄牛种间体外受精和胚胎发育效果。通过研究黄牛和牦牛卵母细胞体外成熟时间、卵母细胞质量、精子处理方式、受精卵培养体系及冷冻—解冻后胚胎活力。结果表明:随着体外培养时间的延长,卵母细胞第一极体排出率增加,A级卵母细胞培养24h第一极体的排出率显著高于B级和C级卵母细胞,但相同体外成熟时间和相同分级的黄牛和牦牛卵母细胞第一极体的排出率差异不显著。用Percoll液梯度离心法和BO液洗涤法分别处理牦牛精液和黄牛精液后通过种间体外受精,BO液洗涤法处理的精液受精后的卵裂率显著高于Per-coll液梯度离心法处理精液受精后的卵裂率,而2种方法处理精液受精后其囊胚率差异不显著。2种方法(黄牛♀×牦牛♂vs.牦牛♀×黄牛♂)生产的早期犏牛胚胎用输卵管上皮细胞共培养和卵丘细胞共培养其囊胚率和孵化囊胚率都显著高于SOF液培养,而3种培养方法培养的早期犏牛胚胎的卵裂率差异不显著。2种IVF胚胎冷冻解冻后形态正常胚(90.52%±5.94%vs.91.53%±7.34%)、24h的存活率(61.45%±8.44%vs.64.72%±11.82%)和48h的存活率(44.81%±6.21%vs.48.47%±10.04%)均差异不显著。将黄牛♀×牦牛♂IVF犏牛胚胎移植到自然发情4头受体黄牛和3头受体犏牛,4头牛怀孕并产犊,妊娠率为57.14%,平均妊娠期258d。 展开更多
关键词 体外成熟 种间受精 犏牛胚胎 胚胎移植
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组织蛋白酶对成年绵羊卵母细胞体外发育能力的影响 被引量:7
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作者 刘志涛 田树军 +4 位作者 孙树春 陈晓勇 张艳普 胡媛媛 郭军艾 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1704-1711,共8页
本研究旨在观察绵羊卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSS、CTSB)的mRNA在体外成熟过程中的表达规律,探明卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSS、CTSB)mRNA的表达与卵母细胞体外发育能力之间的相关性。采用Rea-ltimePCR方法检测绵羊在体外成熟0、8、16和24h... 本研究旨在观察绵羊卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSS、CTSB)的mRNA在体外成熟过程中的表达规律,探明卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSS、CTSB)mRNA的表达与卵母细胞体外发育能力之间的相关性。采用Rea-ltimePCR方法检测绵羊在体外成熟0、8、16和24h的卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSB、CTSS)的mRNA表达水平,以及在成熟液中添加组织蛋白酶抑制剂(E-64)后卵丘细胞中CTSB和CTSS的mRNA表达量在体外成熟前及体外成熟后的表达水平,并测定在成熟液中添加1、5、10μmol.L-1 E-64对卵母细胞成熟率、受精率及囊胚发育率的影响。结果,卵丘细胞中的CTSS和CTSB mRNA表达均随着体外成熟时间的增加(IVM 0h、IVM 8h和IVM 16h)呈下降的趋势(P<0.01)。添加5和10μmol.L-1 E-64组的卵丘细胞中CTSS和CTSB mRNA表达水平较对照组和1μmol.L-1组均显著性降低(P<0.01),而5和10μmol.L-1组间的CTSS和CTSB mRNA表达水平无显著差异(P>0.05)。成熟液中添加5和10μmol.L-1的E-64组的囊胚发育率(26.82%和30.95%)显著高于1μmol.L-1组和对照组(18.23%和15.63%,P<0.05),但5和10μmol.L-1组对卵母细胞的成熟率及卵裂率与1μmol.L-1组和对照组间无显著性差异(P>0.05)。结果表明,绵羊卵丘细胞中CTSS和CTSB的mRNA表达水平在体外成熟过程中呈下降趋势,其mRNA表达水平与胚胎的发育能力呈负相关;组织蛋白酶特异性抑制剂E-64可下调绵羊卵丘细胞中CTSS和CTSB的mRNA表达水平,并提高卵母细胞随后的体外发育能力。 展开更多
关键词 E-64 卵丘细胞 组织蛋白酶 体外发育 REAL-TIMEPCR
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孵化期间蛋内组成成分变化规律的研究 被引量:5
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作者 杨海明 王志跃 +2 位作者 朱小惠 于金成 刘蓓一 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期77-79,83,共4页
通过测定鸡蛋蛋白、蛋黄及胚胎中钙、粗蛋白和粗脂肪含量,探讨孵化期间蛋内组成成分的变化规律。结果表明:胚胎发育过程中蛋白提供20.2%的钙,蛋黄提供10.0%的钙,蛋白和蛋黄钙含量的变化具有一定的互补性;胚胎中钙含量不断增加。蛋白中... 通过测定鸡蛋蛋白、蛋黄及胚胎中钙、粗蛋白和粗脂肪含量,探讨孵化期间蛋内组成成分的变化规律。结果表明:胚胎发育过程中蛋白提供20.2%的钙,蛋黄提供10.0%的钙,蛋白和蛋黄钙含量的变化具有一定的互补性;胚胎中钙含量不断增加。蛋白中粗蛋白含量高,粗脂肪含量低,粗蛋白与粗脂肪含量变化趋势基本相反。除12胚龄外,蛋黄中粗脂肪含量不断降低;18-21胚龄是脂肪代谢旺盛期。胚胎粗蛋白含量不断降低,粗脂肪含量不断增加,两者呈负相关。 展开更多
关键词 胚胎发育 粗蛋白 粗脂肪
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春冬两季受体山羊同期发情和胚胎移植效果研究 被引量:6
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作者 陈静 黄勇富 +4 位作者 周鹏 刘良佳 黎年富 孙晓燕 赵金红 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期36-39,共4页
采用放置CIDR结合注射PMSG方法分别在春季和冬季对154只受体山羊进行同期发情处理,并在发情后第7天进行胚胎移植.结果表明:处理羊只春冬两季的同期发情率分别为90.54%和75.00%;有效发情率分别为81.08%和60.00%;妊娠率分别为61.67%和45.8... 采用放置CIDR结合注射PMSG方法分别在春季和冬季对154只受体山羊进行同期发情处理,并在发情后第7天进行胚胎移植.结果表明:处理羊只春冬两季的同期发情率分别为90.54%和75.00%;有效发情率分别为81.08%和60.00%;妊娠率分别为61.67%和45.83%;产羔率分别为75.00%和54.17%,差异均极具有统计学意义(p<0.01);春季和冬季发情羊排卵并形成功能黄体的比率分别为89.55%和80.00%,差异不具有统计学意义(p>0.05).说明季节对山羊同期发情和胚胎植移效果有一定的影响,但对已发情的羊只形成功能黄体比率影响不明显. 展开更多
关键词 季节 山羊 同期发情 胚胎移植
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家兔桑椹胚和早期囊胚在饲养层表面的贴壁行为 被引量:7
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作者 赖良学 郑瑞珍 +1 位作者 秦鹏春 孙方臻 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期161-165,共5页
探讨了不同状态家兔3日龄桑椹胚和4日龄囊胚在饲养层上的贴壁规律。结果表明,去除或保留透明带和胶膜的全胚贴壁最晚,离散胚在培养24h内即可贴壁,切割胚贴壁大多数发生于体外培养24~48h之间。离散胚和切割胚都可能在培养... 探讨了不同状态家兔3日龄桑椹胚和4日龄囊胚在饲养层上的贴壁规律。结果表明,去除或保留透明带和胶膜的全胚贴壁最晚,离散胚在培养24h内即可贴壁,切割胚贴壁大多数发生于体外培养24~48h之间。离散胚和切割胚都可能在培养12h后重新聚集成中空的亚囊胚结构。亚囊胚的贴壁过程是某一部位首先附着于饲养层表面,然后滋胚层铺展形成向下的拉力,使其全部贴壁。 展开更多
关键词 囊胚 桑椹胚 贴壁 饲养层
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酉州乌羊不同季节超数排卵的试验研究 被引量:6
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作者 高立芳 黄勇富 +5 位作者 任航行 周鹏 刘良佳 孙晓燕 黎年富 赵金红 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期52-55,共4页
目的:探讨不同季节对酉州乌羊超数排卵的影响.方法:选择酉州乌羊作为供体,采用CIDR+PG+FSH法进行超数排卵处理,以快速获得酉州乌羊胚胎,统计胚胎回收数、可用胚数、退化胚数及可利用率.结果:5月、12月2次超排分别回收胚胎273枚、258枚,... 目的:探讨不同季节对酉州乌羊超数排卵的影响.方法:选择酉州乌羊作为供体,采用CIDR+PG+FSH法进行超数排卵处理,以快速获得酉州乌羊胚胎,统计胚胎回收数、可用胚数、退化胚数及可利用率.结果:5月、12月2次超排分别回收胚胎273枚、258枚,平均回收胚胎5月[(13.00±5.15)枚/只]略高于12月[(10.44±4.07)枚/只],但差异不具有统计学意义(p>0.05);可用胚胎分别为247枚、210枚,平均可用胚胎分别为5月[(11.76±5.73)枚/只]显著高于12月[(8.52±4.98)枚/只],差异具有统计学意义(p<0.05),胚胎可用率分别为90.48%和81.40%.结论:不同季节对酉州乌羊超数排卵的可用胚数量有一定影响. 展开更多
关键词 酉州乌羊 超数排卵 胚胎 不同季节
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