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基于非靶向代谢组学探究水牛唾液和血清中的发情标志物
1
作者 余洲 杨柏高 +8 位作者 李崇阳 曹建华 牛一凡 覃广胜 王旭光 万鹏程 梁淦 赵学明 阿布力孜·吾斯曼 《中国草食动物科学》 CAS 北大核心 2024年第5期11-23,共13页
在现代化规模养殖中,水牛发情不明显的问题日益突出。研究旨在利用高通量非靶向代谢组学分析不同发情阶段水牛唾液和血清中代谢物的差异。在相同的饲养管理条件下,选择15头尼里-拉菲水牛,每头注射氯前列醇4 mL,注射当天计为第0天。分别... 在现代化规模养殖中,水牛发情不明显的问题日益突出。研究旨在利用高通量非靶向代谢组学分析不同发情阶段水牛唾液和血清中代谢物的差异。在相同的饲养管理条件下,选择15头尼里-拉菲水牛,每头注射氯前列醇4 mL,注射当天计为第0天。分别在水牛发情前期(第1天)、发情期(第3天)、发情后期(第6天)早上饲喂之前(08:00-11:00)采集唾液和血清,样品处理后采用非靶向代谢组学检测。结果显示,不同发情阶段水牛的唾液和血清中均存在差异代谢物,发情期/发情前期水牛唾液中共鉴定出30种显著差异代谢物,血清中共鉴定出85种显著差异代谢物;发情期/发情后期水牛唾液中共鉴定出8种显著差异代谢物,血清中共鉴定出66种显著差异代谢物。这些差异代谢物主要富集在胰高血糖素信号通路、磷酸戊糖途径、甘油酯代谢等通路上。唾液代谢物与血清代谢物之间存在相关性。唾液中的差异代谢物D-2-磷酸甘油酸、L-丙酰肉碱、白三烯d4和8-异前列腺素a1可能作为水牛发情生物标志物的关键代谢物。 展开更多
关键词 水牛 发情鉴定 血清 唾液 代谢组学
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不同发情阶段水牛唾液的DIA定量蛋白组学分析
2
作者 余洲 杨柏高 +5 位作者 李崇阳 张培培 曹建华 牛一凡 覃广胜 赵学明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期5072-5084,共13页
旨在利用高通量DIA定量蛋白组学分析不同发情阶段水牛唾液中蛋白的差异。本研究将15头体况相近(平均体重为650~750 kg),发情正常,健康状态良好的2~5胎次的尼里-拉菲母水牛作为研究对象,在相同的管理条件下,对其注射氯前列醇并计为第0天... 旨在利用高通量DIA定量蛋白组学分析不同发情阶段水牛唾液中蛋白的差异。本研究将15头体况相近(平均体重为650~750 kg),发情正常,健康状态良好的2~5胎次的尼里-拉菲母水牛作为研究对象,在相同的管理条件下,对其注射氯前列醇并计为第0天,分别在发情前期(第1天)、发情期(第3天)、发情后期(第6天)早上饲喂之前(08:00-11:00)进行唾液的采集,唾液样本每个发情时期分组相同,每3头牛分为一组,共分为5组,样品处理后进行DIA定量蛋白组学检测。结果显示,不同发情阶段水牛的唾液中共定量到1982个蛋白质,分别在发情期/发情前期和发情期/发情后期比较组中鉴定到59和38个差异丰度蛋白。功能分析发现,CBL、SOD1、SPP1和ARPC1B等蛋白质可能在细胞调控和抗氧化、维持细胞间相互作用等方面发挥作用。KEGG通路分析显示,发情前期、发情期和发情后期水牛唾液差异丰度蛋白被富集到mTOR信号通路、孕酮介导的卵母细胞成熟等通路上。综上,通过不同发情阶段的对比,获得与繁殖相关的差异蛋白4个,CBL、ARPC1B、SOD1和SPP1。这些唾液中的差异丰度蛋白可能作为水牛发情生物标志物的关键蛋白,进而为开发水牛发情检测诊断试剂盒提供数据支撑。 展开更多
关键词 水牛 发情鉴定 唾液 蛋白组学
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上海水牛的生长性能、屠宰性能及肉品质分析
3
作者 齐丽娜 陆雪林 +5 位作者 吴昊旻 张文刚 李先玉 薛云 周瑾 章伟建 《中国草食动物科学》 CAS 北大核心 2024年第6期91-94,共4页
试验旨在测定上海水牛的生长性能、屠宰性能和肉品质,系统评价其肉用潜力。首先选取6、12、30和60月龄的上海水牛测定其体重体尺,然后选取5头(30月龄)阉牛进行屠宰,测定其屠宰性能及肉品质。结果表明,30月龄试验牛的平均胴体重为271.80 ... 试验旨在测定上海水牛的生长性能、屠宰性能和肉品质,系统评价其肉用潜力。首先选取6、12、30和60月龄的上海水牛测定其体重体尺,然后选取5头(30月龄)阉牛进行屠宰,测定其屠宰性能及肉品质。结果表明,30月龄试验牛的平均胴体重为271.80 kg±11.69 kg,净肉重193.80 kg±7.90 kg,骨重76.00 kg±4.50 kg,屠宰率(50.40±1.54)%,净肉率(35.94±0.95)%,胴体肉骨比2.57±0.12,眼肌面积81.79 cm^(2)±7.31 cm^(2),嫩度10.05 kg/cm^(2)±1.16 kg/cm^(2),p H_(0h)值6.03±0.15,p H_(24 h)值5.51±0.01;上海水牛每100克肉中的平均含水量为72.330 g±1.217 g,脂肪4.223 g±1.719 g,蛋白质21.460 g±0.578 g,总灰分1.388 g±0.220 g,总氨基酸17.210 g±0.431 g,总核苷酸241.800 mg±15.320 mg,总脂肪酸2.831 g±1.060 g。综上所述,上海水牛的屠宰率和净肉率较高、肉质良好,具有较好的肉用潜力。今后在加强上海水牛地方品种保护的同时,应重视开发利用,继续加强对其肉质风味特色的遗传改良,进一步提高产肉量。 展开更多
关键词 上海水牛 生长性能 屠宰性能 肉品质
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饲粮粗蛋白质水平对5~9月龄生长水牛生长性能、养分表观消化率和瘤胃发酵参数的影响及其可消化粗蛋白质需要量的预测
4
作者 阮莉珺 邓颖朝 +4 位作者 姚毅沛 魏才翔 覃广胜 王蕊张卉 邹彩霞 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期3713-3724,共12页
本试验旨在研究饲粮粗蛋白质(CP)水平对5~9月龄生长水牛生长性能、养分表观消化率和瘤胃发酵参数的影响,并对其可消化粗蛋白质(DCP)需要量进行预测。选取24头平均体重为(210.61±6.43)kg、体况相近的健康5~9月龄生长水牛,随机分为3... 本试验旨在研究饲粮粗蛋白质(CP)水平对5~9月龄生长水牛生长性能、养分表观消化率和瘤胃发酵参数的影响,并对其可消化粗蛋白质(DCP)需要量进行预测。选取24头平均体重为(210.61±6.43)kg、体况相近的健康5~9月龄生长水牛,随机分为3组,即低CP水平(12.49%)饲粮组(LP组)、中CP水平(15.64%)饲粮组(MP组)、高CP水平(18.79%)饲粮组(HP组),每组8个重复,每个重复1头牛。预试期15 d,正试期50 d。饲养试验结束后,每组随机选5头牛进行为期5 d的消化试验,采集粪样和饲粮样,根据粪样和饲粮样中CP含量计算DCP采食量(DCPI),通过析因式原理,建立DCP需要量的回归方程。结果显示:1)MP组和HP组生长水牛的平均日增重(ADG)显著高于LP组(P<0.05);MP组和HP组的干物质采食量(DMI)显著高于LP组(P<0.05)。2)MP组的CP和干物质(DM)表观消化率显著高于LP组(P<0.05);MP组和HP组的粗脂肪(EE)表观消化率显著高于LP组(P<0.05);MP组的中性洗涤纤维(NDF)表观消化率显著高于LP组和HP组(P<0.05)。3)HP组的瘤胃液氨态氮(NH3-N)浓度显著高于LH组和MP组(P<0.05);LP组的瘤胃液乙酸浓度显著高于HP组(P<0.05);LP组的瘤胃液异丁酸、异戊酸和戊酸浓度显著高于MP组和HP组(P<0.05),同时MP组的瘤胃液异丁酸、异戊酸和戊酸浓度显著高于HP组(P<0.05);MP组和HP组的瘤胃液丁酸/总挥发性脂肪酸比值显著高于LP组(P<0.05)。4)按照析因法计算得出生长水牛(体重256 kg左右)维持DCP需要量为3.51 g/(kg W^(0.75)·d),每千克增重所需的DCP为266.87 g。综上所述,饲喂CP水平为15.87%的饲粮可以提高5~9月龄生长水牛的DM、CP、EE和NDF表观消化率以及瘤胃液中乙酸、异丁酸、异戊酸和戊酸的浓度,有利于提高瘤胃中微生物的活性,进而提高饲料转化效率,促进生长水牛对饲粮中养分的消化吸收。5~9月龄生长水牛的DCP需要量模型为:DCP=3.51W^(0.75)+266.87ΔW(式中:DCP为DCP需要量,g/d;W^(0.75)为代谢体重,kg;ΔW为日增重,kg/d)。 展开更多
关键词 生长水牛 粗蛋白质水平 生长性能 养分表观消化率 可消化粗蛋白质需要量
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牦牛“海绵吸附”bta-miR-125b的lncRNA筛选验证及慢病毒载体构建
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作者 贺鸿世 姚一龙 +5 位作者 索朗斯珠 孟朝轶 孔庆辉 席广银 郭敏 徐业芬 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第9期1-8,共8页
旨在筛选在牦牛卵泡发育过程中可能吸附bta-miR-125b的长链非编码RNA(lncRNA),并构建双荧光素酶载体与慢病毒过表达载体,为研究调控牦牛生殖相关lncRNA的功能及机制提供基础。利用miRanda与RNAhybrid数据库预测可能靶向牦牛bta-miR-125b... 旨在筛选在牦牛卵泡发育过程中可能吸附bta-miR-125b的长链非编码RNA(lncRNA),并构建双荧光素酶载体与慢病毒过表达载体,为研究调控牦牛生殖相关lncRNA的功能及机制提供基础。利用miRanda与RNAhybrid数据库预测可能靶向牦牛bta-miR-125b的lncRNAs,筛选出bta-miR-125b具有“海绵吸附”作用的lncRNAs,由RNAhybrid进行结合位点预测,筛选出最优的lncRNA;采集牦牛卵巢分离卵泡并提取总RNA构建cDNA池,以RT-PCR技术扩增筛选所得lncRNA;在此基础上利用pmir-GLO载体构建技术构建该lncRNA野生型及突变型双荧光素酶报告载体,并将其与bta-miR-125b mimics共转染至293T细胞,检测双荧光素酶活性;最后利用慢病毒载体构建技术将测序正确的lncRNA与pHBLV-CMV-MCS-EF1-ZsGreen-T2A-puro载体同源区的片段同源重组,通过慢病毒包装系统(psPAX2:pMD2G)包装后感染293T细胞,计算感染效率及滴度。结果:两个数据库中的lncRNA-ARS-UCD1.2与bta-miR-125b存在紧密结合位点,扩增出lncRNA-ARS-UCD1.2的序列全长为1552 bp;双荧光素酶活性检测表明牦牛lncRNA-ARS-UCD1.2与bta-miR-125b mimic具有靶向关系(P<0.01);同源重组后经酶切鉴定及测序验证表明成功构建了重组质粒,感染效率达(61.520±0.875)%,感染滴度为4×10^(8)TU/mL,表明lncRNA-ARS-UCD1.2过表达慢病毒载体成功构建。综上,本试验筛选出牦牛“海绵吸附”bta-miR-125b的lncRNA,并验证了两者的靶向结合关系,同时成功构建了该lncRNA的过表达慢病毒载体,为下一步深入研究lncRNA在细胞中的功能机制奠定了基础。 展开更多
关键词 牦牛 长链非编码RNA bta-miR-125b 海绵吸附 慢病毒载体
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保种场涪陵水牛及西南地区水牛品种间遗传结构与ROH分析
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作者 屠芸 曾雅楠 +8 位作者 张蒸豪 洪瑞 王震 吴平 周泽洋 叶艺茹 杜亚楠 左福元 张龚炜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1989-1998,共10页
旨在对保种场涪陵水牛及西南地区其他沼泽型水牛品种进行群体遗传结构和连续纯合片段(ROH)分析,为涪陵水牛保种与遗传改良提供理论依据。本研究对保种场26头涪陵水牛以及1头杂交水牛(FM_HY)进行全基因组重测序,从NCBI下载了68头西南地... 旨在对保种场涪陵水牛及西南地区其他沼泽型水牛品种进行群体遗传结构和连续纯合片段(ROH)分析,为涪陵水牛保种与遗传改良提供理论依据。本研究对保种场26头涪陵水牛以及1头杂交水牛(FM_HY)进行全基因组重测序,从NCBI下载了68头西南地区沼泽型水牛和7头河流型水牛的基因组重测序数据,基于所有的基因组数据获得的高质量单核苷酸多态性(SNPs)位点进行遗传结构、ROH以及近交系数的分析。全基因组重测序结果显示,涪陵水牛平均测序深度为10×,质量控制后共鉴定出14 326 437个SNPs。群体遗传结构分析显示,保种场内涪陵水牛与毗邻区域的宜宾水牛、贵州水牛、贵州白水牛、盐津水牛间具有明显的遗传结构差异,德宏水牛和滇东南水牛与上述5个品种区别均明显;当分群数量为K=6时,涪陵水牛可划分为2个类群,与毗邻区域水牛品种相比具有一类独特的群体结构。涪陵水牛、宜宾水牛、贵州水牛这3个品种间共检测到2 722个ROHs,其中涪陵水牛检测到1 593个ROHs,且1~2 Mb的短ROH片段占比达78.15%;仅在涪陵水牛群体中检测到8个大于16 Mb的长ROH片段,最长为24.56 Mb。基于ROH计算的保种场涪陵水牛平均近交系数为0.056 8,其中7头个体近交系数较高(0.062 5~0.125 0);贵州水牛和宜宾水牛的平均近交系数分别为0.034 6和0.041 0。综上,涪陵水牛保种群可分为2个类群,与毗邻区域水牛品种相比具有一类独特的群体结构;保种场内7头涪陵水牛个体存在近交风险,迫切需要加强涪陵水牛的资源保护与利用工作。 展开更多
关键词 涪陵水牛 群体遗传结构 SNP ROH 近交系数
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水牛SFRP 1基因序列分析、真核表达载体构建及组织表达分析
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作者 黄丽清 段安琴 +2 位作者 郑海英 杨春艳 尚江华 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1807-1818,共12页
【目的】获取水牛分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)基因CDS区序列,并预测其编码蛋白的结构功能,构建SFRP 1基因真核表达载体,检测SFRP 1基因在水牛不同组织中的表达情况,为探索SFRP 1基因在水牛生长发育中的作用奠定基础。【方法】以水牛卵... 【目的】获取水牛分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)基因CDS区序列,并预测其编码蛋白的结构功能,构建SFRP 1基因真核表达载体,检测SFRP 1基因在水牛不同组织中的表达情况,为探索SFRP 1基因在水牛生长发育中的作用奠定基础。【方法】以水牛卵巢组织cDNA为模板,通过RT-PCR对SFRP 1基因CDS区序列进行扩增并测序,利用生物信息学在线分析软件对水牛SFRP 1基因与不同物种进行比对和系统进化树构建,并预测SFRP1蛋白理化性质、信号肽、跨膜结构等。将获得的目的基因连接至pCMV-HAhyPBase-mcheery载体并转染至水牛颗粒细胞,检测转染后荧光和基因表达情况。通过实时荧光定量PCR检测水牛不同组织中SFRP 1基因表达情况。【结果】水牛SFRP 1基因CDS区长927 bp,共编码308个氨基酸。多重序列比对结果显示,水牛SFRP 1基因氨基酸序列与黄牛、牦牛、山羊、虎鲸、黑猩猩、北极狐、猫、人、小鼠的相似性分别为100%、100%、99.65%、98.58%、98.23%、98.23%、98.58%、98.23%、96.45%,存在CRD_FZ、NTR_like和DUF3367结构域。水牛SFRP 1基因核苷酸序列与黄牛、绵羊、山羊、牦牛、野牛、马鹿、野骆驼、猪、人的相似性分别为97.3%、95.9%、95.8%、94.5%、94.2%、93.7%、80.4%、78.5%和77.3%。系统进化树结果显示,水牛与黄牛、牦牛、野牛聚为一支。生物信息学分析结果显示,SFRP1蛋白呈碱性,为不稳定蛋白;第1—15位氨基酸处存在信号肽,为分泌型蛋白,存在跨膜结构,主要定位于细胞外;存在21个磷酸化位点和8个O-糖基化修饰位点。二级结构主要由α-螺旋、延伸链和无规则卷曲构成;水牛、黄牛、人的SFRP1蛋白三级结构高度相似。成功构建pCMV-mcheery-SFRP1真核表达载体并转染水牛颗粒细胞,转染72 h后pCMV-mcheery-SFRP1重组质粒组细胞内SFRP 1基因表达量极显著高于对照组(P<0.01)。实时荧光定量PCR结果显示,SFRP 1基因在水牛不同组织中均有表达,且在脾脏中表达量最高,极显著高于其他组织(P<0.01)。【结论】SFRP 1基因在不同物种以及遗传进化过程中具有高保守性,在水牛不同组织中广泛表达。研究结果为今后探究SFRP 1基因在水牛生长发育中的功能及分子机制奠定基础。 展开更多
关键词 水牛 SFRP 1基因 序列分析 真核表达载体 组织表达
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德宏奶水牛乳腺组织miR-21-5p基因及其脂类代谢靶基因表达研究
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作者 赵洪晓 徐思慧 +4 位作者 庞双龙 孙政 杨忠 李卫真 黎明 《饲料研究》 CAS 北大核心 2024年第2期53-57,共5页
试验旨在探究德宏奶水牛乳腺组织miR-21-5p基因及其靶基因的表达规律。选取饲养条件相同、同一胎次、年龄相近、处于泌乳中期的健康德宏奶水牛,分为高乳脂率组(H组)、中乳脂率组(M组)和低乳脂率组(L组)。每组选取3头奶水牛,屠宰后采集... 试验旨在探究德宏奶水牛乳腺组织miR-21-5p基因及其靶基因的表达规律。选取饲养条件相同、同一胎次、年龄相近、处于泌乳中期的健康德宏奶水牛,分为高乳脂率组(H组)、中乳脂率组(M组)和低乳脂率组(L组)。每组选取3头奶水牛,屠宰后采集乳腺组织,提取总RNA。采用生物信息学方法预测miR-21-5p的靶基因。利用荧光定量PCR技术检测miR-21-5p及其靶基因的表达水平,并与课题组前期测定的乳脂率进行相关性分析。结果显示,miR-21-5p的靶基因可能为AGPAT6和GPAM。L组德宏奶水牛乳腺组织中miR-21-5p的表达水平高于M组和H组(P<0.01)。相关性分析结果显示,miR-21-5p与靶基因AGPAT6的表达水平呈极显著负相关(P<0.01),与靶基因GPAM的表达水平呈显著负相关(P<0.05),德宏奶水牛乳腺组织miR-21-5p表达量与乳脂率呈显著负相关(P<0.05),靶基因AGPAT6和GPAM与乳脂率呈极显著正相关(P<0.01)。蛋白互作网络结果显示,AGPAT6和GPAM互作关系最强。研究表明,miR-21-5p可能通过负调控靶基因AGPAT6和GPAM的表达影响乳脂合成,进而影响乳脂率。 展开更多
关键词 德宏奶水牛 乳脂率 靶基因 miR-21-5p基因
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饲喂水牛不同部位脂肪组织对金黄地鼠健康的影响
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作者 冯偞 何琴 +4 位作者 卢晓雨 邓晶 龚思思 吴璋伟 黄洁萍 《中国牛业科学》 2024年第4期24-29,34,共7页
本研究旨在探究饲喂水牛胸部皮下脂(不饱和脂肪酸含量高)和肾周脂(饱和脂肪酸含量高)对金黄地鼠健康的影响。本试验以成年摩拉水牛胸部皮下脂肪和肾周脂肪组织为材料,将30只6周龄雌性金黄地鼠随机平均分为3组:普通饲喂组(含油量10%)、... 本研究旨在探究饲喂水牛胸部皮下脂(不饱和脂肪酸含量高)和肾周脂(饱和脂肪酸含量高)对金黄地鼠健康的影响。本试验以成年摩拉水牛胸部皮下脂肪和肾周脂肪组织为材料,将30只6周龄雌性金黄地鼠随机平均分为3组:普通饲喂组(含油量10%)、胸部皮下脂高脂饲喂组(含油量45%)、肾周脂高脂饲喂组(含脂量45%)。适应性饲喂1周,正式饲喂试验为期8周。在第0、4、8周采集血液样本,饲喂结束时采集肝脏和腹股沟脂肪组织,试验期间每周称重,每天称量采食量。结果表明:与普通饲喂组相比,肾周脂高脂饲喂8周金黄地鼠终末体重、平均日增重、Lee’s指数、血脂浓度(甘油三酯、胆固醇等)、体脂沉积、肝脏损伤及脂代谢等均显著升高(P<0.05或P<0.01),提示高脂饲喂可引起金黄地鼠肥胖;同样是高脂饲喂,胸部皮下脂饲喂组金黄地鼠终末体重、平均日增重、Lee’s指数、血脂浓度(胆固醇、动脉硬化指数等)、体脂沉积、肝脏损伤及脂代谢等均显著均低于肾周脂饲喂组(P<0.05或P<0.01)。综上所述,富含不饱和脂肪酸的水牛胸部皮下脂可缓解高脂饲喂带来的健康风险,这为水牛不饱和脂肪酸生成的调控提供重要基础信息和材料。 展开更多
关键词 水牛 胸部皮下脂 肾周脂 不饱和脂肪酸
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中国家水牛起源通考
10
作者 周宇 《古今农业》 2024年第2期17-31,共15页
从殷墟发掘大量水牛遗存至今的一百年间,中国水牛的驯化起源问题一直是科学界争论的热点,经历了数次反转。笔者结合考古学、史料记载和遗传学等研究重构了中国水牛的驯化历程。中国的家水牛属于沼泽型水牛,早在新石器时期就已被吴越先... 从殷墟发掘大量水牛遗存至今的一百年间,中国水牛的驯化起源问题一直是科学界争论的热点,经历了数次反转。笔者结合考古学、史料记载和遗传学等研究重构了中国水牛的驯化历程。中国的家水牛属于沼泽型水牛,早在新石器时期就已被吴越先民所驯化,考古发现的“圣水牛”本质上就是中国现存水牛的祖先型。先秦时期,家水牛被称为“牛”和“兕”,“水牛”之名词来源于汉代传入的佛经,原指产于西域诸国的河流型水牛,大约到晋代才用于指代中国的家水牛。在戎狄等游牧民族将原产西亚的黄牛带到中国北方草原,再由商人引入中原地区以前,产于吴越之地的水牛是中国唯一的家养牛类,星宿“牵牛”之名即源于此。 展开更多
关键词 水牛起源 圣水牛 兕 牵牛星
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规模奶水牛场犊牛死亡主要因素分析
11
作者 韦科龙 卢瑛 +5 位作者 黄文婷 黄雅鑫 陈笑寒 梁淦 梁宇辰 文崇利 《现代畜牧兽医》 2024年第6期58-62,共5页
文章旨在对广西某规模奶水牛场2017—2023年犊牛死亡情况进行记录,结合犊牛出生的基本信息采取实地调查与资料分析结合的方法统计分析其死亡因素。结果显示:2017—2023年,奶水牛犊牛(不区分健弱仔)平均死亡率为9.36%,各年度犊牛综合死... 文章旨在对广西某规模奶水牛场2017—2023年犊牛死亡情况进行记录,结合犊牛出生的基本信息采取实地调查与资料分析结合的方法统计分析其死亡因素。结果显示:2017—2023年,奶水牛犊牛(不区分健弱仔)平均死亡率为9.36%,各年度犊牛综合死亡率在6.18%~12.41%之间;犊牛初生重小于25 kg时,死亡率达(21.61±14.27)%,显著高于其他阶段初生重犊牛(P<0.05);尼里/拉菲水牛犊牛死亡率显著高于摩拉水牛和杂交水牛(P<0.05);出生后在0~30 d内死亡的犊牛占年度总死亡数比例达(62.14±15.31)%,显著大于在其他日龄死亡的犊牛(P<0.05);春季犊牛的死亡率为(21.03±10.13)%,显著高于其他季节(P<0.05);母犊的死亡率比公犊高18.71%,差异不显著(P>0.05)。研究表明,奶水牛犊牛死亡与初生重、品种、日龄、季节等因素均具有一定关联。 展开更多
关键词 奶水牛 犊牛 死亡率
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宿主天然免疫因子在猪繁殖与呼吸综合征病毒感染中的作用机制研究进展 被引量：2
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作者 郭子强 刘佳晨 +5 位作者 周艳君 赵冉 郑海红 童光志 李丽薇 高飞 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第8期112-118,共7页
猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的急性接触性传染病,给养猪业造成的经济损失巨大。PRRSV感染机体之后,宿主体内的免疫系统识别PRRSV,多种天然免疫因... 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的急性接触性传染病,给养猪业造成的经济损失巨大。PRRSV感染机体之后,宿主体内的免疫系统识别PRRSV,多种天然免疫因子会与PRRSV蛋白相互作用以对病毒感染产生影响。本文主要综述了宿主体内天然免疫抑制因子影响PRRSV感染的相关机制,为解析PRRSV的致病机制以及研发PRRS防控技术提供理论依据。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 天然免疫因子 结构蛋白 非结构蛋白 干扰素 MICRORNA
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非洲猪瘟病毒p17蛋白的哺乳动物细胞表达及鉴定 被引量：1
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作者 乔思娜 赵款 +7 位作者 刘佳晨 李国新 童武 周艳君 赵冉 童光志 高飞 李丽薇 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第3期68-73,共6页
研究旨在利用哺乳动物细胞悬浮培养系统表达非洲猪瘟病毒(ASFV)p17蛋白,纯化并免疫小鼠,制备针对ASFV p17蛋白的特异性多克隆抗体。根据GenBank中公布的ASFV SY18毒株p17蛋白编码基因序列,设计特异性引物扩增p17基因片段,构建重组真核... 研究旨在利用哺乳动物细胞悬浮培养系统表达非洲猪瘟病毒(ASFV)p17蛋白,纯化并免疫小鼠,制备针对ASFV p17蛋白的特异性多克隆抗体。根据GenBank中公布的ASFV SY18毒株p17蛋白编码基因序列,设计特异性引物扩增p17基因片段,构建重组真核表达质粒pCDNA3.1-p17-strep。将其瞬时转染293i细胞,并利用下游strep标签进行蛋白纯化。纯化后的重组p17蛋白配合MnJ(β)胶体锰佐剂免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体血清。利用Western blot、间接免疫荧光试验鉴定该多克隆抗体的反应原性和特异性。结果显示:本试验成功构建pCDNA3.1-p17-strep真核表达质粒,转染293i细胞后纯化获得重组p17蛋白。免疫小鼠后制备的多克隆抗体与真核表达的p17蛋白及表达ASFV p17蛋白的猪繁殖与呼吸综合征病毒均有良好的特异性免疫反应。本试验为深入探讨ASFV p17蛋白的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 p17蛋白 293i细胞 多克隆抗体
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奶水牛发情标记物的研究进展
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作者 余洲 杨柏高 +10 位作者 张航 徐茜 张培培 冯肖艺 曹建华 牛一凡 杜卫华 郝海生 朱化彬 阿布力孜·吾斯曼 赵学明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3623-3630,共8页
水牛是我国产奶畜种之一,其适应能力强,耐高温高湿、耐粗饲,其奶营养丰富,经济价值高,被誉为“奶中之王”。然而,奶水牛性成熟晚、发情症状不明显,且其发情易受环境因素影响,导致其繁殖效率低下,从而在生产中造成人力浪费和经济损失。因... 水牛是我国产奶畜种之一,其适应能力强,耐高温高湿、耐粗饲,其奶营养丰富,经济价值高,被誉为“奶中之王”。然而,奶水牛性成熟晚、发情症状不明显,且其发情易受环境因素影响,导致其繁殖效率低下,从而在生产中造成人力浪费和经济损失。因此,掌握有效的奶水牛发情鉴定技术进而确定最佳配种时间对奶水牛生产具有重要意义。本文参考国内外相关报道,简要总结了奶水牛各发情阶段的人工和自动化鉴定方法及其优缺点,回顾了通过血液、尿液、唾液、宫颈阴道液(cervical-vaginal fluid,CVF)以及粪便等物质鉴定奶水牛发情的相关研究,探讨了利用组学技术开发新的奶水牛发情鉴定方法的可能性,旨在为开发奶水牛发情鉴定新方法提供一定参考。 展开更多
关键词 奶水牛 发情鉴定 血液 唾液 繁殖性能
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抑制BMP/Smad信号通路对水牛卵巢颗粒细胞生长和类固醇激素合成的影响
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作者 徐媛媛 郑海英 +8 位作者 杨春艳 邓廷贤 黄晨茜 冯超 陆杏蓉 段安琴 莫霞 马小娅 尚江华 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2354-2362,共9页
【目的】探究BMP/Smad信号通路对水牛卵巢颗粒细胞生长和类固醇激素合成的影响。【方法】利用脂质体转染的方法将合成的Smad 4基因的3对siRNAs(Smad4-siRNA1、Smad4-siRNA2和Smad4-siRNA3)和NC-siRNA(对照组)分别转染水牛颗粒细胞,通过... 【目的】探究BMP/Smad信号通路对水牛卵巢颗粒细胞生长和类固醇激素合成的影响。【方法】利用脂质体转染的方法将合成的Smad 4基因的3对siRNAs(Smad4-siRNA1、Smad4-siRNA2和Smad4-siRNA3)和NC-siRNA(对照组)分别转染水牛颗粒细胞,通过实时荧光定量PCR检测Smad 4基因的表达水平,比较不同siRNA的干扰效率。然后利用筛选的干扰效率最高的siRNA,转染水牛卵巢颗粒细胞,通过CCK-8法检测对照组和干扰组细胞的增殖情况,实时荧光定量PCR检测上述两组细胞凋亡相关基因Bax和Bcl2,细胞周期相关调控基因CyclinD2和CDK4,以及类固醇激素合成相关基因Cyp19A1和Cyp11A1的表达水平,并通过ELISA检测雌二醇(E 2)和孕酮(P 4)的含量。【结果】基因干扰试验结果表明,3对siRNAs对Smad4基因的表达均具有极显著的干扰作用(P<0.01),其中Smad4-siRNA1的干扰效率最高,达到了64%。CCK-8检测结果显示,与对照组相比,干扰组细胞的增殖效率显著降低(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,干扰组Bcl2、CyclinD2、CDK4和Cyp19A1基因的表达量均显著或极显著下调(P<0.05;P<0.01),而Cyp11A1基因的表达极显著上调(P<0.01),Bax基因的表达未受影响。ELISA检测结果表明,与对照组相比,干扰组雌二醇分泌量减少10.2%,孕酮的分泌量增加24.7%,差异均显著(P<0.05)。【结论】通过RNAi介导的Smad 4基因沉默对内源性BMP/Smad信号通路的中断不仅能够显著抑制水牛颗粒细胞的生长,而且能够诱导水牛颗粒细胞的凋亡,还会改变类固醇激素生成。BMP/Smad信号通路在调控水牛颗粒细胞生长和类固醇生成过程中具有重要的作用。 展开更多
关键词 水牛 BMP/Smad信号通路 Smad 4基因 颗粒细胞 RNA干扰 类固醇生成
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α-亚麻酸对水牛卵巢颗粒细胞体外培养的影响
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作者 肖鹏 尚江华 +10 位作者 杨春艳 李孟琪 段安琴 马小娅 冯超 黄晨茜 张博 周金陈 韦科龙 郑威 郑海英 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2380-2387,共8页
【目的】研究α-亚麻酸(ALA)对水牛卵巢颗粒细胞体外培养过程中细胞活力、细胞凋亡、细胞周期相关基因表达及激素分泌功能的影响。【方法】为了筛选体外培养水牛卵巢颗粒细胞ALA最适浓度,在96孔板中加入起始细胞数量为1×104/mL的... 【目的】研究α-亚麻酸(ALA)对水牛卵巢颗粒细胞体外培养过程中细胞活力、细胞凋亡、细胞周期相关基因表达及激素分泌功能的影响。【方法】为了筛选体外培养水牛卵巢颗粒细胞ALA最适浓度,在96孔板中加入起始细胞数量为1×104/mL的水牛卵巢颗粒细胞,细胞贴壁12 h后更换含0(对照组)、10、50、100、200μmol/L ALA的培养液,在相同条件下处理24 h,用CCK-8进行细胞活力检测,筛选出最适处理浓度,并用于后续试验。后续试验分为对照组(0μmol/L)和处理组(50μmol/L)两组,用实时荧光定量PCR检测颗粒细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白1(p21)和增殖细胞核抗原(PCNA)基因的相对表达量,用免疫荧光对颗粒细胞中细胞凋亡相关蛋白Caspase-3和细胞周期相关蛋白p21进行荧光检测和定量分析,用ELISA法检测培养液中水牛颗粒细胞分泌的雌二醇(E 2)和孕酮(P 4)含量。【结果】与对照组相比,水牛卵巢颗粒细胞经ALA处理24 h后,在10~50μmol/L范围内随着ALA浓度升高水牛卵巢颗粒细胞的细胞活力随之升高,处理浓度为50μmol/L时细胞活力相比对照组极显著提高(P<0.01),随着浓度继续增加,水牛卵巢颗粒细胞活力下降,200μmol/L时细胞活力极显著低于对照组(P<0.01),因此后续试验选用ALA的浓度为50μmol/L。与对照组相比,50μmol/L ALA处理后颗粒细胞中抗凋亡基因Bcl-2和增殖细胞核抗原基因PCNA相对表达量均无显著差异(P>0.05),但促凋亡基因Caspase-3和细胞周期基因p 21在mRNA和蛋白水平上的表达量均极显著降低(P<0.01),E 2和P 4水平显著或极显著增高(P<0.05;P<0.01)。【结论】培养液中添加50μmol/L ALA能够提升水牛卵巢颗粒细胞增殖活力、抗凋亡能力及激素分泌能力,本研究为调控水牛卵泡发育提供理论参考。 展开更多
关键词 α-亚麻酸(ALA) 水牛 颗粒细胞 增殖活力 基因表达
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调控SUV39H1/2对水牛乳腺细胞增殖及STAT5a表达的影响
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作者 原茜 古景开 +2 位作者 薛青松 石德顺 李湘萍 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期126-135,共10页
为了解SUV39H1/2基因对水牛STAT5a基因表达的调控作用,首先克隆不同长度水牛STAT5a启动子区,采用双荧光素酶方法检测启动子活性.利用SUV39H1/2-shRNA慢病毒感染水牛乳腺上皮细胞,检测细胞增殖及相关基因表达变化,并分析DNA甲基化水平.... 为了解SUV39H1/2基因对水牛STAT5a基因表达的调控作用,首先克隆不同长度水牛STAT5a启动子区,采用双荧光素酶方法检测启动子活性.利用SUV39H1/2-shRNA慢病毒感染水牛乳腺上皮细胞,检测细胞增殖及相关基因表达变化,并分析DNA甲基化水平.结果显示:克隆获得的2190 bp,355 bp,417 bp STAT5a启动子片段均具有活性,2190 bp片段活性显著高于其他两个片段(p<0.05),2190 bp启动子区存在sp1,p300,p53,NF-kB等转录结合位点.下调SUV39H1/2基因表达后,乳腺上皮细胞周期阻滞在S期,G0/G1期细胞比例无显著差异,G2期比例显著减少(p<0.05).qRT-PCR结果显示,抑制SUV39H1/2基因表达使乳腺上皮细胞分化及乳蛋白合成相关基因STAT5a,mTOR,且乳脂合成相关基因srebp1,fabp3表达水平均显著降低(p<0.05);STAT5a启动子区甲基化程度为31.5%,高于对照组15.5%.结果表明:抑制SUV39H1/2基因表达能够促进水牛乳腺上皮细胞增殖;SUV39H1/2基因可能通过调控STAT5a启动子甲基化水平,进而调控乳腺上皮细胞增殖分化、乳汁和乳蛋白合成相关基因表达. 展开更多
关键词 水牛 乳腺上皮细胞 细胞增殖 STAT5a 启动子甲基化
原文传递
绵羊卷曲受体1基因克隆、表达谱与多态性分析
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作者 张双双 贾琪 +4 位作者 王丹 王卓 柳俭强 张立春 戢爽 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期4805-4815,共11页
【目的】获得绵羊卷曲受体1(frizzled 1,FZD1)基因CDS序列,确定其生物学功能,探索其多态性并明确其在不同品种不同组织中的表达差异。【方法】采集小尾寒羊和新吉细毛羊心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉和皮肤组织,提取总RNA并反转录... 【目的】获得绵羊卷曲受体1(frizzled 1,FZD1)基因CDS序列,确定其生物学功能,探索其多态性并明确其在不同品种不同组织中的表达差异。【方法】采集小尾寒羊和新吉细毛羊心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉和皮肤组织,提取总RNA并反转录成cDNA。依据NCBI数据库中绵羊FZD 1基因预测序列(登录号:XM_027968435.2)设计引物,以小尾寒羊皮肤组织cDNA为模板,采用TA克隆获得目的基因序列,并对序列进行生物信息学分析,预测其可能编码的蛋白质结构和功能;利用实时荧光定量PCR检测FZD 1基因在小尾寒羊和新吉细毛羊不同组织中的表达差异;采用测序和高分辨熔解曲线(high resolution melting analysis,HRM)进行多态性检测,确定可能存在的单核苷酸多态性(single-nucleotide polymorphisms,SNP)位点。【结果】成功克隆出绵羊FZD 1基因CDS区,序列全长为1941 bp,编码646个氨基酸。绵羊FZD1氨基酸序列与山羊相似性最高,为99.5%,与人的相似性最低,为96.7%;系统进化树结果显示,绵羊FZD1与山羊亲缘关系最近,与人亲缘关系最远。FZD1蛋白含有7个跨膜结构域,42个磷酸化位点和2个N-糖基化位点,主要分布在细胞膜上。FZD1蛋白二级结构预测结果显示,无规则卷曲、α-螺旋、延伸链和β-转角分别占48.30%、35.15%、15.02%和1.55%,与预测的三级结构一致。实时荧光定量PCR结果显示,小尾寒羊FZD 1基因在肌肉和皮肤组织中的表达量显著高于新吉细毛羊,在心脏和肺脏中的表达量显著低于新吉细毛羊(P<0.05)。FZD 1基因在2个品种羊的肺脏和皮肤中的表达量均最高,且显著高于其他组织(P<0.05)。测序结果及HRM验证显示,FZD 1基因第1273和1276 bp位点处存在2个SNPs(g.9443455和g.9443458),这2个SNPs为完全连锁不平衡状态,仅存在2种单倍型,2个SNPs位点均为中度多态。【结论】FZD 1基因CDS全长1941 bp,编码646个氨基酸。FZD1蛋白作为位于细胞膜上的七跨膜受体蛋白,存在42个可能的磷酸化位点,推测FZD1的信号传导是通过磷酸化和去磷酸化进行的;FZD 1基因在小尾寒羊的皮肤组织中表达量最高,提示FZD 1基因可能参与毛囊发育的调控。 展开更多
关键词 小尾寒羊 FZD 1基因 生物信息学 组织表达 SNP
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水牛NONO和PSPC1基因对成纤维细胞抗衰老的作用研究
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作者 仝毅 刘晨 +2 位作者 原茜 任宣 李湘萍 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期110-121,共12页
旁粒相关基因NONO和PSPC1在DNA损伤修复、转录调控、细胞增殖等方面发挥重要作用.该研究旨在克隆水牛NONO,PSPC1基因并对其进行序列分析,探讨其对水牛胎儿成纤维细胞增殖及衰老的影响.首先扩增水牛NONO,PSPC1编码区序列并构建其过表达载... 旁粒相关基因NONO和PSPC1在DNA损伤修复、转录调控、细胞增殖等方面发挥重要作用.该研究旨在克隆水牛NONO,PSPC1基因并对其进行序列分析,探讨其对水牛胎儿成纤维细胞增殖及衰老的影响.首先扩增水牛NONO,PSPC1编码区序列并构建其过表达载体,对不同代数水牛胎儿成纤维细胞中旁粒相关基因的表达进行检测.构建细胞衰老模型,将过表达NONO,PSPC1载体转染第10代成纤维细胞,培养至15代进行细胞增殖、 β-半乳糖苷酶、细胞衰老和凋亡相关基因表达分析.分别得到1 424 bp和1 574 bp的水牛NONO和PSPC1编码区序列,生物信息学分析发现水牛NONO基因与黄牛和人的序列相似度分别为98.9%和91.2%;水牛PSPC1基因与黄牛、绵羊、山羊和人序列相似度分别为99.5%,86.0%,98.8%,89.3%.随着细胞培养代数增加,旁粒相关基因表达降低.过表达转染试验结果发现:与空白组和阴性对照组相比,2个试验组细胞增殖速度变快,β-Gal细胞阳性率和P21,P16,Bax表达均显著下降(p<0.05);2个试验组间相比,上调PSPC1表达后细胞增殖速度更快,β-Gal细胞阳性率和P21,P16,Bax表达均显著降低(p<0.05).上调NONO和PSPC1基因表达能够促进细胞增殖,降低凋亡相关基因的表达进而延缓细胞衰老. 展开更多
关键词 水牛 NONO基因 PSPC1基因 细胞衰老
原文传递
羊巴氏杆菌病研究进展 被引量：2
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作者 汪阳 刘文锴 +2 位作者 张凌 金映红 夏俊 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第8期126-132,共7页
羊巴氏杆菌病是一种羊常见多发疫病,在全球范围内广泛流行,主要病原为多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm),其中A型和D型是Pm最主要的致病血清型。巴氏杆菌病患羊临床症状以高热、肺炎、顽固性腹泻、关节炎、精神沉郁、高死亡率... 羊巴氏杆菌病是一种羊常见多发疫病,在全球范围内广泛流行,主要病原为多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm),其中A型和D型是Pm最主要的致病血清型。巴氏杆菌病患羊临床症状以高热、肺炎、顽固性腹泻、关节炎、精神沉郁、高死亡率等为主,是当前致哺乳期羔羊死亡的最主要疫病,严重制约养羊业的发展,目前国内外对羊巴氏杆菌病的深入研究及报道甚少。本文对羊巴氏杆菌病病原学及流行病学、诊断方法、防治措施等进行综述,旨在为进一步深入开展该病的研究提供借鉴。 展开更多
关键词 羊 巴氏杆菌病 血清型 流行病学 诊断 疫苗
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