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PEDV、PoRVA和PDCoV TaqMan三重RT-qPCR检测方法的建立与初步应用 被引量:1
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作者 胡泽奇 李润成 +5 位作者 谭祖明 谢秀艳 王江平 秦乐娟 李荣 葛猛 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2267-2272,共6页
旨在建立一种可快速同时检测猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)、猪A群轮状病毒(porcine rotavirus type A, PoRVA)和猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus, PDCoV)三重荧光定量PCR方法。针对PEDV-N、PoRVA-... 旨在建立一种可快速同时检测猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)、猪A群轮状病毒(porcine rotavirus type A, PoRVA)和猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus, PDCoV)三重荧光定量PCR方法。针对PEDV-N、PoRVA-VP6和PDCoV-M基因设计了引物和探针,条件优化后进行性能评估,并与商品化试剂盒检测对比。结果显示:本研究建立的三重RT-qPCR方法具有良好特异性,对PRRSV、PCV_2和PRV等阳性核酸不发生扩增;具有较高的敏感性,PEDV、PoRVA和PDCoV的最低检测限均达1 copies·μL^(-1);重复性良好,组内和组间变异系数均小于1%;样本适应性广,检测不同样本类型时,变异系数均小于1%。与商品化试剂盒对比,本研究建立的方法PEDV和PoRVA的检测符合率为92.5%和97.5%,并对PDCoV的检测范围更广,对其变异毒株仍有较好的检测效果。本研究建立的检测方法具有特异性好、敏感性高、稳定性强和样本适应性广等优势,为临床腹泻样本提供了一种好的检测方法。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 猪A群轮状病毒 猪丁型冠状病毒 三重RT-qPCR
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猪肺炎支原体乳酸脱氢酶在诱导猪支气管上皮细胞凋亡中的作用
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作者 王吉英 尹蕊如 +7 位作者 谢星 王海燕 刘胡栋 胡辉 熊祺琰 冯志新 邵国青 于岩飞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2195-2205,共11页
猪肺炎支原体感染会引起宿主上皮细胞的损伤及凋亡。上皮屏障的破坏往往导致细菌和病毒的继发感染,给养猪业造成严重的经济损失,但具体的致病机制及毒力因子尚未完全阐明。前期研究发现猪肺炎支原体乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, L... 猪肺炎支原体感染会引起宿主上皮细胞的损伤及凋亡。上皮屏障的破坏往往导致细菌和病毒的继发感染,给养猪业造成严重的经济损失,但具体的致病机制及毒力因子尚未完全阐明。前期研究发现猪肺炎支原体乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)不仅参与猪肺炎支原体的代谢还与猪肺炎支原体的毒力相关。因此,本研究通过原核表达及亲和层析获得猪肺炎支原体乳酸脱氢酶重组蛋白(recombinant LDH, rLDH),之后分别用不同浓度的rLDH与猪支气管上皮细胞(porcine bronchial epithelial cell, PBEC)孵育,经显微镜观察rLDH对细胞形态的影响,通过CCK-8法检测rLDH对细胞活力的影响。选取对细胞形态及活力影响不显著的50和100μg·mL^(-1) rLDH分别与PBEC孵育,通过流式细胞仪检测细胞凋亡率,反转录荧光定量PCR(reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)法和免疫印记检测凋亡相关基因caspase 3、caspase 8、caspase 9、Bax、BCL-2的转录水平和蛋白水平。结果显示:猪肺炎支原体rLDH呈剂量依赖性地诱导PBEC凋亡,其作用与猪肺炎支原体菌株一致。用rLDH及Mhp 168孵育后,PBEC的促凋亡因子Bax、caspase 3和caspase 9的mRNA水平显著上调,凋亡抑制因子BCL-2的mRNA水平显著下调,caspase 8的mRNA水平未发生显著变化。促凋亡因子Bax、caspase 3的蛋白表达水平显著上调,凋亡抑制因子BCL-2的蛋白表达水平显著下调。结果表明,猪肺炎支原体可能通过LDH诱导PBEC内源性细胞凋亡,凋亡相关因子caspase 3、caspase 9、Bax和BCL-2在其中发挥重要作用。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体(Mhp) 乳酸脱氢酶(LDH) 猪支气管上皮细胞(PBEC) 凋亡
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利用单B细胞分选技术制备猪瘟病毒E2蛋白单克隆抗体及其在ELISA中的应用
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作者 马中元 郑君佐 +2 位作者 梁志博 潘丽 曾巧英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期4579-4589,共11页
本研究旨在建立一种猪瘟病毒E2单抗竞争ELISA检测方法,用于评价猪瘟C株弱毒苗和E2亚单位疫苗的免疫效果。首先,构建猪瘟E2杆状病毒表达载体pFastBAC,通过悬浮培养SF9细胞高效表达E2蛋白;其次,用纯化的E2蛋白免疫BABL/c小鼠,通过流式分选... 本研究旨在建立一种猪瘟病毒E2单抗竞争ELISA检测方法,用于评价猪瘟C株弱毒苗和E2亚单位疫苗的免疫效果。首先,构建猪瘟E2杆状病毒表达载体pFastBAC,通过悬浮培养SF9细胞高效表达E2蛋白;其次,用纯化的E2蛋白免疫BABL/c小鼠,通过流式分选IgM-PE-/E2-APC+型单个B细胞。然后,利用半巢式PCR分别扩增E2特异性IgG抗体的重链和轻链,测序后将抗体重链及轻链构建到pCDNA3.1载体,再将构建好的质粒共转染至HEK-293细胞,制备猪瘟E2单克隆抗体。结果表明,本研究通过单B细胞分选技术获得的两株单克隆抗体,即mAb3A9(IgG1,kappa)和mAb4F7(IgG2a,lambda),分别识别猪瘟E2蛋白B细胞线性表位25GLTTTWKEYSHDLQL^(39)和259GNTTVKVHASDERGP^(273)。此外,用上述两株单克隆抗体及E2蛋白建立的单抗竞争ELISA检测方法,在血清样本检测过程中,均展现出优异的诊断敏感性(97.49%,95.97%)及特异性(96.08%,94.38%),该研究为我国猪瘟的逐步净化提供了有利的技术支撑。 展开更多
关键词 猪瘟 E2 单B细胞 表位 ELISA
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仔猪腹泻病的诊治与体会 被引量:1
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作者 翟雍良 黄金昌 +3 位作者 梁桂聪 周剑辉 聂永吉 蒋铁军 《广西畜牧兽医》 2024年第1期34-36,共3页
仔猪腹泻是养猪生产中最常见的疾病,不管在集约化大型养猪场、小型养猪专业户还是散养户都普遍存在,仔猪腹泻可导致仔猪死亡率增加、生长发育受阻、饲料报酬降低、增加人工费和药费等,给养猪行业带来巨大的经济损失。引起仔猪腹泻的病... 仔猪腹泻是养猪生产中最常见的疾病,不管在集约化大型养猪场、小型养猪专业户还是散养户都普遍存在,仔猪腹泻可导致仔猪死亡率增加、生长发育受阻、饲料报酬降低、增加人工费和药费等,给养猪行业带来巨大的经济损失。引起仔猪腹泻的病因相当多且复杂,主要包括病毒、细菌、寄生虫、营养和应激等因素,因腹泻造成仔猪死亡的占仔猪死亡总数的40%左右,严重威胁养猪业的健康发展[1]。 展开更多
关键词 养猪专业户 大型养猪场 发育受阻 饲料报酬 仔猪腹泻 养猪业 仔猪死亡 散养户
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伪狂犬病病毒感染小鼠基质金属蛋白酶-9介导紧密连接蛋白损伤血脑屏障的研究
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作者 张颖 宋春莲 +3 位作者 张莹 沈鸿 舒相华 杨洪贵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2186-2194,共9页
旨在探究伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)对小鼠血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)通透性的影响及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)与紧密连接(tight junction, TJ)的相关性。将昆明SPF小鼠96只,随机平均... 旨在探究伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)对小鼠血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)通透性的影响及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)与紧密连接(tight junction, TJ)的相关性。将昆明SPF小鼠96只,随机平均分为对照组和3个试验组,24只对照组小鼠滴鼻生理盐水,72只试验组小鼠滴鼻感染PRV,将试验组分为感染24 h组、感染48 h组和感染72 h组,每组24只。观察临床症状并采用H&E染色观察病理损伤情况;通过改良型神经学评分和脑组织病毒载量测定评价PRV感染后神经损伤情况与病毒载量的关系;通过干湿重法和伊文斯蓝染色法探究血脑屏障的通透性;通过mRNA和蛋白表达差异水平探究MMP-9和TJ的相关性。结果显示,攻毒后脑组织病变程度随时间延长而加剧,在攻毒48 h后,脑组织病毒载量出现显著性差异;神经功能损伤评分在第72小时达到最高;干/湿重值及脑组织伊文斯蓝浓度呈时间依赖性;MMP-9与TJ的相关性结果表明,PRV攻毒后MMP-9表达量增加,TJ表达量减少。结果表明,PRV感染通过MMP-9介导的TJ蛋白表达量的降低损害BBB的完整性及通透性。综上所述,PRV感染可能通过MMP-9介导的破坏来损害BBB,为进一步阐明PRV入侵机制奠定基础。 展开更多
关键词 MMP-9 伪狂犬病病毒 血脑屏障 TJ蛋白
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规模猪场发生猪传染性胃肠炎诊治报告
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作者 滕日营 《广西畜牧兽医》 2024年第5期206-207,共2页
猪传染性胃肠炎是由猪传染性胃肠炎冠状病毒引起猪的一种急性、高度传染性消化道传染病。特征为腹泻、呕吐和脱水,不同品种、年龄猪均可发病。本病传播迅速,常在一周内致全场暴发,甚至会导致邻近生猪养殖场相继发病,约10天达到发病高峰... 猪传染性胃肠炎是由猪传染性胃肠炎冠状病毒引起猪的一种急性、高度传染性消化道传染病。特征为腹泻、呕吐和脱水,不同品种、年龄猪均可发病。本病传播迅速,常在一周内致全场暴发,甚至会导致邻近生猪养殖场相继发病,约10天达到发病高峰期,后转入零星发病阶段。发病率与年龄关系不大,死亡率与猪年龄密切相关,流行后期感染的大猪症状较轻,病程缩短,4周龄以下仔猪死亡率高,日龄小与死亡率成正比,5周龄以上的病猪死亡率低,较大的猪或成年猪发病后几乎没有死亡。该病无论农村散养或现代化集约化程度高规模猪场皆有发生,给生猪养殖业造成一定的经济损失。本文是笔者对一例猪传染性胃肠炎的诊治过程及体会,供同行参考。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎 高度传染性 规模猪场 生猪养殖业 消化道传染病 农村散养 诊治报告 生猪养殖场
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适合早期诊断的非洲猪瘟sIgA抗体量子点免疫层析检测方法建立 被引量:3
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作者 谢青云 易玮婕 +9 位作者 李嘉豪 白昀 谢星 袁厅 张越 冯余凡 赵东明 步志高 刘斐 冯志新 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期4311-4319,共9页
非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒感染引起的一种烈性猪传染病,其极高的传染性和发病率给养猪产业造成了巨大的经济损失。目前尚无安全有效的ASF疫苗,因此早期监测是防控ASF最重要的解决方案之一。建立敏感、快速的AS... 非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒感染引起的一种烈性猪传染病,其极高的传染性和发病率给养猪产业造成了巨大的经济损失。目前尚无安全有效的ASF疫苗,因此早期监测是防控ASF最重要的解决方案之一。建立敏感、快速的ASF现场即时检验方法,对维护生猪产业繁荣具有重要意义。首先基于氨基和羧基的偶联反应制备量子点微球(quantum dot microsphere,QDM)偶联ASFV重组抗原蛋白p30的检测探针和QDM-兔抗鸡IgY质控探针;接着在检测线和质控线分别固定鼠抗猪IgA-Sc片段抗体和鸡IgY蛋白制备侧向流免疫试纸条;待检动物口腔液中的ASF sIgA抗体经QDM-p30捕获可被固定至T线。将ASFV阳性口腔液以2倍梯度稀释,检测该方法的灵敏度。通过检测其他几种常见猪病病毒验证该方法的特异性。通过检测ASFV阴性和阳性动物的口腔液临床样本评价该方法的临床诊断效能。该方法特异性好,与PRV、CSFV、PRRV不存在交叉反应;灵敏度高,最低检出稀释度可达1∶64;耗时短,可在20 min内完成检测;操作便捷,无需侵入式采样;检出时间早,人工感染最早可于感染后第6天检出。本研究开发了一种口腔液中ASF sIgA抗体的现场即时检验(point-of-care testing,POCT)量子点免疫试纸条,为ASFV的监测和防控提供了新的技术支持和补充。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 sIgA抗体 量子点免疫试纸条 现场即时检验
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藏猪呼吸道疾病临床样本中病毒的宏基因组学分析 被引量:3
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作者 范燕迪 杨丹娇 +9 位作者 叶忠明 张敏 蓝岚 王靖皓 周菡 康润敏 于吉锋 张志东 李彦敏 周泷 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3836-3847,共12页
为了解我国川西高原地区藏猪呼吸道疾病综合征(porcine respiratory disease complex,PRDC)相关病毒的种类和流行情况,本研究从四川省甘孜藏族自治州地区采集藏猪呼吸道样本共计119份,其中健康藏猪鼻拭子66份(来自6个猪场),PRDC明显症... 为了解我国川西高原地区藏猪呼吸道疾病综合征(porcine respiratory disease complex,PRDC)相关病毒的种类和流行情况,本研究从四川省甘孜藏族自治州地区采集藏猪呼吸道样本共计119份,其中健康藏猪鼻拭子66份(来自6个猪场),PRDC明显症状的藏猪鼻拭子、肺组织及肺泡灌洗液53份(11个猪场)。将健康组和发病组样本制成两个pool样提取总核酸反转录成cDNA,建库后使用Illunima novaseq测序。经序列分析表明,健康藏猪呼吸道样品主要以细菌噬菌体为主,动物相关病毒仅检测到疱疹病毒科(Herpesviridae)的mardivirus。发病组样本的病毒种群包括14个病毒科的16种病毒,可引起PRDC的病毒有猪圆环病毒2型(PCV-2)、细环病毒(TTSuV)、猪细胞巨化病毒(PCMV)和非洲猪瘟病毒(ASFV)等。使用SOAPdenovo软件组装出两株PCV-2,三株TTSuV和一株Porprismacovirus的全基因组。遗传演化分析结果显示,两株PCV-2属于PCV-2d亚型,三株TTSuV均属于k2型,其中SCgz-1属于k2b亚型,SCgz-2和SCgz-3属于k2a亚型。Porprismacovirus毒株与越南的人源Human 16806x66_213毒株聚为单独一分支,而与猪源毒株则遗传距离较远。RDP4重组分析显示,该毒株为人源Human 16806x66_213毒株和猪源Porcine 17668x82_593毒株的重组毒株,该重组方式在国际上未见报道。本研究首次对川西高原地区藏猪的呼吸道相关病毒开展调查研究,发现藏猪呼吸道疾病相关病毒种类繁多,并存在不同家畜间、人和家畜间跨种传播的可能,应予以更多关注。同时,本研究也为藏猪呼吸道疾病的防控提供参考。 展开更多
关键词 藏猪 呼吸道疾病综合征 病毒宏基因组 重组分析
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七种猪常见病毒核酸磁-纳米微粒可视化快速检测技术的建立与应用
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作者 赵永攀 郑芳芳 +3 位作者 尹俊卿 杜谦 童德文 黄勇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3848-3862,共15页
随着集约化养殖业的发展,规模化养猪场对于病原的早期快速检测需求逐步增高,本研究旨在建立针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)、... 随着集约化养殖业的发展,规模化养猪场对于病原的早期快速检测需求逐步增高,本研究旨在建立针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)、猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)、猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪伪狂犬病病毒(porcine pseudorabies virus,PRV)、猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)和猪细小病病毒(porcine parvovirus,PPV)等7种常见病毒病病原感染的广谱磁纳米微粒可视化(ultrasensitive nanoparticle visualization detection,UNVs)现场检测技术。根据不同病毒的复制酶区域的高度保守区域,设计探针和引物,通过探针的筛选和条件的优化,得到具有特异性强、富集效率和杂交效率高的目的病原基因序列特异性识别探针(富集探针和杂交探针),分别与四氧化三铁磁性微粒和纳米金偶联,制备成针对每种病原的特异性功能化磁珠和功能化纳米金。以功能化磁珠为载体富集核酸信号,功能化纳米金做桥梁放大信号,使用双探针同时检测病原核酸,结合碱性磷酸酶的酶促可视化反应检测信号,建立针对猪PCV2、PRV、PPV、PEDV、TGEV、PRRSV和CSFV等7种病毒的现场可视化UNVS便捷诊断技术。结果显示,筛选设计的核酸探针与猪的其它病原无交叉反应,特异性良好。建立的针对PCV2、PRV、PPV、PEDV、TGEV、PRRSV和CSFV病原的UNVs可视化检测技术,检测限为103 copies·mL^(-1)(血清样本)或103 copies·g^(-1)(粪便样本),基本上达到了PCR或RT-PCR的检测敏感度,灵敏度组内与组间最大变异系数均小于5%,显色结果稳定,无较大差异,有良好的重复性,单个样本的检测可在4 h以内完成。应用该技术和PCR检测对来自陕西省的499份临床样品(疑患有PCV2、PRV、PPV、PEDV、TGEV、PRRSV和CSFV的猪的血清、粪便样品)进行同步检测和复检,结果显示,建立的针对7种病原的UNVs可视化检测方法不仅具有与普通PCR相同的敏感度,甚至与普通PCR相比有更高的检出率。本研究成功建立了针对PCV2、PRV、PPV、PEDV、TGEV、PRRSV和CSFV病原的UNVs可视化检测技术,具有灵敏度较高、检测范围广以及特异性和可靠性良好的优点,为猪的多种病原提供了一种快速、准确、灵敏的诊断技术。 展开更多
关键词 猪病毒病 磁纳米微粒 碱性磷酸酶 可视化 现场检测
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广西猪圆环病毒2型及3型的流行病学初步调查 被引量:2
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作者 甘雨 周庆安 +9 位作者 许光明 韩银华 韦海娜 蓝惠华 魏园园 黄胜斌 莫胜兰 胡丽萍 何奇松 施开创 《广西畜牧兽医》 2023年第6期251-254,共4页
为了解广西近年来猪圆环病毒2型(PCV2)、圆环病毒3型(PCV3)的感染现状,本研究采集2020年-2022年来自广西养殖场、生猪屠宰场及无害化处理点的样品,采用实时荧光定量PCR方法进行检测。结果表明,1408份样品中,有731份PCV2阳性样品,阳性率... 为了解广西近年来猪圆环病毒2型(PCV2)、圆环病毒3型(PCV3)的感染现状,本研究采集2020年-2022年来自广西养殖场、生猪屠宰场及无害化处理点的样品,采用实时荧光定量PCR方法进行检测。结果表明,1408份样品中,有731份PCV2阳性样品,阳性率为51.92%,471份PCV3阳性样品,阳性率为33.45%,有353份样品PCV2、PCV3均阳性,混合感染率25.07%。PCV2、PCV3普遍分布在广西14个地市,各地市感染程度存在较大差异。养殖场、屠宰场及无害化处理点PCV2、PCV3风险较高,风险由低到高依次是养殖场、屠宰场及无害化处理点。从不同类型样品携带病毒的情况来看,淋巴结和脾脏最高,脐带次之,精液未检测出阳性。这些结果可为我区PCV2、PCV3的流行情况分析、采样监测及防控提供依据。 展开更多
关键词 PCV2、PCV3 流行病学 实时荧光定量PCR
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猪繁殖与呼吸综合征的研究进展 被引量:90
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作者 刘光清 蔡雪晖 +2 位作者 仇华吉 郭宝清 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期72-76,共5页
关键词 猪繁殖呼吸综合征 PRRS 病毒 流行病学 防制
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猪传染性胃肠炎与猪流行性腹泻二联弱毒疫苗的研究 被引量:46
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作者 佟有恩 冯力 +3 位作者 李伟杰 朱远茂 王明 马思奇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第6期406-410,共5页
用TGE及PED克隆化弱毒株以1:1配比制成TGE、PED二联弱毒疫苗,毒价为107.0-7.5TCID50/0.3ml,主动免疫与被动免疫的保护率为97.7%及98%。弱毒株毒力稳定,符合制苗标准。免疫期7个月,疫苗保存期一年,疫苗接种猪对同圈饲养的非免... 用TGE及PED克隆化弱毒株以1:1配比制成TGE、PED二联弱毒疫苗,毒价为107.0-7.5TCID50/0.3ml,主动免疫与被动免疫的保护率为97.7%及98%。弱毒株毒力稳定,符合制苗标准。免疫期7个月,疫苗保存期一年,疫苗接种猪对同圈饲养的非免疫猪有低效价(16~32倍)的水平感染。6个猪场的田间试验保护率为95%-98%,对紧急预防接种的防制效果更为明显。 展开更多
关键词 传染性胃肠炎 流行性腹泻 二联弱毒疫苗 免疫
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我国猪瘟的流行病学现状分析 被引量:74
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作者 吕宗吉 涂长春 +4 位作者 余兴龙 吴健敏 李月红 马刚 张茂林 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期300-303,共4页
根据调查、收集的猪瘟 (CSF)临床与流行病学资料 ,分析了全国 16个省市自治区 48个发病猪场 (疫点 )的流行状况。调查结果表明 ,我国的CSF流行在较大范围内以临床表现不典型的CSF为主 ,发病多见于 3月龄以下的仔猪 ,发病率与死亡率普遍... 根据调查、收集的猪瘟 (CSF)临床与流行病学资料 ,分析了全国 16个省市自治区 48个发病猪场 (疫点 )的流行状况。调查结果表明 ,我国的CSF流行在较大范围内以临床表现不典型的CSF为主 ,发病多见于 3月龄以下的仔猪 ,发病率与死亡率普遍较高 ,流行规模以局部流行为主 ,同一猪场中育肥猪与种猪的发病率很低。但母猪多呈隐性感染 ,部分感染母猪表现出繁殖障碍 ,因此认为隐性感染母猪可能是仔猪感染的重要传染源。在某些地区 ,仍然流行着高发病率和致死率的急性、典型CSF。所调查的猪群具有较高防疫注射密度 ,但仍有CSF发生 ,可能表明猪群的免疫水平不高。 展开更多
关键词 中国 猪瘟 流行病学
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非洲猪瘟疫苗研究进展 被引量:43
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作者 戈胜强 吴晓东 +3 位作者 张志诚 张永强 赵永刚 王志亮 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期10-15,共6页
非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒引起的、以软蜱为传播媒介的猪的急性、热性、高度接触性传染病。该病毒主要在网状内皮细胞和单核巨噬细胞中复制,造成细胞凋亡,严重影响宿主的免疫系统。该病虽最早见报于1921年,但由于病毒基因组大,基... 非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒引起的、以软蜱为传播媒介的猪的急性、热性、高度接触性传染病。该病毒主要在网状内皮细胞和单核巨噬细胞中复制,造成细胞凋亡,严重影响宿主的免疫系统。该病虽最早见报于1921年,但由于病毒基因组大,基因型多且非常容易变异等客观原因,造成至今无有效的疫苗面世。国外ASF疫苗研发一直在开拓前行,而国内大多数文献只进行了简单的描述,没有全面展示ASF疫苗的研究进展,为此作者就ASF疫苗的相关研究进展进行综述,以期为我国ASF的疫苗研究提供参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 细胞免疫 疫苗
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猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型共感染对猪体内病毒动态及免疫反应的影响 被引量:14
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作者 施开创 杨汉春 +4 位作者 郭鑫 何宛仑 盖新娜 陈艳红 查振林 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期228-234,共7页
将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)单感染和共感染6周龄健康仔猪,采用实时定量PCR(Real-ti me PCR)对血清、组织(心、肝、肺、肾、胰、脾、胸腺、扁桃体、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结)中的PRRSV和PCV2载量进行检测... 将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)单感染和共感染6周龄健康仔猪,采用实时定量PCR(Real-ti me PCR)对血清、组织(心、肝、肺、肾、胰、脾、胸腺、扁桃体、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结)中的PRRSV和PCV2载量进行检测,分别采用间接ELISA和间接IFA对血清中的PRRSV和PCV2特异性抗体进行检测,采用MTT法对猪外周血淋巴细胞(PBLC)的增殖能力进行检测。结果,PRRSV/PCV2共感染组血清、组织中PRRSV的载量均显著高于PRRSV单感染组,PCV2的载量均显著高于PCV2单感染组;共感染组PRRSV和PCV2特异性抗体阳转的时间均晚于并且效价均显著低于PRRSV或PCV2单感染组;共感染组和单感染组PBLC的增殖能力均受到抑制,其严重程度依次为:PRRSV/PCV2组>PRRSV组>PCV2组。由此表明,PRRSV和PCV2在猪体内对彼此的增殖具有促进作用;PRRSV和PCV2共感染对猪的免疫抑制具有加重作用。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒2型 共感染 病毒载量 抗体效价 刺激指数 免疫抑制
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猪圆环病毒2型灭活疫苗的制备与免疫效力研究 被引量:25
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作者 董信田 李玉峰 +3 位作者 姜平 王先炜 冯志新 俞俐莉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期639-644,共6页
猪圆环病毒2型(PCV2)经0.2%甲醛37℃作用一定时间后接种PK-15细胞,盲传3代,用PCR方法检测灭活效果。将灭活的PCV2加入适量的白油和氢氧化铝胶制成PCV2油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗,免疫小鼠,共免疫2次,时间间隔为3周,分别于一免后第21天和... 猪圆环病毒2型(PCV2)经0.2%甲醛37℃作用一定时间后接种PK-15细胞,盲传3代,用PCR方法检测灭活效果。将灭活的PCV2加入适量的白油和氢氧化铝胶制成PCV2油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗,免疫小鼠,共免疫2次,时间间隔为3周,分别于一免后第21天和二免后第14天进行ELISA抗体检测。同时为了评价国产油佐剂和进口油佐剂的免疫效果,笔者进行了猪体免疫效力试验。通过ELISA抗体、攻毒后临床表现及体温变化、剖解时的病理变化、平均日增重及病毒血症等指标对疫苗免疫效果进行评价。结果如下:①PCV2能被0.2%甲醛完全灭活,灭活时间为16 h。②PCV2油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗免疫小鼠后均能产生较好的免疫应答,并且油佐剂灭活疫苗免疫效果好于铝胶佐剂灭活疫苗。③猪体免疫效力试验表明,两种油苗均能产生较高水平的ELISA抗体。攻毒后,攻毒对照猪的体温高于免疫猪,空白对照猪体温正常。免疫猪及空白对照猪平均体重均升高,而攻毒对照猪平均体重有所降低,且两个免疫组和空白对照组之间平均日增重差异显著(P<0.05)。病毒血症检测及病毒DNA在组织中的分布检测表明两油苗均能够有效降低猪体的带毒。以上结果表明,PCV2灭活疫苗免疫小鼠和猪体后均能诱导机体产生免疫应答,并能够在一定程度上抵抗PCV2对猪体的感染。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 油佐剂 氢氧化铝佐剂 灭活苗
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猪生殖-呼吸道综合征病毒抗原在死胎及新生仔猪体内的分布 被引量:23
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作者 吴东来 郭宝清 +3 位作者 李桂芝 蔡雪晖 王继科 褚桂芳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第2期128-129,共2页
应用抗猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)单克隆抗体所做的间接免疫荧光抗体试验(IFA),对人工接种PRRSV的3头妊娠母猪所产9头死胎和2头新生仔猪体内的PRRSV抗原分布进行了观察。结果表明,PRRSV抗原在死... 应用抗猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)单克隆抗体所做的间接免疫荧光抗体试验(IFA),对人工接种PRRSV的3头妊娠母猪所产9头死胎和2头新生仔猪体内的PRRSV抗原分布进行了观察。结果表明,PRRSV抗原在死胎主要分布于脾脏(9/9)和淋巴结(3/4)的巨噬细胞内,而少见于肺(2/9)和肾(0/9)等其他脏器。但新生仔猪则仅在肺脏(2/2)的巨噬细胞内检出了PRRSV抗原。此结果说明PRRSV可通过胎盘屏障垂直传播给胎儿。 展开更多
关键词 抗原分布 死胎 新生仔猪 PRRS
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PRRSV和PCV2共感染对猪肺泡巨噬细胞细胞因子IL-10、IL-12p40和IFN-γ mRNA转录的影响 被引量:16
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作者 李焕荣 杨汉春 +4 位作者 郭鑫 施开创 盖新娜 陈艳红 查振林 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期382-387,共6页
用猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)共感染40日龄健康仔猪,利用实时荧光定量PCR技术对共感染仔猪肺泡巨噬细胞(PAM)细胞因子IL-10、IL-12p40和IFN-γ的mRNA转录水平的变化进行了定量分析。结果表明,IL-12p40 mRNA转... 用猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)共感染40日龄健康仔猪,利用实时荧光定量PCR技术对共感染仔猪肺泡巨噬细胞(PAM)细胞因子IL-10、IL-12p40和IFN-γ的mRNA转录水平的变化进行了定量分析。结果表明,IL-12p40 mRNA转录从攻毒后3 d开始显著上调(P<0.05),7 d达高峰,14 d开始下降,但仍显著高于对照组(P<0.05),28 d和42 d低于对照组;IL-10 mRNA在3 d显著上调(P<0.05),14 d达到转录高峰(P<0.01),之后逐渐下降,42 d接近对照组水平;IFN-γmRNA转录水平尽管在3 d和28 d时出现2次转录低峰1、4 d和42 d时出现2次高峰,但只在3 d和7 d差异显著(P<0.05)。由此表明,PRRSV和PCV2共感染可导致PAM细胞因子IL-12p40和IL-10 mRNA的转录在感染早期被激活,而IFN-γ mRNA转录则呈较复杂的动态变化,提示PRRSV和PCV2共感染猪PAM的免疫应答、免疫调节和抗感染功能均受到不同程度的影响。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒2型 共感染 肺泡巨噬细胞 细胞因子
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猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与初步鉴定 被引量:93
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作者 杨汉春 管山红 +1 位作者 尹晓敏 甘孟侯 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1997年第10期9-10,共2页
猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与初步鉴定杨汉春管山红*尹晓敏*甘孟侯(中国农业大学动物医学院,北京海淀100094)猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是猪的一种新病毒性传染病,首先在北美洲和欧洲发现,曾有“蓝耳病”、“神秘... 猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与初步鉴定杨汉春管山红*尹晓敏*甘孟侯(中国农业大学动物医学院,北京海淀100094)猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是猪的一种新病毒性传染病,首先在北美洲和欧洲发现,曾有“蓝耳病”、“神秘病”等之称[1,2]。该病现已遍布... 展开更多
关键词 繁殖呼吸综合症 病毒 分离 鉴定 猪病
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2016—2017年江西省部分地区规模化猪场猪伪狂犬病血清流行病学调查 被引量:30
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作者 李海琴 康昭风 +2 位作者 谭美芳 曾艳兵 季华员 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1037-1041,共5页
为了解2016—2017年江西部分地区规模化猪场猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒感染状况和猪伪狂犬病免疫状况,应用ELISA方法对江西32个规模化猪场1 820份血清开展猪伪狂犬抗体血清学调查。调查结果显示:猪场血清样品PRV gE样品总阳性率为37.4%,... 为了解2016—2017年江西部分地区规模化猪场猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒感染状况和猪伪狂犬病免疫状况,应用ELISA方法对江西32个规模化猪场1 820份血清开展猪伪狂犬抗体血清学调查。调查结果显示:猪场血清样品PRV gE样品总阳性率为37.4%,场阳性率为65.6%;公猪、母猪、哺乳仔猪、保育仔猪、育肥猪及后备猪的血清样品野毒总阳性率分别为35.8%、44.2%、33.5%、29.2%、48.9%和32.7%;不同地区猪场PRV野毒感染情况不同,九江市野毒感染率最高(52.2%),其次依次为抚州、宜春、南昌、赣州、吉安、新余,上饶; 4个季度的PRV gE阳性率均在30%以上,其中第四季度PRV gE阳性率最高(43%); PRV gB抗体检测结果显示gB抗体阳性率与gE野毒阳性率没有明显的相关性,这也表明较高的gB抗体阳性率并不能说明猪群未受到伪狂犬野毒的感染,结果表明,近年来江西地区规模化猪场猪伪狂犬病野毒感染压力很大,猪伪狂犬病的控制与净化形势严峻。 展开更多
关键词 猪伪狂犬 血清学调查 gE抗体 gB抗体
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