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CRISPR/Cas9系统介导大鼠Inhba基因的编辑
被引量:
2
1
作者
赵为民
涂枫
+4 位作者
王泽平
程金花
付言峰
李碧侠
任守文
《湖南农业大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第6期700-704,共5页
利用chopchop网站对大鼠Inhba基因的第二外显子设计sgRNA位点,通过合成sgRNA寡核苷酸、酶切连接构建到px330载体,再转染px330-Inhba-sgRNA载体到大鼠L6细胞,通过T7E1酶切、T载体克隆测序来验证sgRNA编辑Inhba基因的效率。结果表明:转染p...
利用chopchop网站对大鼠Inhba基因的第二外显子设计sgRNA位点,通过合成sgRNA寡核苷酸、酶切连接构建到px330载体,再转染px330-Inhba-sgRNA载体到大鼠L6细胞,通过T7E1酶切、T载体克隆测序来验证sgRNA编辑Inhba基因的效率。结果表明:转染pX330-Inbha-sgRNA载体后,Inhba基因的编辑区域的PCR产物能被T7E1酶切割预期条带;T载体克隆测序显示,随机选取的20个单克隆中有5个克隆在预期切割位点附近出现不同长度的碱基缺失,估测编辑效率为25%。可见,本研究设计的sgRNA能够有效利用CRISPR/Cas9系统对Inhba基因进行编辑。
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关键词
大鼠
Inhba基因
CRISPR/Cas9
外显子
sgRNA
基因编辑
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职称材料
题名
CRISPR/Cas9系统介导大鼠Inhba基因的编辑
被引量:
2
1
作者
赵为民
涂枫
王泽平
程金花
付言峰
李碧侠
任守文
机构
江苏省农业科学院畜牧研究所
江苏省农业种质资源保护与利用平台
农业农村部种养结合重点实验室
江苏省农业科学院宿迁农科所
出处
《湖南农业大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第6期700-704,共5页
基金
财政部和农业农村部国家现代农业产业技术体系
江苏省农业重大新品种创制项目(PZCZ201733)。
文摘
利用chopchop网站对大鼠Inhba基因的第二外显子设计sgRNA位点,通过合成sgRNA寡核苷酸、酶切连接构建到px330载体,再转染px330-Inhba-sgRNA载体到大鼠L6细胞,通过T7E1酶切、T载体克隆测序来验证sgRNA编辑Inhba基因的效率。结果表明:转染pX330-Inbha-sgRNA载体后,Inhba基因的编辑区域的PCR产物能被T7E1酶切割预期条带;T载体克隆测序显示,随机选取的20个单克隆中有5个克隆在预期切割位点附近出现不同长度的碱基缺失,估测编辑效率为25%。可见,本研究设计的sgRNA能够有效利用CRISPR/Cas9系统对Inhba基因进行编辑。
关键词
大鼠
Inhba基因
CRISPR/Cas9
外显子
sgRNA
基因编辑
Keywords
rat
Inhba gene
CRISPR/Cas9
exon
sgRNA
gene editing
分类号
S865.124.3 [农业科学—野生动物驯养]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
CRISPR/Cas9系统介导大鼠Inhba基因的编辑
赵为民
涂枫
王泽平
程金花
付言峰
李碧侠
任守文
《湖南农业大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2021
2
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