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LINC_00355通过miR-15a-5p调节PHF19在肺癌侵袭转移中的作用机制研究
1
作者 徐柯楠 刘静 +2 位作者 夏丽 周平 杨海龙 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第5期629-634,640,共7页
目的 探讨LINC_00355通过miR-15a-5p调节PHF19在肺癌侵袭转移中的作用机制。方法 采用A549肺癌细胞作为实验细胞。将细胞分为A549肺癌细胞组、lncRNA-NC组、LINC_00355 mimics组、LINC_00355 inhibitor组,进行不同处理。A549肺癌细胞组... 目的 探讨LINC_00355通过miR-15a-5p调节PHF19在肺癌侵袭转移中的作用机制。方法 采用A549肺癌细胞作为实验细胞。将细胞分为A549肺癌细胞组、lncRNA-NC组、LINC_00355 mimics组、LINC_00355 inhibitor组,进行不同处理。A549肺癌细胞组:不进行任何处理;lncRNA-NC组:加入空白载体;LINC_00355 mimics组:加入LINC_00355过表达载体;LINC_00355 inhibitor组:加入LINC_00355低表达载体。培养结束后,MTT法测定细胞活力,检测单克隆形成数、迁移和侵袭水平。采用萤光素酶报告基因实验分析LINC_00355对miR-15a-5p的靶向作用;实时荧光定量PCR(qPCR)法检测细胞LINC_00355、miR-15a-5p、PHF19,Western blot检测PHF19蛋白表达水平。结果 与A549肺癌细胞组、lncRNA-NC组比较,LINC_00355 mimics组吸光度(A)值、细胞活力、单克隆形成数、穿膜数、迁移距离升高(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05);LINC_00355 inhibitor组A值、细胞活力、单克隆形成数、穿膜数、迁移距离降低,凋亡率升高(P<0.05);与LINC_00355 mimics组比较,LINC_00355 inhibitor组A值、细胞活力、单克隆形成数、穿膜数、迁移距离降低,凋亡率升高(P<0.05)。LINC_00355过表达可明显降低miR-15a-5p-wt的萤光素酶活性(P<0.05);与A549肺癌细胞组、lncRNA-NC组比较,LINC_00355 mimics组细胞LINC_00355、PHF19 mRNA表达上调,miR-15a-5p表达降低(P<0.05),LINC_00355 inhibitor组细胞LINC_00355及PHF19 mRNA和蛋白表达降低,miR-15a-5p表达升高(P<0.05);与LINC_00355 mimics组比较,LINC_00355 inhibitor组细胞LINC_00355 mRNA、PHF19 mRNA和蛋白表达降低,miR-15a-5p表达升高(P<0.05)。结论 LINC_00355过表达促进肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭并诱导细胞凋亡,敲低LINC_00355则产生相反的效果;其机制可能与LINC_00355负调控miR-15a-5p进而上调肺癌细胞中PHF19的表达有关。 展开更多
关键词 LINC_00355 miR-15a-5p PHF19 肺癌 细胞侵袭 细胞转移
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pBIFC-VN173-CXCR4和pBIFC-VC155-NT21MP真核表达质粒的构建及其在活细胞内的作用 被引量：2
2
作者 高艳军 杨清玲 +1 位作者 陈昌杰 丁勇兴 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期519-526,共8页
目的:构建pBIFC-VN173-CXCR4和pBIFC-VC155-NT21MP真核表达质粒,利用双分子荧光互补(BiFC)技术,在活细胞内直接观察趋化因子受体4(chemokine receptor 4、CXCR4和CD184)与CXCR4抑制性多肽的相互作用。方法:应用化学合成法获得巨噬细胞... 目的:构建pBIFC-VN173-CXCR4和pBIFC-VC155-NT21MP真核表达质粒,利用双分子荧光互补(BiFC)技术,在活细胞内直接观察趋化因子受体4(chemokine receptor 4、CXCR4和CD184)与CXCR4抑制性多肽的相互作用。方法:应用化学合成法获得巨噬细胞炎症蛋白Ⅱ(viralmacrophage inflammatory protein-Ⅱ,vMIP-Ⅱ)N端21肽(N-terminal 21-mer peptide,NT21MP)编码的基因序列,克隆至经Kpn I和EcoRⅠ酶切的pBiFC-VC155中,筛选含有目标基因的正确克隆。利用RT-PCR扩增人乳腺癌细胞株SKBR3的CXCR4全长基因后,T-A亚克隆至经Kpn I和EcoRⅠ酶切的pBiFC-VN173载体中。然后,经酶切鉴定及DNA测序分析2个基因是否正确连接至真核表达载体中。应用脂质体转染的方法共转染pBiFC-VC155-NT21MP和pBiFC-VC155-CXCR4至细胞株COS-7中,在荧光显微镜下观察NT21MP与CXCR4在胞内的相互作用。结果:经DNA测序及同源性对比,证实pBiFC-VC155-NT21MP和pBiFC-VN173-CXCR4重组载体构建成功;基因片段与NCBI基因库vMIP-Ⅱ和CXCR4基因CDS序列同源性达99.9%。BiFC法观察NT21MP与CXCR4在细胞内结合出现的荧光信号,该信号分布细胞内。结论:本实验成功构建了应用BiFC技术的真核表达载体,并且在活细胞内检测到NT21MP与CXCR4的互相结合。 展开更多
关键词 受体 趋化因子/遗传学 趋化因子CXCL2 质粒 重组蛋白质类/遗传学 遗传载体 转染 遗传互补测验
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基于多参数MRI影像组学评估前列腺癌侵袭性
3
作者 杨静 黄豆豆 +2 位作者 陈峻帆 罗银灯 刘玥希 《陆军军医大学学报》 CSCD 2024年第2期170-180,共11页
目的 探讨多参数MRI上不同感兴趣区的影像组学模型和结合影像组学、PI-RADS 2.1评分、临床变量的综合模型在评估前列腺癌侵袭性方面的价值。方法 收集本院2018年5月至2022年9月2个医疗中心经病理确诊为前列腺癌患者245例:渝中院区176例... 目的 探讨多参数MRI上不同感兴趣区的影像组学模型和结合影像组学、PI-RADS 2.1评分、临床变量的综合模型在评估前列腺癌侵袭性方面的价值。方法 收集本院2018年5月至2022年9月2个医疗中心经病理确诊为前列腺癌患者245例:渝中院区176例,其中低侵袭性组[Gleason评分≤7(3+4)]77例,高侵袭性组[Gleason评分≥7(4+3)]99例;江南院区69例(低侵袭性组33例,高侵袭性组36例)。所有患者行多参数MRI检查后,在多参数MRI图像上分割2种ROI:肿瘤病变区域(tumor region, TR)和前列腺区域(prostate gland, PG)。评估与前列腺癌侵袭性相关的临床变量,并记录每位患者的PI-RADS 2.1评分。使用逻辑回归算法作为机器学习算法,建立多个前列腺癌侵袭性分层模型:影像组学模型(ModelTR、ModelPG、ModelPG+TR)、影像组学-临床联合模型、影像组学-PIRADS联合模型、临床-PIRADS联合模型和影像组学-临床-PIRADS综合模型。分别采用受试者工作特性(ROC)曲线、曲线下面积(AUC)和决策曲线分析(DCA)比较各模型的诊断价值和临床收益。结合影像组学评分、独立临床变量和PI-RADS2.1评分构建影像组学列线图。通过校准度、区分度和临床应用评价列线图性能。结果 在3种影像组学模型中,ModelPG+TR的AUC值为0.919,高于ModelTR(AUC=0.874)和ModelPG(AUC=0.887)。在联合模型中,影像组学-PIRADS-临床综合模型的AUC为0.954,优于影像组学模型(AUC=0.919)、影像组学-临床联合模型(AUC=0.919)、影像组学-PIRADS联合模型(AUC=0.921)和临床-PIRADS联合模型(AUC=0.769)。列线图在评估前列腺癌侵袭性方面显示出良好的风险分层性能(AUC=0.919)和校准效能。决策曲线分析显示,影像组学模型ModelPG+TR和影像组学-临床-PIRADS综合模型获得了较高的临床净收益。结论 结合前列腺和肿瘤区域特征的影像组学模型可准确评估前列腺癌的侵袭性;结合影像组学、PI-RADS 2.1评分和临床变量的综合模型能进一步提高对前列腺癌侵袭性的评估性能。 展开更多
关键词 影像组学 多参数磁共振成像 前列腺肿瘤 侵袭性 前列腺体积 肿瘤体积
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Ki-67、Her-2及CD147在老年女性乳腺癌中的表达及意义
4
作者 邓姣 陈宽冰 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第5期1054-1057,共4页
目的探究与分析癌组织中细胞增殖核抗原(Ki-67)、人表皮生长因子受体(Her)-2及细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)在老年女性乳腺癌中的表达水平及意义。方法选取2019年7月至2021年4月在中国医科大学附属盛京医院接受乳腺癌手术切除术... 目的探究与分析癌组织中细胞增殖核抗原(Ki-67)、人表皮生长因子受体(Her)-2及细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)在老年女性乳腺癌中的表达水平及意义。方法选取2019年7月至2021年4月在中国医科大学附属盛京医院接受乳腺癌手术切除术的105例患者的病理组织标本作为乳腺癌组,将距离肿瘤边缘>5 cm的乳腺组织作为癌旁正常组,采用免疫组织化学法测量并对比乳腺癌组与癌旁正常组标本中Ki-67、Her-2及CD147的表达水平,并将上述指标表达水平与临床病理关系进行分析;对Ki-67、Her-2及CD147的表达水平采用Spearman相关性分析,对全部患者实施为其1年的乳腺癌手术后随访,对随访后乳腺癌患者的生存情况进行统计,对比Ki-67、Her-2及CD147的表达水平在不同生存情况下表达的差异性。结果乳腺癌组组织标本中Ki-67、Her-2及CD147蛋白光度值均显著高于癌旁正常组(P<0.05)。Ki-67、Her-2及CD147蛋白表达分别在肿瘤>5 cm、病理类型为浸润性导管癌、组织分型为中低分化、有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、有脉管侵袭的患者中具有更高的阳性表达率(P<0.05)。死亡组组织标本中Ki-67、Her-2及CD147蛋白阳性表达水平显著高于生存组(P<0.05)。Ki-67、Her-2及CD147互相呈现出了明显的正相关性(P<0.05)。结论Ki-67、Her-2及CD147在乳腺癌组织中多呈现出表达异常的情况,三者之间互相呈现出了明显的正相关性,且上述指标与乳腺癌病理特征、生存预后具有一定的关系。 展开更多
关键词 乳腺癌 细胞增殖核抗原 人表皮生长因子受体-2 细胞外基质金属蛋白酶诱导因子 生存预后
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miR-107靶向FGFRL1/AKT通路抑制胃癌耐药细胞迁移
5
作者 蒋露 张燕 任伟宏 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期705-710,共6页
目的检测胃癌敏感和耐药细胞迁移能力的强弱,探究miR-107靶向成纤维细胞生长因子受体样蛋白(FGFRL)1/蛋白激酶B(AKT)通路调节胃癌耐药细胞迁移。方法利用划痕和transwell小室实验验证胃癌敏感和耐药细胞的迁移;采用荧光定量聚合酶链反应... 目的检测胃癌敏感和耐药细胞迁移能力的强弱,探究miR-107靶向成纤维细胞生长因子受体样蛋白(FGFRL)1/蛋白激酶B(AKT)通路调节胃癌耐药细胞迁移。方法利用划痕和transwell小室实验验证胃癌敏感和耐药细胞的迁移;采用荧光定量聚合酶链反应(PCR),Western印迹检测敏感和耐药胃癌细胞中miR-107、FGFRL1/AKT通路活性及迁移相关蛋白(E-钙黏附蛋白(Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和基质金属蛋白酶(MMP)9)的表达;利用荧光素酶报告实验鉴定miR-107与FGFRL1之间的靶向关系;将胃癌细胞耐药株分为mimic NC组、miR-107 mimic组、NC组和siFGFRL1组,荧光定量PCR、Western印迹检测胃癌耐药细胞中FGFRL1 mRNA表达水平、FGFRL1/AKT通路活性及迁移相关蛋白表达水平;划痕和transwell小室实验测定胃癌耐药细胞迁移能力的变化。结果与胃癌敏感细胞相比,胃癌耐药细胞迁移能力更强,且miR-107呈明显低表达,FGFRL1 mRNA和蛋白水平显著高表达,AKT活性(p-AKT水平)与Vimentin、MMP9蛋白水平显著高表达,E-Cadherin蛋白水平显著低表达(均P<0.05);与mimic NC组和NC组相比,在miR-107 mimic组、siFGFRL1组中胃癌耐药细胞中FGFRL1 mRNA和蛋白表达水平显著下调,AKT活性与Vimentin、MMP9蛋白显著下调,E-Cadherin显著上调,胃癌耐药细胞迁移能力也显著下降(均P<0.05),且荧光素酶报告实验表明FGFRL1是miR-107的下游靶标分子。结论胃癌耐药细胞迁移能力更强,miR-107通过靶向调节FGFRL1/AKT通路活性调控迁移相关蛋白的表达,进而调控胃癌耐药细胞的迁移。 展开更多
关键词 胃癌耐药细胞 miR-107 成纤维细胞生长因子受体(FGFR)L1/蛋白激酶B(AKT) 迁移
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右美托咪定对肝细胞肝癌肿瘤学行为的影响及Nrf2在其中的作用
6
作者 吴瑞欣 周大臣 +1 位作者 唐赛兰 黄春霞 《安徽医科大学学报》 CAS 2024年第1期15-22,共8页
目的从在体和离体两个层面评价右美托咪定对肝细胞肝癌肿瘤学行为的影响及核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)在其中的作用。方法在体层面:将雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照(Ctrl)组、肝细胞肝癌(HCC)组、HCC+右美托咪定(HCC+Dex)组。小鼠... 目的从在体和离体两个层面评价右美托咪定对肝细胞肝癌肿瘤学行为的影响及核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)在其中的作用。方法在体层面:将雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照(Ctrl)组、肝细胞肝癌(HCC)组、HCC+右美托咪定(HCC+Dex)组。小鼠经N-亚硝基二乙胺(DEN)/四氯化碳(CCl 4)联合诱导形成HCC,随后2周每日腹腔注射右美托咪定10μg/kg,继续饲养小鼠1个月后,检测小鼠肝脏肿瘤的数量及最长径,利用Ki67免疫组化评估肝癌的增殖能力,通过免疫荧光检测肿瘤组织中Nrf2蛋白的表达水平。离体层面:在Hepa1-6细胞中,给予不同浓度的右美托咪定(0.1、1.0、5.0 nmol/L)孵育48 h,分别采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)、Transwell法检测细胞的增殖、侵袭和迁移能力,使用Western blot和免疫荧光检测肝癌细胞中Nrf2蛋白的表达水平。经si-RNA转染敲低Nrf2,继以1 nmol/L右美托咪定孵育48 h后,分别使用MTT、Transwell法检测细胞的增殖、侵袭和迁移能力。结果与HCC组比较,解剖学检查结果显示HCC+Dex组小鼠肝脏肿瘤数量增多、最长径增长(P<0.05);Ki67免疫组化结果显示,HCC+Dex组肝癌组织Ki67阳性细胞数增加(P<0.01);免疫荧光结果显示,HCC+Dex组Nrf2表达水平上调(P<0.01)。MTT结果显示1 nmol/L的右美托咪定增强了Hepa1-6细胞的细胞活力(P<0.05);Transwell法结果显示0.1、1和5 nmol/L的右美托咪定增强了Hepa1-6细胞的侵袭能力,0.1、1 nmol/L的右美托咪定增强了Hepa1-6细胞的迁移能力(P<0.05);Western blot和免疫荧光结果显示,使用1 nmol/L的右美托咪定处理后,细胞的Nrf2表达水平上调(P<0.01);使用si-RNA敲低细胞的Nrf2表达水平,再继以1 nmol/L的右美托咪定处理后,MTT、Transwell检测结果显示,Hepa1-6细胞的活力降低,侵袭和迁移的能力降低(P<0.01)。结论右美托咪定可能通过提高Nrf2的表达水平来促进肝癌的增殖、侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 右美托咪定 肝细胞肝癌 核因子E2相关因子2 增殖 侵袭 迁移
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MiR-326调控EphB3抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移 被引量：1
7
作者 陈新璐 陈琳 +5 位作者 左伟 赵燕乔 刘璐 李洪利 李承德 尹崇高 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期665-672,共8页
目的 探究miR-326通过调控EphB3的表达,抑制乳腺癌侵袭转移的分子机制。方法 RTFQ-PCR用于检测miR-326在正常乳腺上皮细胞及乳腺癌细胞中的表达情况及miR-326过表达质粒的转染效率。EdU细胞增殖实验、Transwell实验用于检测不同分组细... 目的 探究miR-326通过调控EphB3的表达,抑制乳腺癌侵袭转移的分子机制。方法 RTFQ-PCR用于检测miR-326在正常乳腺上皮细胞及乳腺癌细胞中的表达情况及miR-326过表达质粒的转染效率。EdU细胞增殖实验、Transwell实验用于检测不同分组细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。双荧光素酶实验用于验证miR-326与EphB3是否存在结合位点。Western blot法检测过表达miR-326后乳腺癌细胞中EphB3的表达情况。结果 RTFQ-PCR结果显示,miR-326在乳腺癌细胞中低表达,且转染成功(P<0.05)。EdU增殖实验和Transwell实验结果表明,过表达miR-326能够抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。双荧光素酶实验结果显示,miR-326可以与EphB3的3′-UTR相互结合(P<0.05)。Western blot和Transwell实验结果显示,miR-326可以负向调控EphB3抑制乳腺癌细胞的侵袭转移(P<0.05)。结论 miR-326在乳腺癌的发生发展过程中起着抑癌基因的作用,并通过调控EphB3的表达抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移。 展开更多
关键词 乳腺癌 MiR-326 EphB3 侵袭 转移 增殖
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CXCR4在VEGF-C介导的胃癌淋巴道转移中的作用 被引量：15
8
作者 孙梯业 赵永亮 +3 位作者 颜伟 石彦 曾冬竹 余佩武 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期161-165,共5页
目的探索趋化因子受体CXCR4和VEGF-C与胃癌淋巴道转移的关系,为研究干预胃癌淋巴转移的新方法提供理论依据。方法采用RT-PCR方法检测86例胃癌组织中趋化因子受体CXCR4 mRNA的表达及VEGF-C mRNA的表达,探索其与胃癌淋巴结转移的关系;Boy... 目的探索趋化因子受体CXCR4和VEGF-C与胃癌淋巴道转移的关系,为研究干预胃癌淋巴转移的新方法提供理论依据。方法采用RT-PCR方法检测86例胃癌组织中趋化因子受体CXCR4 mRNA的表达及VEGF-C mRNA的表达,探索其与胃癌淋巴结转移的关系;Boyden趋化小室法检测CXCR4不同表达状态胃癌细胞的趋化活性和趋化抑制性。结果86例胃癌组织均有不同程度的CXCR4 mRNA和VEGF-C mRNA的表达。53例CXCR4 mRNA呈高表达,表达率为61.63%,VEGF-C mRNA高表达率为56.98%(49/86);VEGF-C mRNA高表达组中的CXCR4 mRNA的表达率也较高;CXCR4 mRNA的表达与胃癌淋巴结转移呈正相关(P<0.05);CXCR4的配体SDF-l对胃癌细胞的平均趋化率为81%,经抗CXCR4单克隆抗体处理后癌细胞的平均趋化率下降至30%,CXCR4被特异性抗体封闭前后的癌细胞趋化活性有显著性差异(P<0.05)。结论胃癌CXCR4的表达和VEGF-C的表达与胃癌淋巴结转移呈正相关;CXCR4的功能状态影响胃癌细胞的迁移活性。通过干预趋化因子受体CXCR4和VEGF-C的活性可能成为阻断胃癌淋巴转移的新靶点。 展开更多
关键词 胃癌 CXCR4 VEGF—C 淋巴转移 侵袭 转移
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LINC00958通过上调VEGF-C表达促进宫颈癌细胞的恶性生物学行为及小鼠模型的淋巴结转移
9
作者 靖爽 和晓利 +1 位作者 井佳雨 王悦 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2024年第2期161-168,共8页
目的:探讨LINC00958/血管内皮生长因子C(VEGF-C)信号通路在宫颈癌的淋巴管生成和淋巴转移中的作用。方法:从2020年9月至2022年9月期间在河南省人民医院接受手术的患者中收集了42例宫颈癌组织标本,通过qPCR检测宫颈癌组织和宫颈癌细胞(H... 目的:探讨LINC00958/血管内皮生长因子C(VEGF-C)信号通路在宫颈癌的淋巴管生成和淋巴转移中的作用。方法:从2020年9月至2022年9月期间在河南省人民医院接受手术的患者中收集了42例宫颈癌组织标本,通过qPCR检测宫颈癌组织和宫颈癌细胞(Hela、C33A、SiHa、Caski)中LINC00958的表达情况。将LINC00958过表达载体(LINC00958组)或对照载体(CMV组)转染Caski细胞,敲减LINC00958(shLINC00958组)、VEGF-C(shVEGF-C组)的shRNA序列或阴性对照shRNA(shNC组)转染SiHa细胞。分别通过CCK-8法、Transwell实验检测过表达或敲减LINC00958对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。观察转染后细胞的培养上清液对人淋巴管内皮细胞(HLEC)淋巴管形成能力的影响。建立小鼠腘淋巴结转移模型,观察过表达LINC00958或同时敲减VEGF-C对宫颈癌淋巴结转移的影响。结果:LINC00958在宫颈癌组织中呈高表达(P<0.001),高水平的LINC00958与大肿瘤、晚期肿瘤分级、浸润深度和淋巴转移有关联(P<0.05或P<0.01)。与正常人宫颈上皮细胞ende1617相比,宫颈癌细胞中LINC00958水平均显著升高(P<0.01或P<0.001)。shLINC00958组SiHa细胞的增殖、迁移、侵袭能力及其培养上清液的促HLEC淋巴管形成能力均显著低于shNC组(P<0.05、P<0.01或P<0.001),LINC00958组Caski细胞的增殖、迁移、侵袭能力及其培养上清液的促HLEC淋巴管形成能力显著高于CMV组(P<0.05、P<0.01或P<0.001)。通过RNA下拉、RNA免疫沉淀实验发现宫颈癌细胞中LINC00958能够特异性结合VEGF-C。LINC00958+shVEGF-C组Caski细胞的增殖、迁移、侵袭能力及其培养上清液的促淋巴管形成能力显著低于LINC00958组(P<0.01或P<0.001);在小鼠腘淋巴结转移模型中,LINC00958+shVEGF-C组中小鼠腘窝淋巴结的体积和VEGF-C蛋白、N-cadherin蛋白以及LYVE-1的阳性细胞比例均显著低于LINC00958组(均P<0.001)。结论:LINC00958通过直接与VEGF-C蛋白相互作用增强宫颈癌细胞的增殖、侵袭、淋巴管生成能力,促进小鼠腘淋巴结转移模型的淋巴结转移。 展开更多
关键词 LINC00958 血管内皮生长因子C 宫颈癌 CASKI细胞 SIHA细胞 淋巴管形成 淋巴结转移
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^(99)Tc^(m)-3PRGD2显像在甲状腺乳头状癌术前转移淋巴结诊断及手术方案制订中的价值
10
作者 杨晔 贾茜 +3 位作者 王源波 刘岩 姚小宝 高蕊 《中国医学影像学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第10期1011-1017,共7页
目的探讨^(99)Tc^(m)-3PRGD2显像及其联合超声在预测甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移及手术方案制订中的应用价值。资料与方法前瞻性对2020年1月—2021年1月西安交通大学第一附属医院因甲状腺乳头状癌伴可疑淋巴结转移行手术治疗的28例患... 目的探讨^(99)Tc^(m)-3PRGD2显像及其联合超声在预测甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移及手术方案制订中的应用价值。资料与方法前瞻性对2020年1月—2021年1月西安交通大学第一附属医院因甲状腺乳头状癌伴可疑淋巴结转移行手术治疗的28例患者(87个淋巴结,包括中央区32个、颈侧区55个),于术前超声检查后7 d内行^(99)Tc^(m)-3PRGD2 SPECT/CT显像。以术后病理为“金标准”,比较^(99)Tc^(m)-3PRGD2 SPECT/CT及超声预测颈部淋巴结转移的情况;比较^(99)Tc^(m)-3PRGD2 SPECT/CT、超声及二者联合预测颈部淋巴结转移的敏感度、特异度、准确度、阳性预测值与阴性预测值的差异,并比较影像学结果与病理、随访结果的一致性。结果中央区组病理确诊22个转移灶,10个良性病变。超声提示9个转移,SPECT/CT提示11个存在异常局灶性摄取。3PRGD2显像正确鉴别2个超声可疑转移,6个超声假阴性,1个超声假阳性。颈侧区组病理确诊38个转移灶,17个良性病变。超声提示34个转移,SPECT/CT提示25个存在异常局灶性摄取。3PRGD2显像正确鉴别8个超声可疑转移,5个超声假阴性,1个超声假阳性。基于此调整手术清扫范围,减少了病灶遗漏。两者联合诊断时,颈侧区组[89.47%、87.27%、77.78%、0.707(P<0.01)]及总体[80.00%、79.31%、63.64%、0.545(P<0.01)]的敏感度、准确度、阴性预测值和与病理随访结果的Kappa值均较单一检查升高,且差异有统计学意义(χ^(2)=6.483~18.157,P均<0.01)。结论在甲状腺乳头状癌术前超声提示异常淋巴结的良、恶性判断中,^(99)Tc^(m)-3PRGD2 SPECT/CT可降低超声假阴性率及假阳性率,联合超声可有效预测颈部淋巴结转移,对颈侧区淋巴结的预测可能更显著;在临床决策和手术方案制订中具有额外优势及增益价值。 展开更多
关键词 甲状腺癌 乳头状 淋巴转移 手术方案制订 ^(99)Tc^(m)-3PRGD2 SPECT/CT 超声检查
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EGFR信号通路调控结肠癌Caco-2细胞侵袭转移的分子机制 被引量：10
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作者 张晓晶 王甦 +2 位作者 刘云鹏 候科佐 王舒宝 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第14期1479-1482,共4页
目的探讨EGFR信号通路与人结肠癌Caco-2细胞增殖和侵袭转移的关系及其调控分子机制。方法采用MTT法和Boyden小室体外侵袭实验检测Caco-2细胞增殖和体外侵袭能力;采用RT-PCR方法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2基因转录水平;采用W este... 目的探讨EGFR信号通路与人结肠癌Caco-2细胞增殖和侵袭转移的关系及其调控分子机制。方法采用MTT法和Boyden小室体外侵袭实验检测Caco-2细胞增殖和体外侵袭能力;采用RT-PCR方法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2基因转录水平;采用W estern b lot法检测P-EGFR和P-ERK蛋白表达。结果外源性EGF(10μg/L)增加P-EGFR和P-ERK蛋白表达同时使24 h细胞生长率提高了23.35%(P<0.01),使过膜细胞数由(208±3)上升到(241±5)(P<0.01)。当用AG1478(20μmol/L)和PD98059(40μmol/L)分别阻断EGFR和ERK/MAPK后,EGF作用消失,Caco-2细胞生长明显抑制(P<0.01),但无时间效应关系;Caco-2细胞体外侵袭力明显减弱(P<0.01)。RT-PCR测定显示,EGF能增加Caco-2细胞MMP-2、MMP-9 mRNA的表达和减少TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达;而AG1478能逆转EGF的作用,使MMP-2、MMP-9 mRNA的表达下降,TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达上升,结果MMP-2/TIMP-2比值和MMP-9/TIMP-1比值均下降(P<0.01)。结论EGFR-ERK/MAPK信号通路通过改变基质金属蛋白酶和其抑制剂mRNA比值调控人结肠癌细胞侵袭转移能力。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 侵袭 转移 基质金属蛋白酶
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检测胃癌患者外周血微转移端粒酶hTERT-mRNA的意义 被引量：7
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作者 邢全台 袁孟彪 +5 位作者 孙启龙 梁业民 王菁华 于涛 高艳景 李延青 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期321-323,共3页
目的　探讨检测胃癌血液微转移的新方法 ,评价端粒酶hTERT—mRNA作为检测微转移标志物的价值。方法　提取4 2例胃癌病人外周血有核细胞RNA ,采用RT -PCR方法检测其端粒酶hTERT -mRNA的表达 ,半定量分析 ,并与 2 5名健康者作对照。结果　... 目的　探讨检测胃癌血液微转移的新方法 ,评价端粒酶hTERT—mRNA作为检测微转移标志物的价值。方法　提取4 2例胃癌病人外周血有核细胞RNA ,采用RT -PCR方法检测其端粒酶hTERT -mRNA的表达 ,半定量分析 ,并与 2 5名健康者作对照。结果　 4 2例胃癌病人外周血端粒酶hTERT—mRNA的表达显著高于 2 5例健康者 ;Ⅰ期癌与Ⅱ～Ⅳ期癌之间存在显著性差异 ;不同细胞学类型胃癌之间无显著性差异 ;不同病理学类型的胃癌之间不存在显著性差异。结论　RT -PCR检测外周血端粒酶hTERT -mRNA可用来观察胃癌微转移 ,半定量分析更具价值。 展开更多
关键词 胃癌 微转移 端粒酶 hTERT-mRNA RT-PCR法
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Ki-67与Cyfra21-1联合检测在鼻咽癌不良预后评估中的作用 被引量：5
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作者 雷琳 肖何 +9 位作者 陈川 张志敏 毛必静 何轩 谢飞 丁琛琛 张辉 杨镇洲 王东 王阁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1199-1202,共4页
目的探讨检测鼻咽癌组织Ki-67的表达水平及治疗后血清细胞角蛋白19片段21-1(Cyfra21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCCA)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)的含量在鼻咽癌不良预后评估中的作用及临床意义。方法回顾性分析2008年6-12月经病理确... 目的探讨检测鼻咽癌组织Ki-67的表达水平及治疗后血清细胞角蛋白19片段21-1(Cyfra21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCCA)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)的含量在鼻咽癌不良预后评估中的作用及临床意义。方法回顾性分析2008年6-12月经病理确诊并接受根治性同步放化疗治疗的鼻咽鳞癌患者89例。免疫组化法检测患者鼻咽癌组织Ki-67表达情况,化学发光法检测治疗后血清Cyfra21-1、SCCA含量,连续监测法检测患者治疗后血清中的LDH、ALP含量。结果至2013年12月随访日结束,36例患者入组复发组,34例患者入组远处转移组,19例患者入组临床缓解组。临床缓解组患者鼻咽癌组织中的Ki-67表达水平低于远处转移组(P<0.05),且血清Cyfra21-1表达水平低于复发组及远处转移组(P<0.05)。同时,复发组患者的血清LDH表达水平低于远处转移组(P<0.05);血清ALP与SCCA在各组间未见明显差异(P>0.05)。Cox回归分析结果显示,组织Ki-67高表达(P<0.01,HR=1.973)与血清Cyfra21-1高表达(P<0.01,HR=1.537)均为无进展生存期的不良预后因素,血清Cyfra21-1高表达(P<0.01,HR=1.492)为总生存期的不良预后因素。通过建立预后指数方程发现,高危组与低危组患者的无进展生存期和总生存期差异有统计学意义(P<0.01)。结论联合检测患者鼻咽癌组织中Ki-67的表达水平与血清Cyfra21-1的含量可用于评估鼻咽癌患者的不良预后情况。 展开更多
关键词 鼻咽癌 KI-67 细胞角蛋白19 CYFRA21-1 标志物
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胃癌相关基因Serpine1的RT-LAMP快速检测法 被引量：7
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作者 徐凌 殷建华 +3 位作者 朱秀 唐毕锋 曹广文 邓松华 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第6期695-697,共3页
目的建立逆转录-环介导的等温扩增快速检测高侵袭型胃癌转移相关基因。方法快速抽提肝转移胃癌患者标本的RNA用环介导的等温扩增反应(LAMP)扩增转移相关基因Serpine1,扩增条件为63℃保温30min,扩增后产物通过特异性内切酶进行鉴定。结果... 目的建立逆转录-环介导的等温扩增快速检测高侵袭型胃癌转移相关基因。方法快速抽提肝转移胃癌患者标本的RNA用环介导的等温扩增反应(LAMP)扩增转移相关基因Serpine1,扩增条件为63℃保温30min,扩增后产物通过特异性内切酶进行鉴定。结果RT-LAMP能特异性快速的扩增目的基因。结论RT-LAMP能因其特异,快速,高效的优点可以广泛运用于肿瘤转移相关基因的检测,对临床早期诊断提供标准。 展开更多
关键词 胃肿瘤 肿瘤 转移
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miR-504靶向CHD1L抑制乳腺癌细胞侵袭的分子机制 被引量：5
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作者 王照岩 杨志一 +5 位作者 林祥博 陈智凯 李洪利 尹崇高 牟青杰 刘雨清 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1302-1307,共6页
目的探讨miR-504靶向染色质解旋酶DNA结合蛋白(chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein 1-like gene,CHD1L)抑制乳腺癌细胞侵袭的分子机制。方法 qRT-PCR检测人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)与乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MCF-7)中m... 目的探讨miR-504靶向染色质解旋酶DNA结合蛋白(chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein 1-like gene,CHD1L)抑制乳腺癌细胞侵袭的分子机制。方法 qRT-PCR检测人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)与乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MCF-7)中miR-504的表达量,同时检测miR-504在MDA-MB-231细胞中的转染效率;双荧光素酶实验检测miR-504与CHD1L是否存在结合靶点;qRT-PCR及Western blot法检测CHD1L mRNA和蛋白的表达水平;Transwell侵袭实验检测MDAMB-231细胞的侵袭能力;Western blot法检测p-Akt、MMP-2和MMP-9的表达情况。结果乳腺癌细胞中miR-504的表达量明显低于人正常乳腺上皮细胞(P <0. 05);miR-504在MDA-MB-231/miR-504组中的表达水平明显增高(P <0. 05);双荧光素酶实验检测显示miR-504能与CHD1L mRNA的3'-UTR结合;此外,过表达miR-504后CHD1L mRNA的表达水平无显著变化,但CHD1L蛋白表达水平显著降低(P <0. 05);与MDA-MB-231/NC组相比,MDA-MB-231/miR-504组侵袭能力明显降低,而MDA-MB-231/miR-504+CHD1L组侵袭能力比MDA-MB-231/miR-504+Con组明显增加;用表皮生长因子分别刺激转染不同质粒的MDA-MB-231细胞,与MDA-MB-231/NC组相比,MDA-MB-231/miR-504组中p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显降低(P <0. 05),而MDA-MB-231/miR-504+CHD1L组中p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平与MDA-MB-231/miR-504+Con组相比明显增加(P <0. 05)。结论 miR-504靶向CHD1L通过PI3K/Akt/MMP信号通路抑制乳腺癌细胞的侵袭。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 miR-504 CHD1L PI3K/Akt/MMP 侵袭
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RNA干扰抑制骨肉瘤MG-63细胞β-catenin的表达 被引量：6
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作者 张帆 陈安民 +1 位作者 郭风劲 陈剑峰 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期13-16,21,共5页
目的通过抑制Wnt信号通路核心蛋白β-catenin在骨肉瘤细胞系MG-63中的表达,探讨β-catenin对MG-63细胞的生长、细胞侵袭性以及耐药性等方面的作用。方法设计合成β-catenin的si RNA序列,LipofectamineTM2000转染入MG-63细胞。用RT-PCR和... 目的通过抑制Wnt信号通路核心蛋白β-catenin在骨肉瘤细胞系MG-63中的表达,探讨β-catenin对MG-63细胞的生长、细胞侵袭性以及耐药性等方面的作用。方法设计合成β-catenin的si RNA序列,LipofectamineTM2000转染入MG-63细胞。用RT-PCR和Western blot法检测干扰后β-catenin的mRNA和蛋白表达情况,利用流式细胞仪检测细胞周期,Transwell法检测细胞侵袭能力,CCK-8法检测细胞增殖,利用阿霉素检测细胞耐药性。结果干扰后,实验组细胞的β-catenin mRNA和蛋白表达较对照组和空白组显著降低(均P<0.05);细胞周期检测实验组与对照组和空白组比较差异无统计学意义(P>0.05);Transwell法结果显示实验组细胞侵袭能力较对照组和空白组显著下降(均P<0.05);CCK-8法检测显示实验组细胞增殖力较对照组和空白组略有降低,但差异无统计学意义(均P>0.05);多柔比星敏感性检测显示实验组较对照组和空白组细胞生长抑制率显著增加(均P<0.05)。结论特异性抑制β-catenin基因表达可抑制骨肉瘤MG-63细胞的侵袭能力,并增加MG-63细胞对化疗药物阿霉素的敏感性。 展开更多
关键词 骨肉瘤 Β-CATENIN RNA干扰
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PRL-3调节PI3K信号通路在促进结肠癌细胞增殖侵袭中的作用 被引量：5
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作者 张建龙 张萦斐 +2 位作者 张育超 毛凯 陈双 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期16-21,共6页
【目的】研究肝再生磷酸酶-3(PRL-3)的过表达与PI3K信号通路的调节及其与结肠癌细胞增殖侵袭的关系。【方法】构建稳定转染PRL-3基因和空白对照质粒的结肠癌细胞株LoVo-PRL-3和LoVo-VC,用qRT-PCR和Western blot的方法对miR-21及其靶蛋白... 【目的】研究肝再生磷酸酶-3(PRL-3)的过表达与PI3K信号通路的调节及其与结肠癌细胞增殖侵袭的关系。【方法】构建稳定转染PRL-3基因和空白对照质粒的结肠癌细胞株LoVo-PRL-3和LoVo-VC,用qRT-PCR和Western blot的方法对miR-21及其靶蛋白PTEN的表达进行检测,在稳转细胞株中转染miR-21或对其进行敲除,用CCK-8、Tanswell实验对细胞的增殖侵袭能力的变化进行研究。【结果】LoVo-PRL-3细胞的增殖侵袭能力要强于对照组LoVo-VC细胞。在结肠癌细胞株LoVo-PRL-3中miR-21的表达上调而PTEN的表达被下调,在LoVo-VC细胞中过表达miR-21促进了细胞的增殖侵袭并降低PTEN的表达,而在LoVo-PRL-3细胞中敲除miR-21抑制了细胞的增殖侵袭并能部分恢复PTEN的表达。【结论】PRL-3通过上调miR-21抑制PTEN的表达,调节了PI3K信号通路,从而促进了结肠癌细胞的增殖侵袭。 展开更多
关键词 肝再生磷酸酶-3 MIR-21 PTEN
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Ezrin蛋白过表达对胰腺癌细胞系Panc-1生物学行为的影响 被引量：4
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作者 孟云霄 于双妮 +1 位作者 卢朝辉 陈杰 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期600-603,共4页
目的探讨Ezrin过表达对胰腺癌细胞系Panc-1生物学行为的影响。方法用过表达载体pcb6-Ezrin稳定转染Panc-1细胞,并用流式细胞仪检测细胞周期,CCK-8法检测细胞生长曲线,扫描电镜观察细胞表面形态及表面突起的变化,用未包被及包被Matrigel... 目的探讨Ezrin过表达对胰腺癌细胞系Panc-1生物学行为的影响。方法用过表达载体pcb6-Ezrin稳定转染Panc-1细胞,并用流式细胞仪检测细胞周期,CCK-8法检测细胞生长曲线,扫描电镜观察细胞表面形态及表面突起的变化,用未包被及包被Matrigel胶的Transwell小室分别检测细胞的运动和侵袭能力,并用免疫印迹法检测信号相关蛋白Erk1/2的变化。结果过表达Ezrin后其蛋白的表达明显升高,Panc-1细胞表面的细胞突起、微绒毛数量明显增加,运动及侵袭能力也明显增加,但对细胞的体外增殖和细胞周期无明显的影响。Ezrin的过表达能够激活Erk1/2的表达。结论 Ezrin蛋白对胰腺癌细胞的细胞突起、表面微绒毛的形成、细胞骨架及细胞的运动和侵袭发挥着重要的作用。因此,Ezrin可能在胰腺癌的进展中发挥着重要的作用,Erk1/2信号转导途径在这一过程中发挥着重要的作用。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 EZRIN 微绒毛 运动 侵袭 过表达
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VEGFR-3、LYVE-1与直肠癌组织中表达及淋巴转移相关性的研究 被引量：4
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作者 陶成诚 余昌俊 +4 位作者 孟刚 曹志国 陈昌裕 龙腾云 王岳君 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第10期1237-1239,共3页
目的通过研究血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)、淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)在直肠癌组织、正常直肠组织淋巴管中的表达,分析直肠癌组织中微淋巴管密度(LMVD)与直肠癌淋巴结转移之间的关系。方法收集46例直肠癌石蜡切片和15例正... 目的通过研究血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)、淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)在直肠癌组织、正常直肠组织淋巴管中的表达,分析直肠癌组织中微淋巴管密度(LMVD)与直肠癌淋巴结转移之间的关系。方法收集46例直肠癌石蜡切片和15例正常直肠组织,分析直肠癌组织及正常直肠组织中的淋巴管分布以及LMVD与直肠癌淋巴结转移、浸润之间的关系。结果直肠癌组织周围原有淋巴管增生、变异,新生功能性淋巴管明显增多,直肠癌组织LMVD与淋巴结转移、肿瘤大小和肿瘤浸润深度有关(P<0.05),与生物学特性和肿瘤部位无关。结论 VEGFR-3、LYVE-1在直肠癌组织淋巴管中的表达,促进了直肠癌的浸润及淋巴结转移。通过对针对VEGFR-3、LYVE-1的靶向治疗,可减少直肠癌的远处转移,检测VEGFR-3、LYVE-1可作为直肠癌治疗的预后指标。 展开更多
关键词 直肠癌 微淋巴管密度 VEGFR-3 LYVE-1 淋巴结 转移
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RT-PCR检测乳腺癌淋巴结转移的临床意义 被引量：6
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作者 郝新保 付京 邱福海 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第9期964-967,共4页
背景与目的:近年来有报道,应用逆转录-多聚酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)技术检测有关肿瘤细胞标志物的mRNA表达来判断淋巴结转移情况,可以获得较高的检测灵敏度。本研究的目的在于探讨RT-PCR检测癌... 背景与目的:近年来有报道,应用逆转录-多聚酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)技术检测有关肿瘤细胞标志物的mRNA表达来判断淋巴结转移情况,可以获得较高的检测灵敏度。本研究的目的在于探讨RT-PCR检测癌细胞淋巴结转移的临床意义。方法:应用RT-PCR技术检测患者腋窝淋巴结中MUC1和keratin19的mRNA表达,结合HE染色结果判断有无发生腋窝淋巴结转移。HE染色阴性患者随访3年。结果:86例肿瘤组织中可检测出MUC1和keratin19的表达,而正常淋巴结中未发现。在37例HE染色淋巴结阴性的病例中,有11例(29.7%)的keratin19检测结果阳性,这部分病例的3年复发率为45.5%,而keratin19表达阴性的病例其3年复发率仅为12.5%(P<0.01)。结论:RT-PCR检测出的MUC1和keratin19在淋巴结中的表达可作为乳腺癌转移的参考标志,有助于对乳腺癌预后的判断。 展开更多
关键词 RT-PCR 检测 乳腺癌 淋巴结转移
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