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诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞和成软骨细胞分化 被引量:29
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作者 艾国平 粟永萍 +4 位作者 闫国和 王蒙 刘晓宏 罗成基 程天民 《中国临床康复》 CSCD 2002年第18期2689-2690,I001,共3页
目的探讨小香猪骨髓间充质干细胞(MSC)向成骨细胞和成软骨细胞诱导分化的能力。方法选用早期贴壁培养的小香猪骨髓MSC,在传代两三次后加入条件培养基,观察了细胞的形态学变化,同时检测碱性磷酸酶、钙盐沉积以及细胞外基质和II型胶原的... 目的探讨小香猪骨髓间充质干细胞(MSC)向成骨细胞和成软骨细胞诱导分化的能力。方法选用早期贴壁培养的小香猪骨髓MSC,在传代两三次后加入条件培养基,观察了细胞的形态学变化,同时检测碱性磷酸酶、钙盐沉积以及细胞外基质和II型胶原的表达。结果MSC在骨形成蛋白(BMP)、地塞米松和β-磷酸甘油钠的作用下,两三天细胞从梭形变为圆形或类圆形,细胞体积增大,12~15d时细胞集落的表面可见有颗粒状物质分泌,碱性磷酸酶染色为阳性,20~25d时,分泌颗粒更加明显,核固红染色为阳性,表现出成骨细胞的特点;在培养体系中加入地塞米松和转化生长因子-β1后两三天,可见细胞由类成纤维状变为圆形或椭圆形状,有的呈肾性,体积增大,10d后可见细胞周围有基质分泌,II型胶原染色为阳性,表现为软骨细胞分化的特点。结论在一定培养条件下成功诱导小香猪骨髓MSC向成骨细胞和成软骨细胞分化,为我们进一步的研究打下基础。 展开更多
关键词 骨髓 间充质干细胞 成骨细胞 成软骨细胞 体外培养 组织工程 细胞分化
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人类脐血来源的间充质干细胞向软骨和成骨细胞分化的实验研究 被引量:6
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作者 于艳秋 任海琴 +3 位作者 云伟 金玉楠 李昆 杜莉莉 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1385-1389,共5页
取足月剖宫产健康新生儿脐血,应用密度梯度法分离脐血单个核细胞,利用形态学特点和流式细胞仪检测细胞表面标志,鉴定和获取间充质干细胞。应用软骨诱导剂(10 ng/ml TGF-β、100 ng/ml胰岛素、10-7mol/L地塞米松、6.25μg/ml转铁蛋白)和... 取足月剖宫产健康新生儿脐血,应用密度梯度法分离脐血单个核细胞,利用形态学特点和流式细胞仪检测细胞表面标志,鉴定和获取间充质干细胞。应用软骨诱导剂(10 ng/ml TGF-β、100 ng/ml胰岛素、10-7mol/L地塞米松、6.25μg/ml转铁蛋白)和成骨诱导剂(10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠、50μg/ml维生素C、10-7mol/L地塞米松)定向诱导分化培养,以检测其是否具有分化能力。脐血来源的间充质干细胞表达CD13、CD44、CD73、CD90、CD166、HLA-AB,不表达CD34、CD45、HLA-DR。诱导分化21 d后,甲苯胺蓝染色和von-Kossa染色均显示阳性,免疫细胞化学结果显示脐血来源干细胞经软骨诱导后表达Ⅱ型胶原。表明脐血中存在着间充质干细胞,可在体外扩增培养,具有分化成软骨细胞与成骨细胞的能力。 展开更多
关键词 脐血 间充质干细胞 分化 软骨细胞 成骨细胞
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氟对软骨细胞与成骨细胞凋亡及H_2O_2、SOD、NO的影响 被引量:4
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作者 桂传枝 王长松 +2 位作者 于燕妮 唐俊杰 刘家骝 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期108-112,共5页
目的研究氟对体外培养的软骨细胞、成骨细胞凋亡及H2O2、SOD、NO的影响。方法采用流式细胞仪对细胞周期进行分析及测定凋亡细胞的百分比;化学方法检测细胞培养液中的H2O2、SOD、NO;透射电镜观察软骨细胞超微结构。结果软骨细胞:(1)不同... 目的研究氟对体外培养的软骨细胞、成骨细胞凋亡及H2O2、SOD、NO的影响。方法采用流式细胞仪对细胞周期进行分析及测定凋亡细胞的百分比;化学方法检测细胞培养液中的H2O2、SOD、NO;透射电镜观察软骨细胞超微结构。结果软骨细胞:(1)不同剂量的氟均诱导细胞凋亡,培养基中的H2O2、NO均水平高于对照组,加SOD可使H2O2、细胞凋亡百分率明显下降,NaF20、160μmol/L可使G2/M期细胞升高。(2)NaF320μmol/L可使细胞超微结构损伤,加SOD可拮抗氟的损伤作用。成骨细胞:与对照组相比(1)加入不同剂量NaF,培养基中的SOD活性降低。但仅在加入160、240μmol/L,培养基中H2O2升高,NO亦同时升高。(2)NaF400μmol/L可诱导成骨细胞凋亡,同时使G0/G1期细胞增多,240、400μmol/L可使G2/M期细胞减少。结论(1)低、中剂量的氟可促进软骨细胞、成骨细胞凋亡,损害细胞超微结构。与此同时培养物中H2O2升高,SOD活性降低,表明细胞凋亡及损伤与氧化应激有关。此外,NO也升高,可能也起一定作用。氟对细胞周期的影响:对软骨细胞主要作用于G2/M期,对成骨细胞可同时作用于G0/G1及G2/M期;(2)一定量的SOD可明显拮抗氟促进的H2O2释放及细胞凋亡,对细胞有保护作用。(3)一定剂量的氟促使软骨细胞、成骨细胞凋亡,同时也促进成骨细胞增殖。 展开更多
关键词 软骨细胞 H2O2 SOD NO 成骨细胞 细胞凋亡 氟化钠 细胞周期
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骨髓间充质干细胞移植治疗颞下颌关节骨关节病 被引量:5
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作者 杨兴华 彭琳 +4 位作者 刘云生 邢再臣 李海峰 李玉庆 刘敏 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第19期3488-3494,共7页
背景:随着干细胞技术的发展,利用组织工程技术修复软骨损伤成为一种可能,而骨髓间充质干细胞由于其优良的特性成为研究重点。目的:通过体外培养骨髓间充质干细胞,注入兔颞下颌关节紊乱病动物模型,观察干细胞对兔颞下颌关节紊乱病的治疗... 背景:随着干细胞技术的发展,利用组织工程技术修复软骨损伤成为一种可能,而骨髓间充质干细胞由于其优良的特性成为研究重点。目的:通过体外培养骨髓间充质干细胞,注入兔颞下颌关节紊乱病动物模型,观察干细胞对兔颞下颌关节紊乱病的治疗效果。方法:通过体外全血贴壁法培养骨髓间充质干细胞并进行鉴定;细胞在体外扩增,诱导成软骨细胞后待用。以Ⅱ型胶原酶进行颞下颌关节腔内注射,建立颞下颌关节紊乱病动物模型,关节腔内注射诱导后成软骨细胞设为实验组,对照组注射未进行诱导的细胞进行比较,通过观察动物咀嚼和组织切片观察治疗效果。结果与结论:实验分离的细胞7-14d可见少量集落形成,20d时观察见细胞基本铺满瓶底。经stro-1+、CD44+流式细胞及免疫组化测定细胞表达间充质干细胞特性;细胞在诱导成软骨细胞后Ⅱ型胶原免疫组化染色强阳性。兔颞下颌关节注射胶原酶可在2周时出现偏侧咀嚼症状,骨髓间充质干细胞诱导的成软骨细胞关节腔注入动物模型后,实验组明显弱于对照组。组织切片显示诱导的成软骨细胞可促进关节损伤的修复,软骨及胶原生成多于对照组。说明骨髓间充质诱导的成软骨细胞关节腔注入后可促进兔颞下颌关节骨关节病愈合。 展开更多
关键词 干细胞 干细胞移植 成软骨细胞 诱导分化 颞下颌关节功能紊乱病 组织工程 治疗技术 省级基金 干细胞图片文章
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体外诱导人脐血间充质干细胞向软骨细胞分化的初步研究 被引量:7
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作者 姚天华 汤晓雨 +3 位作者 杨壮群 李昂 屠军波 马建明 《中国美容医学》 CAS 2007年第4期450-454,共5页
目的:探讨人脐带血间充质干细胞存在及体外向成软骨细胞分化的可能性。方法:将无菌条件下采集健康产妇脐带血,用相对密度为1.077g/ml的人淋巴细胞分离液分离脐血单个核细胞,利用间充质干细胞贴壁生长的特性获得MSCs,流式细胞仪检测其表... 目的:探讨人脐带血间充质干细胞存在及体外向成软骨细胞分化的可能性。方法:将无菌条件下采集健康产妇脐带血,用相对密度为1.077g/ml的人淋巴细胞分离液分离脐血单个核细胞,利用间充质干细胞贴壁生长的特性获得MSCs,流式细胞仪检测其表面抗原标志。联合应用TGF-β1和IGF-Ⅰ及含有1×ITS+1的高糖DMEM进行诱导培养,并于诱导前及诱导后第21天留取细胞,甲苯胺蓝染色,免疫细胞化学法检测II型胶原的表达,分析是否诱导出成软骨细胞。结果:脐血MSC强表达CD44、CD105,不表达CD34、CD45。诱导21天甲苯胺蓝染色阳性,特异性表达II型胶原。结论:人足月脐带血中存在MSCs,在TGF-β1等生长因子诱导下可以向具有软骨细胞表型和功能的细胞分化。 展开更多
关键词 脐带血 间充质干细胞 成软骨细胞 转化生长因子-Β1
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上颌骨成软骨型骨肉瘤1例 被引量:2
6
作者 裴婧 陈蔚华 贾云香 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2020年第9期885-886,共2页
骨肉瘤是骨最常见的原发性恶性肿瘤,本文报告1例上颌骨成软骨型骨肉瘤,并结合文献对其临床和病理特征、诊断和治疗进行讨论。
关键词 低级别 成软骨型骨肉瘤 上颌骨
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软骨母细胞型骨肉瘤的影像诊断
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作者 彭加友 郑汉艺 何志颖 《CT理论与应用研究(中英文)》 2021年第3期379-386,共8页
目的:探究软骨母细胞型骨肉瘤的X线平片、CT及MRI表现和诊断要点。方法:回顾性分析2010年1月至2020年6月我院经病理证实的软骨母细胞型骨肉瘤18例患者的病历资料,分析其X线平片、CT及MRI表现。结果:X线平片和CT显示肿瘤骨(棉絮样瘤骨12... 目的:探究软骨母细胞型骨肉瘤的X线平片、CT及MRI表现和诊断要点。方法:回顾性分析2010年1月至2020年6月我院经病理证实的软骨母细胞型骨肉瘤18例患者的病历资料,分析其X线平片、CT及MRI表现。结果:X线平片和CT显示肿瘤骨(棉絮样瘤骨12例,象牙质样瘤骨3例,针样瘤骨3例)、瘤软骨钙化(沙粒状、斑点状钙化8例,环状、半环状钙化6例)、骨膜新生骨(葱皮状9例、线状5例、层状4例,其中形成Codman三角10例)、软组织肿块18例;全部病例均出现不规则形骨质破坏,边界模糊。14例MRI增强扫描显示肿瘤病灶呈边缘强化4例,不均匀的间隔强化6例,边缘强化及间隔强化4例。结论:肿瘤骨、瘤软骨钙化、肿瘤边缘强化及间隔强化,是软骨母细胞型骨肉瘤的影像特点。合理利用影像学检查,有助于提高软骨母细胞型骨肉瘤的诊断准确率。 展开更多
关键词 软骨母细胞型 骨肉瘤 磁共振成像 电子计算机断层扫描 X线平片
原文传递
人骨髓基质细胞软骨诱导分化及其与细胞载体体外复合
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作者 胡军 张爱斌 +3 位作者 陈永松 杨佩璇 宋建新 刘晓岚 《汕头大学医学院学报》 2005年第3期135-138,F0002,共5页
目的:观察出生后人骨髓基质细胞(hBMSCs)在体外培养条件下增殖与分化的特点,探讨其向成软骨方向分化及机制。研究诱导细胞体外与PDLLA/壳聚糖多孔材料复合。方法:密度梯度离心法进行hBMSCs体外培养。应用传五代细胞,经化学限定培养基诱... 目的:观察出生后人骨髓基质细胞(hBMSCs)在体外培养条件下增殖与分化的特点,探讨其向成软骨方向分化及机制。研究诱导细胞体外与PDLLA/壳聚糖多孔材料复合。方法:密度梯度离心法进行hBMSCs体外培养。应用传五代细胞,经化学限定培养基诱导细胞,设实验对照组。采用倒置显微镜观察细胞增殖及形态变化,甲苯胺蓝染色观察诱导细胞合成细胞外基质中的蛋白多糖,RT-PCR检测Ⅱ型胶原mRNA的表达。将诱导的细胞分别与多孔羟基磷灰石、PDLLA/壳聚糖多孔材料复合,应用扫描电镜观察其在细胞载体表面的生长情况。结果:传五代hBMSCs经化学限定培养基诱导后转化成圆形肥大细胞,甲苯胺蓝染色阳性,Ⅱ型胶原mRNA表达与对照组比较有统计学意义。扫描电镜发现hBMSCs在PDLLA/壳聚糖多孔材料表面增殖良好并分泌大量细胞基质。结论:体外培养hBMSCs经化学限定培养基诱导后可向成软骨方向分化,可作为软骨组织工程种子细胞。PDLLA/壳聚糖多孔复合材料是组织工程良好的细胞载体,有利于细胞的黏附与增殖。 展开更多
关键词 人骨髓基质细胞 成软骨分化 组织工程 细胞培养
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Injectable <i>in situ</i>crosslinkable hyaluronan-polyvinyl phosphonic acid hydrogels for bone engineering
9
作者 Nguyen Thi-Hiep Dao Van Hoa Vo Van Toi 《Journal of Biomedical Science and Engineering》 2013年第8期854-862,共9页
A novel injectable hydrogel that was synthesized by in situ crosslinking of hyaluronan and polyvinyl phosphonic acid was proposed in this study. Fourier transform infrared spectrum (FT-IR) analysis, scanning electron ... A novel injectable hydrogel that was synthesized by in situ crosslinking of hyaluronan and polyvinyl phosphonic acid was proposed in this study. Fourier transform infrared spectrum (FT-IR) analysis, scanning electron microscope (SEM), pH measurement, and biodegradation test were used to confirm its characteristics. The results permitted to prove successful crosslinking, observe the inner morphology of hydrogel and pore sizes distribution, and determine the decomposition of hydrogel components during incubation time. Result of pH measurement showed that the pH scale of hydrogel decreased when volume of PVPA increased. As a consequence, it affected the cytotoxicity value, cell proliferation, and cell growth behaviors of each hydrogel. Optical microscope observation showed that chondroblasts cell proliferated well on HA-PVPA hydrogel. Therefore, these results suggest that the new injectable hydrogel is appropriate for bone/cartilage regeneration applications. 展开更多
关键词 HYALURONAN PVPA INJECTABLE Hydrogel Mesenchymal Stem CELLS chondroblast CELLS
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带蒂皮瓣修复关节损伤的实验研究
10
作者 王兴国 温树正 +1 位作者 崇晓霞 任晓东 《内蒙古医学院学报》 2000年第2期71-73,共3页
目的 :将家兔带蒂皮瓣移植于破坏掉关节软骨的股骨头上 ,探讨皮肤成纤维细胞的成软骨潜能。方法 :用家兔 2 0只 ,每只任选一侧股骨头作为实验组 ,对侧作为对照组。将带蒂皮瓣移植于破坏掉了关节软骨的股骨头上后 ,将股骨头复位 ,作为实... 目的 :将家兔带蒂皮瓣移植于破坏掉关节软骨的股骨头上 ,探讨皮肤成纤维细胞的成软骨潜能。方法 :用家兔 2 0只 ,每只任选一侧股骨头作为实验组 ,对侧作为对照组。将带蒂皮瓣移植于破坏掉了关节软骨的股骨头上后 ,将股骨头复位 ,作为实验组。对侧则以游离全厚皮片作对照。分别在术后 8wk、16wk时各探查 10只动物 ,通过肉眼观察 ,光镜观察移植物的转归。结果 :实验组皮瓣成活并与股骨头愈合 ,表皮逐渐变性消失 ,真皮纤维组织增生呈束状排列 ,在与股骨头接触处 ,有成纤维细胞和成软骨细胞增生。对照组皮片或变性消失或滑脱 ,股骨头表面呈骨关节炎样改变。结论 :家兔带蒂皮瓣真皮内的成纤维细胞 ,在有关节软骨缺损的关节内 。 展开更多
关键词 关节软骨 外科皮瓣 成纤维细胞 成软骨细胞
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活化素Ⅰ型受体对小鼠下颌骨髁突软骨生长发育的影响及其机制
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作者 闫广兴 叶佳朋 +7 位作者 王爽爽 刘苍维 周怡君 胡月 郝新青 杜奥博 史册 孙宏晨 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期492-497,共6页
目的:观察Ⅰ型骨形态发生蛋白(BMP)受体活化素Ⅰ型受体(ACVR1)对出生后小鼠下颌骨髁突软骨(MCC)细胞形态、增殖和分化的影响,为研究MCC相关性疾病的病因及治疗提供参考。方法:采用Cre-LoxP系统构建在C57BL/6J小鼠MCC细胞中条件性敲除AC... 目的:观察Ⅰ型骨形态发生蛋白(BMP)受体活化素Ⅰ型受体(ACVR1)对出生后小鼠下颌骨髁突软骨(MCC)细胞形态、增殖和分化的影响,为研究MCC相关性疾病的病因及治疗提供参考。方法:采用Cre-LoxP系统构建在C57BL/6J小鼠MCC细胞中条件性敲除ACVR1基因的动物模型。将基因型为Acvr1fx/fx;RS/RS和Acvr1+/-;Osterix(+)/(-)的雌性和雄性小鼠配对合笼,以子代Osterix-Cre(+);Acvr1fx/-;RS/+基因型小鼠为实验组,Osterix-Cre(+);Acvr1fx/+;RS/+小鼠为对照组。分别取新出生(n=3)、出生后21天(PN21)(n=4)和出生后42天(PN42)(n=5)雄性小鼠,X-gal染色检测MCC组织中Osterix-Cre表达,micro-CT法检测2组小鼠下颌骨髁突宽度和髁头长度,HE染色和甲苯胺蓝染色分析2组小鼠MCC细胞形态及各层软骨厚度,免疫组织化学(IHC)染色检测2组小鼠MCC组织中增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞数和Ⅹ型胶原水平。结果:X-gal染色和IHC染色,ACVR1条件性基因缺失小鼠模型构建成功。在PN21时,与对照组比较,实验组小鼠下颌骨髁突宽度和髁头长度明显变短(P<0.05);2组小鼠MCC细胞形态表现和结构无明显差异。与对照组比较,实验组小鼠肥大软骨细胞层(Hy)和成软骨细胞层(Ch)这2层及Hy单层MCC组织中PCNA阳性细胞数明显增多(P<0.05或P<0.01)。在PN42时,与对照组比较,实验组小鼠部分下颌骨髁突软骨细胞形态异常,部分髁突肥大软骨细胞的排列紊乱,实验组小鼠髁突软骨前1/3区的Hy和中1/3区除Hy以外的其他层细胞厚度明显增大(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,实验组小鼠MCC组织各层PCNA阳性细胞数和Ch中Ⅹ型胶原水平明显升高。结论:ACVR1通过抑制MCC细胞增殖和成软骨细胞向肥大软骨细胞的分化,从而影响MCC细胞形态及MCC组织结构。 展开更多
关键词 活化素Ⅰ型受体 下颌骨髁突软骨 细胞增殖 细胞分化 成软骨细胞 肥大软骨细胞
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