光周期对光敏核不育水稻光敏色素A含量及其mRNA丰度的影响 被引量：12

1

作者 王伟 洪宇 +2 位作者 童哲 匡廷云 汤佩松 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1997年第10期914-921,共8页

光敏核不育水稻(农垦58S)是我国特有的水稻(Oryza sativa L.)种质材料,光敏色素是光周期诱导其育性转变的受体。报道了育性转换敏感期间的光周期处理对农垦58S及对照“农垦58”叶片中光敏色素A(Phy A)含量及其mRNA丰度的影响。在10个光... 光敏核不育水稻(农垦58S)是我国特有的水稻(Oryza sativa L.)种质材料,光敏色素是光周期诱导其育性转变的受体。报道了育性转换敏感期间的光周期处理对农垦58S及对照“农垦58”叶片中光敏色素A(Phy A)含量及其mRNA丰度的影响。在10个光周期处理的最后一个暗期结束前,收获每株水稻的上部两片叶,用酶联免疫吸附测定法测定Phy A。和长日照(LD)相比,短日照(SD)处理导致农垦58SPhy A相对含量增加38.5％;而“农垦58”只增加18.5％。显然,在较长的暗期中,农垦58S中Phy A的积累比对照快。在水稻幼苗中也得出相似的结果。以光敏色素A基因(phy A)的特异性片段RPA3作探针,用RNA斑点杂交的方法对叶片中Phy A mRNA丰度进行分析的结果表明,光周期处理5d和10d时,两品种水稻的Phy A mRNA丰度都是SD处理的比LD的高,而且SD下农垦58S Phy A mRNA的丰度均比“农垦58”的高。这些结果表明,甲基化水平较低的农垦58S phy A可能比“农垦58”的phy A更活跃地表达。另外,在育性转换敏感期每日主光期结束时(EOD)进行10次短暂的远红光(FR)照射。结果表明,农垦58S植株抽穗和开花期比SD处理推迟2d,而花粉败育率、种子结实率却无变化。暗示农垦58S开花和育性转变过程的光周期反应可能不同。 展开更多

关键词 水稻 光敏核不育 光敏色素 Mrna 光周期

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人端粒酶RNA的cDNA探针制备及其对胃粘膜细胞端粒酶RNA表达的检测 被引量：4

2

作者 何兴祥 王家 +2 位作者 吴捷莉 袁顺玉 艾莉 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期259-262,共4页

目的　建立人端粒酶RNA表达的检测方法。方法　制备人端粒酶RNA ,(humantelomeraseRNA ,hTR)的cDNA探针 ,分别应用RNA斑点杂交与端粒重复序列扩增法 (TRAP)分析检测不同胃粘膜的端粒酶RNA的表达与端粒酶活性。结果　人端粒酶RNA的cDNA... 目的　建立人端粒酶RNA表达的检测方法。方法　制备人端粒酶RNA ,(humantelomeraseRNA ,hTR)的cDNA探针 ,分别应用RNA斑点杂交与端粒重复序列扩增法 (TRAP)分析检测不同胃粘膜的端粒酶RNA的表达与端粒酶活性。结果　人端粒酶RNA的cDNA探针制备成功。 18例活检胃癌组织及 4 5例手术胃癌组织RNA斑点杂交检测的阳性率均为 10 0 % ,相应TRAP分析的阳性率分别为 88 89%、 86 6 7% ,低于RNA斑点杂交 (P <0 0 5 )。同时RNA斑点杂交结果提示在非癌胃组织中随着肠化程度增高人端粒酶RNA表达也增强。结论　RNA斑点杂交检测人端粒酶RNA ,具有高度的敏感性和特异性 。 展开更多

关键词 胃癌 端粒酶 核糖核酸 端粒重复序列扩增法 rna斑点杂交法

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丙型肝炎病毒RNA打点杂交检测方法同RT－PCR方法的比较 被引量：4

3

作者 杨永平 丛勉尔 +2 位作者 夏宁邵 曹经瑗 刘崇柏 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期257-262,共6页

采用ＨＣＶ基因组结构区Ｃ区ｃＤＮＡ探针和非结构区ＮＳ３－４区ｃＤＮＡ探针，建立了用打点杂交（ｄｏｔｂｌｏｔｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ）检测血清中ＨＣＶＲＮＡ的方法，同采用ＨＣＶ基因组５’端非编码区的一对寡核苷酸引物通... 采用ＨＣＶ基因组结构区Ｃ区ｃＤＮＡ探针和非结构区ＮＳ３－４区ｃＤＮＡ探针，建立了用打点杂交（ｄｏｔｂｌｏｔｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ）检测血清中ＨＣＶＲＮＡ的方法，同采用ＨＣＶ基因组５’端非编码区的一对寡核苷酸引物通过逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测血清中ＨＣＶＲＮＡ的方法相比较，发现两种方法都能快速早期和特异地检出血清中ＨＣＶＲＮＡ，但ＲＴ－ＰＣＲ法敏感性优于ＲＮＡ打点杂交法。对于无血清学指标的慢性ＮＡＮＢ肝炎病人的诊断，可采用这两种方法。这两种方法的敏感性在很大程度上依赖于引物和探针的敏感性，以及ＲＮＡ提取方法。ＲＴ－ＰＣＲ法适用于诊断病毒血症和复制，打点杂交法适用于研究ＨＣＶＲＮＡ量的变化，对治疗的评价，以及为实验筛选较高滴度的ＨＣＶＲＮＡ阳性样本。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 打点杂交 检测 rna

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打点杂交及RNA酶保护分析法检测反义HSP90基因转染细胞中反义RNA的表达 被引量：2

4

作者 刘宪玲 赵青川 +2 位作者 郭建成 肖冰 樊代明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第1期31-34,共4页

目的：检测HSP90反义核酸转染细胞后反义RNA的表达。方法：采用打点杂交及RNA酶保护分析法。结果：HSP90反义核酸转染细胞AH－SGC7901，AH-SGC7901／VCR，AH－HCC7402及AH－Ec109有HSP90反义RNA的表达。结论：HSP90反义RNA在AH－SGC7901... 目的：检测HSP90反义核酸转染细胞后反义RNA的表达。方法：采用打点杂交及RNA酶保护分析法。结果：HSP90反义核酸转染细胞AH－SGC7901，AH-SGC7901／VCR，AH－HCC7402及AH－Ec109有HSP90反义RNA的表达。结论：HSP90反义RNA在AH－SGC7901，AH－SGC7901／VCR，AH－HCC7402及AH－Ec109细胞的表达，为进一步研究HSP90在细胞生物学中的作用建立了可靠的细胞模型。 展开更多

关键词 HSP90 反义核酸 酶保护分析法 基因转染

原文传递

RNA点印迹探测碱性成纤维细胞生长因子在激光损伤后视网膜中的表达 被引量：3

5

作者 陈少军 阴正勤 《重庆医学》 CAS CSCD 2002年第12期1173-1174,共2页

目的　观察激光损伤家兔视网膜后碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)表达时相的变化 ,探讨bFGF在视网膜激光损伤后修复过程中的地位和作用。方法　用不同剂量的YAG倍频激光 (5 32nm)致伤有色家兔视网膜 ,于伤... 目的　观察激光损伤家兔视网膜后碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)表达时相的变化 ,探讨bFGF在视网膜激光损伤后修复过程中的地位和作用。方法　用不同剂量的YAG倍频激光 (5 32nm)致伤有色家兔视网膜 ,于伤后 1、3、7、14d取眼底视网膜 脉络膜组织 ,提取细胞总RNA进行RNA斑点印迹 ,用地高辛标记的bFGFcDNA探针进行核酸杂交 ,检测bFGFmRNA的表达水平。结果　激光损伤后眼底组织中bFGFmRNA的表达水平明显提高 ,且随激光致伤量的加大 ,bFGFmRNA的表达水平亦呈进行性增加。结论　激光损伤后眼底组织中bFGFmRNA的表达明显增加 。 展开更多

关键词 激光损伤 碱性成纤维细胞生长因子 斑点印迹 视网膜 BFGF

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基于RNA杂交的马铃薯纺锤块茎类病毒检测芯片 被引量：5

6

作者 谷宇 杜志游 +2 位作者 郎秋蕾 陈集双 何农跃 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第11期2106-2109,共4页

报道了一种检测植物类病毒RNA的新方法———RNA杂交芯片技术,即将cDNA芯片技术与RNA斑点杂交技术相结合,将马铃薯样品的总RNA直接固定在玻片上,用荧光标记制备检测马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)的特异探针,探针与芯片杂交后分析杂交信... 报道了一种检测植物类病毒RNA的新方法———RNA杂交芯片技术,即将cDNA芯片技术与RNA斑点杂交技术相结合,将马铃薯样品的总RNA直接固定在玻片上,用荧光标记制备检测马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)的特异探针,探针与芯片杂交后分析杂交信号以确定相应的样品有无PSTVd侵染.参照膜杂交的方法,确定了RNA芯片的制备条件,并用以检测了马铃薯样品的PSTVd侵染情况,检测结果与RT-PCR结果相符,阳性产物经克隆测序证实为PSTVd. 展开更多

关键词 rna芯片杂交 斑点杂交 CDNA芯片 马铃薯纺锤块基类病毒(PSTVd)

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乙型肝炎患者血清中丁型肝炎病毒RNA检测及意义

7

作者 刘丽 林勇 +5 位作者 赵连三 周思亮 王锦蓉 唐红 丁柳 穆仁懋 《华西医学》 CAS 北大核心 1993年第2期167-169,共3页

本文应用^(32)P标记HDVcDNA探针,用斑点杂交检测了176例乙型肝炎病人血清HDVRNA并同时检测了HBV血清标志物,结果25例(14.2％)HDVRNA阳性,提示四川地区是HDV感染高发区,在HDVRNA阳性的25例中,9例(36％)HBV复制标志阳性,明显低于RNA阴性组... 本文应用^(32)P标记HDVcDNA探针,用斑点杂交检测了176例乙型肝炎病人血清HDVRNA并同时检测了HBV血清标志物,结果25例(14.2％)HDVRNA阳性,提示四川地区是HDV感染高发区,在HDVRNA阳性的25例中,9例(36％)HBV复制标志阳性,明显低于RNA阴性组(72％,p<0.05),提示HDV在一定条件下抑制HBV的复制,部分抗-HBe阳性者HBV复制标志物亦阳性,提示这类病人可能有传染性,在各型肝炎中HDVRNA,HBVDNA的检出率无显著性差别。HDV的致病性及其与HBV致病性的关系有待进一步阐明。 展开更多

关键词 斑点杂交 乙型肝炎 丁型肝炎 rna

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地高辛精标记大鼠代谢型谷氨酸受体第5亚型RNA探针的制备研究

8

作者 秦丽华 于恩华 徐群渊 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期157-160,共4页

为制备用地高辛精标记的大鼠代谢型谷氨酸受体第 5亚型 c RNA探针 ,本实验用分子生物学技术重组质粒 p GEMm Glu R5 ,经限制性内切酶酶切分析 ,证实其确有 m Glu R5基因片段插入且方向正确。将此质粒再经限制性内切酶消化得到线性DNA片... 为制备用地高辛精标记的大鼠代谢型谷氨酸受体第 5亚型 c RNA探针 ,本实验用分子生物学技术重组质粒 p GEMm Glu R5 ,经限制性内切酶酶切分析 ,证实其确有 m Glu R5基因片段插入且方向正确。将此质粒再经限制性内切酶消化得到线性DNA片段 ,用 T7RNA聚合酶体外转录合成带有地高辛精标记的高比活性的单链 RNA探针 ;经斑点杂交实验证实该探针具有较高的敏感性和可靠性 ,可用于代谢型谷氨酸受体第 展开更多

关键词 代谢型谷氨酸受体第5亚型 质粒pGEMmGluR5 地高辛精标记rna探针 斑点杂交 大鼠

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用原位杂交和RNA斑点杂交法检测人肝细胞癌和癌旁肝中甲胎蛋白mRNA 被引量：3

9

作者 杨林森 杨筱菊 +2 位作者 何德华 李昌本 赵寿元 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第1期6-9,共4页

用生物素标记AFP cDNA探针作原位杂交,检测了12例人肝细胞癌和癌旁肝冰冻切片和石蜡组织切片中的AFP mRNA,同时分别抽提了3例人肝癌和癌旁肝总RNA作斑点杂交.结果提示癌和癌旁肝组织中均有AFP基因的过量表达,AFP mRNA在癌内分布比较均一... 用生物素标记AFP cDNA探针作原位杂交,检测了12例人肝细胞癌和癌旁肝冰冻切片和石蜡组织切片中的AFP mRNA,同时分别抽提了3例人肝癌和癌旁肝总RNA作斑点杂交.结果提示癌和癌旁肝组织中均有AFP基因的过量表达,AFP mRNA在癌内分布比较均一,而在癌旁肝组织中则比较多样,可散在分布、小灶性分布或成片状分布,从而证实不仅肝癌细胞可以自己合成AFP,而且癌旁肝细胞也可以自己合成AFP。 展开更多

关键词 肝细胞癌 甲胎蛋白 Mrna 斑点杂交

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基因重组乳链球菌防龋疫苗的研究 Ⅴ.重组乳链球菌中RNA的提取纯化及RNA点印迹杂交

10

作者 樊明文 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期294-296,311,I013,共4页

对参与蛋白质生物合成的转录产物ＲＮＡ进行异硫氰酸胍提取，氯化铯超速离心纯化以及ＲＮＡ点印迹杂交，测定重组乳链球菌中特定的ＲＮＡ，分析影响重组基因表达的因素。紫外分光法测定获得高浓度（５～８ｍｇ／ｍｌ）、纯度（ＯＤ２６... 对参与蛋白质生物合成的转录产物ＲＮＡ进行异硫氰酸胍提取，氯化铯超速离心纯化以及ＲＮＡ点印迹杂交，测定重组乳链球菌中特定的ＲＮＡ，分析影响重组基因表达的因素。紫外分光法测定获得高浓度（５～８ｍｇ／ｍｌ）、纯度（ＯＤ２６０／ＯＤ２８０＞２．０）ＲＮＡ。以切口平移生物素标记ＤＮＡ探针并进行ＤＮＡ－ＲＮＡ点印迹杂交，光基因核酸系统检测结果提示，乳链球菌ＨＬ１０７，ＨＬ４５均含有与变形链球菌相同的特定ＰＡｃ－ｍＲＮＡ靶序列及密度扫描影像。提示ＰＡｃ－ｍＲＮＡ作为指导蛋白质合成的中介物存在于重组乳链球菌中，使重组乳链球菌完成了克隆ｐａｃ基因的表达。 展开更多

关键词 乳链球菌 防龋疫苗 基因工程 龋齿 预防

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植物病毒RNA在片检测方法的建立研究

11

作者 谷宇 杜志游 +2 位作者 郎秋蕾 陈集双 何农跃 《化工时刊》 CAS 2008年第1期21-24,共4页

报道了一种检测植物病毒核糖核酸(RNA)的新方法——RNA玻片杂交法。这种方法把互补脱氧核糖核酸(cDNA)芯片技术与RNA斑点杂交技术相结合,将植物样品的总RNA直接固定在玻片上,用荧光标记的病毒特异探针与芯片杂交后分析杂交信号以确定相... 报道了一种检测植物病毒核糖核酸(RNA)的新方法——RNA玻片杂交法。这种方法把互补脱氧核糖核酸(cDNA)芯片技术与RNA斑点杂交技术相结合,将植物样品的总RNA直接固定在玻片上,用荧光标记的病毒特异探针与芯片杂交后分析杂交信号以确定相应的样品有无该病毒侵染。参照膜杂交的方法,我们设计了一系列实验,对芯片的制备和检测条件进行了摸索,基本建立了在玻片上杂交检测RNA病毒和类病毒的方法。 展开更多

关键词 植物病毒检测 rna玻片杂交 斑点杂交

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端粒相关锌指蛋白基因TASL30在人早期胚胎与组织中的mRNA表达及染色体定位 被引量：1

12

作者 冯耀东 高立 +3 位作者 苟德明 蒋达和 毛歆 李文鑫 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期361-364,共4页

采用原位杂交和RNA点杂交方法 ,观察了一种新的端粒相关锌指基因TASL30在早期人胚与50种器官组织中的mRNA表达。结果表明 ,TASL30基因在早期人胚神经管中有明显表达 ,其中在神经管的头端表达最强 ,而在人的50种器官组织中均未检测到该... 采用原位杂交和RNA点杂交方法 ,观察了一种新的端粒相关锌指基因TASL30在早期人胚与50种器官组织中的mRNA表达。结果表明 ,TASL30基因在早期人胚神经管中有明显表达 ,其中在神经管的头端表达最强 ,而在人的50种器官组织中均未检测到该基因的明显表达。另外通过G -显带和染色体原位杂交 ,将TASL30基因定位于人染色体12q24～qter。 展开更多

关键词 基因定位 染色体 端粒 锌指蛋白基因 早期胚胎

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异羟基洋地黄毒甙元(Digoxigenin)标记的RNA探针在丁型肝炎病毒核酸杂交中的应用 被引量：1

13

作者 牛建章 郭可謇 +1 位作者 Edwards P. Bowden D.S. 《中国病毒学》 CSCD 1992年第2期160-165,共6页

应用异羟基洋地黄毒甙元(Digoxigenin)标记的RNA探针,检测了人和黑猩猩血清及肝脏中丁型肝炎病毒核酸,并与^(32)P标记同一探针做了比较。结果表明,异羟基洋地黄毒甙元标记的RNA探针的杂交效果与同位索探针一致(同源cDNA0.2pg),可用于人... 应用异羟基洋地黄毒甙元(Digoxigenin)标记的RNA探针,检测了人和黑猩猩血清及肝脏中丁型肝炎病毒核酸,并与^(32)P标记同一探针做了比较。结果表明,异羟基洋地黄毒甙元标记的RNA探针的杂交效果与同位索探针一致(同源cDNA0.2pg),可用于人和动物血清及肝脏标本内HDV核酸的检测。 展开更多

关键词 丁肝病毒 核酸 rna探针 DIG

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人酪氨酸羟化酶RNA探针制备的研究

14

作者 李淑婷 杨慧 +2 位作者 张进禄 蔡青 徐群渊 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期241-244,共4页

目的制备地高辛标记的人酪氨酸羟化酶（ｈＴＨ２）ｃＲＮＡ探针。方法用分子克隆技术重组质粒ｐＧＥＭＴＨ２。用体外转录法制备地高辛标记ｈＴＨ２ｃＲＮＡ探针，经限制性内切酶分析，显示重组质粒含有酪氨酸羟化酶基因片段，且插入位... 目的制备地高辛标记的人酪氨酸羟化酶（ｈＴＨ２）ｃＲＮＡ探针。方法用分子克隆技术重组质粒ｐＧＥＭＴＨ２。用体外转录法制备地高辛标记ｈＴＨ２ｃＲＮＡ探针，经限制性内切酶分析，显示重组质粒含有酪氨酸羟化酶基因片段，且插入位点正确。使用斑点杂交证实我们制备的探针是敏感而可靠的。结果杂交阳性部位呈紫蓝色，深浅与稀释度成正比。结论Ｄｉｇ标记的ｈＴＨ２ｃＲＮＡ探针有较好的敏感性和可靠性，可用于基因治疗帕金森病动物模型基因表达的研究。 展开更多

关键词 人酪氨酸羟化酶 rna探针 震颤性麻痹 基因治疗

原文传递

载脂蛋白AⅠ、CⅡ和CⅢmRNA在大鼠组织中的分布

15

作者 彭腾 刘秉文 蓝天鹤 《华西医科大学学报》 CSCD 1991年第3期232-234,共3页

用人载脂蛋白(apo)AI、CⅡ和CⅢ cDNA作探针,经RNA斑点杂交分析说明大鼠肝脏、小肠、脑和肾脏组织均有apo AⅠ、CⅡ和CⅢ mRNA分布。

关键词 载脂蛋白 rna斑点杂交

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感染柑桔裂皮病类病毒的爪哇三七细胞内的两种闭环RNA

16

作者 杨光 周咏芝 +1 位作者 陈雅丽 丁达明 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第4期364-369,共6页

用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳—银染法对爪哇三七(Gynura aurantioca, D. C.)进行生化分析,发现在健康爪哇三七细胞质中有一种闭环RNA(Cytoplasmic small circular RNA,简称cscRNA),它的电泳行为与柑桔裂皮病类病毒(CitruS Exocortis Viro... 用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳—银染法对爪哇三七(Gynura aurantioca, D. C.)进行生化分析,发现在健康爪哇三七细胞质中有一种闭环RNA(Cytoplasmic small circular RNA,简称cscRNA),它的电泳行为与柑桔裂皮病类病毒(CitruS Exocortis Viroid,简称CEV)相似,而点杂交结果显示它的一级结构与类病毒RNA的中心保守区核酸序列没有同源性。进一步分析细胞不同组分的RNA,发现cscRNA仅存在于细胞质中,并与季节的变化有密切关系。在CEV感染的爪哇三七细胞中,可测出CEV-RNA和cscRNA两种闭环RNA分子,但细胞核内仅能检出CEV-RNA一种分子,它与类病毒的中心保守区有明显的同源性。检测CEV感染时,可用细胞核RNA进行测定,以排除细胞质小分子闭环RNA的干扰。 展开更多

关键词 柑桔裂皮病 类病毒 闭环rna PAGE

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肾细胞癌组织中b-FGF的表达意义和肿瘤微血管密度研究 被引量：4

17

作者 车乐 杨学辉 +2 位作者 朱积川 王晓峰 侯树坤 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期246-247,共2页

探讨碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)在肾癌中表达的意义和其在肾癌微血管形成中的作用及与肾癌生物学特性的关系。采用斑点杂交技术测定 2 0例肾癌患者癌组织、癌旁和正常肾组织b FGF表达情况 ;用免疫组化技术测定 35例肾癌患者癌组织... 探讨碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)在肾癌中表达的意义和其在肾癌微血管形成中的作用及与肾癌生物学特性的关系。采用斑点杂交技术测定 2 0例肾癌患者癌组织、癌旁和正常肾组织b FGF表达情况 ;用免疫组化技术测定 35例肾癌患者癌组织、癌旁和正常肾组织b FGF表达和肿瘤微血管密度 (MVD)。结果显示 ,肾癌组织中b FGF表达明显高于癌旁和周围正常肾组织 (P <0 0 1)。b FGF表达升高与肿瘤分期、分级密切相关 ;肾细胞癌组织中MVD与b FGF表达呈明显正相关。提示b FGF是肾细胞癌组织中重要的血管生长因子之一 ,b FGF表达和MVD与肾细胞癌的预后有关。 展开更多

关键词 肾肿瘤 碱性成纤维细胞生长因子 微血管密度 免疫组织化学 斑点杂交 肾细胞癌 B-FGF

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mdm2与p53在骨骼肌恶性肿瘤中的改变及其临床意义 被引量：10

18

作者 李丁 崔大祥 +2 位作者 苏海川 闫小君 范清宇 《第四军医大学学报》 2000年第8期1002-1004,共3页

目的　探讨 mdm2与 p5 3基因在骨骼肌恶性肿瘤中的改变及其临床意义 .方法　采用 RNA打点杂交技术分析2 0例骨骼肌恶性肿瘤中的 mdm2与 p5 3基因的表达水平 ,采用 PCR- SSCP技术分析 p5 3基因的突变情况 ,结合随访结果 ,分析其临床意义 ... 目的　探讨 mdm2与 p5 3基因在骨骼肌恶性肿瘤中的改变及其临床意义 .方法　采用 RNA打点杂交技术分析2 0例骨骼肌恶性肿瘤中的 mdm2与 p5 3基因的表达水平 ,采用 PCR- SSCP技术分析 p5 3基因的突变情况 ,结合随访结果 ,分析其临床意义 .结果　 1RNA打点杂交结果 :mdm2基因在 10例恶性肿瘤标本中呈高表达 ,在 8例肿瘤标本与 2 0例瘤旁组织标本中呈低表达 ,mdm2的表达在骨骼肌恶性肿瘤中显著高于瘤旁组织 (P<0 .0 1) ;p5 3基因在 12例骨骼肌肿瘤标本中呈高表达 ,在相应瘤旁组织中呈低表达 ,两者之间存在显著性差异 (P<0 .0 1) ;2 PCR- SSCP未检出 mdm 2基因突变 ,检出 9例肿瘤标本中存在 p5 3基因突变 ;33a随访结果 :9例p5 3突变患者 ,3例死于术后 0 .5 a,4例死于术后 1a,2例死于术后 1.5 a,11例无 p5 3突变患者 ,6例死于术后 2 a,1例死于术后 3a,4例 3a后尚存活 .结论　 mdm2基因以高表达方式 ,p5 3以突变、高表达方式参与骨骼肌恶性肿瘤发生发展 ,检测 mdm2有无高表达与 p5 3有无异常可辅助判断运动系统肿瘤患者的预后 . 展开更多

关键词 骨骼肌肿瘤 MDM2 P53 rna打点杂交 PCR-SSCP

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采用改进的差示PCR技术分离胃癌差异表达基因及其临床意义(英文) 被引量：13

19

作者 崔大祥 阎小君 苏成芝 《第四军医大学学报》 1998年第6期601-605,共5页

目的：建立优化的差示PCR条件；运用建立的条件分离胃癌GC7901与胃粘膜GES－1细胞株之间的差异表达基因；根据获取的序列，设计引物并运用于检测胃癌组织、血、活检胃粘膜标本，拟筛选出检出率与符合率高的数对引物，建立胃癌基因诊断... 目的：建立优化的差示PCR条件；运用建立的条件分离胃癌GC7901与胃粘膜GES－1细胞株之间的差异表达基因；根据获取的序列，设计引物并运用于检测胃癌组织、血、活检胃粘膜标本，拟筛选出检出率与符合率高的数对引物，建立胃癌基因诊断方法．方法：LJGC7901与GES－1细胞株为研究对象，探索mRNA差示PCR的最佳反应条件，运用优化的条件分离细胞株之间的差异表达基因；以回收的片段作探针，打点杂交证实为真正的差异片段后，对产物进行直接测序及同源性检索；设计引物，采用RT－PCR方法检测胃癌组织、血、活检胃粘膜标本．结果：优化的差示PCR条件为：前5轮PCR循环采用94℃35s，40℃2min，72℃30s，后35轮PCR循环采用94℃45s，55℃2min，72℃1min，最后在72℃延伸7min；分离回收差异条带154条，从中选出17个片段作探针，打点杂交证实在两细胞株之间呈差异表达；对17个片段进行了测序，其中17个新序列被GenBank接受，接受号为AF054162至AF054172，AF071052至AF071058；其中5个序列引物在26例胃癌标本中检出覆盖率为100％，在9例病理确诊的胃癌患者活检胃粘膜中检出率100％，在17例病理确诊为胃癌患者血标本中检出率为53％．结论：优化了mRNA差示PCR技术条件；分离出154个差异表达的基因片段；筛选出17个新序? 展开更多

关键词 胃肿瘤 差异表达基因 差示PCR 聚合酶链反应

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PRSV-CP转基因番木瓜表达与抗病能力关系的研究 被引量：15

20

作者 周鹏 郑学勤 《热带作物学报》 CSCD 1996年第2期77-83,共7页

利用ＲＮＡｄｏｔｂｌｏｔ（点杂交）和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ（分子杂交）等技术，分析了ＰＲＳＶ－ＣＰ转基因番木瓜转录水平（ｍＲＮＡ）的表达，再通过ＲＮＡ斑点杂交和间接斑点ＥＬＩＳＡ等技术估测了ＲＮＡ、蛋白质在ＰＲＳＶ... 利用ＲＮＡｄｏｔｂｌｏｔ（点杂交）和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ（分子杂交）等技术，分析了ＰＲＳＶ－ＣＰ转基因番木瓜转录水平（ｍＲＮＡ）的表达，再通过ＲＮＡ斑点杂交和间接斑点ＥＬＩＳＡ等技术估测了ＲＮＡ、蛋白质在ＰＲＳＶ－ＣＰ转基因番木瓜中的表达量，最后通过大田攻毒试验检测了ＲＮＡ、蛋白质的表达量与抗病能力的关系。 展开更多

关键词 番木瓜 转基因番木瓜 杂交 抗病性

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