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端粒酶抑制因子X1过表达对人食管癌EC1细胞增殖及凋亡的影响 被引量:2
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作者 赵倩 卢桂芳 +4 位作者 刘亚萍 和水祥 任牡丹 李雅睿 杨振威 《国际消化病杂志》 CAS 2023年第1期28-31,38,共5页
目的探究端粒酶抑制因子X1(PinX1)对人食管癌EC1细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养人食管癌细胞系EC1细胞株,并将其分为空白对照(NG)组(空白对照细胞)、pcDNA组(转染阴性对照质粒)、pcDNA-PinX1组(转染PinX1过表达质粒)、N-乙酰-L-半... 目的探究端粒酶抑制因子X1(PinX1)对人食管癌EC1细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养人食管癌细胞系EC1细胞株,并将其分为空白对照(NG)组(空白对照细胞)、pcDNA组(转染阴性对照质粒)、pcDNA-PinX1组(转染PinX1过表达质粒)、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)组(加入信号通路抑制剂)。采用实时荧光定量PCR法检测各组PinX1 mRNA的表达水平。分别采用CCK-8法和流式细胞术检测各组细胞的增殖、凋亡情况。采用荧光探针法检测各组活性氧簇(ROS)水平。采用蛋白质印迹法检测各组腺苷酸激活蛋白激酶/信号转导与转录激活因子3(AMPK/STAT3)信号通路相关蛋白的表达水平。结果经成功转染细胞后,与NG组、pcDNA组比较,pcDNA-PinX1组细胞的增殖抑制率、凋亡率、ROS水平、p-AMPK/AMPK均升高,而p-STAT3/STAT3均降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。与pcDNA-PinX1组比较,NAC组细胞的增殖抑制率、凋亡率、ROS水平、p-AMPK/AMPK均降低,p-STAT3/STAT3升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论PinX1过表达可抑制人食管癌EC1细胞增殖并诱导其凋亡,可能通过促进ROS/AMPK/STAT3信号通路活化来实现。 展开更多
关键词 端粒酶抑制因子X1 人食管癌ec1细胞 活性氧簇 增殖 凋亡
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旋覆花1-O-Acetylbritannilactone RP-HPLC含量测定方法的研究 被引量:9
2
作者 王维娜 王云志 张嫡群 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期205-207,共3页
目的:建立了旋覆花1-O-Acetylbritannilactone含量测定的RP—HPLC法,用该法对不同产地的旋覆花、旋覆花不同部位进行了含量测定和比较。方法:采用高效液相色谱法。用Hypersil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(33:67)... 目的:建立了旋覆花1-O-Acetylbritannilactone含量测定的RP—HPLC法,用该法对不同产地的旋覆花、旋覆花不同部位进行了含量测定和比较。方法:采用高效液相色谱法。用Hypersil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(33:67)为流动相,流速:1 mL·min^(-1);柱温为室温;检测波长210nm。结果:1-O-Acetylbritannilactone在0.36-1.86μg范围内线性良好,其高、中、低3个量的平均回收率分别为99.61%,99.29%,98.83%;RSD(%)为1.0,0.3,0.6(n=3)。结论:方法简便、快速、重复性好,可作为旋覆花的质量控制方法。 展开更多
关键词 旋覆花 1-o-acetylbritannilactone RP-HPLC 含量 测定 反相高效液相色谱法
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电针足三里对腹泻型肠易激综合征模型大鼠EC细胞及内脏敏感性的影响
3
作者 周小琴 王婧雯 +2 位作者 许金森 郑淑霞 萨喆燕 《中医药信息》 2024年第10期27-33,共7页
目的:探究电针刺激大鼠足三里穴对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠EC细胞、5-HT、TPH1的影响,分析其作用机制。方法:18只成年雄性大鼠,随机分为空白组6只和造模组12只,造模组采用慢性束缚应激联合番泻叶灌胃法建立IBS-D模型;造模成功... 目的:探究电针刺激大鼠足三里穴对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠EC细胞、5-HT、TPH1的影响,分析其作用机制。方法:18只成年雄性大鼠,随机分为空白组6只和造模组12只,造模组采用慢性束缚应激联合番泻叶灌胃法建立IBS-D模型;造模成功后,12只大鼠随机分为模型组和电针组各6只,空白组和模型组不予电针干预,电针组进行足三里穴的电针刺激,每日1次,留针20 min,持续进行7 d。观察大鼠体质量增长值、结直肠扩张(CRD)和腹壁撤退反射(AWR)评分、腹泻指数,并运用免疫组化检测EC细胞数量的变化,ELISA检测5-HT表达水平,PCR检测TPH1 mRNA表达情况,Western blot检测大鼠TPH1蛋白的表达情况。结果:与空白组比较,模型组大鼠体质量增长值明显降低,腹泻指数显著升高,CRD容量阈值降低,AWR评分升高,EC细胞数量、5-HT浓度、TPH1 mRNA增高(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,电针组大鼠腹泻指数降低,CRD容量阈值升高,AWR评分降低,EC细胞数量、5-HT浓度、TPH1 mRNA降低(P<0.01,P<0.05)。结论:电针足三里穴能降低IBS-D大鼠内脏敏感性,有效减轻腹泻症状,其作用机制可能是影响EC细胞、TPH1的表达,促使5-HT表达水平下降,从而调控IBS-D大鼠内脏敏感性。 展开更多
关键词 腹泻型肠易激综合征 足三里 ec细胞 五羟色胺 色氨酸羟化酶1
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食管癌组织中Twist1表达对患者临床病理特征及预后的影响
4
作者 袁艺 岳颖 姚晨 《实用癌症杂志》 2024年第11期1759-1761,1767,共4页
目的探究食管癌(EC)组织Twist1表达对EC患者临床病理特征及预后的影响。方法选取EC患者150例作为观察组,同时选取同期正常食管非肿瘤性病变组织标本150例作为对照组。通过免疫组化法检测并比较2种组织标本中Twist1的阳性表达率,应用免... 目的探究食管癌(EC)组织Twist1表达对EC患者临床病理特征及预后的影响。方法选取EC患者150例作为观察组,同时选取同期正常食管非肿瘤性病变组织标本150例作为对照组。通过免疫组化法检测并比较2种组织标本中Twist1的阳性表达率,应用免疫印迹法检测2种组织中Twist基因的表达水平,并分析EC组织中Twist1的阳性表达与临床病理特征的关系。结果与正常食管非肿瘤性病变组织相比,癌组织中的Twist1阳性表达率及Twist1相对表达量均显著升高(P<0.05)。Twist1的阳性表达与EC患者的性别、年龄、肿瘤直径、病理类型以及分化程度均无关(P>0.05);在TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移以及有远处转移的患者中阳性表达率更高(P<0.05)。结论Twist1在EC组织中呈高表达状态,与TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移及远处转移具有一定相关性。检测Twist1的表达水平,有助于EC的早期诊断,同时还可为临床上判断EC患者的预后提供参考。 展开更多
关键词 ec TWIST1 临床病理特征 预后
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沉默STAT3基因对人食管癌EC1细胞裸鼠移植瘤的抑制作用 被引量:3
5
作者 轩小燕 李珊珊 +2 位作者 郑献召 李娜 王丰 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期456-458,共3页
目的构建STAT3靶向短发夹RNA(shRNA)质粒,研究其对人食管癌EC1细胞裸鼠皮下移植瘤的作用,探讨其在食管癌基因治疗中的可行性和特异性。方法构建STAT3的siRNA真核表达载体pSUPER-EGFP-STAT3,稳定表达该质粒的细胞为实验组,转染空质粒细... 目的构建STAT3靶向短发夹RNA(shRNA)质粒,研究其对人食管癌EC1细胞裸鼠皮下移植瘤的作用,探讨其在食管癌基因治疗中的可行性和特异性。方法构建STAT3的siRNA真核表达载体pSUPER-EGFP-STAT3,稳定表达该质粒的细胞为实验组,转染空质粒细胞及未处理细胞为对照组,建立裸鼠荷瘤模型;监测肿瘤生长变化,HE染色观察肿瘤病理学变化,RT-PCR、免疫组化方法检测STAT3mRNA和蛋白变化。结果裸鼠体内实验显示,实验组肿瘤增长受到明显抑制;HE染色显示对照组肿瘤体积大、异形明显;RT-PCR、免疫组化结果表明实验组STAT3mRNA和蛋白表达下调。结论shRNA沉默STAT3基因能抑制人食管癌EC1细胞裸鼠皮下移植瘤的形成,且能在体内有效下调STAT3mRNA和蛋白的表达,为食管癌的基因治疗提供了新的靶点,开辟了新的思路。 展开更多
关键词 食管癌细胞ec1 基因沉默 裸鼠 STAT3
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ISO 362—1:2007与ECE R51/03系列差异及发展动向分析 被引量:4
6
作者 谢东明 冯屹 +2 位作者 郭勇 高吉强 顾斌 《汽车技术》 北大核心 2011年第11期11-15,共5页
阐述了国际标准化组织制定加速行驶车外噪声标准ISO 362—1:2007与联合国欧洲经济委员会制定的加速行驶车外噪声法规ECE R51/03系列在车辆条件、参考点定义及数据处理方面的具体差异,并利用M2≤3.5 t类车辆进行了试验数据验证。分析了2... 阐述了国际标准化组织制定加速行驶车外噪声标准ISO 362—1:2007与联合国欧洲经济委员会制定的加速行驶车外噪声法规ECE R51/03系列在车辆条件、参考点定义及数据处理方面的具体差异,并利用M2≤3.5 t类车辆进行了试验数据验证。分析了2个标准体系差异产生的背景,并结合ISO与ECE提交的最新修订草稿,介绍了2个标准体系的发展动向。 展开更多
关键词 车外噪声标准 ISO 362—1:2007 ecE R51 差异
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Notch1信号途径在食管鳞癌细胞株EC9706的作用研究 被引量:11
7
作者 鲁照明 刘红涛 +2 位作者 许培荣 侯桂琴 薛乐勋 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第13期740-743,共4页
目的:研究Notch1基因在食管癌细胞株中的表达及其对食管鳞癌细胞EC9706凋亡的影响。方法:通过免疫细胞化学检测Notch1基因在EC9706细胞中的表达。通过RT-PCR扩增Notch1基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-Notch1,转染EC9706细胞,利用Western... 目的:研究Notch1基因在食管癌细胞株中的表达及其对食管鳞癌细胞EC9706凋亡的影响。方法:通过免疫细胞化学检测Notch1基因在EC9706细胞中的表达。通过RT-PCR扩增Notch1基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-Notch1,转染EC9706细胞,利用Western blotting检测转染pcDNA3.1-Notch1载体12h,24h,48h,72h的食管癌细胞株与转染空载体食管癌细胞株中Notch1的表达,并观察每一时期食管癌细胞株的凋亡情况。结果:在食管癌细胞株中Notch1基因低表达,此外,转染Notch1后的细胞株Notch1表达量与转染空载体相比有明显差异(F=80.442,P<0.05)。经组间两两比较,实验组食管癌细胞株的Notch1的表达量在12h时比对照组食管癌细胞株的表达量显著增高(P<0.01),前者约为后者的4.6倍。但48h至72h时Notch1表达量实验组与对照组食管癌细胞株无显著性差异(P>0.05)。进一步通过倒置显微镜发现48h至72h细胞出现大量凋亡的现象。上述结果说明12hNotch1表达量的增加,使食管癌细胞EC9706中的Notch1信号途径得以激活,该途径激活后导致48h到72h时的细胞大量凋亡。结论:Notch1在食管癌细胞中的激活引起细胞大量凋亡,提示Notch1基因有可能成为治疗食管癌的新靶点。 展开更多
关键词 NOTCH1 ec9706 免疫细胞化学 WESTERN BLOTTING
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Notch1基因在食管鳞癌细胞株EC9706中的表达及其对细胞凋亡的影响 被引量:5
8
作者 鲁照明 刘红涛 +2 位作者 许培荣 侯桂琴 薛乐勋 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1074-1079,共6页
背景与目的:早期的研究显示,Notch1信号途径与肿瘤的发生密切相关,在细胞的生长、增殖、分化和凋亡中起着十分重要的作用。本研究旨在研究Notch1基因在食管鳞癌EC9706细胞中的表达及其对EC9706细胞凋亡的影响。方法:通过免疫细胞化学方... 背景与目的:早期的研究显示,Notch1信号途径与肿瘤的发生密切相关,在细胞的生长、增殖、分化和凋亡中起着十分重要的作用。本研究旨在研究Notch1基因在食管鳞癌EC9706细胞中的表达及其对EC9706细胞凋亡的影响。方法:通过免疫细胞化学方法检测Notch1基因在EC9706细胞中的表达。采用RT-PCR技术扩增Notch1基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-Notch1(命名为pcNICD),转染EC9706细胞,利用RT-PCR及Western blot检测稳定转染pcNICD载体、转染pcDNA3.1空载体及未处理的EC9706细胞中Notch1的表达,另通过流式细胞仪检测未处理、转染pcDNA3.1和转染pcNICD的EC9706细胞的凋亡。结果:EC9706细胞中发现Notch1基因的表达。与未处理的和转染pcDNA3.1的EC9706细胞相比,转染pcNICD的EC9706细胞中Notch1基因的mRNA和蛋白表达水平均明显增加,大约增加3倍(P<0.05);但未处理的和转染pcDNA3.1的EC9706细胞中Notch1的表达差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞检测结果显示,在未处理的和转染pcDNA3.1的EC9706细胞中,细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);但与与未处理的和转染pcDNA3.1的EC9706细胞相比,转染pcNICD的EC9706细胞转染后24h、48h和72h时细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。结论:Notch信号途径的激活引起食管鳞癌EC9706细胞的凋亡,提示Notch1基因有可能成为治疗食管鳞癌的新靶点。 展开更多
关键词 NOTCH1基因 食管肿瘤 细胞株ec9706 细胞凋亡
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全反式维甲酸联合LY294002对食管癌EC1细胞增殖、迁移及PI3K、MMP-2表达的影响 被引量:5
9
作者 崔会娟 李娜 +3 位作者 路彦娟 李珊珊 王珍珍 路太英 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第1期1-5,共5页
目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)、磷脂酰肌醇激酶-3(PI3K)抑制剂LY294002单独或联合作用对食管癌EC1细胞增殖、迁移及PI3K和MMP-2表达的影响。方法:将常规培养的EC1细胞随机分为ATRA组、LY294002组、ATRA+LY294002组和对照组4组,采用CCK-... 目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)、磷脂酰肌醇激酶-3(PI3K)抑制剂LY294002单独或联合作用对食管癌EC1细胞增殖、迁移及PI3K和MMP-2表达的影响。方法:将常规培养的EC1细胞随机分为ATRA组、LY294002组、ATRA+LY294002组和对照组4组,采用CCK-8检测各组细胞的增殖情况,通过划痕实验测定各组细胞的迁移能力,采用RT-PCR和Western blot方法检测各组细胞中PI3K及MMP-3 mRNA和蛋白的表达情况。结果:作用24、48和72 h后,ATRA+LY294002组的细胞增殖抑制率均高于其他2组(P<0.05);作用24 h后,ATRA+LY294002组细胞迁移能力均低于其他3组(P<0.05);作用48 h后,ATRA+LY294002组细胞PI3K及MMP-2 mRNA和蛋白的表达量均低于其他3组(P<0.05)。结论:ATRA联合LY294002可协同抑制EC1细胞的增殖、迁移和PI3K、MMP-2的表达,进而可能协同抑制肿瘤血管生成。 展开更多
关键词 全反式维甲酸 LY294002 ec1细胞 PI3K MMP-2
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全反式维甲酸对食管癌EC9706细胞NDRG1 mRNA和蛋白表达的影响 被引量:3
10
作者 贺付成 高冬玲 +5 位作者 陈奎生 李惠翔 张岚 张红新 张三申 张云汉 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第3期398-401,共4页
目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对食管癌细胞分化相关基因NDRG1表达的影响。方法:将10μmol/L ATRA作用于人食管癌EC9706细胞,应用免疫组织化学SP法和RT PCR方法分别检测对照组及ATRA作用1d、2d、3d及5d组NDRG1蛋白和mRNA的表达。结果:ATR... 目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对食管癌细胞分化相关基因NDRG1表达的影响。方法:将10μmol/L ATRA作用于人食管癌EC9706细胞,应用免疫组织化学SP法和RT PCR方法分别检测对照组及ATRA作用1d、2d、3d及5d组NDRG1蛋白和mRNA的表达。结果:ATRA作用1d、2d、3d及5d组NDRG1mRNA相对含量分别为1.47±0.18、1.69±0.24、1.72±0.19和1.58±0.25,均高于对照组的1.08±0.10(P<0.05或0.01)。ATRA作用1d、2d、3d及5d组NDRG1蛋白表达积分分别为254±37、277±34、265±30和239±24,均高于对照组的164±29(P<0.01)。结论:ATRA可上调EC9706细胞分化相关基因NDRG1的表达,从而促进其分化。 展开更多
关键词 食管肿瘤 NDRG1 全反式维甲酸 ec9706细胞
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维生素D_3对EC9706细胞增殖、裸鼠移植瘤生长及NDRG1蛋白表达的影响 被引量:5
11
作者 贺付成 张岚 +3 位作者 高冬玲 李惠翔 陈奎生 张云汉 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2009年第1期42-45,共4页
目的:观察1,25-(OH)2维生素D3对食管癌EC9706细胞细胞增殖、细胞周期、食管癌细胞裸鼠移植瘤生长及对NDRG1蛋白表达的影响。方法:采用0.3μmol/L的1,25-(OH)2维生素D3作用于EC9706细胞后,MTT法检测肿瘤细胞的增殖情况,流式细胞仪检测细... 目的:观察1,25-(OH)2维生素D3对食管癌EC9706细胞细胞增殖、细胞周期、食管癌细胞裸鼠移植瘤生长及对NDRG1蛋白表达的影响。方法:采用0.3μmol/L的1,25-(OH)2维生素D3作用于EC9706细胞后,MTT法检测肿瘤细胞的增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期的变化。BALB/c小鼠荷瘤后,用5μg/kg1,25-(OH)2维生素D3溶液皮下注射于移植瘤周围,观察移植瘤生长情况,并采用免疫组织化学方法检测裸鼠移植瘤组织中NDRG1蛋白表达水平。实验中均以未经1,25-(OH)2维生素D3处理作为对照组。结果:①MTT实验结果显示,1,25-(OH)2维生素D3作用1~5d时各组吸光度均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);随着1,25-(OH)2维生素D3作用时间的延长,细胞增殖抑制率逐渐升高(1d:7.4%,3d:21.1%,5d:23.8%)。②细胞周期检测结果显示,不同培养时间组G1期细胞分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。③与对照组相比,1,25-(OH)2维生素D3可上调NDRG1蛋白表达水平。结论:1,25-(OH)2维生素D3可抑制食管癌细胞增殖,并通过上调NDRG1的表达而抑制食管癌裸鼠移植瘤的生长。 展开更多
关键词 1 25-(OH)2维生素D3 NDRG1 ec9706细胞 裸鼠
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肿瘤转移抑制基因-1在食管鳞癌组织及食管癌EC109细胞中的表达及意义 被引量:6
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作者 刘博 吕洋 +3 位作者 林媛媛 刘军超 李秀娟 乔海霞 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期536-539,548,共5页
目的探讨肿瘤转移抑制基因-1(TMSG-1)在食管鳞癌(ESCC)组织及食管癌EC109细胞中的表达及意义。方法采用SP免疫组织化学染色法检测136例ESCC及37例正常食管黏膜组织中TMSG-1蛋白的表达情况,分析TMSG-1与ESCC患者临床病理指标的关系;培养... 目的探讨肿瘤转移抑制基因-1(TMSG-1)在食管鳞癌(ESCC)组织及食管癌EC109细胞中的表达及意义。方法采用SP免疫组织化学染色法检测136例ESCC及37例正常食管黏膜组织中TMSG-1蛋白的表达情况,分析TMSG-1与ESCC患者临床病理指标的关系;培养人食管癌EC109细胞并用常用化疗药物顺铂(CDDP)干预,同时设对照组,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,半定量RT-PCR法检测细胞TMSG-1的表达情况。结果 TMSG-1在ESCC和正常食管黏膜的阳性率分别为52.2%(71/136)、94.6%(35/37),差异具有统计学意义(P<0.05)。TMSG-1的异常表达与ESCC组织学分级、患者的TNM分期、淋巴结转移情况相关。顺铂干预组EC109细胞的增殖抑制率较对照组显著增高,差异具有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR结果显示,干预组EC109细胞TMSG-1的mRNA表达明显高于对照组(P<0.01)。结论 TMSG-1的异常表达与ESCC的发展及转移相关,可作为较为理想的肿瘤标志物辅助诊断并指导临床治疗。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 肿瘤转移抑制基因-1(TMSG-1) ec109细胞 免疫组织化学 RT-PCR 细胞增殖 顺铂(CDDP)
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顺铂下调铜离子转运蛋白1诱导人食管鳞癌细胞EC109耐药 被引量:2
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作者 余乐 陈明辉 +5 位作者 古春萍 李亦蕾 文静 傅剑华 曹之宪 刘叔文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期801-804,共4页
目的研究人食管鳞癌细胞顺铂耐药性产生的机制。方法 MTT法检测顺铂对耐药细胞EC109/CDDP及其亲代细胞EC109的细胞毒作用。电感耦合等离子体质谱检测细胞内顺铂的蓄积和Pt-DNA加合物的形成。Western blotting检测人多聚腺苷二磷酸核糖... 目的研究人食管鳞癌细胞顺铂耐药性产生的机制。方法 MTT法检测顺铂对耐药细胞EC109/CDDP及其亲代细胞EC109的细胞毒作用。电感耦合等离子体质谱检测细胞内顺铂的蓄积和Pt-DNA加合物的形成。Western blotting检测人多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly-ADP-ribose polymerase,PARP)的剪切和铜离子转运蛋白1(copper transporter1,CTR1)的蛋白表达。结果顺铂耐药细胞株EC109/CDDP较其亲代细胞EC109对顺铂引起的细胞毒作用和凋亡敏感性下降,细胞内顺铂蓄积和Pt-DNA加合物的形成减少,并且CTR1蛋白表达水平降低。结论顺铂通过降低细胞CTR1蛋白表达抑制顺铂进入细胞,导致细胞耐药性的产生。 展开更多
关键词 食管鳞癌 ec109 顺铂 耐药性 铜转运蛋白1
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沉默ABCE1基因对人食管癌EC109细胞凋亡、增殖、侵袭及迁移的影响 被引量:2
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作者 李小瑞 岳军艳 +4 位作者 张清琴 崔艳慧 花勤亮 寇小格 李慧敏 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期569-574,共6页
目的:探讨电转法沉默ATP结合盒转运子E1(ATP-binding cassette protein E1,ABCE1)基因的表达对人食管癌EC109细胞凋亡、增殖、侵袭及迁移的影响。方法:合成靶向ABCE1的siRNA序列(ABCE1-siRNA)以及阴性对照序列(NCsiRNA),电转法转染至EC... 目的:探讨电转法沉默ATP结合盒转运子E1(ATP-binding cassette protein E1,ABCE1)基因的表达对人食管癌EC109细胞凋亡、增殖、侵袭及迁移的影响。方法:合成靶向ABCE1的siRNA序列(ABCE1-siRNA)以及阴性对照序列(NCsiRNA),电转法转染至EC109细胞,分别形成ABCE1-EC109、NC-siRNA-EC109细胞。RT-PCR、Western blotting检测转染后EC109细胞中ABCE1 mRNA与蛋白的表达情况,流式细胞术检测EC109细胞周期及凋亡,CCK-8法、划痕愈合实验、Transwell法分别检测EC109细胞的增殖、迁移以及侵袭的能力。结果:ABCE1-EC109细胞中ABCE1 mRNA和蛋白表达较NC-siRNAEC109细胞明显降低[(0.47±0.04)vs(0.67±0.05),(0.63±0.09)vs(0.86±0.11);均P<0.05]。与NC-siRNA-EC109细胞相比,ABCE1-EC109细胞的增殖速度明显减慢[(2.20±0.10)vs(2.91±0.13),P<0.05],细胞周期阻滞在G0/G1期细胞数目明显增多[(76.5±3.1)%vs(56.1±2.7)%,P<0.05)];细胞的凋亡率明显升高[(15.46±3.12)%vs(0.54±0.24)%,P<0.01],迁移、侵袭能力均显著下降[迁移:(8.12±0.23)vs(1.91±0.11)μm,P<0.05;侵袭:(42.56±4.68)vs(68.78±6.98)个,P<0.01]。结论:电转法沉默ABCE1基因的表达可促进食管癌EC109细胞的凋亡,抑制其体外增殖、侵袭及迁移。 展开更多
关键词 ATP 结合盒转运子E1 食管癌 电转法 ec109细胞 凋亡 增殖 侵袭 迁移
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三氧化二砷对人食管癌细胞株EC-1的放射增敏作用 被引量:3
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作者 崔艳慧 梁海军 +2 位作者 张清琴 路平 苗战会 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期667-670,共4页
目的探讨三氧化二砷(As2O3)对食管癌离体肿瘤细胞EC-1的放射增敏作用,并探讨其机制。方法利用多靶单击数学模型拟合放射剂量-细胞存活曲线,观察As2O3对食管癌细胞株EC-1的放射增敏作用。流式细胞法观察As2O3对细胞周期分布及细胞凋亡的... 目的探讨三氧化二砷(As2O3)对食管癌离体肿瘤细胞EC-1的放射增敏作用,并探讨其机制。方法利用多靶单击数学模型拟合放射剂量-细胞存活曲线,观察As2O3对食管癌细胞株EC-1的放射增敏作用。流式细胞法观察As2O3对细胞周期分布及细胞凋亡的影响。结果 As2O3对食管癌细胞株EC-1有明显的放射增敏效应,3μmol/L As2O3作用48 h的放射增敏比为1.285。药物作用后G2/M期细胞比例增加,G0/G1期和S期细胞比例减少;细胞凋亡指数增加,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 As2O3对食管癌细胞株EC-1有明显的放射增敏效应。放射增敏的机制可能与As2O3抑制EC-1细胞的修复能力、使细胞周期阻滞在G2/M期、G0/G1期和S期细胞减少以及凋亡增加有关。 展开更多
关键词 三氧化二砷 人食管癌细胞株ec-1 放射增敏
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转染kiss-1基因对人食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤的抑制作用 被引量:3
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作者 李晟磊 赵志华 +4 位作者 张岚 陈奎生 高冬玲 张云汉 张蕾 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2010年第11期1088-1092,共5页
目的:研究转染kiss-1基因对人食管癌EC9706细胞裸鼠皮下移植瘤的作用,探讨其在食管癌基因治疗中的可行性和特异性.方法:在食管癌细胞系EC9706中转染kiss-1基因,经G418筛选,建立稳定高表达Kiss-1蛋白的细胞系.稳定表达该基因的细胞为转染... 目的:研究转染kiss-1基因对人食管癌EC9706细胞裸鼠皮下移植瘤的作用,探讨其在食管癌基因治疗中的可行性和特异性.方法:在食管癌细胞系EC9706中转染kiss-1基因,经G418筛选,建立稳定高表达Kiss-1蛋白的细胞系.稳定表达该基因的细胞为转染kiss-1基因组,转染空质粒细胞及未处理细胞为对照组,建立裸鼠荷瘤模型;监测肿瘤生长变化,HE染色观察肿瘤病理学变化,RT-PCR、Westernblot方法检测kiss-1mRNA和蛋白变化.结果:转染kiss-1基因组肿瘤生长受到显著抑制;HE染色显示转染kiss-1基因组及转染空质粒组肿瘤组织内坏死均较空白对照组多;RT-PCR、Westernblot结果表明转染kiss-1基因组裸鼠肿瘤组织kiss-1mRNA和蛋白表达均显著升高,三组间比较差异具有统计学意义(F=72.685,24.807,均P<0.05).结论:转染kiss-1基因能抑制人食管癌EC9706细胞裸鼠皮下移植瘤的形成,且能有效上调kiss-1mRNA和蛋白的表达,可为食管癌的基因治疗提供新的靶点、开辟新的思路. 展开更多
关键词 KISS-1 ec9706 转染 裸鼠 逆转录聚合酶链反应 蛋白免疫印迹
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顺铂对TRAIL诱导EC1细胞凋亡的增敏效应 被引量:2
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作者 江亚南 马俊芬 +4 位作者 黄幼田 李沛 李芳芳 杨浩 董子明 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2011年第3期346-348,共3页
目的:观察顺铂(cDDP)对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导EC1细胞凋亡的增敏效应。方法:MTT法检测单用TRAIL(10、50、100、500和1000μg/L)或cDDP(1.0、2.0、4.0、10.0和20.0mg/L)分别作用24、48和72h对EC1细胞增殖的影响。流式... 目的:观察顺铂(cDDP)对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导EC1细胞凋亡的增敏效应。方法:MTT法检测单用TRAIL(10、50、100、500和1000μg/L)或cDDP(1.0、2.0、4.0、10.0和20.0mg/L)分别作用24、48和72h对EC1细胞增殖的影响。流式细胞术检测100μg/LTRAIL和10.0mg/LcDDP单用或联用48h对EC1细胞凋亡和细胞周期的影响,并设空白对照组。结果:单用TRAIL作用24、48和72h对EC1细胞增殖影响不明显(P>0.05),单用cDDP对EC1细胞增殖有抑制作用(P<0.05)。单用TRAIL对EC1细胞凋亡率无影响(FTRAIL=5.836,P=0.250),而单用cDDP可提高EC1细胞凋亡率(FcDDP=20.763,P=0.041),二者联合有交互作用(F交互=57.422,P<0.001)。单用TRAIL和cDDP对EC1细胞周期无影响,二者联用后G0/G1和S期细胞比例下降,G2/M细胞比例上升(P均<0.001)。结论:cDDP可增加EC1细胞对TRAIL的敏感性,二者联用可诱导EC1细胞凋亡,并诱导其在G/M期阻滞。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 顺铂 ec1细胞 细胞凋亡 细胞周期
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Juglone联合顺铂抑制食管癌EC1细胞增殖的研究 被引量:1
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作者 李玲 陈平 +3 位作者 连鸿凯 赵继敏 马俊芬 董子明 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第17期72-73,共2页
目的研究Pinl抑制剂Juglone与化疗药物顺铂(CDDP)单独及联合使用对食管癌EC1细胞增殖的抑制作用。方法使用不同浓度Juglone、CDDP或者两药联用处理食管癌EC1细胞后,应用MTT法测定两药单独或联合使用对食管癌EC1细胞增殖的影响,使用流式... 目的研究Pinl抑制剂Juglone与化疗药物顺铂(CDDP)单独及联合使用对食管癌EC1细胞增殖的抑制作用。方法使用不同浓度Juglone、CDDP或者两药联用处理食管癌EC1细胞后,应用MTT法测定两药单独或联合使用对食管癌EC1细胞增殖的影响,使用流式细胞仪检测其对EC1细胞周期的影响。结果 Juglone对EC1细胞的生长有明显的抑制作用,48 h细胞抑制率从11.5%上升到50.7%,具有显著的剂量效应。Juglone可造成食管癌细胞在G2/M+S期的阻滞;CDDP可增加EC1细胞对于Juglone的敏感性,CDDP与Juglone合用,明显提高了EC1细胞的生长抑制率。结论 Juglone与CDDP联合能显著抑制食管癌EC1细胞的增殖。 展开更多
关键词 Pinl抑制剂Juglone ec1细胞系 细胞增殖 顺铂
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柚皮苷调控miR-199a-5p/ECE1分子轴促进骨损伤修复 被引量:7
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作者 刘冲 曹慧 +1 位作者 杨彩彩 王震 《昆明医科大学学报》 CAS 2020年第6期32-38,共7页
目的探讨柚皮苷通过调控mi R-199a-5p/ECE1分子轴对骨损伤修复的影响。方法 Western blotting检测ECE1及成骨分化相关标志物的表达水平;RT-qPCR检测mi RNAs相对表达水平;双荧光素酶报告基因验证mi R-199a-5p和ECE1靶向关系;MTT检测MC3T3... 目的探讨柚皮苷通过调控mi R-199a-5p/ECE1分子轴对骨损伤修复的影响。方法 Western blotting检测ECE1及成骨分化相关标志物的表达水平;RT-qPCR检测mi RNAs相对表达水平;双荧光素酶报告基因验证mi R-199a-5p和ECE1靶向关系;MTT检测MC3T3-E1细胞增殖活力;碱性磷酸酶(ALP)检测MC3T3-E1细胞成骨分化能力;茜素红染色检测MC3T3-E1细胞矿化情况。结果柚皮苷处理显著促进MC3T3-E1细胞增殖活力、成骨分化指标Runx2、OPN、BMPs、OC等的表达、ALP活性以及细胞钙化能力水平(P<0.01)。其中20ng/m L浓度处理的效果最优。RT-qPCR检测结果显示,柚皮苷能显著上调mi R-199a-5p的表达水平。双荧光素酶报告基因检测结果表明ECE1是mi R-199a-5p的一个靶基因;并且,mi R-199a-5p靶向下调ECE1的表达。进一步实验表明,敲降mi R-199a-5p显著降低柚皮苷对MC3T3-E1细胞增殖活力、ALP活性和钙矿化的促进作用(P<0.01);敲降ECE1显著促进了柚皮苷对MC3T3-E1细胞增殖活力、ALP活性和生物矿化能力的促进作用(P<0.01);柚皮苷处理加同时敲降mi R-199a-5p和ECE1组MC3T3-E1细胞增殖活力、ALP活性和钙矿化能力与柚皮苷组无显著差异(P>0.05)。对细胞成骨分化标志的检测也证明了上述结果。由此可知,柚皮苷通过上调mi R-199a-5p对ECE1靶向下调作用,进而促进MC3T3-E1细胞增殖活力、成骨分化和矿化能力。结论柚皮苷处理显著促进了MC3T3-E1细胞的成骨分化水平;这种作用是通过上调mi R-199a-5p/ECE1分子轴实现的。 展开更多
关键词 骨损伤修复 柚皮苷 miR-199a-5p ecE1 成骨分化
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曲古菌素A对食管癌细胞系EC1细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 马俊芬 李沛 +3 位作者 黄幼田 杨洪艳 郑智敏 董子明 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2010年第2期180-182,共3页
目的:探讨曲古菌素A(TSA)对食管癌EC1细胞凋亡的影响。方法:用DMSO(对照组)和0.3、0.5及1.0μmol/L的TSA处理EC1细胞24 h,用Annexin V-FITC和PI双染色,流式细胞仪检测4组细胞的凋亡率,West-ern Blot检测4组细胞中Bax及Bcl-2表达的变化... 目的:探讨曲古菌素A(TSA)对食管癌EC1细胞凋亡的影响。方法:用DMSO(对照组)和0.3、0.5及1.0μmol/L的TSA处理EC1细胞24 h,用Annexin V-FITC和PI双染色,流式细胞仪检测4组细胞的凋亡率,West-ern Blot检测4组细胞中Bax及Bcl-2表达的变化。结果:对照组、0.3、0.5及1.0μmol/L TSA组作用24 h后,EC1细胞凋亡率分别为(2.18±0.37)%、(2.96±0.34)%、(7.41±1.01)%和(14.03±1.23)%,Bax蛋白表达水平分别为(0.42±0.23)、(0.45±0.11)、(1.16±0.28)和(1.89±0.30),Bcl-2蛋白表达水平分别为(1.15±0.14)、(1.11±0.15)、(0.59±0.06)和(0.40±0.07),4组间3指标差异均有统计学意义(F=211.96,25.12和33.68,P均<0.001),随TSA作用浓度的增加,EC1细胞凋亡率、Bax蛋白表达均增加,Bcl-2表达减少。结论:一定剂量的TSA可以诱导EC1细胞凋亡,凋亡的发生可能与Bax表达增加和Bcl-2表达减少有关。 展开更多
关键词 曲古菌素A 细胞凋亡 食管癌 BAX BCL-2 ec1细胞
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