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1.3倍乙型肝炎病毒全基因真核表达载体的构建及其在Bewo细胞中的表达
被引量:
6
1
作者
资捷
王前
+2 位作者
郑磊
熊石龙
蔡贞
《热带医学杂志》
CAS
2010年第2期126-129,共4页
目的构建1.3倍乙型肝炎病毒(HBV)全基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,并观察其在Bewo细胞中的表达。方法以质粒pMD18T-HBV上的HBV DNA序列为模板,构建1.3倍HBV全基因序列,将其插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),用酶切、PCR及测序鉴定...
目的构建1.3倍乙型肝炎病毒(HBV)全基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,并观察其在Bewo细胞中的表达。方法以质粒pMD18T-HBV上的HBV DNA序列为模板,构建1.3倍HBV全基因序列,将其插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),用酶切、PCR及测序鉴定,并把该载体转染Bewo细胞,以Western免疫印迹、微粒子酶免疫分析法(MEIA)和荧光定量PCR法分别检测胞内和上清中HBsAg、HBeAg蛋白的表达及HBV DNA水平。结果通过酶切、PCR及测序鉴定,成功构建1.3倍HBV全基因表达载体,该载体可以在Bewo细胞系中表达和分泌HBsAg与HBeAg,并可检测到高水平的HBV DNA。结论成功构建了1.3倍HBV全基因真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,为研究胞内HBV宫内感染奠定了基础。
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关键词
乙型肝炎病毒
1.3
倍
hbv
基因组
真核表达载体
BEWO细胞
原文传递
题名
1.3倍乙型肝炎病毒全基因真核表达载体的构建及其在Bewo细胞中的表达
被引量:
6
1
作者
资捷
王前
郑磊
熊石龙
蔡贞
机构
南方医科大学南方医院检验医学中心
出处
《热带医学杂志》
CAS
2010年第2期126-129,共4页
文摘
目的构建1.3倍乙型肝炎病毒(HBV)全基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,并观察其在Bewo细胞中的表达。方法以质粒pMD18T-HBV上的HBV DNA序列为模板,构建1.3倍HBV全基因序列,将其插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),用酶切、PCR及测序鉴定,并把该载体转染Bewo细胞,以Western免疫印迹、微粒子酶免疫分析法(MEIA)和荧光定量PCR法分别检测胞内和上清中HBsAg、HBeAg蛋白的表达及HBV DNA水平。结果通过酶切、PCR及测序鉴定,成功构建1.3倍HBV全基因表达载体,该载体可以在Bewo细胞系中表达和分泌HBsAg与HBeAg,并可检测到高水平的HBV DNA。结论成功构建了1.3倍HBV全基因真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,为研究胞内HBV宫内感染奠定了基础。
关键词
乙型肝炎病毒
1.3
倍
hbv
基因组
真核表达载体
BEWO细胞
Keywords
hepatitis B virus
1.3-fold over length genome hbv
eukaryotic expression vector
Bewo cell
分类号
R512.62 [医药卫生—内科学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
1.3倍乙型肝炎病毒全基因真核表达载体的构建及其在Bewo细胞中的表达
资捷
王前
郑磊
熊石龙
蔡贞
《热带医学杂志》
CAS
2010
6
原文传递
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参考文献
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