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转基因小麦1Dx5基因沉默的遗传表达和品质效应分析 被引量：3
1
作者 武茹 高德荣 +3 位作者 别同德 张晓 赵芸 程顺和 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期991-996,共6页
为了明确通过RNA干扰技术(RNAi)获得的转基因小麦品系"Glu-1Dx5-RNAi"中1Dx5基因的遗传规律,以"Glu-1Dx5-RNAi"为供体亲本,以弱筋品种扬麦18和扬麦13为轮回亲本进行回交,采用半籽粒SDS-PAGE法检测亲本、F_1、F_2和B... 为了明确通过RNA干扰技术(RNAi)获得的转基因小麦品系"Glu-1Dx5-RNAi"中1Dx5基因的遗传规律,以"Glu-1Dx5-RNAi"为供体亲本,以弱筋品种扬麦18和扬麦13为轮回亲本进行回交,采用半籽粒SDS-PAGE法检测亲本、F_1、F_2和BC_1F_1籽粒的高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)组成。结果表明,1Dx5基因的沉默效应在杂交后代中表现为显性遗传,在F_2和BC_1F_1世代1Dx5亚基不表达的种子数与1Dx5亚基表达的种子数的比例分别符合13:3和3:1的分离比例,说明转小RNA基因导致1Dx5基因沉默是单基因显性遗传。对转基因小麦"Glu-1Dx5-RNAi"及其受体品种Bobwhite进行品质测试表明,Glu-1Dx5-RNAi蛋白质含量(13.28%)比转化受体Bobwhite(12.83%)高0.45个百分点,硬度指数、微量SDS沉降值比受体品种分别降低3.13和3.7 mL。1Dx5基因沉默对弱筋小麦育种可能会有一定的利用价值。 展开更多
关键词 小麦 1dx5亚基 RNAI 转基因沉默 品质 遗传
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外源1Dx5基因导致小麦高分子量麦谷蛋白亚基表达变异 被引量：8
2
作者 李三和 李举 +1 位作者 王娜丽 何光源 《生物技术通讯》 CAS 2007年第2期217-219,共3页
目的:为了结合基因枪转化和传统杂交方法培育优质小麦品种,对转基因小麦和国内主栽小麦品种杂交后代外源基因遗传表达行为进行了研究。方法:采用SDS-PAGE对2个小麦杂交组合川89-107×B72-8-11b和鄂麦18×B72-8-11b的杂交及回交... 目的:为了结合基因枪转化和传统杂交方法培育优质小麦品种,对转基因小麦和国内主栽小麦品种杂交后代外源基因遗传表达行为进行了研究。方法:采用SDS-PAGE对2个小麦杂交组合川89-107×B72-8-11b和鄂麦18×B72-8-11b的杂交及回交后代籽粒进行高分子量麦谷蛋白亚基遗传表达分析。结果:在亲本中能够稳定超量表达的外源基因1Dx5在杂交后代中出现了不同的表达量,而且在外源基因的影响下,杂交后代出现了新的、杂交亲本并不表达的高分子量麦谷蛋白亚基。结论:多拷贝的外源基因在不同于受体环境的细胞质中的表达发生了变化,且由于外源基因的插入引起了内源高分子量麦谷蛋白亚基组成的变异。 展开更多
关键词 转基因小麦 外源1dx5基因 表达变异 高分子量麦谷蛋白亚基
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小麦麦谷蛋白高分子量亚基N端序列克隆及原核表达分析
3
作者 王志成 王琦 +4 位作者 张长付 张聪聪 王泽濠 张霞 王金水 《河南工业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2023年第4期60-66,共7页
为了探究麦谷蛋白高分子量亚基(HMW-GS)的N-末端结构域对面粉品质的影响,以HMW-GS的1Dx5的N-末端结构域(1Dx5-N)为目的基因进行序列克隆及原核表达,研究大肠杆菌BL21(DE 3)为载体菌进行转化,鉴定阳性克隆,以IPTG和乳糖作为诱导剂,并通... 为了探究麦谷蛋白高分子量亚基(HMW-GS)的N-末端结构域对面粉品质的影响,以HMW-GS的1Dx5的N-末端结构域(1Dx5-N)为目的基因进行序列克隆及原核表达,研究大肠杆菌BL21(DE 3)为载体菌进行转化,鉴定阳性克隆,以IPTG和乳糖作为诱导剂,并通过正交试验,筛选最佳的诱导条件。结果表明:1Dx5-N序列基因全长267 bp,共编码氨基酸89个,预测分子质量为16.211 kDa;经转化、阳性克隆鉴定后,证明了该表达载体能够在大肠杆菌中稳定遗传;IPTG和乳糖均可诱导1Dx5-N进行表达;SDS-PAGE表明1Dx5-N重组蛋白多为包涵体蛋白;IPTG诱导蛋白最佳表达条件为温度30℃,浓度0.6 mmol/L,诱导时间16 h;乳糖诱导蛋白最佳表达条件为温度30℃、质量浓度9 g/L、诱导时间16 h。通过对比发现,乳糖可代替IPTG诱导1Dx5-N蛋白表达。 展开更多
关键词 麦谷蛋白高分子量亚基 1dx5-N 末端结构域 原核表达
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