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AO/EB染色观察华蟾素诱导体外肿瘤细胞凋亡 被引量:36
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作者 左小东 秦叔逵 +1 位作者 陈惠英 王锦鸿 《临床肿瘤学杂志》 CAS 1999年第3期35-39,共5页
目的:观察华蟾素诱导肿瘤细胞凋亡的变化规律,找出最佳诱导剂量及最佳诱导时间.方法:采用人肝癌SMMC-7721和人胃癌MGC-80-3细胞株,以AO/EB染色对华赡素不同浓度及作用时间下细胞凋亡的形态变化进行观察,并定量计算出凋亡率.结果:在荧光... 目的:观察华蟾素诱导肿瘤细胞凋亡的变化规律,找出最佳诱导剂量及最佳诱导时间.方法:采用人肝癌SMMC-7721和人胃癌MGC-80-3细胞株,以AO/EB染色对华赡素不同浓度及作用时间下细胞凋亡的形态变化进行观察,并定量计算出凋亡率.结果:在荧光显微镜下可区分早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞、活细胞及坏死细胞.华蟾素诱导细胞凋亡的最佳浓度为0.12μg/ml,最佳诱导时间为20 小时左右.结论:华蟾素具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用.运用AO/EB染色研究细胞凋亡,具有方便、准确、可靠、便宜等优点,并能区分凋亡细胞及坏死细胞,值得推广运用. 展开更多
关键词 染色法 华蟾素 肿瘤细胞 细胞凋亡 肝癌 胃癌 细胞培养
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AO/EB双重染色法检测人骨肉瘤细胞凋亡 被引量:15
2
作者 吴兴 陈峥嵘 张光健 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期88-89,共2页
关键词 ao/eb双重染色法 检测 骨肉瘤 细胞凋亡 肿瘤细胞
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AO/EB染色法及流式细胞术检测DMF诱导人肝细胞凋亡 被引量:15
3
作者 路艳艳 杨锦蓉 王菁 《浙江预防医学》 2007年第6期11-14,共4页
目的观察二甲基甲酰胺(DMF)诱导正常成人离体肝细胞凋亡情况。方法以50mmol/L、100mmol/L、150mmol/L和200mmol/L剂量DMF对正常成人离体肝细胞染毒。采用AO/EB双重染色法进行形态学观察;流式细胞术检测细胞凋亡率变化。结果AO/EB染色可... 目的观察二甲基甲酰胺(DMF)诱导正常成人离体肝细胞凋亡情况。方法以50mmol/L、100mmol/L、150mmol/L和200mmol/L剂量DMF对正常成人离体肝细胞染毒。采用AO/EB双重染色法进行形态学观察;流式细胞术检测细胞凋亡率变化。结果AO/EB染色可见:活细胞核染色质着绿色,死亡细胞核染色质着橘红色,晚期凋亡细胞核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状,早期凋亡细胞核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状。染毒组早期凋亡细胞多于阴性对照组,随剂量增高,晚期凋亡细胞和死亡细胞也增多。不同剂量组间染毒24小时后,流式细胞术散点图可见,随染毒剂量增加,活细胞率逐渐下降,以200mmol/L剂量组的活细胞率最低。经单因素方差分析,空白对照组和各剂量组间早期凋亡细胞占细胞总数的百分率差异有统计学意义(F=8.299,P<0.01),随染毒剂量增高,早期凋亡细胞率增加。结论一定浓度的DMF能诱导正常成人离体肝细胞发生凋亡,其早期凋亡率有随DMF浓度的增高而增高的趋势。 展开更多
关键词 DMF染毒 肝细胞 凋亡 ao/eb染色 流式细胞术
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AO/EB双重荧光染色检测细胞凋亡的研究 被引量:5
4
作者 熊琛 陈绪云 +1 位作者 郭怀兰 杨靖 《郧阳医学院学报》 1997年第2期68-69,共2页
目的:检测细胞培养中凋亡细胞的形态及数量。方法:取4℃环境下不同时间培养的小鼠胸腺细胞,用AO/EB染色后荧光镜观察。结果:荧光镜下早期凋亡细胞发绿色或暗绿色荧光,伴有核结构的变化,晚期凋亡细胞发橙红色荧光并伴有凋亡... 目的:检测细胞培养中凋亡细胞的形态及数量。方法:取4℃环境下不同时间培养的小鼠胸腺细胞,用AO/EB染色后荧光镜观察。结果:荧光镜下早期凋亡细胞发绿色或暗绿色荧光,伴有核结构的变化,晚期凋亡细胞发橙红色荧光并伴有凋亡小体的形成。结论:AO和EB双重荧光染色后,荧光镜检在细胞凋亡检测中既可定性,又可定量。 展开更多
关键词 荧光染色 细胞凋亡 双重荧光染色
全文增补中
全脑缺血再灌注后神经元凋亡的时相和分布特征 被引量:9
5
作者 陈力学 姜利人 +2 位作者 刘宝松 陈恒胜 康格非 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期531-534,共4页
目的 探讨大鼠全脑缺血再灌注后神经元凋亡的时相和分布特征,为神经元损伤的早期干预和继发性脑损害的防治提供实验依据。方法 建立大鼠全脑缺血模型,采用TTC染色、原位细胞凋亡检测(原位末端标记法,TUNEL)及AO/EB荧光比色法观察... 目的 探讨大鼠全脑缺血再灌注后神经元凋亡的时相和分布特征,为神经元损伤的早期干预和继发性脑损害的防治提供实验依据。方法 建立大鼠全脑缺血模型,采用TTC染色、原位细胞凋亡检测(原位末端标记法,TUNEL)及AO/EB荧光比色法观察脑缺血再灌后海马、皮层凋亡发生的数量和分布,用荧光指示剂Fura-2 AM标记,检测脑海马细胞内游离钙的浓度。结果 TUNEL显示再灌注3h海马部位即出现散在凋亡细胞,并向皮层区域扩展,24—48h达高峰;坏死细胞迟于凋亡出现,弥散分布于凋亡细胞周围,再灌注48h后坏死细胞增多,72h最多。AO/EB法显示海马、额叶和顶叶凋亡细胞总数分布在再灌注后24h和72h达高峰,并显著高于对照组(P〈0.05)。TTC染色证实全脑缺血再灌注后不出现梗死灶,而是在海马及大脑皮层有弥散性坏死。胞内[Ca^2+];各时间点与对照相比匀显著升高(P〈0.01)。结论 全脑缺血再灌后受累神经元经历了由凋亡到死亡的过程,对缺血敏感的海马神经元首先受损,并向顶叶和额叶皮层扩展,细胞质内[Ca^2+]i增加是主要原因。利用凋亡时间窗进行早期干预可能有益于保护和挽救凋亡前期神经元,减小继发性损害的严重程度。 展开更多
关键词 脑缺血 细胞凋亡 ao/eb TUNEL TTC 神经元 海马
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去甲斑蝥素通过JAK-STAT3途径诱导结肠癌LS-174T细胞凋亡 被引量:12
6
作者 张国建 李猛 +3 位作者 王天阳 石铖 王晨宇 闫庆辉 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期16-21,共6页
目的探讨去甲斑蝥素(NCTD)诱导结肠癌LS-174T细胞的凋亡效应及其可能分子机制。方法应用MTT法检测NCTD对细胞生长的抑制作用,通过AO/EB染色、透射电子显微镜观察细胞形态及超微结构的变化,AnnexinV/PI染色检测细胞凋亡率,Western blot检... 目的探讨去甲斑蝥素(NCTD)诱导结肠癌LS-174T细胞的凋亡效应及其可能分子机制。方法应用MTT法检测NCTD对细胞生长的抑制作用,通过AO/EB染色、透射电子显微镜观察细胞形态及超微结构的变化,AnnexinV/PI染色检测细胞凋亡率,Western blot检测stat3、survivin、Mcl-1、bax蛋白的表达情况。结果去甲斑蝥素对结肠癌LS-174T细胞具有显著的生长抑制作用,并呈时间—剂量依赖性;40μg/ml作用72 h时达到最大抑制率(72.4±3.1)%;AO/EB染色及流式细胞术显示,随着NCTD浓度的增加,细胞凋亡率明显增加;透射电子显微镜观察发现,结肠癌LS-174T细胞出现明显凋亡超微结构变化;Western blot结果显示,stat3、survivin、Mcl-1表达明显下降,bax表达明显上升。结论去甲斑蝥素可以抑制结肠癌LS-174T细胞的生长并促进其凋亡,机制可能是通过抑制stat3途径实现的。 展开更多
关键词 去甲斑蝥素 ao/eb AnnexinV/PI:Survivin STAT3
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牛黄天龙胶囊(含药血清)诱导人子宫内膜癌HEC-B细胞凋亡及其机制 被引量:4
7
作者 田彦玲 王玉花 +1 位作者 程建新 刘京生 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期417-421,475,共6页
目的观察牛黄天龙胶囊(含药血清)对人子宫内膜癌HEC-B细胞能否诱导凋亡并对其抗癌机制进行探讨。方法实验组分低、中、高3个剂量组并设空白组和阳性对照组进行含药血清的制备;MTT法观察细胞毒作用;细胞排染法观察瘤细胞直接损害实验;吖... 目的观察牛黄天龙胶囊(含药血清)对人子宫内膜癌HEC-B细胞能否诱导凋亡并对其抗癌机制进行探讨。方法实验组分低、中、高3个剂量组并设空白组和阳性对照组进行含药血清的制备;MTT法观察细胞毒作用;细胞排染法观察瘤细胞直接损害实验;吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双荧光染色法及电镜(TEM)下观察细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术(FCM)测定细胞凋亡率并进行细胞周期分析,测定凋亡抑制蛋白survivin和凋亡效应蛋白Caspase-3的表达。结果MTT法:人子宫内膜癌HEC-B细胞经含药血清作用后细胞生长受到明显抑制且以低剂量组抑制率最高。细胞排染法:同一时间段内以低剂量组效果最好,不同时间段内(24、48h)细胞抑制率显著提高(P<0.01)。AO/EB和TEM:实验组均可见到典型细胞凋亡的形态学变化。FCM:实验组各组细胞凋亡率与空白组相比差异有显著性(P<0.01)且以低剂量组最高,细胞周期分析显示实验组G0/G1期细胞明显增多而S期细胞明显减少与空白组相比差异有显著性(P<0.01),Survivin蛋白表达在空白组最高,在实验组表达降低与空白组相比差异有显著性(P<0.01),Caspase-3表达则相反,在实验组表达最高与空白组相比差异有显著性(P<0.01)。结论复方中药“牛黄天龙胶囊”(含药血清)能够使人子宫内膜癌HEC-B细胞生长阻滞在G0/G1期并可诱导人子宫内膜癌HEC-B细胞凋亡;并可降低凋亡抑制蛋白survivin表达同时可提高凋亡效应蛋白Caspase-3表达,这可能是其诱导人子宫内膜癌HEC-B细胞凋亡的机制之一;对人子宫内膜癌HEC-B细胞的抗肿瘤作用并非浓度越大效果越好而有一最适剂量。 展开更多
关键词 血清药理学 细胞凋亡 ao/eb双荧光染色法 TEM FCM
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HMC毒素诱导玉米同核C、N细胞质细胞凋亡的荧光显微观察 被引量:12
8
作者 马春红 李秀丽 +6 位作者 董文琦 张红心 李运朝 崔四平 王立安 贾银锁 戴志刚 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1823-1829,共7页
【目的】研究玉米小斑病菌C小种毒素(HMC-toxin)诱导同核异质体玉米的离体根冠细胞发生凋亡的差异性及凋亡规律。【方法】采用吖啶橙(AO)与溴化乙啶(EB)荧光复染以及Hoechst 33258荧光染色的方法检测。【结果】HMC毒素诱导根冠细胞发生... 【目的】研究玉米小斑病菌C小种毒素(HMC-toxin)诱导同核异质体玉米的离体根冠细胞发生凋亡的差异性及凋亡规律。【方法】采用吖啶橙(AO)与溴化乙啶(EB)荧光复染以及Hoechst 33258荧光染色的方法检测。【结果】HMC毒素诱导根冠细胞发生凋亡,出现凋亡小体与染色体边集形态特征。在3种毒素浓度、3种处理时间下,Mo17-C的根冠细胞死亡率均高于Mo17-N。采用AO与EB复染方法,在150μg.mL-1HMC毒素处理7 h时,Mo17-C细胞凋亡率达最高值,为68.7%,而Mo17-N仅为29%;经Hoechst 33258染色后,在150μg.mL-1HMC毒素处理下,Mo17-C也于7 h时达最大凋亡率,为57.3%,而Mo17-N为27.7%。【结论】在毒素"伤害"细胞致死过程中,C细胞质的细胞死亡率远高于N细胞质;在"诱导"细胞凋亡程序中,C细胞质的细胞凋亡率也远高于N细胞质的。凋亡率随诱导浓度和诱导时间的增加而增加。AO、EB复染与Hoechst 33258染色相比,两者细胞凋亡率接近,准确度均高,图像清晰,且费用相当,但前者可以区分早期和晚期凋亡细胞而后者不能区分。 展开更多
关键词 玉米小斑病菌C小种 毒素 细胞凋亡 Hoechst 33258 吖啶橙 溴化乙啶
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中药“龙泉复方”的不同配伍对肿瘤细胞系HepG-2和EC-1增殖的影响 被引量:2
9
作者 李劲 邓志芳 +6 位作者 高雯琪 胡文娟 刘莹 姚品芳 李广灿 陈焕朝 梅之南 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2011年第1期46-49,共4页
通过MTT(四甲基偶氮唑盐)法绘制细胞增殖曲线观察药物对肝癌细胞系HepG-2和食管鳞癌细胞系EC-1细胞增殖的影响,用荧光染色法进一步确定"龙泉复方"有效成分诱导细胞凋亡的较佳配伍及其有效作用浓度范围.结果表明:对抑制HepG-2细胞... 通过MTT(四甲基偶氮唑盐)法绘制细胞增殖曲线观察药物对肝癌细胞系HepG-2和食管鳞癌细胞系EC-1细胞增殖的影响,用荧光染色法进一步确定"龙泉复方"有效成分诱导细胞凋亡的较佳配伍及其有效作用浓度范围.结果表明:对抑制HepG-2细胞增殖有效作用的浓度:七味单方(马钱子、山慈菇、喜树果、龙葵、石上柏、青黛、紫菀)浸膏混合物和龙葵单方浸膏均〈125μg/mL,七味药物复方总浸膏为250~1000μg/mL;对抑制EC-1细胞增殖有效作用的浓度:三味药物混合浸膏(马钱子,喜树果、青黛提取的浸膏的混合物)〈50μg/mL和150~400μg/mL,七味单方混合浸膏〈25μg/mL和50~400μg/mL,喜树果单方浸膏为25μg/mL和50~200μg/mL;3种浸膏促进EC-1细胞增殖的浓度依次为:50~100、25~50、25~50μg/mL.通过对EC-1荧光染色观察发现诱导细胞凋亡的有效作用浓度:七位单方浸膏混合物为5~10μg/mL,三味药复方混合浸膏为10~25μg/mL,喜树果约为50μg/mL.研究结果提示,药物浓度范围和细胞系的不同导致其效果也不尽相同,临床应据具体情况调整,使之用药少效果佳. 展开更多
关键词 龙泉复方 配伍 药物浓度 肿瘤细胞 MTT(四甲基偶氮唑盐)法 ao/eb染色法
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香烟烟雾对大鼠精子核DNA成熟度和精子膜功能的影响 被引量:11
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作者 安瑞华 张诚 +3 位作者 高光强 祁尤成 崔美芝 赵瑞波 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期252-254,共3页
目的 :探讨吸烟对精子核DNA成熟度和精子膜功能的影响。 方法 :自制吸烟机将大鼠制成被动吸烟模型 ,取其精子应用精子核吖啶橙荧光染色法和精子低渗肿胀试验 ,观察吸烟大鼠精子核DNA成熟度和精子膜功能。结果 :大鼠被动吸烟 8周后其双... 目的 :探讨吸烟对精子核DNA成熟度和精子膜功能的影响。 方法 :自制吸烟机将大鼠制成被动吸烟模型 ,取其精子应用精子核吖啶橙荧光染色法和精子低渗肿胀试验 ,观察吸烟大鼠精子核DNA成熟度和精子膜功能。结果 :大鼠被动吸烟 8周后其双链DNA精子百分率为 (5 2 0± 5 6 ) % ,明显低于相应的对照组 [(6 8 5± 3 3) % ](P <0 0 1) ;精子低渗肿胀率 [(2 0 7± 4 3) % ]也较正常对照组 [(5 2 5± 3 8) % ],明显降低 (P <0 0 1)。 结论 :吸烟可致大鼠精子核DNA成熟度降低并使大鼠精子膜更脆弱 ,降低大鼠精子受精能力。 展开更多
关键词 吸烟 低渗肿胀试验 吖啶橙 精子
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镉对体外培养成骨细胞增殖、凋亡、分化及矿化的影响 被引量:5
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作者 陈晓 朱国英 +1 位作者 王莉华 金泰廙 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期513-517,共5页
目的探讨镉对体外培养成骨细胞(osteoblast,OB)增殖、凋亡、分化及矿化的影响。方法用混合酶消化法分离大鼠颅盖骨成骨细胞,进行原代培养;成骨细胞与不同浓度的Cd2+作用后,MTT法测定细胞增殖;AO/EB双染法进行凋亡形态学观察;PNPP法检测... 目的探讨镉对体外培养成骨细胞(osteoblast,OB)增殖、凋亡、分化及矿化的影响。方法用混合酶消化法分离大鼠颅盖骨成骨细胞,进行原代培养;成骨细胞与不同浓度的Cd2+作用后,MTT法测定细胞增殖;AO/EB双染法进行凋亡形态学观察;PNPP法检测碱性磷酸酶活性;矿化结节计数和面积测量分析镉对成骨细胞矿化能力的影响。结果各剂量组氯化镉均可抑制成骨细胞增殖,其中2.0μmol/L以上剂量组与对照组相比差异有统计学显著意义(P<0.01);16.0μmol/L、32.0μmol/L剂量组OB可见较多凋亡细胞;各时点、各剂量组氯化镉均能抑制ALP活性,尤其是48h以上影响作用更明显(P<0.01);0.5μmol/L、1.0μmol/L浓度的氯化镉可明显抑制成骨细胞矿化能力。结论镉离子可以抑制成骨细胞增殖、分化及矿化能力,促进成骨细胞凋亡,对成骨细胞的骨形成能力有明显抑制作用。 展开更多
关键词 氯化镉 成骨细胞 碱性磷酸酶 细胞凋亡 ao/eb 矿化
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3种常见核酸染料的安全性和灵敏度研究 被引量:5
12
作者 赵炜 方炳雄 +3 位作者 牛宇杰 赵彤 何金勇 刘新光 《国际检验医学杂志》 CAS 2013年第22期2954-2955,2958,共3页
目的探讨Gold View、溴化乙锭(EB)、SYBR GreenⅠ3种实验室常用核酸染料的安全性与灵敏度,筛选出具有较高安全性和灵敏度的核酸染料。方法采用正常人胚肾细胞为研究对象,对比研究Gold View、EB、SYBR GreenⅠ对细胞增殖和细胞周期的影响... 目的探讨Gold View、溴化乙锭(EB)、SYBR GreenⅠ3种实验室常用核酸染料的安全性与灵敏度,筛选出具有较高安全性和灵敏度的核酸染料。方法采用正常人胚肾细胞为研究对象,对比研究Gold View、EB、SYBR GreenⅠ对细胞增殖和细胞周期的影响;分别使用3种核酸染料对凝胶中的DNA进行染色,比较其灵敏度。结果 SYBR GreenⅠ对HEK-293细胞的周期与增殖影响最小,Gold View的影响最大。SYBR GreenⅠ和Gold View对DNA染色的灵敏度相当,略低于EB。结论 SYBR GreenⅠ具有较高安全性和较高的灵敏度。 展开更多
关键词 核酸染料 GOLD VIEW 溴化乙锭 SYBRGreen 安全性 灵敏度
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南蛇藤提取物体外抑瘤作用研究 被引量:16
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作者 张舰 许运明 刘延庆 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期99-101,共3页
目的:探讨南蛇藤提取物体外抗肿瘤作用及诱导细胞凋亡作用。方法:MTT法对南蛇藤提取物的分离成分进行初步筛选,在此基础上用吖啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)双重荧光染色法观察南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导SGC-7901细胞凋亡作用。结果:南蛇藤乙酸... 目的:探讨南蛇藤提取物体外抗肿瘤作用及诱导细胞凋亡作用。方法:MTT法对南蛇藤提取物的分离成分进行初步筛选,在此基础上用吖啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)双重荧光染色法观察南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导SGC-7901细胞凋亡作用。结果:南蛇藤乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物有较强的抗肿瘤作用。南蛇藤乙酸乙酯提取物40 mg/L对SGC-7901细胞有明显诱导凋亡作用。 展开更多
关键词 南蛇藤 MTT ao/eb双重荧光染色 凋亡
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解脲脲原体感染与精子DNA完整性的相关性的研究 被引量:8
14
作者 蒋超 黄祝 +5 位作者 魏杰 徐会茹 王晨阳 侯林 姚兵 黄宇烽 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期727-731,共5页
目的:探讨不育男性解脲脲原体(Uu)感染与精子核DNA完整性及精液各参数的相关性。方法:95例不育症患者的精液用Uu培养液进行解脲脲原体的培养,按WHO的标准,用计算机辅助精液分析系统(CASA)进行精液各参数的分析,然后通过精子低渗肿胀实验... 目的:探讨不育男性解脲脲原体(Uu)感染与精子核DNA完整性及精液各参数的相关性。方法:95例不育症患者的精液用Uu培养液进行解脲脲原体的培养,按WHO的标准,用计算机辅助精液分析系统(CASA)进行精液各参数的分析,然后通过精子低渗肿胀实验,吖啶橙(AO)荧光染色检测精子膜的完整性和精子核DNA的完整性。结果:Uu阳性40例,Uu阴性55例,Uu阳性组与阴性组比较,精子核DNA完整性与精子的密度、a+b级精子百分率以及精子的肿胀率都有显著性差异(P<0.01,P<0.05)。同时Uu阳性组与阴性组的精子核DNA完整性与精子的肿胀率存在显著的正相关性(r=0.438,P=0.014;r=0.438,P=0.01)。结论:Uu感染能够降低精子膜的完整性以及精子核DNA的完整性,这可能是Uu致男性不育的又一因素。 展开更多
关键词 解脲脲原体(Uu) 精子低渗肿胀 精子核DNA 吖啶橙(ao)
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姜黄素对人白血病K562细胞凋亡的影响 被引量:10
15
作者 许建华 赵蓉 +2 位作者 柯丹如 黄自强 陈元仲 《中药药理与临床》 CAS CSCD 1998年第6期19-22,共4页
K562细胞对多种化疗药物诱导凋亡具有抗性,本文以AO/EB染色法、细胞分光光度术、DNA凝胶电泳及电镜观察等方法,发现姜黄素可显著诱导K562细胞凋亡,提示该药对治疗慢性粒细胞性白血病可能有价值。
关键词 姜黄素 人白血病K562细胞 细胞凋亡 白血病 DNA凝胶电泳 电镜观察 ao/eb染色法 细胞分光光度术
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植物甾醇抑制SGC-7901胃癌细胞生长和诱导DNA损伤的研究 被引量:2
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作者 曲刚 李天文 +1 位作者 崔洪斌 赵永焕 《黑龙江八一农垦大学学报》 2008年第1期66-70,共5页
为确定和评价植物甾醇对胃癌细胞SGC-7901生长的影响,采用MTT法检测植物甾醇对SGC-7901细胞生长的抑制作用,AO/EB和DAPI染色观察细胞形态的变化,单细胞凝胶电泳检测植物甾醇对SGC-7901细胞DNA的损伤。试验结果表明,植物甾醇对SGC-7901... 为确定和评价植物甾醇对胃癌细胞SGC-7901生长的影响,采用MTT法检测植物甾醇对SGC-7901细胞生长的抑制作用,AO/EB和DAPI染色观察细胞形态的变化,单细胞凝胶电泳检测植物甾醇对SGC-7901细胞DNA的损伤。试验结果表明,植物甾醇对SGC-7901细胞生长具有抑制作用,并呈现时间-效应关系,不呈现剂量-效应关系;植物甾醇处理5d后,细胞出现皱缩、密度变小等变化;AO/EB荧光染色后,细胞核成固缩状,出现凋亡小体等凋亡细胞形态;DAPI染色后,可见细胞核边缘不整等凋亡细胞形态;单细胞凝胶电泳实验结果表明,植物甾醇混合物处理5d的细胞出现了彗星现象。植物甾醇对SGC-7901细胞生长具有抑制作用,诱导SGC-7901细胞DNA的损伤。 展开更多
关键词 植物甾醇 MTT实验ao/eb染色 DAPI染色 单细胞凝胶电泳
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蟾酥注射液诱导人膀胱癌细胞T24、BIU-87凋亡的研究 被引量:1
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作者 吴江平 张展东 +2 位作者 江沂 苏宁 杨振淮 《国际医药卫生导报》 2014年第6期743-746,共4页
目的验证蟾酥注射液的抗癌活性。方法将T24细胞、BIU-87细胞分别接种于RPMI1640培养液中37℃孵育,并在多个时间点取细胞悬液加入AO/EB染料染色,在荧光显微镜下观察。结果在0、3、6、12、24和48h时,T24细胞的凋亡率分别为3.0%、12... 目的验证蟾酥注射液的抗癌活性。方法将T24细胞、BIU-87细胞分别接种于RPMI1640培养液中37℃孵育,并在多个时间点取细胞悬液加入AO/EB染料染色,在荧光显微镜下观察。结果在0、3、6、12、24和48h时,T24细胞的凋亡率分别为3.0%、12.5%、59.5%、66,5%、70.O%和63.5%,BIU-87细胞的凋亡率分别为2.0%、13.5%、55.5%、62.5%、68.5%和64.0%。结论蟾酥注射液可显著诱导T24细胞、BIU-87细胞凋广,在体外具有抗癌活性。 展开更多
关键词 ao eb双荧光染色法 蟾酥注射液 细胞凋亡
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连花清瘟胶囊对乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制与诱导凋亡作用的观察 被引量:1
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作者 文翔昊 李冲 +2 位作者 郭露 鲁启明 郭玉 《海峡药学》 2014年第12期235-238,共4页
目的:研究连花清瘟胶囊抗肿瘤的药理作用。方法应用MTT法检测连花清瘟胶囊对乳腺癌 MCF-7细胞增殖的抑制程度,AO/EB双荧光染色法检测细胞凋亡形态,DNA琼脂糖凝胶电泳观察细胞 DNA 片段。结果在浓度为200~2667μg· mL -1内... 目的:研究连花清瘟胶囊抗肿瘤的药理作用。方法应用MTT法检测连花清瘟胶囊对乳腺癌 MCF-7细胞增殖的抑制程度,AO/EB双荧光染色法检测细胞凋亡形态,DNA琼脂糖凝胶电泳观察细胞 DNA 片段。结果在浓度为200~2667μg· mL -1内,连花清瘟胶囊对乳腺癌MCF-7细胞的增殖有显著的抑制作用,其抑制作用随药物浓度的增加而增强,对MCF-7细胞增殖抑制率由10.50%增加到43.83%,与对照组比较呈显著差异性(P<0.05vs正常组)。连花清瘟胶囊明显影响乳腺癌MCF-7细胞的染色质,发生固缩等凋亡形态的变化及细胞凋亡的 DNA梯带形状。结论连花清瘟胶囊具有抑制乳腺癌细胞增殖和诱导其凋亡的抗肿瘤的药理作用。 展开更多
关键词 连花清瘟胶囊 乳腺癌MCF-7细胞 MTT法 ao/eb双荧光染色法 DNA琼脂糖凝胶电泳
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基于HPCPC白首乌C21甾体苷诱导PC-3细胞凋亡研究 被引量:7
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作者 郑威 林红梅 张如松 《中国医药导报》 CAS 2012年第11期22-23,27,共3页
目的从白首乌块根中提取纯化C21甾体苷类化合物,并研究其诱导PC-3肿瘤细胞凋亡作用。方法运用高效离心分配色谱,从白首乌总苷中分离纯化C21甾体苷,并利用FCM检测对PC-3细胞周期和凋亡的影响,利用AO荧光染色观察凋亡细胞形态学。结果提... 目的从白首乌块根中提取纯化C21甾体苷类化合物,并研究其诱导PC-3肿瘤细胞凋亡作用。方法运用高效离心分配色谱,从白首乌总苷中分离纯化C21甾体苷,并利用FCM检测对PC-3细胞周期和凋亡的影响,利用AO荧光染色观察凋亡细胞形态学。结果提取物对PC-3细胞的诱导凋亡作用具有量-效关系,且可以浓度依赖性的提高细胞G2/M期比例;AO染色荧光显微镜观察,提取物可诱发明显的核断裂和核固缩,以及凋亡小体的形成。结论运用高效离心分配色谱分离纯化白首乌中的C21甾体苷,提取物能诱导PC-3肿瘤细胞凋亡,发生G2/M期阻滞,这可能是它抗肿瘤作用机制之一。 展开更多
关键词 白首乌 C21甾体苷 高效离心分配色谱 凋亡 FCM ao荧光染色
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体外扩增CIK细胞对结肠癌SW480细胞株杀伤作用的研究 被引量:2
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作者 池小钜 刘汉锋 蓝东 《广西医科大学学报》 CAS 2014年第3期372-377,共6页
目的:观察细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)体外增值情况,了解其扩增后杀伤结肠癌SW480细胞株最佳比例及最有效的维持时间.方法:分离健康人外周血单个核细胞在体外诱导制备成CIK细胞,计数不同培养时间的CIK细胞,采用流式细胞仪检测... 目的:观察细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)体外增值情况,了解其扩增后杀伤结肠癌SW480细胞株最佳比例及最有效的维持时间.方法:分离健康人外周血单个核细胞在体外诱导制备成CIK细胞,计数不同培养时间的CIK细胞,采用流式细胞仪检测其表型特征.倒置显微镜下观察CIK细胞作用与SW480结肠癌细胞的形态学变化,采用HE染色、AO/EO荧光染色和MTT法检测CIK细胞对SW480结肠癌细胞株的杀伤活性.结果:CIK细胞在体外培养14 d细胞增殖倍数为(100.22±8.68)倍,培养21 d细胞增殖倍数为(300.86±10.13)倍,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);培养28 d细胞增殖倍数为(305.06±5.13)倍,与培养21 d的细胞增殖倍数比较差异无统计学意义(P>0.05).培养21 d的CIK细胞中CD3+、CD56+双阳性细胞的百分比为(45.3±5.1)%,与28 d相比较差异无统计学意义(P>0.05),第35天细胞增殖(212.50±4.25)倍,呈下降趋势.CIK细胞对结肠癌SW480细胞株有明显的杀伤作用,最高杀伤率为(68.21±1.31)%.结论:CIK细胞具有较强的抗结肠癌细胞活性,体外培养14~21 d具有较强的抗瘤活性,此时应用较为合适.CIK细胞作用于肿瘤细胞应达到一定数量并维持一定时间,可达到较好的抗瘤活性. 展开更多
关键词 CIK细胞 结肠癌SW480 HE染色 ao EO荧光染色 MTT法检测
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