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基于AO/PI荧光染色原理的杀伤细胞数量及活率检测方法学验证和细胞培养、冻存、复苏稳定性研究
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作者 储王龙 朱丽萍 +5 位作者 张芬 钟振忠 柯晖 梁晓 曾秀萍 刘沐芸 《药物评价研究》 CAS 2023年第2期377-383,共7页
目的验证基于吖啶橙(AO)/碘化丙啶(PI)荧光染色原理的自动细胞分析仪检测细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)数量及活率的可行性,并对CIK细胞培养全过程及冻存复苏后至使用前过程进行检测,建立相应的数量及活率标准。方法采集健康供者的外周... 目的验证基于吖啶橙(AO)/碘化丙啶(PI)荧光染色原理的自动细胞分析仪检测细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)数量及活率的可行性,并对CIK细胞培养全过程及冻存复苏后至使用前过程进行检测,建立相应的数量及活率标准。方法采集健康供者的外周血分离、培养CIK细胞,取培养过程中的细胞使用AO/PI荧光染色法、应用自动细胞分析仪检测细胞数量及活率,对结果的专属性、准确度、精密度、数量线性及范围、活率线性及范围进行验证。应用建立的方法对外周血分离后的外周血单个核细胞(PBMC)、培养过程中、冻存前及复苏后的CIK细胞数量及活率进行全过程检测。结果专属性、准确度、精密度、数量线性及范围、活率线性及范围验证均符合预期要求。CIK细胞培养全过程活率均不低于80%,样本平均倍增时间为(42.26±1.17)h。冻存前的CIK细胞在加入含5%DMSO的冷冻保护剂后90 min内活率稳定,复苏后未经稀释或洗涤处理120 min内活率稳定,复苏后经洗涤去除DMSO处理后12 h内活率稳定。结论基于AO/PI荧光染色原理的自动细胞分析仪可以用于检测CIK细胞的数量及活率,其结果可以用于细胞放行评价及稳定性研究。 展开更多
关键词 细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK) ao/pi荧光 自动细胞分析仪 细胞数量 活率 验证 稳定性
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AO/PI荧光染色法快速检测啤酒酵母细胞死亡率
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作者 连畅 贺秀丽 +1 位作者 倪健宇 郭立芸 《中外酒业》 2023年第15期14-25,共12页
(AO/PI)双重荧光染色多用于医学、药理学、病毒学等专业领域,用于检测细胞活性及形态变化。该研究采用吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI)荧光染色原理建立酵母死亡率的快速检测方法,并进行准确性及精密度验证。结果表明:基于AO/PI荧光染色原理的... (AO/PI)双重荧光染色多用于医学、药理学、病毒学等专业领域,用于检测细胞活性及形态变化。该研究采用吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI)荧光染色原理建立酵母死亡率的快速检测方法,并进行准确性及精密度验证。结果表明:基于AO/PI荧光染色原理的自动计数仪法,在酵母死亡率检测准确性方面与理论死亡率R²为0.9885,具有良好的线性关系;同时标准差为0.122,相对偏差为2.50%,检测结果的精密度优于显微镜计数法;检测时间较传统方法节约了60%以上,效率大大提高。 展开更多
关键词 酵母死亡率 显微镜计数法 ao/pi荧光染色 自动计数仪
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Correlation Analysis of the Results of Double Fluorescence(AO/PI) Staining and Clinical Outcomes 被引量:2
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作者 Yu-bao WANG Lei-wen ZHAO +3 位作者 Zu-qiong XIANG Xiu-zhuang ZHOU You-lun GUI Chang-hai HE 《Journal of Reproduction and Contraception》 CAS 2012年第2期111-118,共8页
Objective To estimate the predictive value of double fluorescence [acridine orange (AO)/propidium iodide (PI)] staining results for fertilization rate and clinical outcomes and analyze the correlation between th... Objective To estimate the predictive value of double fluorescence [acridine orange (AO)/propidium iodide (PI)] staining results for fertilization rate and clinical outcomes and analyze the correlation between the results of AO/P1 staining and sperm apoptosis. Methods A prospective study was carried out, 235 infertile couples remedied using traditional in vitro fertilization (IVF) were included. Semen collected from 235 patients were stained by fluorescence dye, AO and PL at the same time the spermatozoa apoptosis rate was calculated by using flow cytometry to detect the rate of Annexin V+/ PI- . The result of fluorescence was divided into 3 groups as green (G), yellow (Y) and red (R) according to the color of fluorescence. The correlation between the percent of the 3 colors and clinical outcomes and spermatozoa apoptosis rate was evaluated. Results Significant negative correlation was observed between the percentage of Y and fertilization rate (r= -0.42, P=0.04), no significant correlation was observed between the percentage of G, R and fertilization rate. The percentage of G, Y, R was not significantly different between pregnant patients and non-pregnant patients, respectiw,ly, while the percentage of Y was significant different between miscarriage patients and liveborn patients (r=0.6L P=0.01) and no significant difference exist in the percentage of G and R between liveborn patients and miscarriage patients. There was a significant positive correlation between the percentage of Y and the rate of Annexin V+/ PI (r=0.53, P=0.04), and no significant correlation was shown between the percentage of G, R and the rate of Annexin V+/ PI-.Conclusion The percentage of yellow group of double fluorescence (AO/PI) staining will affect the fertilization rate and the miscarriage rate, and this group of spermatozoa may be connected with the spermatozoa apoptosis. 展开更多
关键词 acridine orange ao propidium iodide pi SPERMATOZOA in vitro fertilization (1VF)
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三拗片联合强力枇杷露对感染后咳嗽的疗效与安全性
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作者 徐荣荣 何婷 +2 位作者 叶丽静 丁娅 尹章勇 《中国药物与临床》 CAS 2024年第18期1214-1218,共5页
目的探究三拗片联合强力枇杷露对感染后咳嗽的疗效与安全性。方法回顾性分析2022年1月至2023年12月浙江省丽水市人民医院收治的80例感染后咳嗽患者的临床资料。根据患者接受的不同治疗方案进行分组,将感染后咳嗽常规治疗的患者纳入常规... 目的探究三拗片联合强力枇杷露对感染后咳嗽的疗效与安全性。方法回顾性分析2022年1月至2023年12月浙江省丽水市人民医院收治的80例感染后咳嗽患者的临床资料。根据患者接受的不同治疗方案进行分组,将感染后咳嗽常规治疗的患者纳入常规组(37例),将三拗片联合强力枇杷露治疗的患者纳入联合组(43例),2组的治疗周期均为14 d。对比2组的治疗有效率,中医证候积分(咳嗽、气喘、咳痰、肺部音),日间、夜间咳嗽评分,免疫功能[免疫球蛋白(Ig)A、IgG、IgM];炎症水平[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-8];药物不良反应(头晕、嗜睡、恶心呕吐)。结果联合组患者的治疗有效率为93%高于常规组76%(P<0.05);联合组患者的中医证候积分[咳嗽(1.24±0.35)分、气喘(1.17±0.29)分、咳痰(1.01±0.41)分、肺部音(1.33±0.45)分]低于常规组[咳嗽(1.85±0.42)分、气喘(1.74±0.37)分、咳痰(1.76±0.37)分、肺部音(1.69±0.32)分](P<0.05);联合组患者的日间咳嗽评分和夜间咳嗽评分[(0.78±0.21)分和(0.76±0.24)分]均低于常规组[(0.97±0.23)分和(0.91±0.22)分](P<0.05);联合组患者的IgA、IgG、IgM[(1.63±0.24)g/L、(9.65±1.33)g/L、(1.21±0.37)g/L]均高于常规组[(1.27±0.21)g/L、(7.32±1.68)g/L、(0.88±0.25)g/L](P<0.05);联合组患者的TNF-α、IL-6、IL-8水平[(12.6±1.2)pg/ml、(162±8)pg/ml、(9.5±2.8)pg/ml]均低于常规组[(15.4±1.2)pg/ml、(176±10)pg/ml、(11.6±2.6)pg/ml](P<0.05);联合组不良反应发生率为5%低于常规组的22%(P<0.05)。结论三拗片联合强力枇杷露对感染后咳嗽患者的疗效显著,可有效改善患者的咳嗽症状,提高免疫功能,降低炎症反应,且安全性高。 展开更多
关键词 咳嗽 三拗片 强力枇杷露 治疗结果
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茶多酚对Hep-G2细胞活性及形态的影响 被引量:2
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作者 孙警辉 伍春莲 +2 位作者 陈杨琼 耿文峰 张思楠 《西华师范大学学报(自然科学版)》 2011年第2期146-150,共5页
大量研究表明,长期饮茶尤其绿茶者,可大大降低各种癌变的发病率,而且对多种体内外肿瘤具有直接杀伤作用.作者通过采用不同浓度的茶多酚作用于体外培养的肝癌细胞株Hep-G2细胞,初步探讨茶多酚对Hep-G2细胞的凋亡作用.采用MTT法(噻唑蓝比... 大量研究表明,长期饮茶尤其绿茶者,可大大降低各种癌变的发病率,而且对多种体内外肿瘤具有直接杀伤作用.作者通过采用不同浓度的茶多酚作用于体外培养的肝癌细胞株Hep-G2细胞,初步探讨茶多酚对Hep-G2细胞的凋亡作用.采用MTT法(噻唑蓝比色法)和AO-PI(吖啶橙-碘化丙啶)双重荧光染色法研究了茶多酚诱导Hep-G2细胞株的凋亡作用.MTT法研究结果表明,在一定的浓度范围内,茶多酚对Hep-G2细胞有明显的抑制作用,且存在良好的剂量效应关系,随着茶多酚浓度的升高,其对Hep-G2细胞的抑制率也升高.Hep-G2细胞经茶多酚作用后,细胞形态发生明显的变化,可见凋亡小体,荧光强度增强,细胞呈现凋亡现象.茶多酚在体外对Hep-G2细胞的增殖具有抑制作用,诱导其发生凋亡.研究结果为茶多酚的进一步开发应用奠定理论基础. 展开更多
关键词 茶多酚 MTT ao/pi Hep-G2细胞 细胞凋亡
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内皮素受体拮抗剂抑制异丙肾上腺素诱导大鼠心肌细胞搏动加速及凋亡
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作者 张媛 纳涛 +4 位作者 黄志江 戴德哉 饶瑜兰 吉民 戴茵 《中国药事》 CAS 2007年第11期874-877,共4页
观察内皮素受体拮抗剂CPU0213能否阻断异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)所致大鼠心肌细胞搏动加速及凋亡。分离大鼠心肌细胞。给ISO(10-7M)的同时给CPU0213(10-7、10-6、10-5M),并以普萘洛尔(10-6M)作为阳性药对照,观察各组心肌细胞的搏... 观察内皮素受体拮抗剂CPU0213能否阻断异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)所致大鼠心肌细胞搏动加速及凋亡。分离大鼠心肌细胞。给ISO(10-7M)的同时给CPU0213(10-7、10-6、10-5M),并以普萘洛尔(10-6M)作为阳性药对照,观察各组心肌细胞的搏动次数。采用吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI)染色法检测成年大鼠心肌细胞凋亡率的变化。普萘洛尔明显抑制ISO效应(P<0.001)。内皮素受体拮抗剂CPU0213明显抑制ISO所致的心肌细胞搏动和细胞凋亡,且呈浓度依赖性。大剂量CPU0213对ISO生物效应的阻断作用(P<0.001)与普萘洛尔相仿。内皮素受体拮抗剂CPU0213阻断ISO所致的心肌细胞搏动加速和增加细胞凋亡率等生物学效应,提示内皮素介导β-受体效应。 展开更多
关键词 异丙肾上腺素 CPU0213 内皮素受体拮抗剂 吖啶橙/碘化丙啶(ao/pi)染色 心肌细胞
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H_2O_2对人肝癌细胞Hep-G2凋亡的影响
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作者 伍春莲 房守敏 +3 位作者 耿文峰 张思楠 孙警辉 李祥会 《西华师范大学学报(自然科学版)》 2010年第4期342-346,共5页
探讨不同浓度H2O2对人肝癌细胞株Hep-G2细胞凋亡的影响.使用不同浓度(0.01、0.05、0.10、0.20、0.50mmol/L)的H2O2作用于Hep-G2细胞12h,通过丫啶橙-碘化丙啶(AO/PI)双重荧光染色法对Hep-G2细胞的形态变化进行观察;再进行DNA的提取和琼... 探讨不同浓度H2O2对人肝癌细胞株Hep-G2细胞凋亡的影响.使用不同浓度(0.01、0.05、0.10、0.20、0.50mmol/L)的H2O2作用于Hep-G2细胞12h,通过丫啶橙-碘化丙啶(AO/PI)双重荧光染色法对Hep-G2细胞的形态变化进行观察;再进行DNA的提取和琼脂糖凝胶电泳观察DNA断裂情况.结果表明:不同浓度的H2O2处理后在荧光显微镜下可以区分正常对照细胞(0mmol/L)、染色质凝聚的早期凋亡细胞(0.01、0.05mmol/L)、细胞质皱缩和细胞核解体的晚期凋亡细胞(0.10、0.20mmol/L)和降解细胞(0.50mmol/L),在一定时间内随H2O2浓度的增加而增大,呈现浓度依赖性.DNA电泳结果显示发生凋亡的细胞基因组DNA形成弥散条带,从而表现出体外细胞凋亡的特征.因此,H2O2可以诱导Hep-G2细胞凋亡. 展开更多
关键词 H2O2 Hep-G2细胞 ao/pi 细胞凋亡 DNA
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去甲斑蝥素通过JAK-STAT3途径诱导结肠癌LS-174T细胞凋亡 被引量:12
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作者 张国建 李猛 +3 位作者 王天阳 石铖 王晨宇 闫庆辉 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期16-21,共6页
目的探讨去甲斑蝥素(NCTD)诱导结肠癌LS-174T细胞的凋亡效应及其可能分子机制。方法应用MTT法检测NCTD对细胞生长的抑制作用,通过AO/EB染色、透射电子显微镜观察细胞形态及超微结构的变化,AnnexinV/PI染色检测细胞凋亡率,Western blot检... 目的探讨去甲斑蝥素(NCTD)诱导结肠癌LS-174T细胞的凋亡效应及其可能分子机制。方法应用MTT法检测NCTD对细胞生长的抑制作用,通过AO/EB染色、透射电子显微镜观察细胞形态及超微结构的变化,AnnexinV/PI染色检测细胞凋亡率,Western blot检测stat3、survivin、Mcl-1、bax蛋白的表达情况。结果去甲斑蝥素对结肠癌LS-174T细胞具有显著的生长抑制作用,并呈时间—剂量依赖性;40μg/ml作用72 h时达到最大抑制率(72.4±3.1)%;AO/EB染色及流式细胞术显示,随着NCTD浓度的增加,细胞凋亡率明显增加;透射电子显微镜观察发现,结肠癌LS-174T细胞出现明显凋亡超微结构变化;Western blot结果显示,stat3、survivin、Mcl-1表达明显下降,bax表达明显上升。结论去甲斑蝥素可以抑制结肠癌LS-174T细胞的生长并促进其凋亡,机制可能是通过抑制stat3途径实现的。 展开更多
关键词 去甲斑蝥素 ao/EB AnnexinV/pi:Survivin STAT3
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阴极极化对金属电极表面微生物膜的影响 被引量:2
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作者 李相波 王佳 《装备环境工程》 CAS 2004年第3期27-31,共5页
阴极极化对不锈钢表面微生物膜的附着有一定的影响,通过荧光显微镜记数和细菌双染色方法(AO+PI),对在不同电位下极化过的不锈钢表面进行了观察,同时做了对比实验.实验证明在一定的范围内(-800mV~-1000mV),阴极极化对微生物向洁净金属... 阴极极化对不锈钢表面微生物膜的附着有一定的影响,通过荧光显微镜记数和细菌双染色方法(AO+PI),对在不同电位下极化过的不锈钢表面进行了观察,同时做了对比实验.实验证明在一定的范围内(-800mV~-1000mV),阴极极化对微生物向洁净金属表面的附着有一定的抑制作用,但是对已经附着的微生物膜不能够起到脱除或完全杀灭作用,只能杀死靠近金属表面的微生物.通过模拟膜实验,从侧面证明了只有微生物膜附着而无生物活性时,钝性金属的开路电位不会发生正移. 展开更多
关键词 阴极极化 双染色方法(ao+pi) 模拟膜 开路电位
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使用不同染色方法进行细胞计数的结果精密度评价 被引量:1
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作者 刘曜铭 《中国计量》 2022年第9期88-91,共4页
传统区分死活细胞的台盼蓝染色法难以区分大块细胞碎片和目标细胞,使用DNA荧光染料则可有效标记有核细胞。CellometerAuto2000是采用明场和AO/PI(吖啶橙/碘化丙啶)荧光染色的全自动细胞计数仪,本研究使用Jurkat和HepG2两种细胞系对其细... 传统区分死活细胞的台盼蓝染色法难以区分大块细胞碎片和目标细胞,使用DNA荧光染料则可有效标记有核细胞。CellometerAuto2000是采用明场和AO/PI(吖啶橙/碘化丙啶)荧光染色的全自动细胞计数仪,本研究使用Jurkat和HepG2两种细胞系对其细胞浓度检测能力进行线性和精密度评价。通过对比发现,使用AO/PI自动计数法与传统人工计数法或台盼蓝染色自动计数法,在细胞浓度检测方面无显著性差异,是快捷、准确的自动细胞计数方法。 展开更多
关键词 计量学 细胞计数 自动细胞计数仪 Cellometer Auto 2000 台盼蓝 ao/pi
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Erosion of a Polyimide Material Exposed to Simulated Atomic Oxygen Environment 被引量:5
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作者 赵伟 李卫平 +1 位作者 刘慧从 朱立群 《Chinese Journal of Aeronautics》 SCIE EI CAS CSCD 2010年第2期268-273,共6页
Oxygen plasma source generated by thermal cathode filament discharge has been used to study the erosion process of polyim- ide (PI) materials in atomic oxygen (AO) environment, and their mass loss, surface morphol... Oxygen plasma source generated by thermal cathode filament discharge has been used to study the erosion process of polyim- ide (PI) materials in atomic oxygen (AO) environment, and their mass loss, surface morphology and surface chemical composi- tions have been examined by scanning electron microscope (SEM) and X-ray photoelectron spectroscopy (XPS) after exposure to incremental AO flux. The data indicate that the physical adsorption of AO at the samples' surface results in the increase of oxygen concentration when polyimide is exposed to AO flux. Then selective chemical reactions of groups of polyimide materials with AO yield volatile organic compounds, sample mass loss is on linear increase and carpet-like surface morphology forms. In the initial exposure to AO, the reaction occurs mainly between AO and carbon in specific location of aromatic ring, then the re- action rate of C=O groups gradually increases. After AO exposure, the oxygen concentration increases while nitrogen and carbon concentration decreases. Reaction rate of groups containing nitrogen is slower compared with carbon and oxygen. 展开更多
关键词 low earth orbit (LEO) atomic oxygen ao EROSION polyimide pi selective chemical reaction
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