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ARMS-PCR对棉花SNP分型的研究 被引量:4
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作者 郑炜佳 曲延英 +5 位作者 谢元元 陈全家 冯文林 马顺尧 柴颜军 梁维维 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期2182-2188,共7页
【目的】在已知SNP的情况下,找到适合棉花SNP的简便验证方法。【方法】利用四引物扩增突变体系(tetra-primer amplification refractory mutationsystem PCR,Tetra-primer ARMS-PCR)对棉花SNP分型进行验证。【结果】根据深圳华大基因已... 【目的】在已知SNP的情况下,找到适合棉花SNP的简便验证方法。【方法】利用四引物扩增突变体系(tetra-primer amplification refractory mutationsystem PCR,Tetra-primer ARMS-PCR)对棉花SNP分型进行验证。【结果】根据深圳华大基因已组装的棉花转录本做为参考,分别将新海21号和新陆中36号的转录组测序样品比对到参考基因,通过SOAPsnp技术检测样品的单核苷酸多态性。棉花海陆杂交亲本的38个单核苷酸多态性位点设计出的66组SNP引物进行验证。通过优化PCR反应体系,反应条件,调整内外引物浓度和PCR体系的优化,从66组引物中扩增出11组引物,得到了良好的分型效果。【结论】四引物扩增受阻突变体系聚合酶链式反应是一种简单快捷而有效的SNP基因分形方法。 展开更多
关键词 棉花 单核苷酸多态性 基因分型 arms-pcr
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一种检测多种NPM1突变体的ARMS-PCR方法的建立 被引量:3
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作者 简正伟 徐芬 +2 位作者 石淙 万腊根 张长林 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期1058-1062,共5页
本研究旨在建立一种简单、灵敏的,能检测多种NPM1突变体的方法,以降低NPM1突变的漏检率。通过构建NPM1基因野生型和最常见的突变型A、B、C、D重组质粒作为检测对象,根据NPM1不同突变体碱基排列方式不同,设计1对特异性引物,使得上游引物3... 本研究旨在建立一种简单、灵敏的,能检测多种NPM1突变体的方法,以降低NPM1突变的漏检率。通过构建NPM1基因野生型和最常见的突变型A、B、C、D重组质粒作为检测对象,根据NPM1不同突变体碱基排列方式不同,设计1对特异性引物,使得上游引物3'末端的碱基与突变体A、B、C、D匹配,而与野生型NPM1不匹配;通过条件优化,建立检测多种NPM1突变的ARMS-PCR的方法。通过对该方法的检测范围、灵敏度的评估及与直接测序法的比较,判断该方法的可行性。结果表明,成功构建NPM1基因野生型和突变型A、B、C、D 5种重组质粒,经测序鉴定和目的片段一致。ARMS-PCR方法可以检测到ABCD 4种突变体,检测范围在103copies/ml-109copies/ml,其灵敏度为0.01%,而当突变体含量低于10%时采用直接测序则检测不出突变。结论:本研究建立了一种可以检测NPM1 4种高频突变的ARMS-PCR方法。该方法灵敏度高,可以检出95%以上的突变,为临床检测NPM1基因突变提供一种新型的检测方法。 展开更多
关键词 NPM1突变体 arms-pcr方法 急性髓系白血病
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采用四引物ARMS-PCR方法检测奶牛乳腺组织DGAT1基因单核苷酸多态性 被引量:1
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作者 段晓宇 吕贺 +3 位作者 杨洋 矫洪涛 侯晓明 林叶 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第10期3023-3028,共6页
试验旨在快速有效地检测泌乳奶牛的二酰甘油转酰基酶1(diacylgycerol acyltransferase 1,DGAT1)乳脂量性状的优势等位基因K232A单核苷酸多态性,确定DGAT1基因型进而确定泌乳性状,为中国荷斯坦奶牛分子标记辅助选择提供技术支持。选取6... 试验旨在快速有效地检测泌乳奶牛的二酰甘油转酰基酶1(diacylgycerol acyltransferase 1,DGAT1)乳脂量性状的优势等位基因K232A单核苷酸多态性,确定DGAT1基因型进而确定泌乳性状,为中国荷斯坦奶牛分子标记辅助选择提供技术支持。选取6头泌乳初期(3头为高乳产量牛,3头为低乳产量牛)中国北方荷斯坦奶牛为研究对象,提取乳腺组织基因组DNA,分别设计1对外引物和1对内引物,建立一种四引物ARMS-PCR体系快速检测奶牛乳腺组织DGAT1基因单核苷酸多态性。结果发现,外引物扩增片段长度为512 bp,为PCR反应的阳性对照,基因型为232K扩增片段长度为369 bp,基因型为232A扩增片段长度为181 bp。PCR结果显示,6头牛的乳腺组织样本均由外部引物扩增出长度为512 bp的片段,泌乳期高乳产量奶牛和泌乳期低乳产量奶牛乳腺组织的特异性扩增片段长度均为181 bp。表明本研究选取的6头奶牛样本DGAT1基因K232A多态性均为232A型。提示该PCR鉴定方法能够快速有效地鉴定奶牛DGAT1基因型,可用于中国荷斯坦奶牛分子标记辅助选择。 展开更多
关键词 荷斯坦奶牛 DGAT1基因 arms-pcr 基因分型
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小麦抗麦红吸浆虫候选基因TraesCS4A01G437800的四引物ARMS-PCR标记开发 被引量:2
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作者 郝志明 章悦 +3 位作者 张力菁 温树敏 刘桂茹 王睿辉 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期1-10,共10页
麦红吸浆虫(Sitodiplosis mosellana Géhin)是影响我国小麦生产的重要害虫,选育抗虫小麦品种是控制虫害最为有效的措施,而利用通量高、成本低的抗虫相关标记对提高小麦抗虫种质资源筛选和分子育种效率具有重要意义。本研究根据前... 麦红吸浆虫(Sitodiplosis mosellana Géhin)是影响我国小麦生产的重要害虫,选育抗虫小麦品种是控制虫害最为有效的措施,而利用通量高、成本低的抗虫相关标记对提高小麦抗虫种质资源筛选和分子育种效率具有重要意义。本研究根据前期挖掘到的抗虫候选基因TraesCS4A01G437800序列中存在的SNP位点开发了1个四引物ARMS-PCR标记T3-1-1,并在92个RIL株系和95个小麦品种中进行了标记有效性检测。结果表明:T3-1-1在RIL株系间的检测有效率在90%左右,在供试高抗、高感小麦品种中的检测有效率较高,分别为63.16%和96.43%,可用于小麦种质资源的抗虫性筛选和抗虫性分子标记辅助选择。进一步分析发现,在具有抗虫位点的14个抗虫小麦品种中,多为生产上很少使用的老品种,因此鉴定和创新小麦抗虫种质资源尤为重要。 展开更多
关键词 小麦 麦红吸浆虫 抗吸浆虫候选基因 单核苷酸多态性(SNP) 四引物扩增受阻突变体系PCR(四引物arms-pcr)
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Sanger测序与ARMS-PCR在非小细胞肺癌EGFR基因突变检测中的比较及应用评价 被引量:6
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作者 葛闯 易琳 +3 位作者 唐万燕 吴明凤 杨薇 辇伟奇 《国际检验医学杂志》 CAS 2018年第21期2648-2653,共6页
目的比较Sanger测序法与ARMS-PCR法检测肺癌表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的差异,评价两种基因突变检测方法用于目标人群的临床应用价值。方法收集2016年4-9月123例非小细胞肺癌(NSCLC)患者标本。用Sanger测序法与ARMS-PCR法检测EGFR... 目的比较Sanger测序法与ARMS-PCR法检测肺癌表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的差异,评价两种基因突变检测方法用于目标人群的临床应用价值。方法收集2016年4-9月123例非小细胞肺癌(NSCLC)患者标本。用Sanger测序法与ARMS-PCR法检测EGFR基因第18~21号外显子基因突变,分析两种检测手段之间的方法学差异以及临床病理行为对基因突变的影响,随访并比较受检人群的生存状况。结果 Sanger测序法EGFR基因突变总检出率为36.6%(45/123),ARMS-PCR法基因突变总检出率为48.0%(59/123)。Sanger测序与ARMS-PCR两种方法在不同类型标本中的阳性率分别是手术标本:35.8%(19/53)与49.1%(26/53),穿刺标本:50.0%(11/22)与54.5%(12/22),纤维支气管镜标本:30.0%(3/10)与40.0%(4/10),胸水标本:31.6%(12/38)与44.7%(17/38)。EGFR基因突变多见于≤65岁(54.2%)、女性(61.0%)、非吸烟(60.6%)、腺癌(50.9%)人群。未接受靶向治疗组与接受靶向治疗的Sanger阳性患者组、ARMS-PCR阳性患者组的治疗效果差异均有统计学意义(X^2=4.797,P=0.029;X^2=7.270,P=0.007),Sanger组敏感突变患者与ARMS-PCR组敏感突变患者接受TKIs的疗效差异无统计学意义(X^2=0.141,P=0.708)。结论两种检测方法对NSCLC患者的靶向治疗决策均具有积极意义,但基于灵敏度更高、操作更简便的最优原则,ARMS-PCR法在临床实践中更具优势。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 表皮生长因子受体 Sanger测序 arms-pcr 靶向治疗
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基于Taqman荧光ARMS-PCR技术检测CYP3A5基因多态性方法的建立 被引量:1
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作者 朱小亚 黄志文 蒋析文 《分子诊断与治疗杂志》 2020年第1期22-26,43,共6页
目的建立一种基于Taqman荧光的ARMS-PCR技术检测人外周全血样本CYP3A5*3(rs776746)基因多态性的新方法。方法根据CYP3A5和内参基因的保守序列分别设计特异性引物及探针,建立CYP3A5*1和CYP3A5*3 Taqman荧光ARMS-PCR检测体系及其测序体系... 目的建立一种基于Taqman荧光的ARMS-PCR技术检测人外周全血样本CYP3A5*3(rs776746)基因多态性的新方法。方法根据CYP3A5和内参基因的保守序列分别设计特异性引物及探针,建立CYP3A5*1和CYP3A5*3 Taqman荧光ARMS-PCR检测体系及其测序体系,并对200例人外周全血样本进行检测及金标准测序对比验证,分析2种检测方法的一致性,并统计分析CYP3A5*3基因多态性的分布。结果该方法可检测人外周全血样本CYP3A5*3(rs776746)基因多态性,其检测结果与sanger测序一致性为100%。200例外周血样本CYP3A5*3基因型分布:*1/*1型19例(9.5%),*1/*3型为62例(31.0%),*3/*3型为119例(59.5%)。结论本研究建立的基于Taqman荧光ARMS-PCR技术的检测方法能够简单、快速、准确地检测CYP3A5*3基因型,适用于临床推广。 展开更多
关键词 arms-pcr CYP3A5 基因多态性
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利用ARMS-PCR等位基因分型方法对德国小蠊钠通道基因新突变的检测及分型研究
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作者 吕瑞辰 谭伟龙 +3 位作者 齐永 朱长强 艾乐乐 韩招久 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2022年第1期68-71,共4页
目的了解南京市德国小蠊对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性水平,建立一种快捷方便的抗性基因检测分型方法,对kdr(knockdown resistance,kdr)基因突变进行检测和分型。方法利用圆球法检测高效氯氰菊酯、氯菊酯、胺菊酯以及右旋反式氯丙炔菊酯... 目的了解南京市德国小蠊对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性水平,建立一种快捷方便的抗性基因检测分型方法,对kdr(knockdown resistance,kdr)基因突变进行检测和分型。方法利用圆球法检测高效氯氰菊酯、氯菊酯、胺菊酯以及右旋反式氯丙炔菊酯对德国小蠊的半数击倒时间(KT),PCR扩增检测kdr基因突变情况。针对1059位氨基酸位点的碱基突变设计引物建立ARMS-PCR检测方法。结果在100 mg/m剂量时,氰菊酯、氯菊酯、胺菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯对德国小蠊试虫的KT值分别20、19、17和8 min。同时在kdr基因的1058-1059氨基酸位点处检测到6种突变基因型,并成功地建立了针对D1059K突变基因型的ARMS-PCR检测方法。结论采集到的德国小蠊对拟除虫菊酯类杀虫剂产生了不同程度的抗性,且其kdr基因存在着多种新型突变位点。 展开更多
关键词 德国小蠊 击倒抗性 arms-pcr
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ARMS-PCR技术检测法医学体液样本DNA甲基化方案
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作者 田欢 董迎春 +3 位作者 孙静 梁伟波 李永生 白鹏 《中国法医学杂志》 CSCD 2023年第4期390-395,共6页
目的 案件现场遗留的体液等生物检材对案件性质的判定以及犯罪现场的重建具有重要意义。本研究旨在确定ARMS-PCR技术能否用于DNA甲基化位点的检测,评估候选的DNA甲基化标记物是否具有体液特异性,以便于解决目前体液鉴定复杂、成本高、... 目的 案件现场遗留的体液等生物检材对案件性质的判定以及犯罪现场的重建具有重要意义。本研究旨在确定ARMS-PCR技术能否用于DNA甲基化位点的检测,评估候选的DNA甲基化标记物是否具有体液特异性,以便于解决目前体液鉴定复杂、成本高、混合样本识别困难等问题。方法 利用ARMS技术设计DNA甲基化特异性引物,构建复合扩增体系,通过毛细管电泳进行分型检测。结果 本研究利用ARMS技术以及毛细管电泳构建了包含22个甲基化位点的复合扩增体系,进一步检测并识别出了100例单一体液样本。结论 该方法可实现甲基化位点的检测,是一种快速、低成本的检测方式,候选位点具有体液特异性。 展开更多
关键词 法医遗传学 体液鉴定 DNA甲基化 arms-pcr
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8例肺肠型腺癌临床病理特征分析
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作者 林洁 苏群英 +2 位作者 朱晓莹 韦礼肥 黎俊楠 《中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生》 2024年第4期0147-0150,共4页
针对肺肠型腺癌(Pulmonary enteric adenocarinoa PEAC)的临床病理特点进行探讨。方法 该方法收集了8例PEAC临床数据,对TTF-1、NapsionA、CK7、CK20、CDX-2的表达采用免疫组化Envision检测;应用ARMS-PCR方法检测PEAC8患者的突变基因,并... 针对肺肠型腺癌(Pulmonary enteric adenocarinoa PEAC)的临床病理特点进行探讨。方法 该方法收集了8例PEAC临床数据,对TTF-1、NapsionA、CK7、CK20、CDX-2的表达采用免疫组化Envision检测;应用ARMS-PCR方法检测PEAC8患者的突变基因,并对相关文献资料进行审阅。结果 8例PEAC患者年龄45-76岁,6例以咳嗽、咳痰为临床表现,2例以胸痛为主要表现。实施手术1例,常规治疗2例,放弃治疗5例。免疫表型8例PEAC表达CK7,3例表达CDX-2,6例表达CK20,8例均不表达TTF-1和NapsionA。随访3-30个月,死亡1人,转诊、复诊2人。结论 PEAC需要综合诊断免疫组化表型,根据临床病史、影像学、病理组织等进行综合诊断。同时PEAC患者应行多基因检测和免疫相关蛋白检测,有助于筛选靶向治疗及免疫治疗的对象,指导个体化治疗。 展开更多
关键词 肺肠型腺癌 临床病理特征 免疫组化 arms-pcr
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河南豫东地区661例非小细胞肺癌常见驱动基因突变分析
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作者 王延 贺雅静 +1 位作者 黄立娜 张玉文 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期38-42,共5页
目的分析河南豫东地区非小细胞肺癌(non-small cell lung cancers,NSCLC)患者常见驱动基因的突变情况。方法回顾性分析2022年3月至2023年7月就诊于商丘市第一人民医院的661例NSCLC患者,入组病例均采用了5种基因突变检测试剂盒(荧光PCR法... 目的分析河南豫东地区非小细胞肺癌(non-small cell lung cancers,NSCLC)患者常见驱动基因的突变情况。方法回顾性分析2022年3月至2023年7月就诊于商丘市第一人民医院的661例NSCLC患者,入组病例均采用了5种基因突变检测试剂盒(荧光PCR法)进行检测。应用统计学方法分析其临床特征与各驱动基因状态之间的关系。结果661例NSCLC中EGFR、KRAS、ALK、ROS1、PIK3CA、BRAF、HER2、RET、MET14和NRAS的突变率分别为47.35%、9.68%、5.45%、1.82%、2.87%、1.82%、1.21%、0.91%、0.61%和0%。EGFR、ROS1和HER2的突变更易发生在在女性患者中(P<0.05),而KRAS突变常发生于男性患者(P<0.05)。EGFR、KRAS和ALK突变在腺癌中的突变率显著高于鳞癌和非小细胞肺癌非特指型(NSCLC.NOS)(P<0.05),PIK3CA在NSCLC.NOS中的突变率最高。KRAS基因在Ⅰ+Ⅱ期的突变率显著高于Ⅲ+Ⅳ期(P<0.05),其他基因与临床分期无明显相关性。与吸烟者相比,非吸烟者的总驱动基因突变率明显较高(P<0.05),EGFR、ALK、PIK3CA、ROS1、BRAF和HER2常发生于非吸烟患者中(P<0.05),而KRAS基因更易发生于吸烟患者中(P<0.05)。沉渣细胞块标本10种驱动基因突变率78.67%,检出率显著高于其他类型标本(P<0.05)。结论EGFR、KRAS、ALK等常见驱动基因与患者性别、病理类型、临床分期以及吸烟具有一定的相关性。质控合格的沉渣细胞块标本用于基因检测的优势明显,可以在有条件的患者中广泛推广;ARMS-PCR法联合检测10种基因可作为初诊初治NSCLC患者的首选基因检测方法。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 驱动基因 多基因检测 arms-pcr
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绵羊PRNP密码子136和154及171等位基因型的ARMS-PCR鉴定方法的建立 被引量:4
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作者 王芳 赵春林 +1 位作者 吴润 王川 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期118-125,共8页
根据已获得的绵羊PRNP密码子136、154和171等位基因型的序列,设计并合成了针对各等位基因型的特异性引物,摸索3′末端引入的错配碱基种类及位置,优化扩增条件,以建立绵羊PRNP密码子136、154和171等位基因型的ARMS-PCR鉴定方法。应用ARMS... 根据已获得的绵羊PRNP密码子136、154和171等位基因型的序列,设计并合成了针对各等位基因型的特异性引物,摸索3′末端引入的错配碱基种类及位置,优化扩增条件,以建立绵羊PRNP密码子136、154和171等位基因型的ARMS-PCR鉴定方法。应用ARMS-PCR分析已知PRNP等位基因型的绵羊血样,验证ARMS-PCR与PCR-SSCP鉴定PRNP等位基因型的符合率。经ARMS-PCR验证,已知的15种绵羊PRNP等位基因型的94份血样,两者的基因分型符合率达100%。研究结果显示,该ARMS-PCR分型法能够准确鉴定出绵羊PRNP密码子136、154和171的等位基因型,且具有简便、快速、廉价的优点,适合于绵羊PRNP等位基因型的普查。 展开更多
关键词 绵羊 PRNP等位基因 arms-pcr分型法
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ddPCR与ARMS-PCR检测NSCLC患者EGFR基因T790M突变的比较研究
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作者 李月 徐玉霞 《肿瘤预防与治疗》 2022年第3期211-216,共6页
目的:通过对比微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)和突变扩增阻滞系统PCR(amplification refractory mutation system PCR,ARMS-PCR)检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)表皮生长因子受体(epidermal growth fact... 目的:通过对比微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)和突变扩增阻滞系统PCR(amplification refractory mutation system PCR,ARMS-PCR)检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因T790M突变的检测效能,综合分析两种检测方法的优势及适用范围。方法:回顾性收集115例NSCLC患者的标本,同时使用ddPCR和ARMS-PCR两种方法检测EGFR基因T790M突变状态,比较两种方法的检测结果,并分析不同样本类型对ddPCR检测结果的影响。结果:ddPCR检测T790M阳性率为65.2%,ARMS-PCR阳性率为27.8%,ddPCR检测敏感性显著高于ARMS-PCR(P<0.05),两种方法检测一致率为62.6%。ddPCR+ARMS-样本的T790M平均阳性微滴数和平均突变丰度(11,0.35%)均显著低于ddPCR+ARMS+样本(632.3,17.7%)。ddPCR检测基因组DNA和外周血游离DNA阳性率分别为55.9%和78.7%,不同样本类型T790M突变阳性微滴数和突变丰度无显著差别。结论:ddPCR和ARMS-PCR均可用于NSCLC患者EGFR基因T790M突变检测,二者具有良好的一致性,ddPCR具有更高的灵敏性,在检测突变丰度较低的样本方面具有优势。 展开更多
关键词 EGFR基因 T790M突变 ddPCR arms-pcr 非小细胞肺癌
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胸腔积液不同类型标本用于非小细胞肺癌驱动基因检测的临床价值研究 被引量:2
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作者 龙朝恋 李琨 +2 位作者 刘子臣 张娜娜 车南颖 《诊断病理学杂志》 2023年第3期221-225,共5页
目的分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者胸腔积液上清、细胞沉淀、细胞蜡块用于驱动基因检测的准确性。方法回顾性纳入2021-01—2022-03首都医科大学附属北京胸科医院确诊并发胸腔积液且具有同期配对组织基因检测结果的NSCLC患者45例,采用蝎... 目的分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者胸腔积液上清、细胞沉淀、细胞蜡块用于驱动基因检测的准确性。方法回顾性纳入2021-01—2022-03首都医科大学附属北京胸科医院确诊并发胸腔积液且具有同期配对组织基因检测结果的NSCLC患者45例,采用蝎形探针扩增阻滞突变系统荧光定量PCR(ARMS-PCR)对患者胸腔积液上清、细胞沉淀和细胞蜡块进行肺癌靶基因变异检测。结果胸腔积液三种类型标本中共检出EGFR、KRAS、BRAF、MET、HER2、PIK3CA、ALK共7个基因变异。以组织基因检测结果为参考,胸腔积液上清总体变异检测敏感度为80.0%(24/30),特异度为93.3%(14/15),高于细胞沉淀和细胞蜡块。在DNA层面,胸腔积液上清核苷酸变异敏感度最高,为84.6%(22/26);对于RNA融合变异,上清与细胞蜡块敏感度一致,均为50.0%(2/4),高于细胞沉淀的25.0%(1/4)。胸腔积液细胞学结果对上清、细胞沉淀和细胞蜡块驱动基因总体变异、核苷酸变异检出有影响,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论晚期并发胸腔积液NSCLC患者在无法获取组织标本情况下,胸腔积液,尤其是上清标本是进行靶基因检测,有效指导临床治疗决策潜在优质标本类型。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 arms-pcr 驱动基因 液态活检 胸腔积液
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新鲜穿刺样本和HE染色细胞样本在甲状腺穿刺BRAF基因V600检测中的价值
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作者 师晓琴 徐宵宵 +2 位作者 何金 蒋立人 蔡毅然 《同济大学学报(医学版)》 2023年第3期350-359,共10页
目的评价以新鲜穿刺样本和经苏木精伊红(HE)染色后的细胞样本作为甲状腺穿刺鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)基因V600突变检测样本的适用性。方法收集370例甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)患者的临床资料,及术... 目的评价以新鲜穿刺样本和经苏木精伊红(HE)染色后的细胞样本作为甲状腺穿刺鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)基因V600突变检测样本的适用性。方法收集370例甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)患者的临床资料,及术前细针穿刺(fine-needle aspiration,FNA)细胞学样本和术后福尔马林固定石蜡包埋(formalin-fixed,paraffin embedded,FFPE)样本,并按照FNA样本类型的不同,分为两个亚组。采用扩增阻滞突变系统(amplification refractory mutation system,ARMS)法进行BRAF基因V600的突变检测,并分析其与临床病理特征的关系。结果在术后FFPE样本的分析中,BRAF基因V600的突变率与大多临床病理特征无关,但与病灶数显著相关(P=0.028)。在FNA细胞学样本的分析中,BRAF基因V600的突变率与其细胞学诊断分类极显著相关(P=0.002)。新鲜穿刺样本和HE染色后的细胞样本与术后FFPE样本相比,灵敏度分别为95.7%和98.8%;一致性分别为93.7%和95%。结论不论是新鲜穿刺样本还是HE染色的细胞样本,在BRAF基因V600突变状态检测方面均有很高的灵敏度。在甲状腺的细胞学诊断中,二者均可以成为BRAF基因V600检测的有效补充样本。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 细针抽吸活检 BRAF arms-pcr
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水稻粒长基因GS3和qGL3功能标记的设计及应用 被引量:8
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作者 丁丹 张亚东 +9 位作者 郑佳 赵春芳 陈涛 赵庆勇 朱镇 周丽慧 姚姝 赵凌 于新 王才林 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第6期1191-1197,共7页
水稻粒型是与其产量直接相关的重要性状。在前期研究证实来源于特大粒水稻TD70和籼稻品种Kasalath的重组自交系(RIL)群体中检测到已克隆的粒长GS3和q GL3基因的基础上,通过TD70和Kasalath的GS3、q GL3基因序列差异分析,设计功能标记,检... 水稻粒型是与其产量直接相关的重要性状。在前期研究证实来源于特大粒水稻TD70和籼稻品种Kasalath的重组自交系(RIL)群体中检测到已克隆的粒长GS3和q GL3基因的基础上,通过TD70和Kasalath的GS3、q GL3基因序列差异分析,设计功能标记,检测240个RILs和不同粒长的6个粳稻、9个籼稻中GS3、q GL3基因类型及其效应。结果显示:TD70和Kasalath中的GS3基因和q GL3基因分别在第2外显子上的编码区+165位置和第10外显子上的编码区+1 092位置存在一个由碱基C到碱基A的单核苷酸替换,据此设计了四引物扩增受阻突变体系(Tetra-primer ARMS-PCR)标记,TD70的GS3和q GL3基因分别扩增为270 bp和145 bp条带及448 bp和288bp条带,Kasalath的GS3、q GL3基因分别扩增为270 bp和175 bp条带及448 bp和216 bp条带;240个RILs中含有GS3-T和q GL3-T基因的株系61个,含GS3-T和q GL3-K的株系48个,含GS3-K和q GL3-T的株系17个;不同粒型基因组合的粒长存在显著差异,表现为GS3-T+q GL3-T>GS3-T+q GL3-K或GS3-K+q GL3-T>GS3-K+q GL3-K;长粒型的1个粳稻和5个籼稻品种的GS3基因表现为TD70带型,短粒型的5个粳稻和4个籼稻品种的GS3基因表现为Kasalath带型;所有水稻品种的q GL3基因均表现为Kasalath带型。表明开发的GS3和q GL3基因功能标记是有效的,可用于水稻分子标记辅助育种。 展开更多
关键词 水稻 GS3基因 qGL3基因 序列差异 四引物arms-pcr标记
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广西南宁地区Hb Q-Thailand基因分析 被引量:6
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作者 张强 范歆 +3 位作者 韦媛 陈秋莉 唐燕青 何升 《检验医学与临床》 CAS 2014年第20期2803-2804,2807,共3页
目的了解广西南宁地区异常血红蛋白Hb Q-Thailand分子特征。方法回顾性分析2013年1月至2014年1月来广西壮族自治区妇幼保健院·儿童医院做地贫筛查的23 026例患者资料,通过毛细管电泳方法,确定可疑Hb Q-Thailand患者,运用扩增不应... 目的了解广西南宁地区异常血红蛋白Hb Q-Thailand分子特征。方法回顾性分析2013年1月至2014年1月来广西壮族自治区妇幼保健院·儿童医院做地贫筛查的23 026例患者资料,通过毛细管电泳方法,确定可疑Hb Q-Thailand患者,运用扩增不应突变系统对可疑阳性患者进行确诊。结果在23 026例中共确诊Hb Q-Thailand阳性患者29例,占筛查人数的0.13%。且有1例是我国首次发现的Hb Q-Thailand不与4.2左侧缺失型α-地贫连锁的患者。结论 Hb Q-Thailand作为异常血红蛋白的一种,有其独特的分子特征,在日常工作中应引起足够的重视。 展开更多
关键词 HB Q-Thailand arms-pcr 基因分析
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SLCO1B1 521T>C基因多态性对瑞舒伐他汀钙降脂疗效的影响 被引量:5
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作者 张昀赟 叶小磊 +2 位作者 王美华 陈季志 查芹 《中风与神经疾病杂志》 CAS 北大核心 2016年第6期533-535,共3页
目的观察SLCO1B1 521T>C基因多态性对瑞舒伐他汀钙降脂疗效的影响。方法纳入2015年1月-2015年12月期间我院神经内科高脂血症患者,均口服瑞舒伐他汀钙片10 mg,一次/日,睡前服用。应用ARMS-PCR方法探索中国人群中SLCO1B1 521T>C的... 目的观察SLCO1B1 521T>C基因多态性对瑞舒伐他汀钙降脂疗效的影响。方法纳入2015年1月-2015年12月期间我院神经内科高脂血症患者,均口服瑞舒伐他汀钙片10 mg,一次/日,睡前服用。应用ARMS-PCR方法探索中国人群中SLCO1B1 521T>C的基因型分布频率,并分别检测用药前与用药后1 w、6 w的血总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),并计算其变化率。结果瑞舒伐他汀治疗1 w后,各组TC、TG、LDL-C、HDL-C变化率差异均无统计学意义(P>0.05)。用药6 w后,TC组和CC组较TT组能显著降低TC、LDL-C及升高HDL-C水平,有统计学意义(P<0.01),但TC组和CC组间差异无统计学意义(P>0.05)。各组间TG变化率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SLCO1B1 521T>C基因变异可增强瑞舒伐他汀钙降脂疗效。 展开更多
关键词 瑞舒伐他汀 SLCO1B1 基因多态性 高脂血症 arms-pcr
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537例结肠腺癌患者KRAS基因检测结果分析 被引量:3
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作者 李秀博 杜洪 +2 位作者 王小拍 李雯 沈春辉 《广州医药》 2018年第4期7-9,共3页
目的分析KRAS基因突变在左半结肠、右半结肠癌分布几率的差异性。方法回顾性分析我院病理科分子实验室2015年到2017年间接收的537例结肠癌手术标本,用ARMS-PCR法进行了KRAS基因的检测,并对左右半结肠腺癌KRAS基因突变比例进行χ~2检验,P... 目的分析KRAS基因突变在左半结肠、右半结肠癌分布几率的差异性。方法回顾性分析我院病理科分子实验室2015年到2017年间接收的537例结肠癌手术标本,用ARMS-PCR法进行了KRAS基因的检测,并对左右半结肠腺癌KRAS基因突变比例进行χ~2检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果 537例中有187(34.82%)例为右半结肠腺癌,左半结肠腺癌有350(65.18%)例。KRAS基因突变检测阳性例数为240例,阳性率为44.69%;右半结肠腺癌KRAS基因突变阳性数为114例,阳性率为60.96%;左半结肠癌KRAS基因突变阳性数为126例,阳性率为36.00%。双侧结肠腺癌KRAS基因突变差异有统计学意义。结论右半结肠癌的患病例数低于左半结肠癌,右半结肠癌KRAS基因突变阳性率较左半结肠癌高,本研究为区分左右半结肠癌的分子靶向治疗提供了数据支持。 展开更多
关键词 左半结肠腺癌 右半结肠腺癌 KRAS基因突变 arms-pcr
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基于SLAF-seq技术的苦瓜白粉病SNP分子标记开发 被引量:4
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作者 冯诚诚 黄如葵 +5 位作者 黄熊娟 陈小凤 黄玉辉 梁家作 刘杏连 王齐旭 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期108-115,共8页
以高抗白粉病苦瓜MC18和高感白粉病MC105杂交构建遗传分离群体,利用SLAF-seq技术进行深度测序,开发与抗白粉病性状紧密关联的SNP分子标记。结果表明:测序共获得各样品的有效reads为10.48 Mb,获得高质量的SLAF标签91 856个,其中多态性SLA... 以高抗白粉病苦瓜MC18和高感白粉病MC105杂交构建遗传分离群体,利用SLAF-seq技术进行深度测序,开发与抗白粉病性状紧密关联的SNP分子标记。结果表明:测序共获得各样品的有效reads为10.48 Mb,获得高质量的SLAF标签91 856个,其中多态性SLAF标签5 502个,多态性比例为5.99%。通过对多态性SLAF标签进行关联分析,筛选出与苦瓜白粉病抗病性状紧密关联的SNP位点共29个。根据关联分析结果 ,通过四引物扩增受阻突变体系PCR技术进行SNP位点多态性的验证,其中Marker4542、Marker11188分子标记特异性强、灵敏度高、稳定性好,建立一套简便快捷的苦瓜SNP分型方法。该方法可对苦瓜育种材料进行分子标记辅助选择,以进一步提高苦瓜抗病育种效率。 展开更多
关键词 苦瓜 白粉病 SLAF-seq SNP分子标记 arms-pcr
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Association of TAP1 Gene Polymorphism in Human Papilloma Virus Related Oropharyngeal Cancer
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作者 Sindhura Suryanarayana Jaimanti Bakshi +3 位作者 Malay Sannigrahi Rajni Sharma Naresh K. Panda Madhu Khullar 《Surgical Science》 2020年第1期1-8,共8页
Background: Polymorphisms of TAP1 gene might be pertinent in development of cancer by altering the immune response. We studied the association of TAP1 gene polymorphism with HPV related oropharyngeal cancer. Methods: ... Background: Polymorphisms of TAP1 gene might be pertinent in development of cancer by altering the immune response. We studied the association of TAP1 gene polymorphism with HPV related oropharyngeal cancer. Methods: This prospective study consisted of 200 subjects divided into three groups;Group A—HPV positive oropharyngeal cancer (17/100), Group B—HPV negative oropharyngeal cancer (83/100) and Group C—Controls. TAP1ile333val polymorphism genotyping was performed by ARMS-PCR. Results: No significant difference was observed in the distribution of Val/Val genotype of Group A in comparison to Group C (OR = 0.663, 95% CI = 0.164 - 2.688, p = 0.742) and Group B (OR = 1.725, 95% CI = 0.388 - 7.675, p = 0.677) and thus was not associated with HPV associated cancer. But the frequency of Val/Val genotype was found to be significantly decreased in Group B as compared to controls and was linked with increased risk of oropharyngeal cancers (OR = 0.38, 95% CI = 0.15 - 0.97, p = 0.048). Conclusion: TAP1i333v gene polymorphism was not associated with HPV positive oropharyngeal cancer;however decreased frequency of Val/Val genotype raises the risk of oropharyngeal cancer. 展开更多
关键词 TAP1 HPV OROPHARYNGEAL Cancer HNSCC arms-pcr
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