目的探讨小分子干扰RNA(si RNA)靶向沉默CDX2基因后对白血病细胞K562增殖、凋亡的影响,并检测BCR-ABL及相关凋亡蛋白表达量的变化,探讨其可能的作用机制。方法根据前期实验结果,成功筛选出能够特异性有效靶向沉默CDX2基因的si RNA序列(C...目的探讨小分子干扰RNA(si RNA)靶向沉默CDX2基因后对白血病细胞K562增殖、凋亡的影响,并检测BCR-ABL及相关凋亡蛋白表达量的变化,探讨其可能的作用机制。方法根据前期实验结果,成功筛选出能够特异性有效靶向沉默CDX2基因的si RNA序列(CDX2-si RNA)和相应的阴性对照序列(CDX2-si RNA-NC),应用罗氏X-treme GENE HP DNA Transfection Reagent转染K562细胞,流式细胞术检测CDX2沉默表达后对K562细胞凋亡的影响;RT-PCR法和Western Blot法分别检测BCR-ABL、Caspase-9、Bax m RNA和蛋白表达量变化。结果 MTT及流式细胞术检测显示,CDX2沉默表达后,K562细胞增殖能力减弱,凋亡率明显增加;RT-PCR和Western Blot显示,与正常细胞组和CDX2-si RNA-NC组相比,CDX2沉默表达后,CDX2-si RNA组的BCR-ABL m RNA和蛋白表达量明显降低,Caspase-9、Bax m RNA和蛋白表达量明显升高(均P<0.05)。结论 CDX2-si RNA能够明显促进白血病细胞K562凋亡,其机制可能与其抑制BCR-ABL表达,增强Caspase-9、Bax的活性有关。展开更多
文摘目的探讨小分子干扰RNA(si RNA)靶向沉默CDX2基因后对白血病细胞K562增殖、凋亡的影响,并检测BCR-ABL及相关凋亡蛋白表达量的变化,探讨其可能的作用机制。方法根据前期实验结果,成功筛选出能够特异性有效靶向沉默CDX2基因的si RNA序列(CDX2-si RNA)和相应的阴性对照序列(CDX2-si RNA-NC),应用罗氏X-treme GENE HP DNA Transfection Reagent转染K562细胞,流式细胞术检测CDX2沉默表达后对K562细胞凋亡的影响;RT-PCR法和Western Blot法分别检测BCR-ABL、Caspase-9、Bax m RNA和蛋白表达量变化。结果 MTT及流式细胞术检测显示,CDX2沉默表达后,K562细胞增殖能力减弱,凋亡率明显增加;RT-PCR和Western Blot显示,与正常细胞组和CDX2-si RNA-NC组相比,CDX2沉默表达后,CDX2-si RNA组的BCR-ABL m RNA和蛋白表达量明显降低,Caspase-9、Bax m RNA和蛋白表达量明显升高(均P<0.05)。结论 CDX2-si RNA能够明显促进白血病细胞K562凋亡,其机制可能与其抑制BCR-ABL表达,增强Caspase-9、Bax的活性有关。
