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艾灸对实验性RA家兔滑膜NLRP3炎性小体、Caspase-12表达的影响
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作者 路晓清 刘华辉 +7 位作者 陈俊 席东来 王燚 杨慎峭 周海燕 马文彬 吴菲 杨馨 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第9期2975-2982,共8页
目的观察艾灸对实验性类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)家兔滑膜组织中NLRP3炎性小体、Caspase-12表达的影响,探索艾灸对RA家兔抗炎作用的机制。方法将24只日本大耳白兔根据体质量和性别随机分为3组:对照组、模型组、艾灸组。... 目的观察艾灸对实验性类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)家兔滑膜组织中NLRP3炎性小体、Caspase-12表达的影响,探索艾灸对RA家兔抗炎作用的机制。方法将24只日本大耳白兔根据体质量和性别随机分为3组:对照组、模型组、艾灸组。将弗氏完全佐剂(Freund's complete adjuvant,FCA)按照同等剂量(0.5 mL·kg^(-1))注射到各组(模型组、艾灸组)实验动物双侧后膝关节腔内,对照组各动物于该位置处注入同等体积的生理盐水用作对照。对艾灸组家兔双侧“肾俞”、“足三里”穴进行无瘢痕艾灸,每天每穴5壮,连续治疗6天,休息1天,为1个疗程,共治疗3个疗程。光镜下观察家兔膝关节滑膜样本的组织形态学改变,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测家兔膝关节滑膜组织中NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、Caspase-12的mRNA表达,酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)检测实验动物滑膜液中IL-1β(白细胞介素1β)的含量变化。结果相较于对照组,模型组滑膜的炎性细胞浸润程度、滑膜组织增生程度、纤维组织增生程度、巨噬细胞增生程度等病理改变及病理评分增加(P<0.05),NLRP3、Caspase-1 mRNA的表达升高(P<0.05),Caspase-12 mRNA的表达显著下降(P<0.01),IL-1β的表达显著升高(P<0.01);与模型组相比,艾灸组滑膜病变程度以及病理评分均有所减少(P<0.05),NLRP3、Caspase-1 mRNA的表达下降(P<0.05),Caspase-12 mRNA的表达显著上升(P<0.01),IL-1β的表达降低(P<0.05)。结论艾灸对RA家兔膝关节滑膜炎症病理过程具有明显的抑制作用;艾灸“肾俞”、“足三里”穴可上调Caspase-12表达进而抑制NLRP3炎性小体,可能是艾灸减轻RA炎症反应的机制之一。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 艾灸 NLRP3 caspase-12
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基于GRP78/Caspase-12/CHOP信号通路探讨艾灸预防急性胃黏膜损伤的机制
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作者 韦芳 霍新慧 +2 位作者 周知然 兰永利 阿力米热·阿布都热西提 《现代中西医结合杂志》 CAS 2023年第12期1645-1650,共6页
目的基于葡萄糖调节蛋白78(GRP78)/半胱氨酸蛋白水解酶-12(Caspase-12)/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)信号通路探讨艾灸预防急性胃黏膜损伤的机制。方法将52只健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸预处理组、针刺预处理组,每组1... 目的基于葡萄糖调节蛋白78(GRP78)/半胱氨酸蛋白水解酶-12(Caspase-12)/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)信号通路探讨艾灸预防急性胃黏膜损伤的机制。方法将52只健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸预处理组、针刺预处理组,每组13只。正常组、模型组大鼠只固定不进行处理;艾灸预处理组大鼠选取足三里穴、中脘穴进行艾灸,每次20 min,1次/d,连续灸7 d;针刺预处理组大鼠选穴和治疗时间同艾灸预处理组。预处理结束后,对模型组、艾灸预处理组、针刺预处理组大鼠进行无水乙醇结合阿司匹林混悬液灌胃7 d建立急性胃黏膜损伤模型。实验结束后,HE染色观察各组大鼠胃组织病理形态,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)水平,免疫组织化学法检测胃组织中GRP78、Caspase-12、CHOP蛋白表达情况。结果模型组大鼠胃组织上皮细胞结构破坏,炎症细胞浸润,胃黏膜组织损伤明显;艾灸预处理组和针刺预处理组大鼠胃组织病理损伤较轻。与正常组比较,模型组大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平均明显升高(P均<0.05),血清IL-10水平明显降低(P<0.05),胃组织中GRP78、Caspase-12、CHOP呈强阳性表达,可见大量棕黄色颗粒;艾灸预处理组和针刺预处理组大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平均明显低于模型组(P均<0.05),血清IL-10水平均明显高于模型组(P均<0.05),胃组织中GRP78、Caspase-12、CHOP呈弱阳性表达,可见少量棕黄色颗粒,且艾灸预处理组上述各项变化均较针刺预处理组明显。结论艾灸预处理对急性胃黏膜损伤具有保护作用,分析与其调节GRP78/Caspase-12/CHOP信号通路,抑制内质网应激,调节促炎及抑炎因子表达有关。 展开更多
关键词 艾灸预处理 胃黏膜损伤 GRP78/caspase-12/CHOP信号通路
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大鼠脑缺血/再灌注后神经元凋亡及caspase-12 mRNA和蛋白表达的改变 被引量:15
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作者 张鸿 宋利春 +2 位作者 贾春红 刘艳艳 吕永利 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1069-1072,共4页
目的研究大鼠局灶性脑缺血/再灌注后caspase-12 mRNA及蛋白的表达,明确内质网信号通路在脑缺血后神经元凋亡调控中的作用。方法60只Wistar♂大鼠随机分为假手术组和缺血组。应用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血/再灌注模型,应用原位末端... 目的研究大鼠局灶性脑缺血/再灌注后caspase-12 mRNA及蛋白的表达,明确内质网信号通路在脑缺血后神经元凋亡调控中的作用。方法60只Wistar♂大鼠随机分为假手术组和缺血组。应用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血/再灌注模型,应用原位末端标记法(TUNEL)、免疫组化染色、RT-PCR技术检测脑缺血/再灌注后各组凋亡细胞数和caspase-12 mRNA及蛋白的表达。结果脑缺血/再灌注后,随着再灌注时间的延长,凋亡细胞数和caspase-12mRNA及蛋白的表达逐渐增高。在脑缺血/再灌注后24h达高峰。与假手术组相比,缺血组在各时间点凋亡细胞数、caspase-12 mRNA及蛋白表达均明显升高(P<0.01)。结论脑缺血/再灌注后神经元凋亡数明显增高,caspase-12 mRNA及蛋白的表达明显升高,提示内质网通路参与了脑缺血/再灌注后神经元凋亡的调控。 展开更多
关键词 脑缺血 凋亡 caspase-12 内质网
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Z-ATAD-FMK预处理对癫痫持续状态后大鼠海马Caspase-12表达的影响和神经元的保护作用 被引量:1
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作者 娄鹏程 王海萍 +3 位作者 李光乾 焦颖 林忠东 叶秀云 《温州医学院学报》 CAS 2011年第5期446-450,共5页
目的:探讨Caspase-12抑制剂(苄氧羰-丙氨酰-苏氨酸-丙氨酰-天冬氨酰-氟甲基酮,Z-ATAD-FMK)对大鼠癫痫持续状态(status epilepticus,SE)后海马Caspase-12表达及神经细胞损伤的影响。方法:80只雄性SD大鼠,随机分成正常对照组(A组,8只)、... 目的:探讨Caspase-12抑制剂(苄氧羰-丙氨酰-苏氨酸-丙氨酰-天冬氨酰-氟甲基酮,Z-ATAD-FMK)对大鼠癫痫持续状态(status epilepticus,SE)后海马Caspase-12表达及神经细胞损伤的影响。方法:80只雄性SD大鼠,随机分成正常对照组(A组,8只)、二甲基亚砜(DMSO)对照组(B组,24只)、SE组(C组,24只)、Z-ATAD-FMK预处理组(D组,24只)。后3组按时间点分成3个亚组,分别为12 h组、24 h组、72 h组,每亚组各8只。采用氯化锂-匹罗卡品法制作SE大鼠模型,B、C、D组均于造模前2 h分别于右侧脑室内注入DMSO 5μL、DMSO 5μL、Z-ATAD-FMK 5μL。采用免疫组化法检测大鼠海马Caspase-12蛋白的表达变化;光镜和电镜下分别观察大鼠海马病理学和神经细胞超微结构的改变情况。结果:A组和B组大鼠海马CA1区均有少量Caspase-12蛋白表达,但A组与B组之间差异无统计学意义(P>0.05);C组大鼠海马CA1区Caspase-12蛋白表达在SE后12 h开始增加,24 h进一步升高,于72 h达最高点,且均较A和B组各时间点显著增高(P<0.01);D组24 h、72 h时间点Caspase-12蛋白表达的动态变化与C组相似,但均较C组明显降低(P<0.05或P<0.01)。光镜和电镜观察结果显示SE后D组海马神经细胞的损伤情况较C组减轻。结论:Z-ATAD-FMK能选择性地阻断Caspase-12的活性,并使神经元损伤减轻,提示Z-ATAD-FMK对惊厥性脑损伤可能有保护作用。 展开更多
关键词 癫痫持续状态 内质网应激 caspase-12 caspase-12抑制剂 超微结构 脑损伤 大鼠
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电针内关、百会穴对脑缺血/再灌注大鼠GRP78和Caspase-12基因表达的影响 被引量:24
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作者 沈菁 雷晓明 +5 位作者 宋洋 谭杏 刘琴 戴丽雯 李文慧 郁洁 《湖南中医药大学学报》 CAS 2016年第2期54-57,共4页
目的观察电针内关、百会穴对脑缺血/再灌注(Ischemia/Reperfusion,I/R)大鼠脑GRP78和Caspase-12基因表达的影响,探讨针刺发挥脑保护作用是否与内质网应激凋亡通路有关。方法 100只大鼠随机分为5组,每组20只,即正常组、假手术组、手术造... 目的观察电针内关、百会穴对脑缺血/再灌注(Ischemia/Reperfusion,I/R)大鼠脑GRP78和Caspase-12基因表达的影响,探讨针刺发挥脑保护作用是否与内质网应激凋亡通路有关。方法 100只大鼠随机分为5组,每组20只,即正常组、假手术组、手术造模组、依达拉奉组和针刺干预组。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)脑I/R模型。采用TUNEL染色法,检测大鼠神经细胞凋亡指数;采用实时定量多聚酶链式反应(Real-Time polymerase chain reaction,RT-PCR),检测GRP78、Caspase-12 mRNA表达。结果与正常组和假手术组相比,手术造模组、依达拉奉组和针刺干预组大鼠细胞凋亡指数升高,GRP78和Caspase-12 mRNA表达增多,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与手术造模组相比,依达拉奉组和针刺干预组大鼠细胞凋亡指数和Caspase-12 mRNA表达均明显降低(P<0.01),GRP78 mRNA表达明显升高(P<0.01);与依达拉奉组相比,针刺干预组大鼠各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论针刺内关、百会穴可以有效抑制脑缺血神经元细胞凋亡,其保护机制可能上调内质网应激保护性GRP78表达,同时抑制促凋亡Caspase-12表达有关。 展开更多
关键词 细胞凋亡 电针 脑缺血/再灌注损伤 百会 内关 GRP78 caspase-12
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脂肪来源的干细胞移植对大鼠脑缺血后神经细胞凋亡及Bcl-2、caspase-12表达的影响 被引量:9
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作者 林小惠 刘楠 +5 位作者 肖迎春 陈荣华 杜厚伟 王杰华 张逸仙 刘德山 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期40-43,共4页
目的:探讨脂肪来源的干细胞(ADSCs)移植对大鼠脑缺血后神经细胞凋亡的影响及其机制研究。方法:72只清洁级成年雄性Sprague-Darley大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、局灶性脑缺血组(MCAO组)、溶剂对照组(Vehicle组)和ADSC治疗组(ADSC组),... 目的:探讨脂肪来源的干细胞(ADSCs)移植对大鼠脑缺血后神经细胞凋亡的影响及其机制研究。方法:72只清洁级成年雄性Sprague-Darley大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、局灶性脑缺血组(MCAO组)、溶剂对照组(Vehicle组)和ADSC治疗组(ADSC组),每组18只,采用改良Zea-Longa线栓法制作大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,ADSC组于造模成功1d后经侧脑室注射入30μL的ADSC细胞悬液(内含1×106个细胞),分别于术后4d、7d和14d采用TUNEL法检测缺血区神经细胞凋亡,用免疫组织化学法和RT-PCR法检测脑组织Bcl-2、caspase-12表达的变化。结果:大鼠脑缺血后缺血周边区可见大量细胞凋亡,ADSC组较MCAO组和Vehicle组细胞凋亡明显减少(P<0.05);ADSC组术后4d、7d和14d脑组织中Bcl-2的表达水平较MCAO组和Vehicle组明显增高(P<0.05),而caspase-12的表达水平较MCAO组和Vehicle组明显降低(P<0.05)。结论:ADSCs移植减少脑缺血大鼠缺血区细胞凋亡,其机制可能与促进Bcl-2的表达和抑制caspase-12的表达有关。 展开更多
关键词 脂肪来源的干细胞 脑缺血 细胞凋亡 BCL-2 caspase-12
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强心胶囊对慢性心力衰竭大鼠凋亡相关蛋白Caspase-12表达的影响 被引量:8
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作者 陈晶 侯志涛 +2 位作者 叶婷 张梦 张宇 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第7期1831-1834,I0017,共5页
目的:观察强心胶囊对慢性心力衰竭大鼠心肌组织细胞凋亡及Caspase-12蛋白表达的影响,探讨强心胶囊抑制心肌细胞凋亡的可能作用机制。方法:雄性SD大鼠100只,随机选取10只作为空白对照组,其余90只大鼠尾静脉注射阿霉素复制慢性心力衰竭模... 目的:观察强心胶囊对慢性心力衰竭大鼠心肌组织细胞凋亡及Caspase-12蛋白表达的影响,探讨强心胶囊抑制心肌细胞凋亡的可能作用机制。方法:雄性SD大鼠100只,随机选取10只作为空白对照组,其余90只大鼠尾静脉注射阿霉素复制慢性心力衰竭模型,空白对照组尾静脉注射等容积的生理盐水。6周后,将造模成功大鼠65只随机分为模型组、西药组、强心胶囊低剂量组、中剂量组、髙剂量组,加之前的空白组,共6组。强心胶囊低、中、高剂量组分别给予0.66、1.32、2.64 g/kg强心胶囊溶液灌胃,西药组给予1.8 mg/kg依那普利溶液灌胃,模型组和空白组给予等容积0.9%生理盐水灌胃,每日1次,连续给药4周。治疗结束后,采用TUNEL法测定心肌细胞凋亡情况,Western blot检测Caspase-12蛋白表达情况。结果:与空白对照组比较,模型组凋亡细胞个数明显升高(P<0.01);与模型组比较,西药组、强心胶囊中、高剂量组的凋亡细胞个数明显降低(P<0.01);与空白组比较,模型组Caspase-12蛋白表达明显升高(P<0.01);与模型组比较,西药组、强心胶囊中、高剂量组Caspase-12蛋白表达显著降低(P<0.01);与西药组比较,强心胶囊低、中剂量组Caspase-12蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论:Caspase-12蛋白参与慢性心力衰竭的发病;强心胶囊可降低慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡程度,与该药降低Caspase-12蛋白表达有关。 展开更多
关键词 强心胶囊 慢性心力衰竭 细胞凋亡 caspase-12
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载脂蛋白A-I模拟肽D4F通过抑制caspase-12减轻氧化低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞凋亡 被引量:6
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作者 田华 李严严 +6 位作者 丁明德 杨娜娜 焦鹏 桑慧 方永奇 姚树桐 秦树存 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1750-1755,共6页
目的:探讨载脂蛋白A-I(apolipoprotein A-I,Apo A-I)模拟肽D4F对氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的巨噬细胞凋亡和内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)凋亡途径关键分子caspase-12的影响,并... 目的:探讨载脂蛋白A-I(apolipoprotein A-I,Apo A-I)模拟肽D4F对氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的巨噬细胞凋亡和内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)凋亡途径关键分子caspase-12的影响,并阐明其可能的分子机制。方法:体外培养RAW264.7巨噬细胞,给予12.5、25和50 mg/L D4F、5 mmol/L ERS抑制剂4-苯丁酸(4-phenylbutyric acid,PBA)或5μmol/L二亚苯基碘鎓(diphenyleneiodonium,DPI)预处理1 h后,再加入100 mg/L ox-LDL或4 mg/L ERS诱导剂衣霉素(tunicamycin,TM)继续培养24 h。MTT法检测细胞活力;TUNEL法检测细胞凋亡情况;试剂盒测定细胞内丙二醛(malondialdehyde,MDA)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶活性;Western blot法检测caspase-12的表达变化。结果:与ERS抑制剂PBA相似,D4F可抑制ox-LDL或TM所致的巨噬细胞活力降低和凋亡,且呈浓度依赖性(P<0.05)。与氧化应激抑制剂DPI相似,D4F显著抑制ox-LDL诱导的氧化应激反应,表现为ROS和MDA生成减少(P<0.01)、SOD活性增加以及NADPH氧化酶活性降低(P<0.05);与PBA和DPI相似,D4F可减轻ox-LDL诱导的巨噬细胞caspase-12活化,且呈浓度依赖性(P<0.05);另外,D4F还可抑制TM诱导的caspase-12活化(P<0.05)。结论:D4F能够抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞凋亡,其机制至少部分是通过减轻氧化应激继而抑制caspase-12活化实现的。 展开更多
关键词 载脂蛋白A-I模拟肽D4F caspase-12 氧化低密度脂蛋白 巨噬细胞 细胞凋亡
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甘草黄酮对小鼠光老化皮肤中caspase-3、caspase-12表达的影响 被引量:7
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作者 宁舒鹏 杨桂兰 +3 位作者 王佳媚 白景瑞 龙朝钦 罗洋 《西北国防医学杂志》 CAS 2012年第3期234-236,共3页
目的:研究皮肤外用甘草黄酮对紫外线照射引起的小鼠光老化皮肤的影响。方法:BALB/C小鼠50只随机分成5组:模型组(A)、基质组(B)、甘草黄酮组(C)、薇诺娜组(D)、正常对照组(E),模拟UVB长期照射,造成皮肤光老化小鼠模型。B、C、D组照射同... 目的:研究皮肤外用甘草黄酮对紫外线照射引起的小鼠光老化皮肤的影响。方法:BALB/C小鼠50只随机分成5组:模型组(A)、基质组(B)、甘草黄酮组(C)、薇诺娜组(D)、正常对照组(E),模拟UVB长期照射,造成皮肤光老化小鼠模型。B、C、D组照射同时分别外用基质乳膏、甘草黄酮乳膏、薇诺娜防晒霜(SPF30,PA+++)。组织切片HE染色观察皮肤结构改变;以ELISA法测定皮肤组织caspasse-3、caspase-12含量。结果:A、B组小鼠皮肤组织caspasse-3、caspase-12含量明显增加,病理切片呈现明显光老化状态;C、D组cspasse-3、caspase-12含量与E组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:甘草黄酮乳膏对紫外线照射引起的小鼠皮肤光老化具有保护作用,其机制可能为甘草黄酮通过抑制caspase-12活化,进而阻断caspase-3的激活,抑制细胞的凋亡。 展开更多
关键词 光老化 甘草黄酮 caspase-3 caspase-12
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冬虫夏草对肾缺血-再灌注大鼠肾组织Caspase-12 mRNA和蛋白表达的影响 被引量:5
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作者 黄仁发 梁群卿 +4 位作者 程新 向少伟 马晓露 龙韵 吴金玉 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期39-44,共6页
目的观察冬虫夏草对肾缺血-再灌注(I/R)大鼠肾组织Caspase-12 mRNA和蛋白表达的影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、缺血-再灌注组(I/R组)和冬虫夏草(CS)组3组,采用摘除右肾夹闭左肾蒂60 min的方法复制I/R大鼠模型,sham组和I/... 目的观察冬虫夏草对肾缺血-再灌注(I/R)大鼠肾组织Caspase-12 mRNA和蛋白表达的影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、缺血-再灌注组(I/R组)和冬虫夏草(CS)组3组,采用摘除右肾夹闭左肾蒂60 min的方法复制I/R大鼠模型,sham组和I/R组大鼠再灌注后灌服生理盐水(2 mL/d);CS组再灌注后灌服冬虫夏草提取液[5 g/(kg·d)]。结果 sham组肾小球和肾小管结构基本正常,而I/R组可见肾小管坏死改变,各时间点半定量计分均高于sham组(P<0.01),而CS组肾小管病理改善,半定量计分均低于相同时间点I/R组(P<0.01);正常组和sham组肾组织可见少量的Caspase-12 mRNA和蛋白表达,I/R可诱导Caspase-12 mRNA和蛋白表达上调,各时间点I/R组Caspase-12 mRNA和蛋白表达显著高于sham组(P<0.01)。CS组Caspase-12 mRNA和蛋白水平表达显著低于相同时间点I/R组(P<0.01)。sham组有极少量的肾小管上皮细胞凋亡,I/R可诱导肾小管上皮细胞凋亡显著增多,各时间点I/R组凋亡比例均高于sham组(P<0.01),而CS组各时间点的凋亡比例均低于I/R组(P<0.01)。结论冬虫夏草通过下调肾组织中Caspase-12的表达,抑制内质网应激凋亡途径发挥肾保护作用。 展开更多
关键词 肾缺血-再灌注损伤 内质网应激 caspase-12 冬虫夏草
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左归降糖益肾方含药血浆对高糖培养小鼠足细胞凋亡及Caspase-12表达的影响 被引量:7
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作者 陈聪 吴勇军 +4 位作者 喻嵘 唐元 罗文娟 曾婧 张翔 《湖南中医药大学学报》 CAS 2015年第3期1-4,18,72,共6页
目的探讨在高糖作用下,体外培养的小鼠足细胞凋亡及内质网应激凋亡因子Caspase-12 m RNA和蛋白表达水平的变化及左归降糖益肾方含药血浆的调控作用。方法将体外培养的小鼠足细胞随机分为空白组(A组,25 mmol/L葡萄糖,10%空白血浆)、高糖... 目的探讨在高糖作用下,体外培养的小鼠足细胞凋亡及内质网应激凋亡因子Caspase-12 m RNA和蛋白表达水平的变化及左归降糖益肾方含药血浆的调控作用。方法将体外培养的小鼠足细胞随机分为空白组(A组,25 mmol/L葡萄糖,10%空白血浆)、高糖组(B组,200 mmol/L葡萄糖,10%空白血浆)、左归降糖益肾方含药血浆组(C组,200 mmol/L葡萄糖,10%含药血浆),4-苯基丁酸含药血浆组(D组,200 mmol/L葡萄糖,10%含药血浆)。培养48 h后,采用免疫荧光细胞化学法、流式细胞术检测足细胞凋亡情况;Western blot法、RT-PCR法分别检测Caspase-12蛋白或m RNA表达水平的变化。结果与A组比较:在高糖状态下B组足细胞凋亡率、Caspase-12 m RNA和蛋白的表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与B组比较:C组、D组足细胞凋亡率,Caspase-12 m RNA和蛋白的表达水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与C组比较:D组足细胞凋亡率降低,差异有统计学意义(P<0.05);但Caspase-12 m RNA和蛋白的表达水平,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 Caspase-12表达上调,是足细胞凋亡的分子机制之一;10%左归降糖益肾方含药血浆可能通过降低Caspase-12的表达水平,从而保护足细胞。 展开更多
关键词 高糖 足细胞 左归降糖益肾方 caspase-12
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益气活血通络解毒方通过抑制caspase-12减轻小鼠肺缺血/再灌注损伤 被引量:4
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作者 颜王鑫 宋冬 +6 位作者 项冰倩 罗梓垠 石璐 应磊 WU Yi-ming 陈大庆 王万铁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期804-810,共7页
目的:探讨益气活血通络解毒方(Yiqi Huoxue Tongluo Jiedu Fang,YHTJF)对小鼠肺部缺血/再灌注损伤及caspase-12表达的影响。方法:选取雄性10~12周龄C57BL/6J小鼠70只,体重21~25g,复制在体左肺缺血/再灌注(ischemia-reperfusion,I/... 目的:探讨益气活血通络解毒方(Yiqi Huoxue Tongluo Jiedu Fang,YHTJF)对小鼠肺部缺血/再灌注损伤及caspase-12表达的影响。方法:选取雄性10~12周龄C57BL/6J小鼠70只,体重21~25g,复制在体左肺缺血/再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤模型。随机分为7组:正常对照(control)组,羧甲基纤维素钠(carboxyl methyl cellulose-Na,CMC-Na)组,假手术(sham)组,I/R模型组,YHTJF低(low,L)、中(meddle,M)、高(high,H)浓度干预组。CMC-Na、sham和I/R组术前连续7 d腹腔注射CMC-Na溶液,YHTJF-L、YHTJF-M和YHTJF-H组术前连续7 d腹腔注射低、中、高浓度的YHTJF溶液。术毕,取左肺测定肺组织湿/干比值(W/D)及总肺含水量(TLW),行肺泡损伤评估(IQA);光、电镜观察肺组织形态学及超微结构改变;原位末端标记法(TUNEL)测组织细胞凋亡指数(AI);RT-PCR和Western blot分别检测caspase-12和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的mRNA和蛋白表达量。结果:相比control组,I/R组的W/D、TLW、IQA和AI明显升高(P〈0.01),肺组织形态学破坏显著,caspase-12和GRP78的mRNA和蛋白表达量增加(P〈0.01),而CMC-Na组和sham组各项指标与control组无明显差异;与I/R组比较,YHTJF-L组、YHTJF-M组和YHTJF-H组各项指标(除GRP78外)数值均下降(P〈0.01),组织损伤明显减轻。结论:YHTJF可有效减轻小鼠缺血/再灌注性肺损伤,其机制可能与其抑制caspase-12通路所致凋亡有关。 展开更多
关键词 益气活血通络解毒方 caspase-12 肺缺血/再灌注损伤 细胞凋亡
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内质网应激标志性蛋白Caspase-12在四氯化碳诱导大鼠肝纤维化逆转恢复模型中的作用研究 被引量:3
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作者 黄艳 李晓慧 +5 位作者 吴正升 王欢 汪应红 李海迪 孙仕伟 李俊 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第2期140-143,共4页
目的探讨内质网应激(ERS)标志性蛋白天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶12(Caspase-12)在大鼠肝纤维化形成与逆转恢复病程中的作用。方法建立四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化模型,苏木精-伊红染色和Masson胶原纤维染色观察肝脏病理组织学改变... 目的探讨内质网应激(ERS)标志性蛋白天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶12(Caspase-12)在大鼠肝纤维化形成与逆转恢复病程中的作用。方法建立四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化模型,苏木精-伊红染色和Masson胶原纤维染色观察肝脏病理组织学改变;免疫组化法检测肝组织肝纤维化标志性蛋白α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)以及钙激活蛋白酶(Calpain)的表达;Western blot检测不同时期肝脏组织中Calpain、Cleaved-Caspase-12和Cleaved-Caspase-3蛋白表达变化。结果肝脏病理组织学检测提示肝纤维化逆转恢复模型成功。免疫组化结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肝脏组织中α-SMA和Calpain抗原阳性细胞明显增多、着色明显加深,且多分布在肝实质肝细胞区域。逆转恢复期,α-SMA抗原表达阳性细胞与模型组比较逐渐下降。Calpain抗原表达阳性细胞主要分布在肝脏的小叶中央静脉、汇管区、肝窦间隙等部位。Western blot结果显示,模型组肝脏Calpain、Cleaved-Caspase-12和Cleaved-Caspase-3蛋白的表达与正常组相比显著升高。与模型组相比,逆转恢复2、4和8周组肝组织Calpain、Cleaved-Caspase-12和CleavedCaspase-3蛋白的表达降低,但仍高于正常组。结论 ERS标志性蛋白Caspase-12诱导的细胞凋亡存在于大鼠肝纤维化病程中,可能与肝纤维化的发生、发展和恢复逆转密切相关。 展开更多
关键词 肝纤维化 内质网应激 凋亡 CALPAIN caspase-12
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氧化苦参碱对大鼠局灶性脑缺血再灌注后caspase-12表达的影响 被引量:6
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作者 付燕燕 段静雨 宋远见 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第47期40-41,共2页
目的探讨氧化苦参碱(OMT)对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用及机制。方法取150只SD雄性大鼠制作局灶性脑缺血再灌注后随机分为模型组、OMT组、假手术组各50只,分别采用免疫组化、RT-PCR技术检测各组caspase-12蛋白和mRNA的表达... 目的探讨氧化苦参碱(OMT)对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用及机制。方法取150只SD雄性大鼠制作局灶性脑缺血再灌注后随机分为模型组、OMT组、假手术组各50只,分别采用免疫组化、RT-PCR技术检测各组caspase-12蛋白和mRNA的表达。结果模型组、OMT组随缺血再灌注时间延长,caspase-12蛋白和mRNA的表达逐渐增高;OMT组表达水平在各时间点均显著低于模型组。结论OMT可减轻脑缺血再灌注损伤,其机制为抑制内质网应激通路,减少神经元凋亡。 展开更多
关键词 苦参碱 脑缺血再灌注 内质网 caspase-12
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CCl_4诱导大鼠肝硬化形成过程中Caspase-12蛋白表达与肝细胞凋亡的相关性 被引量:5
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作者 慕永平 刘平 +3 位作者 都广礼 王磊 龙爱华 李风华 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第2期132-137,共6页
目的:探讨CCl_4大鼠肝硬化形成过程中Caspase-12蛋白表达与肝细胞凋亡的相关性.方法:首次CCl_4 3 mL/kg sc,以后500 mL/L CCl_4橄榄油溶液2 mL/kg sc,2次/wk,共计12 wk制备大鼠肝硬化模型.设4wk、8wk、12 wk 3个时间点,动态观察肝细胞... 目的:探讨CCl_4大鼠肝硬化形成过程中Caspase-12蛋白表达与肝细胞凋亡的相关性.方法:首次CCl_4 3 mL/kg sc,以后500 mL/L CCl_4橄榄油溶液2 mL/kg sc,2次/wk,共计12 wk制备大鼠肝硬化模型.设4wk、8wk、12 wk 3个时间点,动态观察肝细胞凋亡指数、肝组织Caspase-12免疫组织化学及蛋白表达.结果:模型大鼠4wk时呈典型的急性肝损伤改变,8wk时大鼠呈典型的慢性肝损伤肝纤维化的病理改变,12wk时已形成肝硬化;随着肝损伤加重和肝硬化形成,肝细胞凋亡指数显著增加,模型对照4wk与正常组、模型对照8 wk比较有显著差异(70.4±11.59 vs 9.6±1.14,95.8±10.94,P<0.01),模型对照12wk与模型对照8wk比较有统计学意义(122.8±17.51 vs 95.8±10.94,P<0.05).Caspase-12蛋白表达亦显著增加,模型对照4wk与正常组、模型对照8wk比较有显著差异(0.071±0.014 vs 0.014±0.007,1.172±0.028,P<0.01),模型对照12 wk与模型对照8wk比较亦有显著差异(1.84±0.083 vs 1.172±0.028,P<0.01):且肝细胞凋亡指数和Caspase-12蛋白表达量之间呈正相关(r=0.89,t=9.125,P<0.01).结论:内质网凋亡通路参与CCl_4大鼠肝硬化形成过程中肝细胞凋亡事件,其关键的凋亡酶Caspage-12蛋白表达量基本能够反映肝细胞的凋亡程度. 展开更多
关键词 肝硬化 凋亡 caspase-12蛋白
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caspase-12在胎鼠宫内缺血/再灌注后脑神经元凋亡中的作用 被引量:5
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作者 张建华 赵泽燕 张华 《重庆医学》 CAS CSCD 2007年第9期834-835,共2页
目的探讨caspase-12与内质网应激介导的宫内缺血/再灌注损害后胎鼠脑组织神经元凋亡的关系。方法制作胎鼠宫内缺血/再灌注损伤模型。取胎鼠脑组织行TUNEL染色,分析神经元凋亡情况。以免疫组化法检测海马回CA1区caspase-12蛋白的表达情... 目的探讨caspase-12与内质网应激介导的宫内缺血/再灌注损害后胎鼠脑组织神经元凋亡的关系。方法制作胎鼠宫内缺血/再灌注损伤模型。取胎鼠脑组织行TUNEL染色,分析神经元凋亡情况。以免疫组化法检测海马回CA1区caspase-12蛋白的表达情况。结果缺血15min再灌注3、6、12、24h,海马回CA1区TUNEL阳性神经元数分别为(43.6±11.4)(、64.4±9.3)(、74.2±12.1)和(97.3±8.9)个/mm2;随着再灌注时间的延长,TUNEL阳性神经元数明显增加,于再灌注24h达高峰。与血流未恢复时的(20.2±9.9)个/mm2比较,差异有统计学意义(P<0.001)。缺血15min再灌注3、6、12、24h,海马回CA1区caspase-12的表达分别为0.41±0.12、0.51±0.21、0.59±0.16和0.31±0.09,与对照组的0.01±0.01比较,差异有统计学意义(P<0.001),表达高峰于再灌注12h出现。结论caspase-12活化是胎鼠宫内缺血缺氧时内质网应激介导脑神经元凋亡的重要环节。 展开更多
关键词 眙鼠 缺血/再灌注 凋亡 caspase-12
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当归补血汤对内质网应激特有Caspase-12凋亡途径影响 被引量:8
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作者 张思泉 帅瑜 +1 位作者 张莹雯 沈鑫 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2018年第3期20-24,共5页
目的:研究当归补血汤对内质网应激特有的Caspase-12凋亡途径的影响,探讨当归补血汤对肾脏的保护机制。方法:60只SD大鼠腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)结合高脂高糖饮食建立大鼠糖尿病肾病模型(DN),喂养8周后,观察大鼠的毛色、精神状... 目的:研究当归补血汤对内质网应激特有的Caspase-12凋亡途径的影响,探讨当归补血汤对肾脏的保护机制。方法:60只SD大鼠腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)结合高脂高糖饮食建立大鼠糖尿病肾病模型(DN),喂养8周后,观察大鼠的毛色、精神状态等一般状态;酶偶联比色法检测尿蛋白、BUN、尿肌酐等反应肾功能的相关指标;光镜观察其肾脏病理变化;RT-PCR、western Blot及免疫组化检测GRP78、Caspase-12的蛋白及m RNA表达水平;TUNEL检测肾组织细胞凋亡情况。结果:DN组大鼠空腹血糖、尿蛋白、BUN等明显升高,肾功能受损严重,肾脏组织GRP78、Caspase-12的蛋白及m RNA含量增加,光镜下肾脏结构病变明显,肾组织细胞凋亡率增高;当归补血汤治疗后肾功能损伤减轻,GRP78、Caspase-12的蛋白及m RNA含量降低,光镜下肾组织病变改善,大鼠肾组织凋亡率降低。结论:当归补血汤能抑制内质网应激特有Caspase-12凋亡途径,改善糖尿病肾病大鼠肾功能,减少肾组织过度凋亡。 展开更多
关键词 当归补血汤 内质网应激 糖尿病肾病 GRP78 caspase-12凋亡途径
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大鼠脊髓缺血再灌注损伤后caspase-12表达与细胞凋亡 被引量:3
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作者 黄柏南 孙善全 +2 位作者 汪克建 黄德胜 陈海 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期222-225,F0003,共5页
目的:观察大鼠脊髓缺血再灌注损伤过程中细胞凋亡、caspase-12的表达变化规律,以探讨其分子机制。方法:采用自制压迫装置制备脊髓压迫缺血再灌注模型。运用形态学、分子生物学等方法,分别于缺血再灌注后3、7、11、23和47h,观察脊髓缺血... 目的:观察大鼠脊髓缺血再灌注损伤过程中细胞凋亡、caspase-12的表达变化规律,以探讨其分子机制。方法:采用自制压迫装置制备脊髓压迫缺血再灌注模型。运用形态学、分子生物学等方法,分别于缺血再灌注后3、7、11、23和47h,观察脊髓缺血再灌注损伤后,脊髓的病理变化和内质网的形态学改变、细胞凋亡及caspase-12的表达变化的规律。结果:脊髓缺血再灌注3h后,出现不同程度的细胞肿胀,神经元退行性变及内质网结构变化;随着再灌注时间的延长,神经元和神经胶质细胞凋亡数明显增加,并伴有caspase-12的表达增强;capspase-12表达与细胞凋亡的时空变化规律相一致。结论:在脊髓缺血再灌注过程中神经细胞凋亡是引起脊髓继发性损伤的主要病理因素,caspase-12可能参与了脊髓缺血再灌注损伤所导致的细胞凋亡。 展开更多
关键词 脊髓 缺血 再灌注损伤 凋亡 caspase-12
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茵陈蒿汤对肝纤维化大鼠肝组织内质网应激caspase-12通路的影响 被引量:6
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作者 李木松 张贵贤 +1 位作者 魏媛媛 刘震霞 《世界中医药》 CAS 2016年第9期1839-1841,共3页
目的:观察茵陈蒿汤对胆汁瘀积性肝纤维化大鼠肝组织内质网应激caspase-12通路的影响,探讨茵陈蒿汤抗胆汁瘀积性肝纤维的作用机制。方法:将35只SD大鼠分为假手术组和造模组,采用胆总管结扎法复制胆汁瘀积性肝纤维化大鼠模型,1周后将造模... 目的:观察茵陈蒿汤对胆汁瘀积性肝纤维化大鼠肝组织内质网应激caspase-12通路的影响,探讨茵陈蒿汤抗胆汁瘀积性肝纤维的作用机制。方法:将35只SD大鼠分为假手术组和造模组,采用胆总管结扎法复制胆汁瘀积性肝纤维化大鼠模型,1周后将造模组动物分为模型组和中药组,中药组予以3.5 g/kg茵陈蒿汤灌胃,4周后处死动物,HE、Masson染色观察肝脏组织病理学变化;Western blot法检测各组大鼠肝脏GRP78、e IF2α和Caspase-12蛋白表达变化。结果:肝脏组织病理学变化显示模型组大鼠肝纤维化程度较假手术组明显增加(P<0.05),中药组大鼠肝纤维化程度较模型组减轻(P<0.05),但仍重于假手术组。Western blot结果显示,模型组肝脏GRP78、e IF2α和Caspase-12蛋白的表达与假手术组相比显著升高(P<0.01),中药组较模型组e IF2α和Caspase-12明显降低(P<0.01)。结论:抑制e IF2α和Caspase-12的活化,从而减少肝细胞凋亡,进而抑制内质网应激在胆汁瘀积性肝纤维化中的促进作用,是茵陈蒿汤抗胆汁瘀积性肝纤维化的作用机制之一。 展开更多
关键词 胆汁瘀积性肝纤维化 茵陈蒿汤 内质网应激 细胞凋亡 caspase-12
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茵陈蒿汤对酒精性肝纤维化大鼠肝组织Caspase-12通路的影响 被引量:6
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作者 李木松 张贵贤 +2 位作者 魏媛媛 秦维 陈晖 《现代中西医结合杂志》 CAS 2019年第6期571-574,617,共5页
目的观察茵陈蒿汤对酒精性肝纤维化大鼠内质网应激的同型半胱氨酸(Hcy)-真核生物翻译起始因子(eIF2α)-Caspase-12通路引起的细胞凋亡的影响,探讨茵陈蒿汤防治酒精性肝纤维的作用机制。方法将40只SD大鼠随机分为空白组、模型组和茵陈蒿... 目的观察茵陈蒿汤对酒精性肝纤维化大鼠内质网应激的同型半胱氨酸(Hcy)-真核生物翻译起始因子(eIF2α)-Caspase-12通路引起的细胞凋亡的影响,探讨茵陈蒿汤防治酒精性肝纤维的作用机制。方法将40只SD大鼠随机分为空白组、模型组和茵陈蒿汤组,模型组和茵陈蒿汤组采用乙醇灌胃的方法复制酒精性肝纤维化大鼠模型,茵陈蒿汤组同时给予3. 5g/kg茵陈蒿汤灌胃,10周后处死动物,采用赖氏法检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,采用HE和Masson三色染色观察各组大鼠肝脏组织病理学表现,采用Real-Time PCR法检测各组大鼠肝脏组织中GRP78、eIF-2α、Caspase-12mRNA表达情况。结果模型组大鼠血清ALT、AST水平明显高于空白组(P均<0. 05),茵陈蒿汤组大鼠血清ALT、AST水平均明显低于模型组(P均<0. 05)。肝脏组织病理学显示,模型组大鼠出现明显肝纤维化表现,茵陈蒿汤组大鼠肝纤维化程度较模型组明显减轻。模型组大鼠肝脏组织中GRP78、eIF-2α、Caspase-12mRNA表达水平均明显高于空白组(P均<0. 05),茵陈蒿汤组大鼠肝脏组织中GRP78、eIF-2α、Caspase-12mRNA表达水平均明显低于模型组(P均<0. 05)。结论茵陈蒿汤抑制GRP78、eIF-2α、Caspase-12的活性可能是其抗酒精性肝纤维化的作用机制之一。 展开更多
关键词 酒精肝纤维化 茵陈蒿汤 内质网应激 caspase-12
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