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RAA-LFD检测RHdV-2方法的建立
1
作者 刘立荣 许高琳 +2 位作者 郑娱 游泽龙 王全溪 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期779-785,共7页
【目的】建立基于重组酶介导的核酸等温扩增(RAA)的侧流层析试纸条(LFD)方法,用于快速诊断兔出血症病毒(RHdV)2型(RHdV-2)。【方法】采用生物信息学软件分析RHdV-2、RHdV 1型(RHdV^(-1))基因组,筛选RHdV-2特异且保守的片段,设计RAA-LFD... 【目的】建立基于重组酶介导的核酸等温扩增(RAA)的侧流层析试纸条(LFD)方法,用于快速诊断兔出血症病毒(RHdV)2型(RHdV-2)。【方法】采用生物信息学软件分析RHdV-2、RHdV 1型(RHdV^(-1))基因组,筛选RHdV-2特异且保守的片段,设计RAA-LFD探针与特异性引物,以筛选最适引物及其浓度;对RAA-LFD检测的最适反应温度和时间进行优化,并对该方法的灵敏性、特异性、重复性进行评价及临床样品检测。【结果】同源性分析表明,RHdV-2的VP60基因存在特异且保守的序列。基于VP60基因设计3对引物,发现上游引物序列为5'-TCATTTGTACCCTTCAGCGGTACCACCATCC-3'、下游引物序列为5'-CCCGGCTGTTGTCTGGTTTATGCCATTT-3'的扩增效果最好,引物与探针混合液的最适浓度为5.000μmol·L^(-1)。用LFD-RAA方法检测RHdV-2的最适反应温度为39℃,最适反应时间为30 min。敏感性检测结果显示:以RHdV-2 VP60重组质粒为模板的最低检出量为6.7×103 ng·μL^(-1)。用建立的RAA-LFD方法对RHdV^(-1)的检测结果呈阴性,对RHdV-2的检测结果呈阳性,表明该方法的特异性良好。重复性检测结果显示,同一批次和不同批次试剂盒的检测结果均一致,表明重复性好。31份临床样品检测结果显示,5份为RHdV-2阳性样品。【结论】建立的检测RHdV-2的RAA-LFD方法具有简捷、易操作的特点,适合养殖场对RHdV-2的快速诊断。 展开更多
关键词 兔出血症病毒 重组酶介导的核酸等温扩增 侧流层析试纸条 诊断方法
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免疫磁珠-PCR试纸条快速检测食品中牛源成分方法的建立 被引量：3
2
作者 赵良娟 李宗梦 +2 位作者 王淞 张宏伟 郑文杰 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2018年第3期127-131,共5页
建立食品中牛成分快速检测的免疫磁珠-PCR试纸条方法。免疫磁珠提取食品中核酸,设计牛特异性引物,建立牛成分快速检测的PCR-试纸条方法。验证方法的特异性、灵敏度和稳定性。该方法检测灵敏度0.01%,能够从食品中扩增出561 bp特异性DNA... 建立食品中牛成分快速检测的免疫磁珠-PCR试纸条方法。免疫磁珠提取食品中核酸,设计牛特异性引物,建立牛成分快速检测的PCR-试纸条方法。验证方法的特异性、灵敏度和稳定性。该方法检测灵敏度0.01%,能够从食品中扩增出561 bp特异性DNA片段。建立的食品中牛成分检测的免疫磁珠-PCR试纸条法特异性好,灵敏度高,简便,快速,是食品中牛成分检测的有效方法。 展开更多
关键词 磁珠分离 牛成分 食品 快速检测 PCR-试纸条法
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尿微量白蛋白试纸法在尿微量白蛋白检测中的临床价值 被引量：6
3
作者 杜锦 潘长玉 《中国全科医学》 CAS CSCD 2006年第24期2031-2032,共2页
目的评价尿微量白蛋白测试条(Micral-testⅡ)半定量测定尿微量白蛋白的有效性及临床应用价值。方法收集新鲜尿标本119份,分别采用免疫印迹法及尿微量白蛋白试纸法(简称试纸法,采用德国罗氏公司生产的Micral-testⅡ试纸)测定尿标本微量... 目的评价尿微量白蛋白测试条(Micral-testⅡ)半定量测定尿微量白蛋白的有效性及临床应用价值。方法收集新鲜尿标本119份,分别采用免疫印迹法及尿微量白蛋白试纸法(简称试纸法,采用德国罗氏公司生产的Micral-testⅡ试纸)测定尿标本微量白蛋白。以免疫印迹法检测结果为标准,以尿白蛋白半定量测定≥20mg/L为阳性诊断标准1,≥50mg/L为阳性诊断标准2,计算试纸法检测尿微量白蛋白的灵敏度、特异度、漏诊率、误诊率、Yuden指数及阳性实验似然比。结果以免疫印迹法测定结果为标准,按标准1试纸法检测尿微量白蛋白的灵敏度为92%,特异度为63%,漏诊率为8%,误诊率为37%。按标准2检测尿微量白蛋白的灵敏度为78%,特异度为89%,漏诊率为11%,误诊率为22%。结论利用德国罗氏诊断公司生产的Micral-testⅡ试纸检测尿微量白蛋白经济、迅捷,可准确地定性测定尿微量白蛋白,适于临床大规模筛查。 展开更多
关键词 微量白蛋白尿 检测方法 试纸法
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胶体染料试纸条法快速诊断家畜血吸虫病的研究 被引量：6
4
作者 何伟 朱荫昌 +3 位作者 徐明 曹国群 华万全 叶萍 《中国兽医寄生虫病》 2002年第3期1-3,3,共4页
为了适应现场家畜血吸虫病的筛查需要 ,设计了简便快速的胶体染料试纸条诊断技术用于检测家畜血清中的抗血吸虫抗体 ,以该方法检测血吸虫病牛、猪血清 83份 ,其结果为阳性检出率 1 0 0 %,健康牛、猪血清 73份的检测结果为阴性符合率分别... 为了适应现场家畜血吸虫病的筛查需要 ,设计了简便快速的胶体染料试纸条诊断技术用于检测家畜血清中的抗血吸虫抗体 ,以该方法检测血吸虫病牛、猪血清 83份 ,其结果为阳性检出率 1 0 0 %,健康牛、猪血清 73份的检测结果为阴性符合率分别为 95 .3 %和 94.0 %,与感染肝片形吸虫的牛、羊血清 1 6份的交叉反应率为 1 8.8%。表明本方法敏感性高 。 展开更多
关键词 胶体染料试纸条法 快速诊断 日本血吸虫病 家畜
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试带法尿蛋白定性试验临床应用价值的探讨
5
作者 谈介凡 万卫红 +2 位作者 曹建林 华浩根 林光 《遵义医学院学报》 1993年第3期17-19,共3页
本文测定了20例正常人、439例不同病因住院病人及24例原发性肾小球疾病病人尿蛋白含量,比较了磺柳酸法与试带法的的测定结果。试带法仅对白蛋白敏感,对其它血浆蛋白基本无反应,阳性标本尿蛋白的检出率仅64.1％。建议用磺柳酸法或其它敏... 本文测定了20例正常人、439例不同病因住院病人及24例原发性肾小球疾病病人尿蛋白含量,比较了磺柳酸法与试带法的的测定结果。试带法仅对白蛋白敏感,对其它血浆蛋白基本无反应,阳性标本尿蛋白的检出率仅64.1％。建议用磺柳酸法或其它敏感方法与试带法一起作为尿蛋白筛选试验.并讨论了两法同测的临床意义。 展开更多
关键词 蛋白尿 试带法 磺柳酸法
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一种食品中亚硝酸盐含量快速测定方法的研究 被引量：7
6
作者 刘静 李月娟 +1 位作者 许敬东 韩玲 《中国酿造》 CAS 北大核心 2015年第1期156-159,共4页
为了寻找一种食品中亚硝酸盐含量的快速测定方法,利用亚硝酸盐和盐酸间苯二胺发生重氮化偶联反应的原理,以定性中速滤纸为原料,通过在不同质量浓度的偶联试剂中浸泡,采用不同的试纸干燥法,最终确定了试纸显色的最佳条件为:定性中速滤纸... 为了寻找一种食品中亚硝酸盐含量的快速测定方法,利用亚硝酸盐和盐酸间苯二胺发生重氮化偶联反应的原理,以定性中速滤纸为原料,通过在不同质量浓度的偶联试剂中浸泡,采用不同的试纸干燥法,最终确定了试纸显色的最佳条件为:定性中速滤纸在30.0 g/L盐酸间苯二胺中浸泡20 min,经40℃真空干燥后,低温避光条件下密封保存。此法可快速对食品中的亚硝酸盐进行检测,同时检出限较低,实验所用试剂易得、操作简单,所用试纸携带方便,成本低廉,具有较高的应用价值和广阔的市场开发前景。 展开更多
关键词 亚硝酸盐 试纸法 快速测定 检出限
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MIRA-LFD鉴别肉制品中鸭源性成分的 方法研究 被引量：1
7
作者 尚柯 张敏 +5 位作者 张彪 王巍 段庆梓 张玉 雍溶 叶梅 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2021年第19期179-186,共8页
传统的肉制品动物源性成分检测对检测人员操作水平及试验条件等方面要求较高,不适于基层检测需要。多酶恒温快速扩增技术(multienzyme isothermal rapid amplification,MIRA)是一种新型的核酸扩增方式,整个反应在37℃条件下即可完成,相... 传统的肉制品动物源性成分检测对检测人员操作水平及试验条件等方面要求较高,不适于基层检测需要。多酶恒温快速扩增技术(multienzyme isothermal rapid amplification,MIRA)是一种新型的核酸扩增方式,整个反应在37℃条件下即可完成,相比昂贵的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)仪器,检测成本以及试验条件要求明显降低。该研究通过结合多酶恒温快速扩增技术与侧向流层析技术(lateral flow dipstick,LFD),建立一种鸭源性成分多酶恒温侧流式扩增技术(MIRA-LFD)的快速检测方法,并对其特异性、检出性以及应用的可行性进行评价。 展开更多
关键词 物种鉴定 鸭源性成分 多酶恒温快速扩增技术 侧向流层析技术 方法考察
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试纸法在食品安全快速检测中的应用研究 被引量：2
8
作者 黄洁 何金珊 +1 位作者 陈文杰 邵伟伟 《现代食品》 2021年第11期71-73,共3页
食品安全监管是国民健康的重要保障,快速检测技术操作简便、检测时间短、检测成本低,在现代食品安全监管中得到广泛应用,且成效显著。其中,试纸法在多种检测技术中占有重要地位,文章分析了试纸法在食品安全快速检测中的优势及存在的问题... 食品安全监管是国民健康的重要保障,快速检测技术操作简便、检测时间短、检测成本低,在现代食品安全监管中得到广泛应用,且成效显著。其中,试纸法在多种检测技术中占有重要地位,文章分析了试纸法在食品安全快速检测中的优势及存在的问题,并提出了相应建议,以期为后续学者的深入探讨提供理论依据。 展开更多
关键词 试纸法 食品安全 快速检测 优势
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不同流行程度下日本血吸虫病血清学诊断方法方法的Meta分析 被引量：9
9
作者 王鑫瑶 杨坤 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期18-25,29,共9页
目的通过Meta分析,综合评价不同流行程度下间接血凝实验(IHA)、酶联免疫吸附测定(ELISA)和胶体染料试纸条法(DDIA)的日本血吸虫病诊断效果。方法通过文献检索,按照纳入和排除标准建立数据库,采用Meta-disc和R软件进行阈值检验、异质性... 目的通过Meta分析,综合评价不同流行程度下间接血凝实验(IHA)、酶联免疫吸附测定(ELISA)和胶体染料试纸条法(DDIA)的日本血吸虫病诊断效果。方法通过文献检索,按照纳入和排除标准建立数据库,采用Meta-disc和R软件进行阈值检验、异质性检验、效应量加权定量合并及SROC曲线拟合等Meta分析。结果共有60篇文献符合纳入标准。IHA在重、中度及低度流行区的灵敏度分别为0.84、0.76和0.94,特异度分别为0.73、0.64和0.73;ELISA在重、中度及低度流行区的灵敏度分别为0.88、0.80和0.93,特异度分别为0.59、0.59和0.62;DDIA在重、中度及低度流行区的灵敏度分别为0.93、0.81和0.93,特异度分别0.66、0.69和0.59。IHA、ELISA与DDIA的加权合并灵敏度分别为0.83、0.87和0.90;加权合并特异度为0.69、0.60和0.62。IHA、ELISA和DDIA的总体SROC曲线下面积分别为0.89、0.96和0.92。结论不同流行程度下,血吸虫病血清学诊断方法的检验效能存在一定差异。血吸虫病诊断试剂的灵敏度与特异度均需进一步提高。 展开更多
关键词 日本血吸虫病 间接血凝实验(IHA) 酶联免疫吸附测定(ELISA) 胶体染料试纸条法(DDIA) 灵敏度 特异度 检验效能 META分析
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