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Harmonization of SARS-CoV-2 antigen immunoassays:are they measuring the same“thing”?
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作者 Giuseppe Lippi Gian Luca Salvagno +1 位作者 Gianluca Gianfilippi Brandon Michael Henry 《Infectious Diseases Research》 2023年第1期5-9,共5页
Background:This study was planned to assess the accuracy and comparability of two commercially available,laboratory-based SARS-CoV-2(severe acute respiratory syndrome)antigen(Ag)immunoassays.Methods:We studied a cohor... Background:This study was planned to assess the accuracy and comparability of two commercially available,laboratory-based SARS-CoV-2(severe acute respiratory syndrome)antigen(Ag)immunoassays.Methods:We studied a cohort of subjects with acute SARS-CoV-2 infection,from whom a nasopharyngeal swab was taken and tested with a molecular assay(Altona Diagnostics RealStar SARS-CoV-2 RT-PCR Kit)and two laboratory-based,fully automated SARS-CoV-2 Ag immunoassays(Fujirebio Lumipulse G SARS-CoV-2 Ag and Roche Elecsys SARS-CoV-2 Ag).Results:The final population consisted in 93 subjects testing positive for SARS-CoV-2 RNA,34 with cycle threshold(Ct)values<29.5.The results of the two SARS-CoV-2 Ag immunoassays were significantly intercorrelated(r=0.77;P<0.001)in the entire cohort,though such correlation considerably improved in patients with high viral load(cycle threshold values<29.5:r=0.96;P<0.001).The accuracy for identifying samples with high viral load was excellent for both Lumipulse G SARS-CoV-2 Ag(AUC,0.99;P<0.001)and Elecsys SARS-CoV-2 Ag(AUC,0.99;P<0.001),with best cut-offs of 2.03 ng/mL for Lumipulse G SARS-CoV-2 Ag(1.00 sensitivity and 0.88 specificity)and 0.70 COI for Elecsys SARS-CoV-2 Ag(1.00 sensitivity and 0.80 specificity),respectively.Conclusion:The results of this study provide valuable support to usability of fully-automated,rapid,high throughput and accurate SARS-CoV-2 Ag immunoassays for complementing molecular assays. 展开更多
关键词 COVID-19 SARS-CoV-2 laboratory medicine diagnosis immunoassay
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β-受体激动剂类药物人工抗原合成方法研究进展
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作者 孙晓亮 王晓茵 +4 位作者 方汉卿 宋翠平 赵思俊 曹旭敏 李木子 《中国动物检疫》 CAS 2024年第2期42-46,85,共6页
开展动物性食品中β-受体激动剂监测,对保障食品安全具有重要意义。免疫分析技术操作快速、灵敏度高、检测成本低,被广泛用于大批量畜禽产品的快速筛查。抗体特性是免疫检测的核心,而人工抗原合成的质量直接影响特异性抗体性能。本文主... 开展动物性食品中β-受体激动剂监测,对保障食品安全具有重要意义。免疫分析技术操作快速、灵敏度高、检测成本低,被广泛用于大批量畜禽产品的快速筛查。抗体特性是免疫检测的核心,而人工抗原合成的质量直接影响特异性抗体性能。本文主要综述了碳二亚胺法、活泼酯法、混合酸酐法、重氮化法、戊二醛法等β-受体激动剂类药物人工抗原合成方法,以及紫外光谱法、核磁共振法等人工抗原鉴定方法,以期为免疫分析等相关工作研究提供参考。 展开更多
关键词 β-受体激动剂 免疫分析 人工抗原 合成
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高灵敏化学发光法特异性检测人血清促甲状腺激素方法的建立
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作者 冯杰 高艳红 +3 位作者 井三有 赵强 杨锐创 颜光涛 《标记免疫分析与临床》 CAS 2024年第1期157-161,共5页
目的 通过双位点夹心化学发光免疫分析原理,建立一种高灵敏度测定人血清促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone, TSH)的化学发光免疫分析方法。方法 将样本与预包被有抗促甲状腺激素(TSH)抗体的超顺磁珠,以及抗TSH-碱性磷酸结合物... 目的 通过双位点夹心化学发光免疫分析原理,建立一种高灵敏度测定人血清促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone, TSH)的化学发光免疫分析方法。方法 将样本与预包被有抗促甲状腺激素(TSH)抗体的超顺磁珠,以及抗TSH-碱性磷酸结合物添加到反应管中共孵育,待测样本中的TSH通过夹心法与磁珠和抗TSH-碱性磷酸结合物与形成双位点复合物。与磁珠结合的复合物吸附到磁场上,用缓冲液洗去未结合的物质。加入发光底物3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧环乙烷二钠盐[3-(2-spiroadamantane)-4-methoxy-4-(3-phosphoryloxy)-phenyl-1,2-dioxetane, AMPPD],测定相对光子强度(RLU),通过标准曲线计算待测样本中TSH的浓度。结果 本研究建立的TSH检测方法,最低检测限为0.003μIU/mL,批内CV小于1%,总CV小于3%,正确度样本实测值与靶值之间相对偏差均在±12.5%范围内,线性范围为0.005~100μIU/mL且相关系数(r)高于0.9900。开封稳定性试验的相对偏差<10%。结论 该方法检测血清TSH浓度具有灵敏度高、准确性好、线性范围广、稳定性强的优点,各项指标均达到临床检测要求,可以推广使用。 展开更多
关键词 促甲状腺激素 化学发光免疫分析法 灵敏度
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基于衍生化3-氨基-2-恶唑烷酮的夹心酶联免疫分析
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作者 张世伟 吴会玲 +6 位作者 周迎春 王炳志 杨星星 杜业刚 汤璐 冯荣虎 郭继平 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第6期271-276,共6页
建立一种3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)夹心免疫检测方法。通过1,6-己二醇连接2-硝基-4-羧基苯甲醛和生物素合成针对AOZ的新型衍生试剂。在样品前处理时加入衍生试剂可对AOZ进行衍生,衍生产率为89%。在酶标板上包被抗... 建立一种3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)夹心免疫检测方法。通过1,6-己二醇连接2-硝基-4-羧基苯甲醛和生物素合成针对AOZ的新型衍生试剂。在样品前处理时加入衍生试剂可对AOZ进行衍生,衍生产率为89%。在酶标板上包被抗AOZ单克隆抗体并以辣根过氧化物酶标记的亲和素或抗生物素抗体作为第二结合物可实现AOZ的夹心酶联免疫吸附检测(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)。从实际应用的角度,得到双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下两个表位的极限距离,分别为12Å和13Å,理想距离分别为16Å和17Å。在双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下的检出限分别达到1.8 pg/mL和0.8 pg/mL(以AOZ质量浓度计),相对于竞争ELISA,其灵敏度最高提高了25倍。平均回收率为73%~85%,平均相对标准偏差为9.0%。 展开更多
关键词 3-氨基-2-恶唑烷酮 夹心酶联免疫分析 表位间隔距离 辣根过氧化物酶标记亲和素
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电化学发光免疫测定技术对桥本氏甲状腺炎的灵敏性、特异性分析
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作者 王贵贤 魏旭明 杨明 《临床研究》 2024年第5期24-27,共4页
目的 探讨桥本氏甲状腺炎(HT)患者应用电化学发光免疫测定技术(ECLIA)的灵敏性、特异性。方法 选取2020年8月至2022年8月在河南新乡医学院第二附属医院检查的疑似HT患者共计68例,所有患者均接受ECLIA、放射免疫法(RIA)测定,以症状、病... 目的 探讨桥本氏甲状腺炎(HT)患者应用电化学发光免疫测定技术(ECLIA)的灵敏性、特异性。方法 选取2020年8月至2022年8月在河南新乡医学院第二附属医院检查的疑似HT患者共计68例,所有患者均接受ECLIA、放射免疫法(RIA)测定,以症状、病理检查及随访结果作为金标准,比较不同测定技术的测定结果、阳性率、诊断价值及测定时间。结果 ECLIA测定游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、促甲状腺激素(TSH)、抗甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、促甲状腺激素受体抗体(TRAb)水平较RIA更高,差异均有统计学意义(P <0.05);ECLIA测定FT3、FT4、TSH、TPOAb、TgAb、TRAb阳性率较RIA更高,差异均有统计学意义(P <0.05);ECLIA诊断灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确性、曲线下面积(AUC)分别为95.83%、95.00%、97.87%、90.48%、95.59%、0.861,RIA分别为79.17%、60.00%、82.61%、54.54%、73.53%、0.753,ECLIA较RIA更高,差异具有统计学意义(P <0.05);ECLIA平均测定时间时间较RIA更短,差异具有统计学意义(P <0.05)。结论 ECLIA用于HT患者灵敏性、特异性均较高,且可缩短测定时间。 展开更多
关键词 桥本氏甲状腺炎 电化学发光免疫测定技术 灵敏性 特异性
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化学发光免疫测定甲状腺功能在生化检验中的准确度分析
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作者 张黎 吴延东 张腾芳 《系统医学》 2024年第1期50-52,共3页
目的系统分析化学发光免疫测定甲状腺功能在生化检验中的准确度。方法选取2021年2月—2022年2月湖北省公安县人民医院收治的45例疑似甲状腺疾病患者作为研究对象,以最终的病理诊断结果作为金标准,分别对45例疑似甲状腺疾病患者开展放射... 目的系统分析化学发光免疫测定甲状腺功能在生化检验中的准确度。方法选取2021年2月—2022年2月湖北省公安县人民医院收治的45例疑似甲状腺疾病患者作为研究对象,以最终的病理诊断结果作为金标准,分别对45例疑似甲状腺疾病患者开展放射免疫分析法与化学发光免疫法进行检测,对比两种检查方法准确度、敏感度、特异度。结果化学发光免疫法的敏感度、准确度分别为97.50%、95.56%,高于放射免疫分析法的75.00%、73.33%,差异有统计学意义(χ^(2)=8.538、8.459,P均<0.05);化学发光免疫法的特异度为80%,高于放射免疫分析法的60.00%,差异无统计学意义(χ^(2)=0.476,P>0.05)。结论化学发光免疫法检测甲状腺疾病患者的敏感度、特异度、准确度均较高,可为临床医生诊断与治疗甲状腺疾病提供良好的新思路。 展开更多
关键词 化学发光免疫 甲状腺功能 生化检验 准确度
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牛乳β-乳球蛋白变异体检测方法研究进展
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作者 王亚玲 贾舸 +3 位作者 赵军英 乔为仓 张明辉 陈历俊 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第3期446-457,共12页
β-乳球蛋白(β-LG)是牛乳中重要的天然活性营养物质,也是牛乳中主要的过敏原之一。β-乳球蛋白约为乳清蛋白总量的50%,是牛乳中主要的乳清蛋白,具有较强的热敏感性和致敏性,在优质乳品工业中起关键作用。其不仅作为牛奶热处理强度的评... β-乳球蛋白(β-LG)是牛乳中重要的天然活性营养物质,也是牛乳中主要的过敏原之一。β-乳球蛋白约为乳清蛋白总量的50%,是牛乳中主要的乳清蛋白,具有较强的热敏感性和致敏性,在优质乳品工业中起关键作用。其不仅作为牛奶热处理强度的评估指标,还作为食品中牛乳过敏原的标志蛋白,有效识别和检测牛乳β-乳球蛋白非常重要。已报道的牛乳β-乳球蛋白有13种变异体,其中A和B是牛乳β-LG的常见变异体,且含量最高。根据不同的检测原理,文章简述近年来牛乳β-乳球蛋白变异体的三大类检测方法,总结电泳法、色谱法和免疫法的原理、优缺点及部分应用实例,重点介绍液相色谱法和毛细管电泳法两种定量方法,并展望牛乳β-乳球蛋白未来的发展方向。 展开更多
关键词 Β-乳球蛋白 变异体 色谱法 免疫法 电泳法
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抗球虫药的人工抗原合成及免疫分析方法研究进展
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作者 吴佳蓓 田恒旗 +5 位作者 胡骁飞 孙亚宁 邢云瑞 王琳 王成宾 王耀 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期347-355,共9页
抗球虫药在畜禽业应用广泛,但不合理使用会导致其在动物性食品中残留超标,对人类健康造成威胁。近年来,食品安全监督抽检中抗球虫药残留超标时有发生,因此,实现动物性食品中抗球虫药残留的高效快速检测,有利于兽药残留的有效监管。在众... 抗球虫药在畜禽业应用广泛,但不合理使用会导致其在动物性食品中残留超标,对人类健康造成威胁。近年来,食品安全监督抽检中抗球虫药残留超标时有发生,因此,实现动物性食品中抗球虫药残留的高效快速检测,有利于兽药残留的有效监管。在众多残留检测方法中,免疫分析方法具有灵敏度高、特异性强,操作简单等优点,适用于大批量样品的现场快速检测。该文综述了抗球虫药人工抗原的合成方法,并对其免疫分析方法进行归纳总结,以期为开发更高效的抗球虫药残留分析方法提供参考。 展开更多
关键词 抗球虫药 人工抗原 免疫分析 研究进展
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基于上转换纳米材料的免疫检测技术应用
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作者 黄惠威 李丽华 +3 位作者 罗林 沈玉栋 雷红涛 徐振林 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第2期355-368,共14页
免疫分析法具有简便、快速、准确等特点,广泛应用于医学、食品、环境等领域检测,将免疫分析方法与纳米材料相结合可以提高免疫分析的性能。与传统纳米材料相比,上转换纳米颗粒(upconversion nanoparticles,UCNPs)具有光稳定性好、发光... 免疫分析法具有简便、快速、准确等特点,广泛应用于医学、食品、环境等领域检测,将免疫分析方法与纳米材料相结合可以提高免疫分析的性能。与传统纳米材料相比,上转换纳米颗粒(upconversion nanoparticles,UCNPs)具有光稳定性好、发光寿命长和狭窄及可调整的发射带等优秀的光学性质,与免疫分析相结合可显著降低背景噪声,提高分析灵敏度。本文简要介绍了UCNPs的发光机制,对UCNPs的合成和表面修饰方法进行了总结,并详细论述荧光共振能量转移、内滤效应、磁分离技术、上转化连接免疫吸附技术和上转换免疫层析技术五种基于UCNPs的免疫检测技术,最后对该技术所面临的挑战和前景进行总结和展望,以期为UCNPs免疫检测技术的发展提供理论指导。 展开更多
关键词 上转换纳米颗粒 合成方法 表面修饰方法 免疫检测技术
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内源性因素对抗体夹心免疫法检测血清心肌肌钙蛋白Ⅰ的干扰及解决方案研究进展
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作者 何成山 刘洋 +2 位作者 徐正 蒋秀娣 陆志成 《现代检验医学杂志》 CAS 2024年第1期186-191,共6页
心肌肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponinⅠ,cTnⅠ)是临床上诊断心肌损伤的首选血清学标志物。cTnⅠ检测基于抗体夹心免疫法,不同检测试剂中检测和捕获抗体所针对的cTnⅠ抗原表位不一致,易造成cTnⅠ检测结果的异质性。内源性干扰因素如cTnⅠ自... 心肌肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponinⅠ,cTnⅠ)是临床上诊断心肌损伤的首选血清学标志物。cTnⅠ检测基于抗体夹心免疫法,不同检测试剂中检测和捕获抗体所针对的cTnⅠ抗原表位不一致,易造成cTnⅠ检测结果的异质性。内源性干扰因素如cTnⅠ自身抗体、异嗜性抗体、类风湿因子等可严重的干扰cTnⅠ检测结果,影响临床上对心肌损伤类疾病的诊断、治疗及预后判断。该文就cTnⅠ的抗体夹心免疫检测和内源性因素对cTnⅠ检测的干扰及解决方案等方面研究进展作一综述,为临床上鉴别诊断cTnⅠ异常检测结果提供理论依据。 展开更多
关键词 心肌肌钙蛋白Ⅰ 抗体 夹心免疫 干扰 内源性因素
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前因素对不同检测原理的25羟维生素D检测结果的影响
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作者 李敏 孙江漫 +2 位作者 孟祥兆 邵燕 于洪远 《分子诊断与治疗杂志》 2024年第2期278-281,共4页
目的 探讨分析前因素对不同检测原理的25羟维生素D[25(OH)D]检测结果的影响。方法 收集北京航天总医院2022年1月住院患者血清和血浆标本作为研究对象,采用免疫电化学发光法和液相色谱串联质谱法分别进行25(OH)D的检测,分析离心温度为室... 目的 探讨分析前因素对不同检测原理的25羟维生素D[25(OH)D]检测结果的影响。方法 收集北京航天总医院2022年1月住院患者血清和血浆标本作为研究对象,采用免疫电化学发光法和液相色谱串联质谱法分别进行25(OH)D的检测,分析离心温度为室温和4℃、抗凝管和促凝管、采集后立即离心和常温储存8 h后离心、离心后常温和2~8℃储存8 h这4种因素对两种方法检测结果的影响。结果 使用免疫法检测25(OH)D,室温离心组、使用促凝管采血组、采集后常温放置8 h组的25(OH)D总量高于4℃离心组、抗凝管组、即刻离心组,差异有统计学意义(t=-7.398、2.852、3.506,P<0.05),离心后常温储存组的25(OH)D总量高于2~8℃储存组,差异无统计学意义(t=1.883,P>0.05)。使用质谱法检测25(OH)D,室温离心组、使用促凝管采血组、采集后常温放置8 h组、离心后常温储存组的25(OH)D总量高于4℃离心组、抗凝管组、即刻离心组、2~8℃储存组,差异均无统计学意义(t=-1.918、1.995、-1.499、-0.399,P>0.05)。结论 前因素对两种不同检测原理的25(OH)D检测结果的影响有差异,日常检测中应积极采取有效措施避免分析前因素对检测结果准确性的影响。 展开更多
关键词 25羟维生素D 液相色谱串联质谱法 免疫电化学发光法 影响因素
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基于化学发光免疫技术检测念珠菌IgG抗体方法的建立与性能评估
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作者 李静静 王雪琦 +3 位作者 孙娅顺 赵思琪 刘春龙 钟成 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期389-394,共6页
目的:基于化学发光免疫技术建立一种即时检测念珠菌甘露聚糖IgG抗体的方法。方法:依据间接法原理建立念珠菌甘露聚糖IgG抗体检测体系,并参照美国临床试验室标准化协会(CLSI)批准指南进行分析性能评估。结果:生物素标记念珠菌甘露聚糖抗... 目的:基于化学发光免疫技术建立一种即时检测念珠菌甘露聚糖IgG抗体的方法。方法:依据间接法原理建立念珠菌甘露聚糖IgG抗体检测体系,并参照美国临床试验室标准化协会(CLSI)批准指南进行分析性能评估。结果:生物素标记念珠菌甘露聚糖抗原与碱性磷酸酶标记抗人IgG抗体工作液浓度均为1μg/ml;检测方法空白限为5.20 AU/ml;检出限为5.50 AU/ml;试剂精密度与重复性变异系数(CV)均<10%;检测方法与常见特异性抗体无交叉反应;血红蛋白、三酰甘油及胆红素对临床样本均无显著影响;检测方法与ELISA法总体符合率为90%,Kappa值=0.80,回归分析与偏差分析结果均表明两种方法有较强一致性(R2=0.9898)。结论:本研究所建立检测体系性能均符合临床辅助诊断技术相关要求,适用于血清样本中念珠菌甘露聚糖IgG抗体的快速检测。 展开更多
关键词 念珠菌IgG抗体 化学发光免疫技术 性能分析
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用于诺氟沙星现场灵敏检测的便携式智能手机赋能荧光传感技术
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作者 卓雨欣 徐文娟 +1 位作者 程源 龙峰 《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第1期482-488,共7页
通过融合激光诱导荧光原理和光纤传感原理,集成全光纤光学系统、微型化流动进样系统、高灵敏微型光电探测系统和基于智能手机的APP软件,研制了用于水中抗生素现场快速灵敏检测的便携式智能手机赋能荧光生物传感器.以喹诺酮类抗生素诺氟... 通过融合激光诱导荧光原理和光纤传感原理,集成全光纤光学系统、微型化流动进样系统、高灵敏微型光电探测系统和基于智能手机的APP软件,研制了用于水中抗生素现场快速灵敏检测的便携式智能手机赋能荧光生物传感器.以喹诺酮类抗生素诺氟沙星(NOR)为例,在优化条件下,该荧光生物传感器对NOR的检测限可达0.35μg/L,线性检测范围为1.6~20.6µg/L.所建立的NOR检测方法也被用于各种水样的NOR加标回收检测,其回收率为85%~120%,检测时间少于15min,表明其可以用于实际样品中NOR的现场灵敏快速检测.结合物联网等新兴技术,可根据设定的程序将检测结果直接上传环境监测监管中心,为实现水环境安全的监测预警和应急监测提供重要技术支持. 展开更多
关键词 抗生素 生物传感器 免疫分析 智能手机 激光诱导荧光 新污染物
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阿尔茨海默病中免疫检查位点LAG3的研究
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作者 孟凌云 段冉 陈静 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期273-277,共5页
目的:探讨免疫检查位点基因LAG3在阿尔茨海默病(AD)中的作用和意义。方法:对GEO(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/)数据库中AD患者脑组织测序数据集GSE48350和血液测序数据集GSE140829进行分析,采用CIBERSORT计算脑组织中的免疫细胞评... 目的:探讨免疫检查位点基因LAG3在阿尔茨海默病(AD)中的作用和意义。方法:对GEO(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/)数据库中AD患者脑组织测序数据集GSE48350和血液测序数据集GSE140829进行分析,采用CIBERSORT计算脑组织中的免疫细胞评分,并观察LAG3的表达量变化;使用人源Aβ1-42淀粉样蛋白诱导小鼠海马神经元细胞系HT22作为AD细胞模型,RT-PCR检测LAG3的表达量变化。通过GSEA分析研究与LAG3直接相关的通路,String网站构建PPI网络,发现与LAG3相互作用的基因,最后通过KEGG和GO分析这些基因的生物学功能。结果:AD患者脑组织中免疫细胞与健康人存在较大差异,AD患者脑组织和血液中LAG3水平均高于健康人,AD细胞模型中LAG3的表达量也增高。结论:AD脑组织中免疫细胞构成与健康人存在差异,AD脑组织中未激活的记忆CD4^(+)T细胞和单核细胞的比例较高,激活的NK细胞偏低,且免疫检查位点LAG3的表达量增高,其可能与CD4细胞有关,也与免疫细胞的活化和调节存在联系。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 LAG3 免疫检查位点 CD4 免疫细胞评分
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口蹄疫病毒O型全自动磁微粒CLIA抗体定量检测方法的建立
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作者 包艳芳 蒋韬 +8 位作者 何莉 吕律 李涛善 李昕 孙燕燕 杨光 魏婷 潘晓乐 林密 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期810-819,共10页
【背景】口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、烈性传染病,疫苗接种是预防临床口蹄疫的有效措施。免疫抗体水平监测则是评估疫苗免疫效果、制定免疫程序的重要依据,是免疫工作和疫情防控必不可少的... 【背景】口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、烈性传染病,疫苗接种是预防临床口蹄疫的有效措施。免疫抗体水平监测则是评估疫苗免疫效果、制定免疫程序的重要依据,是免疫工作和疫情防控必不可少的关键环节,因此建立高效、快速、全自动的抗体检测方法具有重要意义。【目的】基于磁微粒(micromagnetic particles,MPs)化学发光免疫分析技术(CLIA),建立一种新型、全自动、可定量的口蹄疫病毒O型抗体检测方法,为口蹄疫免疫监测和疫情防控提供技术支撑。【方法】使用纳米材料磁微粒为固相载体和分离载体包被捕获抗体,用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)标记检测抗体,经过条件优化建立了一种新型磁微粒CLIA检测方法(magnetic particle chemiluminescence immunoassay,MP-CLIA)。本方法首先加入磁微粒-兔抗偶联物(magnetic particle-polyclonal antibodies,MPs-p Abs)、待测样本、口蹄疫病毒O型抗原,37℃孵育;再加入适量酶标抗体(ALP-p Abs),37℃孵育;最后加入化学发光底物AMPPD,检测相对发光强度(relative light unit,RLU)。研究通过检测标准品拟合标准曲线,并应用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)确定检测方法的判定标准;利用质控样本进行方法学评价,同时检测田间样本,并和液相阻断ELISA(LPB-ELISA)比对,验证临床检测效果。【结果】优化后最佳反应条件为磁微粒浓度0.25 mg·m L^(-1)、口蹄疫病毒O型抗原1﹕1000稀释、酶标抗体1﹕2000稀释、加样量20μL。整个检测过程均在全自动化学发光免疫分析仪中完成,反应时间20 min,在抗体含量0—1280 U(效价0—1﹕2048)范围内标准曲线R2>0.99,可进行定量检测。该方法敏感性为94.66%;特异性为97.10%,检测口蹄疫A型、Asia I型血清型特异性为97.14%,与塞内卡病毒(SVV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、牛流行热病毒(BEFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、羊痘病毒(QRFV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体阳性血清无交叉反应;重复检测变异系数CV值<10%;田间样本检测结果与LPB-ELISA符合率为94.69%,定量结果相关系数R2为0.8473,P<0.0001,相关性显著。【结论】建立的MP-CLIA方法耗时短、操作简便,配套国产全自动化学发光仪,可进行全自动化检测,是一种新型、高效的口蹄疫病毒O型抗体定量检测方法,本方法对应的试剂盒已经完成中试生产和临床检测试验,在全国不同区域试用效果较好,具有较高的临床应用价值。 展开更多
关键词 磁微粒化学发光免疫分析法 口蹄疫 磁微粒 全自动化
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β-人绒毛膜促性腺激素快速高灵敏化学发光POC检测方法的建立及评价
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作者 谢海宇 秦静 +3 位作者 张艳妮 刘俊杰 何小维 王羽 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期615-620,共6页
目的:建立β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)快速高灵敏化学发光POC检测法(POC-CLIA)并进行评价。方法:采用碱性磷酸酶(Alp)-AMPPD发光体系,以磁微粒(Mps)为固相载体构建POC-CLIA,并评估其灵敏度、精密度、准确度、线性范围、特异性、稳定... 目的:建立β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)快速高灵敏化学发光POC检测法(POC-CLIA)并进行评价。方法:采用碱性磷酸酶(Alp)-AMPPD发光体系,以磁微粒(Mps)为固相载体构建POC-CLIA,并评估其灵敏度、精密度、准确度、线性范围、特异性、稳定性、钩状效应和临床应用。结果:β-HCG最低检测限为0.71 mU/ml,线性检测范围为0.710~1.092×10^(4) mU/ml,且在1.7×10^(5) mU/ml内无钩状效应影响。批内和批间变异系数均<10%,可在37℃稳定保存10 d。准确度偏差在±10%之内,结果可靠。干扰物质与β-HCG均无交叉反应。对100例临床血清标本进行检测,与临床标准方法检测结果高度相关(R^(2)=0.997 0)。单个样品检测时间<15 min,且测试通量可达到200 T/h。结论:该方法具有较高应用价值,可广泛用于基层社区,助力基层医疗中妊娠及相关疾病筛查。 展开更多
关键词 人绒毛膜促性腺激素 化学发光免疫 即时检测 基层健康筛查
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基于强化学习的化学发光免疫分析仪温度控制策略研究
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作者 李中伟 乔美英 王聪 《科技创新与应用》 2024年第13期39-43,共5页
传统PID控制作为最常用的控制算法,在全自动化学发光免疫分析仪的温度控制单元上有着广泛的应用,但存在PID控制参数整定困难,调节时间长和超调量较大等问题,如何在保证温度控制精度的情况下,缩短温度调节时间,减小超调量,进一步提升仪... 传统PID控制作为最常用的控制算法,在全自动化学发光免疫分析仪的温度控制单元上有着广泛的应用,但存在PID控制参数整定困难,调节时间长和超调量较大等问题,如何在保证温度控制精度的情况下,缩短温度调节时间,减小超调量,进一步提升仪器的检验效率,成为需要解决的问题。针对此问题,应用基于深度确定性策略梯度(Deep Deterministic Policy Gradient,DDPG)的温度控制策略,可以避免依靠人工经验进行PID参数整定,并缩短温度调节时间,大幅度减小超调量,通过仿真实验分析温度控制的参数指标。结果表明,该算法相较于传统的PID控制和模糊PID控制策略,在调节时间上分别提升14.9%和6.3%,在超调量上分别提升99.8%和99.2%,对于提升仪器的性能有较大意义。 展开更多
关键词 发光免疫分析仪 温度控制 PID DDPG 强化学习
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3,6-Bis-β-Dicarbonylsubstituted Carbazoles Bearing N-Spacers and Their Eu(III) Complexes as Immunofluorescent Labelling Agents
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作者 Dmitry E. Pugachev Georgy V. Zatonsky +2 位作者 Tatyana S. Kostryukova Anna G. Shubina Nikolay V. Vasiliev 《International Journal of Organic Chemistry》 2024年第1期20-31,共12页
New reagents for immunofluorescence analysis of carbazole series containing fluorinated β-dicarbonyl fragments and carboxylic substituent groups separated by spacers of different lengths from the light-gathering carb... New reagents for immunofluorescence analysis of carbazole series containing fluorinated β-dicarbonyl fragments and carboxylic substituent groups separated by spacers of different lengths from the light-gathering carbazole scaffold have been developed. The markers in complex with Eu<sup>3+</sup> ions possess stability in the aqueous phase, intense and prolonged luminescence (τ 550 - 570 μs) with characteristic emission maxima in the region of 615 nm and excitation wavelengths in the region of 380 - 390 nm, which distinguishes them from most of the analogs used. In the study of marker conjugation with streptavidin, a reagent containing 4 - 5 europium labeling complexes based on spacer-containing carbazole tetraketone was obtained. The marker-doped silicate nanoparticles exhibit intense and long-lived luminescence in the characteristic region. 展开更多
关键词 Fluorescence immunoassay Fluorinated β-Diketones CARBAZOLE Europium Complexes STREPTAVIDIN Nanodispersions
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人C-反应蛋白磁微粒化学发光酶免疫测定法的建立
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作者 罗梦洁 肖铎 +5 位作者 曾璇 谭楚帆 徐叶 钟志宏 刘如石 郑姣 《生命科学研究》 CAS 2024年第2期135-142,151,共9页
人C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)是炎症以及各种相关疾病如病毒感染、心血管疾病等诊断、治疗和预后的临床检测指标。为了建立一种快速、准确的CRP定量免疫测定方法,将表达纯化的重组CRP作为抗原免疫小鼠,获得了5株稳定分泌抗体... 人C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)是炎症以及各种相关疾病如病毒感染、心血管疾病等诊断、治疗和预后的临床检测指标。为了建立一种快速、准确的CRP定量免疫测定方法,将表达纯化的重组CRP作为抗原免疫小鼠,获得了5株稳定分泌抗体的单克隆抗体细胞株,采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay,DAS-ELISA)初步鉴定筛选的抗人CRP单克隆抗体,并分别选择mAb 9D6和mAb 9G4作为捕获抗体与检测抗体,建立用于人CRP检测的化学发光酶免疫测定法(chemiluminescence enzyme immunoassay,CLEIA),最后通过测定分析临床血清CRP样本,评价CLEIA的性能。结果显示,基于9D6/9G4-AP单克隆抗体对的CLEIA测定范围为0.1767~500滋g/L(可扩展至100 mg/L);所建立的CLEIA与医院采用的免疫散射比浊法(R^(2):0.9496,P<0.0001)表现出良好的相关性,且Bland-Altman分析中96.36%(106/110)的点在95%一致性界限范围内显示两种检测方法具有较好的一致性。结果初步表明,建立的分析方法在临床诊断中具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 C-反应蛋白(CRP) 单克隆抗体(mAb) 双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(DAS-ELISA) 化学发光酶免疫测定法(CLEIA)
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CLIA、RPR、TPPA检测血清中梅毒螺旋体抗体的价值分析
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作者 赵颖 马跃 《中国现代药物应用》 2024年第5期72-74,共3页
目的 分析化学发光免疫测定法(CLIA)、快速血清反应素试验(RPR)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)检测血清中梅毒螺旋体抗体的结果。方法 100例疑似梅毒患者血清样本为研究对象,均采用CLIA、RPR、TPPA进行检测,并以重组免疫印迹法(RI... 目的 分析化学发光免疫测定法(CLIA)、快速血清反应素试验(RPR)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)检测血清中梅毒螺旋体抗体的结果。方法 100例疑似梅毒患者血清样本为研究对象,均采用CLIA、RPR、TPPA进行检测,并以重组免疫印迹法(RIBA)检测结果为金标准,分析三种检测方式的检测结果 ,并比较三种检测方式的诊断效能。结果 CLIA检出阳性59例,阴性41例。RPR检出阳性73例,阴性27例。TPPA检出阳性59例,阴性41例。CLIA诊断准确率为69.00%(69/100),敏感度为68.92%(51/74),特异度为69.23%(18/26);RPR诊断准确率为97.00%(97/100),敏感度为97.30%(72/74),特异度为96.15%(25/26);TPPA诊断准确率为77.00%(77/100),敏感度为74.32%(55/74),特异度为84.62%(22/26)。RPR的诊断准确率、敏感度显著高于CLIA、TPPA(P<0.05);RPR的特异度高于CLIA(P<0.05);CLIA与TPPA的诊断准确率、敏感度、特异度差异较小(P>0.05)。结论 RPR在梅毒螺旋体抗体的临床诊断中具有更佳的诊断准确率,可为梅毒患者的治疗提供可靠的诊疗依据。 展开更多
关键词 化学发光免疫测定法 快速血清反应素试验 梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验 梅毒螺旋体抗体
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