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川芎嗪对缺氧缺糖状态下培养的血管内皮细胞ECV-304的影响 被引量:25
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作者 林蓉 刘俊田 +1 位作者 甘伟杰 王维蓉 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期462-465,共4页
目的 :观察缺氧缺糖条件下血管内皮细胞 (ECV 30 4 )释放乳酸脱氢酶 (LDH)、一氧化氮 (NO)、丙二醛(MDA)水平和细胞膜流动性的变化及川芎嗪对它们的影响。方法 :缺氧缺糖诱导血管内皮细胞损伤 ,自动生化分析仪测定培养液和细胞层中LDH活... 目的 :观察缺氧缺糖条件下血管内皮细胞 (ECV 30 4 )释放乳酸脱氢酶 (LDH)、一氧化氮 (NO)、丙二醛(MDA)水平和细胞膜流动性的变化及川芎嗪对它们的影响。方法 :缺氧缺糖诱导血管内皮细胞损伤 ,自动生化分析仪测定培养液和细胞层中LDH活性 ;用比色法测定细胞培养液中NO水平 ;用荧光法检测细胞内脂质过氧化产物MDA以评价脂质过氧化程度 ;荧光偏振法测定内皮细胞膜流动性。结果 :缺氧缺糖引起的血管内皮细胞LDH释放增加、MDA生成增多和膜流动性增高 ,NO水平降低。而川芎嗪可抑制缺氧缺糖引起的血管内皮细胞释放LDH ,MDA生成和降低细胞膜流动性 ,提高NO水平。结论 :川芎嗪可保护缺氧缺糖诱导血管内皮细胞的损伤 ,其作用机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 川芎嗪 缺氧缺糖状态 血管内皮细胞 ecv-304 乳酸脱氢酶 LDH 一氧化氮 NO
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常规制备家兔血清对人脐静脉内皮细胞-304的影响 被引量:4
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作者 秦英 杨君 +4 位作者 姜良铎 王硕仁 朱陵群 牛福玲 周春华 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期845-848,共4页
目的 :探讨中药血清药理学研究中常规制备的正常家兔血清浓度变化对培养体系中细胞的影响。方法 :常规制备无污染、无溶血正常家兔血清 ,通过细胞形态学、台盼蓝染色活细胞计数、细胞毒四唑盐 (MTT)比色试验、乳酸脱氢酶 (LDH)及血管紧... 目的 :探讨中药血清药理学研究中常规制备的正常家兔血清浓度变化对培养体系中细胞的影响。方法 :常规制备无污染、无溶血正常家兔血清 ,通过细胞形态学、台盼蓝染色活细胞计数、细胞毒四唑盐 (MTT)比色试验、乳酸脱氢酶 (LDH)及血管紧张素转换酶 (ACE)等指标 ,观察 5 %、10 %、2 0 %、4 0 %、60 %和 80 %家兔血清对人脐静脉内皮细胞 (VEC) 30 4的影响。结果 :5 %和 10 %两浓度组各指标均无变化 ,对VEC 30 4没有损伤作用。 4 0 %、60 %和 80 % 3个浓度组家兔血清浓度对细胞均有不同程度的损伤 ,而且随着浓度的增加 ,呈现出损伤加重的趋势 ,而 2 0 %的浓度从细胞形态、台盼蓝染色活细胞计数、MTT及ACE方面没有表现出明显的损伤作用 ,只有LDH含量差异有显著性 (P <0 0 1)。结论 :常规制备的家兔血清在无污染和无溶血的情况下 ,其对细胞的作用浓度是有一定限制的 ,当达到 4 0 %或更高浓度时有较为明显的损伤。所以 ,在中药血清药理学研究中 ,应进行常规制备正常血清及含药血清的细胞毒实验 。 展开更多
关键词 细胞毒性 人脐静脉内皮细胞-304 乳酸脱氢酶 血管紧张素转换酶 中药血清药理学
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槲皮素对TNF-α损伤的血管内皮细胞的保护作用 被引量:24
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作者 林蓉 刘俊田 甘伟杰 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期597-599,共3页
目的 :用TNF α诱导血管内皮细胞 (ECV 30 4 )损伤 ,观察槲皮素对ECV 30 4的保护作用。方法 :采用MTT法观察槲皮素对ECV 30 4活性的影响 :硫代巴比妥酸法测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)含量 ;用比色法测定细胞培养液中超氧化物... 目的 :用TNF α诱导血管内皮细胞 (ECV 30 4 )损伤 ,观察槲皮素对ECV 30 4的保护作用。方法 :采用MTT法观察槲皮素对ECV 30 4活性的影响 :硫代巴比妥酸法测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)含量 ;用比色法测定细胞培养液中超氧化物歧化酶 (SOD)和一氧化氮 (NO)含量 ;免疫细胞化学法观察内皮细胞核转录因子 κB(NF κB)的表达。结果 :TNF α对ECV 30 4具有损伤作用 ,槲皮素能显著抑制TNF α诱导ECV 30 4内NO和MDA释放和NF κB的表达 ;并能提高TNF α诱导ECV 30 4内SOD活性。结论 :槲皮素对TNF α诱导ECV 30 4损伤具有保护作用 ,其机制可能与其减少NO释放和抗氧化作用有关 ,而抗氧化作用主要是通过调节NF 展开更多
关键词 ecv-304 槲皮素 TNF-Α 保护作用 血管内皮细胞 诱导 观察 释放 含量 SOD活性
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NDGA对内皮细胞增殖抑制的作用研究 被引量:11
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作者 孙慧勤 陈意生 +2 位作者 史景泉 卞修武 辛榕 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期245-248,共4页
目的 :探讨去甲二氢愈创木酸 (NDGA)对内皮细胞增殖活性的影响及特点。方法 :采用形态学观察、细胞计数、流式细胞仪分析、免疫组织化学等技术方法观测不同浓度NDGA作用下人脐静脉内皮细胞ECV 3 0 4细胞增殖活性的变化。结果 :①不同浓... 目的 :探讨去甲二氢愈创木酸 (NDGA)对内皮细胞增殖活性的影响及特点。方法 :采用形态学观察、细胞计数、流式细胞仪分析、免疫组织化学等技术方法观测不同浓度NDGA作用下人脐静脉内皮细胞ECV 3 0 4细胞增殖活性的变化。结果 :①不同浓度 ( 5 0~ 2 0 0 μmol/L)的NDGA处理ECV 3 0 4细胞 2 4~ 72h后或一定浓度 ( 10 0 μmol/L)的NDGA处理ECV 3 0 4细胞不同时间 ( 1~ 8d)后 ,均出现NDGA抑制细胞增殖的作用 ,且这种作用与NDGA的浓度和作用时间有关。②NDGA处理细胞后出现细胞增殖活性降低 ,主要表现为有丝分裂计数和细胞增殖指数降低 ,细胞的生长抑制率增加 ,细胞生长减慢 ,免疫组化显示PCNA、BrdU标记指数下降等。结论 :NDGA对内皮细胞增殖有明显抑制作用 ,此抑制作用可能是其影响血管生成的主要原因之一。 展开更多
关键词 去甲二氢愈创木酸 血管内皮细胞 细胞增殖
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胶质瘤血瘤屏障体外模型的形态学观察 被引量:2
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作者 林志雄 黄强 +2 位作者 杨丽娟 陈振斌 林建华 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期257-261,共5页
目的 探讨胶质瘤血瘤屏障体外模型的形态学特征。 方法 利用电镜技术观察血管内皮细胞ECV30 4 和C6 胶质瘤细胞共培养 (混合共培养、Transwell共培养、Transwell膜两面共培养 )后的内皮细胞的孔窗、内皮细胞之间的连接及内皮细胞与... 目的 探讨胶质瘤血瘤屏障体外模型的形态学特征。 方法 利用电镜技术观察血管内皮细胞ECV30 4 和C6 胶质瘤细胞共培养 (混合共培养、Transwell共培养、Transwell膜两面共培养 )后的内皮细胞的孔窗、内皮细胞之间的连接及内皮细胞与肿瘤细胞的相互关系、瘤细胞的“血管周足”等的形态学特征 ;并与 4例人脑胶质瘤组织标本的血瘤屏障进行比较。 结果 电镜下发现ECV30 4 细胞经与C6 细胞按 3种不同方式共培养汇合后均为无孔窗型内皮细胞 ,细胞间出现紧密连接 ;Transwell共培养的膜上C6 细胞未见伸出伪足突向膜的微孔 ;经膜两面共培养的瘤细胞则可通过Transwell的微孔突向内皮细胞侧 ,但瘤细胞未伸出伪足包绕内皮细胞或突入内皮细胞间隙 ,瘤细胞的“血管周足”不完整 ,后两者与脑胶质瘤组织标本的血瘤屏障的形态特征相类似。 结论 在体外经Transwell膜两面共培养的ECV30 4 和C6 胶质瘤细胞的系统可在一定程度模拟体内的血瘤屏障的形态学特征。 展开更多
关键词 胶质瘤 血管内皮细胞 血瘤屏障 电子显微镜 人脐静脉内皮细胞 大鼠胶质瘤细胞
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23-羟基白桦酸对血管内皮细胞增殖和迁移的影响 被引量:2
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作者 周尧远 蒋孟军 +6 位作者 蔡刚明 张荣军 杨敏 范俊 张波 顾晓波 曹国宪 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期10-12,共3页
目的:探讨23-羟基白桦酸(23-HBA)对血管内皮细胞(ECV-304)形态变化,增殖和迁移的影响。方法:SRB方法测定23-HBA对ECV-304细胞的增殖抑制率,体外琼脂法检测内皮细胞的迁移能力,并用光镜观察内皮细胞形态变化。结果:23-HBA对ECV-304细胞的... 目的:探讨23-羟基白桦酸(23-HBA)对血管内皮细胞(ECV-304)形态变化,增殖和迁移的影响。方法:SRB方法测定23-HBA对ECV-304细胞的增殖抑制率,体外琼脂法检测内皮细胞的迁移能力,并用光镜观察内皮细胞形态变化。结果:23-HBA对ECV-304细胞的IC50为39.74μg/ml。当23-HBA浓度提高到20μg/ml以上,ECV-304细胞的凋亡现象非常明显。23-HBA浓度在1μg/ml时即能抑制细胞的迁移。结论:23-HBA对ECV-304增殖和迁移均有显著抑制作用。 展开更多
关键词 23-羟基白桦酸 内皮细胞 增殖 迁移
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HT-29肠癌细胞中E-selectin、Integrin β1及ICAM-1表达水平 被引量:1
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作者 刘长宝 凌志强 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2007年第1期62-65,共4页
目的:探讨HT-29肠癌细胞、正常肠上皮细胞及ECV-304血管内皮细胞中E-selectin、Integrinβ1及ICAM-1的表达状态。方法:采用Nothern Blotting方法检测HT-29肠癌细胞、正常肠上皮细胞和ECV-304血管内皮细胞中E-selectin、Integrinβ1及ICA... 目的:探讨HT-29肠癌细胞、正常肠上皮细胞及ECV-304血管内皮细胞中E-selectin、Integrinβ1及ICAM-1的表达状态。方法:采用Nothern Blotting方法检测HT-29肠癌细胞、正常肠上皮细胞和ECV-304血管内皮细胞中E-selectin、Integrinβ1及ICAM-1mRNA表达水平,采用ELISA法定量分析其表达含量。结果:HT-29肠癌细胞、正常肠上皮细胞和ECV-304血管内皮细胞均有E-selectin、Integrinβ1及ICAM-1基因表达。ELISA定量测定3个粘附分子表达水平,HT-29肠癌细胞均高于正常肠上皮细胞和ECV-304血管内皮细胞,分别存在显著性差异(P<0.05)。结论:E-selectin、Integrinβ1、ICAM-1可能与肿瘤细胞转移有关。 展开更多
关键词 HT-29肠癌细胞 正常肠上皮细胞 ecv-304血管内皮细胞 粘附分子
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黄芪注射液对高糖所致血管内皮细胞损伤的保护作用
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作者 范可 陈培红 吴青 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2008年第4期295-298,共4页
背景与目的:研究黄芪注射液对50%葡萄糖所诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用。材料与方法:采用血管内皮细胞VEC-304,分为正常对照组、葡萄糖损伤对照组和加入3个不同黄芪浓度的实验组(100mg/ml、200mg/ml、300mg/ml),各组细胞孵育24h后... 背景与目的:研究黄芪注射液对50%葡萄糖所诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用。材料与方法:采用血管内皮细胞VEC-304,分为正常对照组、葡萄糖损伤对照组和加入3个不同黄芪浓度的实验组(100mg/ml、200mg/ml、300mg/ml),各组细胞孵育24h后,除正常对照组外其余各组加入50%葡萄糖(终浓度为30mg/L)诱导损伤,继续培养4h。在倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化并采用MTT光吸收法检测细胞活力、采用考马斯亮蓝法检测蛋白质含量,用RT-PCR法和免疫细胞化学方法检测血管内皮生长因子(VEGF mRNA)及蛋白的表达。结果:正常对照组及黄芪注射液各剂量组细胞活力、蛋白质含量均高于50%葡萄糖损伤对照组,其差异均具有统计学意义(P均<0.05)。显示高糖明显抑制VEGF的活性和表达,而黄芪则具有明显的对高糖损伤的修复作用。 展开更多
关键词 黄芪注射液 商糖 VEC-304细胞
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刺梨和金荞麦提取物抑制内皮细胞生长和血管生成 被引量:8
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作者 崔玖洁 李苏宜 +1 位作者 张华 赵婷 《肿瘤学杂志》 CAS 2010年第2期111-115,共5页
[目的]探讨刺梨提取物(CL)、金荞麦提取物(FR)对人脐静脉内皮细胞ECV-304增殖及凋亡的影响以及对鸡胚尿囊膜血管新生的影响。[方法]IC30浓度CL/FR单独或两药的1/2IC30浓度联合作用于ECV-304细胞,MTT法检测ECV-304细胞的增殖抑制率;流式... [目的]探讨刺梨提取物(CL)、金荞麦提取物(FR)对人脐静脉内皮细胞ECV-304增殖及凋亡的影响以及对鸡胚尿囊膜血管新生的影响。[方法]IC30浓度CL/FR单独或两药的1/2IC30浓度联合作用于ECV-304细胞,MTT法检测ECV-304细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测ECV-304细胞早期凋亡细胞比例;RT-PCR和Western blot法分析Ki-67及Bax、Bcl-2 mRNA/蛋白表达的变化。计算经100μg/mlCL、100μg/mlFR、CL50μg/ml+FR50μg/ml联合作用后的7日龄鸡胚尿囊膜血管抑制率。[结果]IC30CL、IC30FR和1/2(IC30CL+IC30FR)对ECV-304细胞的抑制率分别为30.87%±1.2%,32.93%±1.4%和43.67%±1.5%。CL、FR单独应用或联合使用均可明显抑制ECV-304细胞生长,呈剂量依赖性,且诱导凋亡。与单独用药组比较,联合用药组Ki-67、Bcl-2 mRNA/蛋白表达率均有显著降低,而Bax mRNA/蛋白表达均显著增高。CL、FR单独或联合应用均可抑制鸡胚尿囊膜新生血管的生长,以CL作用更明显。[结论]CL和FR单药及联合应用都具有抑制ECV-304细胞增殖和诱导凋亡的效用,两药联合比单药更明显。两药单用和联合都可明显抑制鸡胚尿囊膜血管生成。 展开更多
关键词 提取物 刺梨 金荞麦 脐静脉内皮细胞 鸡胚尿囊膜试验
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