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一氧化氮前体L-精氨酸对肺动脉高压的干预作用及其机制
被引量:
3
1
作者
杜军保
齐建光
+7 位作者
唐朝枢
汪立
金红芳
李晓惠
石琳
魏冰
汤秀英
李简
《医学研究杂志》
2007年第9期58-58,共1页
关键词
一氧化氮前体
肺动脉高压
l-
精氨酸
干预作用
肺血管结构重建
前体物质
NO合成
arg
下载PDF
职称材料
钝齿棒杆菌中异源表达N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶合成L-鸟氨酸的研究
被引量:
2
2
作者
舒群峰
徐美娟
+4 位作者
李静
张显
杨套伟
许正宏
饶志明
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第7期29-39,共11页
目的:对一株产鸟氨酸的钝齿棒杆菌Corynebacterium crenatum SYPA5-5/△proB/△argF(SYPO-1)进行代谢工程改造,筛选不同细菌来源的N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶在大肠杆菌中克隆与表达,纯化后对其进行酶学性质的比较;将黏质沙雷氏菌Serrat...
目的:对一株产鸟氨酸的钝齿棒杆菌Corynebacterium crenatum SYPA5-5/△proB/△argF(SYPO-1)进行代谢工程改造,筛选不同细菌来源的N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶在大肠杆菌中克隆与表达,纯化后对其进行酶学性质的比较;将黏质沙雷氏菌Serratia marcescens Y213来源的Smarg E基因编码的N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶在L-鸟氨酸生产菌株C.crenatum SYPO-1中过量表达,进一步提高L-鸟氨酸的产量。方法:通过利用pDXW10穿梭质粒对不同来源的N-乙酰鸟氨酸脱乙酰化酶进行克隆表达和酶学性质比较,选择性质最优来源的N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶编码基因Smarg E在产L-鸟氨酸重组钝齿棒杆菌中表达,考察重组菌株发酵过程中参数的变化。结果:来源于S.marcescens Y213的N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶比酶活最高为798.98U/mg,最适pH为7,最适温度为37℃,0.1mmol/L的Mg^(2+)、Li^+、Mn^(2+)促进酶的比酶活提高了50%;在钝齿棒杆菌中表达N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶酶活达到128.4U/ml,显著提高了钝齿棒杆菌中胞内乙酰基循环水平;5L发酵罐发酵重组菌株96h,L-鸟氨酸的产量达到38.5g/L,比出发菌株,L-鸟氨酸的产量提高了33.2%,产率达0.401g/(L·h)。结论:筛选出最佳来源的N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶,在鸟氨酸生产菌株C.crenatum(SYPO-1)中过量表达,可以促进鸟氨酸的前体物质N-乙酰鸟氨酸的快速消耗,实现鸟氨酸的积累。
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关键词
l-
鸟氨酸
钝齿棒杆菌
N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶
arg
E
原文传递
题名
一氧化氮前体L-精氨酸对肺动脉高压的干预作用及其机制
被引量:
3
1
作者
杜军保
齐建光
唐朝枢
汪立
金红芳
李晓惠
石琳
魏冰
汤秀英
李简
机构
北京大学第一医院儿科
出处
《医学研究杂志》
2007年第9期58-58,共1页
基金
国家杰出青年科学基金资助(30425010)
国家自然科学基金资助(30070796
+5 种基金
39470735
39870844)
国家科技攻关计划资助(96-920-06-05-43)
北京市自然科学基金资助(7012021
7033047)
国家重点基础研究发展规划(G2000056905)
关键词
一氧化氮前体
肺动脉高压
l-
精氨酸
干预作用
肺血管结构重建
前体物质
NO合成
arg
分类号
R725.411 [医药卫生—儿科]
下载PDF
职称材料
题名
钝齿棒杆菌中异源表达N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶合成L-鸟氨酸的研究
被引量:
2
2
作者
舒群峰
徐美娟
李静
张显
杨套伟
许正宏
饶志明
机构
江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室
出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第7期29-39,共11页
基金
国家自然科学基金(31770058)
江苏省杰出青年科学基金(BK20150002)
+2 种基金
教育部重点研究项目(113033A)
中央高校基本科研业务费专项资金(JUSRP51708A)
江苏高校优势学科建设工程资助项目
文摘
目的:对一株产鸟氨酸的钝齿棒杆菌Corynebacterium crenatum SYPA5-5/△proB/△argF(SYPO-1)进行代谢工程改造,筛选不同细菌来源的N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶在大肠杆菌中克隆与表达,纯化后对其进行酶学性质的比较;将黏质沙雷氏菌Serratia marcescens Y213来源的Smarg E基因编码的N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶在L-鸟氨酸生产菌株C.crenatum SYPO-1中过量表达,进一步提高L-鸟氨酸的产量。方法:通过利用pDXW10穿梭质粒对不同来源的N-乙酰鸟氨酸脱乙酰化酶进行克隆表达和酶学性质比较,选择性质最优来源的N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶编码基因Smarg E在产L-鸟氨酸重组钝齿棒杆菌中表达,考察重组菌株发酵过程中参数的变化。结果:来源于S.marcescens Y213的N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶比酶活最高为798.98U/mg,最适pH为7,最适温度为37℃,0.1mmol/L的Mg^(2+)、Li^+、Mn^(2+)促进酶的比酶活提高了50%;在钝齿棒杆菌中表达N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶酶活达到128.4U/ml,显著提高了钝齿棒杆菌中胞内乙酰基循环水平;5L发酵罐发酵重组菌株96h,L-鸟氨酸的产量达到38.5g/L,比出发菌株,L-鸟氨酸的产量提高了33.2%,产率达0.401g/(L·h)。结论:筛选出最佳来源的N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶,在鸟氨酸生产菌株C.crenatum(SYPO-1)中过量表达,可以促进鸟氨酸的前体物质N-乙酰鸟氨酸的快速消耗,实现鸟氨酸的积累。
关键词
l-
鸟氨酸
钝齿棒杆菌
N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶
arg
E
Keywords
l-
ornithine
Corynebacterium crenatum
N-acety
l-
l-
ornithine deacetylase
arg
E
分类号
Q819 [生物学—生物工程]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一氧化氮前体L-精氨酸对肺动脉高压的干预作用及其机制
杜军保
齐建光
唐朝枢
汪立
金红芳
李晓惠
石琳
魏冰
汤秀英
李简
《医学研究杂志》
2007
3
下载PDF
职称材料
2
钝齿棒杆菌中异源表达N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶合成L-鸟氨酸的研究
舒群峰
徐美娟
李静
张显
杨套伟
许正宏
饶志明
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018
2
原文传递
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