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How do Chinese medicines that tonify the kidney inhibit dopaminergic neuron apoptosis? 被引量:11
1
作者 Shaogang Lin Shuifen Ye +6 位作者 Jinmu Huang Yun Tian Yihui Xu Mengqi Wu Jingxia Wang Songying Wu Jing Cai 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2013年第30期2820-2826,共7页
Wistar rats were intragastrical y perfused with Chinese medicines used for tonifying the kidney. These included 0.180 g/mL of Herba Epimedi (Epimedium), Semen Cuscutae (Dodder Seed), or Herba Cistanches (Desertli... Wistar rats were intragastrical y perfused with Chinese medicines used for tonifying the kidney. These included 0.180 g/mL of Herba Epimedi (Epimedium), Semen Cuscutae (Dodder Seed), or Herba Cistanches (Desertliving Cistanche), 0.04 mg/mL monoamine oxidase-B inhibitor selegiline, or distil ed water for 14 consecutive days to prepare drug-containing serum or blank serum. MES23.5 cells in the logarithmic phase were cultured in media supplemented with 15%drug-containing serum for 24 hours, fol owed by incubation in culture solution containing 100μmol/L H2O2 for 3 hours. 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) and flow tometry results showed that al drug-containing serums improved the survival rate of H 2 O 2-injured MES23.5 cells, inhibited pro-apoptotic FasL and caspase-3 expression, promoted anti-apoptotic Bcl-2 expression. However, drug-containing serums had little influence on Fas expression in H 2 O 2-injured MES23.5 cells. Enzyme-linked immunosorbent assay results showed that serum containing Herba Cistanches or Herba Epimedi increased the expression of nerve growth factor, brain-derived neurotrophic factor, and glial cellline-derived neurotrophic factor in injured MES23.5 cells;serum containing Semen Cuscutae only increased brain-derived neurotrophic factor expres-sion; while expression of the above neurotrophic factors remained the same in cells treated with serum containing selegiline. These findings indicate that Chinese medicines used to tonify the kid-ney can protect nerve cells by regulating the expression of apoptosis-related factors and neuro-trophic factors in MES23.5 cells. 展开更多
关键词 neural regeneration traditional Chinese medicine drug-containing serum mes23.5 dopaminergicnerve cells neurotrophic factors apoptosis factors Parkinson's disease NEUROPROTECTION
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2,3-吲哚醌对多巴胺能细胞氧化损伤的保护作用 被引量:9
2
作者 张芳 董海 岳旺 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1081-1085,共5页
目的采用过氧化氢(H2O2)作为损伤因素,检测2,3-吲哚醌(isatin,ISA)对MES 23.5细胞的保护作用及其机制。方法 MTT比色法检测H2O2的毒性作用及ISA的保护作用。细胞分为:对照组,H2O2 20μmol.L-1组,和ISA 100μmol.L-1+H2O2 20μmol.L-1组... 目的采用过氧化氢(H2O2)作为损伤因素,检测2,3-吲哚醌(isatin,ISA)对MES 23.5细胞的保护作用及其机制。方法 MTT比色法检测H2O2的毒性作用及ISA的保护作用。细胞分为:对照组,H2O2 20μmol.L-1组,和ISA 100μmol.L-1+H2O2 20μmol.L-1组,采用流式细胞技术(FCM)检测线粒体膜电位(△ψm)的变化;激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)变化。结果 H2O2组细胞存活率明细降低。ISA 100μmol.L-1及以上浓度处理的细胞存活率均高于H2O2组(P<0.05)。H2O2组细胞内R123平均荧光强度较对照组明显降低而ISA组明显增强(P<0.01)。H2O2组细胞内Fluo-3荧光强度明显高于对照组(P<0.01),而ISA组细胞内荧光强度明显低于H2O2组(P<0.01)。结论 ISA可减轻H2O2导致的DA能MES 23.5细胞损伤,其机制与减轻△ψm异常,降低[Ca2+]i水平有关。 展开更多
关键词 2 3-吲哚醌 H2O2 mes23.5细胞 线粒体膜电位 Ca2+ MTT
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抑制葡糖脑苷脂酶对多巴胺神经细胞内α-突触核蛋白寡聚体形成及细胞自噬功能的影响 被引量:1
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作者 刘光伟 尹娜 +3 位作者 弥娜 李昕 李尧华 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 2013年第6期820-825,共6页
目的研究抑制葡糖脑苷脂酶(glucocerebrosidase,GBA)活性对多巴胺神经细胞内α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)寡聚体形成及自噬功能的影响。方法在培养MES23.5细胞外添加不同浓度的GBA活性抑制剂(conduritol-β-epoxide,CβE),观察GB... 目的研究抑制葡糖脑苷脂酶(glucocerebrosidase,GBA)活性对多巴胺神经细胞内α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)寡聚体形成及自噬功能的影响。方法在培养MES23.5细胞外添加不同浓度的GBA活性抑制剂(conduritol-β-epoxide,CβE),观察GBA活性的变化,同时在细胞外添加α-Syn单体使其进入细胞内并孵育48 h。使用双抗体夹心ELISA方法测定细胞内α-Syn寡聚体含量,观察细胞自噬活性、氧化应激和凋亡。结果随着CβE质量浓度的增加,GBA活性呈质量浓度依赖性的下降,而细胞内α-Syn寡聚体的含量则呈质量浓度依赖性的增加;在CβE处理细胞,随着细胞外添加的α-Syn单体的质量浓度加大,自噬活性和氧化应激液增强,同时细胞凋亡数量增加。结论抑制GBA活性导致细胞内α-Syn寡聚体增多以及依赖于α-Syn浓度的自噬活性和氧化应激增强和细胞凋亡增加。 展开更多
关键词 葡糖脑苷脂酶 α-突触核蛋白寡聚体 MES 23 5细胞 自噬
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迷迭香酸对MPP^+导致MES 23.5细胞损伤保护作用 被引量:3
4
作者 杜婷婷 宋宁 +1 位作者 谢俊霞 姜宏 《青岛大学医学院学报》 CAS 2010年第3期193-195,共3页
目的观察迷迭香酸对1-甲基-4-苯基吡啶阳离子(MPP+)所致MES 23.5细胞损伤的保护作用。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测方法,观察不同浓度的迷迭香酸对MPP+处理的MES 23.5细胞的保护作用。结果 10-9~10-6mol/L的迷迭香酸对MES 23.5细胞... 目的观察迷迭香酸对1-甲基-4-苯基吡啶阳离子(MPP+)所致MES 23.5细胞损伤的保护作用。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测方法,观察不同浓度的迷迭香酸对MPP+处理的MES 23.5细胞的保护作用。结果 10-9~10-6mol/L的迷迭香酸对MES 23.5细胞无毒性作用(F=0.581,P>0.05)。200μmol/L的MPP+可使细胞存活率降低(F=44.863,P<0.01),而应用10-9~10-6mol/L的迷迭香酸预孵育细胞后,能明显提高细胞的存活率(P<0.01)。结论迷迭香酸能拮抗MPP+对MES 23.5细胞的毒性作用,具有一定的神经保护作用。 展开更多
关键词 迷迭香酸 1-甲基-4-苯基吡啶 mes23.5细胞
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1-甲基-4-苯基吡啶离子诱导MES 23.5细胞线粒体功能异常的实验研究 被引量:1
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作者 杨秀丽 陈生弟 +1 位作者 刘振国 乐卫东 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2001年第2期70-73,共4页
目的 探讨 1 -甲基 -4 -苯基吡啶离子 (MPP+ )诱导多巴胺 (DA)能神经元死亡的线粒体功能异常机制。方法 不同浓度的 1 -甲基 -4 -苯基 -1 ,2 ,3 ,6-四氢吡啶 (MPTP)、MPP+ 及还原型谷胱甘肽 (GSH)与 MES2 3 .5细胞共同培养 ,采用 MTT... 目的 探讨 1 -甲基 -4 -苯基吡啶离子 (MPP+ )诱导多巴胺 (DA)能神经元死亡的线粒体功能异常机制。方法 不同浓度的 1 -甲基 -4 -苯基 -1 ,2 ,3 ,6-四氢吡啶 (MPTP)、MPP+ 及还原型谷胱甘肽 (GSH)与 MES2 3 .5细胞共同培养 ,采用 MTT比色法及流式细胞术检测细胞线粒体膜电势 (△ Ψ m)和氧自由基 (ROS)的变化。结果 MES2 3 .5细胞活力在 MPP+组显著减低 ,且与浓度呈正相关 ,GSH+MPP+组轻度减低 ,而 MPTP组不降低。此外 ,用 MPP+ 处理后 MES 2 3 .5细胞线粒体 △ Ψ m明显下降和 ROS生成显著增加。结论 线粒体△ Ψ m下降及ROS生成增多可能参与了 MPP+ 诱导黑质 展开更多
关键词 1-甲基-4-苯基吡啶离子 还原型谷胱甘肽 mes23.5细胞 帕金森病
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还原型谷胱甘肽对多巴胺能神经细胞氧化损伤的保护作用 被引量:3
6
作者 张峪涵 刘艳 +1 位作者 朱义芳 邓茜 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期393-398,共6页
目的:探讨1-甲基-4-苯基-吡啶盐(MPP^+)作用下,还原型谷胱甘肽(GSH)对MES 23.5多巴胺神经元细胞氧化损伤的保护作用及其机制。方法:CCK8法检测MES 23.5细胞存活率,细胞分为5组:对照组、MPP^+组、MPP^++L-Dopa组、MPP^++GSH组、MPP^++L-D... 目的:探讨1-甲基-4-苯基-吡啶盐(MPP^+)作用下,还原型谷胱甘肽(GSH)对MES 23.5多巴胺神经元细胞氧化损伤的保护作用及其机制。方法:CCK8法检测MES 23.5细胞存活率,细胞分为5组:对照组、MPP^+组、MPP^++L-Dopa组、MPP^++GSH组、MPP^++L-Dopa+GSH组。流式细胞术检测凋亡率及线粒体膜电位;通过DCFH-DA探针检测ROS含量;用比色法,检测MDA水平、CAT活性。结果:GSH可以抑制MPP^+所致的MES 23.5细胞存活率、△ψm及CAT活性水平降低,凋亡率、ROS含量及MDA水平升高(P<0.05);GSH与L-Dopa合用,这种抑制作用更明显(P<0.05)。结论:GSH与L-Dopa合用对MPP^+诱导的MES 23.5细胞氧化损伤有明显保护作用,机制可能与抑制细胞线粒体损伤及脂质过氧化,发挥抗氧化作用有关。 展开更多
关键词 还原型谷胱甘肽 左旋多巴 MES 23.5细胞 保护作用
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Impact of Pitx3 gene knockdown on glial cell line-derived neurotrophic factor transcriptional activity in dopaminergic neurons 被引量:1
7
作者 Jing Chen Xiao-yu Kang +1 位作者 Chuan-xi Tang Dian-shuai Gao 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2017年第8期1347-1351,共5页
Pitx3 is strongly associated with the phenotype, differentiation, and survival of dopaminergic neurons. The relationship between Pitx3 and glial cell line-derived neurotrophic factor(GDNF) in dopaminergic neurons re... Pitx3 is strongly associated with the phenotype, differentiation, and survival of dopaminergic neurons. The relationship between Pitx3 and glial cell line-derived neurotrophic factor(GDNF) in dopaminergic neurons remains poorly understood. The present investigation sought to construct and screen a lentivirus expression plasmid carrying a rat Pitx3 short hairpin(sh)RNA and to assess the impact of Pitx3 gene knockdown on GDNF transcriptional activity in MES23.5 dopaminergic neurons. Three pairs of interference sequences were designed and separately ligated into GV102 expression vectors. These recombinant plasmids were transfected into MES23.5 cells and western blot assays were performed to detect Pitx3 protein expression. Finally, the most effective Pitx3 sh RNA and a dual-luciferase reporter gene plasmid carrying the GDNF promoter region(GDNF-luciferase) were cotransfected into MES23.5 cells. Sequencing showed that the synthesized sequences were identical to the three Pitx3 interference sequences. Inverted fluorescence microscopy revealed that the lentivirus expression plasmids carrying Pitx3-sh RNA had 40-50% transfection efficiency. Western blot assay confirmed that the corresponding Pitx3 of the third knockdown sequence had the lowest expression level. Dual-luciferase reporter gene results showed that the GDNF transcriptional activity in dopaminergic cells cotransfected with both plasmids was decreased compared with those transfected with GDNF-luciferase alone. Together, the results showed that the designed Pitx3-sh RNA interference sequence decreased Pitx3 protein expression, which decreased GDNF transcriptional activity. 展开更多
关键词 nerve regeneration NEURODEGENERATION Parkinson's disease glial cell line-derived neurotrophic .factor Pitx3 mes23.5 cells shorthairpin RNA gene knockdown PLASMID dual-luciferase reporter gene neural regeneration
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Dopaminergic neuroblastoma MES23. 5 apoptosis induced by H2O2
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作者 Shengli Xu Alex Zhang Piu Chan 《中国药理通讯》 2007年第2期23-23,共1页
关键词 多巴胺能 神经母细胞瘤 细胞凋亡 氧化过程
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杨梅黄酮减弱MPP^+诱导的MES23.5细胞的细胞毒性(英文)
9
作者 张凯 马泽刚 +1 位作者 王俊 谢安木 《现代生物医学进展》 CAS 2011年第10期1830-1833,共4页
目的:探讨杨梅黄酮对MPP+处理的MES23.5细胞的保护作用。方法:实验分为空白对照组,MPP+处理组,MPP+和杨梅黄酮共处理组,分别处理MES23.5细胞24h后,应用Hoechst 33258染色观察各组细胞细胞核形态的改变,应用RT-PCR技术观察Bcl-2和Bax mRN... 目的:探讨杨梅黄酮对MPP+处理的MES23.5细胞的保护作用。方法:实验分为空白对照组,MPP+处理组,MPP+和杨梅黄酮共处理组,分别处理MES23.5细胞24h后,应用Hoechst 33258染色观察各组细胞细胞核形态的改变,应用RT-PCR技术观察Bcl-2和Bax mRNA表达的改变。结果:杨梅黄酮能明显抑制MPP+引起的MES23.5细胞核固缩,核碎裂等形态学的改变,杨梅黄酮还可以对抗MPP+处理造成的MES23.5细胞的Bcl-2/Bax比率的降低。结论:杨梅黄酮对MPP+处理的MES23.5细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 杨梅黄酮 MPP^+ 凋亡 mes23.5 cells
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铁调素对体外多巴胺能神经细胞内铁聚积的作用 被引量:3
10
作者 孙超 宋宁 +1 位作者 朱德璋 谢安木 《中国临床神经科学》 2012年第2期176-180,共5页
目的:探讨铁调素在多巴胺能神经细胞内铁代谢调节的作用。方法:体外培养MES23.5细胞,经用枸橼酸铁胺处理4 h后应用RT-PCR检测铁调素mRNA的表达,Western blot检测膜铁转运蛋白1(FPN1)的表达。结果:高铁作用4 h后观察到MES23.5细胞内铁调... 目的:探讨铁调素在多巴胺能神经细胞内铁代谢调节的作用。方法:体外培养MES23.5细胞,经用枸橼酸铁胺处理4 h后应用RT-PCR检测铁调素mRNA的表达,Western blot检测膜铁转运蛋白1(FPN1)的表达。结果:高铁作用4 h后观察到MES23.5细胞内铁调素表达增高,FPN1表达降低(P<0.05)。结论:铁调素通过减少FPN1影响多巴胺能神经元的铁转出,参与帕金森病的铁聚积。 展开更多
关键词 铁调素 膜铁转运蛋白1 mes23.5细胞 铁聚积
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