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采用绿色荧光蛋白腺病毒载体表达HBsAgCTL优势表位肽MHC单链三聚体
1
作者 陈心春 刘威龙 +5 位作者 杨桂林 刘勇军 朱秀云 张红梅 周伯平 Lybarger Lonnie 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期161-164,共4页
目的采用携带GFP报告基因腺病毒载体表达HBsAg细胞毒性T细胞（CTL）表位MHC单链三聚体，为增强HBV特异性免疫提供新方法。方法构建小鼠MHCⅠ类分子（H-2L^d）限制的HBsAg优势CTL表位肽与MHCⅠ类分子重链（Ld）和β2M链（β2-microglobu... 目的采用携带GFP报告基因腺病毒载体表达HBsAg细胞毒性T细胞（CTL）表位MHC单链三聚体，为增强HBV特异性免疫提供新方法。方法构建小鼠MHCⅠ类分子（H-2L^d）限制的HBsAg优势CTL表位肽与MHCⅠ类分子重链（Ld）和β2M链（β2-microglobulin，β2微球蛋白）的单链三聚体（HBsAg—SCT）。并将HBsAg-SCT亚克隆到GFP标记腺病毒载体，以HBsAg和OVA—SCT作为对照，转染293A细胞，包装产生携带HBsAg—SCT，HBsAg和OVA—SCT的重组腺病毒。结果经双酶切和克隆测序鉴定，HBsAg—SCT能成功克隆到编码GFP标记的腺病毒载体，通过荧光显微镜观察到转染的293A细胞含有绿色荧光素蛋白。通过Western Blot进一步证实表达的重组蛋白HBsAg—SCT能与抗-Flag抗体发生反应。结论编码HBsAg—SCT的荧光蛋白腺病毒载体成功构建，并能在293A细胞中完整包装成重组腺病毒颗粒。 展开更多
关键词 肝炎表面抗原 乙型 重组 遗传 腺病毒 人 免疫显性表位 基因 mhc Ⅰ类 T淋巴细胞 细胞毒性 荧光抗体技术
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抗HLA和抗MICA抗体的表达对移植肾功能和急性排斥反应的预示作用 被引量：6
2
作者 侯建全 何军 +9 位作者 袁晓妮 王乾 王云炎 李强 张江磊 李琛 鲍晓晶 邱桥成 李扬 温端改 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期343-347,共5页
目的 探讨抗HLA与抗主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关基因A（MICA）抗体的表达对移植肾功能和急性排斥反应的预示作用.方法 采用免疫磁珠流式液相芯片技术检测41例肾移植受者移植前后的抗HLA和抗MICA抗体,其中37例接受了1、3、6个月及1、... 目的 探讨抗HLA与抗主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关基因A（MICA）抗体的表达对移植肾功能和急性排斥反应的预示作用.方法 采用免疫磁珠流式液相芯片技术检测41例肾移植受者移植前后的抗HLA和抗MICA抗体,其中37例接受了1、3、6个月及1、2、3年的动态随访.分析抗HLA和抗MICA抗体的特异性,及其与血清肌酐和排斥反应的相关性.结果 移植前共有9例（22.0%,9/41）预存抗HLA或（和）抗MICA抗体,其中抗HLA抗体阳性2例（4.9%,2/41）,抗MICA抗体阳性6例（14.6%,6/41）,抗HLA和抗MICA抗体均阳性1例（2.4%,1/41）.另外有5例抗MICA抗体可疑阳性.除1例的抗MICA抗体为供者特异性抗体（DSA）外,其余均为非供者特异性抗体（NDSA）.37例随访者中,6例新生抗HLA抗体（16.2%）,3例新生抗MICA抗体（8.1%）,新生抗HLA抗体者的抗体滴度在随访3年中呈现上升趋势.9例预存抗体的受者,有4例（44.4%,4/9）发生排斥反应;6例新生抗HLA抗体的受者中,有3例（50.0%）发生急性排斥反应,而3例新生抗MICA抗体的受者均无排斥反应发生,二者间的差异有统计学意义（P＜0.05）.新生抗HLA抗体产生较早（术后3 d和7 d）的2例受者均检测到抗HLAⅡ类DSA,其移植肾均因排斥反应而切除.预存抗MICA抗体,且移植后发生排斥反应者在随访的每个时间点上的血清肌酐水平均高于预存抗MICA抗体但无排斥反应者（P＜0.05）;移植前抗HLA和抗MICA抗体均阴性者,术后发生排斥反应者在随访的每个时间点上的血清肌酐水平均高于抗体阴性且无排斥反应者（P＜0.01）;无论是新生抗HLA抗体还是抗MICA抗体,移植后1个月发生排斥反应者的血肌酐均明显高于抗体阴性且无排斥反应者（P＜0.01）.结论 预存和新生抗HLA抗体是移植后发生急性排斥反应的重要因素,而供、受者HLA和MICA基因错配是产生新生抗体的重要原因. 展开更多
关键词 肾移植 抗体 HLA抗原 基因 mhcⅠ类 移植物排斥 肾功能试验
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肾移植术后新生HLA抗体和MICA抗体对移植肾功能的损伤作用 被引量：2
3
作者 彭志国 田军 +6 位作者 扈煜 张鲁伟 崔先泉 毕正 鲜万华 孙怀斌 李恩刚 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第12期74-77,共4页
目的研究肾移植术后新生人类白细胞抗原(HLA)抗体及主要组织相容性I类相关链A抗原(MICA)抗体的产生对移植肾功能的损伤作用。方法采用免疫磁珠流式细胞仪液相芯片技术检测96例肾移植患者HLA及MICA抗体。根据检测结果,将患者分为HLA抗体... 目的研究肾移植术后新生人类白细胞抗原(HLA)抗体及主要组织相容性I类相关链A抗原(MICA)抗体的产生对移植肾功能的损伤作用。方法采用免疫磁珠流式细胞仪液相芯片技术检测96例肾移植患者HLA及MICA抗体。根据检测结果,将患者分为HLA抗体阳性组(HLA+)、MICA抗体阳性组(MICA+)、以及HLA、MICA抗体阴性组(HLA-/MICA-),观察并比较各组不良免疫事件的发生率。再根据有无急性排斥(AR),将患者分为排斥组(AR+)和非排斥(AR-)组,观察HLA抗体、MICA抗体对移植肾功能的影响。结果HLA+组急性排斥反应发生率高于HLA-/MICA-组(43.5%vs11.7%,P<0.05);MICA+组急性排斥反应发生率与HLA-/MICA-组比较差异无统计学意义(15.3%vs11.7%,P>0.05);AR+组中,HLA+患者术后1、3、6和12个月时血清肌酐水平高于HLA-/MICA-患者,MICA+患者在术后1、3月时血肌酐水平高于抗体阴性患者;AR-组中,HLA+患者术后6、12个月血肌酐水平高于HLA-/MICA-患者;MICA+组在术后6个月及12个月的尿蛋白定量均值高于150mg,并随时间逐渐升高。结论HLA抗体对移植肾功能的损伤作用表现为血清肌酐的升高以及与急性排斥反应的发生有关;MICA抗体对移植肾功能的损伤主要表现为尿蛋白定量的升高。 展开更多
关键词 肾移植 HLA抗体 MICA抗体 移植物排斥
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