基于蛋白组学分析旋毛虫原肌球蛋白过表达对小细胞肺癌NCI-H446细胞蛋白组分的影响 被引量：1

1

作者 王灏轩 朱莹莹 +2 位作者 程露阳 郭文平 杜娈英 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期758-765,共8页

目的研究旋毛虫原肌球蛋白(tropomyosin,Tm)过表达对人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)NCI-H446细胞蛋白组分的影响。方法本研究通过串联质谱标记(Tandem mass tags,TMT)技术结合生物信息学分析旋毛虫Tm过表达对NCI-H446细胞... 目的研究旋毛虫原肌球蛋白(tropomyosin,Tm)过表达对人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)NCI-H446细胞蛋白组分的影响。方法本研究通过串联质谱标记(Tandem mass tags,TMT)技术结合生物信息学分析旋毛虫Tm过表达对NCI-H446细胞蛋白组分的影响。比较旋毛虫Tm(Tm-pcDNA3.1)过表达和转染空载体(pcDNA3.1)48 h后NCI-H446细胞的蛋白组分,利用Uniprot数据库检索差异表达蛋白(Differentially expressed protein,DEPs)并对所得DEPs进行基因本体论(GO)富集分析。从STRING数据库获得DEPs相互作用数据,利用Cytoscape 3.9.0软件构建蛋白互作网络并筛选中心节点蛋白。通过Western blot对随机选取的中心节点蛋白NDRG1进行验证。结果旋毛虫Tm转染NCI-H446细胞48 h后,筛选出DEPs 70个,其中34个上调,36个下调;GO功能富集分析显示,DEPs主要涉及转录后的调控、免疫应答的调节等生物学功能;分析蛋白互作网络获得5个下调的中心节点蛋白:细胞周期蛋白G相关激酶(GAK)、组蛋白H3-7(H3-7)、辛普勒金Symplekin(SYMPK)、N-myc下游调节因子1(NDRG1)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶N2(PKN2);Westrne blot结果显示旋毛虫Tm降低NCI-H446细胞中NDRG1的表达。结论旋毛虫TM能引起NCI-H446细胞蛋白组分的显著变化;旋毛虫Tm可能通过下调NCI-H446细胞中GAK、H3-7、SYMPK、NDRG1、PKN2的表达发挥其生物学作用。 展开更多

关键词 旋毛虫 原肌球蛋白 小细胞肺癌nci-h446细胞 蛋白组学

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旋毛虫排泄分泌蛋白对小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响 被引量：8

2

作者 常红敏 赵蕾 +4 位作者 王小杰 方艳辉 李丹 罗婧梅 杜娈英 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期299-303,共5页

目的研究旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白对人小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响。方法旋毛虫肌幼虫培养24 h,收集培养液,取上清,即为旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白。将人小细胞肺癌NCI-H446细胞(编号A054)随机分为3组,实验组(A组)和细胞凋亡组(B... 目的研究旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白对人小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响。方法旋毛虫肌幼虫培养24 h,收集培养液,取上清,即为旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白。将人小细胞肺癌NCI-H446细胞(编号A054)随机分为3组,实验组(A组)和细胞凋亡组(B组)的NCI-H446细胞(5×106/ml)分别与旋毛虫排泄分泌蛋白(终浓度为0.3 mg/ml)和顺铂(6.4μg/ml)共培养24 h,空白对照组(C组)的NCI-H446细胞培养24 h,不作任何处理。RT-PCR检测3组NCI-H446细胞中凋亡抑制基因Bcl-2、凋亡相关基因Fas和Fas配体(Fasl)mRNA的表达水平。以抗原癌基因C-myc标签鼠单克隆抗体为一抗,蛋白质印迹(Western blotting)检测3组细胞C-myc蛋白的表达情况。免疫荧光检测3组NCI-H446细胞中C-myc蛋白阳性表达情况。结果 RT-PCR结果显示,经旋毛虫排泄分泌蛋白处理的NCI-H446细胞(A组),Bcl-2 mRNA相对表达水平最低,为(0.575±0.047),与B(0.850±0.073)、C组(0.975±0.069)比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。A组Fas mRNA相对表达量最高,为(0.975±0.115),B(0.817±0.121)、C组(0.769±0.061)相对较低(P<0.05)。A、B和C组细胞Fasl mRNA相对表达水平分别为0.669±0.051、0.787±0.124、0.875±0.125(P<0.05)。A、B和C组细胞Fas/Fasl mRNA比值分别为1.475、1.038和0.878。Western blotting分析结果显示,A组C-myc相对表达水平最低(0.566±0.054),B(1.074±0.069)、C组(1.172±0.026)相对较高(P<0.05)。免疫荧光定位结果显示,旋毛虫排泄分泌蛋白和顺铂作用后24 h,C-myc蛋白在细胞浆/细胞核表达。结论旋毛虫排泄分泌蛋白可促进人小细胞肺癌细胞系NCI-H446细胞凋亡,可能是通过调节凋亡蛋白C-myc表达、进而抑制Bcl-2 mRNA的表达并调节Fas/Fasl mRNA比例来实现的。 展开更多

关键词 旋毛虫 排泄分泌蛋白 小细胞肺癌 nci-h446 凋亡基因 凋亡蛋白

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志苓胶囊对人小细胞肺癌细胞系NCI-H446增殖抑制和诱导凋亡的影响 被引量：7

3

作者 陈英玉 潘云苓 +3 位作者 刘庭波 潘明继 胡辉亮 胡建达 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期531-534,共4页

目的研究志苓胶囊(ZLJN)对人小细胞肺癌细胞系NCI-H446增殖影响及诱导凋亡作用。方法将志苓胶囊按其不同的中西药成分配制成不同浓度的中药组、西药组和复方组,与NCI-H446共培养后,采用MTT比色法、集落形成试验,分别检测细胞存活率和集... 目的研究志苓胶囊(ZLJN)对人小细胞肺癌细胞系NCI-H446增殖影响及诱导凋亡作用。方法将志苓胶囊按其不同的中西药成分配制成不同浓度的中药组、西药组和复方组,与NCI-H446共培养后,采用MTT比色法、集落形成试验,分别检测细胞存活率和集落形成率。通过流式细胞仪进行DNA倍体分析、Bcl-2蛋白表达、线粒体跨膜电位及Caspase-3活性检测;DNA片段化分析法、Annexin V-FITC标记法、TdT酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞。结果不同浓度的药物组与NCI-H446共培养后,细胞生长明显受抑制,细胞集落形成率明显降低,呈浓度依赖性;各药物组处理后的细胞线粒体跨膜电位和Bcl-2蛋白表达水平下降,Caspase-3活性增强;琼脂糖凝胶电泳可见典型的DNA梯形带;各药物组均检测到明显的亚二倍体G1峰(凋亡峰);Annexin V-FITC法检测到早期凋亡细胞;TUNEL法检测到晚期凋亡细胞。复方组诱导细胞凋亡作用强于中药组和西药组。结论志苓胶囊可以有效抑制NCI-H446细胞增殖,诱导其凋亡,细胞线粒体跨膜电位水平降低,Caspase-3活性增强和Bcl-2表达下调可能参与了该过程。 展开更多

关键词 小细胞肺癌细胞系nci-h446 志苓胶囊 增殖 凋亡

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志苓胶囊对小细胞肺癌细胞株NCI-H446细胞凋亡及h-TERT、CD44表达的影响 被引量：4

4

作者 陈英玉 潘云苓 +3 位作者 郑志宏 潘明继 胡建达 刘庭波 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1382-1386,共5页

目的研究志苓胶囊(抗癌复方Ⅱ号)对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446诱导凋亡作用机制以及对细胞黏附分子表达的影响。方法将志苓胶囊按其不同的中西药成份配制成相应的中药组、西药组和复方组,与NCI-H446共培养后,倒置显微镜观察、Hochest33... 目的研究志苓胶囊(抗癌复方Ⅱ号)对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446诱导凋亡作用机制以及对细胞黏附分子表达的影响。方法将志苓胶囊按其不同的中西药成份配制成相应的中药组、西药组和复方组,与NCI-H446共培养后,倒置显微镜观察、Hochest33258荧光染色法检测凋亡细胞,RT-PCR、Western blot、流式细胞仪分别检测bcl-2、bax、hTERT基因mRNA和相应蛋白表达水平变化以及黏附分子CD44的表达变化。结果NCI-H446经不同的药物组处理后,倒置显微镜、Hochest33258荧光染色可观察到细胞凋亡形态学改变,bcl-2基因mRNA和蛋白表达水平均有不同程度下降,bax基因表达水平则有不同程度增强,复方组改变最明显,各药物组与对照组比较差异具有显著性(P<0.01)。中药组和西药组hTERT基因和蛋白表达水平未见明显改变,复方组表达水平下调,与对照组比较差异具有显著性(P<0.01)。各药物组CD44表达水平降低,其中复方组降低水平最明显(P<0.01)。结论志苓胶囊可能通过下调NCI-H446细胞bcl-2、hTERT基因和CD44分子表达,增强bax基因表达,从而诱导NCI-H446细胞凋亡,抑制细胞黏附、转移。 展开更多

关键词 小细胞肺癌细胞株nci-h446 志苓胶囊 凋亡 HTERT CD44

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不同IL-15基因转染对NCI-H446肿瘤细胞增殖的影响 被引量：2

5

作者 王智华 王润田 +3 位作者 丁军颖 张征峥 邓郁青 王平 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期639-641,共3页

目的探讨不同形式IL-15基因转染对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446细胞增殖的影响。方法用本室已构建的3种转染不同IL-15基因(原型、成熟肽及以IL-2信号肽替代IL-15信号肽的改型IL-15基因)的NCI-H446细胞模型:CIL-15、CIL-15mp和CIL-2sp-IL-... 目的探讨不同形式IL-15基因转染对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446细胞增殖的影响。方法用本室已构建的3种转染不同IL-15基因(原型、成熟肽及以IL-2信号肽替代IL-15信号肽的改型IL-15基因)的NCI-H446细胞模型:CIL-15、CIL-15mp和CIL-2sp-IL-15mp,以野生株NCI-H446细胞(CW)为对照,台盼蓝拒染计数法测定细胞生长曲线、MTT法检测细胞增殖、流式细胞术分析细胞周期的变化、RT-PCR法检测cyclinD1和cyclinE的表达。结果与CW相比,CIL-15、CIL-15mp和CIL-2sp-IL-15mp增殖速率依次减慢、G0/G1期细胞比例依次增加、S期细胞和细胞周期蛋白cyclinE表达依次减少、cyclinD1表达无变化。结论3种IL-15基因转染均有使NCI-H446细胞增殖明显减慢的作用,强度依次为改型>成熟肽>原型;这种作用与降低NCI-H446细胞cyclinE的表达有关(r=0.953,P<0.05),与cyclinD1的表达无关(r=0.155,P>0.05)。 展开更多

关键词 IL-15 基因转染 nci-h446 细胞增殖 细胞周期

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金莲花黄酮对K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446细胞增殖的影响 被引量：15

6

作者 孙黎 程建贞 +3 位作者 罗强 张秀昌 白雪梅 安芳 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第5期981-983,共3页

目的:观察金莲花黄酮对K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞增殖的影响。方法:①采用CCK-8法检测0.793、1.586、3.172、6.344、9.516、12.688g/L金莲花黄酮对K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞株增殖的影响。②采用流式细胞术观察... 目的:观察金莲花黄酮对K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞增殖的影响。方法:①采用CCK-8法检测0.793、1.586、3.172、6.344、9.516、12.688g/L金莲花黄酮对K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞株增殖的影响。②采用流式细胞术观察0.793、1.586、3.172g/L金莲花黄酮对K562细胞周期的影响。结果:①金莲花黄酮在0.793～12.688g/L范围内对体外培养的K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用,且抑制作用呈剂量依赖性(F=6.72,9.81,8.54,4.83,P均<0.05)。②金莲花黄酮可使K562G0/G1期细胞增多,S期细胞减少(F=12.56,20.86,P均<0.05)。结论:金莲花黄酮对体外培养的K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞株的增殖均有很强的抑制作用;金莲花黄酮可使体外培养的K562细胞周期阻滞在G0/G1期,可能是其抑制K562肿瘤细胞增殖的机制。 展开更多

关键词 金莲花黄酮 K562 HELA Ec-109 nci-h446 增殖

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低剂量X射线照射对荷人小细胞肺癌(NCI-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因mRNA表达的影响 被引量：7

7

作者 姜宏宇 王冠军 丁艳华 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1373-1375,共3页

目的研究低剂量照射(LDR)对荷人小细胞肺癌(NC I-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因mRNA表达的影响。方法对荷人小细胞肺癌裸小鼠进行全身深部X射线照射,采用原位杂交技术检测荷人小细胞肺癌裸小鼠移植瘤组织的p53、Bcl-2、Bax的mRNA... 目的研究低剂量照射(LDR)对荷人小细胞肺癌(NC I-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因mRNA表达的影响。方法对荷人小细胞肺癌裸小鼠进行全身深部X射线照射,采用原位杂交技术检测荷人小细胞肺癌裸小鼠移植瘤组织的p53、Bcl-2、Bax的mRNA表达水平。结果D1(75 mGy)、D2(4Gy)照射后,小细胞肺癌细胞的p53、Bax的mRNA表达呈上升趋势,Bcl-2的mRNA表达呈下降趋势,但与假照组(0 mGy)比较,无明显差异;D1+D2组的p53、Bax的mRNA表达明显增多,Bcl-2 mRNA表达显著下降,与假照组(0 mGy)比较有统计学差异(P<0.05)。结论LDR在一定程度上可能上调了小细胞肺癌细胞的p53、Bax的mRNA表达,下调了Bcl-2 mRNA的表达,同时对其后的大剂量照射有协同作用。 展开更多

关键词 低剂量照射 人小细胞肺癌nci-h446细胞株 凋亡 原位杂交

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小白菊内酯对人小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖及凋亡作用研究 被引量：3

8

作者 刘捷 徐玲 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期414-419,共6页

目的:研究小白菊内酯(parthenolide,PTL)对人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)细胞株NCI-H446增殖及凋亡作用的影响及其可能的分子机制。方法:NCI-H446细胞株由武汉大学细胞库提供,PTL购于Gene Operation公司,将NCIH446细胞株... 目的:研究小白菊内酯(parthenolide,PTL)对人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)细胞株NCI-H446增殖及凋亡作用的影响及其可能的分子机制。方法:NCI-H446细胞株由武汉大学细胞库提供,PTL购于Gene Operation公司,将NCIH446细胞株分为对照组和实验组(1.5μg/m L组、2.0μg/m L组、2.5μg/m L组和3.0μg/m L组),向实验组细胞培养基中加入对应浓度PTL处理细胞,对照组中加入等体积无血清培养基。MTT比色法观测不同浓度PTL对NCI-H446细胞增殖的影响;Hochest 33258染色后,荧光显微镜下观察细胞核形态学变化;流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析细胞凋亡率;RT-PCR分别检测不同浓度组PTL处理48 h后细胞中NF-κB、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9基因的表达状态,Wsetern blot检测NF-κB、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白的表达状态。结果:PTL抑制小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖并呈浓度依赖性;Hochest33258染色结果显示,PTL作用NCI-H446细胞48 h后,细胞数量减少,细胞核固缩碎裂,形成凋亡小体,导致细胞凋亡;流式细胞术检测显示,PTL处理NCI-H446细胞后,细胞凋亡率与药物浓度梯度呈浓度依赖性,差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR及Wsetern blot结果显示,与对照组比较,经PTL处理的NCI-H446细胞中NF-κB m RNA及蛋白表达下调,同时Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 m RNA及蛋白表达上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:PTL能抑制NCI-H446细胞的增殖并诱导其发生凋亡,PTL的作用机制可能与抑制NF-κB信号通路及活化Caspase系统有关。 展开更多

关键词 小白菊内酯 小细胞肺癌HCI-H446 细胞增殖 细胞凋亡

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不同IL-15转染对NCI-H446HLA-Ⅰ和HLA-Ⅱ表达及NK敏感性的影响 被引量：3

9

作者 丁军颖 王润田 +5 位作者 张征峥 杨志强 韩志鹏 李铁民 邓郁青 王平 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期468-470,共3页

目的探讨不同形式IL15基因转染对人小细胞肺癌细胞株NCIH446细胞HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达及NK杀伤敏感性的影响。方法在本室已构建的3种细胞模型(转染IL15成熟肽基因的NCIH446/IL15mp细胞、转染原型IL15基因的NCIH446/IL15细胞和转染以... 目的探讨不同形式IL15基因转染对人小细胞肺癌细胞株NCIH446细胞HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达及NK杀伤敏感性的影响。方法在本室已构建的3种细胞模型(转染IL15成熟肽基因的NCIH446/IL15mp细胞、转染原型IL15基因的NCIH446/IL15细胞和转染以IL2信号肽替代IL15信号肽的改型IL15基因的NCIH446/IL2spIL15mp细胞)基础上[1],以野生株细胞为对照,流式细胞分析仪(Fluorescenceactivatedcellsorter,FACS)分析这3种细胞HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定它们对NK杀伤的敏感性。结果野生株NCIH446细胞表面阳性表达HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子;转染IL15成熟肽基因或改型IL15基因后,这两种分子的表达均被抑制为阴性;转染原型IL15基因后,这两种分子的表达均被显著上调。5名不同健康志愿者的外周血单个核细胞(PBMC)对野生株NCIH446细胞的平均NK杀伤率最低,对NCIH446/IL15、NCIH446/IL15mp和NCIH446/IL2spIL15mp细胞的平均NK杀伤率依次升高。结论转染不同形式IL15基因对NCIH446细胞的免疫生物学特性影响不同。转染IL15成熟肽基因或改型IL15基因,抑制NCIH446细胞表面HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达;转染原型IL15基因,上调这两种分子的表达;转染不同形式IL15基因均可增强NCIH446细胞对NK杀伤的敏感性,但程度不同:以改型IL15者最高,IL15成熟肽者次之,原型IL15者最低。 展开更多

关键词 IL-15 基因转染 nci-h446 HLA-Ⅰ HLA-Ⅱ NK杀伤敏感性

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不同IL-15基因转染对NCI-H446细胞诱导PBMC增殖和杀伤肿瘤细胞的影响 被引量：1

10

作者 丁军颖 王润田 +5 位作者 王智华 崔瀓 韩志鹏 李铁民 张征峥 邓郁青 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期645-648,共4页

目的研究不同IL-15基因转染对NCI-H446细胞诱导外周血单个核细胞(PBMC)增殖和杀伤肿瘤细胞的影响。方法野生型NCI-H446细胞(Cw)和被3种IL-15基因分别转染的3种NCI-H446细胞(Cmp:被IL-15成熟肽基因转染;Cp:被原型IL-15基因转染;Csp:被信... 目的研究不同IL-15基因转染对NCI-H446细胞诱导外周血单个核细胞(PBMC)增殖和杀伤肿瘤细胞的影响。方法野生型NCI-H446细胞(Cw)和被3种IL-15基因分别转染的3种NCI-H446细胞(Cmp:被IL-15成熟肽基因转染;Cp:被原型IL-15基因转染;Csp:被信号肽换为IL-2信号肽的改型IL-15基因转染),用丝裂霉素(M)处理后(分别名为MCw、MCmp、MCp和MCsp)作为刺激细胞刺激健康志愿者的PBMC。对这些被刺激的PBMC,分别名为MCw-PBMC、MCmp-PBMC、MCp-PBMC和MC-sp-PBMC。台盼蓝拒染法计数细胞数,流式细胞术测定CD4+细胞和CD8+细胞百分率。在MCmp-PBMC,MCp-PBMC和MCsp-PBMC中,选择其细胞数和CD4+细胞和/或CD8+细胞百分率统计学上明显高于MCw-PBMC的作为效应细胞,MTT法测定它们对Cw的杀伤。结果与MCw-PBMC相比,MCp-PBMC在细胞数、CD4+细胞和CD8+细胞百分率及对Cw的杀伤上,均显著提高(P<0.05)。结论原型IL-15基因转染能提高NCI-H446细胞诱导PBMC增殖和杀伤野生型NCI-H446细胞的能力。 展开更多

关键词 白细胞介素15 基因转染 nci-h446 外周血单个核细胞 杀伤肿瘤细胞

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反义bcl-2硫代磷酸寡脱氧核苷酸对小细胞肺癌细胞株NCI-H446的抑制作用及诱导细胞凋亡的研究 被引量：5

11

作者 陈鑫基 胡建达 +1 位作者 战榕 吕联煌 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期374-378,共5页

目的 :观察反义bcl- 2硫代磷酸寡脱氧核苷酸 (AS -PS -ODN)对小细胞肺癌细胞株NCI-H44 6mRNA、蛋白以及增殖、活力和凋亡的影响。方法 :合成bcl- 2AS -PS -ODN作用于小细胞肺癌细胞株NCI-H44 6,半定量RT -PCR检测bcl- 2mRNA表达 ;免疫... 目的 :观察反义bcl- 2硫代磷酸寡脱氧核苷酸 (AS -PS -ODN)对小细胞肺癌细胞株NCI-H44 6mRNA、蛋白以及增殖、活力和凋亡的影响。方法 :合成bcl- 2AS -PS -ODN作用于小细胞肺癌细胞株NCI-H44 6,半定量RT -PCR检测bcl- 2mRNA表达 ;免疫细胞化学染色和流式细胞仪检测Bcl- 2蛋白表达 ;通过克隆形成率、细胞计数、流式细胞仪DNA倍体分析、TUNEL等指标观察bcl- 2AS -PS -ODN对细胞增殖、活力和凋亡的影响。结果 :①bcl- 2AS -PS -ODN能特异性地降低NCI-H44 6细胞bcl- 2mRNA和Bcl- 2蛋白的表达。 1μmol/LAS -PS-ODN作用 2 4h后bcl- 2mRNA表达量下降 69 5 % ,48h后Bcl- 2蛋白下降 62 7%。②bcl- 2AS -PS -ODN能够抑制细胞增殖和活力 ,诱导细胞凋亡 ,1μmol/LAS -PS -ODN作用 2 4h后 ,细胞凋亡率约为 2 2 3 % - 3 2 7%。 结论 :bcl- 2AS -PS -ODN能够特异性降低bcl- 2mRNA、蛋白表达 ,抑制NCI-H44 6细胞的增殖和活力 。 展开更多

关键词 硫代磷酸寡脱氧核苷酸 小细胞 肺癌细胞株 nci-h446 BCL-2 细胞凋亡

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热疗联合紫杉醇对NCI-H446细胞增殖和VEGF mRNA表达的影响 被引量：2

12

作者 张瑞芳 王威 吴拥军 《河南医学研究》 CAS 2010年第3期263-265,269,共4页

目的:观察热疗联合紫杉醇对NCI-H446细胞增殖作用以及VEGF mRNA表达的影响。方法:将NCI-H446细胞分组,Ⅰ热疗组(43℃加热90 min);Ⅱ紫杉醇组;Ⅲ热疗联合紫杉醇组;Ⅳ对照组(常规培养细胞)。分别在处理72 h后用MTT法检测4组细胞增殖情况;R... 目的:观察热疗联合紫杉醇对NCI-H446细胞增殖作用以及VEGF mRNA表达的影响。方法:将NCI-H446细胞分组,Ⅰ热疗组(43℃加热90 min);Ⅱ紫杉醇组;Ⅲ热疗联合紫杉醇组;Ⅳ对照组(常规培养细胞)。分别在处理72 h后用MTT法检测4组细胞增殖情况;RT-PCR检测各组细胞中VEGF mRNA的表达量。结果:加热抑制了NCI-H446细胞的增殖;单独应用紫杉醇随着药物浓度的倍比增大,增殖抑制率逐渐增大;加热联合紫杉醇与对应浓度单独使用比较差异有统计学意义(P<0.05)。加热降低了NCI-H446细胞中VEGF mRNA的表达;加热联合紫杉醇组中NCI-H446细胞中VEGF mRNA的表达量明显减少,与对应浓度紫杉醇组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:43℃加热90 min联合紫杉醇对NCI-H446细胞增殖有抑制作用,并降低了VEGF mRNA的表达量。 展开更多

关键词 热疗 紫杉醇 nci-h446细胞 增殖抑制率 VEGF MRNA

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奥沙利铂诱导人小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的研究 被引量：1

13

作者 李玉芳 仲宁 +1 位作者 沈文香 王金志 《现代肿瘤医学》 CAS 2011年第7期1315-1318,共4页

目的:研究奥沙利铂对人肺癌细胞株NCI-H446生长抑制及诱导凋亡的作用并探讨其机制。方法:以不同浓度的奥沙利铂作用于NCI-H446细胞,应用采用噻唑蓝(MTT)法检测奥沙利铂对NCI-H446细胞生长的抑制作用。Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋... 目的:研究奥沙利铂对人肺癌细胞株NCI-H446生长抑制及诱导凋亡的作用并探讨其机制。方法:以不同浓度的奥沙利铂作用于NCI-H446细胞,应用采用噻唑蓝(MTT)法检测奥沙利铂对NCI-H446细胞生长的抑制作用。Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡形态学变化;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;分光光度法检测caspase-3、caspase-8、caspase-9的活性。结果:奥沙利铂可抑制NCI-H446细胞的生长并具有时间和剂量依赖性,Hoechst 33258荧光染色可见典型的细胞凋亡特征,流式细胞仪检测到细胞阻滞于S期和sub-G1峰。经过奥沙利铂诱导,caspase-3、caspase-9活性被上调,较对照组明显升高(P<0.05),caspase-8活性未见明显改变(P>0.05)。结论:奥沙利铂具有抑制肺癌细胞株NCI-H446增殖及诱导凋亡作用,此作用可能通过激活内源性凋亡途径实现。 展开更多

关键词 奥沙利铂 nci-h446细胞 凋亡 细胞周期

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^(125)I-RC-160的标记及与NCI-H446细胞体外受体结合特性的研究 被引量：4

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作者 李富军 汪静 +1 位作者 邓敬兰 李焰 《核技术》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期321-326,共6页

为探索高比活度12 5I -生长抑素类似物 (RC - 160 )的制备及与小细胞肺癌 (SCLC)细胞株-NCI-H4 46体外受体结合特性。12 5I -RC - 160采用氯胺T法标记 ,C18反向色谱柱纯化 ,硅胶纸层析检测。12 5I-RC - 160与NCI -H4 46细胞进行体外结... 为探索高比活度12 5I -生长抑素类似物 (RC - 160 )的制备及与小细胞肺癌 (SCLC)细胞株-NCI-H4 46体外受体结合特性。12 5I -RC - 160采用氯胺T法标记 ,C18反向色谱柱纯化 ,硅胶纸层析检测。12 5I-RC - 160与NCI -H4 46细胞进行体外结合实验、饱和结合实验和竞争结合实验。12 5I -RC - 160标记率为 5 4.34 % ,比活度 1.85TBq/ (mmol·L- 1) ,放射化学纯度 (RCP)为 92 % ;Scatchard作图提示 ,Kd 为 1.71× 10 - 10 mol/L ,Bmax为 1.0 6× 10 5个 /细胞。制备的12 5I -RC - 160达到体外受体配体结合分析的标准 ;12 5I-RC - 160与NCI -H4 46的结合具有温度时间依赖性、可饱和性、可逆性及特异 ;12 5I -RC - 160与NCI -H4 46细胞生长抑素受体的结合符合单位点系统。 展开更多

关键词 RC-160 标记 nci-h446 细胞体外受体 结合特性 生长抑素 小细胞肺癌 碘125 受体介导核素治疗 放射性核素

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低剂量辐射对荷人小细胞肺癌(NCI-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡的影响 被引量：2

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作者 邵明柏 姜宏宇 王冠军 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期297-299,共3页

目的探讨低剂量辐射对荷人小细胞肺癌(NCIH446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡的影响。方法对荷人小细胞肺癌裸小鼠进行全身深部X射线照射,采用TUNEL(末端脱氧核甘酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记)检测荷人小细胞肺癌裸小鼠移植瘤组织细胞凋亡的... 目的探讨低剂量辐射对荷人小细胞肺癌(NCIH446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡的影响。方法对荷人小细胞肺癌裸小鼠进行全身深部X射线照射,采用TUNEL(末端脱氧核甘酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记)检测荷人小细胞肺癌裸小鼠移植瘤组织细胞凋亡的情况。结果D1组(75mGy)照射后,细胞凋亡指数(AI)呈增加趋势,但与假照组(0mGy)比差异不显著(P>0.05)。D2组(4Gy)、D1+D2组细胞凋亡指数均明显增加,与假照组(0mGy)比差异显著(P<0.010。而D1+D2组与D2组比较,D1+D2组细胞凋亡指数增加更为明显,有统计学差异(P<0.05)。结论75mGy照射对小细胞肺癌可能有一定的促细胞凋亡作用;大剂量照射及低剂量联合大剂量照射对小细胞肺癌均有促细胞凋亡作用,低剂量辐射与大剂量辐射有协同促小细胞肺癌细胞凋亡的作用。 展开更多

关键词 低剂量辐射 人小细胞肺癌(NCI—H446) 裸小鼠 凋亡

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瑞香狼毒提取物作用于人肺癌细胞NCI-H446[H446]后端粒酶的定量表达 被引量：3

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作者 刘芳 刘华 孙黎 《河北北方学院学报（医学版）》 2008年第3期27-29,共3页

目的:通过端粒酶的数量变化来探讨瑞香狼毒提取物对肺癌细胞NCI-H446[H446]的抗肿瘤作用。方法:体外培养肺癌细胞NCI-H446[H446]细胞株,以不同浓度的瑞香狼毒提取物作用24h后,用荧光标记的方法定量检测端粒酶。结果:瑞香狼毒提取物作用... 目的:通过端粒酶的数量变化来探讨瑞香狼毒提取物对肺癌细胞NCI-H446[H446]的抗肿瘤作用。方法:体外培养肺癌细胞NCI-H446[H446]细胞株,以不同浓度的瑞香狼毒提取物作用24h后,用荧光标记的方法定量检测端粒酶。结果:瑞香狼毒提取物作用人肺癌细胞提取物NCI-H446[H446]后,端粒酶的数量明显减少并呈现与剂量的正相关性。结论:瑞香狼毒提取物对肺癌细胞NCI-H446[H446]具有明显的抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 人肺癌细胞nci-h446[H446] 端粒酶 瑞香狼毒

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氯化甲基汞诱导NCI-H446细胞凋亡的体外实验研究

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作者 丁会 王建国 +2 位作者 李丹 刘伟 李志超 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第24期3215-3217,共3页

目的探讨氯化甲基汞(MMC)诱导NCI-H446细胞凋亡发生的可能机制。方法通过分子生物学方法,检测调控细胞凋亡的关键基因Bcl-2、Bax和caspase-3在mRNA水平的表达情况。结果MMC组细胞Bcl-2mRNA水平低于对照组,并存在着时间依赖性降低趋势,至... 目的探讨氯化甲基汞(MMC)诱导NCI-H446细胞凋亡发生的可能机制。方法通过分子生物学方法,检测调控细胞凋亡的关键基因Bcl-2、Bax和caspase-3在mRNA水平的表达情况。结果MMC组细胞Bcl-2mRNA水平低于对照组,并存在着时间依赖性降低趋势,至24h达到最低;Bax及caspase-3mRNA水平高于对照组,并存在着时间依赖性增高趋势,至24h达到最高。结论MMC能够在体外诱导NCI-H446细胞发生凋亡。 展开更多

关键词 氯化甲基汞 nci-h446细胞 细胞凋亡

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甲基汞对人类小细胞肺癌NCI-H446细胞周期的影响

18

作者 丁会 左孟华 +1 位作者 李丹 李志超 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第23期2305-2307,共3页

目的研究氯化甲基汞(MMC)对小细胞肺癌NCI-H446细胞周期的影响。方法采用流式细胞仪检测了MMC对NCI-H446细胞细胞周期的作用,并与目前最常用的化疗药顺铂(DDP)和同样具有剧毒的三氧化二砷(As2O3)做比较。结果MMC、DDP能使NCI-H446细胞... 目的研究氯化甲基汞(MMC)对小细胞肺癌NCI-H446细胞周期的影响。方法采用流式细胞仪检测了MMC对NCI-H446细胞细胞周期的作用,并与目前最常用的化疗药顺铂(DDP)和同样具有剧毒的三氧化二砷(As2O3)做比较。结果MMC、DDP能使NCI-H446细胞表现为G0/G1期细胞数剂量依赖性明显增加,S期细胞数呈剂量依赖性明显减少;As2O3组细胞表现为明显的G2/M期剂量依赖性增加,S期细胞数剂量依赖性减少。结论MMC、As2O3、DDP均能诱导小细胞肺癌细胞株的细胞周期阻滞,但阻滞作用发生在细胞周期的不同时相。 展开更多

关键词 甲基汞 小细胞肺癌 NCI—H446细胞 细胞周期

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低剂量辐射对荷人小细胞肺癌(NCI-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因蛋白表达的影响

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作者 姜宏宇 付军 +2 位作者 李红艳 王冠军 林贞花 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1075-1077,共3页

目的研究低剂量照射(LDR)对荷人小细胞肺癌(NC I-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因蛋白表达的影响。方法35只荷人小细胞肺癌(NC I-H446)裸小鼠,随机分为7个实验组,假照组(0 mGy);D1组(75 mGy);D2组(4 Gy);D1-12 h+D2组(D1照射后12 h予... 目的研究低剂量照射(LDR)对荷人小细胞肺癌(NC I-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因蛋白表达的影响。方法35只荷人小细胞肺癌(NC I-H446)裸小鼠,随机分为7个实验组,假照组(0 mGy);D1组(75 mGy);D2组(4 Gy);D1-12 h+D2组(D1照射后12 h予以D2);D1-24 h+D2组(D1照射后24 h予以D2);D1-48 h+D2组(D1照射后48 h予以D2);D1-72 h+D2组(D1照射后72 h予以D2)。各实验组不同方式照射后4 d,荷瘤裸鼠全部处死,采用免疫组化技术检测荷瘤组织的P53、Bcl-2、Bax的蛋白表达水平。结果D1组照射后,小细胞肺癌细胞的p53、Bcl-2的蛋白表达呈下降趋势,Bax蛋白表达呈上升趋势,但与假照组比较,无明显差异(P>0.05);D2组、D1+D2组的p53、Bcl-2蛋白表达明显减少,Bax蛋白表达明显增多,与假照组比较差异显著(P<0.05);而D1+D2组与D2组比较,差异显著(P<0.05),以D1+D2组p53、Bcl-2蛋白的表达减少、Bax蛋白的表达增多更为明显。结论低剂量辐射可能在一定程度上下调了小细胞肺癌细胞的p53、Bcl-2的蛋白表达,上调了Bax蛋白的表达,同时对其后的大剂量照射有协同作用。 展开更多

关键词 低剂量照射 人小细胞肺癌(nci-h446) 裸小鼠 凋亡 免疫组化

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以hsa-miR-491-3p为靶标的反义寡核苷酸对NCI-H446细胞生物学特性的影响 被引量：3

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作者 官士珍 付玉荣 +3 位作者 伊正君 李猛 裴景亮 高昆山 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期171-176,共6页

背景与目的:miRNAs是一类小分子RNA,参与转录后调控。前期研究结果显示,hsa-miR-491-3p在肺癌和肾癌组织中高表达,目前鲜见其功能研究的报道。本研究旨在探讨以hsa-miR-491-3p为靶标的反义寡核苷酸对人小细胞肺癌NCI-H446细胞生物学特... 背景与目的:miRNAs是一类小分子RNA,参与转录后调控。前期研究结果显示,hsa-miR-491-3p在肺癌和肾癌组织中高表达,目前鲜见其功能研究的报道。本研究旨在探讨以hsa-miR-491-3p为靶标的反义寡核苷酸对人小细胞肺癌NCI-H446细胞生物学特性的影响。方法:合成以hsa-miR-491-3p为靶标的反义寡核苷酸和随机对照序列,转染NCI-H446细胞。实验分4组:空白对照组(组1)、空白转染组(组2)、随机对照组(组3)和反义寡核苷酸组(组4)。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法筛选最佳作用浓度,Hoechst33258染色检测细胞核的形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡和周期变化,划痕实验检测细胞的迁移能力。结果:转染反义寡核苷酸后细胞生长受到抑制,最佳作用浓度为0.5μmol/L。Hoechst33258染色各组的凋亡率分别为(6.67±0.58)%、(7.00±1.00)%、(6.67±1.53)%和(26.33±1.53)%,组4的凋亡率明显高于前3组,差异有统计学意义(P<0.001)。流式细胞仪检测各组的凋亡率分别为(2.44±0.60)%、(2.59±0.85)%、(2.62±1.11)%和(5.22±0.40)%,组4的凋亡率明显高于前3组,差异有统计学意义(P<0.01),且G1期细胞增多,S期细胞减少。划痕实验显示各组细胞24 h的迁移距离分别为(196.88±39.13)、(163.06±21.28)、(225.49±23.42)和(77.41±6.07)μm,组4细胞的迁移距离小于前3组(P<0.05),迁移能力减弱。结论:以hsa-miR-491-3p为靶标的反义寡核苷酸能够抑制NCI-H446细胞增殖,诱导其凋亡,并降低其侵袭能力。 展开更多

关键词 hsa-miR-491-3p 反义寡核苷酸 细胞凋亡 nci-h446细胞

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