期刊文献+
共找到47篇文章
< 1 2 3 >
每页显示 20 50 100
LINE-1 ORF-1p过表达对肝癌细胞株SMMC7721增殖和锚定非依赖性生长的影响 被引量:5
1
作者 高旭东 陆荫英 +4 位作者 冯帆 王春平 王鈜 常秀娟 杨永平 《实用肝脏病杂志》 CAS 2011年第5期323-326,共4页
目的研究逆转座子L1编码蛋白ORF-1p的表达对肝癌细胞株SMMC7721细胞增殖的影响。方法利用带Flag标签的L1 ORF1表达载体,转染SMMC7721细胞;采用Western blot法检测反转座子L1 ORF1编码蛋白ORF-1p的表达;采用软琼脂成集落实验和相关报告... 目的研究逆转座子L1编码蛋白ORF-1p的表达对肝癌细胞株SMMC7721细胞增殖的影响。方法利用带Flag标签的L1 ORF1表达载体,转染SMMC7721细胞;采用Western blot法检测反转座子L1 ORF1编码蛋白ORF-1p的表达;采用软琼脂成集落实验和相关报告基因检测ORF-1p表达对肝癌细胞p53、p15和p21活性的影响。结果在SMMC7721细胞中,Flag-ORF-1p表达能够显著促进该细胞的增殖(P<0.05),增强该细胞的锚定非依赖性生长(P<0.05),降低p53、p15和p21报告基因的活性。结论 L1基因编码蛋白ORF-1p能够促进肝癌细胞的生长、浸润以及肿瘤的形成。 展开更多
关键词 肝癌细胞株SMMC7721 逆转座子L1 开放读码框-1p 蛋白质转移吸印技术
下载PDF
对标“1+X”证书的高职《建筑识图与CAD制图》在线开放课程建设 被引量:1
2
作者 胡芳珍 王贺贺 《武汉工程职业技术学院学报》 2023年第2期84-87,共4页
“1+X”证书的推进指明了职业教育的方向。在线开放课程的建设是教学信息化的具体表现。阐述了《建筑识图与CAD制图》在线开放课程建设现状,根据岗位特点和“1+X”职业技能等级证书的要求,系统地列举了在线开放课程的建设思路、建设内... “1+X”证书的推进指明了职业教育的方向。在线开放课程的建设是教学信息化的具体表现。阐述了《建筑识图与CAD制图》在线开放课程建设现状,根据岗位特点和“1+X”职业技能等级证书的要求,系统地列举了在线开放课程的建设思路、建设内容和建设步骤,最后还总结了在线开放课程建设的实践效果。 展开更多
关键词 1+X”证书 建筑识图 CAD制图 在线开放课程 课程建设
下载PDF
The ORF 113 of Heliocoverpa armigera Single Nucleopolyhedrovirus Encodes a Functional Fibroblast Growth Factor 被引量:2
3
作者 Xiang LI Chang-yong LIANG Jian-hua SONG Xin-wen CHEN 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2008年第5期321-329,共9页
Fibroblast growth factor (FGF) is a key regulator of developmental processes. A FGF homolog (vFGF) is found in all lepidopteran baculoviruses. Autographa californica nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) and Bombyx mori NPV (... Fibroblast growth factor (FGF) is a key regulator of developmental processes. A FGF homolog (vFGF) is found in all lepidopteran baculoviruses. Autographa californica nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) and Bombyx mori NPV (BmNPV) vFGFs are chemotactic factors. Here we analyzed the vfgf of Helicoverpa armigera NPV (HearNPV), a group II NPV. The HearNPV vfgf transcripts were detected from 18 to 96 h post-infection (hpi) of Hz-AM1 cells with HearNPV and encoded a 36 kDa protein, which was secreted into the culture medium. HearNPV vFGF had strong affinity to heparin, a property important for FGF signaling via an FGF receptor. Unlike its AcMNPV homolog, HearNPV vFGF specially chemoattracted Hz-AM1, but not other insect cells such as Sf9 and Se-UCR and not the mammalian cells 293 and HepG2. HearNPV vFGF is also associated with the envelope of BV but is absent in occlusion-derived virus, which coordinated to the chemotatic activity analysis. 展开更多
关键词 Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus (HearNPV) Fibroblast growth factor (FGF) BACULOVIRUS open reading frame 113 (orf 113)
下载PDF
Mutational analysis of hepatitis E virus ORF1 'Y-domain' : Effects on RNA replication and virion infectivity 被引量:1
4
作者 Mohammad Khalid Parvez 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2017年第4期590-602,共13页
AIMTo investigate the role of non-structural open reading frame 1 &#x0201c;Y-domain&#x0201d; sequences in the hepatitis E virus (HEV) life cycle.METHODSSequences of human HEV Y-domain (amino acid sequences 216... AIMTo investigate the role of non-structural open reading frame 1 &#x0201c;Y-domain&#x0201d; sequences in the hepatitis E virus (HEV) life cycle.METHODSSequences of human HEV Y-domain (amino acid sequences 216-442) and closely-related viruses were analyzed in silico. Site-directed mutagenesis of the Y-domain (HEV SAR55) was carried out and studied in the replicon-baculovirus-hepatoma cell model. In vitro transcribed mRNA (pSK-GFP) constructs were transfected into S10-3 cells and viral RNA replicating GFP-positive cells were scored by flow cytometry. Mutant virions&#x02019; infectivity was assayed on na&#x000ef;ve HepG2/C3A cells.RESULTSIn silico analysis identified a potential palmitoylation-site (C<sub>336</sub>C<sub>337</sub>) and an &#x003b1;-helix segment (L<sub>410</sub>Y<sub>411</sub>S<sub>412</sub>W<sub>413</sub>L<sub>414</sub>F<sub>415</sub>E<sub>416</sub>) in the HEV Y-domain. Molecular characterization of C<sub>336</sub>A, C<sub>337</sub>A and W<sub>413</sub>A mutants of the three universally conserved residues showed non-viability. Further, of the 10 consecutive saturation mutants covering the entire Y-domain nucleotide sequences (nts 650-1339), three constructs (nts 788-994) severely affected virus replication. This revealed the indispensability of the internal sequences but not of the up- or downstream sequences at the transcriptional level. Interestingly, the three mutated residues corresponded to the downstream codons that tolerated saturation mutation, indicating their post-translational functional/structural essentiality. In addition, RNA secondary structure prediction revealed formation of stable hairpins (nts 788-994) where saturation mutation drastically inhibited virion infectivity.CONCLUSIONThis is the first demonstration of the critical role of Y-domain sequences in HEV life cycle, which may involve gene regulation and/or membrane binding in intracellular replication complexes. 展开更多
关键词 Hepatitis E virus open reading frame 1 Y-domain PALMITOYLATION ;1 -HELIX
下载PDF
基于高通量数据分析DNA甲基化和拷贝数畸变对C1orf26基因表达的影响
5
作者 赵小芳 杜欣娜 《吉林医学》 CAS 2020年第6期1289-1291,共3页
目的:揭示乳腺癌中1号染色体开放阅读框26(Chromosome 1 Open Reading Frame 26,C1orf26)DNA甲基化和拷贝数畸变对表达的影响。方法:利用癌症多组学和临床数据库LinkedOmics分析DNA甲基化和拷贝数畸变对乳腺癌组织中C1orf26基因表达的... 目的:揭示乳腺癌中1号染色体开放阅读框26(Chromosome 1 Open Reading Frame 26,C1orf26)DNA甲基化和拷贝数畸变对表达的影响。方法:利用癌症多组学和临床数据库LinkedOmics分析DNA甲基化和拷贝数畸变对乳腺癌组织中C1orf26基因表达的影响。结果:C1orf26 mRNA水平与其基因拷贝数变化拷贝数畸变正相关(P<0.01),而与其DNA甲基化水平负相关(P<0.01);且LinkedOmics分析结果显示乳腺癌中C1orf26 mRNA水平分别受到组织学类型、肿瘤纯度和患者种族影响(P<0.05、P<0.01、P<0.01)。结论:C1orf26基因拷贝数畸变和DNA甲基化水平影响其表达,C1orf26可作为乳腺癌预后的潜在标志物。 展开更多
关键词 乳腺癌 1号染色体开放阅读框26 基因变化 预后
下载PDF
ORF1编码的四种非结构蛋白可用于戊型肝炎病毒的基因分型
6
作者 胡玲玲 王跃荣 郑海音 《智慧健康》 2018年第19期16-18,共3页
目的探讨人类戊型肝炎病毒(HEV)开放阅读框(ORF)1编码的四种非结构蛋白的基因序列能否用于其基因组的分型。方法从Gen Bank中查找并下载能感染人类测序完整的全基因组的HEV基因组及蛋白序列共35株,用Clustal W程序对35株HEV的ORF1编码... 目的探讨人类戊型肝炎病毒(HEV)开放阅读框(ORF)1编码的四种非结构蛋白的基因序列能否用于其基因组的分型。方法从Gen Bank中查找并下载能感染人类测序完整的全基因组的HEV基因组及蛋白序列共35株,用Clustal W程序对35株HEV的ORF1编码区序列进行多序列比对,并用treev32绘制基因进化树,研究其进化关系。结果 HEV的基因组全长为7.5kb;而RNA依赖的RNA聚合酶只有1460bp,其他的基因序列则更短,木瓜样半胱氨酸蛋白酶为479bp、解旋酶为734bp,多聚脯氨酸铰链只有200bp。这四种蛋白的多序列比对和进化分析结果与Gen Bank中的分型结果相符。结论 HEV ORF1编码表达的木瓜样半胱氨酸蛋白酶、多聚脯氨酸铰链、解旋酶和RNA依赖的RNA聚合酶的基因序列更短,且可作为HEV的分型依据,从而为HEV的分型找到了一种更简便、快捷的方法。 展开更多
关键词 戊型肝炎病毒 基因型 开放阅读框1 进化分析
下载PDF
36型人腺病毒E4ORF1真核表达载体的构建及其促进前脂肪细胞3T3-L1对葡萄糖利用的作用初探
7
作者 王冰丽 陈哲 +3 位作者 艾柯代姆·阿卜杜克热木 刘迪晖 赵炳尧 关亚群 《新疆医科大学学报》 CAS 2022年第5期469-478,共10页
目的通过构建早期基因4开放读码框1(E4ORF1)真核表达载体,探讨E4ORF1蛋白调节前脂肪细胞3T3-L1(小鼠胚胎成纤维细胞)利用葡萄糖的作用。方法通过分子克隆技术构建pcDNA3.1-E4ORF1重组质粒,并进行DNA测序鉴定。将前脂肪细胞3T3-L1分为对... 目的通过构建早期基因4开放读码框1(E4ORF1)真核表达载体,探讨E4ORF1蛋白调节前脂肪细胞3T3-L1(小鼠胚胎成纤维细胞)利用葡萄糖的作用。方法通过分子克隆技术构建pcDNA3.1-E4ORF1重组质粒,并进行DNA测序鉴定。将前脂肪细胞3T3-L1分为对照组和E4ORF1转染组,检测两组细胞第0、1、2、3天培养基中葡萄糖浓度,利用RT-qPCR和Western-Blot检测两组细胞第0、1、2、3、4天E4ORF1、己糖激酶2(HK2)、糖原合酶1(GYS1)mRNA和蛋白质的表达情况。油红O染色观察两组细胞第0、1、2、3、4天分化及脂质积累情况,检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白a(C/EBPa)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、脂肪酸合成酶(FASN)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)mRNA和蛋白质的表达情况。结果成功构建N端带FLAG(DYKDDDDK肽)标签的真核表达载体pcDNA3.1-E4ORF1。与对照组相比,E4ORF1转染组细胞培养基中葡萄糖浓度随培养时间延长下降更快,差异有统计学意义(P<0.01)。RT-qPCR和Western-Blot结果显示,与对照组相比,转染组E4ORF1的mRNA和蛋白表达水平均显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。E4ORF1转染组的糖酵解关键酶基因HK2和糖原合酶基因GYS1 mRNA和蛋白质的表达均显著上升(P均<0.05)。油红O染色显示两组细胞均无成脂分化现象,脂肪细胞分化标志基因PPARγ、C/EBPa、FABP4、FASN、ACC的mRNA和蛋白表达水平均无显著变化(P>0.05)。结论成功构建pcDNA3.1-E4ORF1真核表达载体;在前脂肪细胞3T3-L1中,E4ORF1可能通过促进HK2和GYS1的表达,参与细胞对葡萄糖的分解和糖原合成过程,对前脂肪细胞的分化无影响。 展开更多
关键词 36型人腺病毒 早期基因4开放读码框1 己糖激酶 前脂肪细胞3T3-L1 糖代谢
下载PDF
墨西哥利什曼原虫环形DNA1含有编码核苷酸结合蛋白基因(英文)
8
作者 汪俊云 杨玥涛 +1 位作者 包意芳 瞿靖琦 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期217-220,共4页
目的 对扩增的墨西哥利什曼原虫环形 DNA1(CD1)部分片段进行测序 ,确定具有蛋白编码功能的开放阅读框。 方法 通过脉冲电泳方法分离并使用琼脂糖酶方法回收 CD1,酶切的 CD1片段克隆于 p Zero载体 ,用 M13通用引物自动测序决定核苷酸... 目的 对扩增的墨西哥利什曼原虫环形 DNA1(CD1)部分片段进行测序 ,确定具有蛋白编码功能的开放阅读框。 方法 通过脉冲电泳方法分离并使用琼脂糖酶方法回收 CD1,酶切的 CD1片段克隆于 p Zero载体 ,用 M13通用引物自动测序决定核苷酸序列 ,用 GCG- PCGENE程序分析序列。 结果 测出 4385个核苷酸序列 ,通过分析发现两个开放阅读框具有蛋白质编码功能 (编码核苷酸结合蛋白 )。 结论 墨西哥利什曼原虫 展开更多
关键词 利什曼原虫 环形DNA1(CD1) 开放阅读框 蛋白质编码功能 结合蛋白基因
下载PDF
2019-2021年鸭坦布苏病毒广西流行毒株遗传多样性分析 被引量:3
9
作者 熊陈勇 尹彦文 +11 位作者 施开创 李军 郑敏 韦显凯 冯淑萍 龙凤 屈素洁 陆文俊 周洪槿 黄海莲 谢守玉 黎宗强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第8期3099-3111,共13页
【目的】研究鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)广西毒株分子遗传特征,以期了解、掌握DTMUV广西毒株流行新特点,为及时调整、制定有效防控措施提供数据支持。【方法】采集2019-2021年广西各地的鸭组织病料,采用已建立的实时荧光定... 【目的】研究鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)广西毒株分子遗传特征,以期了解、掌握DTMUV广西毒株流行新特点,为及时调整、制定有效防控措施提供数据支持。【方法】采集2019-2021年广西各地的鸭组织病料,采用已建立的实时荧光定量RT-PCR方法检测DTMUV,根据毒株检测年限和来源地选取部分阳性样品进行DTMUV全序列扩增及测序,并进行序列相似性、重要蛋白关键氨基酸位点、系统发育、全序列重组及遗传进化速率分析。【结果】共获得8株DTMUV全序列,基因组全长为10992 bp,为广西毒株。广西毒株之间开放阅读框(ORF)及E、NS5基因的核苷酸序列相似性分别为97.9%~99.8%、97.0%~99.9%和97.8%~99.9%,氨基酸序列相似性分别为99.1%~99.9%、99.0%~100%和99.3%~99.9%;与国内外参考毒株的核苷酸序列相似性分别为86.4%~99.3%、85.8%~99.5%和87.1%~99.2%,氨基酸序列相似性分别为96.0%~99.8%、94.8%~100%和97.5%~99.9%,且与水禽源TMUV相似性高于其他宿主源。与疫苗株FX2010相比,DTMUV广西毒株E蛋白共有11个氨基酸位点发生变异,其中第43、150、153、326、403、464及487位为广西毒株独特的氨基酸突变。ORF遗传进化分析结果显示,广西毒株均分布于2.1亚群,而源自广西的GX2011和GX2015株隶属于2.2亚群,表明DTMUV广西流行毒株进化趋势不完全一致;E、NS5基因系统发育趋势与ORF相似。重组分析结果表明,GXBH01-2019、GXZS02-2020、ziYY150901及HB2016株检测有重组信号。E、NS5基因的遗传进化速率估算分别为1.31×10^(-3)和1.30×10^(-3)替换/(位点·年),表明二者进化较为同步。【结论】当前DTMUV广西流行毒株表现为与主要流行毒株亲缘性较近,E蛋白发生特有氨基酸突变,进化趋势不一致,存在重组现象等分子特征,结果为制定有效防控措施提供了基础数据。 展开更多
关键词 鸭坦布苏病毒(DTMUV) 开放阅读框(orf) E基因 NS5基因 遗传多样性
下载PDF
鲤鱼NOD1基因克隆与组织特异性表达分析
10
作者 黄建勋 安利国 +2 位作者 袁金铎 张福淼 杨桂文 《济南大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2012年第3期260-265,共6页
利用RT-PCR技术在鲤鱼(Cyprinus carpio)中首次克隆得到了NOD1基因编码序列全长。生物信息学分析发现,鲤鱼NOD1具有3个保守结构域和相应的保守位点,在进化中与草鱼亲缘关系最近;半定量RT-PCR分析NOD1基因在鲤鱼不同组织中分布发现,NOD1... 利用RT-PCR技术在鲤鱼(Cyprinus carpio)中首次克隆得到了NOD1基因编码序列全长。生物信息学分析发现,鲤鱼NOD1具有3个保守结构域和相应的保守位点,在进化中与草鱼亲缘关系最近;半定量RT-PCR分析NOD1基因在鲤鱼不同组织中分布发现,NOD1在头肾和血液中表达最高,在肌肉、皮肤和性腺中表达量最少;鳗弧菌(V.anguillarum)刺激后NOD1基因在肝脏、脾脏、头肾和前肠中表达量都有明显上升。研究结果显示NOD1在鲤鱼应对鳗弧菌刺激天然免疫过程中可能发挥着重要作用。 展开更多
关键词 鲤鱼 NOD1 克隆 开放性阅读框
下载PDF
Expression of p27Kip1, A Cell Cycle Repressor Protein with Dual Roles for Both Cancer Prevention and Promotion, Is Regulated Primarily at the Level of Unusual p27Kip1 mRNA—A Short Concept Proposal 被引量:2
11
作者 Isao Eto 《American Journal of Molecular Biology》 2018年第3期186-193,共8页
The p27Kip1 is a cell cycle repressor protein that regulates primarily the cell cycle transition from G1 to S phase and hence the DNA replication is in the S phase and cell division in the M phase. Expression of p27Ki... The p27Kip1 is a cell cycle repressor protein that regulates primarily the cell cycle transition from G1 to S phase and hence the DNA replication is in the S phase and cell division in the M phase. Expression of p27Kip1 protein has dual roles for both cancer prevention and promotion. For example, numerous nutritional and chemopreventive anti-cancer agents specifically increase the expression of p27Kip1 protein without directly affecting the expression of any other cell cycle regulatory proteins. On the other hand, pro-cancer agents (like glucose, insulin and other growth factors frequently seen in obesity and/or diabetes) specifically decrease the expression of p27Kip1 protein without directly affecting the expression of any other cell cycle regulatory proteins. Unlike expression of any other cell cycle regulatory proteins, expression of p27Kip1 protein is very unusual. The mRNA of p27Kip1 has a very long and unusual 5’-untranslated region (from -575 to -1 in human). It appears that the 5’-untranslated region of p27Kip1 mRNA forms two alternative secondary structures. One increases the expression of p27Kip1 protein when anti-cancer agents are added and another decrease the expression of p27K1p1 when pro-cancer agents are added. For this short concept proposal, Dr. Albert Einstein’s “visualized thought experiments (German: Gedanken experiment)” were used as a fundamental tool for understanding how either anti- or pro-cancer agents bring the primary structure of the 5’-untranslated region of p27Kip1 mRNA into two alternative secondary structures, thereby either increasing or decreasing, respectively, the translation initiation of p27Kip1 protein. 展开更多
关键词 P27KIP1 Cell Cycle Repressor Protein CANCER Prevention Anti-Cancer AGENTS CANCER PROMOTION Pro-Cancer AGENTS P27KIP1 MRNA 5-Prime-Untranslated Region Translation Initiation 5-Prime Cap Upstream open reading frame Internal Ribosome Entry Site
下载PDF
Higher Concentrations of Glucose or Insulin Increase the Risk of Various Types of Cancer in Obesity or Type 2 Diabetes by Decreasing the Expression of p27Kip1, a Cell Cycle Repressor Protein 被引量:1
12
作者 Isao Eto 《American Journal of Molecular Biology》 2020年第1期1-11,共11页
Research Aims: Obesity and type 2 diabetes are known to be associated with increased risk of various types of cancer. However, the molecular biological mechanism of how the risk of cancer is increased in obesity or ty... Research Aims: Obesity and type 2 diabetes are known to be associated with increased risk of various types of cancer. However, the molecular biological mechanism of how the risk of cancer is increased in obesity or type 2 diabetes is not known. The aim this research is to investigate if the decreased expression of p27Kip1, a cell cycle repressor protein, plays a central role in this mechanism. Research Methods, Previous Studies and Theoretical Backgrounds: It is well known that the expression of p27Kip1 is increased by numerous nutritional or chemopreventive anti-cancer agents. But it has never been known that the expression of p27Kip1 could be decreased, rather than increased, and the risk of cancer could be increased, rather than decreased. This problem was solved recently and this new analytical method was used in this study. Results: 1) The expression of p27Kip1 was indeed significantly decreased in human obese type 2 diabetic individuals relative to the lean normal controls. 2) The expression of p27Kip1 was also significantly decreased in genetically obese rodents relative to the lean normal controls. Additionally, in obese rodents, the concentrations of glucose or insulin were significantly increased relative to the lean normal controls. 3) Using human cells cultured in vitro it was found that the increased concentrations of glucose or insulin decrease the expression of p27Kip1. Conclusions: These results suggest that higher concentrations of glucose or insulin increase the risk of various types of cancer in obesity or type 2 diabetes by decreasing the expression of p27Kip1. 展开更多
关键词 OBESITY Type 2 Diabetes CANCER P27KIP1 MRNA Translation Initiation 5’-Untranslated Region (5’UTR) 5’-End Cap of P27KIP1 MRNA Upstream open reading frame (uorf) Internal RIBOSOME Entry Site (IRES)
下载PDF
Analysis of molecular variation in porcine reproductive and respiratory syndrome virus in China between 2007 and 2012 被引量:2
13
作者 Yuhang Cao Hongsheng Ouyang +4 位作者 Mingjun Zhang Fuwang Chen Xin Yang Daxing Pang Linzhu Ren 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2014年第3期183-188,共6页
In the present study, 89 porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV) isolates in China during 2007 to 2012 were randomly selected from the GenBank genetic sequence database. Evolutionary characteristics... In the present study, 89 porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV) isolates in China during 2007 to 2012 were randomly selected from the GenBank genetic sequence database. Evolutionary characteristics of these isolates were analyzed based on the sequences of non-struc-tural protein 2(Nsp2) and glycoprotein 5(GP5). The genetic variations of the isolates were also compared with six representative strains. The results showed that a high degree of genetic diversity exists among the PRRSV population in China. Highly pathogenic PRRSV isolates, with a discon-tinuous deletion of a 30 amino acid residue in the Nsp2 region, remained the most dominant virus throughout 2007–2012 in China. Owing to the extensive use of representative vaccine strains, natu-ral recombination events occurred between strains. Three isolates – HH08, DY, and YN-2011 – were more closely related to vaccine strains than the other isolates. Both YN-2011 and DY were the evolu-tionary products of recombination events between strains SP and CH-1R. The results of the present study provide useful information for the epidemiology of PRRSV as well as for vaccine development. 展开更多
关键词 porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV) open reading frame(orf non-structural protein 2(Nsp2) glycoprotein 5(GP5) recombination
下载PDF
外固定架治疗胫腓骨中下1/3段骨折的临床研究
14
作者 李继赋 《中国现代医生》 2008年第25期50-51,53,共3页
目的探讨多功能单侧外固定支架在小腿胫腓骨中下1/3段骨折治疗中的突出优势。方法分析我院1998~2007年间收治的42例小腿胫腓骨中下1/3段骨折病例,采用有限切开复位多功能单侧外固定支架固定治疗。结果42例病例全部获得骨愈合,功能完全... 目的探讨多功能单侧外固定支架在小腿胫腓骨中下1/3段骨折治疗中的突出优势。方法分析我院1998~2007年间收治的42例小腿胫腓骨中下1/3段骨折病例,采用有限切开复位多功能单侧外固定支架固定治疗。结果42例病例全部获得骨愈合,功能完全恢复。结论有限切开复位多功能单侧外固定支架固定,在小腿胫腓骨中下1/3段骨折治疗方法中具有突出优势。 展开更多
关键词 胫腓骨中下1/3段骨折 有限切开复位 多功能单侧外固定支架 骨折固定 优势探讨
下载PDF
HEV ORF3 cDNA序列分析及在HepG2细胞的表达
15
作者 赵振宇 温雯静 +2 位作者 刘新胜 赵江波 刘晓东 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第23期3034-3036,共3页
目的对构建的HEV新疆株ORF3真核表达载体pcHEV3进行DNA序列分析,并转染HepG2细胞进行表达,为进一步探索ORF3蛋白功能提供基础。方法对HEV ORF3真核表达载体pcHEV3进行DNA测序,分析ORF3蛋白一级结构,脂质体介导法转染HepG2细胞,用免疫荧... 目的对构建的HEV新疆株ORF3真核表达载体pcHEV3进行DNA序列分析,并转染HepG2细胞进行表达,为进一步探索ORF3蛋白功能提供基础。方法对HEV ORF3真核表达载体pcHEV3进行DNA测序,分析ORF3蛋白一级结构,脂质体介导法转染HepG2细胞,用免疫荧光法鉴定ORF3蛋白的表达及细胞内定位。结果 HEV新疆株ORF3蛋白具有保守的PPLP基序,转染HepG2细胞后经免疫荧光鉴定能在细胞内表达。结论构建出HEV ORF3蛋白真核表达重组载体,并能在HepG2细胞表达,为进一步研究HEV ORF3蛋白的功能提供了实验基础。 展开更多
关键词 戊型肝炎病毒 开放读码框架 表达载体
下载PDF
口蹄疫病毒WFL株ORF基因真核表达质粒的构建及病毒的拯救
16
作者 任林柱 王兴龙 +2 位作者 崔丽瑾 张辉 孟柯音 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期27-31,共5页
构建了FMDVWFL株ORF(open reading frame)基因真核表达质粒pEGFP-C1-A3I3,并进行了表达研究和共转染研究。结果发现,该质粒可以在BHK-21细胞中表达。将其与体外转录获得的FMDV RNA共转染BHK-21细胞后,用夹心ELISA、RT-PCR法以及电镜观... 构建了FMDVWFL株ORF(open reading frame)基因真核表达质粒pEGFP-C1-A3I3,并进行了表达研究和共转染研究。结果发现,该质粒可以在BHK-21细胞中表达。将其与体外转录获得的FMDV RNA共转染BHK-21细胞后,用夹心ELISA、RT-PCR法以及电镜观察证明共转染后的细胞培养液中有病毒粒子,且病毒量高于单独转染RNA所得病毒量。证明用FMDV基因组真核表达质粒与其基因组体外转录RNA共转染敏感细胞可提高拯救病毒的数量。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 开放性阅读框 真核表达 反向遗传技术 拯救
下载PDF
2株微孢子虫热激蛋白Hsp70的ORF研究
17
作者 马兰 李灿 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2013年第8期139-143,147,共6页
为探讨微孢子虫的起源、分类地位及亲缘关系,在系统发育分析的基础上,对家蚕微孢子虫(Nosema.bombycis)和柞蚕微孢子虫(N.antheraeae)Hsp70基因的ORF序列进行克隆、测序,同时将2种微孢子虫的Hsp70基因的ORF序列翻译成氨基酸序列,利用Exp... 为探讨微孢子虫的起源、分类地位及亲缘关系,在系统发育分析的基础上,对家蚕微孢子虫(Nosema.bombycis)和柞蚕微孢子虫(N.antheraeae)Hsp70基因的ORF序列进行克隆、测序,同时将2种微孢子虫的Hsp70基因的ORF序列翻译成氨基酸序列,利用Expasy蛋白质数据库的分析工具和DNAstar软件对其功能进行理论分析和预测。结果表明:家蚕微孢子虫和柞蚕微孢子虫的Hsp70氨基酸序列在N端均有一个高度保守的基序GIDLGTT,另外还有被作为线粒体Hsp70标志的2个保守的基序;氨基酸序列相似性比较结果发现,家蚕微孢子虫广东株Hsp70的蛋白氨基酸序列和家蚕微孢子虫日本株的相似性最近,约为96%。系统发育分析发现,微粒子属和变形虫属有较近的亲缘关系。功能预测表明,2种微孢子虫在信号肽剪切位点、跨膜结构域及糖基化位点、二级结构、亲水性、柔韧性等方面均存在异同。 展开更多
关键词 微孢子虫 热激蛋白70 开放读码框
下载PDF
Pathogenesis and clinical features of severe hepatitis E virus infection
18
作者 László Orosz Károly Péter Sárvári +2 位作者 Áron Dernovics András Rosztóczy Klára Megyeri 《World Journal of Virology》 2024年第2期19-33,共15页
The hepatitis E virus(HEV),a member of the Hepeviridae family,is a small,non-enveloped icosahedral virus divided into eight distinct genotypes(HEV-1 to HEV-8).Only genotypes 1 to 4 are known to cause diseases in human... The hepatitis E virus(HEV),a member of the Hepeviridae family,is a small,non-enveloped icosahedral virus divided into eight distinct genotypes(HEV-1 to HEV-8).Only genotypes 1 to 4 are known to cause diseases in humans.Genotypes 1 and 2 commonly spread via fecal-oral transmission,often through the consum-ption of contaminated water.Genotypes 3 and 4 are known to infect pigs,deer,and wild boars,often transferring to humans through inadequately cooked meat.Acute hepatitis caused by HEV in healthy individuals is mostly asymptomatic or associated with minor symptoms,such as jaundice.However,in immunosup-pressed individuals,the disease can progress to chronic hepatitis and even escalate to cirrhosis.For pregnant women,an HEV infection can cause fulminant liver failure,with a potential mortality rate of 25%.Mortality rates also rise amongst cirrhotic patients when they contract an acute HEV infection,which can even trigger acute-on-chronic liver failure if layered onto pre-existing chronic liver disease.As the prevalence of HEV infection continues to rise worldwide,highlighting the particular risks associated with severe HEV infection is of major medical interest.This text offers a brief summary of the characteristics of hepatitis developed by patient groups at an elevated risk of severe HEV infection. 展开更多
关键词 Hepatitis E virus CIRRHOSIS Acute-on-chronic liver failure PREGNANCY Immune dysfunction open reading frames 1-4
下载PDF
酵母基因组中ORF数目与长度的关系
19
作者 冯立芹 《生物信息学》 2011年第1期32-34,共3页
根据NCBI数据库中基因注释序列及相关注释文件,统计了酿酒酵母基因组中不同长度的开阅读框架(Open ReadingFrame,ORF)的数目,分析了开阅读框架的数目随长度的分布关系,结果发现有明显的规律性。根据分布的特点用各种分布模型进行拟合比... 根据NCBI数据库中基因注释序列及相关注释文件,统计了酿酒酵母基因组中不同长度的开阅读框架(Open ReadingFrame,ORF)的数目,分析了开阅读框架的数目随长度的分布关系,结果发现有明显的规律性。根据分布的特点用各种分布模型进行拟合比较,提出这类分布是Г(α,β)分布的假设。进一步根据Г(α,β)分布估算了酵母基因组蛋白质编码序列的数目为5870个。该结果对于基因注释具有一定的参考价值。 展开更多
关键词 基因组 开阅读框架(orf) Г(α β)分布
下载PDF
木尔坦棉花曲叶病毒“C4 ORF”编码蛋白对病毒致病性的影响
20
作者 郑信诗 尚鹏祥 +3 位作者 李景远 丁新伦 吴祖建 张洁 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期2095-2104,共10页
【目的】通过分析发现木尔坦棉花曲叶病毒(cotton leaf curl Multan virus,CLCuMuV)C4开放阅读框(open reading frame,ORF)附近可编码3个不同大小的蛋白,而NCBI数据库登录的CLCuMuV各个分离物编码的C4蛋白大小也不尽相同,本研究试图通... 【目的】通过分析发现木尔坦棉花曲叶病毒(cotton leaf curl Multan virus,CLCuMuV)C4开放阅读框(open reading frame,ORF)附近可编码3个不同大小的蛋白,而NCBI数据库登录的CLCuMuV各个分离物编码的C4蛋白大小也不尽相同,本研究试图通过分析该3个假定的“C4 ORF”编码蛋白对病毒致病性的影响,以明确CLCuMuV C4蛋白ORF的确切定位。【方法】根据双生病毒编码蛋白的保守性,在CLCuMuV C4 ORF附近查找到3个大小不等的ORF,分别标记为C4-L(567 nt)、C4-M(546 nt)和C4-S(303 nt)。利用同源重组的方法将该3个ORF分别构建到PVX异源表达载体,通过农杆菌介导的植物接种法,分析PVX介导的3个蛋白在本氏烟表达对本氏烟症状的影响。利用同源重组的方法构建CLCuMuV野生型及C4-L或C4-S缺失突变型的侵染性克隆,同样通过农杆菌介导的植物接种法,分别与其伴随DNA-β分子的侵染性克隆接种本氏烟,分析C4-L或C4-S缺失对CLCuMuV致病性的影响,并利用Southern blot和Western blot分别对接种烟草的病毒基因组的积累量和病毒C4蛋白的表达量进行分析。同时利用Gateway系统载体对C4-L和C4-S蛋白在本氏烟叶片表皮细胞中的亚细胞定位进行分析。【结果】PVX异源表达载体接种本氏烟,结果发现PVX-C4-L和PVX-C4-S接种的本氏烟叶片卷曲、叶柄伸长,并且PVX-C4-S症状更重,而PVX-C4-M接种的本氏烟症状较轻或基本无症状,Western blot试验也在PVX-C4-L和PVX-C4-S接种组检测到了C4蛋白的表达,说明C4-S ORF编码的蛋白对PVX异源病毒的致病性影响最大。侵染性克隆接种本氏烟,结果发现野生型(CLCuMuV)和C4-L突变型(CLCuMuV-ΔL)接种的本氏烟叶片皱缩增生、叶柄和茎秆扭曲,而C4-S突变型(CLCuMuV-ΔS)和对照组(Mock)接种的本氏烟未显示任何症状,并且前两者的植株高度明显矮于后两者,同时Southern blot试验在CLCuMuV和CLCuMuV-ΔL接种的本氏烟中均检测到大量病毒基因组的积累,而Western blot试验也在其中检测到C4蛋白的表达,说明C4-S ORF编码的蛋白在CLCuMuV诱导寄主产生症状过程中起关键作用。亚细胞定位发现YFP-C4-L主要定位在本氏烟叶片表皮细胞的叶绿体,YFP-C4-S则定位在细胞膜或细胞质周边,并有点状聚集体结构。【结论】C4-S ORF编码的蛋白对CLCuMuV的侵染必不可少,而C4-L和C4-M ORF编码的蛋白对CLCuMuV的侵染不是必需。 展开更多
关键词 木尔坦棉花曲叶病毒 C4开放阅读框 致病性
下载PDF
上一页 1 2 3 下一页 到第
使用帮助 返回顶部