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miR-22-3p靶向调控PLAGL2保护OGD/R诱导的心肌细胞损伤机制研究
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作者 陈玥璇 汪潞 柳华锋 《全科医学临床与教育》 2023年第9期784-789,共6页
目的探讨miR-22-3p在氧-糖剥夺/复氧(OGD/R)心肌细胞铁死亡中的作用及机制。方法大鼠心肌细胞系H9c2采用OGD/R处理以及转染miR-22-3p模拟物(miR-22-3p mimic)。细胞根据是否缺氧及有无转染分为常氧组、OGD/R组、OGD/R+miRNA模拟物阴性对... 目的探讨miR-22-3p在氧-糖剥夺/复氧(OGD/R)心肌细胞铁死亡中的作用及机制。方法大鼠心肌细胞系H9c2采用OGD/R处理以及转染miR-22-3p模拟物(miR-22-3p mimic)。细胞根据是否缺氧及有无转染分为常氧组、OGD/R组、OGD/R+miRNA模拟物阴性对照(miRNA-NC组)和OGD/R+miR-22-3p组。采用细胞计数(CCK-8)法检测细胞活力,酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测H9c2细胞中铁死亡指标水平,Western blot检测谷胱甘肽过氧化物酶4(Gpx4)及多形性腺瘤基因样蛋白2(PLAGL2)蛋白表达,双荧光素酶报告实验验证miR-22-3p和PLAGL2靶向关系。结果OGD/R处理H9c2细胞后,第4天的吸光度值低于常氧组,活性氧(ROS)及丙二醛(MDA)水平、Fe^(2+)的积累明显高于常氧组,miR-22-3p水平明显低于常氧组(t分别=3.78、4.24、2.54、4.47、3.53,P均<0.05),H9c2细胞转染miR-22-3p mimic及OGD/R处理后,第3、4天的吸光度值高于miR-NC+OGD/R组(t分别=2.98、1.97、2.57、2.46,P均<0.05),细胞MDA、ROS、Fe^(2+)明显低于OGD/R+miR-NC组(t分别=2.62、5.35、4.11,P均<0.05),Gpx4表达水平高于OGD/R+miR-NC组。Fer-1和OGD/R处理H9c2细胞后,第3、4天的细胞吸光度值明显高于OGD/R组(t分别=3.12、3.36,P均<0.05),细胞MDA、ROS和Fe^(2+)水平显著低于OGD/R组(t分别=3.03、5.33、2.48,P均<0.05)。H9c2细胞转染miR-22-3p组的PLAGL2蛋白表达明显低于miR-NC组,且PLAGL2-WT+miR-22-3p组的荧光素酶活性明显低于PLAGL2-MUT+miR-22-3p组(t=2.69,P<0.05)。H9c2细胞共转染miR-22-3p mimic和PLAGL2过表达质粒后,Gpx4表达低于OGD/R+miR-22-3p组,吸光度值明显低于OGD/R+miR-22-3p组(t分别=3.91、3.12,P均<0.05),MDA、Fe^(2+)、ROS水平高于OGD/R+miR-22-3p组(t分别=3.78、3.87、3.05,P均<0.05)。结论miR-22-3p靶向调控PLAGL2表达抑制铁死亡,进而降低OGD/R诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 miR-22-3p plagl2 OGD/R 心肌细胞 铁死亡
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肺癌组织中plagl2、ascl2的表达及临床意义 被引量:1
2
作者 姚淑芳 董海平 +1 位作者 黄慕超 林建锋 《临床肺科杂志》 2020年第3期414-419,共6页
目的检测肺癌组织中多形性腺瘤基因样蛋白2(pleomorphic adenoma gene-like protein 2,PLAGL2)、无刚毛鳞甲复合体样蛋白2(achaete-scute homologue 2,ASCL2)的表达情况,并分析两者在肺癌组织中表达的相关性及与肺癌患者临床病理参数、... 目的检测肺癌组织中多形性腺瘤基因样蛋白2(pleomorphic adenoma gene-like protein 2,PLAGL2)、无刚毛鳞甲复合体样蛋白2(achaete-scute homologue 2,ASCL2)的表达情况,并分析两者在肺癌组织中表达的相关性及与肺癌患者临床病理参数、预后的关系。方法收集2016年1月~2018年1月我院肺癌患者手术标本86例,应用qRT-PCR和免疫组织化学试验,检测肺癌组织及配对癌旁组织中PLAGL2、ASCL2的表达情况;并分析肺癌组织中PLAGL2、ASCL2表达的相关性,及PLAGL2、ASCL2的表达与肺癌患者临床病理参数、预后的关系。结果qRT-PCR检测PLAGL2 mRNA、ASCL2 mRNA在肺癌组织中表达分别为1.63±0.88,2.28±1.34,在癌旁组织中表达分别为1.08±0.70,0.99±0.56,肺癌组织中PLAGL2、ASCL2表达水平均高于癌旁组织(P值均<0.05),且肺癌组织中PLAGL2与ASCL2的表达呈正相关(r=0.561,P=0.009﹚;免疫组化检测PLAGL2、ASCL2在肺癌组织中阳性表达分别为50(58.14%)、58(67.44%)例,在癌旁组织中阳性表达分别为30(34.88%)、26(30.23%)例,肺癌组织中PLAGL2、ASCL2阳性表达率均高于癌旁组织(P值均<0.05)。PLAGL2与肿瘤TNM分期、淋巴结转移显著相关,ASCL2与肿瘤组织TNM分期、淋巴结转移和组织分级显著相关(P值均<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析肺癌组织中PLAGL2、ASCL2高表达患者生存期较短。结论肺癌组织中PLAGL2、ASCL2呈高表达,并与肿瘤发生发展及预后有关。PLAGL2、ASCL2在肺癌组织中的表达呈正相关,可能协同参与了肺癌的发生发展。PLAGL2、ASCL2具有作为肺癌新的标记物、治疗靶标及评估预后的潜在价值。 展开更多
关键词 肺癌 plagl2 ASCL2 临床病理参数
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PLAGL2基因siRNA表达质粒的构建及体外干扰作用
3
作者 邓飞涛 柴新群 叶伦 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期598-601,共4页
目的构建PLAGL2 siRNA表达载体质粒并探讨其体外干扰作用。方法构建的PLAGL2 siRNA表达载体质粒经脂质体介导转染到小鼠肺Ⅱ型上皮细胞株H441细胞中并获得稳定细胞株,采用实时荧光PCR及Westernblot技术分别检测转染组和野生型H441细胞中... 目的构建PLAGL2 siRNA表达载体质粒并探讨其体外干扰作用。方法构建的PLAGL2 siRNA表达载体质粒经脂质体介导转染到小鼠肺Ⅱ型上皮细胞株H441细胞中并获得稳定细胞株,采用实时荧光PCR及Westernblot技术分别检测转染组和野生型H441细胞中PLAGL2、SP-C、SP-B mRNA和PLAGL2蛋白表达水平的变化。结果实时荧光PCR检测结果显示:与野生型H441细胞相比较,PLAGL2 siRNA表达载体质粒转染的H441细胞中PLA-GL2 mRNA水平明显降低(P<0.05),SP-C mRNA水平明显增高(P<0.05),而SP-B mRNA水平没有明显差异(P>0.05);Western blot检测结果显示:与野生型H441细胞相比较,PLAGL2 siRNA表达载体质粒转染的H441细胞中PLAGL2蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论成功构建了PLAGL2 siRNA表达载体,将其转染至H441细胞中可有效抑制PLAGL2基因的表达,同时促进SP-C基因的表达。 展开更多
关键词 RNA 小分子干扰 plagl2 SP-C SP-B H441细胞
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PLAGL2对SP-C基因表达的调控及其机制的初步研究 被引量:1
4
作者 邓飞涛 柴新群 +1 位作者 吴超英 王泽华 《中国优生与遗传杂志》 2008年第3期33-35,44,共4页
目的研究多形性腺瘤样因子2(pleiomorphic adenoma gene like-2,PLAGL2)对肺表面活性蛋白C基因(surfactant protein-C,SP-C)表达的影响及调控机制。方法通过定点诱变技术分别突变掉SP-C基因启动子上PLAGL2的结合位点以及PLAGL2的第6?7... 目的研究多形性腺瘤样因子2(pleiomorphic adenoma gene like-2,PLAGL2)对肺表面活性蛋白C基因(surfactant protein-C,SP-C)表达的影响及调控机制。方法通过定点诱变技术分别突变掉SP-C基因启动子上PLAGL2的结合位点以及PLAGL2的第6?7位锌指结构域并获得相应的突变体;利用细胞共转染和荧光素酶报告基因检测技术研究PLAGL2对SP-C基因启动子表达活性的影响及比较正常及突变体的PLAGL2或SP-C基因启动子之间相互作用的差异以明确PLAGL2对SP-C基因的调控及作用靶点。结果细胞共转染试验中,荧光素酶活性检测结果表明PLAGL2可明显增加SP-C基因的表达(P<0·001),SP-C基因表达活性的增高与PLAGL2的作用浓度呈正相关;当定点诱变掉PLA-GL2的第6或7位锌指结构域后,PLAGL2的突变体质粒均不能增高SP-C基因的表达活性,与对照组相比较,差异具有显著性(P<0·001);同样,当定点诱变掉PLAGL2在SP-C基因启动子上的结合位点后,PLAGL2也不能增高SP-C基因启动子突变体质粒的表达活性,与对照组相比较,两者具有明显差异(P<0·01)。结论在肺Ⅱ型细胞中,PLAGL2通过其第6和7位锌指结构域结合于SP-C基因启动子上的PLAGL2结合位点序列来促进SP-C基因的表达。 展开更多
关键词 多形性腺瘤样因子2 表面活性蛋白C基因 定点诱变 细胞共转染 荧光素酶活性检测
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人肺腺癌干细胞分子表型及PLAGL2基因的生物学功能研究 被引量:7
5
作者 薛明明 宁仁利 +4 位作者 黄进肃 李钟 李榕 徐慧莉 董强刚 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期366-375,共10页
目前,不断有证据证明肿瘤源自组织成体干细胞或其祖细胞的恶性转化,这些转化的干(祖)细胞称为肿瘤起始细胞(tumor-initiating cells)或肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC)。但肺癌CSC细胞的起源尚不清楚。该实验室曾报道人体肺腺癌中存... 目前,不断有证据证明肿瘤源自组织成体干细胞或其祖细胞的恶性转化,这些转化的干(祖)细胞称为肿瘤起始细胞(tumor-initiating cells)或肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC)。但肺癌CSC细胞的起源尚不清楚。该实验室曾报道人体肺腺癌中存在一类表达OCT4(octamer-binding transcription factor 4)的细支气管肺泡干细胞(bronchioalveolar stem cell,BASC)样CSC。该研究采用RNA干扰技术灭活了此类癌细胞中的锌指蛋白转录因子编码基因多形腺瘤样基因2(pleiomorphic adenoma gene-like 2,PLAGL2),证明该基因表达沉默驱使肺腺癌CSC分化形成了I型肺泡细胞(alveolartype 1 cells,AT1)样细胞并失去致瘤能力。借助基因芯片筛查技术平台,发现肺腺癌CSC具有与人体肺脏未分化干细胞和肺泡祖细胞相似的分子表型,提示此类肺干(祖)细胞可能是肺腺癌潜在的细胞起源。此外,该研究结果还揭示肺腺癌CSC的分化受TTF-1(甲状腺转录因子-1)和PLAGL2的双重调控,通过基因操作以及药理性诱导可以驱使此类癌细胞分化。这些结果为针对肺癌CSC的靶向治疗提供了新的思路。 展开更多
关键词 肺腺癌 肿瘤干细胞 分子表型 plagl2 细胞起源
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PLAGL2与SP-C基因启动子相互作用的研究 被引量:4
6
作者 邓飞涛 王泽华 +2 位作者 夏炎枝 吴超英 柴新群 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期289-292,298,共5页
目的研究PLAGL2(pleiomorphic adenoma gene like-2,PLAGL2)对SP-C基因(surfactant pro-tein-C,SP-C)启动子的结合与影响作用。方法定点诱变技术(site-directed mutagenesis)及凝胶电泳迁移实验(electrophoresis mobility shift assay,E... 目的研究PLAGL2(pleiomorphic adenoma gene like-2,PLAGL2)对SP-C基因(surfactant pro-tein-C,SP-C)启动子的结合与影响作用。方法定点诱变技术(site-directed mutagenesis)及凝胶电泳迁移实验(electrophoresis mobility shift assay,EMSA)研究PLAGL2与SP-C基因启动子之间的相互结合作用;体外培养MLE12细胞共转染和荧光素酶报告基因活性值检测技术,研究PLAGL2对SP-C基因启动子表达活性的影响;结果EMSA及竞争性EMSA实验表明:PLAGL2能通过其核心和簇结合位点序列与同位素标记的SP-C基因启动子片段相结合形成蛋白-DNA复合物;细胞共转染及荧光素酶报告基因活性值检测结果显示:PLAGL2能明显促进SP-C基因启动子的表达。结论在肺Ⅱ型细胞中,PLAGL2能与SP-C基因启动子相互作用并促进其表达。 展开更多
关键词 plagl2蛋白 SP—C启动子 荧光素酶报告基因检测 凝胶电泳迁移实验
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PLAGL2、TTF-1对SP-C基因启动子的共同调控作用 被引量:1
7
作者 邓飞涛 柴新群 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2009年第25期3576-3579,共4页
目的:探讨多形性腺瘤样基因2(PLAGL2)和甲状腺转录因子-1(TTF-1)对表面活性蛋白C(SP-C)基因启动子的共同调控作用。方法:应用定点诱变技术和体外细胞共转染后荧光素酶报告基因活性值检测技术研究PLAGL2、TTF-1对SP-C基因启动子表达活性... 目的:探讨多形性腺瘤样基因2(PLAGL2)和甲状腺转录因子-1(TTF-1)对表面活性蛋白C(SP-C)基因启动子的共同调控作用。方法:应用定点诱变技术和体外细胞共转染后荧光素酶报告基因活性值检测技术研究PLAGL2、TTF-1对SP-C基因启动子表达活性的影响及相互作用;应用实时荧光PCR技术检测PLAGL2、TTF-1及SP-C在人胚肺和成熟小鼠肺Ⅱ型上皮细胞中的表达。结果:荧光素酶报告基因活性值检测结果显示TTF-1、PLAGL2共转染后所测SP-C基因启动子荧光素酶活性值明显低于PLAGL2共转染后SP-C基因启动子的活性值(P<0.01);SP-C基因启动子野生型质粒转染后的荧光素酶活性值明显低于其突变体质粒转染后的活性值(P<0.005);实时荧光PCR检测结果显示,PLAGL2基因的表达水平随胚肺发育成熟而逐渐减少,TTF-1和SP-C基因的表达水平则逐渐增高。结论:在肺Ⅱ型细胞中,PLAGL2和TTF-1对SP-C基因共同调控的过程中体现出一种动态平衡、相互抑制的关系。 展开更多
关键词 plagl2 TTF-1 SP—C基因启动子 定点诱变PCR 荧光素酶活性检测 实时荧光PCR
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PLAGL2对SP-C基因表达调控的作用靶点研究
8
作者 邓飞涛 柴新群 +3 位作者 邹丽 吴超英 张建初 王泽华 《中国优生与遗传杂志》 2008年第8期15-16,共2页
目的研究PLAGL2对SP-C基因表达调控的作用靶点。方法定点诱变技术分别突变掉SP-C基因启动子上PLAGL2的结合位点以及PLAGL2的第6、7位锌指结构域序列并获得相应的突变体;凝胶电泳迁移实验研究PLAGL2及其突变体分别与SP-C基因启动子及其... 目的研究PLAGL2对SP-C基因表达调控的作用靶点。方法定点诱变技术分别突变掉SP-C基因启动子上PLAGL2的结合位点以及PLAGL2的第6、7位锌指结构域序列并获得相应的突变体;凝胶电泳迁移实验研究PLAGL2及其突变体分别与SP-C基因启动子及其突变体之间的相互结合作用。结果PLAGL2能与同位素标记的SP-C基因启动子片段相结合形成蛋白-DNA复合物,而两者的突变体却不能与相应的蛋白或DNA片段发生相互作用。结论PLAGL2通过其第6?7位锌指结构与SP-C基因启动子上PLAGL2的核心和簇结合位点序列相互结合从而实现对SP-C基因的表达调控。 展开更多
关键词 plagl2 SP—C基因 EMSA 竞争性EMSA 定点诱变PCR
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长链非编码RNA ARAP1-AS1在卵巢癌中的表达及作用机制研究
9
作者 董冰 李翠萍 +3 位作者 徐潇萌 王妍 李跃文 李兴媚 《中国现代医药杂志》 2023年第11期12-17,共6页
目的从分子生物学角度阐述长链非编码RNA(lncRNA)ARAP1反义AS1(ARAP1-AS1)的表达水平在卵巢癌细胞生长分化中的作用及机制,从而揭示lncRNA ARAP1-AS1对卵巢癌恶性程度、生长速度及侵袭能力的影响。方法分别购买人正常卵巢表面上皮细胞... 目的从分子生物学角度阐述长链非编码RNA(lncRNA)ARAP1反义AS1(ARAP1-AS1)的表达水平在卵巢癌细胞生长分化中的作用及机制,从而揭示lncRNA ARAP1-AS1对卵巢癌恶性程度、生长速度及侵袭能力的影响。方法分别购买人正常卵巢表面上皮细胞系和卵巢癌细胞系进行培养和传代。采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)对卵巢癌细胞及正常卵巢细胞中lncRNA ARAP1-AS1表达水平进行检测和评价;采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、溴脱氧核苷尿嘧啶和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡;通过Western blot检测miR-4735-3p/多态腺样瘤蛋白2(PLAGL2)信号通路相关蛋白表达变化;使用Transwell分析验证细胞迁移和侵袭。结果RT-PCR结果显示,ARAP1-AS1在卵巢癌细胞系中呈现高表达(P<0.05)。ARAP1-AS1的欠表达可以抑制卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.01)。同时沉默ARAP1-AS1可以抑制miR-4735-3p/PLAGL2信号通路相关蛋白的表达水平。结论ARAP1-AS1通过miR-4735-3p基因增强了PLAGL2的表达,即ARAP1-AS1通过miR-4735-3p/PLAGL2信号通路在卵巢癌中发挥致癌作用。 展开更多
关键词 卵巢癌 ARAP1-AS1 plagl2 miR-4735-3p
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Expression of Lung Surfactant Proteins SP-B and SP-C and Their Modulating Factors in Fetal Lung of FGR Rats 被引量:6
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作者 邓飞涛 欧阳为相 +2 位作者 葛良芳 张莉 柴新群 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2015年第1期122-128,共7页
This study investigated the expression of lung surfactant proteins SP-B and SP-C, and their modulating factors TTF-1 and PLAGL2 in the fetal lung of rats with fetal growth restriction(FGR). The rat FGR model was est... This study investigated the expression of lung surfactant proteins SP-B and SP-C, and their modulating factors TTF-1 and PLAGL2 in the fetal lung of rats with fetal growth restriction(FGR). The rat FGR model was established by prenatal hypoxia in the first stage of pregnancy, 180 rats for experiment served as hypoxia group, and 197 healthy rats served as normal control group. The FGR incidence in hypoxia was compared with that in normal control group. The histological changes in the fetal lung were observed under the light microscope and electronic microscope in two groups. The SP-B, SP-C, TTF-1 and PLAGL2 proteins were determined in the fetal lung of two groups immunohistochemically. The expression levels of SP-B, SP-C, TTF-1 and PLAGL2 protein and m RNA in the fetal lung of two groups were detected by using Western blotting and RT-PCR respectively. The FGR rat model was successfully established by using hypoxia. Pathologically the fetal lung developed slowly, and the expression levels of SP-B, SP-C, TTF-1 and PLAGL2 protein and mR NA in the fetal lung were significantly reduced in hypoxia group as compared with those in normal control group. It was suggested that maternal hypoxia in the first stage of pregnancy could induce FGR, and reduce the expression of SP-B and SP-C, resulting in the disorder of fetal lung development and maturation. 展开更多
关键词 SP-B SP-C plagl2 TTF-1 fetal growth restriction lung development real-time PCR Western blot immunohistochemistry
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多形性腺瘤基因样蛋白2在前列腺癌组织中的表达及其临床意义
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作者 甄红革 李娜 乔玉华 《国际泌尿系统杂志》 2020年第6期971-974,共4页
目的探讨多形性腺瘤基因样蛋白2(PLAGL2)在前列腺癌组织中的表达及其与患者临床病理特征的关系。方法选取2016年5月至2017年8月本院收治的前列腺癌患者100例,采用免疫组织化学法检测前列腺癌及癌旁组织PLAGL2的表达情况,比较前列腺癌组... 目的探讨多形性腺瘤基因样蛋白2(PLAGL2)在前列腺癌组织中的表达及其与患者临床病理特征的关系。方法选取2016年5月至2017年8月本院收治的前列腺癌患者100例,采用免疫组织化学法检测前列腺癌及癌旁组织PLAGL2的表达情况,比较前列腺癌组织及前列腺癌旁组织PLAGL2表现的差异,并分析前列腺癌患者癌组织中PLAGL2与临床病理特征的关系。结果 PLAGL2在前列腺癌组织及癌旁组织中主要表达于细胞胞质中,PLAGL2在前列腺癌组织中阳性表达率为85.0%,在癌旁组织中阳性表达率为18.0%,PLAGL2在前列腺癌组织中的阳性表达率高于癌旁组织(χ2=89.861,P<0.001);单因素分析显示,前列腺癌的分化程度、淋巴结转移、TNM分期、前列腺特异抗原(PSA)水平及神经浸润是PLAGL2表达的相关因素;logistic多因素分析结果显示,淋巴结转移是前列腺癌患者PLAGL2阳性表达的独立影响因素。结论前列腺癌患者PLAGL2阳性表达率较高,且与淋巴结转移相关,对其检测有助于病情的评估。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 plagl2 淋巴转移
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