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苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白Cry1Ba3活性区的研究 被引量：6
1
作者 王广君 张杰 +2 位作者 吴隽 宋福平 黄大昉 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1585-1590,共6页
通过对Cry1Ba3蛋白序列的分析,以及与已知Cry蛋白比较,设计了6对特异性引物,通过PCR扩增获得6种不同长度的cry1Ba3基因片段。将这些基因片段克隆到pET-21b载体上,导入大肠杆菌BL21中进行诱导表达,最终得到6种不同长度的Cry1Ba3蛋白片段... 通过对Cry1Ba3蛋白序列的分析,以及与已知Cry蛋白比较,设计了6对特异性引物,通过PCR扩增获得6种不同长度的cry1Ba3基因片段。将这些基因片段克隆到pET-21b载体上,导入大肠杆菌BL21中进行诱导表达,最终得到6种不同长度的Cry1Ba3蛋白片段。采用浸叶法检测这些蛋白片段对小菜蛾的杀虫活性,研究结果表明含有第1～685位和含有第22～655位氨基酸的蛋白片段对小菜蛾的毒性,与全长Cry1Ba3蛋白相比,没有改变;含有第54～655位氨基酸的蛋白片段对小菜蛾的毒力明显降低;而含有第22～627位和含有第85～655位氨基酸的蛋白片段完全丧失了对小菜蛾的活性。上述结果表明Cry1Ba3蛋白对小菜蛾的活性区在第22～655位氨基酸之间。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 Cry1Ba 3蛋白 活性区 小菜蛾 杀虫晶体蛋白 基因片段 特异性引物 PCR扩增 氨基酸
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小菜蛾抗药性消失动态研究 被引量：4
2
作者 朱树勋 司升云 +2 位作者 邹丰 刘小明 吴士雄 《中国蔬菜》 北大核心 1996年第1期20-22,共3页
武汉地区小菜蛾田间自然抗性种群（ＷＨ）与室内美国敏感品系（ＡＳ）相比，对氰戊菊酯、亚胺硫磷的抗性倍数分别是１９７．４７倍和１００．２９倍，属高抗水平。将ＷＨ种群在室内无毒条件下饲养测定，其抗性水平逐代下降，至２０代后... 武汉地区小菜蛾田间自然抗性种群（ＷＨ）与室内美国敏感品系（ＡＳ）相比，对氰戊菊酯、亚胺硫磷的抗性倍数分别是１９７．４７倍和１００．２９倍，属高抗水平。将ＷＨ种群在室内无毒条件下饲养测定，其抗性水平逐代下降，至２０代后，抗药性基本消失，敏感性得到恢复，且表现稳定。ＷＨ种群与ＡＳ品系对灭多威的敏感性不高，但其抗药性消失较为缓慢。本研究为害虫抗性治理对策中暂停使用某些药剂的技术措施提供了科学依据。 展开更多
关键词 小菜蛾 抗药性 消失动态
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卷蛾分索赤眼蜂和拟澳洲赤眼蜂对小菜蛾利他素各成分的嗅觉反应 被引量：2
3
作者 吕燕青 何余容 陈科伟 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1184-1189,共6页
卷蛾分索赤眼蜂Trichogrammatoidea bactrae Nagaraja和拟澳洲赤眼蜂Trichogramma confusum Viggiani是小菜蛾Plutella xylostella(L.)的优势寄生蜂。本研究利用"Y"型管测定了2种赤眼蜂对小菜蛾P.xylostella利他素-卵表和腹... 卷蛾分索赤眼蜂Trichogrammatoidea bactrae Nagaraja和拟澳洲赤眼蜂Trichogramma confusum Viggiani是小菜蛾Plutella xylostella(L.)的优势寄生蜂。本研究利用"Y"型管测定了2种赤眼蜂对小菜蛾P.xylostella利他素-卵表和腹部鳞片13种饱和烷烃的嗅觉反应。结果显示:卷蛾分索赤眼蜂交配雌蜂进入2,6,10,14-四甲基十五烷、正十五烷、正十七烷处理区的百分数分别为80.65%,68.75%和66.67%,表明这3种烷烃对卷蛾分索赤眼蜂交配雌蜂有显著的吸引作用,其他10种饱和烷烃对卷蛾分索赤眼蜂雌蜂无明显作用。拟澳洲赤眼蜂进入2,6,10,14-四甲基十五烷、正三十五烷和正十五烷处理区的数目分别占84.38%,70%和62.16%,表明其对拟澳洲赤眼蜂交配雌蜂起着显著的吸引作用,而另外10种烷烃对拟澳洲赤眼蜂雌蜂无作用。卷蛾分索赤眼蜂和拟澳洲赤眼蜂未交配雄蜂进入13种烷烃处理区和对照区的时间均无显著差异,表明利他素各组分对2种赤眼蜂未交配雄蜂均无吸引作用。 展开更多
关键词 赤眼蜂 卷蛾分索赤眼蜂 拟澳洲赤眼蜂 小菜蛾 利他素 嗅觉反应
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苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白cry2Ad2原核表达及其不同长度片段产物的杀虫活性 被引量：1
4
作者 谢雅晶 冯纪年 +3 位作者 张存政 王耘 赵龙龙 刘贤进 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第6期1242-1248,共7页
该研究采用NCBI蛋白分析软件对Cry2Ad2蛋白序列进行分析,采用PCR克隆获得3种不同长度的cry2Ad2及全长cry2Ad2基因片段,并将这些基因片段克隆到pET-26b载体上,构建重组质粒pET-Ad、pET-Ad1、pET-Ad2和pET-Ad3,再导入大肠杆菌BL21(DE3)中... 该研究采用NCBI蛋白分析软件对Cry2Ad2蛋白序列进行分析,采用PCR克隆获得3种不同长度的cry2Ad2及全长cry2Ad2基因片段,并将这些基因片段克隆到pET-26b载体上,构建重组质粒pET-Ad、pET-Ad1、pET-Ad2和pET-Ad3,再导入大肠杆菌BL21(DE3)中进行细胞周质诱导表达,并采用室内生物测定法测定表达产物对小菜蛾的毒力。Cry2Ad2蛋白的序列分析结果表明:全长的Cry2Ad2蛋白包含两个保守区域domain I(第53位～第264位氨基酸)和domainⅡ(第267位～第472位氨基酸),推测保守活性片段C端末端在N-端的第472位与第633位氨基酸之间。重组质粒pET-Ad、pET-Ad1、pET-Ad2和pET-Ad3在大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳验证分别含有约70 000、52 000、51 000和54 000的表达蛋白。生物活性初步测定结果表明:表达的Cry2Ad2、Cry2Ad2-1、Cry2Ad2-2及Cry2Ad2-3给药72 h后对小菜蛾都具有杀虫活性,其中蛋白Cry2Ad2、Cry2Ad2-2与Cry2Ad2-3对小菜蛾有较强的毒性,相同剂量致死率分别为64.35%、53.27%和61.66%,统计分析表明蛋白Cry2Ad2-1与Cry2Ad2-3的致死率与蛋白Cry2Ad2的致死率无显著差异,(P>0.05);蛋白Cry2Ad2-2对小菜蛾的毒力相对较低,相同剂量致死率为39.89%,蛋白Cry2Ad2-2的致死率与蛋白Cry2Ad2的致死率差异显著(P<0.05)。鉴此,初步推断Cry2Ad2蛋白对小菜蛾的活性区在第49位与第463位氨基酸之间。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 Cry2Ad2蛋白 活性区 小菜蛾
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卷蛾分索赤眼蜂对小菜蛾利他素各成分的接触反应
5
作者 吕燕青 谢梅琼 +1 位作者 何余容 陈科伟 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期30-34,共5页
在实验室条件下测定了卷蛾分索赤眼蜂Trichogrammatoidea bactrae Nagaraja对小菜蛾Plutella xylostella（L.）利他素各成分的接触反应.结果表明,卷蛾分索赤眼蜂在正二十七烷处理卵卡上的总接触次数最大,为74.17次,在其处理过的卵卡上... 在实验室条件下测定了卷蛾分索赤眼蜂Trichogrammatoidea bactrae Nagaraja对小菜蛾Plutella xylostella（L.）利他素各成分的接触反应.结果表明,卷蛾分索赤眼蜂在正二十七烷处理卵卡上的总接触次数最大,为74.17次,在其处理过的卵卡上的寄生总数也最高,为148.5粒,说明正二十七烷对卷蛾分索赤眼蜂的吸引作用最强;卷蛾分索赤眼蜂在正十六烷处理卵卡上的总接触次数最低,为7次,在其处理过的卵卡上的寄生总数也最低,仅为1.17粒,说明正十六烷对卷蛾分索赤眼蜂的吸引作用最弱.卷蛾分索赤眼蜂对利它素各成分的最大寄生率在20%以上的有2,6,10,14-四甲基十五烷、正二十五烷、正二十七烷和正三十六烷,最大寄生率在5%以下的有正十六烷和正二十二烷.综合分析表明,卷蛾分索赤眼蜂在0.2-2×103ng/cm2范围的卵卡上的接触次数和寄生率相对较高. 展开更多
关键词 卷蛾分索赤眼蜂 小菜蛾 利他素 接触反应
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小菜蛾卵表和雌蛾腹部鳞片提取液的GC-MS分析
6
作者 吕燕青 何余容 陈科伟 《应用昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期109-112,共4页
来源于小菜蛾Plutella xylostella(L.)卵表和雌蛾腹部鳞片的挥发性化学物质影响着卷蛾分索赤眼蜂Trichogrammatoidea bactrae Nagaraja、拟澳洲赤眼蜂Trichogramma confusum Viggiani、短管赤眼蜂Trichogramma pretiosum Riley和玉米螟... 来源于小菜蛾Plutella xylostella(L.)卵表和雌蛾腹部鳞片的挥发性化学物质影响着卷蛾分索赤眼蜂Trichogrammatoidea bactrae Nagaraja、拟澳洲赤眼蜂Trichogramma confusum Viggiani、短管赤眼蜂Trichogramma pretiosum Riley和玉米螟赤眼蜂Trichogramma ostriniae Pang et Chen的搜索行为,为明确这些挥发性化学物质的主要成分,本文利用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对小菜蛾卵表和雌蛾腹部鳞片正己烷提取液的化学成分进行分析。结果总共分离到48种挥发性化学物质,其中卵表中16种,雌蛾腹部鳞片中32种。经NIST数据库检索,并与标准图谱比较,应用色谱峰面积归一法测定各成分的相对含量,结果表明,鉴定出卵表中有11种化学物质,占其总挥发性组分总量的93.95%;雌蛾腹部鳞片中有17种化学物质,占其总挥发性组分总量的88.47%。结果表明,小菜蛾卵表和雌蛾腹部鳞片中的主要成分为12～36碳的直链和支链饱和烷烃及一些脂肪酸衍生物。 展开更多
关键词 小菜蛾 GC-MS 卵表 鳞片 分析
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