SHIV KU-1感染恒河猴颞叶皮层中IMPDH2的表达

1

作者 赵长城 丁华明 +5 位作者 鹿伦山 张千 杨静 董颖 薛群山 庄柯 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第7期34-40,共7页

目的探讨HIV对大脑颞叶皮层神经元中次黄嘌呤核苷酸脱氢酶II(inosine monophosphate dehydrogenase 2,IMPDH2)蛋白表达的影响。方法应用MoCA分数和磁共振成像手段评估HIV感染者轻度认知障碍情况。利用中国恒河猴SHIV KU-1神经艾滋病模型... 目的探讨HIV对大脑颞叶皮层神经元中次黄嘌呤核苷酸脱氢酶II(inosine monophosphate dehydrogenase 2,IMPDH2)蛋白表达的影响。方法应用MoCA分数和磁共振成像手段评估HIV感染者轻度认知障碍情况。利用中国恒河猴SHIV KU-1神经艾滋病模型,HE染色观察猴颞叶皮层细胞结构的变化;采用免疫组化方法和Western blot方法检测IMPDH2在猴颞叶皮层神经元内的表达;以及借助在线数据库预测IMPDH2相关信号通路的关键信号分子。结果HIV感染者颞叶皮质较健康对照萎缩。与健康对照相比,SHIV KU-1感染恒河猴颞叶皮层神经元中IMPDH2蛋白表达显著降低(P<0.0001)。HNRNPA1等8个基因与IMPDH2有潜在的相互作用。结论IMPDH2在HIV患者颞叶皮层神经元中的表达下调,其可能参与了HIV相关神经认知障碍发生。 展开更多

关键词 HIV相关神经认知障碍 IMPDH2 颞叶皮层 shiv KU-1感染 恒河猴

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SHIV-1157i及衍生病毒的研究进展

2

作者 金光 丛喆 +1 位作者 王卫 魏强 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第5期66-69,共4页

C亚型是世界上流行的HIV-1主要亚型,带有HIV-1 C亚型env区的SHIV和相应的非人灵长类模型是研究人类艾滋病的有效工具。SHIV-1157i及其衍生病毒能够成功地通过黏膜途径感染恒河猴和猪尾猴,并诱发艾滋病类似症状,而且恒河猴缓慢的发病进... C亚型是世界上流行的HIV-1主要亚型,带有HIV-1 C亚型env区的SHIV和相应的非人灵长类模型是研究人类艾滋病的有效工具。SHIV-1157i及其衍生病毒能够成功地通过黏膜途径感染恒河猴和猪尾猴,并诱发艾滋病类似症状,而且恒河猴缓慢的发病进程与人类感染HIV-1相似。因此,掌握SHIV-1157i及其衍生病毒感染恒河猴的发病规律并探索其机制,将对研究人类HIV-1感染和发病机制,以及评价HIV-1 C亚型env区为靶点的艾滋病候选疫苗具有重要意义。 展开更多

关键词 shiv-1157i shiv-1157ipd3N4 恒河猴 猪尾猴

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SHIV-KB9感染中国恒河猴的实验研究 被引量：19

3

作者 王卫 刘强 +7 位作者 许琰 冯育芳 丛喆 佟巍 蒋虹 杨贵波 魏强 秦川 《中国比较医学杂志》 CAS 2007年第2期67-71,共5页

目的研究SHIV-KB9感染中国恒河猴的可能性,确定其有效病毒浓度,明确实验猴感染SHIV-KB9后的病毒复制和免疫反应情况,建立SHIV/SAIDS模型,并确定、完善SHIV/SAIDS模型评价指标。方法实验前采集猴血清并进行血清学检查。选出6只无SIV、STL... 目的研究SHIV-KB9感染中国恒河猴的可能性,确定其有效病毒浓度,明确实验猴感染SHIV-KB9后的病毒复制和免疫反应情况,建立SHIV/SAIDS模型,并确定、完善SHIV/SAIDS模型评价指标。方法实验前采集猴血清并进行血清学检查。选出6只无SIV、STLV、SRV/D和B病毒感染的恒河猴,分别用10倍系列稀释的病毒液静脉感染实验猴,使用流式细胞术、血常规检测、病毒分离、DNA-PCR和RT-PCR等方法确定实验猴是否被感染,以及感染后恒河猴体内病毒复制和免疫细胞损伤情况,持续测定3个月。结果实验猴的血浆病毒载量、病毒分离结果、CD4+/CD8+比值和CD4+细胞数等证实,4.8×106copies/mL以上浓度的SHIV-KB9病毒液能成功感染中国恒河猴。结论SHIV-KB9成功感染中国恒河猴为进一步建立SHIV/SAIDS模型奠定了良好的实验基础,为使用此模型评价抗病毒药物或疫苗提供了条件。 展开更多

关键词 shiv-KB9 恒河猴 MDS 模型 动物

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人/猴免疫缺陷病毒SHIV衣壳蛋白p27的表达纯化及活性鉴定 被引量：2

4

作者 华秋东 姜成刚 +3 位作者 王海 相文华 周建华 陈维多 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2008年第11期51-55,共5页

利用PCR技术从质粒SHIV89.6P中扩增p27gag基因,并克隆入pMD18-T载体,测序鉴定;将p27gag基因插入表达载体pET32aT7启动子下游,构成重组质粒pET32a-p27并使其在大肠杆菌BL21中高效表达,最后利用固定化金属离子(Ni2+)配体亲和层析技术从表... 利用PCR技术从质粒SHIV89.6P中扩增p27gag基因,并克隆入pMD18-T载体,测序鉴定;将p27gag基因插入表达载体pET32aT7启动子下游,构成重组质粒pET32a-p27并使其在大肠杆菌BL21中高效表达,最后利用固定化金属离子(Ni2+)配体亲和层析技术从表达蛋白中纯化目的蛋白,Western Blot检测活性。结果显示,融合蛋白p27经SDS-PAGE电泳观察可见45ku的明显条带,与预期分子质量大小一致且多以可溶形式表达,目的蛋白占菌体总蛋白的36.8%;经镍柱纯化,获得目的蛋白p27纯度可达98%;经Western Blot试验检测,证明此融合蛋白p27能与SHIV阳性血清发生特异性反应,具有较好的抗原活性。该研究为进一步开发早期诊断试剂盒和基因工程疫苗奠定了初步基础。 展开更多

关键词 shiv P27 原核表达 大肠杆菌

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运用实时荧光定量RT-PCR和ELISA方法定量检测SHIV的对比分析 被引量：3

5

作者 刘强 杨贵波 +4 位作者 褚亚芬 段丹丽 彭虹 邢辉 邵一鸣 《中国艾滋病性病》 CAS 2006年第4期300-303,310,共5页

目的 建立一种实时、灵敏、特异的针对人／猴免疫缺陷病毒（SHIV）的RNA载量检测方法，通过与酶联免疫吸附试验（ELISA）进行比较，成为监测SHIV病毒体外复制过程的常用方法。方法 体外转录制备RNA标准品，利用TaqMan EZ逆转录聚合酶链... 目的 建立一种实时、灵敏、特异的针对人／猴免疫缺陷病毒（SHIV）的RNA载量检测方法，通过与酶联免疫吸附试验（ELISA）进行比较，成为监测SHIV病毒体外复制过程的常用方法。方法 体外转录制备RNA标准品，利用TaqMan EZ逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）试剂盒的反应体系和针对SHIVgag保守区91个碱基的Taq—Man探针与引物，建立一步法实时荧光定量RT—PCR。三种SHIV感染性分子克隆体外转染293T细胞，在不同的时间点采样，通过实时荧光定量RT—PCR和ELISA两种方法监测SHIV病毒复制过程。结果两种方法监测的病毒复制过程基本一致，转染后2～48小时病毒复制出现明显的对数生长期，之后进入平台期，p24浓度大约100pg／ml，而RNA载量大约在100拷贝／ml。两者具有很好的相关性（r^2=0．834；P〈0．001）。实时荧光定量RT＋PCR灵敏度更高，检测范围更广，费用更低。结论 所建立的一步法检测SHIV病毒载量的实时荧光定量RT—PCR方法，可以作为监测SHIV体外扩增的常用方法。 展开更多

关键词 人/猴免疫缺陷病毒(shiv) 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT—PCR) 酶联免疫吸附试验(ELISA) 体外复制 病毒定量

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全基因组SHIV-KB9克隆的构建及其在人、猴外周血单核细胞中的复制(英文) 被引量：5

6

作者 吴颖运 洪坤学 +3 位作者 陈佩 陈启明 耿运琪 邵一鸣 《中国病毒学》 CSCD 2004年第2期114-119,共6页

将分别携带SHIV-KB9 (SIV/HIV-1 KB9) 基因组的3′端和5′端的两个半长克隆,体外连接成SHIV-KB9全基因组克隆。含有全长基因的质粒培养时易发生同源重组和缺失,采用JM109作为宿主菌以及30℃、低转速的培养条件,可保持质粒的稳定性。通过... 将分别携带SHIV-KB9 (SIV/HIV-1 KB9) 基因组的3′端和5′端的两个半长克隆,体外连接成SHIV-KB9全基因组克隆。含有全长基因的质粒培养时易发生同源重组和缺失,采用JM109作为宿主菌以及30℃、低转速的培养条件,可保持质粒的稳定性。通过PCR , RT-PCR 和猴免疫缺陷病毒(SIV) gag p27 核心抗原滴度检测表明:感染性克隆SHIV-KB9可有效在人、恒河猴及食蟹猴的外周血单核细胞中复制。 展开更多

关键词 shiv-KB9 克隆 基因组 质粒 人 恒河猴 食蟹猴 外周血单核细胞 复制

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B亚型SHIV_(SF162p3)中国恒河猴小剂量多次阴道黏膜感染 被引量：3

7

作者 丛喆 刘浩 +7 位作者 朵建英 王卫 蒋虹 高虹 杨志伟 Sylvain Fleury 魏强 秦川 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第2期44-48,共5页

目的模拟HIV性传播感染特点进行中国恒河猴阴道黏膜小剂量多次感染研究,为我国艾滋病疫苗有效性评价提供新的模型构建思路。方法选用20-30TCID50剂量的SHIVSF162p3病毒阴道黏膜途径感染六只成年雌性中国恒河猴,共感染13次,每次攻毒间隔4... 目的模拟HIV性传播感染特点进行中国恒河猴阴道黏膜小剂量多次感染研究,为我国艾滋病疫苗有效性评价提供新的模型构建思路。方法选用20-30TCID50剂量的SHIVSF162p3病毒阴道黏膜途径感染六只成年雌性中国恒河猴,共感染13次,每次攻毒间隔4～7 d。采取测定血浆病毒载量和外周血CD4+∶CD8+。结果 6只中国恒河猴经13次病毒攻击后,经检测均建立系统性感染,血浆病毒载量呈阳性;CD4+∶CD8+均有下降。结论成功建立了中国恒河猴阴道黏膜小剂量多次感染模型,为艾滋病研究提供了新的更接近于自然感染状态的模型建立模式。 展开更多

关键词 猴-人免疫缺陷病毒(shiv) 模型 动物 黏膜感染

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SHIV感染恒河猴十二指肠黏膜活检组织病理学观察 被引量：3

8

作者 刘颖 朱华 +3 位作者 代小伟 丛喆 蒋虹 秦川 《中国比较医学杂志》 CAS 2009年第3期28-31,I0003,共5页

目的使用消化内窥镜对SHIV感染恒河猴十二指肠黏膜进行观察。方法SHIV感染恒河猴,消化内镜检查并进行活检取材,对活检标本进行固定,石蜡包埋,常规HE染色镜检。结果内镜大体观察胃黏膜和十二指肠黏膜基本上完整平滑,1例胃黏膜有弥漫性白... 目的使用消化内窥镜对SHIV感染恒河猴十二指肠黏膜进行观察。方法SHIV感染恒河猴,消化内镜检查并进行活检取材,对活检标本进行固定,石蜡包埋,常规HE染色镜检。结果内镜大体观察胃黏膜和十二指肠黏膜基本上完整平滑,1例胃黏膜有弥漫性白斑,3例有小面积的出血;光镜下十二指肠黏膜完整未见脱落,固有层中有散在分布的慢性炎细胞,活检取材最深可达黏膜下层,未见其他特异性病理改变。结论不同毒株,不同感染时间的SHIV感染恒河猴和对照恒河猴的十二指肠黏膜活检组织HE染色组织结构清晰,呈慢性炎症改变,病理形态上没有明显的差异。 展开更多

关键词 人/猿嵌合免疫缺陷病毒(shiv) 消化内窥镜 黏膜活检

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体内CD8^＋T细胞剔除对无症状期SHIV感染猴的影响 被引量：2

9

作者 王卫 丛喆 +5 位作者 刘浩 陶真 刘强 魏强 陈志伟 秦川 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第4期1-5,共5页

目的 CD8+T细胞在一些病毒感染疾病的免疫反应中起着重要的作用,但CD8+T细胞在HIV无症状期的作用尚不明确,本研究通过体内CD8+T细胞剔除,研究CD8+T细胞对SHIV感染猴的影响,进一步了解艾滋病的发病机制。方法选择8只SHIV病毒感染的恒河猴... 目的 CD8+T细胞在一些病毒感染疾病的免疫反应中起着重要的作用,但CD8+T细胞在HIV无症状期的作用尚不明确,本研究通过体内CD8+T细胞剔除,研究CD8+T细胞对SHIV感染猴的影响,进一步了解艾滋病的发病机制。方法选择8只SHIV病毒感染的恒河猴,均处于无症状期,随机分成两组,实验组4只恒河猴在0、3、7 d注射抗CD8+T抗体cM-T807,不同的时间取外周血、腹股沟淋巴结。流式细胞术测定恒河猴外周血和淋巴结中CD8+T细胞数目,Real-time RT-PCR法测定实验猴血浆病毒载量,并使用IFN-γElispot方法测定其对猴细胞免疫的影响。结果 CD8+T细胞敲除后,4只猴的病毒载量都转阳,但反应性不一,HIV-1的靶细胞CD4+T细胞有轻微下降,后反弹,与病毒载量无相关性;CD8敲除猴的感染情况(血浆病毒载量和CD4细胞)比SHIV病毒急性感染轻,这与ELIPOT结果一致。结论 CD8+T细胞在HIV无症状期发挥重要的作用,但其作用具有个体差别。 展开更多

关键词 shiv 恒河猴 CD8+T细胞 模型 动物 无症状期

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SHIV减毒株在AIDS疫苗研究中的应用 被引量：2

10

作者 吴颖运 洪坤学 +1 位作者 耿运琪 邵一鸣 《中国病毒学》 CAS CSCD 2004年第2期187-191,共5页

关键词 shiv 减毒株 AIDS 疫苗 获得性免疫缺陷综合症 人免疫缺陷病毒 HIV-1

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SHIV-KB9感染中国恒河猴动物模型的建立 被引量：4

11

作者 王卫 刘强 +7 位作者 许琰 冯育芳 丛喆 佟巍 蒋虹 杨贵波 魏强 秦川 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第2期1-6,共6页

目的为了进一步确证SHIV-KB9感染中国恒河猴的病毒浓度范围,测试动物对病毒的适应性,明确该动物模型的可重复性。方法实验前采集猴血清并进行血清学检查。选出4只无SIV、STLV、SRV/D和B病毒感染的恒河猴,分别用10倍系列稀释的病毒液静... 目的为了进一步确证SHIV-KB9感染中国恒河猴的病毒浓度范围,测试动物对病毒的适应性,明确该动物模型的可重复性。方法实验前采集猴血清并进行血清学检查。选出4只无SIV、STLV、SRV/D和B病毒感染的恒河猴,分别用10倍系列稀释的病毒液静脉感染实验猴,使用流氏细胞术、血常规、病毒分离、DNA-PCR和RT-PCR等方法确定实验猴是否被感染,以及感染后恒河猴体内病毒复制和免疫细胞损伤情况。结果实验猴的血浆病毒载量、病毒分离结果、CD4+/CD8+比值和CD4+T细胞数等证实,4.8×105 copies/mL以上浓度的SHIV-KB9病毒液能成功感染中国恒河猴。结论本研究进一步明确了SHIV-KB9感染中国恒河猴的有效病毒浓度范围,确定了SHIV-KB9病毒感染中国恒河猴的病毒学、免疫学的测定指标,成功的建立了SHIV-KB9/中国恒河猴动物模型。 展开更多

关键词 shiv-KB9 恒河猴 艾滋病 模型 动物

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SHIV1157ipd3N4中国恒河猴细胞适应株静脉感染中国恒河猴有效浓度的确定 被引量：2

12

作者 丛喆 蒋虹 +8 位作者 金光 陈霆 王卫 陶真 姚南 熊竞 吴芳新 陈志伟 魏强 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第4期12-15,共4页

目的确定SHIV1157ipd3N4静脉途径感染中国恒河猴的有效病毒浓度,明确SHIV1157ipd3N4感染实验猴体内病毒复制和免疫损伤情况。方法 10只正常中国恒河猴分成6组,分别用10倍系列稀释的病毒液1 mL静脉感染,测定血浆病毒载量,CD4+/CD8+,CD4+... 目的确定SHIV1157ipd3N4静脉途径感染中国恒河猴的有效病毒浓度,明确SHIV1157ipd3N4感染实验猴体内病毒复制和免疫损伤情况。方法 10只正常中国恒河猴分成6组,分别用10倍系列稀释的病毒液1 mL静脉感染,测定血浆病毒载量,CD4+/CD8+,CD4+T淋巴细胞绝对数,分析感染后恒河猴体内病毒复制和免疫损伤情况。结果 5TCID50/mL以上浓度的SHIV1157ipd3N4能通过静脉途径感染中国恒河猴。结论该实验的成功进行为SHIV/中国恒河猴疾病及评价模型的建立奠定了良好的基础,为今后使用此模型评价抗病毒药物或疫苗提供了条件。 展开更多

关键词 shiv1157ipd3N4 中国恒河猴 模型 动物 AIDS

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SHIV-B'whu感染中国猕猴的组织病理学观察 被引量：1

13

作者 唐志佼 代明 +6 位作者 包容 王勇 张晶 鲜巧阳 饶艳 李任翔 孙理华 《实验动物与比较医学》 CAS 2008年第2期99-101,共3页

目的观察SHIV-B'whu感染中国猕猴的组织病理学变化。方法SHIV-B'whu感染中国猕猴,4次传代(P1￣P4),定时测量动物体温变化,对各代感染的猴在第14天处死,进行病理学解剖观察,并且对全身主要脏器以及多处淋巴结组织取材做病理分析... 目的观察SHIV-B'whu感染中国猕猴的组织病理学变化。方法SHIV-B'whu感染中国猕猴,4次传代(P1￣P4),定时测量动物体温变化,对各代感染的猴在第14天处死,进行病理学解剖观察,并且对全身主要脏器以及多处淋巴结组织取材做病理分析。结果中国猕猴在感染急性期体温有短暂升高,经病理分析,4代感染猴均有典型的间质性肺炎特征,肝组织有点状或灶性坏死,淋巴窦扩张,淋巴滤泡萎缩,淋巴细胞减少,淋巴结出现噬红细胞现象,组织巨噬细胞免疫组化染色阳性率从P1到P4逐步增加,从3.5%到22%。结论SHIV-B'whu能成功感染中国猕猴,引起与HIV感染人后所相似的免疫病理学变化。 展开更多

关键词 shiv 感染 免疫 病理学变化

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IL-21对恒河猴SHIV特异性CD8~＋T细胞毒性效应的影响 被引量：3

14

作者 赵长城 高锡强 +6 位作者 薛婧 丛喆 张伟伦 苏爱华 陈霆 魏强 秦川 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2012年第5期29-34,共6页

目的探讨白细胞介素21(interleukin 21,IL-21)对SHIV特异性CD8+T细胞毒性效应的影响。方法定时采集16只SHIV感染恒河猴的外周血,应用实时荧光定量RT-PCR测定病毒载量,流式细胞仪测定CD8+T细胞绝对数,并且体外检测经IL-21刺激SHIV特异性C... 目的探讨白细胞介素21(interleukin 21,IL-21)对SHIV特异性CD8+T细胞毒性效应的影响。方法定时采集16只SHIV感染恒河猴的外周血,应用实时荧光定量RT-PCR测定病毒载量,流式细胞仪测定CD8+T细胞绝对数,并且体外检测经IL-21刺激SHIV特异性CD8+T细胞后其IL-21R、CD107a及胞内穿孔素(perforin)的表达水平。结果体内实验结果表明外周血病毒载量和CD8+T细胞绝对数之间呈一定程度的负相关。体外实验结果表明SHIV特异性CD8+T细胞经IL-21刺激后其细胞表面表达的IL-21R显著上调,而且perforin+CD8+T细胞和CD107a+CD8+T细胞的百分比上升,同未经刺激的对照组相比具有统计学差异。结论 IL-21能够促进SHIV特异性CD8+T细胞的毒性效应。 展开更多

关键词 白细胞介素21 CD8+T淋巴细胞 细胞毒性效应 恒河猴 shiv感染

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RT-SHIV感染中国恒河猴及体内传代 被引量：1

15

作者 姚南 王卫 +5 位作者 丛喆 陈霆 金光 陶真 陈志伟 魏强 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第4期16-20,共5页

目的了解RT-SHIV感染中国恒河猴的感染特点,研究RT-SHIV在中国恒河猴中传代特点;建立RT-SHIV中国恒河猴动物模型,为评价HIV-1药物有效性提供动物平台。方法选择4只健康恒河猴,其中两只动物经上肢静脉感染RT-SHIV病毒,感染急性期采取外... 目的了解RT-SHIV感染中国恒河猴的感染特点,研究RT-SHIV在中国恒河猴中传代特点;建立RT-SHIV中国恒河猴动物模型,为评价HIV-1药物有效性提供动物平台。方法选择4只健康恒河猴,其中两只动物经上肢静脉感染RT-SHIV病毒,感染急性期采取外周血分离CD8-PBMC,扩增病毒,将新制备的病毒静脉感染另外两只中国恒河猴,通过监测血浆病毒载量,CD4+/CD8+比值,CD4+T淋巴细胞和B淋巴细胞的绝对数,了解实验猴的感染状态,同时分析病毒RT基因变异情况。结果 4只动物均获得系统性感染,且传代动物急性期表现更为强烈,RT基因在感染和传代的过程中共观察到3个氨基酸的改变。结论本研究为RT-SHIV中国恒河猴模型的建立提供了基础信息。 展开更多

关键词 RT-shiv 传代 RT基因突变

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SHIV及其在AIDS疫苗和药物研究中的应用 被引量：1

16

作者 刘强 杨贵波 邵一鸣 《中国病毒学》 CSCD 2006年第5期523-527,共5页

关键词 嵌合猿猴/人免疫缺陷病毒(shiv) 猿猴免疫缺陷病毒(SIV) 人免疫缺陷病毒(HIV) 模型

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感染性嵌合病毒SHIV cDNA的构建及活性筛选

17

作者 吴颖运 乔文涛 +2 位作者 陈启民 耿运琪 邵一鸣 《南开大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期84-89,共6页

以感染性克隆SHIV-KB9cDNA为主要骨架,将其env基因区域的gp120和部分gp41(从N末端的50到650个氨基酸)的1.7kb片段,用来源于4个不同中国HIV-1B′/C毒株env的相应区域进行替换,构建了50个全基因SHIVcDNA克隆,大规模体外活性筛选实验,获得... 以感染性克隆SHIV-KB9cDNA为主要骨架,将其env基因区域的gp120和部分gp41(从N末端的50到650个氨基酸)的1.7kb片段,用来源于4个不同中国HIV-1B′/C毒株env的相应区域进行替换,构建了50个全基因SHIVcDNA克隆,大规模体外活性筛选实验,获得了能够在人的PBMC中进行生产性复制的SHIV-XJ02170cDNA克隆. 展开更多

关键词 shiv-XJ02170 CDNA克隆 构建 活性筛选 复制

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携带GFP发光基因人猴嵌合免疫缺陷病毒SHIV的构建及活性检测

18

作者 李悦 莎日娜 +3 位作者 许璇 乔文涛 邵一鸣 杨贵波 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第2期7-11,F0002,I0001,共7页

目的获得正常感染宿主细胞并稳定表达绿色荧光的SHIV毒株,为后期建立发光SHIV/恒河猴感染模型奠定基础。方法通过分子克隆手段,将绿色荧光蛋白基因克隆到携带HIV-1包膜蛋白的SHIV病毒全基因组中,并在细胞水平检测各毒株的感染活性及荧... 目的获得正常感染宿主细胞并稳定表达绿色荧光的SHIV毒株,为后期建立发光SHIV/恒河猴感染模型奠定基础。方法通过分子克隆手段,将绿色荧光蛋白基因克隆到携带HIV-1包膜蛋白的SHIV病毒全基因组中,并在细胞水平检测各毒株的感染活性及荧光蛋白表达能力。结果得到一株可表达绿色荧光蛋白的病毒株SHIV-KB9nefGFP,并具有感染TZM-bl细胞系及猴PBMC的能力。结论该毒株在宿主细胞恒河猴PBMC中具有一定复制能力,希望通过后续的猴体内传代实验获得毒力更强的发光病毒。 展开更多

关键词 HIV-1 shiv 模型 动物 GFP荧光蛋白 感染活性

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SHIV-KB9病毒中国恒河猴细胞适应株的制备

19

作者 丛喆 陶真 +5 位作者 王卫 陈霆 金光 姚南 苏爱华 魏强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第3期23-27,共5页

试验旨在研究体外制备SHIV-KB9病毒中国恒河猴细胞适应株,在细胞水平和中国恒河猴体内评价其生物学特性。试验将SHIV-KB9半长质粒连接后转染CEMx174细胞,转染上清与正常恒河猴PBMCs共培养。定期测定培养液中的P27抗原水平。当病毒复制... 试验旨在研究体外制备SHIV-KB9病毒中国恒河猴细胞适应株,在细胞水平和中国恒河猴体内评价其生物学特性。试验将SHIV-KB9半长质粒连接后转染CEMx174细胞,转染上清与正常恒河猴PBMCs共培养。定期测定培养液中的P27抗原水平。当病毒复制达高峰期时收集培养上清,分装并冻存,测定病毒RNA载量和TCID50。静脉感染中国恒河猴,研究该批次SHIV-KB9在体内的病毒学、免疫学指标变化及变异情况,分析其基本的生物学特性。结果表明,本研究共制备了95mLSHIV-KB9病毒原液,病毒载量为2.678×105拷贝/mL,TZM-bl细胞测定病毒的TCID50为3.16×103/mL,gp120序列分析表明病毒未发生变异。10倍稀释的3个不同浓度的SHIV-KB9均静脉成功感染中国恒河猴,引起外周血CD4+/CD8+大幅下降。因此,此次制备的SHIV-KB9细胞适应株生物学特性稳定,适合作为毒种库建立SHIV-KB9/中国恒河猴模型。 展开更多

关键词 shiv-KB9 中国恒河猴 外周血单核淋巴细胞 半数感染量

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SHIV1157ipd3N4小量多次阴道粘膜感染中国猕猴的初步研究

20

作者 丛喆 蒋虹 +11 位作者 金光 王卫 高虹 姚南 陶真 陈霆 杨志伟 Sylvain.Fleury Anick Chalifour Ruth. M. Ruprecht 魏强 秦川 《实验动物与比较医学》 CAS 2011年第1期38-42,共5页

目的建立R5-SHIV1157ipd3N4病毒中国猕猴阴道粘膜小剂量多次感染模型，为我国艾滋病疫苗有效性评价提供新的模型构建、应用策略。方法选用10—20TCID50剂量的SHIV1157ipd3N4病毒阴道黏膜途径感染6只雌性中国猕猴，共感染11次，每次攻毒... 目的建立R5-SHIV1157ipd3N4病毒中国猕猴阴道粘膜小剂量多次感染模型，为我国艾滋病疫苗有效性评价提供新的模型构建、应用策略。方法选用10—20TCID50剂量的SHIV1157ipd3N4病毒阴道黏膜途径感染6只雌性中国猕猴，共感染11次，每次攻毒间隔4～7d。定期测定血浆病毒载量和外周血CD4＋：CD8＋。结果6只中国猕猴经11次病毒攻击后，均建立系统性感染，血浆病毒载量呈阳性；CD4＋：CD8＋均有下降。结论初步建立了R5-SHIV1157ipd3N4中国猕猴阴道黏膜小剂量多次感染模型，为艾滋病研究提供了更接近于自然感染状态的模型建立模式。 展开更多

关键词 shiv1157ipd3N4 黏膜感染 中国猕猴

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