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基于Dectin-1-Syk-CARD9信号通路研究三黄汤缓解白念珠菌定植小鼠溃疡性结肠炎作用机制 被引量:1
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作者 彭景 潘易缘 +3 位作者 鲍鑫 陈凤 李雯倩 马克龙 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2024年第4期86-93,共8页
目的基于Dectin-1-Syk-CARD9信号通路研究三黄汤治疗白念珠菌定植小鼠溃疡性结肠炎的作用机制。方法采用葡聚糖硫酸钠自由饮用联合白念珠菌灌胃建立白念珠菌定植溃疡性结肠炎小鼠模型。将小鼠分为正常对照组、模型组、柳氮磺吡啶组、氟... 目的基于Dectin-1-Syk-CARD9信号通路研究三黄汤治疗白念珠菌定植小鼠溃疡性结肠炎的作用机制。方法采用葡聚糖硫酸钠自由饮用联合白念珠菌灌胃建立白念珠菌定植溃疡性结肠炎小鼠模型。将小鼠分为正常对照组、模型组、柳氮磺吡啶组、氟康唑组和三黄汤低、高剂量组,分别予相应药物干预。观察小鼠一般状况并进行疾病活动指数(DAI)评分,检测小鼠肠道白念珠菌载荷,测量结肠长度并进行结肠组织病理学评分,透射电镜观察结肠上皮细胞超微结构,ELISA检测血清和结肠组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-12含量,q PCR、Western blot和免疫组化检测结肠上皮细胞和结肠组织Dectin-1、Syk、CARD9及核因子(NF)-κBp65和炎症因子表达。结果与正常对照组比较,模型组小鼠活动减弱、摄食量减少,伴有稀便,DAI评分明显升高,肠道白念珠菌载荷增加,结肠长度缩短,组织病理评分增加,结肠上皮细胞间隙增宽,细胞质溶解,线粒体肿胀,血清和结肠组织TNF-α、IL-6、IL-12含量升高,结肠上皮细胞Dectin-1、CARD9 mRNA和蛋白表达升高,结肠组织p-Syk、p-NF-κBp65、CARD9、TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,三黄汤高剂量组小鼠DAI评分明显降低,肠道白念珠菌载荷减少,结肠长度增加,组织病理评分降低,结肠黏膜上皮细胞微绒毛较完整、排列较有序,线粒体轻度肿胀,血清和结肠组织TNF-α、IL-6、IL-12含量均降低,结肠上皮细胞Dectin-1、CARD9 mRNA和蛋白表达降低,结肠组织p-Syk、p-NF-κBp65、CARD9、TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05)。结论三黄汤可能通过抑制Dectin-1-Syk-CARD9信号通路、减少炎症因子释放,发挥抗白念珠菌定植UC作用。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 白念珠菌 三黄汤 Dectin-1-syk-CARD9信号通路
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汉防己甲素通过抑制Mincle/Syk信号介导的巨噬细胞炎性活化减轻小鼠缺血再灌注诱导的急性肾损伤
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作者 彭泽 王洪连 +1 位作者 粟宏伟 王丽 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期670-678,共9页
目的:探讨汉防己甲素(Tet)对小鼠缺血再灌注诱导的急性肾损伤(IRI-AKI)的作用及其机制。方法:8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、IRI-AKI组、低剂量(20 mg/kg)Tet组、高剂量(40 mg/kg)Tet组和槲皮素(50 mg/kg)阳性对照组,每组6只... 目的:探讨汉防己甲素(Tet)对小鼠缺血再灌注诱导的急性肾损伤(IRI-AKI)的作用及其机制。方法:8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、IRI-AKI组、低剂量(20 mg/kg)Tet组、高剂量(40 mg/kg)Tet组和槲皮素(50 mg/kg)阳性对照组,每组6只。采用双侧肾动静脉夹闭45 min后恢复血供的方法建立IRI-AKI模型,Tet和槲皮素组的IRI-AKI小鼠于术前1 h及术后连续3 d给予相应剂量药物腹腔注射,假手术和IRI-AKI组小鼠给予同等体积溶剂注射。实验终点处死动物,收集血清及肾脏组织样本,进行肾功能、病理、mRNA及蛋白等指标检测。在体外,采用脂多糖(LPS;300μg/L)刺激的原代小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)进行Tet(1、2和4 mg/L)的抗炎活性研究。结果:(1)与IRI-AKI组相比,低和高剂量Tet干预均能显著降低血清肌酐和血尿素氮水平(P<0.05),并减轻肾小管病理损伤(P<0.05)。(2)Tet干预可以显著抑制IRI-AKI小鼠肾组织中白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6的mRNA和蛋白表达及NF-κB信号的活化,减少肾组织巨噬细胞浸润(P<0.05)。(3)在LPS刺激的BMDM中,Tet同样抑制IL-1β和IL-6的mRNA和蛋白表达及NF-κB信号的活化(P<0.05)。(4)进一步实验显示,Tet可以显著降低LPS刺激的BMDM和IRI-AKI小鼠肾组织中Mincle、Syk和p-Syk的表达水平(P<0.05)。结论:Tet可以显著减轻IRI-AKI小鼠肾损伤,减轻肾组织炎症反应,其可能的机制为抑制巨噬细胞Mincle/Syk/NF-κB促炎信号通路。 展开更多
关键词 汉防己甲素 急性肾损伤 缺血再灌注 巨噬细胞 Mincle/syk/NF-κB信号通路
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芍药苷联合SYK抑制剂干预NAFLD细胞脂肪沉积和炎症
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作者 孙智珺 叶阳梅 《中药材》 CAS 北大核心 2024年第3期735-739,共5页
目的:探究芍药苷和SYK抑制剂干预对油酸(OA)诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)细胞模型增殖、凋亡、脂质沉积和炎症水平的影响。方法:基于OA诱导构建NAFLD细胞模型,将细胞分为正常对照组、模型组、芍药苷组、R406(SYK抑制剂)组、芍药苷+R... 目的:探究芍药苷和SYK抑制剂干预对油酸(OA)诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)细胞模型增殖、凋亡、脂质沉积和炎症水平的影响。方法:基于OA诱导构建NAFLD细胞模型,将细胞分为正常对照组、模型组、芍药苷组、R406(SYK抑制剂)组、芍药苷+R406组。CCK-8检测各组细胞增殖活力,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,油红O染色观察细胞脂质积聚程度,生化试剂盒检测细胞中TC、TG含量,ELISA检测细胞中TNF-α、IL-6含量,Western Blot检测细胞中SYK蛋白表达。结果:采用1.5 mmol/L的OA诱导构建NAFLD细胞模型,以40μmol/L芍药苷进行干预。与正常对照组比较,模型组细胞增殖活力显著降低,凋亡率显著升高(P<0.05),脂质液滴明显增多,TC、TG、TNF-α、IL-6含量及SYK蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,各给药组细胞增殖活力显著升高,凋亡率显著降低(P<0.05),脂质液滴减少,TC、TG、TNF-α、IL-6含量及SYK蛋白表达显著降低(P<0.05)。与R406组比较,芍药苷+R406组细胞增殖活力显著升高,凋亡率显著降低(P<0.05),脂质液滴减少,TC、TG、TNF-α、IL-6含量及SYK蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:芍药苷联合SYK抑制剂可更好地抑制NAFLD细胞脂质沉积和炎症,减少细胞凋亡。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 芍药苷 脾酪氨酸激酶(syk) 脂质沉积 炎症 细胞凋亡
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SYK基因甲基化对胃癌预后评估的价值及恶性生物学行为的影响
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作者 伍星 贺晓伟 吴康中 《浙江医学》 CAS 2024年第21期2277-2282,2287,共7页
目的探讨脾酪氨酸激酶(SYK)基因甲基化对胃癌病情及预后评估的价值及恶性生物学行为的影响。方法回顾性选取2020年1月至2022年1月湖州师范学院附属第一医院诊治的胃癌患者107例为观察组,另择54例同期在本院诊治的胃良性疾病(胃息肉、胃... 目的探讨脾酪氨酸激酶(SYK)基因甲基化对胃癌病情及预后评估的价值及恶性生物学行为的影响。方法回顾性选取2020年1月至2022年1月湖州师范学院附属第一医院诊治的胃癌患者107例为观察组,另择54例同期在本院诊治的胃良性疾病(胃息肉、胃炎等可取得病理组织的疾病)患者为对照组。留取观察组患者肿瘤组织及配对的癌旁组织(距离肿瘤组织边缘>3 cm),对照组患者胃镜活检组织为本研究的组织标本。以购买的MKN-45、SGC-7901、MFC、AGS胃癌细胞系及人胃正常黏膜上皮细胞(GES-1)为细胞标本。采用甲基特异性聚合酶链反应检测各组组织与各组细胞SYK基因甲基化状态。比较不同临床病理特征的观察组肿瘤组织SYK基因甲基化情况。Kaplan-Meier法分析SYK基因甲基化与观察组患者预后的关系。将针对SYK启动子序列设计的MON、UMON、CON1、CON2寡核苷酸序列转染至AGS细胞,分别设为MON组、UMON组、CON1组、CON2组。采用CCK-8法检测细胞增殖活性;Transwell检测细胞迁移及侵袭能力;采用实时荧光定量聚合酶链反应检测SYK及上皮间质转化相关蛋白上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)基因mRNA表达;采用Western blot法检测SYK、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白表达。结果观察组肿瘤组织SYK基因甲基化率(70.1%)高于观察组癌旁组织(14.0%)、对照组胃镜活检组织(14.8%)(均P<0.05),SYK mRNA及蛋白表达量均低于癌旁组织、对照组患者胃镜活检组织(均P<0.05)。MKN-45、SGC-7901、MFC胃癌细胞SYK基因呈甲基化状态,而AGS、GES-1细胞SYK基因呈未甲基化状态,AGS、GES-1细胞SYK mRNA及蛋白表达量均高于MKN-45、SGC-7901、MFC细胞(均P<0.05)。组织学分级3级、肿瘤大小≥5 cm、T_(3)~T_(4)期、区域淋巴结有转移、有远处转移及Ⅲ~Ⅳ期患者肿瘤组织SYK基因甲基化率分别高于1~2级、肿瘤大小<5 cm、T_(1)~T_(2)期、区域淋巴结无转移、无远处转移及Ⅰ~Ⅱ期患者(均P<0.05)。SYK基因甲基化患者中位生存期明显短于未甲基化患者(26.7个月比35.1个月,P<0.05)。与UMON组、CON1组及CON2组比较,MON组AGS细胞SYK mRNA和蛋白表达量均降低(均P<0.05),增殖活性、迁移和侵袭能力均增强(均P<0.05),E-cadherin表达量降低(均P<0.05),N-cadherin和Vimentin表达量均升高(均P<0.05)。结论胃癌组织SYK基因处于高甲基化状态,为患者预后的不利因素。SYK基因高甲基化可促进胃癌细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化。 展开更多
关键词 胃癌 脾酪氨酸激酶 甲基化 临床价值 恶性生物学行为
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医用臭氧油通过抑制FcεRI/Syk信号通路缓解DNCB诱导的变应性接触性皮炎 被引量:3
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作者 付志兵 谢雅洁 +6 位作者 曾丽月 高丽华 喻小春 谭丽娜 周璐 曾金容 鲁建云 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期1-14,共14页
目的:臭氧被广泛用于治疗过敏性皮肤病,如湿疹、特应性皮炎和接触性皮炎。然而其具体的机制仍然不清楚。本研究旨在探讨医用臭氧油对2,4-二硝基氯苯(2,4-dinitrochlorobenzene,DNCB)诱导的变应性接触性皮炎(allergic contact dermatitis... 目的:臭氧被广泛用于治疗过敏性皮肤病,如湿疹、特应性皮炎和接触性皮炎。然而其具体的机制仍然不清楚。本研究旨在探讨医用臭氧油对2,4-二硝基氯苯(2,4-dinitrochlorobenzene,DNCB)诱导的变应性接触性皮炎(allergic contact dermatitis,ACD)的治疗作用及其机制。方法:除空白对照组外,其余小鼠均用DNCB处理。采用DNCB建立ACD样小鼠模型,随机分为模型组、基础油组、医用臭氧油组、FcεRI过表达质粒(FcεRI-OE)组和FcεRI空质粒(FcεRI-NC)组;基础油和医用臭氧油组分别采用同等剂量基础油和医用臭氧油进行处理,FcεRI-OE组和FcεRI-NC组分别皮内注射25μg FcεRI过表达质粒和空质粒。记录皮损每日的变化,并使用反射共聚焦显微镜(reflectance confocal microscope,RCM)评估皮损厚度和炎症改变,同时对皮损组织进行苏木精-伊红(hematoxylineosin,HE)染色、实时聚合酶链反应(real-time PCR)、RNA测序(RNA-sequencing,RNA-seq)和免疫组织化学的检测及分析。结果:医用臭氧油显著减轻了DNCB诱导的ACD样皮炎,并降低了IFN-γ、IL-17A、IL-1β、TNF-α和其他相关炎症因子的表达(均P<0.05)。RNA-seq分析显示医用臭氧油显著抑制了DNCB诱导的FcεRI/Syk信号通路的激活,后续通过real-time PCR和免疫组织化学方法得到证实(均P<0.05)。与臭氧油组和FcεRI-NC组相比,FcεRI-OE组的IFN-γ、IL-17A、IL-1β、IL-6、TNF-α和其他炎症基因的mRNA表达水平明显升高(均P<0.05),FcεRI-OE组FcεRI和Syk的mRNA和蛋白质表达水平也明显升高(均P<0.05)。结论:医用臭氧油通过抑制FcεRI/Syk信号通路显著改善ACD样皮炎,减轻DNCB诱导的ACD样皮炎。 展开更多
关键词 医用臭氧油 2 4二硝基氯苯 变应性接触性皮炎 FcεRI/syk信号通路
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苦参碱通过抑制Lyn/Syk信号通路治疗大鼠过敏性哮喘 被引量:2
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作者 范爱欣 袁菲 唐科毅 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期872-878,共7页
目的探讨苦参碱(Mat)调节Lyn/Syk信号通路对过敏性哮喘大鼠免疫功能的影响。方法随机取12只SD大鼠作为对照组(NC组),其余大鼠参考先前文献通过卵清蛋白(OVA)造模。将造模成功的过敏性哮喘大鼠随机平分为Model组、Mat组(100 mg/kg Mat)、... 目的探讨苦参碱(Mat)调节Lyn/Syk信号通路对过敏性哮喘大鼠免疫功能的影响。方法随机取12只SD大鼠作为对照组(NC组),其余大鼠参考先前文献通过卵清蛋白(OVA)造模。将造模成功的过敏性哮喘大鼠随机平分为Model组、Mat组(100 mg/kg Mat)、MLR-1023组(30 mg/kg Lyn/Syk信号通路激活剂MLR-1023)、Mat+MLR-1023组(100 mg/kg Mat+30 mg/kg MLR-1023),每组12只。NC组、Model组给予等量的生理盐水,每天1次,持续4周。收集支气管肺泡灌洗液(BALF)并进行嗜酸粒细胞计数;ELISA试剂盒检测血清和BALF液中细胞因子水平;HE染色检测肺组织病理变化;测定肺组织中组胺水平;Western blot检测Lyn/Syk通路相关蛋白水平。结果NC组大鼠肺组织染色清晰,结构正常。Model组出现大量炎性细胞浸润现象,支气管周围嗜酸粒细胞增多,上皮细胞增大、脱落。Model组较NC组血清中TNF-α、IL-4、IL-5、IL-1β和LTD-4水平,BALF中IgE、OVA sIgE、嗜酸粒细胞数量以及肺组织p-Lyn/Lyn、p-Syk/Syk、组胺水平均显著增加(P<0.05);与Model组相比,Mat组嗜酸粒细胞数量、TNF-α、IL-4、IL-5、IL-1β和LTD-4水平、IgE、OVA sIgE、组胺、p-Lyn/Lyn、p-Syk/Syk水平均显著降低(P<0.05),而MLR-1023组结果与Mat组趋势相反;MLR-1023消除了Mat对过敏性哮喘大鼠的治疗效果。结论Mat可能通过下调Lyn/Syk信号通路对过敏性哮喘大鼠免疫功能起到改善作用。 展开更多
关键词 苦参碱 Lyn/syk信号通路 过敏性哮喘 免疫功能
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茯苓酸调节Lyn/Syk信号通路对哮喘大鼠气道炎症的影响
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作者 王艳梅 甘德堃 +1 位作者 赵润杨 梁彦昌 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期790-796,共7页
目的探讨茯苓酸对支气管哮喘大鼠气道炎症及酪氨酸蛋白激酶(Lyn)/脾酪氨酸激酶(Syk)信号通路的影响及其机制。方法建立支气管哮喘大鼠模型,将大鼠分为对照组、哮喘组、Lyn抑制剂PP2组、茯苓酸5 mg/kg组及茯苓酸10 mg/kg组,观察大鼠肺组... 目的探讨茯苓酸对支气管哮喘大鼠气道炎症及酪氨酸蛋白激酶(Lyn)/脾酪氨酸激酶(Syk)信号通路的影响及其机制。方法建立支气管哮喘大鼠模型,将大鼠分为对照组、哮喘组、Lyn抑制剂PP2组、茯苓酸5 mg/kg组及茯苓酸10 mg/kg组,观察大鼠肺组织病理学变化,并进行炎症评分。ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)与血清TNF-α、IFN-γ、IL-4水平,Giemsa染色法检测BALF炎症细胞,qRT-PCR法检测肺组织Lyn、Syk、STAT3 mRNA表达水平,Western blot检测肺组织Lyn、Syk、p-STAT3蛋白表达。结果哮喘组大鼠支气管黏膜水肿,管腔内容物增多,微血管渗漏,并伴有大量炎性细胞浸润。与对照组比较,哮喘组大鼠支气管炎症评分、BALF中炎性细胞数目、血清及BALF中TNF-α、IL-4水平及肺组织Lyn、Syk、STAT3mRNA及蛋白表达水平显著升高,BALF中IFN-γ水平显著降低(P<0.05);与哮喘组比较,PP2组、茯苓酸5 mg/kg组与茯苓酸10 mg/kg组的上述改变均得以减轻(P<0.05),且茯苓酸10 mg/kg组比茯苓酸5 mg/kg组效果为明显(P<0.05)。结论茯苓酸可抑制支气管哮喘大鼠气道炎症反应,其机制可能与抑制Lyn/Syk信号通路有关。 展开更多
关键词 茯苓酸 支气管哮喘 气道炎症 Lyn/syk信号通路
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枳葛口服液通过Syk/Ras/ERK信号通路防治酒精性肝损伤机制研究
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作者 苟沙沙 黄晓平 +3 位作者 李波 王晓栋 黄素琼 魏嵋 《中医药临床杂志》 2023年第8期1560-1565,共6页
目的:基于Syk/Ras/ERK信号通路观察枳葛口服液含药血清对酒精性肝损伤大鼠BRL3A肝细胞炎症反应的影响,探讨枳葛口服液防治酒精性肝损伤的相关机制。方法:将正常大鼠BRL3A肝细胞接种于6孔板,贴壁后分为正常对照组、模型组(2.5%乙醇处理)... 目的:基于Syk/Ras/ERK信号通路观察枳葛口服液含药血清对酒精性肝损伤大鼠BRL3A肝细胞炎症反应的影响,探讨枳葛口服液防治酒精性肝损伤的相关机制。方法:将正常大鼠BRL3A肝细胞接种于6孔板,贴壁后分为正常对照组、模型组(2.5%乙醇处理)、阳性对照组(美他多辛含药血清加2.5%乙醇)和不同浓度枳葛口服液含药血清(2.5%、5%、10%枳葛口服液含药血清加2.5%乙醇)干预组,24h后酶标法检测各组细胞上清液中GGT(γ-谷氨酰转肽酶)、LDH(乳酸脱氢酶)含量;RT-PCR法测定各组细胞内Syk、Ras、MEK1/2、ERK1/2、c-Fos mRNA表达情况。结果:与正常对照组比较,模型组细胞上清液中GGT、LDH含量显著升高(P<0.01);Syk、Ras、MEK1/2、ERK1/2、c-Fos mRNA表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各干预组以上指标均呈现不同程度的好转,其中10%枳葛口服液含药血清及阳性对照组作用最显著(P<0.01),二者之间未见明显差异(P>0.05)。结论:一定浓度的枳葛口服液含药血清对大鼠肝细胞酒精性肝损伤具有防治作用,其机制可能与抑制Syk/Ras/ERK信号通路活化,从而减轻肝脏炎症相关。 展开更多
关键词 枳葛口服液 syk/Ras/ERK信号通路 酒精性肝损伤 炎症反应
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Syk和SYK-mRNA在乳腺浸润性导管癌中的表达及其与腋窝淋巴结转移的关系
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作者 王华毅 张兆祥 +2 位作者 刘朝奇 黎家华 刘宇飞 《临床外科杂志》 2009年第7期450-452,共3页
目的 探讨Syk及其编码基因SYK—mRNA在乳腺癌中的表达及其与腋窝淋巴结转移的相关性。方法分别采用免疫组化SP法和原位RT—PCR方法同步检测52例乳腺浸润性导管癌(其中有腋窝淋巴结转移者32例)和39例乳腺非癌组织中Syk蛋白和SYK—mRNA... 目的 探讨Syk及其编码基因SYK—mRNA在乳腺癌中的表达及其与腋窝淋巴结转移的相关性。方法分别采用免疫组化SP法和原位RT—PCR方法同步检测52例乳腺浸润性导管癌(其中有腋窝淋巴结转移者32例)和39例乳腺非癌组织中Syk蛋白和SYK—mRNA的表达。结果Syk和SYK—mRNA在乳腺癌中的阳性表达率分别为42.3%(22/52)和38%(20/52),均显著低于非癌组织。Syk和SYK—mRNA表达的一致率为91%。无淋巴结转移组的乳腺癌Syk和SYK—mRNA阳性表达率均显著高于有淋巴结转移组的乳腺癌,但两组的Syk和SYK—mRNA表达量差异均无统计学意义。结论Syk(SYK—mRNA)的表达缺失与乳腺癌腋窝淋巴结转移有关,SYK—mRNA基因可能是乳腺癌的一种候选抑癌基因。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 syk syk—mRNA 淋巴结转移 抑癌基因
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蛇床子素调节Mincle/Syk/NF-κB信号通路对肾病综合征大鼠的治疗作用 被引量:4
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作者 何晓梅 丁洁 +2 位作者 王艳芳 程群芳 封宝红 《河北医学》 CAS 2023年第3期380-387,共8页
目的:探讨蛇床子素(OST)调节巨噬细胞诱导性C型凝集素样受体(Mincle)/脾脏酪氨酸激酶(Syk)/核因子κB(NF-κB)信号通路对肾病综合征(NS)大鼠的治疗作用。方法:随机选择10只大鼠记为N组,其它大鼠构建NS模型,将建模成功的50只大鼠随机平分... 目的:探讨蛇床子素(OST)调节巨噬细胞诱导性C型凝集素样受体(Mincle)/脾脏酪氨酸激酶(Syk)/核因子κB(NF-κB)信号通路对肾病综合征(NS)大鼠的治疗作用。方法:随机选择10只大鼠记为N组,其它大鼠构建NS模型,将建模成功的50只大鼠随机平分为NS组(模型组)、L-OST组(10mg/kg OST)、M-OST组(20mg/kg OST)、H-OST组(40mg/kg OST)、H-OST+TDB组(40mg/kg OST+50μg TDB/周),OST每天注射1次,连续治疗4周。ELISA法检测血清中炎性因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)、氧化应激指标(SOD、MDA、LDH)、24h尿液中UP水平;通过全自动化学分析仪检测BUN、Scr水平;HE染色以及Masson染色检测肾脏病理变化;TUNEL染色检测肾脏细胞凋亡;Western blot检测collagen I、Ly6g、Ki-67、Mincle/Syk/NF-κB通路蛋白表达。结果:N组肾组织结构正常,染色清晰,NS组出现大量间质炎性细胞浸润、肾小管萎缩、大量空泡的现象,NS组较N组24h UP、Scr、BUN含量、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、LDH水平、胶原容积分数、凋亡率、collagen I、Ly6g、Ki-67、Mincle、Syk、p-NF-κB/NF-κB蛋白水平均显著升高(P<0.05),SOD水平显著下降(P<0.05);与NS组相比,L-OST组、M-OST组、H-OST组均改善炎性细胞浸润、肾小管萎缩现象,24h UP、Scr、BUN含量、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、LDH水平、胶原容积分数、凋亡率、collagen I、Ly6g、Ki-67、Mincle、Syk、p-NF-κB/NF-κB蛋白水平均显著下降(P<0.05),SOD水平显著升高(P<0.05),且H-OST组治疗效果最佳;TDB消除了OST对NS大鼠肾损伤的改善作用。结论:OST可能通过抑制Mincle/Syk/NF-κB信号通路减轻OST大鼠的肾损伤。 展开更多
关键词 蛇床子素 肾病综合征 巨噬细胞诱导性C型凝集素样受体 脾脏酪氨酸激酶 核因子ΚB
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天花粉蛋白抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞生长及逆转syk基因甲基化的研究 被引量:15
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作者 华芳 单保恩 +2 位作者 赵连梅 姚志刚 彭华 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期944-949,共6页
目的:研究天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和诱导细胞凋亡过程中脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,syk)基因甲基化状态的改变,以寻找新的去甲基化药物。方法:采用MTT法分析TCS对MDA-MB-231细胞增殖的... 目的:研究天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和诱导细胞凋亡过程中脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,syk)基因甲基化状态的改变,以寻找新的去甲基化药物。方法:采用MTT法分析TCS对MDA-MB-231细胞增殖的影响,Giemsa染色法观察TCS作用后细胞形态学的变化,FCM检测不同浓度TCS作用48h后MDA-MB-231细胞凋亡和细胞周期分布情况,甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)法检测MDA-MB-231细胞经TCS作用前后syk基因甲基化状态的改变,RT-PCR方法分析TCS作用后MDA-MB-231细胞中syk、Dnmts和MBD2 mRNA表达量的变化,比色法检测TCS对MDA-MB-231细胞DNA甲基转移酶活性的影响。结果:TCS体外对MDA-MB-231细胞增殖具有显著抑制作用(P<0.05),并呈时间和浓度依赖性;TCS可诱导MDA-MB-231细胞出现空泡样变性、核固缩和核碎裂等细胞凋亡形态学改变,能使MDA-MB-231细胞凋亡并可诱导细胞生长周期阻滞,凋亡率明显高于对照组(P<0.05),并呈时间和浓度依赖性。TCS可以逆转MDA-MB-231细胞syk基因启动子区甲基化状况;MDA-MB-231细胞syk mRNA表达阴性,经TCS作用后,syk mRNA表达阳性;MDA-MB-231细胞经TCS作用48h前后Dnmts和MBD2 mRNA表达量没有明显变化(P>0.05),但Dnmts活性降低。结论:TCS在抑制MDA-MB-231细胞增殖、诱导细胞凋亡过程中对syk基因具有明显的去甲基化作用,因而可能成为新型的去甲基化药物。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 天花粉蛋白 蛋白质酪氨酸激酶 DNA甲基化 细胞增殖 细胞凋亡 基因 syk
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PTEN、nm23-H1和Syk在大肠癌中的表达及意义 被引量:14
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作者 董华承 范丽昕 +3 位作者 朴正爱 王晓鸿 王海 王丽双 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2013年第5期403-407,共5页
目的检测PTEN、nm23-H1和Syk蛋白在大肠癌中的表达,探讨其与大肠癌发生、发展、浸润和转移的关系。方法采用免疫组化SP法检测60例大肠癌组织及30例正常大肠黏膜中PTEN、nm23-H1和Syk的表达,分析三者与大肠癌临床病理特征的关系。结果正... 目的检测PTEN、nm23-H1和Syk蛋白在大肠癌中的表达,探讨其与大肠癌发生、发展、浸润和转移的关系。方法采用免疫组化SP法检测60例大肠癌组织及30例正常大肠黏膜中PTEN、nm23-H1和Syk的表达,分析三者与大肠癌临床病理特征的关系。结果正常大肠黏膜中PTEN、nm23-H1和Syk的阳性表达率分别为90.0%(27/30)、93.3%(28/30)和96.7%(29/30),而在大肠癌组织中分别为36.7%(22/60)、41.7%(25/60)和31.7%(19/60),差异均有统计学意义(P<0.01)。大肠癌中3种蛋白的表达与年龄、性别、肿瘤大小和发生部位均无关(P>0.05),PTEN、Syk表达与大肠癌的浸润程度、淋巴结转移、分化程度及Duke's分期有关,nm23-H1表达与浸润程度、淋巴结转移及Duke's分期有关。大肠癌中3种蛋白表达两两呈正相关。结论 PTEN、nm23-H1和Syk表达与大肠癌发生、发展、浸润及转移密切相关,联合检测是判断大肠癌生物学行为的重要指标。 展开更多
关键词 大肠癌 抑癌基因 PTEN NM23-H1 syk 免疫组织化学
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DNA甲基化导致肝细胞癌SYK基因失表达 被引量:12
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作者 元云飞 汪建平 +5 位作者 李锦清 王莉 刘文姬 崔伯康 杨祖立 张昌卿 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期307-309,共3页
目的:探讨SYK(Spleentyrosinekinase,脾酪氨酸激酶)在肝细胞癌中的表达和不表达的机制。方法:分别用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法和甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation-specificPCR,MSP)检测SYK基因在肝癌细胞系(HepG2和Hep3B)... 目的:探讨SYK(Spleentyrosinekinase,脾酪氨酸激酶)在肝细胞癌中的表达和不表达的机制。方法:分别用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法和甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation-specificPCR,MSP)检测SYK基因在肝癌细胞系(HepG2和Hep3B)和34例肝细胞癌组织、癌旁非瘤组织中的表达和甲基化情况。结果:肝癌细胞系Hep3B表达SYKmRNA,而HepG2不表达SYKmRNA。DNA甲基化转移酶抑制剂5-aza-2’-deoxycytidine处理HepG2后,SYK重新表达。Hep3B细胞SYK甲基化阴性,HepG2细胞SYK甲基化阳性。34例肝细胞癌组织标本中,5例SYKmRNA表达阴性,SYK基因甲基化均阳性;29例SYKmRNA表达阳性,其中3例SYK甲基化阳性,其余26例SYK甲基化阴性。肿瘤组织SYK基因的甲基化率为23.5%(8/34),而瘤旁肝组织中为8.8%(3/34)。结论:SYK基因启动子甲基化导致肝细胞癌SYKmRNA失表达,可能是肝癌发病的机制之一。 展开更多
关键词 syk 甲基化 肝细胞癌
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蟾蜍灵在诱导HL-60细胞凋亡时对SYK和CBL家族蛋白的影响 被引量:8
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作者 曲秀娟 赵明芳 +6 位作者 刘云鹏 滕月娥 曲晶磊 张晔 徐玲 李迎春 侯科佐 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期65-68,共4页
为了探讨酪氨酸蛋白激酶SYK和CBL家族泛素连接酶在蟾蜍灵诱导HL-60细胞凋亡过程中的作用机制,采用台盼蓝染色检测细胞活力,采用流式细胞术检测细胞凋亡,采用Western blot和免疫沉降技术检测CBL、CBL-b表达和SYK的磷酸化。结果显示,蟾蜍... 为了探讨酪氨酸蛋白激酶SYK和CBL家族泛素连接酶在蟾蜍灵诱导HL-60细胞凋亡过程中的作用机制,采用台盼蓝染色检测细胞活力,采用流式细胞术检测细胞凋亡,采用Western blot和免疫沉降技术检测CBL、CBL-b表达和SYK的磷酸化。结果显示,蟾蜍灵以时间和剂量依赖方式抑制HL-60细胞增殖,24、48和72小时抑制细胞活力的IC50浓度分别约为26.3,7.8和2.0 nmol/L。高剂量蟾蜍灵从8小时即开始诱导HL-60细胞凋亡;与此同时蟾蜍灵快速活化SYK,并以时间依赖的方式下调CBL和CBL-b表达。结论:SYK活化及CBL家族蛋白表达下调可能参与蟾蜍灵对HL-60细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用。 展开更多
关键词 蟾蜍灵 syk HL-60细胞 细胞凋亡 CBL
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洛铂术前化疗后乳腺癌组织中Syk表达及其分子机制的研究 被引量:8
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作者 史健 王桂英 +5 位作者 单保恩 王小玲 刘江 鲁壮平 石军梅 刘志敏 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期636-640,共5页
目的探讨乳腺癌洛铂术前化疗后组织病理改变及其Syk表达变化的分子机制。方法60例乳腺癌患者随机分组为实验组(术前24h应用洛铂化疗和洛铂药物作用24h的人乳腺癌细胞株)、对照组(未行化疗或未用洛铂药物作用的人乳腺癌细胞株)。两组均应... 目的探讨乳腺癌洛铂术前化疗后组织病理改变及其Syk表达变化的分子机制。方法60例乳腺癌患者随机分组为实验组(术前24h应用洛铂化疗和洛铂药物作用24h的人乳腺癌细胞株)、对照组(未行化疗或未用洛铂药物作用的人乳腺癌细胞株)。两组均应用H-E法、免疫组织化学染色法、荧光PCR法分别检测两组人乳腺癌细胞株、乳腺癌组织中Syk、c-myc、P53、PCNA等分子生物学指标变化。结果洛铂药物作用24h后,人乳腺细胞株中Syk及其蛋白表达均为阳性,SykmRNA表达值均增高,MCF-7中SykmRNA由1.41×104升高到3.13×104;MDA-MB-231洛铂作用后则由阴性转为阳性表达,SykmRNA由0升高到1.11×104;实验组SYK蛋白染色较对照组乳腺癌组织中明显增强,染色深,颗粒粗。Syk阳性表达率显示,实验组86.7%(26/30)明显高于对照组的63.3%(19/30)。SykmRNA均值实验组(26.39±0.017)×104明显高于对照组(6.17±0.065)×104(P<0.001)。实验组乳腺癌患者肿瘤细胞坏死明显,细胞空泡变性增多,核固缩、凝固性坏死显著,肿瘤组织及其周围组织中可见大量淋巴细胞和嗜酸性细胞浸润。实验组乳腺癌组织中Syk、IL-2Rβ、CD4β、c-myc均表达增强,其阳性表达率分别为86.7%、100%、60%、70%;Syk、c-myc较对照组的阳性表达率增高有显著差异(P<0.05)。结论洛铂术前化疗可提高乳腺癌组织Syk表达,IL-2Rβ及其CD4β是与SykPTK相关联所必需的,也是IL-2诱导激活的SykPTK、c-myc及其细胞信号转导增殖所必需的区域。同时IL-2诱导的SykPTK激活可能导致c-myc基因的表达。 展开更多
关键词 乳腺癌 洛铂 术前化疗 syk
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乳腺癌和非癌组织中Syk、survivin和Ki-67的表达及其相关性 被引量:25
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作者 王华毅 张兆祥 +3 位作者 胡余昌 黎家华 王雅琴 刘宇飞 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期158-161,共4页
目的探讨乳腺癌和非癌组织中Syk、survivin和Ki-67的表达及其相互关系。方法应用免疫组化SP法检测52例乳腺浸润性导管癌和39例非癌组织(包括癌旁乳腺组织17例和乳腺纤维腺瘤组织22例)中Syk、survivin和Ki-67的表达。结果39例非癌组织中... 目的探讨乳腺癌和非癌组织中Syk、survivin和Ki-67的表达及其相互关系。方法应用免疫组化SP法检测52例乳腺浸润性导管癌和39例非癌组织(包括癌旁乳腺组织17例和乳腺纤维腺瘤组织22例)中Syk、survivin和Ki-67的表达。结果39例非癌组织中Syk均呈阳性表达,而survivin及Ki-67均呈阴性表达。52例乳腺癌组织中,Syk阳性22例(42.3%),survivin阳性36例(69.2%),Ki-67阳性32例(61.5%)。乳腺癌中Syk阳性表达率低于非癌组织(χ2=31.01,P<0.01);乳腺癌中survivin(χ2=41.82,P<0.01)和Ki-67(χ2=34.37,P<0.01)阳性表达率均高于非癌组织。相关分析显示,Syk与sur-vivin的表达呈负相关(r=-0.53,P<0.01);Syk与Ki-67的表达相关系数呈负值(r=-0.22,P=0.12);survivin与Ki-67的表达呈正相关(r=0.33,P<0.05)。结论Syk可能有抑制乳腺癌细胞增殖和促进其凋亡的功能,提示Syk可能是一种抑癌基因,可作为乳腺癌新的分子标记物。联合检测Syk、survivin和Ki-67在乳腺癌中的表达,有望成为估价乳腺癌生物学行为的参考指标。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 syk SURVIVIN KI-67 免疫组织化学 抑癌基因
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三七总皂苷通过调节TLR4/SYK信号抑制ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化泡沫细胞的形成 被引量:9
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作者 赵培 李永辉 +5 位作者 高伟 马倩 于悦卿 王洁 路永刚 帖彦清 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2021年第8期1267-1273,共7页
三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)是从五加科人参属植物三七根部提取的有效活性成分,临床广泛应用于动脉粥样硬化疾病的治疗,但其相关机制尚不完全清楚,本课题对ApoE基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠的体内实验研究发现PNS具有明显... 三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)是从五加科人参属植物三七根部提取的有效活性成分,临床广泛应用于动脉粥样硬化疾病的治疗,但其相关机制尚不完全清楚,本课题对ApoE基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠的体内实验研究发现PNS具有明显的改善血脂的功能,并对小鼠动脉粥样硬化斑块的形成具有抑制作用,其分子机制与TLR4/SYK信号通路相关;进一步通过体外细胞实验发现PNS能够抑制小鼠斑块内巨噬细胞的吞噬能力和CD36的表达,从而抑制泡沫细胞的形成。因此我们认为三七总皂苷可通过调节TLR4/SYK信号抑制ApoE^(-/-)小鼠泡沫细胞的形成从而抑制动脉粥样硬化的进展。 展开更多
关键词 三七总皂苷 TLR4/syk 动脉粥样硬化 泡沫细胞
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MSP法检测胰腺癌Syk基因甲基化改变的研究 被引量:11
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作者 陈明霞 丁永斌 +3 位作者 戴存才 蒋奎荣 范萍 苗毅 《河北医学》 CAS 2003年第7期577-579,共3页
目的 :探讨胰腺癌Syk基因启动子区 5’CpG岛甲基化改变的特点与临床病理特征的关系。方法 :采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测Syk基因启动子甲基化情况。结果 :32例癌旁正常胰腺组织未发现有Syk基因启动子的甲基化 ,14 /32例胰腺癌组织... 目的 :探讨胰腺癌Syk基因启动子区 5’CpG岛甲基化改变的特点与临床病理特征的关系。方法 :采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测Syk基因启动子甲基化情况。结果 :32例癌旁正常胰腺组织未发现有Syk基因启动子的甲基化 ,14 /32例胰腺癌组织检测到Syk基因启动子的甲基化 ,癌组织Syk基因启动子甲基化率显著增高 (P <0 .0 5 )。有淋巴结转移的 15例胰腺癌组织中 ,有 10例Syk基因启动子甲基化 ,有淋巴结转移的Syk基因启动子甲基化显著高于无淋巴结转移组 (P <0 .0 5 )。结论 :Syk基因启动子甲基化是导致Syk基因失活的原因之一 ,Syk基因启动子的甲基化与胰腺癌的发生、转移相关。 展开更多
关键词 胰腺癌 syk 甲基化 MSP法 基因启动子
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盐酸普鲁卡因对人肝癌HepG2细胞Syk基因甲基化的影响 被引量:6
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作者 高曰文 朱耀明 +5 位作者 韩钰 秦烨 朱晨宇 胡汉卿 王艳林 商远方 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期191-194,共4页
为探讨盐酸普鲁卡因(procaine,PCA)对人肝癌HepG2细胞Syk基因甲基化的影响,应用巢式双重甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation-specific PCR,MSP)检测盐酸普鲁卡因处理前后HepG2细胞中Syk基因启动子的甲基化水平;采用蛋白印迹技术观察... 为探讨盐酸普鲁卡因(procaine,PCA)对人肝癌HepG2细胞Syk基因甲基化的影响,应用巢式双重甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation-specific PCR,MSP)检测盐酸普鲁卡因处理前后HepG2细胞中Syk基因启动子的甲基化水平;采用蛋白印迹技术观察Syk蛋白表达情况。结果显示,MSP检测到人肝癌HepG2细胞中Syk基因发生甲基化,随盐酸普鲁卡因浓度升高和时间的延长Syk基因甲基化水平逐渐降低;蛋白印迹结果表明,Syk蛋白在HepG2细胞中低表达,经盐酸普鲁卡因处理可以上调Syk蛋白的表达。人肝癌HepG2细胞中Syk基因启动子区域发生甲基化可能是肝癌发病的机制之一;盐酸普鲁卡因能降低Syk基因启动子区域CpG岛甲基化,并使Syk蛋白表达上调。 展开更多
关键词 盐酸普鲁卡因 syk基因 甲基化
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兔抗Syk抗体制备和在乳腺癌诊断中的应用 被引量:4
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作者 单保恩 董青 +3 位作者 王晓玲 陈兴 董金琢 马洪 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期486-488,共3页
目的 :制备兔抗小鼠脾酪氨酸激酶 (Syk)抗体 ,分析其在乳腺癌诊断中的价值。方法 :应用重组小鼠Syk蛋白 ,常规免疫雄性家兔制备抗Syk抗体。用免疫印迹法检测Syk抗体的纯度和特异性。应用免疫组化法 ,检测乳腺组织中Syk蛋白的表达。结果 ... 目的 :制备兔抗小鼠脾酪氨酸激酶 (Syk)抗体 ,分析其在乳腺癌诊断中的价值。方法 :应用重组小鼠Syk蛋白 ,常规免疫雄性家兔制备抗Syk抗体。用免疫印迹法检测Syk抗体的纯度和特异性。应用免疫组化法 ,检测乳腺组织中Syk蛋白的表达。结果 :用重组小鼠Syk蛋白免疫家兔 6wk后 ,静脉血中抗Syk抗体效价为 1∶6 4 0 0 (A450 =1.0 3)。将Syk经SDS PAGE分离 ,可见 1条相对分子质量 (Mr)为 72 0 0 0的蛋白条带 ,与理论值相符。用抗Syk血清做免疫印迹证实 ,在Mr 为 72 0 0 0处有 1条明显的带 ,证明是抗Syk特异性抗体。乳腺组织切片经抗Syk抗体免疫组化染色 ,在正常乳腺组织细胞胞浆中可见棕黄色颗粒 ,而浸润性乳腺导管癌组织的细胞浆不着色。结论 :制备了高效价、特异性的兔抗Syk抗体。用该抗体检测证实 ,Syk在正常乳腺组织细胞中呈高表达 ,在乳腺癌组织细胞中表达缺失。 展开更多
关键词 syk 抗体 乳腺癌 诊断
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