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HBeAg阳性慢性乙型肝炎初治患者BCP区A1762T/G1764A变异株定量检测结果分析
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作者 吕莹 涂文辉 陈晓蓉 《肝脏》 2017年第7期605-607,共3页
目的探讨HBeAg阳性慢性乙型肝炎初治患者BCP区A1762T/G1764A变异株定量检测的临床意义。方法通过单标记探针联合选择性阻断实时荧光定量PCR法精确定量检测97例HBV DNA阳性慢性乙型肝炎初治患者BCP区A1762T/G1764A变异株,并进行统计学分... 目的探讨HBeAg阳性慢性乙型肝炎初治患者BCP区A1762T/G1764A变异株定量检测的临床意义。方法通过单标记探针联合选择性阻断实时荧光定量PCR法精确定量检测97例HBV DNA阳性慢性乙型肝炎初治患者BCP区A1762T/G1764A变异株,并进行统计学分析。结果 97例HBeAg阳性患者变异株的含量会随着HBV DNA水平的升高而降低(P<0.01)。变异株含量同时与HBeAg水平呈显著相关,随着HBeAg水平的升高,变异株含量降低(P<0.01)。结论对HBV感染者的BCP区A1762T/G1764A变异株进行定量检测,可对患者病情的可能发展进行预测,从而可以采取有效的防治措施。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 BCP区 A1762t/G1764A双变异 定量检测
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不对称熔解曲线PCR法和DNA测序法检测HBV A1762T/G1764A结果分析
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作者 刘京伟 赵安成 《医学检验与临床》 2013年第4期10-11,共2页
目的:以DNA测序法为标准,探讨不对称PCR熔解曲线法检测乙型肝炎病毒A1762T/G1764A基因变异的敏感性和特异性。方法:选取45例HBV阳性且经PCR熔解曲线法显示A1762T/G1764A变异的乙型肝炎患者血清,另选10例未发生HBV A1762T/G1764A变... 目的:以DNA测序法为标准,探讨不对称PCR熔解曲线法检测乙型肝炎病毒A1762T/G1764A基因变异的敏感性和特异性。方法:选取45例HBV阳性且经PCR熔解曲线法显示A1762T/G1764A变异的乙型肝炎患者血清,另选10例未发生HBV A1762T/G1764A变异的慢乙肝患者血清,用DNA测序法进行比较,分析两者检测结果。结果:55例测序样本中有51例两法结果完全一致,总符合率92.7%,另4例结果是:不对称PCR熔解曲线法检测显示为不完全变异型,而测序法则显示为完全变异型。结论:两法的相符率高,PCR熔解曲线法对A1762T/G1764A变异的检测是一简单易行较实用的方法,适用于临床基层开展。 展开更多
关键词 溶解曲线PCR A1762t G1764A DNA序列
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乙型肝炎病毒基本核心启动子区A1762T/G1764A突变检测的意义 被引量:5
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作者 徐丹丹 张曼 吴黎黎 《检验医学与临床》 CAS 2017年第1期32-34,共3页
目的探讨乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)基本核心启动子区(BCP)A1762T/G1764A联合突变在不同疾病中发生的差异及其与乙肝相关肝癌预后的关系。方法选择慢性乙肝(CHB)患者38例、乙肝肝硬化(LC)患者36例、乙肝相关肝细胞肝癌(HCC)患者74例,用巢... 目的探讨乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)基本核心启动子区(BCP)A1762T/G1764A联合突变在不同疾病中发生的差异及其与乙肝相关肝癌预后的关系。方法选择慢性乙肝(CHB)患者38例、乙肝肝硬化(LC)患者36例、乙肝相关肝细胞肝癌(HCC)患者74例,用巢式PCR扩增患者血清中HBV BCP区,直接测序法检测HBV BCP区变异,分析A1762T/G1764A突变与HBV复制、HBeAg表达和HBV感染不同阶段的关系,以及与HCC患者预后的关系。结果在148例患者中,A1762T/G1764A突变总体发生率为54.7%,乙肝相关HCC组中A1762T/G1764A突变发生率为79.7%,而CHB、LC患者分别为31.6%、27.8%,HCC组变异的发生率明显高于CHB组(P<0.05)和LC组(P<0.05);A1762T/G1764A突变组HBV-DNA载量与非突变组比较差异无统计学意义(P>0.05);HBeAg阳性组A1762T/G1764A突变发生率为41.4%,HBeAg阴性组为73.5%,HBeAg阴性组变异发生率明显高于HBeAg阳性组(P<0.05);HCC患者A1762T/G1764A变异组与非变异组之间无病生存期及总体生存期差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HBV核心启动子区A1762T/G1764A联合突变与HCC发生具有显著关系,该变异与血清HBV-DNA的复制水平无关,但与血清HBeAg表达水平有关,与乙肝相关HCC预后无显著关系。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 基因突变 A1762t/G1764A 肝细胞癌
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乙型肝炎病毒A1762T/G1764A变异的临床意义
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作者 郑南红 纪礽斌 +2 位作者 胡家定 丁世雄 舒晋峰 《医学研究杂志》 2006年第9期61-63,共3页
目的探讨乙肝病毒(HBV)A1762T/G1764A变异的临床意义。方法应用基因芯片方法对115例慢性乙型肝炎患者进行HBVA1762T/G1764A变异检测,分析A1762T/G1764A变异与临床类型、HBV-DNA、HBeAg及肝纤维化血清学指标透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(P... 目的探讨乙肝病毒(HBV)A1762T/G1764A变异的临床意义。方法应用基因芯片方法对115例慢性乙型肝炎患者进行HBVA1762T/G1764A变异检测,分析A1762T/G1764A变异与临床类型、HBV-DNA、HBeAg及肝纤维化血清学指标透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PⅢP)、Ⅳ型胶原(CL-Ⅳ)、层粘蛋白(LN)的关系。结果慢性乙型肝炎轻度、中度、重度及肝炎肝硬化中A1762T/G1764A变异率分别为43%、55%、61%、89%(P<0.05);A1762T/G1764A变异组病人肝纤维化指标HA、PⅢP、CL-Ⅳ明显高于对照组(P<0.05)。结论HBVA1762T/G1764A变异与与疾病进展及肝纤维化具有相关性。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 A1762t/G1764A变异 肝纤维化 基因芯片
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慢性HBV感染者BCP区A1762T/G1764A和前C区G1896A变异的影响因素分析
5
作者 张行芬 华馨 +1 位作者 高国生 胡耀仁 《中华临床感染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期283-290,共8页
目的:探讨慢性HBV感染者基本核心启动子(BCP)区A1762T/G1764A和前C区G1896A变异的影响因素。方法:回顾性收集2010年10月至2022年8月宁波市第二医院464例慢性HBV感染者的临床资料,分析慢性HBV感染者BCP区A1762T/G1764A和前C区G1896A的变... 目的:探讨慢性HBV感染者基本核心启动子(BCP)区A1762T/G1764A和前C区G1896A变异的影响因素。方法:回顾性收集2010年10月至2022年8月宁波市第二医院464例慢性HBV感染者的临床资料,分析慢性HBV感染者BCP区A1762T/G1764A和前C区G1896A的变异情况。采用Logistic回归分析BCP区A1762T/G1764A和前C区G1896A变异的影响因素。结果:A1762T/G1764A变异率为62.1%(288/464),G1896A变异率为32.8%(152/464),A1762T/G1764A和G1896A同时变异率为20.9%(97/464)。终末期肝病患者的A1762T/G1764A变异率、A1762T/G1764A和G1896A同时变异率均高于慢性乙型肝炎患者(χ^(2)=9.285和6.748,P值均<0.05)。单因素分析结果显示,A1762T/G1764A变异组年龄、血清天冬氨酸转氨酶水平及基因C型比例均高于无变异组(P<0.05或<0.01);G1896A变异组年龄、HBeAg阴性比例及血清γ-谷氨酰转肽酶水平均高于无变异组(P<0.05或<0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄是A1762T/G1764A变异的独立影响因素(OR=1.035,95%CI 1.017~1.054,P<0.001),HBeAg状态是G1896A变异的独立影响因素(OR=0.171,95%CI 0.112~0.261,P<0.001)。结论:对于慢性HBV感染者,年龄越大,A1762T/G1764A变异可能性大;HBeAg阴性,G1896A变异可能性大。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 基因突变 A1762t/G1764A G1896A
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Distribution of hepatitis B virus genotypes:Phylogenetic analysis and virological characteristics of Genotype C circulating among HBV carriers in Kolkata,Eastern India 被引量:3
6
作者 Arup Banerjee Sibnarayan Datta +3 位作者 Partha K Chandra Susanta Roychowdhury Chinmoy Kumar Panda Runu Chakravarty 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2006年第37期5964-5971,共8页
AIM: To evaluate the genotype distribution of hepatitis B virus (HBV) in Eastern India and to clarify the phyloge- netic origin and virological characteristics of the recently identifi ed genotype C in this region. ME... AIM: To evaluate the genotype distribution of hepatitis B virus (HBV) in Eastern India and to clarify the phyloge- netic origin and virological characteristics of the recently identifi ed genotype C in this region. METHODS: Genotype determination, T1762/A1764 mutation in the basal core promoter (BCP) and A1896 mutation in the precore region of 230 subjects were de- termined by restriction fragment length polymorphism method (RFLP) and the result was confi rmed by direct sequencing. RESULTS: The predominant genotypes D (HBV/D) and A (HBV/A) were detected in 131/230 (57%) and 57/230 (25%) samples. In addition, genotype C (HBV/C) was detected in 42/230 (18%) isolates. Surface gene region was sequenced from 45 isolates (27 HBV/C, 9 HBV/A and 9 HBV/D). Phylogenetic analysis revealed that all of the HBV/C sequences clustered with South East Asian subgenotype (HBV/Cs). The sequence data showed re- markable similarity with a Thai strain (AF068756) (99.5% ± 0.4% nucleotide identities) in 90% of the genotype C strains analyzed. T1762/A1764 mutation in BCP re- gion, associated with high ALT was signifi cantly higher in HBeAg negative isolates than HBeAg positive isolates. Frequency of A1896 mutation leading to HBeAg negativ- ity was low.CONCLUSION: The present study reports the genotypic distribution and the characteristics of partial genome sequences of HBV/C isolates from Eastern India. Low genetic diversity and confi nement of HBV/C in Eastern India possibly indicate a recent, limited, spread in this region. Genotype C with T1762/A1764 mutation has been reported to increase the risk for hepatocellular car- cinoma; therefore genotype C carriers in Eastern India should be carefully monitored. 展开更多
关键词 HBV genotypes HBV/Cs Eastern India t1762/a1764 mutation
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乙型肝炎病毒原发性肝癌X区变异与外周血T淋巴细胞亚群的关系 被引量:4
7
作者 黄有全 何雨 +4 位作者 黄天壬 邓伟 黄月莹 梅凡彪 李红 《广西医科大学学报》 CAS 2019年第10期1576-1580,共5页
目的:初步探讨乙型肝炎病毒(HBV)X区热点突变A1762T/G1764A与HBV相关性原发性肝癌(PLC)患者外周血T淋巴细胞亚群之间的关系。方法:使用流式细胞仪和全自动生化分析仪分别检测35例PLC患者外周血CD3^+、CD4^+和CD8^+T淋巴细胞亚群水平和... 目的:初步探讨乙型肝炎病毒(HBV)X区热点突变A1762T/G1764A与HBV相关性原发性肝癌(PLC)患者外周血T淋巴细胞亚群之间的关系。方法:使用流式细胞仪和全自动生化分析仪分别检测35例PLC患者外周血CD3^+、CD4^+和CD8^+T淋巴细胞亚群水平和肝功能相关指标,同时提取外周血HBV DNA,用巢式PCR扩增HBV X区,对PCR产物进行双向测序,分析HBV X区A1762T/G1764A位点突变情况。结果:成功扩增35例PLC患者血清HBV DNA,DNA载量在突变组与未突变组间存在明显差异(t=4.41,P<0.001)。高载量组中CD3^+、CD4^+、CD8^+T淋巴细胞所占百分比和CD4^+/CD8^+比值与低载量组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。突变组中CD3^+、CD4^+和CD8^+T淋巴细胞所占百分比和CD4^+/CD8^+的比值与未突变组比较,差异无统计学意义(P>0.05);突变组总胆红素(TBIL)、总蛋白(TP)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和未突变组比较无明显差异(P>0.05),但突变组丙氨酸氨基转移酶(ALT)高于未突变组(t=2.20,P=0.035)。结论:HBV X区A1762T/G1764A突变与外周血T淋巴细胞可能无直接关联,但能够引起较为严重的肝损伤。 展开更多
关键词 原发性肝癌 A1762t/G1764A双突变 t淋巴细胞
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TDI-FP法分析肝细胞癌组织中HBV核心启动子双突变 被引量:1
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作者 吕贯廷 卢冰 +2 位作者 白玉杰 张剑 阎小君 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第7期916-919,共4页
目的:通过TDI-FP法检测肝细胞癌组织中HBV DNA核心启动子区A1762 T和G1764A双突变并分析二者之间的相关性,同时建立一种新的突变检测方法.方法:以20例肝细胞癌组织为研究标本,通过PCR扩增含有HBV DNA核心启动子区的DNA片段,然后用TDI-F... 目的:通过TDI-FP法检测肝细胞癌组织中HBV DNA核心启动子区A1762 T和G1764A双突变并分析二者之间的相关性,同时建立一种新的突变检测方法.方法:以20例肝细胞癌组织为研究标本,通过PCR扩增含有HBV DNA核心启动子区的DNA片段,然后用TDI-FP法检测R110或TAMRA标记ddNTP的FP值,鉴定nt1762和nt1764的基因型.结果:20例肝细胞癌组织中经HBV检测试剂盒鉴定后,18例为HBV感染阳性,阳性率为90%.经TDI-FP检测,其中有13例为T1762和A1764双突变型,1例为T1762-A1764/A1762-G1764突变杂合型,4例检测结果为阴性.经测序,阳性结果及突变杂合型与TDI-FP结果完全吻合,阴性结果中2例在nt1762前有8个核苷酸缺失突变,导致突变检测引物无法与模板结合,故产生TDI-FP检测出现假阴性结果.在肝细胞癌组织HBV DNA中,Ti762-A1764突变阳性率为75%,突变杂合型为5%,野生型为10%.结论:在肝细胞癌组织中,HBV感染率非常高,而且其核心启动子区出现nt1762和nt1764双突变率较高,提示双突变与肝细胞癌关系密切;同时本实验所建立的TDI-FP法操作快速简便,可以进行高通量自动化操作,具有进一步推广应用的前景. 展开更多
关键词 tDI-FP法 肝细胞癌 HBV DNA核心启动子 A1762t G1764A 基因突变
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乙型肝炎病毒BCP区A1762T/G1764A和前C区G1896A变异与慢性乙型肝炎疾病进程的关系探讨 被引量:2
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作者 孙狄儿 高国生 +1 位作者 楼柯宏 蔡挺 《中国卫生检验杂志》 CAS 2022年第10期1240-1244,共5页
目的探讨BCP区A1762T/G1764A和前C区G1896A变异与慢性乙型肝炎疾病进程的关系。方法选取本院肝病中心慢性HBV感染患者540例(421例慢性乙型肝炎和119例乙肝肝硬化),所有患者采用基因芯片法检测A1762T/G1764A和G1896A变异,分析变异与慢性... 目的探讨BCP区A1762T/G1764A和前C区G1896A变异与慢性乙型肝炎疾病进程的关系。方法选取本院肝病中心慢性HBV感染患者540例(421例慢性乙型肝炎和119例乙肝肝硬化),所有患者采用基因芯片法检测A1762T/G1764A和G1896A变异,分析变异与慢性乙型肝炎疾病进程的相关性。结果LC患者的A1762T/G1764A变异率高于CHB患者(P<0.05);而G1896A变异率在2组间差异无统计学意义(P>0.05)。HBe Ag/HBe Ab模式与1762/1764变异无关,而HBe Ag(+)患者1896变异率显著降低(χ^(2)=91.255,P<0.001)。不同HBV-DNA复制水平患者的1762/1764、1896变异率差异均无统计学意义(P>0.05)。1762/1764变异者FIB-4显著高于无变异者(P<0.05),1896变异者APRI、FIB-4、S指数均显著高于无变异者(P<0.05)。不同肝纤维化分期(S<2和S≥2)间1762/1764变异率差异无统计学意义(P>0.05),而肝纤维化患者(S≥2)1896变异率显著升高(χ^(2)=7.008,P<0.01)。结论BCP区A1762T/G1764A和前C区G1896A变异影响了慢性乙型肝炎疾病进程,特别是A1762T/G1764A与肝硬化的发生紧密相关,而G1896A变异有可能在疾病的早期阶段发挥作用。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 基因变异 肝纤维化 A1762t/G1764A G1896A
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福州市乙肝病毒基因型和基因亚型的分布及其与前C、C基因启动子变异的关系 被引量:5
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作者 郭燕 郑能雄 +8 位作者 姚栩 纪惠玲 陈智伟 陈艳 徐珊 张彩云 黄晓霞 杨建娜 卢园 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2008年第10期731-734,共4页
目的研究福州市乙肝病毒基因型和亚型分布及其与T1762/A1764、A1896变异的关系,为完善预防、诊断、治疗病毒感染的策略和方法提供科学依据。方法应用型特异性引物PCR法检测HBsAg阳性血清的基因型,应用PCR-RFLP方法检测基因亚型、T1762/A... 目的研究福州市乙肝病毒基因型和亚型分布及其与T1762/A1764、A1896变异的关系,为完善预防、诊断、治疗病毒感染的策略和方法提供科学依据。方法应用型特异性引物PCR法检测HBsAg阳性血清的基因型,应用PCR-RFLP方法检测基因亚型、T1762/A1764变异和A1896变异。结果282份HBsAg阳性血清样品中103份未能成功分型,其余179份样品中B基因型122份(68.2%),C基因型54份(30.2%),B+C型3份(1.7%),未检测到其他基因型。随机选取的100份B基因型样品中,Ba亚型71份(71.0%),Bj亚型8份(8.0%),未能分亚型者21份(21.0%)。54份C基因型样品中Ce亚型31份(57.4%),Cs亚型14份(25.9%),Ce+Cs1份(1.9%),未能分亚型者8份(14.8%)。T1762/A1764变异标本9份(8.7%),Ce亚型变异率最高(29.2%),Ba亚型次之(3.3%),Cs和Bj亚型未检测到变异株,T1762/A1764变异在不同基因型和亚型间的分布差异有统计学意义(P<0.05)。A1896变异标本10份(10.0%),Ba亚型变异率最高(14.0%),Cs亚型次之(10.0%),Ce亚型最低(4.0%),不同基因型和亚型中的变异差异无统计学意义(P>0.05)。HBeAg阳性和阴性样品中的基因型和亚型分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论福州市乙肝病毒以B、C基因型为主,Ba、Ce亚型占优势,HBV各基因型和亚型发生T1762/A1764、A1896变异的模式不同。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 基因型 基因亚型 t1762/a1764变异 A1896变异
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我国常见乙型肝炎病毒基因型与基本核心启动子及前C区突变关系的初步研究 被引量:1
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作者 郭瑜 刘晓燕 +3 位作者 陈斯勇 伊瑶 陈向伟 毕胜利 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期436-439,共4页
收集81份HBV DNA阳性血清标本,经PCR扩增和序列测定确定其中有50份属于基因型C,31份属于基因型B;C基因型的基本核心启动子BCP T1762/A1764的突变率(38%)明显高于B基因型(12.9%,P<0.05);前C区A1896的突变在B、C两基因型间无显著性差... 收集81份HBV DNA阳性血清标本,经PCR扩增和序列测定确定其中有50份属于基因型C,31份属于基因型B;C基因型的基本核心启动子BCP T1762/A1764的突变率(38%)明显高于B基因型(12.9%,P<0.05);前C区A1896的突变在B、C两基因型间无显著性差异,B基因型为9.7%,C基因型为12%,P>0.05;HBeAg的表达与否与BCP双突变或前C区A1896突变均无明显相关性。经定量PCR检测证明,HBeAg阳性组中的HBV DNA含量明显高于抗-HBe阳性组,P<0.05。组内BCP双突变株和野生株及前C1896突变株和野生株的HBV DNA含量无显著性差异。 展开更多
关键词 嗜肝DNA病毒科 乙型肝炎病毒 基因型 BCP t1762/a1764 前C区基因 突变 HBeAg
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乙型肝炎核心启动子BCP的临床观察
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作者 朱静菲 《放射免疫学杂志》 CAS 2006年第2期157-158,共2页
关键词 慢性乙型肝炎 临床观察 BCP区 核心启动子 G1764A A1762t 乙型肝炎患者 基因芯片 变异
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BCP区和前C区突变检测在慢加急性肝衰竭中的临床价值
13
作者 王倩倩 胡耀仁 高国生 《中国现代医生》 2022年第22期10-14,共5页
目的探讨检测乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure,ACLF)患者基本核心启动子区(basic core promoter,BCP)A1762T/G1764A和前C区G1896A突变的临床价值。方法选取2010年9月至2020年10... 目的探讨检测乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure,ACLF)患者基本核心启动子区(basic core promoter,BCP)A1762T/G1764A和前C区G1896A突变的临床价值。方法选取2010年9月至2020年10月中国科学院大学宁波华美医院收治的403例慢性HBV感染患者,根据患者是否发生ACLF将其分为慢性乙型肝炎(chronic hepititis B,CHB)组(369例)和ACLF组(34例),并根据预后将ACLF组患者再分为缓解组和恶化组。采用多因素Logistic回归分析筛选发生ACLF的独立影响因素,并构建联合预测模型。绘制受试者操作特征曲线以评价该模型的诊断价值。结果ACLF组患者的年龄、总胆红素(total bilirubin,TBiL)、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、甲胎蛋白、凝血酶原时间均显著高于CHB组(P<0.05),乙型肝炎e抗原阳性率、白蛋白(albumin,ALB)均显著低于CHB组(P<0.05)。ACLF组和CHB组患者A1762T/G1764A突变率比较差异无统计学意义(P>0.05),ACLF组患者G1896A突变率显著高于CHB患者(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄、TBiL、ALB、G1896A突变均是发生ACLF的独立影响因素(P<0.05)。以上4项指标联合诊断ACLF的曲线下面积为0.950,敏感度和特异性分别为88.24%和93.22%;缓解组和恶化组患者的A1762T/G1764A、G1896A突变率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论HBV相关ACLF患者的前C区G1896A突变率显著增高是ACLF发病的独立危险因素,而BCP区A1762T/G1764A突变与ACLF发病的关系可能并不紧密。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 慢加急性肝衰竭 基因突变 A1762t/G1764A G1896A
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乙型肝炎
14
《传染病网络动态》 2007年第2期94-115,共22页
HBeAg阴性慢型乙型肝炎的临床分析及其与基因变异的关系——高玉金等(江苏徐州市传染病医院、徐州市肝病研究所221004);《临床消化病杂志》,2006,18(3):151-152[目的:探讨HBeAg阴性慢性乙型肝炎(以下简称e^-CHB)的临床特点... HBeAg阴性慢型乙型肝炎的临床分析及其与基因变异的关系——高玉金等(江苏徐州市传染病医院、徐州市肝病研究所221004);《临床消化病杂志》,2006,18(3):151-152[目的:探讨HBeAg阴性慢性乙型肝炎(以下简称e^-CHB)的临床特点及与前C区G1896A变异及基本核心启动子(BCP)区A1762T/G1764A双变异的关系。方法:采用实时荧光定量PCR法检测HBV DNA,采用时间分辨荧光免疫分析法定量检测乙型肝炎病毒标志物,采用基因芯片检测基因变异。 展开更多
关键词 慢型乙型肝炎 HBEAG阴性 乙型肝炎病毒标志物 基本核心启动子 荧光免疫分析法 基因变异 G1764A A1762t
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野生型及突变型乙型肝炎病毒X基因在pGEX-6P-2系统中的克隆、表达、纯化及免疫鉴定 被引量:5
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作者 张晓慧 王昌源 +5 位作者 谭炳芹 李程 杜磊 王永康 张洪花 董格峰 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期427-432,共6页
构建野生型和A1762T/G1764A双突变型乙型肝炎病毒(HBV)X基因原核表达系统,为深入研究HBV X基因及其双突变后对HBV慢性感染者病情发展和肿瘤发生的作用奠定基础。从慢性乙型肝炎患者血清中抽提HBV基因组DNA,经PCR扩增和基因测序,证实并... 构建野生型和A1762T/G1764A双突变型乙型肝炎病毒(HBV)X基因原核表达系统,为深入研究HBV X基因及其双突变后对HBV慢性感染者病情发展和肿瘤发生的作用奠定基础。从慢性乙型肝炎患者血清中抽提HBV基因组DNA,经PCR扩增和基因测序,证实并获得野生型及A1762T∕G1764A双突变型HBV X基因。应用TA克隆及亚克隆技术将2基因分别插入pGEX-6P-2载体,构建pGEX-6P-2-hbvxw(野生型)及pGEX-6P-2-hb-vxm(A1762T∕G1764A突变型)重组表达载体;转化入宿主菌进行诱导表达;包涵体复性后,GSTrap FF蛋白纯化柱纯化带有GST标签的野生型和A1762T∕G1764A突变型HBV x抗原(HBxAg);应用SDS-PAGE、Westernblot和ELISA方法对表达的野生型和突变型HBxAg进行鉴定。结果SDS-PAGE证实本研究构建的2个表达系统均能高效表达目的蛋白;复性、纯化后野生型和突变型GST-HBxAg分别达到4.88mg/mL和5.07mg/mL;Western blot鉴定证实所纯化的野生型和突变型HBxAg均能被特异性的单克隆抗体所识别;ELISA方法检测显示2种抗原都能成功包被于微量滴定板上并与乙肝患者血清反应。证实本研究成功地构建了野生型和A1762T∕G1764A突变型HBxAg表达系统,为进一步研究A1762T∕G1764A基因突变对肿瘤发生学和慢性HBV感染者疾病进展的作用和分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 乙肝病毒x抗原 野生型 A1762t/G1764A突变型 融合表达 纯化 免疫鉴定
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乙型肝炎病毒基因组C区启动子突变位点新型检测方法的建立、验证及初步应用 被引量:5
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作者 程鹏飞 刘绪 +2 位作者 余敏 冯杨 唐景峰 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第10期1313-1320,共8页
目的 利用错配扩增和荧光PCR技术,建立一种针对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)基因组C区启动子(basal core promoter,BCP)1762/1764突变位点的新型检测方法,并对该方法进行验证及临床评价。方法 根据NCBI登录的HBV A-H型基因... 目的 利用错配扩增和荧光PCR技术,建立一种针对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)基因组C区启动子(basal core promoter,BCP)1762/1764突变位点的新型检测方法,并对该方法进行验证及临床评价。方法 根据NCBI登录的HBV A-H型基因序列(以GenBank号为AB033556.1的C基因型作为标准参考序列)合成野生型和突变型标准品序列,测序后连接至pMD-18T载体上,构建质粒标准品,设计引物、探针及合适的突变检测体系,确定检测的线性范围;对建立的方法进行灵敏度、重复性、特异性、稳定性验证;分别用本实验建立的ARMS-PCR法和基因Sanger测序法(金标准)检测132份慢性乙型肝炎患者血液样本的基因位点是否发生突变,并分析ARMS-PCR法的灵敏度和特异度。结果ARMS-PCR法能检测1 × 10^2- 1 × 10^9 copies/ml的野生型和突变型质粒;野生型和突变型样本检测的Ct差值(驻Ct)在7以上,且能检出最低达1%突变含量的混合质粒和样本;该方法灵敏度较高,重复性、特异性、稳定性良好;其检测132份慢性乙型肝炎患者血液样本1762/1764位点突变阳性率为41.7%,明显高于Sanger测序法检测结果(P〈0.05)。结论 建立的ARMS-PCR法能很好地用于评估乙肝患者患肝癌的风险,且较Sanger测序法检测精度更高,更适合于临床推广。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 肝癌 基因组C区启动子 1762/1764突变 扩增阻碍突变系统 聚合酶链反应
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HBsAg阳性母亲HBV核心启动子突变与宫内传播的关系 被引量:5
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作者 武佳欣 杨志清 +7 位作者 张睿君 李雁笛 赵甜静 扆琳珠 冯永亮 丰淑英 汪波 王素萍 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期902-907,共6页
目的分析HBV为C基因型的HBsAg阳性母亲核心启动子(BCP)区突变与宫内传播的关系。方法2011年6月至2013年7月太原市第三人民医院妇产科HBsAg阳性母亲及新生儿399对。收集一般人口学资料,采用荧光定量PCR和电化学发光法分别检测母婴血清HBV... 目的分析HBV为C基因型的HBsAg阳性母亲核心启动子(BCP)区突变与宫内传播的关系。方法2011年6月至2013年7月太原市第三人民医院妇产科HBsAg阳性母亲及新生儿399对。收集一般人口学资料,采用荧光定量PCR和电化学发光法分别检测母婴血清HBV DNA及HBV血清学标志物。选择HBV DNA载量≥106 IU/ml的113例母亲为研究对象,其新生儿发生宫内传播的22例为宫内传播组,随机选取其中22例未发生宫内传播者作为对照组,母亲HBV DNA经提取、扩增、克隆、测序和序列编辑及剪接后与从NCBI下载的标准序列比对进行基因分型,最终选择C基因型的39例母亲进行突变分析。结果HBV为C基因型(88.63%)的母亲共39例,其中宫内传播组19例,对照组20例。母亲A1762T/G1764A双突变率在两组差异显著(7.53%vs.27.72%,P<0.001)。非条件logistic回归分析显示A1762T/G1764A双突变可能是宫内传播的保护因素(aOR=0.065,95%CI:0.006~0.746,P=0.028)。母亲A1762T/G1764A双突变可能与新生儿HBeAg水平有关(P=0.050)。结论HBV C基因型的HBsAg阳性母亲HBV DNA BCP区A1762T/G1764A双突变可能降低HBV宫内传播的风险。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒宫内传播 核心启动子 HBs抗原 HBe抗原 A1762t/G1764A
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HBV基本核心启动子区和前C区变异与肝病进展的关系 被引量:2
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作者 徐尧江 宋伟泉 《中华临床感染病杂志》 CAS 2012年第4期253-256,共4页
乙型肝炎病毒(HBV)感染是我国严重的卫生健康问题,目前大约有1.7亿慢性HBV感染者,约占世界慢性HBV感染者的一半。HBV基因组结构为部分环状双链DNA,全长约3.2kb,其核心启动子对于HBV的复制和形态构成发挥了关键性作用。
关键词 肝炎 乙型 基因 突变 基本核心启动子 前C区 A1762t/G1764A变异 G1896A变异疾病进展
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