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瑞香素调节STING/TBK1/IRF3信号通路对脓毒症大鼠免疫炎症反应的影响
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作者 温亚 李燕 +3 位作者 白思怡 陈凯林 成丽英 李亚冬 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期822-827,共6页
目的探究瑞香素调节STING/TBK1/IRF3信号通路对脓毒症大鼠免疫炎症反应的影响。方法选用80只雄性Sprague Dawley(SD)大鼠,将大鼠随机分为4组,假手术组20只;其余60只按照盲肠结扎穿刺法(CLP)构建脓毒症小鼠模型,腹腔注射不同剂量瑞香素,... 目的探究瑞香素调节STING/TBK1/IRF3信号通路对脓毒症大鼠免疫炎症反应的影响。方法选用80只雄性Sprague Dawley(SD)大鼠,将大鼠随机分为4组,假手术组20只;其余60只按照盲肠结扎穿刺法(CLP)构建脓毒症小鼠模型,腹腔注射不同剂量瑞香素,分为无瑞香素模型组(0 mg/kg)、低剂量组(2.5 mg/kg)、高剂量组(5 mg/kg),每组20只;模型组及假手术组腹腔注射等量0.1%DMSO。观察CLP建模后的各组大鼠存活率。收集肺、肾、肝和脾组织进行病理组织学分析。ELISA检测大鼠血清炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β),流式细胞术检测外周血中的T淋巴细胞亚群,Western blotting检测STING/TBK1/IRF3信号通路蛋白表达变化。结果与假手术组相比,模型组大鼠生存率降低(P<0.05),各个脏器组织损伤明显,血清炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)水平上升(P<0.05),外周血CD4^(+)比例、CD4^(+)/CD8^(+)比值均降低(P<0.05),CD8^(+)比例、Th1/Th2比值均升高(P<0.05),STING、p-TBK1/TBK1、p-IRF3/IRF3蛋白表达均下调(P<0.05)。与模型组相比,瑞香素高剂量组提高了大鼠生存率(P<0.05),各脏器组织损伤明显减轻,血清炎症因子水平降低(P<0.05),外周血CD4^(+)比例、CD4^(+)/CD8^(+)比值升高(P<0.05),CD8^(+)比例、Th1/Th2比值降低(P<0.05),STING、p-TBK1/TBK1、p-IRF3/IRF3蛋白表达升高(P<0.05)。结论瑞香素可通过调节STING/TBK1/IRF3信号通路,改善脓毒症大鼠免疫炎症反应。 展开更多
关键词 瑞香素 脓毒症 盲肠结扎穿刺(CLP) STING/tbk1/IRF3信号通路 免疫调节 炎症
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日本鳗鲡TBK-1基因的克隆及免疫刺激的表达模式
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作者 赵歌洁 黄贝 黄文树 《集美大学学报(自然科学版)》 CAS 2024年第1期1-9,共9页
利用PCR技术克隆了日本鳗鲡(Anguilla japonica)TBK-1基因(AjTBK-1),其开放阅读框为2193 bp,编码731个氨基酸。序列结构分析结果显示,AjTBK-1含有4个保守结构域,分别为氨基端激酶结构域,泛素样结构域和羧基端两个卷曲-螺旋结构域。系统... 利用PCR技术克隆了日本鳗鲡(Anguilla japonica)TBK-1基因(AjTBK-1),其开放阅读框为2193 bp,编码731个氨基酸。序列结构分析结果显示,AjTBK-1含有4个保守结构域,分别为氨基端激酶结构域,泛素样结构域和羧基端两个卷曲-螺旋结构域。系统发育分析表明,鱼类与四足类的TBK-1各自聚为一枝。实时定量PCR(qPCR)结果显示,AjTBK-1在日本鳗鲡各组织中均有表达。Poly I:C刺激6 h后,日本鳗鲡脾脏组织中AjTBK-1的上调倍数最高,为对照组的1.63倍;迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)感染24 h后,日本鳗鲡肝脏组织中AjTBK-1的上调倍数最高,为对照组的2.2倍:表明AjTBK-1参与了日本鳗鲡抗病毒、抗细菌免疫反应应答。 展开更多
关键词 日本鳗鲡 tbk-1基因 序列分析 转录表达
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TBK1对NLRC4炎症小体的作用及其机制研究
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作者 曾强 张在奎 +1 位作者 孙乃双 陈允梓 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第5期595-603,614,共10页
目的:探究TANK结合激酶1(TANK-binding kinase 1,TBK1)调控核苷结合寡聚化结构域样受体4(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor 4,NLRC4)炎症小体激活的作用及其机制。方法:在鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimuriu... 目的:探究TANK结合激酶1(TANK-binding kinase 1,TBK1)调控核苷结合寡聚化结构域样受体4(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor 4,NLRC4)炎症小体激活的作用及其机制。方法:在鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium,S.T)感染的永生化骨髓巨噬细胞(immortalized bone marrow derived macrophage,IBMDM)中,Western blot检测NLRC4炎症小体激活及其下游分子半胱天冬蛋白酶1(cysteine aspartic acid specific protease 1,Caspase-1)和Gasdermin D(GSDMD)的剪切情况;乳酸脱氢酶检测试剂盒检测细胞培养基上清中乳酸脱氢酶的含量;蛋白质免疫共沉淀实验确定TBK1与NLRC4的相互作用及其具体结构域;细胞免疫荧光实验确定TBK1与NLRC4的空间定位;GST pull-down实验确定TBK1与NLRC4是否存在直接相互作用;凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)寡聚化检测实验验证NLRC4炎症小体组装。构建S.T感染C57BL/6小鼠动物模型,观察小鼠生存情况。涂板计数腹腔灌洗液和肺的细菌负荷量;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测腹腔灌洗液及血清中的肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和白细胞介素(interleukin,IL)-1β的含量;流式细胞术检测腹腔灌洗液中的中性粒细胞比例。结果:在S.T感染的IBMDM中,抑制TBK1可减弱NLRC4炎症小体激活,NLRC4磷酸化水平下降,Caspase-1与GSDMD的剪切减少;TBK1与NLRC4存在相互作用,TBK1的N端与NLRC4的NACHT结构域相互作用;TBK1与NLRC4存在空间上的共定位;TBK1可以磷酸化NLRC4的Ser533位点。S.T动物模型实验显示,抑制TBK1活性可以显著提高小鼠的生存率;减低小鼠腹腔灌洗液和肺中的细菌负荷量;降低血清以及腹腔灌洗液中的IL-1β、TNF-α的表达水平;减少腹腔灌洗液中的中性粒细胞比例。结论:TBK1与NLRC4相互作用,磷酸化NLRC4 Ser533位点,促进NLRC4炎症小体的激活,为治疗相关疾病提供理论依据和新的潜在靶点。 展开更多
关键词 NLRC4炎症小体 tbk1 鼠伤寒沙门氏菌
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日本鳗鲡TBK1基因的克隆与免疫功能分析
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作者 徐元凯 彭欣慰 +2 位作者 林鹏 王艺磊 冯建军 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期157-173,共17页
为了阐明鱼类TANK结合激酶1(TBK1)在免疫应答密切相关的NF-κB、I型IFN及MAPK信号通路中的调控作用,本实验通过cDNA末端快速扩增技术(SMART RACE)从日本鳗鲡中克隆了TBK1基因cDNA全长序列,命名为AjTBK1,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检... 为了阐明鱼类TANK结合激酶1(TBK1)在免疫应答密切相关的NF-κB、I型IFN及MAPK信号通路中的调控作用,本实验通过cDNA末端快速扩增技术(SMART RACE)从日本鳗鲡中克隆了TBK1基因cDNA全长序列,命名为AjTBK1,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测了在体和离体状态下不同病原体相关分子模式(PAMPs)及嗜水气单胞菌对日本鳗鲡AjTBK1基因表达水平变化的影响,通过构建绿色荧光蛋白pEGFP-TBK1和pCMV-TBK1真核表达质粒对AjTBK1亚细胞定位以及AjTBK1过表达对NF-κB、AP-1、IFN-β启动子荧光素酶活性的激活作用进行研究。蛋白质序列分析显示,日本鳗鲡AjTBK1编码731个氨基酸,其三维丝带空间结构与人类TBK1相似,具有保守的激酶结构域(KD)、泛素样结构域(ULD)、二聚化支架结构域(SDD)以及C端结构域(CTD),在系统发育树中与其他鱼类TBK1家族聚为一支。qRT-PCR检测发现AjTBK1在多种组织中广泛表达,且在肝脏和肠中高表达。经LPS、poly I:C、嗜水气单胞菌免疫注射后,AjTBK1基因表达水平在日本鳗鲡肝脏中显著提高,而肾脏中的表达量则在LPS和poly I:C刺激后显著降低。离体实验中,经LPS、poly I:C、PGN以及不同浓度嗜水气单胞菌刺激后的日本鳗鲡肝脏细胞AjTBK1基因表达水平均有显著升高。亚细胞定位结果显示,天然状态下的AjTBK1在HEK293细胞质中分布,经LPS和poly I:C刺激后呈聚集点状分布。此外,双荧光素酶活性检测发现过表达的AjTBK1可显著增强NF-κB、AP-1和IFN-β启动子荧光素酶活性。以上研究表明,AjTBK1可以通过激活NF-κB、AP-1和I型IFN信号通路,在机体抗细菌和抗病毒先天免疫应答中发挥重要的调控作用。 展开更多
关键词 日本鳗鲡 TANK结合激酶1(tbk1) 信号通路 亚细胞定位 双荧光素酶活性
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慢性应激小鼠脑内STING-TBK1-IRF3通路相关蛋白的表达及意义
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作者 孙健屿 王粤 +1 位作者 王强 翟茜 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期208-213,共6页
目的探索慢性应激小鼠脑内干扰素刺激因子(stimulator of interferon gene,STING)-TANK结合激酶1(TANK-binding kinase 1,TBK1)-干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3,IRF3)信号通路相关蛋白的表达变化及意义。方法将小鼠分... 目的探索慢性应激小鼠脑内干扰素刺激因子(stimulator of interferon gene,STING)-TANK结合激酶1(TANK-binding kinase 1,TBK1)-干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3,IRF3)信号通路相关蛋白的表达变化及意义。方法将小鼠分为对照(control,CON)组与束缚应激(chronic restraint stress,RST)组,RST组小鼠给予慢性束缚应激刺激(每天6 h,共14 d)后,采用q RT-PCR、组织免疫荧光共标染色与Western blotting方法检测两组小鼠脑内促炎因子CCL2、CXCL10、IL-1β、IL-6、IL-10、TNFαm RNA与STING、TBK1、p-TBK1、IRF3、p-IRF3的蛋白表达变化。结果q RT-PCR实验结果显示,与CON组相比,RST组小鼠脑内促炎因子m RNA表达显著升高(P均<0.05);组织免疫荧光共标染色实验结果显示,STING与小胶质细胞标记物Iba-1高度共标,RST组小鼠脑内STING表达降低;Western blotting结果显示,STING、p-TBK1、p-IRF3蛋白表达均显著降低(P均<0.01)。结论慢性束缚应激小鼠脑内存在神经炎症反应,STING-TBK1-IRF3通路被显著抑制。 展开更多
关键词 慢性束缚应激 干扰素刺激因子(STING) TANK结合激酶1(tbk1) 干扰素调节因子3(IRF3) 神经炎症
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STING/TBK1/NF-κB信号通路调节PD-1/PD-L1对肺癌细胞免疫逃逸的影响
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作者 史春辉 吴超 蔺建平 《河北医药》 CAS 2023年第5期651-656,共6页
目的探讨干扰素基因刺激因子(STING)/TANK结合激酶1(TBK1)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路调节程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)/程序性死亡配体-1(PD-L1)对肺癌细胞免疫逃逸的影响。方法分离培养小鼠脾脏淋巴细胞,以1∶1的比例与小鼠Lewis... 目的探讨干扰素基因刺激因子(STING)/TANK结合激酶1(TBK1)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路调节程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)/程序性死亡配体-1(PD-L1)对肺癌细胞免疫逃逸的影响。方法分离培养小鼠脾脏淋巴细胞,以1∶1的比例与小鼠Lewis肺癌细胞共培养,随机分为对照组、diABZI(STING激活剂)组、BMS-1(PD-1/PD-L1信号抑制剂)组、diABZI+BMS-1组,以diABZI和BMS-1分组处理24 h,流式细胞仪检测脾脏淋巴细胞中活化CD_(8)^(+)T细胞比例;CCK-8实验检测脾脏淋巴细胞对Lewis细胞杀伤率;免疫印迹实验检测脾脏淋巴细胞和Lewis细胞PD-1、PD-L1和STING/TBK1/NF-κB通路蛋白表达。皮下注射Lewis细胞构建肺癌移植瘤小鼠模型48只,随机分为对照组、diABZI组、BMS-1组、diABZI+BMS-1组,每组12只,以diABZI和BMS-1分组处理后,测量小鼠肿瘤体积;检测肿瘤组织中浸润的CD_(8)^(+)T细胞数;免疫印迹实验检测肿瘤组织PD-1、PD-L1和STING/TBK1/NF-κB通路蛋白表达。结果与对照组比较,diABZI组、BMS-1组、diABZI+BMS-1组小鼠脾脏淋巴细胞中活化CD_(8)^(+)T细胞比例、脾脏淋巴细胞对Lewis细胞杀伤率、肿瘤组织中浸润的CD_(8)^(+)T细胞数均升高(P<0.05),小鼠肿瘤体积均降低(P<0.05);与diABZI组、BMS-1组比较,diABZI+BMS-1组小鼠脾脏淋巴细胞中活化CD_(8)^(+)T细胞比例、脾脏淋巴细胞对Lewis细胞杀伤率、肿瘤组织中浸润的CD_(8)^(+)T细胞数均升高(P<0.05),小鼠肿瘤体积均降低(P<0.05)。与对照组比较,diABZI组细胞和肿瘤组织PD-1、PD-L1、STING、TBK1蛋白表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65均升高(P<0.05),BMS-1组细胞和肿瘤组织PD-1、PD-L1蛋白表达均降低(P<0.05),diABZI+BMS-1组细胞和肿瘤组织p-NF-κB p65/NF-κB p65及STING、TBK1蛋白表达均升高(P<0.05),PD-1、PD-L1蛋白表达均降低(P<0.05);与diABZI组、BMS-1组分别比较,diABZI+BMS-1组细胞和肿瘤组织PD-1、PD-L1蛋白表达均降低(P<0.05)。结论激活STING/TBK1/NF-κB和阻断PD-1/PD-L1信号均可促进脾脏淋巴细胞中CD_(8)^(+)T细胞活化及对肿瘤组织的浸润,提高其对肺癌细胞的杀伤力,减轻肺癌细胞的免疫逃逸,而激活STING可增加PD-1和PD-L1表达,并增强PD-1/PD-L1抑制剂的抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 STING/tbk1/NF-κB PD-1/PD-L1 肺癌 免疫逃逸
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火炭母通过调控TLR4-TBK1信号通路改善鼠伤寒沙门菌感染小鼠空肠的炎症反应
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作者 张易安 郭琰娜 +5 位作者 刘妍 刘涵笑 沈幸玲 刘逸雷 唐陆平 何永明 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第11期132-139,共8页
为了探讨火炭母对鼠伤寒沙门菌感染小鼠空肠的免疫保护作用及其潜在机制。本试验将48只雌性BALB/c小鼠随机分为6个组:空白对照组、模型组、阳性药物组和火炭母高、中、低剂量组,每组8只。阳性药物组小鼠灌胃庆大霉素[20 mg/(kg·bw... 为了探讨火炭母对鼠伤寒沙门菌感染小鼠空肠的免疫保护作用及其潜在机制。本试验将48只雌性BALB/c小鼠随机分为6个组:空白对照组、模型组、阳性药物组和火炭母高、中、低剂量组,每组8只。阳性药物组小鼠灌胃庆大霉素[20 mg/(kg·bw)],火炭母高、中、低剂量组小鼠分别按16、8和4 g/(kg·bw)剂量灌胃火炭母,空白对照组和模型组小鼠给予等体积的灭菌生理盐水,共连续给药8 d。预防性给药2 d后,每只小鼠(空白对照组除外)灌胃0.2 mL半数致死量(LD 50)鼠伤寒沙门菌(5×10^(4) CFU/mL)致病。给药结束后,处死小鼠取空肠用于组织病理学检查和Western blot。结果显示,鼠伤寒沙门菌感染后,小鼠空肠杯状细胞和肠腺红细胞增多、肠绒毛结构松散,火炭母各剂量组小鼠空肠杯状细胞和肠腺红细胞明显减少,火炭母减轻了小鼠空肠组织损伤。Western blot结果显示,与空白对照组相比,模型组小鼠空肠中免疫因子β干扰素(IFN-β)蛋白表达显著上升(P<0.05),γ干扰素(IFN-γ)蛋白表达显著下降(P<0.05),干扰素调节因子3(IRF3)、磷酸化TANK结合激酶1(p-TBK1)和Toll样受体4(TLR4)蛋白表达显著上调(P<0.05),炎性因子白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)和核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达显著上升(P<0.05);与模型组相比,不同剂量火炭母可以不同程度降低炎症因子IL-6(P<0.05或P>0.05)、IL-1β(P<0.05)和NF-κB p65(P<0.05)蛋白表达,显著提高TLR4、β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)蛋白的表达和TANK结合激酶1(TBK1)蛋白表达及其磷酸化水平(P<0.05),提高下游信号IRF3蛋白的表达(P<0.05)及其磷酸化水平(P<0.05或P>0.05),进而提高空肠中IFN-β(P<0.05或P>0.05)和IFN-γ(P<0.05)蛋白的表达。结果表明,火炭母通过调控TLR4-TBK1信号通路改善鼠伤寒沙门菌感染小鼠空肠的炎症反应。 展开更多
关键词 火炭母 鼠伤寒沙门菌 空肠 Toll样受体4(TLR4) TANK结合激酶1(tbk1)
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Inosine:A broad-spectrum anti-inflammatory against SARS-CoV-2 infection-induced acute lung injury via suppressing TBK1 phosphorylation
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作者 Ningning Wang Entao Li +9 位作者 Huifang Deng Lanxin Yue Lei Zhou Rina Su Baokun He Chengcai Lai Gaofu Li Yuwei Gao Wei Zhou Yue Gao 《Journal of Pharmaceutical Analysis》 SCIE CAS CSCD 2023年第1期11-23,共13页
Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2(SARS-CoV-2)-induced cytokine storms constitute the primary cause of coronavirus disease 19(COVID-19)progression,severity,criticality,and death.Glucocorticoid and anti-cy... Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2(SARS-CoV-2)-induced cytokine storms constitute the primary cause of coronavirus disease 19(COVID-19)progression,severity,criticality,and death.Glucocorticoid and anti-cytokine therapies are frequently administered to treat COVID-19,but have limited clinical efficacy in severe and critical cases.Nevertheless,the weaknesses of these treatment modalities have prompted the development of anti-inflammatory therapy against this infection.We found that the broad-spectrum anti-inflammatory agent inosine downregulated proinflammatory interleukin(IL)-6,upregulated anti-inflammatory IL-10,and ameliorated acute inflammatory lung injury caused by multiple infectious agents.Inosine significantly improved survival in mice infected with SARS-CoV-2.It indirectly impeded TANK-binding kinase 1(TBK1)phosphorylation by binding stimulator of interferon genes(STING)and glycogen synthase kinase-3β(GSK3β),inhibited the activation and nuclear translocation of the downstream transcription factors interferon regulatory factor(IRF3)and nuclear factor kappa B(NF-κB),and downregulated IL-6 in the sera and lung tissues of mice infected with lipopolysaccharide(LPS),H1N1,or SARS-CoV-2.Thus,inosine administration is feasible for clinical anti-inflammatory therapy against severe and critical COVID-19.Moreover,targeting TBK1 is a promising strategy for inhibiting cytokine storms and mitigating acute inflammatory lung injury induced by SARS-CoV-2 and other infectious agents. 展开更多
关键词 CYTOKINE stormInterleukin 6 (IL-6)InosineSARS-CoV-2TANK-binding kinase 1 (tbk1)
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酸化解卡方法解除伊朗TBK-8井卡钻事故 被引量:11
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作者 刘德胜 胡欣峰 +2 位作者 王文勇 李亚强 石璟玲 《钻井液与完井液》 CAS 北大核心 2006年第6期77-78,88,共3页
伊朗19+2项目TBK-8井在二开空气钻进过程中,由于水层和强水敏性页岩地层在同一井段相遇,使页岩钻屑在雾化环境下粘结成团,无法带出,瞬间沉积在钻头上,形成一个环状堆积。当试图通过活动解卡时,堆积物越挤越死,形成一个圆柱,卡死钻具。... 伊朗19+2项目TBK-8井在二开空气钻进过程中,由于水层和强水敏性页岩地层在同一井段相遇,使页岩钻屑在雾化环境下粘结成团,无法带出,瞬间沉积在钻头上,形成一个环状堆积。当试图通过活动解卡时,堆积物越挤越死,形成一个圆柱,卡死钻具。现场先后采用了浸泡柴油和解卡剂的解卡措施,都没有取得效果。当发现卡钻位置在灰岩地层时,仅注入15%的盐酸5.5m3,就顺利解卡。因此,对于粘附卡钻以外的卡钻事故,当卡钻位置在碳酸盐岩井段,且酸液能注到卡点以下时,可采用酸化方法解卡。 展开更多
关键词 卡钻 解卡 酸化 解卡剂 伊朗tbk-8井
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伊朗TBK气田严重漏失与严重坍塌地层钻井液技术 被引量:6
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作者 刘德胜 陈星元 +1 位作者 陈光 王奎才 《钻井液与完井液》 CAS 北大核心 2003年第2期1-3,共3页
TABNAK气田是伊朗南部位于波斯湾近海岸的一个出露背斜,地层岩性主要是碳酸盐岩和页岩。该气田地层裂缝发育,钻井过程中井漏和井塌问题非常严重,钻井作业十分困难。一开采用微泡沫钻井粗泡沫堵漏工艺;二开采用稳定泡沫钻井液;三开采用... TABNAK气田是伊朗南部位于波斯湾近海岸的一个出露背斜,地层岩性主要是碳酸盐岩和页岩。该气田地层裂缝发育,钻井过程中井漏和井塌问题非常严重,钻井作业十分困难。一开采用微泡沫钻井粗泡沫堵漏工艺;二开采用稳定泡沫钻井液;三开采用聚磺钻井液;四开采用硬胶泡沫钻井液;五开和六开采用随钻堵漏技术与低密度水包油钻井液相结合的方法,钻井过程中防漏堵漏效果好。现场应用表明,该套钻井液体系密度低,防漏、防塌效果好,抗盐、抗钙和携砂能力强,机械钻速快,钻井施工顺利,成本低,基本解决了TBK气田表层钻井和固井漏失问题。据TBK-2井、TBK-3井和TBK-6井完井统计,实际钻井液材料费用比预算分别降低了67.4%、81.0%和76.3%。 展开更多
关键词 低密度钻井液 泡沫钻井液 井眼稳定 井涌井眼清洁 抗盐 tbk气田 伊朗 漏失 坍塌 地层 钻井液技术
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空气钻井技术在伊朗项目TBK油田的应用 被引量:6
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作者 王立超 范光永 张秋菊 《西部探矿工程》 CAS 2004年第11期83-84,共2页
科学技术是第一生产力 ,钻井技术发展的兴衰 ,直接关系到企业的生存、发展质量。如何使我们在激烈的竞争中立于不败之地 ,在甲方树立良好的形象 ,更多的占领钻井市场份额 ,获得更好的效益。只有依靠科技优势 ,依靠技术进步来提高钻井速... 科学技术是第一生产力 ,钻井技术发展的兴衰 ,直接关系到企业的生存、发展质量。如何使我们在激烈的竞争中立于不败之地 ,在甲方树立良好的形象 ,更多的占领钻井市场份额 ,获得更好的效益。只有依靠科技优势 ,依靠技术进步来提高钻井速度 ,创造最大化利润 ,这是企业生存、发展的必然选择。伊朗项目在TBK油田 ,引进的世界领先的空气钻井技术的应用 ,取得了可喜的成绩 ,这充分说明了钻井速度的提高。 展开更多
关键词 空气泡沫钻井 tbk气田 井身结构 钻井液
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草鱼TBK1基因荧光定量PCR检测方法的建立
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作者 张林 张浪 +3 位作者 周剑光 甘金华 张涛 何力 《中国渔业质量与标准》 2022年第6期9-14,共6页
TANK结合激酶1(TANK-binding kinase 1,TBK1)基因在天然抗菌免疫中发挥重要作用,为研究该基因在草鱼(Ctenopharyngodon idella)抗病天然免疫中的表达水平,本研究根据已报道的草鱼TBK1基因(ciTBK1)序列,设计特异性引物2对,基于ciTBK1和18... TANK结合激酶1(TANK-binding kinase 1,TBK1)基因在天然抗菌免疫中发挥重要作用,为研究该基因在草鱼(Ctenopharyngodon idella)抗病天然免疫中的表达水平,本研究根据已报道的草鱼TBK1基因(ciTBK1)序列,设计特异性引物2对,基于ciTBK1和18S rRNA双标准曲线建立了荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)检测方法。结果表明,建立的标准曲线Ct(Cycle thrshold)值与模板浓度的对数呈现良好的线性关系(R^(2)均大于0.99),建立的qRT-PCR检测方法能特异地定量检测ciTBK1基因,检测灵敏度可达50拷贝/μL,且组内及组间变异系数均小于5%。所建立的qRT-PCR检测方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性。 展开更多
关键词 草鱼 tbk1基因 18S rRNA基因 荧光定量PCR 双标准曲线
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LPS和嗜水气单胞菌胁迫下东北林蛙不同组织内TBK1转录产物表达动态的研究 被引量:4
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作者 曲俐俐 柴龙会 +2 位作者 王伯驹 许晴 肖向红 《野生动物学报》 北大核心 2019年第1期142-146,共5页
TBK1是IKKs蛋白激酶家族中的一员,也是免疫应答的重要调节因子之一,在Toll样受体通路等多条信号通路中均能发挥作用。Toll受体作为先天免疫中最为重要的一类模式识别受体,能够特异性地识别病原微生物的保守结构。为了探究东北林蛙在LPS... TBK1是IKKs蛋白激酶家族中的一员,也是免疫应答的重要调节因子之一,在Toll样受体通路等多条信号通路中均能发挥作用。Toll受体作为先天免疫中最为重要的一类模式识别受体,能够特异性地识别病原微生物的保守结构。为了探究东北林蛙在LPS和嗜水气单胞菌刺激下TBK1表达量变化的规律,本研究运用荧光定量PCR检测东北林蛙在嗜水气单胞菌和LPS两种不同的刺激源刺激下肾脏、肺脏、脾脏和肝脏中TBK1的表达水平。结果表明:在嗜水气单胞菌和LPS处理下,肾脏、肺脏、脾脏和肝脏中的TBK1表达量变化显著(P <0. 01),但在不同组织中,LPS和嗜水气单胞菌刺激下TBK1的表达量变化趋势并不完全一致。推测在不同的组织中不同的刺激源产生免疫应答的时间不尽相同。和不同物种的实验数据对比分析,发现各物种TBK1分子的表达量变化关系的规律不显著,推测在不同物种的不同器官中,受到外源微生物侵染时会有选择的激活不同的信号转导通路完成免疫应答。 展开更多
关键词 东北林蛙 嗜水气单胞菌 LPS tbk1
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IKKε/TBK1信号通路调控与致癌作用的研究进展 被引量:2
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作者 唐人民 李俊明 邹秀兰 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第23期6918-6921,共4页
IKKε和TBK1是2个IκB激酶(IKK)相关激酶,他们之间形成异源二聚体,共同参与调控干扰素调节因子(IRF)与核因子(NF)-κB的信号级联,从而调控天然免疫和炎症代谢疾病,甚至肿瘤的形成。IKKε和TBK1在NF-κB信号通路活化过程中与经典的IKK(IK... IKKε和TBK1是2个IκB激酶(IKK)相关激酶,他们之间形成异源二聚体,共同参与调控干扰素调节因子(IRF)与核因子(NF)-κB的信号级联,从而调控天然免疫和炎症代谢疾病,甚至肿瘤的形成。IKKε和TBK1在NF-κB信号通路活化过程中与经典的IKK(IKKα、IKKβ)都具有磷酸化靶点的作用,所以国外学者多把IKKε和TBK1称为NF-κB的额外活化激酶, 展开更多
关键词 IKKε tbk1 核因子-ΚB 干扰素调节因子 肿瘤
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基于TLR4-TBK1-IKKε信号通路探讨栀子苷对果糖代谢综合征大鼠肾保护作用机制 被引量:2
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作者 黄瑞欧 王星 金路 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期583-588,共6页
目的探讨栀子苷对果糖诱导的代谢综合征大鼠肾保护作用及其可能机制。方法 50只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、栀子苷组(30、60mg/kg)和别嘌呤醇组(10mg/kg),每组10只,采用10%果糖水建立大鼠代谢综合征肾损伤模型,8周后处死动物,... 目的探讨栀子苷对果糖诱导的代谢综合征大鼠肾保护作用及其可能机制。方法 50只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、栀子苷组(30、60mg/kg)和别嘌呤醇组(10mg/kg),每组10只,采用10%果糖水建立大鼠代谢综合征肾损伤模型,8周后处死动物,测定胰岛素糖耐量,血清尿酸、肌酐、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、白介素-1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,尿液尿酸、肌酐水平以及肾脏TG、TC、IL-1β、IL-6和TNF-α水平,同时测定肾脏组织核转录因子-κB(NF-κB)和Toll样受体4(TLR4)-TANK结合激酶1(TBK1)-κB抑制因子激酶ε(IKKε)信号通路的表达变化。结果栀子苷显著改善胰岛素抵抗,降低血清尿酸、肌酐、TG、TC、IL-1β、IL-6和TNF-α和肾脏TG、TC、IL-1β、IL-6及TNF-α水平,并显著升高尿液尿酸和肌酐水平,且NF-κB和TLR4-TBK1-IKKε信号通路的激活均得到显著抑制,同时在细胞实验中进一步证实了果糖刺激诱导人肾近端小管上皮细胞系HK-2细胞炎症因子的表达和TLR4-TBK1-IKKε信号通路的激活,而栀子苷和TLR4抑制剂TAK-242可以显著改善上述指标的异常表达。结论栀子苷改善果糖喂养大鼠高尿酸血症、脂质堆积和肾脏炎症,并与抑制TLR4-TBK1-IKKε信号通路激活有关。 展开更多
关键词 栀子苷 果糖 代谢综合征 肾保护 高尿酸血症 炎症 TLR4 tbk1 IKKε信号通路
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IKKε和TBK1通路及其抑制剂在肿瘤中的作用 被引量:1
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作者 黄炜祺(综述) 江高峰 周咏明(审阅) 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期204-208,共5页
非经典信号通路IKKε和TBK1与恶性肿瘤密切相关,多种因素激活IKKε和TBK1通路,可引起NF-κB途径的激活,导致肿瘤细胞的凋亡减少、细胞周期加快,促进肿瘤发生和发展。抑制IKKε和TBK1信号通路,可增加多种细胞凋亡因子的表达,抑制肿瘤细... 非经典信号通路IKKε和TBK1与恶性肿瘤密切相关,多种因素激活IKKε和TBK1通路,可引起NF-κB途径的激活,导致肿瘤细胞的凋亡减少、细胞周期加快,促进肿瘤发生和发展。抑制IKKε和TBK1信号通路,可增加多种细胞凋亡因子的表达,抑制肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡,同时提高化疗和放疗的敏感性。因此,阻断IKKε和TBK1信号通路可有效治疗恶性肿瘤,已有的实验证实有多种阻断IKKε和TBK1通路的药物均具有良好的抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 IKKε tbk1 核转录因子ΚB 干扰素 肿瘤 药物治疗
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TLR4、TBK/IRF3信号通路介导肾小管上皮细胞与单核细胞相互作用 被引量:4
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作者 李青 郑敏 +2 位作者 张露 刘利华 孙伟 《中国中西医结合肾病杂志》 2015年第11期994-996,I0005,共4页
目的:探讨单核细胞与肾小管上皮细胞相互作用的分子机制。方法:体外建立单核细胞(U937)与肾小管上皮细胞(HK-2)共培养系统,观察HK-2细胞对U937细胞Toll样受体4(toll-like receptors 4,TLR4)及TANK结合蛋白激酶(TBK)/干扰素调节因子3(IR... 目的:探讨单核细胞与肾小管上皮细胞相互作用的分子机制。方法:体外建立单核细胞(U937)与肾小管上皮细胞(HK-2)共培养系统,观察HK-2细胞对U937细胞Toll样受体4(toll-like receptors 4,TLR4)及TANK结合蛋白激酶(TBK)/干扰素调节因子3(IRF3)信号通路的影响;观察阻断TBK/IRF3信号通路对单核细胞分化的影响。结果:HK-2细胞促进U937细胞TLR4及TBK/IRF3信号通路蛋白及mRNA的表达(P<0.05);阻断TBK/IRF3信号通路抑制HK-2细胞诱导U937细胞发生M1型转化(P<0.05)。结论:TLR4分子介导HK-2细胞与U937细胞相互作用,激活TBK/IRF3信号通路,导致U937细胞发生M1型转化,进一步诱导炎症因子产生,促进肾脏纤维化。 展开更多
关键词 单核/巨噬细胞 肾小管上皮细胞 TLR4 tbk/IRF3
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鸡TBK1基因实时荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用
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作者 李世雨 程玉强 +3 位作者 刘云霞 朱雯娴 孙建和 严亚贤 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2019年第1期31-35,共5页
为测定鸡TBK1(chTBK1)基因在家禽抗感染天然免疫中mRNA表达水平变化情况,本研究根据chTBK1序列,设计3对特异性引物,基于chTBK1和β-actin双标准曲线建立了荧光定量PCR(qRT-PCR)检测方法,并测定在禽流感病毒刺激下鸡成纤维细胞(DF-1)中ch... 为测定鸡TBK1(chTBK1)基因在家禽抗感染天然免疫中mRNA表达水平变化情况,本研究根据chTBK1序列,设计3对特异性引物,基于chTBK1和β-actin双标准曲线建立了荧光定量PCR(qRT-PCR)检测方法,并测定在禽流感病毒刺激下鸡成纤维细胞(DF-1)中chTBK1表达量的变化情况。结果表明,建立的标准曲线Ct值与模板浓度的对数呈现良好的线性关系(R^2均大于0.99),能特异地检测chTBK1,检测灵敏度可达59拷贝数/μL,且组内及组间变异系数小于2%;chTBK1在DF-1细胞中的mRNA水平在病毒刺激下呈现上升趋势。该qRT-PCR检测方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性,为研究chTBK1在鸡抗病毒感染中的作用提供了有效工具。 展开更多
关键词 tbk1 实时荧光定量PCR 双标准曲线
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环状RNA调控TBK1表达影响肿瘤发生发展
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作者 朱俊畅 张雨萱 +4 位作者 葛彬洁 胡盼洁 唐嘉吕 蔡文品 季敬璋 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2021年第7期807-816,共10页
TANK结合酶1(TANK-binding kinase 1,TBK1)是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,在机体先天免疫调节、细胞选择性自噬、细胞凋亡、细胞再生中发挥重要作用,与肿瘤的发生密切相关.环状RNA(circle RNA,circRNA)是新型的闭合环状非编码RNA,其生物功能... TANK结合酶1(TANK-binding kinase 1,TBK1)是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,在机体先天免疫调节、细胞选择性自噬、细胞凋亡、细胞再生中发挥重要作用,与肿瘤的发生密切相关.环状RNA(circle RNA,circRNA)是新型的闭合环状非编码RNA,其生物功能及与肿瘤的联系受到国内外学者广泛关注.近年来,越来越多的研究发现,TBK1能与circRNA相互作用,对肿瘤的发生发展产生影响,这暗示了circRNA联合TBK1在肿瘤靶向治疗中的巨大潜力,为肿瘤精准治疗提供了新思路.本文总结了近10年来TBK1与circRNA在肿瘤中的研究,分析两者相互作用的模式,以期为肿瘤的靶向治疗提供新靶点. 展开更多
关键词 tbk1 环状RNA 肿瘤
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热应激麻鸡感染大肠杆菌后空肠TLR4-TBK1信号通路免疫因子变化研究 被引量:3
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作者 李伟豪 刘逸雷 +3 位作者 伦健炽 何永明 唐陆平 陈云 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第19期74-78,共5页
为了探索热应激麻鸡感染大肠杆菌后对空肠中TLR4-TBK1信号通路及相关免疫因子的影响,试验将24只雄性麻鸡随机均分为3组,即空白组、大肠杆菌组(E.coli组)和热应激+大肠杆菌组(HS+E.coli组)。HS+E.coli组麻鸡于41℃热应激12 h后恢复7 d,随... 为了探索热应激麻鸡感染大肠杆菌后对空肠中TLR4-TBK1信号通路及相关免疫因子的影响,试验将24只雄性麻鸡随机均分为3组,即空白组、大肠杆菌组(E.coli组)和热应激+大肠杆菌组(HS+E.coli组)。HS+E.coli组麻鸡于41℃热应激12 h后恢复7 d,随后E.coli组和HS+E.coli组麻鸡均灌胃给予1×109 cfu/mL大肠杆菌O157:H71 mL,空白组麻鸡给予相同剂量的无菌生理盐水。于感染大肠杆菌后第4天处死麻鸡,取一段空肠进行病理组织学检查,并通过Western-blot法测定β干扰素(IFN-β)、γ干扰素(IFN-γ)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、干扰素调节因子3(IRF3)、磷酸化干扰素调节因子3(p-IRF3)、热休克蛋白70(HSP70)、Toll样受体4(TLR4)和TANK结合激酶1(TBK1)等相关蛋白的表达情况。结果表明:E.coli组与空白组相比,大肠杆菌感染降低了空肠中绒毛高度并增加了隐窝深度,使空肠中IFN-β、IFN-γ、HMGB1、p-IRF3、TLR4蛋白水平极显著升高(P<0.01),IRF3(P<0.01)、HSP70(P<0.05)、TBK1(P<0.01)蛋白表达水平降低。而HS+E.coli组与E.coli组相比,热应激降低了空肠的隐窝深度,空肠中IFN-β(P<0.01)、IFN-γ(P<0.01)、p-IRF3(P<0.01)、TBK1(P<0.05)和TLR4(P<0.01)蛋白表达水平降低。说明热应激可以通过下调TLR4-TBK1信号通路相关免疫因子表达抑制大肠杆菌感染麻鸡空肠的免疫反应。 展开更多
关键词 热应激 大肠杆菌 空肠 TLR4 tbk1
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