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鸦胆子油乳剂对食管鳞状细胞癌TE-1细胞增殖、凋亡和自噬的影响及其可能的机制 被引量:4
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作者 付皓云 李嫚 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期560-567,共8页
目的:探讨鸦胆子油乳剂(BJOE)对食管鳞状细胞癌TE-1细胞增殖、凋亡和自噬的影响及其可能的机制。方法:按干预措施的不同,将TE-1细胞分为对照组、RAPA(自噬激动剂)组、740Y-P(PI3K激活剂)组、BJOE组、BJOE+RAPA组和BJOE+740Y-P组。采用FC... 目的:探讨鸦胆子油乳剂(BJOE)对食管鳞状细胞癌TE-1细胞增殖、凋亡和自噬的影响及其可能的机制。方法:按干预措施的不同,将TE-1细胞分为对照组、RAPA(自噬激动剂)组、740Y-P(PI3K激活剂)组、BJOE组、BJOE+RAPA组和BJOE+740Y-P组。采用FCM、克隆形成、Transwell实验检测细胞凋亡、增殖、迁移和侵袭能力,qPCR法检测细胞中PI3K、Akt、mTOR、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、p62、Beclin 1、caspase-3的mRNA表达,WB法检测PI3K、Akt、mTOR及其磷酸化、LC3Ⅱ/Ⅰ、p62、Beclin 1、caspase-3的蛋白表达。结果:与对照组比较,RAPA组和BJOE组细胞凋亡率均显著升高(均P<0.01),细胞克隆形成率、迁移和侵袭能力均显著降低(均P<0.01),细胞中PI3K、Akt、mTOR的mRNA和蛋白磷酸化水平均显著降低(均P<0.05),p62的mRNA和蛋白水平显著降低(均P<0.01),LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1和caspase-3的mRNA和蛋白水平显著升高(均P<0.05),740Y-P组的结果则相反(均P<0.05);与RAPA组或740Y-P组比较,BJOE+RAPA组或BJOE+740Y-P组细胞凋亡率显著升高(均P<0.01),克隆形成率、细胞侵袭和迁移能力显著降低(均P<0.01),PI3K、Akt、mTOR的mRNA和蛋白磷酸化水平均显著降低(均P<0.05),p62的mRNA和蛋白水平均显著降低(均P<0.05),LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1和caspase-3 mRNA和蛋白水平显著升高(均P<0.05)。结论:BJOE显著抑制TE-1细胞增殖、迁移、侵袭并促进细胞凋亡与自噬,其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 鸦胆子油乳剂 食管鳞状细胞癌 te-1细胞 增殖 凋亡 自噬 PI3K/Akt/mTOR信号通路
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青藤碱通过MAPK/ERK/mTOR通路诱导自噬抑制人食管癌TE-1细胞增殖
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作者 陈耀 肖文涛 +1 位作者 叶玉海 陈伟毅 《中医药导报》 2023年第6期16-21,共6页
目的:研究青藤碱对人食管癌TE-1细胞增殖、自噬的作用和机制。方法:将TE-1细胞分成对照组、青藤碱200 mg/L组、青藤碱400 mg/L组、青藤碱800 mg/L组。对照组不做处理,青藤碱200 mg/L组、青藤碱400 mg/L组、青藤碱800 mg/L组分别予以相... 目的:研究青藤碱对人食管癌TE-1细胞增殖、自噬的作用和机制。方法:将TE-1细胞分成对照组、青藤碱200 mg/L组、青藤碱400 mg/L组、青藤碱800 mg/L组。对照组不做处理,青藤碱200 mg/L组、青藤碱400 mg/L组、青藤碱800 mg/L组分别予以相应浓度的青藤碱干预。光学显微镜观察细胞形态改变,Hochest染色检测活细胞数,CCK8法检测细胞抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡情况,透射电镜观察自噬小体情况,免疫荧光检测LC3表达情况,Western blotting检测LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin-1、ERK1/2、p-ERK1/2、mTOR、p-mTOR蛋白相对表达量。结果:在200、400、800 mg/L青藤碱的作用下,TE-1细胞皱缩、变圆,漂浮在培养液中,活细胞数不断减少。青藤碱200 mg/L组、青藤碱400 mg/L组、青藤碱800 mg/L组活细胞数比例显著低于对照组(P<0.01),细胞抑制率、细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.01);青藤碱200 mg/L组、青藤碱400 mg/L组、青藤碱800 mg/L组TE-1细胞内自噬小体多于对照组;青藤碱200 mg/L组、青藤碱400 mg/L组、青藤碱800 mg/L组TE-1细胞LC3表达、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、Beclin-1蛋白相对表达量均显著高于对照组(P<0.01),p-ERK1/2/ERK1/2及p-mTOR/mTOR比值均显著低于对照组(P<0.01)。结论:青藤碱能抑制人食管癌TE-1细胞增殖,其机制与抑制MAPK/ERK/mTOR通路和诱导自噬有关。 展开更多
关键词 食管癌 te-1细胞 青藤碱 细胞增殖 细胞自噬 MAPK/ERK/mTOR通路
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莪术醇β-环糊精包合物对食管癌TE-1细胞增殖、凋亡的影响及其机制研究 被引量:11
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作者 景钊 谢聪颖 +2 位作者 吴志勤 许芳 邹长林 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期85-89,共5页
目的探讨莪术醇β-环糊精包合物对食管癌TE-1细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法采用饱和溶液法制备莪术醇与β-环糊精的包合物,红外光谱验证包合物的形成。不同浓度(25、50、100mg/L)莪术醇β-环糊精包合物处理食管癌TE-1细胞后,... 目的探讨莪术醇β-环糊精包合物对食管癌TE-1细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法采用饱和溶液法制备莪术醇与β-环糊精的包合物,红外光谱验证包合物的形成。不同浓度(25、50、100mg/L)莪术醇β-环糊精包合物处理食管癌TE-1细胞后,噻唑蓝[3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT]比色法测定细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期与凋亡情况。实时荧光定量PCR及2-ΔΔCt法定量分析不同处理组Survivin mRNA的相对表达量。Western blot检测Survivin蛋白表达。结果 MTT法检测结果显示,与对照组比较,莪术醇β-环糊精包合物各剂量组生长抑制率均明显升高,且随着剂量升高而增加,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,莪术醇β-环糊精包合物处理可使细胞阻滞在G0/G1期与G2/M期,并且促进细胞凋亡。此外,与对照组比较,处理组细胞中Survivin mRNA与蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论莪术醇β-环糊精包合物能够抑制食管癌细胞TE-1的增殖,促进凋亡,对Survivin的抑制与其抑制食管癌细胞的恶性表型的作用相关。 展开更多
关键词 食管癌 莪术醇 Β-环糊精 SURVIVIN te-1细胞
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温郁金提取物对食管癌TE-1细胞增殖的抑制作用 被引量:10
4
作者 景钊 邹海洲 +1 位作者 许芳 邹长林 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1219-1222,共4页
目的研究温郁金提取物对食管癌TE-1细胞增殖的抑制作用。方法采用超临界CO2萃取法提取温郁金成分。将TE-1细胞贴壁后分成4组:1组加入100μL含0.1%DMSO的RMPI-1640培养基,作为对照组;另外3组分别加入浓度为25、50、100mg/L温郁金提取物... 目的研究温郁金提取物对食管癌TE-1细胞增殖的抑制作用。方法采用超临界CO2萃取法提取温郁金成分。将TE-1细胞贴壁后分成4组:1组加入100μL含0.1%DMSO的RMPI-1640培养基,作为对照组;另外3组分别加入浓度为25、50、100mg/L温郁金提取物完全培养液各100μL,分别作为温郁金低、中、高剂量组。培养48h后采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定各组TE-1细胞生长抑制率。应用基因芯片技术检测各组TE-1细胞基因表达谱的变化。对差异表达基因进行基因本体(gene ontology,GO)功能分类。结果与对照组比较,温郁金各剂量组生长抑制率均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。温郁金各剂量组TE-1细胞生长抑制率随着剂量升高而增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。通过基因芯片筛选出温郁金提取物作用前后88个基因表达水平发生改变且有统计学意义,包括22个基因表达下调,66个基因表达上调。基因GO分类提示差异表达基因主要涉及信号传导(6个)、细胞周期(8个)、凋亡(14个)或分化调节(10个)等。结论温郁金提取物对人食管癌TE-1细胞生长有抑制作用,其抗肿瘤作用可能与调控多层次的基因表达改变有关。 展开更多
关键词 温郁金 食管癌 te-1细胞 基因芯片
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多种肿瘤干细胞标志物在食管鳞癌TE-1细胞系中的表达 被引量:6
5
作者 许健 李步强 慕晓玲 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第20期3640-3642,共3页
目的:检测食管鳞癌TE-1细胞系中肿瘤干细胞标志物CD44、CD133、P75NTR、OCT-4的表达,探讨食管鳞癌的肿瘤干细胞标志物。方法:应用免疫荧光技术检测食管鳞癌TE-1细胞系中CD44、CD133、P75NTR、OCT-4的表达和定位。结果:在TE-1细胞中,CD44... 目的:检测食管鳞癌TE-1细胞系中肿瘤干细胞标志物CD44、CD133、P75NTR、OCT-4的表达,探讨食管鳞癌的肿瘤干细胞标志物。方法:应用免疫荧光技术检测食管鳞癌TE-1细胞系中CD44、CD133、P75NTR、OCT-4的表达和定位。结果:在TE-1细胞中,CD44和CD133在所有细胞都表达且荧光定位在细胞的胞浆;P75NTR和OCT-4也在所有细胞表达,但在有些细胞荧光定位于胞核,在另外一些细胞荧光定位于胞浆。结论:在TE-1中可能存在肿瘤干细胞,但CD44、CD133、P75NTR、OCT-4不是特异的标志物。 展开更多
关键词 CD44 CD133 P75NTR OCT-4 肿瘤干细胞 食管鳞癌te-1细胞
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人食管癌细胞株KYSE-150、TE-1中肿瘤干细胞的培养分化及增殖侵袭能力分析 被引量:3
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作者 王永连 王忠民 +2 位作者 王毅 陶义鹏 韩高扬 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第1期55-59,共5页
背景:研究发现,食管癌组织中存在一类细胞亚群,具有一定的侵袭和转移性能,与治疗效果之间存在十分密切的联系。目的:从人食管癌细胞株KYSE-150、TE-1中分离富含肿瘤干细胞的细胞球,并对其增殖和侵袭能力进行分析。方法:运用无血清培养... 背景:研究发现,食管癌组织中存在一类细胞亚群,具有一定的侵袭和转移性能,与治疗效果之间存在十分密切的联系。目的:从人食管癌细胞株KYSE-150、TE-1中分离富含肿瘤干细胞的细胞球,并对其增殖和侵袭能力进行分析。方法:运用无血清培养基培养KYSE-150、TE-1细胞,观察细胞球的生成情况,采用MTT法以及Transwell小室实验检测细胞的增殖情况和侵袭能力,流式细胞仪检测细胞表面标志物的表达。结果与结论:①KYSE-150、TE-1细胞在无血清培养条件下可以获得稳定传代的细胞球。②细胞球的增殖能力和侵袭能力均显著高于亲本细胞(P<0.05)。③TE-1细胞球和KYSE-150细胞球的CD44^+、CD271^+、CD44^+CD271^+细胞比例均显著高于TE-1亲本细胞和KYSE-150亲本细胞(P<0.05)。④实验结果提示,从人食管癌细胞株KYSE-150、TE-1中分离出具有肿瘤干细胞特性的细胞球,具有很强的增殖和侵袭转移能力,且CD44和CD271可以作为重要的食管癌干细胞表面标志物。 展开更多
关键词 食管肿瘤 肿瘤干细胞 细胞增殖 组织工程 干细胞 食管癌 KYSE-150细胞株 te-1细胞株 诱导分化 细胞球 增殖 侵袭
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DADS对TE-1体外以及裸鼠体内生长的影响及作用机制 被引量:1
7
作者 尹晓然 冯诚 +7 位作者 张军 马红兵 王西京 许琨 张淑群 张蓉 宋玲琴 刘东 《山西医科大学学报》 CAS 2013年第12期919-922,共4页
目的探讨二烯丙基二硫化物(DADS)对TE-1细胞体外以及裸鼠体内生长的影响及其作用机制。方法 MTT法检测24 h、48 h不同浓度DADS体外对食管癌TE-1细胞活力的影响。使用TE-1细胞建立裸鼠皮下移植瘤模型,分为对照组和DADS低浓度治疗组(20 mg... 目的探讨二烯丙基二硫化物(DADS)对TE-1细胞体外以及裸鼠体内生长的影响及其作用机制。方法 MTT法检测24 h、48 h不同浓度DADS体外对食管癌TE-1细胞活力的影响。使用TE-1细胞建立裸鼠皮下移植瘤模型,分为对照组和DADS低浓度治疗组(20 mg/kg)、DADS高浓度治疗组(40 mg/kg),腹腔注射14次,隔日1次,观察动物状态并监测移植瘤生长状况,28 d后处死动物,使用Western blot检测不同组别移植瘤中磷酸化p38、磷酸化ERK1/2、caspase-3、活化caspase-3的表达水平。结果 MTT结果提示DADS能够在体外抑制TE-1的增殖,且具有剂量依赖性。DADS药物治疗组移植瘤生长速度明显低于对照组,以高剂量组为著。Western blot检测结果显示,DADS药物组移植瘤中p38MAPK磷酸化水平升高、ERK1/2的磷酸化水平显著降低,活化caspase-3水平明显升高,且均呈剂量依赖性(P<0.05)。结论 DADS在裸鼠体外、体内均能显著抑制人食管癌TE-1细胞的生长,其作用机制可能与DADS活化p38MAPK通路并抑制ERK通路,活化caspase-3进而抑制肿瘤增殖并促进TE-1细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 DADS te-1 食管肿瘤 动物模型 P38MAPK ERKL 2
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食管癌TE-1细胞生物学性状的相关性研究 被引量:1
8
作者 李步强 许健 +3 位作者 李奇志 李晓义 谷锋泽 慕晓玲 《中国现代医药杂志》 2011年第10期33-36,共4页
目的研究食管癌TE-1细胞生物学性状。方法①将购自上海生命科学院的食管癌TE-1细胞株进行HE染色;②用MTT法绘制细胞生长曲线;③免疫组织化学检测细胞特异性免疫标志;④流式细胞仪分析细胞周期。结果①用DMEM高糖培养基培养,生长良好。H... 目的研究食管癌TE-1细胞生物学性状。方法①将购自上海生命科学院的食管癌TE-1细胞株进行HE染色;②用MTT法绘制细胞生长曲线;③免疫组织化学检测细胞特异性免疫标志;④流式细胞仪分析细胞周期。结果①用DMEM高糖培养基培养,生长良好。HE染色下,细胞大致分为3种:一种细胞呈椭圆形,核大,胞浆少,一种细胞呈三角形或多角形,大小,形态不等,一种细胞有双核或者多核,核大深染,染色质丰富,核分裂相多见;②细胞接种培养后其生长曲线呈近似S形。免疫组织化学检测3种抗体均表达阳性,其中CK7阳性表达定位于胞浆,Ki-67和p53定位于胞核;③TE-1细胞周期:半数细胞处于增生期,半数处于静止期。结论食管癌TE-1细胞符合食管鳞癌的特征。 展开更多
关键词 食管癌 te-1细胞株 生物学特性
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稳定表达TMEM16A蛋白TE-1细胞株的构建与鉴定 被引量:1
9
作者 耿仙 冯承保 +2 位作者 吴建民 杨会茹 宋新梅 《医学研究与教育》 CAS 2013年第1期15-19,共5页
目的建立稳定表达TMEM16A蛋白的TE-1肿瘤细胞株。方法用Lipofectamine 2000转染试剂将TMEM16A基因转染到TE-1细胞,经G418筛选,使用激光共聚焦显微镜和Western blot技术检测TMEM16A基因是否在TE-1细胞中已经稳定表达。结果通过使用G418... 目的建立稳定表达TMEM16A蛋白的TE-1肿瘤细胞株。方法用Lipofectamine 2000转染试剂将TMEM16A基因转染到TE-1细胞,经G418筛选,使用激光共聚焦显微镜和Western blot技术检测TMEM16A基因是否在TE-1细胞中已经稳定表达。结果通过使用G418进行筛选,阳性克隆于4周后培养形成。激光共聚焦显微镜观察稳定表达TMEM16A蛋白的TE-1细胞可见细胞发出绿色荧光。Western blot结果表明,未稳转细胞和稳转细胞系统均表达有TMEM16A蛋白,而稳转细胞系统的蛋白水平明显高于未转染细胞系统的蛋白水平。结论利用脂质体转染方法成功构建了稳定表达TMEM16A基因的TE-1细胞系。 展开更多
关键词 TMEM16A te-1 脂质体2000 激光共聚焦显微镜 免疫印迹
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MicroRNA-21对食管鳞状上皮癌细胞TE-1生物学特性的影响
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作者 黄珊 陈鑫 +4 位作者 马红兵 惠蓓娜 张丽 马海琳 张晓智 《现代肿瘤医学》 CAS 2015年第3期294-298,共5页
目的:食管鳞状上皮癌TE-1细胞中microRNA-21(miR-21)高表达,本研究探讨miR-21对TE-1细胞生物学特性的影响。方法:转染miRZip-21慢病毒,持久抑制TE-1细胞中高表达的miR-21,将由此获得的稳定细胞系命名为anti-miR-21细胞系,实时定量PCR方... 目的:食管鳞状上皮癌TE-1细胞中microRNA-21(miR-21)高表达,本研究探讨miR-21对TE-1细胞生物学特性的影响。方法:转染miRZip-21慢病毒,持久抑制TE-1细胞中高表达的miR-21,将由此获得的稳定细胞系命名为anti-miR-21细胞系,实时定量PCR方法验证,以TE-1细胞作为对照。细胞增殖实验检测anti-miR-21细胞增殖能力,Transwell侵袭实验观察细胞侵袭能力,Transwell迁移实验及划痕实验观察细胞迁移能力,克隆形成实验及细胞毒性实验分别观察放射线及药物敏感性变化。结果:Anti-miR-21细胞的相对增殖率较对照组TE-1细胞低,差异具有统计学意义(P<0.05)。Transwell侵袭实验及迁移实验显示穿过小室的anti-miR-21细胞较TE-1细胞分别减少51.97%及64.31%,差异具有统计学意义(P<0.05)。划痕实验显示anti-miR-21细胞较TE-1细胞的迁移率降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。克隆形成实验分析显示anti-miR-21细胞的D0值(2.73Gy vs 3.60Gy)和Dq值(1.25Gy vs 2.75Gy)均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。细胞毒性实验显示anti-miR-21细胞在顺铂及氟尿嘧啶各个梯度浓度下细胞存活率均降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:MiR-21影响食管鳞状上皮癌TE-1细胞的生物学特性。抑制miR-21表达后,降低了TE-1细胞的增殖、侵袭及迁移能力,同时增加了其对放射及化学药物的敏感性。MiR-21可能成为食管鳞癌治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 食管鳞癌 te-1细胞 MICRORNA-21 生物学特性
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沉默线粒体核糖体蛋白L35基因对人食管癌TE-1细胞生长的影响 被引量:3
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作者 王爱馥 张奇 +3 位作者 张道明 修雨婷 丁雅明 刘林林 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期28-32,217,共6页
目的:探讨慢病毒介导沉默线粒体核糖体蛋白L35 (MRPL35)基因对人食管癌TE-1细胞生长的影响,并阐明其机制。方法:选择3种人食管癌TE-1、ECA109和KYSE150细胞,采用实时定量PCR法检测3种细胞中MRPL35mRNA相对表达水平。食管癌TE-1细胞分为s... 目的:探讨慢病毒介导沉默线粒体核糖体蛋白L35 (MRPL35)基因对人食管癌TE-1细胞生长的影响,并阐明其机制。方法:选择3种人食管癌TE-1、ECA109和KYSE150细胞,采用实时定量PCR法检测3种细胞中MRPL35mRNA相对表达水平。食管癌TE-1细胞分为shMRPL35组和shCtrl组,分别加入沉默靶基因带有嘌呤霉素抗性的si-RNA慢病毒和带有嘌呤霉素抗性的阴性对照si-RNA慢病毒进行感染,建立稳定沉默MRPL35基因的食管癌细胞系,实时定量PCR及Western blotting法检测各组细胞中MRPL35基因沉默效率,采用CCK-8法检测各组细胞生长曲线,AnnexinⅤ-PE/7AAD双染色后流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:3种食管癌细胞均表达MRPL35基因,3种细胞中MRPL35mRNA表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。实时定量PCR法和Western blotting法检测,shMRPL35组TE-1细胞中MRPL35mRNA和蛋白表达水平明显低于shCtrl组(P<0.05)。与shCtrl组比较,shMRPL35组TE-1细胞生长速度明显降低(P<0.05),凋亡率明显升高(P<0.01)。结论:沉默MRPL35基因可抑制食管癌细胞TE-1增殖,并通过凋亡途径发挥作用。 展开更多
关键词 线粒体核糖体蛋白L35 食管癌te-1细胞 细胞凋亡
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RNAi抑制食管癌TE-1细胞株血管生长素表达的实验研究 被引量:1
12
作者 王同建 徐志云 +4 位作者 黄盛东 乔彬 刘晓红 袁扬 龚德军 《实用医药杂志》 2006年第4期446-449,共4页
目的构建介导血管生长素(Angiogenin,ANG)短发夹RNA(ShorthairpinRNA,shRNA)表达的真核质粒载体,研究RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术对食管癌细胞株TE-1中ANG表达的抑制作用。方法依据Tuschl等设计原则,以ANG为靶基因设计并合成有... 目的构建介导血管生长素(Angiogenin,ANG)短发夹RNA(ShorthairpinRNA,shRNA)表达的真核质粒载体,研究RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术对食管癌细胞株TE-1中ANG表达的抑制作用。方法依据Tuschl等设计原则,以ANG为靶基因设计并合成有小发夹结构的两条DNA片段序列,经退火成互补双链,再克隆到载体pRNA-H1.1/Neo中构建重组质粒pRNA-H1.1/Neo-ANGshRNA。脂质体法转染重组质粒至食管癌TE-1细胞,以空质粒(pRNA-H1.1/Neo)转染为对照;半定量RT-PCR法及蛋白质印迹法分别观察TE-1细胞中ANG在核酸和蛋白水平表达量改变。结果①成功构建带ANG靶向的shRNA真核表达载体(pRNA-H1.1/Neo-ANGshRNA);②pRNA-H1.1/Neo-ANGshRNA转染TE-1细胞后,ANG在核酸和蛋白水平表达均较空载体pRNA-H1.1/Neo转染的对照组显著下降。结论成功构建真核表达质粒介导的ANG靶向RNA干扰重组质粒,转染TE-1细胞后能有效抑制ANG表达,为下一步利用RNAi技术抑制肿瘤血管形成以及局部侵袭和远处转移提供研究基础。 展开更多
关键词 RNAI te-1细胞株 血管生长素
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紫草素对人食管癌TE-1细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响及其可能的机制 被引量:5
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作者 赵莉 黄景荣 +4 位作者 龚承先 汪毅 屈银宗 计春燕 杨建美 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期889-894,共6页
目的:观察紫草素对人食管癌TE-1细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响,并探究其作用机制。方法:采用不同浓度的紫草素(0、1、5、10µmol/L)处理TE-1细胞,MTT法检测24、48、72 h后各组细胞增殖水平;紫草素处理各组TE-1细胞48 h后,采用Hoec... 目的:观察紫草素对人食管癌TE-1细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响,并探究其作用机制。方法:采用不同浓度的紫草素(0、1、5、10µmol/L)处理TE-1细胞,MTT法检测24、48、72 h后各组细胞增殖水平;紫草素处理各组TE-1细胞48 h后,采用Hoechst 33258荧光染色观察细胞凋亡状况,流式细胞术检测细胞的凋亡水平及周期变化,Western blotting检测TRAP1/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达变化。结果:紫草素呈时间和浓度依赖性抑制TE-1细胞增殖(P<0.05或P<0.01);与对照组相比,紫草素能显著促进TE-1细胞凋亡(P<0.01),使TE-1细胞周期发生G0/G1期阻滞(P<0.05或P<0.01),同时降低TRAP1、p-Akt以及p-mTOR表达水平(P<0.05或P<0.01),以上作用具有剂量依赖性。结论:紫草素能显著抑制TE-1细胞的增殖,诱导细胞发生G0/G1期阻滞并促进其凋亡,这可能与其抑制TRAP1/Akt/mTOR信号通路有关。 展开更多
关键词 紫草素 食管癌 te-1细胞 增殖 凋亡 细胞周期 TRAP1/Akt/mTOR信号通路
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没食子酸对人食管癌TE-1细胞的体外抑制作用及其机制 被引量:5
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作者 吴昊 努兰·拜都拉 +1 位作者 刘琳玉 任艳利 《中国药房》 CAS 北大核心 2022年第12期1448-1454,共7页
目的探究没食子酸(GA)对人食管癌TE-1细胞的体外抑制作用及潜在机制。方法MTT法检测GA作用24 h和48 h后对TE-1细胞增殖的影响,细胞荧光计数(CCK-F)法和倒置荧光显微镜观察GA作用后TE-1细胞的数量变化和形态变化,划痕实验检测细胞迁移能... 目的探究没食子酸(GA)对人食管癌TE-1细胞的体外抑制作用及潜在机制。方法MTT法检测GA作用24 h和48 h后对TE-1细胞增殖的影响,细胞荧光计数(CCK-F)法和倒置荧光显微镜观察GA作用后TE-1细胞的数量变化和形态变化,划痕实验检测细胞迁移能力的变化,平板集落形成实验检测GA对TE-1细胞集落形成能力的影响,流式细胞术检测细胞凋亡情况,荧光探针(DCFH-DA)法观察活性氧(ROS)产生情况;Western blot法检测胱天蛋白酶3(caspase-3)、caspase-9、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、cyclin D3的表达水平。结果GA能够明显降低TE-1细胞的增殖能力,且有时间和浓度依赖趋势,其对细胞的半数抑制浓度分别为(281.22±26.81)μmol/L(24 h)和(220.90±31.15)μmol/L(48 h)。与对照组比较,给药组细胞出现皱缩、排列稀疏、细胞核固缩等现象,且细胞数量明显减少。与对照组比较,给药组细胞的细胞迁移能力和集落形成能力均显著降低(P<0.01或P<0.05)。经100、300、500μmol/L的GA作用24 h后,细胞凋亡率分别为(6.21±0.32)%、(12.59±0.58)%和(15.41±0.41)%,均显著高于对照组的(5.29±0.28)%(P<0.01或P<0.05);除100μmol/L GA组外,其余给药组细胞ROS的产生水平均显著提高(P<0.01或P<0.05);与对照组比较,各给药组细胞中Bcl-2(仅GA 200μmol/L组)、Bax(GA 100μmol/L组除外)、caspase-3、caspase-9(GA 100μmol/L组除外)的表达水平均显著升高(P<0.01或P<0.05),Bcl-2(GA 100、200μmol/L组除外)、cyclin D1、cyclin D3蛋白的表达水平均显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论GA能够抑制人食管癌TE-1细胞的增殖,限制其迁移能力及集落形成能力,促进其凋亡;上述作用可能与该成分可提高ROS水平并上调促凋亡蛋白caspase-3、caspase-9、Bax的表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2和细胞周期蛋白cyclin D1、cyclin D3的表达有关。 展开更多
关键词 没食子酸 食管癌 凋亡 活性氧 te-1细胞
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过表达miR-145-5p通过下调IGF1R抑制食管鳞状细胞TE-10细胞的恶性生物学行为 被引量:7
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作者 邴钟兴 曹磊 +1 位作者 曹智理 梁乃新 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期634-639,共6页
目的:探究miR-145-5p对食管鳞状细胞癌TE-10细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)等恶性生物学行为的分子机制。方法:q PCR法检测miR-145-5p在食管鳞状细胞癌细胞和正常食管上皮细胞中的表达水... 目的:探究miR-145-5p对食管鳞状细胞癌TE-10细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)等恶性生物学行为的分子机制。方法:q PCR法检测miR-145-5p在食管鳞状细胞癌细胞和正常食管上皮细胞中的表达水平。采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-145-5p与胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF1R)的靶向调控关系,Western blotting检测IGF1R蛋白和EMT相关蛋白的表达,CCK-8法和Transwell检测miR-145-5p/IGF1R分子轴对TE-10细胞增殖、侵袭、迁移的影响。结果:miR-145-5p在3株食管鳞状细胞癌细胞中低表达且在TE-10细胞中表达最低(P<0.01或P<0.05)。过表达miR-145-5p可显著抑制TE-10细胞的增殖、侵袭、迁移和EMT进程(P<0.01或P<0.05)。双荧光素酶报告基因证实miR-145-5p靶向下调IGF1R表达(P<0.01)。回复实验进一步证实,与单独过表达IGF1R相比,同时过表达miR-145-5p和IGF1R能显著缓解IGF1R对TE-10细胞的增殖、侵袭、迁移和EMT进程的促进作用(P<0.01或P<0.05)。结论:过表达miR-145-5p通过靶向下调IGF1R进而抑制了食管鳞状细胞癌TE-10细胞的增殖、侵袭、迁移和EMT进程。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 te-10细胞 miR-145-5p 胰岛素样生长因子1受体 增殖 侵袭 迁移 上皮间质转化
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辐射抗性食管癌细胞亚系TE-1R的建立及其辐射抗拒机制的研究
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作者 王金华 顾玉明 《徐州医学院学报》 CAS 2013年第6期384-387,共4页
目的建立辐射抗性食管癌细胞亚系TE-1R,并探讨其辐射诱导的凋亡性及辐射抗性机制。方法采用分次、间歇照射的方法(2Gy,5次)诱导人食管癌细胞系TE-1产生具有稳定辐射抗性的细胞亚系TE-1R,显微镜下观察细胞形态学差异。以TE-1和TE-1... 目的建立辐射抗性食管癌细胞亚系TE-1R,并探讨其辐射诱导的凋亡性及辐射抗性机制。方法采用分次、间歇照射的方法(2Gy,5次)诱导人食管癌细胞系TE-1产生具有稳定辐射抗性的细胞亚系TE-1R,显微镜下观察细胞形态学差异。以TE-1和TE-1R细胞为实验对象,给予6MVX射线单次照射(2Gy),流式细胞仪分析细胞照射后的凋亡情况,RT—PCR法和Western Blot法分别检测食管癌TE-1、TE-1R细胞中复制蛋白AI(RPA1)mRNA和蛋白的表达情况。结果筛选出辐射抗性食管癌细胞亚系TE—1R。2Gy射线照射后12、24和48hTE-1R细胞的凋亡率低于TE—1细胞(P〈0.05)。RPA1 mRNA和蛋白在TE—1R细胞中的表达高于TE-1细胞(P〈0.05)。结论成功建立了辐射抗性的食管癌细胞亚系TE-1R,新的细胞亚系TE-1R比其亲本细胞系TE-1对射线更加抗拒,RPA1可能在食管癌细胞辐射抗性的修复中起着重要作用。 展开更多
关键词 食管癌te-1细胞 复制蛋白A1 辐射抗拒 凋亡
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转染沉默IGFBP-2基因抑制食管癌细胞系TE-1增殖、转移的影响 被引量:1
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作者 张倬 熊飞 +1 位作者 李雪曼 陈天佑 《甘肃科学学报》 2020年第1期32-37,共6页
研究转染沉默IGFBP-2抑制食管癌细胞系TE-1增殖、转移的影响。通过构建好的IGFBP-2的SiRNA绿色荧光载体转染到人食管癌细胞系TE-1中,于荧光显微镜下观测转染效率,通过Western-blot证实基因沉默的效果,并通过CCK8,Transwell和流式来分别... 研究转染沉默IGFBP-2抑制食管癌细胞系TE-1增殖、转移的影响。通过构建好的IGFBP-2的SiRNA绿色荧光载体转染到人食管癌细胞系TE-1中,于荧光显微镜下观测转染效率,通过Western-blot证实基因沉默的效果,并通过CCK8,Transwell和流式来分别评估IGFBP-2-SiRNA对细胞增殖,侵袭和凋亡的影响。结果显示:Western-blot法证实IGFBP-2能有效地被SiRNA沉默,而且IGFBP-2-SiRNA能抑制食管癌细胞系TE-1的增殖\,侵袭和诱导凋亡。实验结果表明IGFBP-2在食管癌的发病机理中可能有着重要的作用。IGFBP-2也许能成为食管癌治疗的一个靶向基因。 展开更多
关键词 IGFBP-2 食管癌 SIRNA te-1
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TW37对食管癌TE-1细胞迁移的影响
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作者 秦甜甜 张雪燕 +6 位作者 李蕾蕾 霍峻锋 石晓丽 王希雅 叶小萍 杨程宇 王淙 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2018年第6期706-710,共5页
目的:观察TW37对食管癌TE-1细胞迁移的影响。方法:用0. 25、0. 50、1. 00、2. 00、4. 00、8. 00、16. 00、32. 00和64. 00μmol/L的TW37处理TE-1细胞24、48、72 h,采用MTT法检测细胞增殖。倒置显微镜下观察2、4μmol/L的TW37作用24 h对T... 目的:观察TW37对食管癌TE-1细胞迁移的影响。方法:用0. 25、0. 50、1. 00、2. 00、4. 00、8. 00、16. 00、32. 00和64. 00μmol/L的TW37处理TE-1细胞24、48、72 h,采用MTT法检测细胞增殖。倒置显微镜下观察2、4μmol/L的TW37作用24 h对TE-1细胞形态的影响。划痕实验检测2、4μmol/L的TW37作用24、48 h对TE-1细胞迁移的影响。Western blot实验测定2、4μmol/L TW37作用24 h对TE-1细胞E-Cadherin、Vimentin以及N-Cadherin蛋白表达的影响。均设空白对照。结果:TW37抑制TE-1细胞增殖,呈时间和浓度依赖性。TW37作用后TE-1细胞由原来的梭形变成了卵圆形。TW37能够在较低浓度(2μmol/L)抑制TE-1细胞迁移,4μmol/L的TW37抑制迁移的作用更强(P <0. 05)。TW37能降低TE-1细胞中Vimentin、N-Cadherin的表达,上调E-Cadherin的表达(P <0. 05)。结论:TW37可能通过抑制EMT进程进而抑制TE-1细胞的迁移。 展开更多
关键词 食管癌 TW37 迁移 E-CADHERIN VIMENTIN N-CADHERIN te-1细胞
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胶质母细胞瘤中癌-睾丸抗原OY-TES-1的表达对M2型巨噬细胞极化的影响
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作者 赵振凯 梁国 +4 位作者 李枫 农蔚霞 张庆梅 罗彬 谢小薰 《中国临床新医学》 2024年第8期875-880,共6页
目的探讨胶质母细胞瘤(GBM)中癌-睾丸抗原OY-TES-1的表达对M2型巨噬细胞极化的影响。方法体外培养人GBM细胞U251与人外周血单核细胞THP-1,构建稳定下调OY-TES-1的U251稳转株(U251-SH-OY-TES-1组),将转染无关序列的U251作为对照(U251-SH... 目的探讨胶质母细胞瘤(GBM)中癌-睾丸抗原OY-TES-1的表达对M2型巨噬细胞极化的影响。方法体外培养人GBM细胞U251与人外周血单核细胞THP-1,构建稳定下调OY-TES-1的U251稳转株(U251-SH-OY-TES-1组),将转染无关序列的U251作为对照(U251-SH-NC组)。48h后取两组上清液与THP-1细胞共培养,加入U251-SH-NC组上清液的THP-1细胞为SH-NC组,加入U251-SH-OY-TES-1组上清液的THP-1细胞为SH-OY-TES-1组。通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法分别检测两组OY-TES-1mRNA和蛋白相对表达量,确定转染效率。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养液中人白细胞介素-10(IL-10)、人转化生长因子-β(TGF-β)表达水平。通过流式细胞术检测CD206表达水平。结果RT-qPCR与蛋白免疫印迹法检测结果显示,U251-SH-OY-TES-1组OY-TES-1mRNA和蛋白的相对表达量低于U251-SH-NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA结果显示,两组培养液中TGF-β、IL-10水平随培养时间的增加呈上升趋势。第0天、第2天SH-OY-TES-1组培养液中TGF-β水平显著低于SH-NC组(P<0.05),IL-10水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。第4天SH-OY-TES-1组培养液中TGF-β、IL-10水平显著低于SH-NC组(P<0.05)。流式细胞术结果显示,与SH-NC组比较,SH-OY-TES-1组CD206水平下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论GBM中OY-TES-1高表达能够促进M2型巨噬细胞的极化。 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤 OY-TES-1 M2型巨噬细胞 极化
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连翘根醇提物体外诱导TE-13细胞凋亡的机制研究 被引量:2
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作者 颜晰 赵连梅 +2 位作者 刘月彩 王玲 单保恩 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期239-244,共6页
目的:从基因及蛋白水平探讨连翘根醇提物(ethanol extract of Forsythia suspensa root,FSEER)诱导人食管癌TE-13细胞凋亡的作用机制。方法:不同质量浓度的FSEER(0.4、0.5和0.6mg/mL)作用于TE-13细胞24h后,采用FCM检测线粒体膜电位的变... 目的:从基因及蛋白水平探讨连翘根醇提物(ethanol extract of Forsythia suspensa root,FSEER)诱导人食管癌TE-13细胞凋亡的作用机制。方法:不同质量浓度的FSEER(0.4、0.5和0.6mg/mL)作用于TE-13细胞24h后,采用FCM检测线粒体膜电位的变化;蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白[caspase-3、caspase-8、caspase-9和细胞质中细胞色素C(cytochrome-C,Cyt-C)]经FSEER处理后在TE-13细胞中的表达情况;同时通过RT-PCR检测细胞凋亡相关基因Bax、Bad、Noxa、Bcl-2、Bcl-xl和Mcl-1mRNA的表达情况。结果:TE-13细胞经FSEER(0.4、0.5和0.6mg/mL)作用24h后,随FSEER作用浓度的升高,发生线粒体膜电位损伤的细胞数目逐渐增多,且明显多于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。蛋白质印迹法检测结果显示,经FSEER处理后,TE-13细胞中cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的表达水平及细胞质中Cyt-C的表达水平均逐渐增加,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);而caspase-8的表达水平则无明显变化,与对照组相比,差异无统计学意义。RT-PCR检测结果显示,FSEER可以上调TE-13细胞中Bax、Bad和NoxamRNA的表达水平,下调Bcl-2、Bcl-xl和Mcl-1mRNA的表达水平。结论:FSEER可能是通过依赖于线粒体的细胞凋亡内源途径而诱导人食管癌TE-13细胞发生凋亡的。 展开更多
关键词 食管肿瘤 连翘属 植物提取物 细胞凋亡 te-13细胞
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