补中益气汤含药血清对TGF-β1介导的A549细胞中Twistl表达的影响 被引量：5

1

作者 唐莹 郭倩 +2 位作者 于宁 姜林林 刘春英 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第6期1451-1453,I0015,共4页

目的:观察补中益气汤含药血清对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)介导的人肺腺癌A549细胞上皮间质转化过程中Twistl表达的影响。方法:制备最佳浓度补中益气汤最佳浓度含药血清作用于TGF-β1诱导的A549细胞,实... 目的:观察补中益气汤含药血清对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)介导的人肺腺癌A549细胞上皮间质转化过程中Twistl表达的影响。方法:制备最佳浓度补中益气汤最佳浓度含药血清作用于TGF-β1诱导的A549细胞,实验分组为空白血清组、空白血清+TGF-β1组、以及补中益气汤最佳浓度补中益气汤含药血清+TGF-β1组。采用免疫组化、western-blot和realtime PCR法分别检测Twistl在蛋白和基因水平表达的变化。结果:最佳浓度的补中益气汤含药血清能使上皮间质化的A549细胞中Twistl蛋白表达下降,mRNA表达水平降低。结论:补中益气汤含药血清能抑制TGF-β1介导的A549细胞上皮间质化过程中Twistl表达。 展开更多

关键词 补中益气汤 A549细胞 twistl TGF-Β1

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聚焦细胞株检测对骨肉瘤细胞侵袭、转移的影响

2

作者 冯晨 任春慧 +3 位作者 温宏丽 孙振华 戴忻恒 李罡 《航空航天医学杂志》 2024年第6期644-647,共4页

目的探讨聚焦细胞株检测对骨肉瘤细胞侵袭、转移的影响。方法检测Twist1(Twist1基因是一种编码转录因子的基因,其异常活化与多种癌症的发生和发展密切相关。)在143B、MG63、TE85三种不同骨肉瘤中的基础表达,采用划痕实验检测细胞的平行... 目的探讨聚焦细胞株检测对骨肉瘤细胞侵袭、转移的影响。方法检测Twist1(Twist1基因是一种编码转录因子的基因,其异常活化与多种癌症的发生和发展密切相关。)在143B、MG63、TE85三种不同骨肉瘤中的基础表达,采用划痕实验检测细胞的平行迁移能力,Transwell实验检测细胞的垂直迁移及侵袭能力。结果不同恶性程度的骨肉瘤细胞其划痕愈合率也不同,其中143B细胞最高,MG63细胞次之,TE85细胞最低。通过Twist1表达的诱导能够提高细胞的划痕愈合率,促进细胞的迁移,而抑制Twist1表达则会影响到细胞划痕愈合率,限制细胞迁移;不同细胞恶性程度不同,细胞的侵袭能力也存在一定差别,其中具有最强侵袭能力的细胞是143B,其次是TE85细胞,最低的是MG63细胞。骨肉瘤是一种高度恶性的肿瘤,其恶化程度与Twist1的表达水平密切相关。研究显示,通过诱导Twist1的过表达,可以显著提高骨肉瘤细胞的侵袭能力,尤其是MG63细胞,其侵袭能力的提升尤为明显。这一发现揭示了Twist1在骨肉瘤发展中的关键作用,进一步证实了Twist1的表达水平与骨肉瘤的恶性程度正相关。此外,Twist1的过表达还能够增强骨肉瘤细胞的迁移能力,这对于骨肉瘤的扩散和转移具有重要意义。因此,Twist1可能成为骨肉瘤治疗的一个新的靶点,通过抑制Twist1的表达或功能,可能有助于抑制骨肉瘤的生长和扩散。 展开更多

关键词 Twist1表达 骨肉瘤 细胞侵袭 转移

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Twist1在食管癌中的表达及其临床意义研究 被引量：1

3

作者 刘善东 黄云龙 +8 位作者 方炎鑫 姚龙 吴开明 万军 夏万里 康宁宁 姬强 刘晓颖 张仁泉 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第10期1517-1520,共4页

目的研究Twist1在食管鳞状细胞癌中的表达情况,探讨其在食管癌演变的过程中的作用及临床意义。方法用Western blot和免疫组织化学法检测正常食管组织、食管癌旁组织(距癌组织2 cm内组织)、食管鳞癌组织中Twist1的表达情况并阐明其与性... 目的研究Twist1在食管鳞状细胞癌中的表达情况,探讨其在食管癌演变的过程中的作用及临床意义。方法用Western blot和免疫组织化学法检测正常食管组织、食管癌旁组织(距癌组织2 cm内组织)、食管鳞癌组织中Twist1的表达情况并阐明其与性别、年龄、肿瘤位置、细胞分化程度、临床分期、T分期以及有无淋巴结转移等的关系。结果Twist1在食管鳞癌组织中阳性表达率(74.7%)明显高于癌旁组织(49.3%)和正常食管组织(38.4%),差异有统计学意义(P=0.000)。食管鳞状细胞癌中Twist1的阳性表达率在不同细胞分化程度、临床分期、T分期组间差异有统计学意义(P<0.05),在不同性别、年龄、肿瘤部位、有无淋巴结转移组间差异无统计学意义。正常食管组织组、癌旁组织组、食管鳞癌组织组间Twist1的相对表达量差异有统计学意义(F=6.263,P=0.002)。结论 Twist1可能参与了食管鳞状细胞癌的发生、发展及恶性转化过程,检测Twist1有助于食管鳞癌的诊断、判断其恶性程度。 展开更多

关键词 twistl转录因子 食管肿瘤 WESTERN BLOT 免疫组织 化学

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小白菊内酯对人宫颈癌Hela细胞株生长与迁移的影响及其相关分子机制的研究 被引量：2

4

作者 杨万山 陈升宏 +4 位作者 孙抒 刘成俊 盛晴宇 潘颖 玄延花 《国际老年医学杂志》 2017年第6期241-245,共5页

目的探讨小白菊内酯对人宫颈癌Hela细胞株生长与迁移的影响及其相关分子机制，为小白菊内脂的进一步抗肿瘤药物研发提供实验基础。方法应用CCK-8检测细胞活性，HE染色观察细胞形态学变化，细胞划痕实验检测细胞迁移能力的变化；细胞免... 目的探讨小白菊内酯对人宫颈癌Hela细胞株生长与迁移的影响及其相关分子机制，为小白菊内脂的进一步抗肿瘤药物研发提供实验基础。方法应用CCK-8检测细胞活性，HE染色观察细胞形态学变化，细胞划痕实验检测细胞迁移能力的变化；细胞免疫化学染色检测BCL-2和NF—κB基因在细胞内表达，Western—blot方法检测细胞迁移相关蛋白Twist—relatedprotein1（Twistl）表达的变化。结果小白菊内酯作用后的Hela细胞的生长受到抑制，并诱导细胞凋亡。肿瘤细胞的迁移能力受到明显的抑制，实验组和对照组差异显著（P〈0．05），但是24h和48h差别并不明显；BCL-2和NF—κB基因在细胞内表达明显下调，Twistl表达明显下调，和Oh比较区别显著（P〈0．05），但是24h和48h并无明显区别。结论小白菊内酯能够抑制Hela细胞株生长与迁移能力，可能和抑制BCL-2，NF—κB基因与Twistl表达有关。 展开更多

关键词 小白菊内酯 HELA细胞株 twistl BCL-2 NF—κB

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TGF-β1诱导结肠癌细胞SW480发生上皮-间质转化及对Twist1表达的影响 被引量：8

5

作者 于伟娜 罗军敏 +4 位作者 徐林 秦欢 丁陈波 袁建波 冯继红 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期850-854,共5页

目的探讨TGF-β1诱导结肠癌细胞SW480发生上皮-间质转化(EMT)及对Twist1表达的影响。方法采用10 ng/ml的TGF-β1作用结肠癌细胞SW480 72 h,倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化;细胞划痕实验检测细胞体外迁移能力;细胞免疫荧光、Western... 目的探讨TGF-β1诱导结肠癌细胞SW480发生上皮-间质转化(EMT)及对Twist1表达的影响。方法采用10 ng/ml的TGF-β1作用结肠癌细胞SW480 72 h,倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化;细胞划痕实验检测细胞体外迁移能力;细胞免疫荧光、Western blot和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测E-cadherin、Vimentin及Twist1的蛋白和mRNA表达。结果经TGF-β1诱导72 h后,SW480细胞呈典型间质型细胞形态,且细胞的迁移能力明显增强(P<0.05);E-cadherin蛋白及mRNA表达显著下降,Vimentin、Twist1蛋白及mRNA表达水平均明显增加(P<0.05)。结论 TGF-β1诱导结肠癌细胞SW480发生上皮间质转化时可促进Twist1的表达。 展开更多

关键词 转化生长因子Β1 结肠癌 上皮-间质转化 TWIST1

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食管鳞癌组织中Twist1的表达及其临床意义 被引量：5

6

作者 孙凤丹 崔演 +2 位作者 张佰玲 楚佳楠 玄延花 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期836-839,共4页

目的探讨转录因子Twist1基因在食管鳞癌组织中的表达及其临床病理学意义。方法采用免疫组化EnVision法检测Twist1基因在164例食管鳞癌中的表达,分析Twist1基因表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、有无淋巴结及远处转移、肿瘤分化程度、临... 目的探讨转录因子Twist1基因在食管鳞癌组织中的表达及其临床病理学意义。方法采用免疫组化EnVision法检测Twist1基因在164例食管鳞癌中的表达,分析Twist1基因表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、有无淋巴结及远处转移、肿瘤分化程度、临床分期及生存率等临床病理学特征之间的关系。结果 Twist1在食管鳞癌组织中主要表达于癌周边间质纤维细胞,部分表达于癌细胞。食管鳞癌间质细胞中Twist1在T1期和临床分期Ⅰ期中的表达明显低于其他分期(P均<0.05),有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组(P<0.05),死亡组高于生存组(P<0.05);Twist1在食管鳞癌间质细胞中的表达与患者性别、年龄、肿瘤大小、分化程度、有无远处转移和肿瘤复发均无关(P>0.05)。食管鳞癌细胞中Twist1表达在死亡组明显高于生存组(P<0.001),复发组明显高于未复发组(P<0.001);Twist1在食管鳞癌细胞中表达与患者性别、年龄、肿瘤大小、分化程度、TNM分期均无关(P>0.05)。结论检测Twist1在食管鳞癌中的表达可成为判定食管鳞癌患者预后的重要辅助参考指标。 展开更多

关键词 食管肿瘤 食管鳞癌 TWIST1 免疫组织化学

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Twist1蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义 被引量：1

7

作者 孙凤丹 崔演 +2 位作者 张金子 程志芬 玄延花 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期528-531,I0002,共5页

目的:检测Twist1蛋白在胃癌组织中的表达,探讨其在胃癌发生、发展过程中的作用及其临床病理学意义。方法:采用免疫组织化学法检测Twist1蛋白在199例胃癌、25例高级别上皮内瘤变、24例低级别上皮内瘤变、46例肠上皮化生、17例慢性萎缩性... 目的:检测Twist1蛋白在胃癌组织中的表达,探讨其在胃癌发生、发展过程中的作用及其临床病理学意义。方法:采用免疫组织化学法检测Twist1蛋白在199例胃癌、25例高级别上皮内瘤变、24例低级别上皮内瘤变、46例肠上皮化生、17例慢性萎缩性胃炎和23例正常胃黏膜组织中的表达水平,分析Twist1蛋白表达与胃癌临床病理学特征之间的关系。结果:Twist1蛋白在胃癌组织中的表达明显高于上皮内瘤变、肠上皮化生、慢性萎缩性胃炎和正常胃黏膜组织,差异有统计学意义(P<0.001)。胃癌组织中Twist1蛋白的表达水平在肿瘤直径≥4cm组明显高于肿瘤直径<4cm组(P<0.01);有淋巴结转移组明显高于无转移组(P<0.01);死亡组明显高于生存组(P<0.01)。但Twist1蛋白的表达水平与胃癌类型、患者年龄、肿瘤发生部位、T分级、肿瘤分化、临床分期和肿瘤组织学类型无统计学关联(P>0.05)。结论:Twist1蛋白在胃癌组织中高表达,并与肿瘤大小、转移情况和患者预后有关,其可能是胃癌发生的一个重要因素。 展开更多

关键词 胃肿瘤 Twist1蛋白 免疫组织化学

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miR-181a抑制舌鳞癌细胞上皮-间充质转化及化疗耐药机制的研究 被引量：1

8

作者 刘墨 李劲松 +1 位作者 阮毅 黄洪章 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2018年第4期289-295,共7页

目的:探讨miR-181a调控上皮-间充质转化(EMT)促进舌鳞状细胞癌细胞顺铂耐药的机制。方法:分别在CAL27/CDDP、CAL27中转染miR-181a mimics、miR-181a LNA,免疫印迹及免疫荧光检测E-cadherin、Vimentin的表达;免疫印迹检测Twist1、Slug的... 目的:探讨miR-181a调控上皮-间充质转化(EMT)促进舌鳞状细胞癌细胞顺铂耐药的机制。方法:分别在CAL27/CDDP、CAL27中转染miR-181a mimics、miR-181a LNA,免疫印迹及免疫荧光检测E-cadherin、Vimentin的表达;免疫印迹检测Twist1、Slug的表达;Transwell及划痕实验检测细胞的侵袭、迁移能力;MTT法检测细胞对顺铂的半抑制率。利用生物信息学方法预测Twist1可能为miR-181a的靶基因。构建包含Twist1结合序列片段的荧光素酶报告基因质粒,进行双荧光素酶报告基因实验。采用SPSS17.0软件包对结果进行单因素方差分析。结果:转染miR-181a mimics可逆转CAL27/CDDP的EMT表型,E-cadherin表达增强,Vimentin、Twist1及Slug表达降低,细胞的侵袭、迁移能力显著降低,IC_(50)下降47.57%±6.23%(P<0.05)。转染miR-181a LNA可诱导CAL27细胞发生EMT,Ecadherin表达降低,Vimentin、Twist1及Slug表达增强,细胞侵袭、迁移能力显著增强,IC_(50)升高55.61%±7.20%(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实,Twist1是miR-181a的靶基因。结论:miR-181a靶向调控Twist1,从而抑制舌鳞癌细胞上皮-间充质转化与顺铂耐药。 展开更多

关键词 舌鳞状细胞癌 上皮-间充质转化 MICRORNA TWIST1 耐药性

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Twist1在结直肠癌多药耐药中的作用机制

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作者 程家平 文坤明 +2 位作者 黎江 曾庆良 陈正权 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期860-863,869,共5页

目的探讨Twist1在结直肠癌多药耐药中的作用机制。方法建立人结直肠癌耐奥沙利铂细胞株(SW620/OxR),构建带G418抗性的Twist1-shRNA质粒转染SW620/OxR细胞作为实验组,同时,设置转染带G418抗性阴性对照质粒的SW620/OxR细胞作为阴性对照组... 目的探讨Twist1在结直肠癌多药耐药中的作用机制。方法建立人结直肠癌耐奥沙利铂细胞株(SW620/OxR),构建带G418抗性的Twist1-shRNA质粒转染SW620/OxR细胞作为实验组,同时,设置转染带G418抗性阴性对照质粒的SW620/OxR细胞作为阴性对照组,并在转染成功后用G418筛选建立稳定转染细胞株。采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测SW620/OxR细胞中Twist1基因和蛋白的表达,采用流式细胞术间接法检测细胞中Twist1、p-STAT3、P-gp、Survivin蛋白变化,Western blot法检测两组细胞Twistl、STAT3、p-STAT3蛋白表达变化。结果 Twist1-shRNA干扰质粒能够明显降低SW620/OxR细胞Twist1 mRNA及蛋白水平。且实验组的E-cadherin表达水平明显降低,vimentin表达水平明显升高。采用流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡,阴性对照组细胞凋亡率为5.08%,实验组则明显增高至30.69%。流式细胞术间接法检测实验组中Pgp、Survivin、p-STAT3及Twist1阳性率分别为5.25%、1.93%、2.51%、3.58%,阴性对照组中P-gp、Survivin、p-STAT3及Twist1阳性率分别增加至21.98%、22.36%、19.42%、53.68%,二者差异有统计学意义(P<0.01)。实验组Twist1、STAT3、p-STAT3蛋白相对表达量明显低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Twist1可能是结直肠癌多药耐药机制中的关键因子,其可能通过逆向调控STAT3信号通路发挥作用。 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 多药耐药 TWIST1 SW620/OxR

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利用SmartFlare技术进行胶质瘤细胞系U87中Twist1^(hi)亚群分选及其对顺铂耐药性研究

10

作者 董成亚 石晓旭 +3 位作者 贺文艳 李昊文 刘丽 王雅杰 《标记免疫分析与临床》 CAS 2015年第1期41-45,共5页

目的利用特异性SmartFlare^(TM)RNA检测探针在人脑胶质瘤细胞系U87中分选Twist1^(hi)-U87细胞亚群,并研究其对顺铂的耐药性。方法用SmartFlare^(TM)RNA探针对Twist1^(hi)-U87细胞亚群进行分选。以未分选细胞作为对照。CCK8法检测Twist1^... 目的利用特异性SmartFlare^(TM)RNA检测探针在人脑胶质瘤细胞系U87中分选Twist1^(hi)-U87细胞亚群,并研究其对顺铂的耐药性。方法用SmartFlare^(TM)RNA探针对Twist1^(hi)-U87细胞亚群进行分选。以未分选细胞作为对照。CCK8法检测Twist1^(hi)-U87亚群和亲代U87细胞对顺铂的化疗敏感性。流式细胞仪检测顺铂作用后细胞凋亡情况。结果根据细胞核内Twist1的表达量,流式细胞分选所得Twist1^(hi)-U87亚群约占亲代U87细胞的57.9%~69.8%。CCK8结果显示,加药后24h和48h,Twist1^(hi)-U87亚群对顺铂的耐药性均高于亲代U87细胞(P<0.05)。经顺铂处理后,Twist1^(hi)-U87细胞凋亡率(14.07%±0.96%)明显低于U87细胞(20.4%±1.29%)(P<0.05)。结论 Twist1基因高表达可以抑制胶质瘤细胞凋亡,进而降低顺铂的杀伤作用。 展开更多

关键词 脑胶质瘤 TWIST1 顺铂 耐药

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miR-580对乳腺癌细胞系中Twist1的调节作用

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作者 孟庆威 孙嘉 +1 位作者 纪春连 席玉慧 《临床与病理杂志》 CAS 2015年第6期1065-1069,共5页

目的:探讨miR-580在MCF-10A细胞系中对于Twistl的调节。方法:本实验利用生物信息学方法预测Twistl的靶miRNA是miR-580。首先,采用qPCR法检测在MCF-10A系列细胞系中Twist1及miR-580的表达。然后,在MCF-10A细胞系中分别转染miR-580类似物... 目的:探讨miR-580在MCF-10A细胞系中对于Twistl的调节。方法:本实验利用生物信息学方法预测Twistl的靶miRNA是miR-580。首先,采用qPCR法检测在MCF-10A系列细胞系中Twist1及miR-580的表达。然后,在MCF-10A细胞系中分别转染miR-580类似物和miR-580抑制物后,利用RT-PCR、Western blot、t检验分析Twistl的表达及细胞迁移能力的变化。最后利用荧光素酶实验验证miR-580通过结合在Twistl的3'UTR调节其表达。结果:1)在MCF-10A细胞系中Twist1与miR-580的表达呈负相关;2)在MCF-10A细胞系中转染miR-580类似物后,Twist1的表达下调;在MCF-10A细胞系中转染miR-580抑制物后Twistl的表达上调;3)在MCF-10A细胞系中引人miR-580类似物后细胞迁移能力降低;4)miR-580直接结合在Twistl的3'UTR。结论:miRNA-580在MCF-10A细胞系中通过结合在Twistl的3'UTR负向调节Twist1的表达从而克制细胞的迁移。 展开更多

关键词 乳腺癌 Twist1蛋白 miR-580 细胞迁移

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Twist1对人乳腺癌细胞E-cadher in表达及亚细胞定位的影响 被引量：8

12

作者 张冲 孙保存 +5 位作者 张丹芳 刘芳 董学易 刘志勇 车娜 赵秀兰 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期509-512,共4页

目的:探讨转录调控因子Twist1对人乳腺癌MCF-7细胞E-cadherin表达的影响。方法:上调人乳腺癌MCF-7细胞中Twist1的表达,利用RT-PCR,Western blot,细胞免疫荧光检测分析上调Twist1对E-cadherin表达的影响;划痕实验分析对细胞侵袭运动能力... 目的:探讨转录调控因子Twist1对人乳腺癌MCF-7细胞E-cadherin表达的影响。方法:上调人乳腺癌MCF-7细胞中Twist1的表达,利用RT-PCR,Western blot,细胞免疫荧光检测分析上调Twist1对E-cadherin表达的影响;划痕实验分析对细胞侵袭运动能力的影响;三维培养观察Twist1对MCF-7细胞成血管能力的影响。结果:MCF-7细胞过表达Twist1抑制细胞E-cadherin的表达,并且导致其亚细胞定位异常,细胞迁移运动能力增强,细胞成血管能力增强。结论:Twist1能抑制MCF-7细胞E-cadherin的表达,并增强其侵袭迁移及血管生成能力。 展开更多

关键词 TWIST1 E-CADHERIN 乳腺癌

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8-溴-7-甲氧基白杨素逆转人宫颈癌SiHa细胞系球形成细胞上皮-间叶样表型转化 被引量：12

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作者 曹晓正 杨小红 +1 位作者 曹建国 向红琳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期668-671,共4页

目的研究8-溴-7-甲氧基白杨素(8-bromo-7-methoxychrysin,BrMC)能否有效逆转人宫颈癌SiHa细胞系球形成细胞上皮-间叶样表型转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)。方法体外培养SiHa细胞系细胞,干细胞条件培养基悬浮培养得到球... 目的研究8-溴-7-甲氧基白杨素(8-bromo-7-methoxychrysin,BrMC)能否有效逆转人宫颈癌SiHa细胞系球形成细胞上皮-间叶样表型转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)。方法体外培养SiHa细胞系细胞,干细胞条件培养基悬浮培养得到球形成细胞(sphere forming cells,SFCs)。以BrMC处理SFCs后,通过单层贴壁培养观察细胞形态。Western blot分析SFCs的E-cadherin、N-cadherin和Twist1蛋白表达水平。结果与亲本细胞比较,SiHa细胞系SFCs呈现间叶样细胞(梭形细胞)形态,并低表达E-cadherin和高表达N-cadherin蛋白。BrMC(1.0μmol·L-1)处理72 h后,SFCs由梭形细胞转变为多边形细胞;BrMC(0.1和1.0μmol·L-1)作用24 h,SFCs中E-cadherin表达上调,N-cadherin和Twist1蛋白表达降低。结论 BrMC具有逆转SiHa细胞系SFCs的EMT作用,其机制涉及降低Twsit1蛋白表达。 展开更多

关键词 肿瘤干细胞 宫颈癌 球形成细胞 8-溴-7-甲氧基白 杨素 上皮-间叶样表型转化 TWIST1

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Twist1通过NF-κB信号通路对人乳头状甲状腺癌上皮-间质转化的调控机制研究 被引量：11

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作者 毛冲舟 何海山 +1 位作者 杜尖 付小兰 《临床和实验医学杂志》 2016年第14期1369-1373,共5页

目的探究Twist1对人乳头状甲状腺癌的侵袭转移的影响及相关蛋白表达的影响。方法利用MTT检测Twist1对人乳头状甲状腺癌乳头状癌细胞(IHH-4)细胞增殖能力的影响;利用转孔小室(Transwell小室)实验检测Twist1对人乳头状甲状腺癌IHH-4细胞... 目的探究Twist1对人乳头状甲状腺癌的侵袭转移的影响及相关蛋白表达的影响。方法利用MTT检测Twist1对人乳头状甲状腺癌乳头状癌细胞(IHH-4)细胞增殖能力的影响;利用转孔小室(Transwell小室)实验检测Twist1对人乳头状甲状腺癌IHH-4细胞侵袭能力的影响;采用免疫印迹试验(Western Blot)检测上皮-间质转化(EMT)相关标志蛋白和核因子(NF-κB)信号通路的分子蛋白的改变情况。结果在人乳头状甲状腺癌IHH-4细胞中沉默Twist1后,细胞的增殖能力没有发生显著变化;通过沉默Twist1可以降低人乳头状甲状腺癌IHH-4细胞侵袭和迁移能力,降低了EMT的恶性程度;Western Blot检测沉默Twist1后EMT相关蛋白上皮钙黏蛋白(E-Cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和NF-κB信号通路的p-NF-κB P65均发生明显改变。结论在人乳头状甲状腺癌中Twist1起到癌基因的作用,并且通过NF-κB信号通路对人乳头状甲状腺癌上皮-间质转化起到促进作用,为临床治疗人乳头状甲状腺癌提供科学依据及新的治疗靶点和思路。 展开更多

关键词 人乳头状甲状腺癌 TWIST1 上皮-间充质转化 侵袭 NF-ΚB信号通路

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Twist1稳定表达细胞株的建立及对乳腺癌细胞上皮-间充质转变的影响 被引量：2

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作者 宋玉华 陈滢洁 +7 位作者 张亚楠 刘婕 罗晓丽 贾晓蒙 李欣 姜潇 丁丽华 叶棋浓 《生物技术通讯》 CAS 2016年第1期36-39,共4页

目的:构建Twist1的慢病毒真核表达载体,并建立稳定表达Twist1的乳腺癌细胞株,研究Twist1在乳腺癌中对上皮-间充质转变(EMT)的影响。方法:以乳腺文库为模板,PCR扩增Twist1编码序列,克隆到慢病毒p CDH载体,构建成p CDH-Twist1,转染293T细... 目的:构建Twist1的慢病毒真核表达载体,并建立稳定表达Twist1的乳腺癌细胞株,研究Twist1在乳腺癌中对上皮-间充质转变(EMT)的影响。方法:以乳腺文库为模板,PCR扩增Twist1编码序列,克隆到慢病毒p CDH载体,构建成p CDH-Twist1,转染293T细胞,Western印迹鉴定p CDH载体介导的Twist1的表达;包装病毒载体,感染ZR75-1细胞,用嘌呤霉素筛选得到稳定表达Twist1的细胞株,检测ZR75-1细胞对EMT的影响。结果:经Bam HⅠ、Eco RⅠ双酶切及测序证实得到p CDH-Twist1表达载体,Western印迹实验发现Twist1在293T细胞内表达;嘌呤霉素筛选得到稳定表达Twist1的ZR75-1细胞株。结论:构建了p CDH-Twist1的真核表达载体并建立了稳定表达Twist1的ZR75-1细胞,为进一步研究Twist1在EMT过程中的机制奠定了基础。 展开更多

关键词 TWIST1 E-钙黏蛋白 上皮-间充质转变 乳腺癌细胞

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Twist1蛋白在溃疡性结肠炎及其相关性结直肠癌的表达及意义 被引量：4

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作者 欧阳满照 唐立 +5 位作者 姚学清 陆岩 伍锦浩 张伟杰 廖天佑 罗振涛 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期256-261,共6页

目的:探讨Twist1在溃疡性结肠炎(UC)、溃疡性结肠炎相关性结直肠癌(uc CRC)患者肠粘膜和UC模型细胞中的表达差异及其在UC癌变的可能机制.方法:收集我院进行肠镜检查的患者肠道标本及临床资料共59例,其中正常对照组13例,UC组35例和uc CRC... 目的:探讨Twist1在溃疡性结肠炎(UC)、溃疡性结肠炎相关性结直肠癌(uc CRC)患者肠粘膜和UC模型细胞中的表达差异及其在UC癌变的可能机制.方法:收集我院进行肠镜检查的患者肠道标本及临床资料共59例,其中正常对照组13例,UC组35例和uc CRC组13例.采用免疫组化法检测Twist1蛋白表达情况.构建UC细胞模型,采用Western blot法检测Twist1和Bcl-2蛋白在不同时间点的表达差异.结果:UC组和uc CRC组中Twist1的表达率较正常对照组明显升高(P<0.05),同时在uc CRC组中的表达率高于UC组(P<0.05).Twist1蛋白在UC和uc CRC组织的表达与年龄、性别以及uc CRC肿瘤发生部位无明显关系(P>0.05).在UC细胞模型中,Twist1蛋白表达量高于正常对照组(P<0.05),Bcl-2的表达较正常对照组也有所提高(P<0.05).结论:Twist1在"UC→uc CRC"的转变过程中起促进作用,其机制可能与抑制细胞凋亡等密切相关. 展开更多

关键词 TWIST1 溃疡性结肠炎 溃疡性结肠炎相关性结直肠癌 细胞凋亡

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TWIST1蛋白与肿瘤 被引量：9

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作者 陈立伟 张雨晨 +4 位作者 王子秋 杨黎婷 戴依琳 余健秀 赵娴 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1221-1228,共8页

Twist1(人类直系同源物为TWIST1)蛋白是一种进化上高度保守的碱性螺旋-环-螺旋(basic helix-loop-helix,bHLH)转录因子,最初在果蝇胚胎发育过程中发现其具有重要作用,Twist1基因突变引起头面部和肢体畸形。近年来研究表明,Twist1在多种... Twist1(人类直系同源物为TWIST1)蛋白是一种进化上高度保守的碱性螺旋-环-螺旋(basic helix-loop-helix,bHLH)转录因子,最初在果蝇胚胎发育过程中发现其具有重要作用,Twist1基因突变引起头面部和肢体畸形。近年来研究表明,Twist1在多种恶性肿瘤中高表达,具有诱导上皮-间质转化,促进细胞迁移、侵袭,增强化疗药物抗性等生物学功能。本文主要对Twist1蛋白的结构特征、基因表达调控与蛋白修饰调控机制及其在肿瘤发生发展中的作用进行综述,为其作为潜在的药物靶点及癌症治疗研究提供新的启示。 展开更多

关键词 TWIST1 肿瘤 分子结构 调控机制

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骨髓瘤患者骨髓及髓外病变组织中Twist1的表达及临床意义

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作者 蔡正平 《国际检验医学杂志》 CAS 2018年第9期1102-1104,共3页

目的探讨骨髓瘤患者骨髓及髓外病变组织中Twist1的表达及临床意义。方法选取该院收治的30例骨髓瘤患者作为骨髓瘤组,并选择25例诊断为骨髓瘤合并髓外病变的患者作为合并组,通过免疫组化法检测骨髓瘤患者骨髓及髓外病变组织中骨髓瘤细胞... 目的探讨骨髓瘤患者骨髓及髓外病变组织中Twist1的表达及临床意义。方法选取该院收治的30例骨髓瘤患者作为骨髓瘤组,并选择25例诊断为骨髓瘤合并髓外病变的患者作为合并组,通过免疫组化法检测骨髓瘤患者骨髓及髓外病变组织中骨髓瘤细胞核、细胞质中的Twist1的阳性表达率,比较不同肿瘤分期患者Twist1表达情况,分析Twist1与患者临床参数(性别、年龄)等关系。结果 Twist1在骨髓瘤患者的骨髓组织及髓外组织的细胞核、细胞质均中可表达,且合并髓外病变者的细胞核Twist1高表达率均高于细胞质(P<0.05),其细胞核、细胞质中的髓外组织高表达率均高于骨髓瘤组(P<0.05);骨髓瘤组织细胞核的Twist1表达率随着分期增加而增加,但两组间表达率比较差异无统计学意义(P>0.05);骨髓组织细胞核中Twist1表达与患者临床病理特征关系分析,显示Twist1表达高低与性别、年龄不相关(P>0.05),与临床分期有一定联系,且与疾病分期呈正相关(r=0.316,P<0.05)。结论 Twist1在骨髓瘤患者骨髓中高度表达,尤其是合并髓外病患者的髓外病变组织的细胞核中,且Twist1高表达与患者病理分期有关,临床可作为骨髓瘤患者预后不良指标之一。 展开更多

关键词 骨髓瘤 髓外病变组织 Twist1表达

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口腔黏膜异常增生不同阶段上皮细胞E-cadherin、Twist1启动子甲基化研究 被引量：6

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作者 孙雅楠 佘文婷 +2 位作者 薛敬玲 张佳莉 陈新明 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2016年第5期689-693,707,共6页

目的:研究口腔黏膜异常增生不同阶段上皮细胞E-cadherin及Twist1启动子甲基化,探讨其意义。方法:使用量子点免疫荧光技术检测口腔黏膜异常增生中Twist1的表达。随机选取口腔黏膜上皮异常增生组织,使用甲基化特异性PCR检测其甲基化状态,... 目的:研究口腔黏膜异常增生不同阶段上皮细胞E-cadherin及Twist1启动子甲基化,探讨其意义。方法:使用量子点免疫荧光技术检测口腔黏膜异常增生中Twist1的表达。随机选取口腔黏膜上皮异常增生组织,使用甲基化特异性PCR检测其甲基化状态,分别以口腔黏膜单纯过度角化,口腔鳞癌细胞系及口腔鳞癌组织作为阴性或阳性对照。结果:Twist1在口腔黏膜单纯过度角化中几乎不表达,在口腔异常增生黏膜中随上皮异常增生程度加重而升高(P<0.05)。在轻、中、重度的口腔黏膜异常增生的样本中,Twist1甲基化率随上皮异常增生程度加重而升高,分别为15.8%,29.4%,50%,差异有显著性(P<0.05)。口腔癌组织Twist1甲基化率为62.5%,口腔癌细胞系为60%,而单纯过度角化中Twist1未出现甲基化;与异常增生相比具有统计学意义(P<0.05)。在不同程度的异常增生上皮中,E-cadherin甲基化率分别为33.3%,50%,62.5%,未显示统计学差异。Twist1和Ecadherin的甲基化率无明显相关性(P>0.05)。结论:Twist1启动子甲基化可能发生在黏膜异常增生早期阶段,且与口腔黏膜上皮癌变过程关系密切。 展开更多

关键词 口腔黏膜上皮异常增生 口腔鳞状细胞癌 E-CADHERIN TWIST1 甲基化

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Twist1调控FoxM1在上皮性卵巢癌中的表达 被引量：2

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作者 杨丽娜 赵静 +2 位作者 吴娟 李郁 杨红 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第8期1452-1456,共5页

目的:探讨Twist1调控转录因子Fox M1在上皮性卵巢癌中的表达。方法:采用免疫组织化学SP法检测Fox M1、Twist1在上皮性卵巢癌组织中表达情况,斯皮尔曼秩相关分析其在上皮性卵巢癌组织中的表达相关性;双荧光素酶报告系统检测Twist1对Fox M... 目的:探讨Twist1调控转录因子Fox M1在上皮性卵巢癌中的表达。方法:采用免疫组织化学SP法检测Fox M1、Twist1在上皮性卵巢癌组织中表达情况,斯皮尔曼秩相关分析其在上皮性卵巢癌组织中的表达相关性;双荧光素酶报告系统检测Twist1对Fox M1的调控作用;Real-time quantitative RT-PCR和蛋白免疫印迹技术验证Twist1对Fox M1的调控作用。结果:Twist1、Fox M1在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率分别是71.4%(40/56)、78.6%(44/56),明显高于正常卵巢组织,差异有统计学意义(P<0.05);且其在上皮性卵巢癌中的表达显著相关(r=0.896,P<0.01);Twist1可以结合并激活Fox M1启动子(P<0.05);上调Twist1表达可以激活Fox M1在卵巢癌细胞中的表达(P<0.05),而干扰Twist1后可以下调Fox M1的表达(P<0.05)。结论:Twist1参与调控增殖相关转录因子Fox M1在卵巢癌中的表达,可能是一个潜在的治疗靶点。 展开更多

关键词 TWIST1 FOXM1 上皮性卵巢癌 表达调控

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