目的:通过对胶原蛋白Ⅳ型α5链(collagen type Ⅳα 5 chain,COL4A5)基因进行分析,为1例X-连锁性遗传性Alport综合征家系的分子诊断和遗传咨询提供依据。探讨Alport综合征COL4A5基因移码突变谱及临床表型。方法:应用全外显子组测序技术...目的:通过对胶原蛋白Ⅳ型α5链(collagen type Ⅳα 5 chain,COL4A5)基因进行分析,为1例X-连锁性遗传性Alport综合征家系的分子诊断和遗传咨询提供依据。探讨Alport综合征COL4A5基因移码突变谱及临床表型。方法:应用全外显子组测序技术进行基因检测,应用Sanger测序法对候选致病变异进行验证。结果:病人肾损害渐进展,出现肉眼血尿、肾病综合征,抗感染治疗后蛋白尿及肉眼血尿可缓解。先证者肾脏病理活检:病理表现为基底膜厚薄不一,致密层增厚,部分呈撕裂状和蛛网状。高通量测序和一代测序结果均提示病人COL4A5基因49号外显子存在c.4518_c.4519 insC(p.Gln1507Profs*14)的杂合变异;病人父母均不携带该变异。结论:首次报道了COL4A5基因该位点的新生变异为病人的发病原因,丰富了COL4A5基因变异谱,为该X-连锁性遗传性肾炎家系的分子诊断及产前诊断提供了依据;对指导家族中母亲及女儿再生育,通过产前基因诊断或胚胎植入前遗传学诊断技术,阻断该疾病有重要意义。展开更多
目的对2021年1月陆军军医大学第二附属医院接诊的1例Schmid型干骺端软骨发育不全(Schmid type metaphyseal chondrodysplasia,SMCD)家系进行疾病表型与基因型分析,结合文献复习探讨其防治手段。方法对先证者进行家系调查及系谱分析,收...目的对2021年1月陆军军医大学第二附属医院接诊的1例Schmid型干骺端软骨发育不全(Schmid type metaphyseal chondrodysplasia,SMCD)家系进行疾病表型与基因型分析,结合文献复习探讨其防治手段。方法对先证者进行家系调查及系谱分析,收集先证者及家系成员的临床资料,采用全外显子组测序明确突变基因,并通过Sanger测序验证和家系共分离分析,同时结合ACMG指南进行生物信息学分析来评价变异的致病性。结果在家系患者中发现COL10A1基因存在新的杂合错义突变c.1843T>G(p.Tyr615Asp),该位点所在区域在不同物种之间高度保守,此突变可能通过影响X型胶原(α1)蛋白的三聚化及其与细胞外基质分子结合导致疾病发生。结论发现了1种SMCD的新突变,丰富了SMCD患者的突变谱,为SMCD的预防、诊断及治疗提供理论依据。展开更多
目的观察人膝关节不同退变阶段骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞中微小RNA-140(micro RNA-140,miR-140)表达规律及转染双链miR-140模拟物/抑制物(double strands-miR-140 mimic/inhibitor,ds-miR-140mimic/inhibitor)对OA软骨细胞...目的观察人膝关节不同退变阶段骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞中微小RNA-140(micro RNA-140,miR-140)表达规律及转染双链miR-140模拟物/抑制物(double strands-miR-140 mimic/inhibitor,ds-miR-140mimic/inhibitor)对OA软骨细胞功能的影响。方法根据Kellgren and Lawrence X线分级,膝关节软骨分为正常组(O级)、中期OA组(Ⅲ级)和晚期OA组(Ⅳ级)。各组收集软骨标本6~8例,体外分离及培养软骨细胞,采用第2代软骨细胞进行检测。运用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测各组miR-140相对表达量及Ⅱ型胶原(collagentypeⅡa,COL2A1)及Ⅹ型胶原(Collagentype Xa,COL10A1)的表达情况。向中期OA组软骨细胞转染ds-miR-140mimic/inhibitor后,观察软骨形成因子SRY基因(SRY-related high mobility group box gene9,SOX9),COL2A1及COL10A1表达情况。结果 miR-140在OA软骨细胞中表达显著下降,中、晚期OA组miR-140和正常组相比分别减少78.9%和94.5%(P<0.05),晚期OA组miR-140较中期OA组减少73.9%(P<0.05)。中、晚期OA组SOX9的mRNA较正常组分别减少34.1%和49.3%(P<0.05),COL2A1的mRNA较正常组分别减少36.7%和78.7%(P<0.05),中、晚期OA组COL10A1的mRNA较正常组分别增加1.66倍和2.10倍(P<0.05)。向中期OA组转染ds-miR-140mimic/inhibitor后,SOX9的mRNA分别增加1.95倍和减少59.1%,COL2A1的mRNA分别增加1.87倍和减少68.8%(P<0.05),COL10A1的mRNA分别减少73.0%和增加1.96倍(P<0.05)。结论miR-140在OA软骨细胞中表达显著下降,且随病情加重而进一步减少;转染ds-miR-140 mimic可增加SOX9和COL2A1的表达,同时降低COL10A1的表达。展开更多
文摘目的对2021年1月陆军军医大学第二附属医院接诊的1例Schmid型干骺端软骨发育不全(Schmid type metaphyseal chondrodysplasia,SMCD)家系进行疾病表型与基因型分析,结合文献复习探讨其防治手段。方法对先证者进行家系调查及系谱分析,收集先证者及家系成员的临床资料,采用全外显子组测序明确突变基因,并通过Sanger测序验证和家系共分离分析,同时结合ACMG指南进行生物信息学分析来评价变异的致病性。结果在家系患者中发现COL10A1基因存在新的杂合错义突变c.1843T>G(p.Tyr615Asp),该位点所在区域在不同物种之间高度保守,此突变可能通过影响X型胶原(α1)蛋白的三聚化及其与细胞外基质分子结合导致疾病发生。结论发现了1种SMCD的新突变,丰富了SMCD患者的突变谱,为SMCD的预防、诊断及治疗提供理论依据。
文摘目的观察人膝关节不同退变阶段骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞中微小RNA-140(micro RNA-140,miR-140)表达规律及转染双链miR-140模拟物/抑制物(double strands-miR-140 mimic/inhibitor,ds-miR-140mimic/inhibitor)对OA软骨细胞功能的影响。方法根据Kellgren and Lawrence X线分级,膝关节软骨分为正常组(O级)、中期OA组(Ⅲ级)和晚期OA组(Ⅳ级)。各组收集软骨标本6~8例,体外分离及培养软骨细胞,采用第2代软骨细胞进行检测。运用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测各组miR-140相对表达量及Ⅱ型胶原(collagentypeⅡa,COL2A1)及Ⅹ型胶原(Collagentype Xa,COL10A1)的表达情况。向中期OA组软骨细胞转染ds-miR-140mimic/inhibitor后,观察软骨形成因子SRY基因(SRY-related high mobility group box gene9,SOX9),COL2A1及COL10A1表达情况。结果 miR-140在OA软骨细胞中表达显著下降,中、晚期OA组miR-140和正常组相比分别减少78.9%和94.5%(P<0.05),晚期OA组miR-140较中期OA组减少73.9%(P<0.05)。中、晚期OA组SOX9的mRNA较正常组分别减少34.1%和49.3%(P<0.05),COL2A1的mRNA较正常组分别减少36.7%和78.7%(P<0.05),中、晚期OA组COL10A1的mRNA较正常组分别增加1.66倍和2.10倍(P<0.05)。向中期OA组转染ds-miR-140mimic/inhibitor后,SOX9的mRNA分别增加1.95倍和减少59.1%,COL2A1的mRNA分别增加1.87倍和减少68.8%(P<0.05),COL10A1的mRNA分别减少73.0%和增加1.96倍(P<0.05)。结论miR-140在OA软骨细胞中表达显著下降,且随病情加重而进一步减少;转染ds-miR-140 mimic可增加SOX9和COL2A1的表达,同时降低COL10A1的表达。
