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人参皂甙Rg1、Rb1和维生素E对氧化损伤的牛RPE细胞凋亡的影响 被引量：9
1
作者 鹿庆 孙葆忱 王津津 《眼科新进展》 CAS 1999年第3期152-154,共3页
目的检验氧化损伤的牛ＲＰＥ细胞是否存在着凋亡以及人参皂甙Ｒｇ１、Ｒｂ１和维生素Ｅ对其的影响，以期进一步研究ＲＰＥ细胞氧化损害的机理，并试图为预防和治疗与ＲＰＥ细胞相关的视网膜疾病提供有效的手段。方法建立牛ＲＰＥ细胞氧... 目的检验氧化损伤的牛ＲＰＥ细胞是否存在着凋亡以及人参皂甙Ｒｇ１、Ｒｂ１和维生素Ｅ对其的影响，以期进一步研究ＲＰＥ细胞氧化损害的机理，并试图为预防和治疗与ＲＰＥ细胞相关的视网膜疾病提供有效的手段。方法建立牛ＲＰＥ细胞氧化损伤模型，利用原位末端标记技术测定ＲＰＥ细胞凋亡。结果发生凋亡的ＲＰＥ细胞细胞核染成紫蓝色，形态不一，往往成颗粒状着色，与次黄嘌呤（ＨＸ）／黄嘌呤氧化酶（ＸＯ）（ＨＸ＝０．１ｍｍｏｌ·Ｌ－１，ＸＯ＝５Ｕ·Ｌ－１）组阳性细胞数相比较，正常对照组Ｒｇ１（０．１ｍｇ·Ｌ－１）组及维生素Ｅ（１０ｍｇ·Ｌ－１）组存在显著性差异（Ｐ＜０．０５），而与Ｒｂ１（１０ｍｇ·Ｌ－１）组无显著性差异。结论氧化损伤可使培养的牛ＲＰＥ细胞发生凋亡。人参皂甙Ｒｇ１和维生素Ｅ对抗氧自由基对ＲＰＥ细胞损伤的机制可能是通过清除氧自由基、减少ＲＰＥ细胞脂类过氧化的发生，从而有效地抑制ＲＰＥ细胞凋亡，利于ＲＰＥ细胞的生存。 展开更多
关键词 视网膜 色素上皮细胞 自由基 人参皂甙 维生素
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EPO对氧化损伤的人视网膜色素上皮细胞bcl-2表达的影响 被引量：3
2
作者 公慧敏 周占宇 +1 位作者 牛膺筠 徐静 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2007年第7期481-484,共4页
目的研究实验性氧化损伤的人视网膜色素上皮(RPE)细胞中凋亡相关基因(bcl-2)表达的变化及促红细胞生成素(EPO)对bcl-2基因表达的影响。方法制备RPE细胞氧化损伤模型,加入40U/ml的重组人促红细胞生成素(rhEPO)共同孵育,采用免疫细胞化学... 目的研究实验性氧化损伤的人视网膜色素上皮(RPE)细胞中凋亡相关基因(bcl-2)表达的变化及促红细胞生成素(EPO)对bcl-2基因表达的影响。方法制备RPE细胞氧化损伤模型,加入40U/ml的重组人促红细胞生成素(rhEPO)共同孵育,采用免疫细胞化学法检测bcl-2蛋白的表达,RT-PCR测定bcl-2mRNA的表达量。结果bcl-2在正常RPE细胞有弱表达,在氧化损伤2、8、24h其表达水平依次降低,氧化损伤组在各时间点与正常组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。EPO组bcl-2表达变化规律与氧化损伤组一致,但较氧化损伤组明显增加(P<0.05)。bcl-2mRNA表达量与bcl-2蛋白表达的变化趋势一致。结论bcl-2参与视网膜氧化损伤的机制,EPO促进bcl-2在氧化损伤的RPE细胞中的表达。 展开更多
关键词 促红细胞生成素 视网膜色素上皮细胞 氧化损伤 凋亡 BCL-2
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视网膜色素上皮细胞体外凋亡过程中钙离子平衡与caspase-3基因表达(英文) 被引量：2
3
作者 庞东渤 洪晶 《国际眼科杂志》 CAS 2011年第1期1-3,共3页
目的:研究钙通道拮抗剂-维拉帕米(verapamil,Ver)诱导视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞凋亡过程中钙离子及凋亡基因caspase-3变化。方法:应用80mg/L的Ver分别作用健康人眼RPE细胞12,24及48h诱导凋亡,设立对照组。逆... 目的:研究钙通道拮抗剂-维拉帕米(verapamil,Ver)诱导视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞凋亡过程中钙离子及凋亡基因caspase-3变化。方法:应用80mg/L的Ver分别作用健康人眼RPE细胞12,24及48h诱导凋亡,设立对照组。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测凋亡基因caspase-3的表达,采用Fluo-3/AM负载技术,MetaFluo4.5/coolsnapfx/IX70细胞内钙离子荧光成像系统测定每组20个RPE细胞钙荧光值,并计算RPE细胞内钙浓度([Ca2+]i)。结果:对照组RPE细胞Ca2+荧光分布胞核最强,胞质次之。Ver作用12,24及48h后,细胞内[Ca2+]i明显降低(P<0.01)。对照组RPE细胞可见caspase-3的mRNA有少量的表达。Ver作用12h后,可见caspase-3的mRNA有较高的表达,与对照组比较,具有显著性差异(P<0.01)。随着Ver作用时间的延长,caspase-3的mRNA表达逐渐增强,在48h时有所下降。结论:Caspase-3基因表达上调及RPE细胞内钙离子稳态失调可能在Ver诱导RPE细胞凋亡中起关键作用。 展开更多
关键词 钙离子平衡 CASPASE-3基因 Ver诱导视网膜色素上皮细胞凋亡
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α-晶状体蛋白在高糖培养人RPE细胞中的表达机制研究
4
作者 王飞 王亚冬 +2 位作者 丁颖 孙明 施晨蕾 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第2期235-238,共4页
目的:研究高糖体外培养环境下人RPE细胞的α晶状体蛋白的表达变化,并排除渗透影响因素下与正常糖浓度组进行比较。方法:对人RPE细胞(ARPE-19)在D-葡萄糖为5.5mM条件下培养和传代3周,然后按培养条件分为3组,即5.5mM葡萄糖,33mM葡萄糖,5.... 目的:研究高糖体外培养环境下人RPE细胞的α晶状体蛋白的表达变化,并排除渗透影响因素下与正常糖浓度组进行比较。方法:对人RPE细胞(ARPE-19)在D-葡萄糖为5.5mM条件下培养和传代3周,然后按培养条件分为3组,即5.5mM葡萄糖,33mM葡萄糖,5.5mM葡萄糖+27.5mM甘露醇,再分别培养12h,24h,48h后进行总蛋白和RNA提取。进而通过Western blotting对αA晶状体蛋白,αB晶状体蛋白以及凋亡相关蛋白bax,bcl-2进行检测,并通过RT-PCR检测αA-,αB-两种晶状体蛋白的mRNA水平。结果:相对于正常糖浓度组,高糖环境下αA晶状体蛋白,αB晶状体蛋白均表达明显上调,渗透变化对蛋白表达没有明显影响。高糖培养环境下,随着时间延长,bcl-2表达量明显下降,而bax表达量呈上升趋势,αA-,αB-两种晶体蛋白的mRNA变化趋势与蛋白水平一致。结论:高糖培养环境下人视网膜色素上皮细胞的αA-,αB-两种晶状体蛋白均明显表达上调。 展开更多
关键词 Α-晶状体蛋白 人视网膜色素上皮细胞 高糖 凋亡
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