CaM和p-CREB在缺氧所致大鼠心肌细胞损伤中表达的定量研究

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作者 徐新萍 王丽峰 +7 位作者 左红艳 李英俊 王水明 高亚兵 王少霞 董霁 彭瑞云 王德文 《中国体视学与图像分析》 2010年第2期195-199,共5页

目的定量研究钙调素(calmodulin,CaM)和磷酸化环腺苷酸反应元件结合蛋白(phosphorcAMP response element binding protein,p-CREB)在缺氧后大鼠心肌细胞中的表达及其意义。方法二级Wistar大鼠40只,雌雄各半,随机分为对照组和10%缺氧组,... 目的定量研究钙调素(calmodulin,CaM)和磷酸化环腺苷酸反应元件结合蛋白(phosphorcAMP response element binding protein,p-CREB)在缺氧后大鼠心肌细胞中的表达及其意义。方法二级Wistar大鼠40只,雌雄各半,随机分为对照组和10%缺氧组,将缺氧组大鼠置于本课题组设计并研制的常压低氧舱(氧浓度为10%),于缺氧后1d、3d、5d和7d活杀取心脏组织,采用免疫组化和图像分析等方法 ,定量研究CaM和p-CREB在大鼠心肌细胞中的表达。结果缺氧后1～7d,大鼠心肌细胞中CaM表达增加,其表达于缺氧后5d达高峰(P<0.01);p-CREB表达于缺氧后1～7d心肌细胞胞核中均明显增加,与对照组比,其差异均有显著性(P<0.05或0.01)。结论缺氧后大鼠心肌细胞CaM和p-CREB表达增加,可能通过影响Ca2+信号通路,参与缺氧所致心肌细胞损伤的病理生理过程。 展开更多

关键词 缺氧 大鼠 心脏 cam p-CREB

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枳实生品及麸炒品对脾虚大鼠肝组织物质能量代谢酶活性及CaMKⅡ通路CaM、CaMKⅡ蛋白表达的比较研究

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作者 林桂梅 来有雪 +2 位作者 高慧 鞠成国 单国顺 《中国民族民间医药》 2023年第24期8-13,共6页

目的:观察枳实生品及麸炒品提取液对脾虚大鼠肝组织能量代谢相关酶活性及对CaMKⅡ通路CaM、CaMKⅡ蛋白表达水平的影响。方法:SD大鼠随机分为7组,空白对照组,利血平模型组,阳性药组,枳实生品高、低剂量组及枳实麸炒品高、低剂量组。除空... 目的:观察枳实生品及麸炒品提取液对脾虚大鼠肝组织能量代谢相关酶活性及对CaMKⅡ通路CaM、CaMKⅡ蛋白表达水平的影响。方法:SD大鼠随机分为7组,空白对照组,利血平模型组,阳性药组,枳实生品高、低剂量组及枳实麸炒品高、低剂量组。除空白对照组外,其余各组均采用利血平注射制成脾虚模型。测定各组大鼠肝匀浆中物质能量代谢相关指标的活性差异,采用蛋白免疫印迹法比较研究肝组织中CaM、CaMKⅡ及p-CaMKⅡ蛋白表达差异。结果:与模型组比较,枳实麸炒品高剂量组钠钾ATP酶(Na+-K+-ATPase)活性升高;枳实麸炒品高、低剂量组钙镁ATP酶(Ca 2+-Mg 2+-ATPase)活性升高;枳实麸炒品高剂量组柠檬酸合成酶(CS)及异柠檬酸脱氢酶(ICD)均升高;枳实生品低剂量组CaM蛋白表达量升高;枳实麸炒品高剂量组CaMKⅡ表达量升高;枳实生制品高、低剂量组p-CaMKⅡ蛋白表达量均升高。结论:枳实麸炒品不论在三磷酸腺苷酶活性或是CaMK II信号通路关键分子蛋白表达方面均较生品有显著提高,说明麸炒品能更好改善脾虚大鼠症状。 展开更多

关键词 枳实 钙调蛋白 肝组织 脾气虚证

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P450cam突变体蛋白表达、纯化与结晶的改进及其四突变体(F87L/Y96F/L244A/V247A)晶体结构

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作者 刘斌斌 孙蕾 +4 位作者 徐峰 娄智勇 庞海 L.L.WONG 刘一苇 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第7期611-615,共5页

在P4 5 0cam突变体蛋白纯化过程中使用 2 80nm/ 392nm双波长比值检测蛋白质纯度 ,采用 β 巯基乙醇对蛋白质进行还原性保护 ,有效地缩短了纯化进程 ,纯化效率相应提高 .以PEG 80 0 0为沉淀剂经悬滴汽相扩散法筛选得到适合衍射的P4 5 0ca... 在P4 5 0cam突变体蛋白纯化过程中使用 2 80nm/ 392nm双波长比值检测蛋白质纯度 ,采用 β 巯基乙醇对蛋白质进行还原性保护 ,有效地缩短了纯化进程 ,纯化效率相应提高 .以PEG 80 0 0为沉淀剂经悬滴汽相扩散法筛选得到适合衍射的P4 5 0cam四突变体 (F87L/Y96F/L2 4 4A/V2 4 7A)晶体 ,在Mar Research面探测器系统上收集了0 2 2nm分辨率的X射线衍射数据 .采用同晶差值傅立叶法解析结构 ,最后的晶体学R因子和Rfree分别为 0 197和 0 2 4 7,键长偏差为 0 0 0 177nm ,键角偏差为 1 96°.结构测定显示P4 5 0cam四突变体 (F87L/Y96F/L2 4 4A/V2 4 7A)和P4 5 0cam野生型的整体构象无重大变化 ,突变后活性口袋变大而疏水性增加 ,这与突变设计预期目标一致 . 展开更多

关键词 p450cam 四突变体 纯化 双波长检测 晶体结构

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散结镇痛胶囊对PGF_(2α)诱发小鼠子宫平滑肌细胞收缩的抑制作用探讨 被引量：7

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作者 刘莉娜 吕耀中 +3 位作者 孙兰 周军 王振中 萧伟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期732-736,共5页

目的研究散结镇痛胶囊对前列腺素F_(2α)致原代小鼠子宫平滑肌细胞收缩变化的影响,初步探讨其对痛经的治疗作用。原代培养小鼠子宫平滑肌细胞并进行纯度鉴定,给药后监测动态钙离子变化,染色法观察细胞收缩的情况,免疫荧光法测定细胞钙... 目的研究散结镇痛胶囊对前列腺素F_(2α)致原代小鼠子宫平滑肌细胞收缩变化的影响,初步探讨其对痛经的治疗作用。原代培养小鼠子宫平滑肌细胞并进行纯度鉴定,给药后监测动态钙离子变化,染色法观察细胞收缩的情况,免疫荧光法测定细胞钙调蛋白(calmodulin,CaM)、肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)、磷酸化的肌球蛋白轻链2(phosphorylation of myosin light chain 2,p-MLC_(20))的蛋白表达水平。结果平滑肌肌动蛋白免疫荧光染色呈强阳性。与PGF_(2α)组比较,散结镇痛胶囊组的钙离子荧光值明显降低(P≤0.05);细胞面积明显增加(P≤0.01);CaM的蛋白表达水平明显降低(P≤0.05);MLCK的蛋白水平有下调趋势;p-MLC_(20)的蛋白表达水平明显降低(P≤0.01)。结论散结镇痛胶囊能治疗痛经,可能与其能抑制平滑肌细胞内钙离子内流,缓解细胞的收缩,降低CaM,p-MLC_(20)的蛋白表达水平有关。 展开更多

关键词 原代小鼠子宫平滑肌细胞 钙离子 细胞收缩 前列腺素F2Α cam p-MLC20

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脾气虚大鼠肝组织三磷酸腺苷酶活性和CaMKⅡ通路CaM、CaMKⅡ蛋白表达的变化 被引量：5

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作者 成映霞 段永强 +7 位作者 梁玉杰 杨晓轶 杜娟 刘靓 程卫东 朱立鸣 安耀荣 高建德 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期40-45,共6页

目的观察脾气虚大鼠肝组织三磷酸腺苷酶活性和CaMKⅡ通路关键分子[Ca2+]i以及CaM、CaMKⅡ、p-Ca MKⅡ蛋白表达水平的变化。方法受试动物随机分为4组,即空白对照组,脾气虚模型7 d、14 d、21d组,每组12只。除空白对照组外,其余受试动物采... 目的观察脾气虚大鼠肝组织三磷酸腺苷酶活性和CaMKⅡ通路关键分子[Ca2+]i以及CaM、CaMKⅡ、p-Ca MKⅡ蛋白表达水平的变化。方法受试动物随机分为4组,即空白对照组,脾气虚模型7 d、14 d、21d组,每组12只。除空白对照组外,其余受试动物采用复合法(苦寒破气法、游泳力竭法及饥饱失常法)成功建立脾气虚证大鼠模型,在观测各组大鼠一般生存状态和肝组织ATP酶活性的基础上,采用激光共聚焦技术检测肝组织细胞内[Ca2+]i浓度,蛋白免疫印迹技术检测肝组织CaM、CaMKⅡ和p-CaMKⅡ的表达变化。结果与空白组比较,脾气虚大鼠随着造模时间的延长,一般生存状况渐差,肝组织Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活性均降低(P<0.05,P<0.01);肝组织[Ca2+]i浓度和CaM、CaMKⅡ、p-Ca MK Ⅱ蛋白表达量显著降低(P<0.01);且脾气虚模型7 d、14 d、21 d组之间比较,以脾气虚21 d组变化更为显著。结论脾气虚大鼠肝组织Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性和[Ca2+]i浓度降低,并且CaMKⅡ信号通路关键分子CaM、CaMKⅡ和p-CaMKⅡ蛋白表现为低表达。 展开更多

关键词 脾气虚证 钙调蛋白 蛋白 肝组织 大鼠

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粘附分子P-选择素在胶质瘤中表达的临床意义 被引量：1

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作者 王懿 胡秉诚 +2 位作者 沈建康 李国文 陈玉英 《中国临床神经外科杂志》 2002年第4期225-227,共3页

目的 研究粘附分子P-选择素在脑胶质瘤中表达与肿瘤病理分级的关系,讨论P-选择素在脑胶质瘤预后判断中的临床意义。方法 应用抗P-选择素单抗和免疫组化技术(LSAB)分别对39例脑胶质瘤检测P-选择素的表达。结果 在39例人脑胶质瘤中P-选择... 目的 研究粘附分子P-选择素在脑胶质瘤中表达与肿瘤病理分级的关系,讨论P-选择素在脑胶质瘤预后判断中的临床意义。方法 应用抗P-选择素单抗和免疫组化技术(LSAB)分别对39例脑胶质瘤检测P-选择素的表达。结果 在39例人脑胶质瘤中P-选择素表达与肿瘤恶性程度有关,其阳性率为61.5％(24/39),其中Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤表达阳性率为76.2％(16/28),明显高于Ⅰ～Ⅱ级胶质瘤44.4％(8/81)的阳性率(P<0.05),P-选择素表达与患者性别和年龄无关。结论 P-选择素与脑胶质瘤的恶性浸润有关,对这种粘附分子的检测可能成为判断脑胶质瘤浸润生长和预后的指标。 展开更多

关键词 粘附分子 p-选择素 脑胶质瘤 免疫组化技术

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大枣中环磷酸腺苷的提取及体外抗过敏活性研究 被引量：27

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作者 王维有 曹晨晨 +5 位作者 欧赟 马秋月 王宇 周婕 任迪峰 鲁军 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期49-52,282,共5页

大枣中环磷酸腺苷(cAMP)的含量极其丰富,具有调节免疫、抑制哮喘等生理作用。本研究采用闪式提取法提取早脆王枣中的cAMP,利用大孔树脂进行纯化,并对其体外抗过敏活性进行研究。正交实验结果表明,最优提取条件为:60%乙醇、料液比1:20、... 大枣中环磷酸腺苷(cAMP)的含量极其丰富,具有调节免疫、抑制哮喘等生理作用。本研究采用闪式提取法提取早脆王枣中的cAMP,利用大孔树脂进行纯化,并对其体外抗过敏活性进行研究。正交实验结果表明,最优提取条件为:60%乙醇、料液比1:20、提取次数3次、提取时间40s,此条件下cAMP的提取率达(149.5±3.6)μg/g。纯化条件为提取液浓度20μg/mL,以1.5BV/h流速上样,上样体积70mL,以40%乙醇洗脱,流速为1BV/h。在此条件下,所获大枣cAMP提取物的纯度可达68.5%±3.4%。利用Elson-Morgan法对所获大枣cAMP提取物进行抗过敏活性评价,其透明质酸酶抑制率可达96.2%±4.1%,表明具有潜在的功能应用前景。 展开更多

关键词 大枣 环磷酸腺苷 闪式提取 抗过敏活性 Elson—Morgan法

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Cr12MoV钢三角凸轮的显微组织分析及其耐磨性能研究 被引量：2

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作者 卜小梅 杨晓豫 毛立忠 《金属热处理》 EI CAS CSCD 北大核心 1998年第2期6-9,共4页

通过对不同加工状态下Ｃｒ１２ＭｏＶ钢三角凸轮样品显微组织的观察分析，提出较合理的加工工艺和方法。随后采用化学镀ＮｉＰ对三角凸轮进行表面改性的研究，通过系统的硬度试验和耐磨性对比试验表明：ＮｉＰ化学镀表面改性后，其... 通过对不同加工状态下Ｃｒ１２ＭｏＶ钢三角凸轮样品显微组织的观察分析，提出较合理的加工工艺和方法。随后采用化学镀ＮｉＰ对三角凸轮进行表面改性的研究，通过系统的硬度试验和耐磨性对比试验表明：ＮｉＰ化学镀表面改性后，其表面维氏硬度提高４００ＨＶ以上，２ｈ的耐磨性试验后其表面磨损宽度下降１３％以上。可有效提高三角凸轮的使用寿命。还结合耐磨性试验后表面磨损形貌分析，对磨损机理进行了初步探讨。 展开更多

关键词 三角凸轮 化学镀 CR12MOV钢 显微组织 耐磨钢

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凸轮材料的表面强化及其摩擦学特性 被引量：6

9

作者 李月英 刘勇兵 陈华 《吉林大学学报（工学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第5期1064-1068,共5页

研究了汽车用铁基烧结凸轮材料在3种表面处理状态下(烧结态、激光表面淬火和高频感应淬火)的显微组织、显微硬度及其摩擦学特性。研究结果表明:经2种表面淬火后,材料的表面得到一均匀的硬化层,其组织为细针状的马氏体组织,材料表面的耐... 研究了汽车用铁基烧结凸轮材料在3种表面处理状态下(烧结态、激光表面淬火和高频感应淬火)的显微组织、显微硬度及其摩擦学特性。研究结果表明:经2种表面淬火后,材料的表面得到一均匀的硬化层,其组织为细针状的马氏体组织,材料表面的耐磨性和摩擦系数得到了显著的改善。激光淬火凸轮材料的表面摩擦学特性略优于高频淬火凸轮材料。在本试验参数范围内,随着试验载荷的提高,激光淬火铁基烧结凸轮材料的磨损机制发生转变,由轻微氧化磨损和磨粒磨损机制转化为严重氧化磨损、磨粒磨损和剥层磨损机制。 展开更多

关键词 材料表面与界面 粉末冶金 凸轮材料 表面强化 摩擦学特性

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按许用压力角设计最小尺寸的摆动从动杆盘形凸轮机构的解析法 被引量：3

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作者 常勇 王知行 马喜川 《哈尔滨商业大学学报（自然科学版）》 CAS 1999年第3期43-49,共7页

从压力角表达式出发，构造起摆杆推程与凸轮转向相同、相反两种Ｐ型摆动从动杆盘形凸轮机构的类速度图，并将图解原理与解析手段恰当、有机地结合起来，研究解决了按许用压力角设计最小尺寸的Ｐ型摆动从动杆盘形凸轮机构的理论课题。文... 从压力角表达式出发，构造起摆杆推程与凸轮转向相同、相反两种Ｐ型摆动从动杆盘形凸轮机构的类速度图，并将图解原理与解析手段恰当、有机地结合起来，研究解决了按许用压力角设计最小尺寸的Ｐ型摆动从动杆盘形凸轮机构的理论课题。文章将该方法应用于为锁合凸轮、槽道凸轮和共轭凸轮，且在文末附有设计示例。 展开更多

关键词 摆动从动杆 p型 盘形凸轮 类速度图 压力角表达式

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滚花装配式凸轮轴凸轮粉末冶金锻造及冷温精密锻造研究 被引量：6

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作者 张驰 陈华 李月英 《新技术新工艺》 2009年第8期73-76,共4页

分析了装配式凸轮轴凸轮的性能要求及设计参数,对粉末冶金锻造及冷温锻造凸轮进行了材料配比和选择,对粉末冶金凸轮的精密锻造工艺进行了重点研究,探讨了碳素钢的冷温精密锻造成型工艺。应用该技术生产滚花装配式凸轮轴的凸轮,可以节材... 分析了装配式凸轮轴凸轮的性能要求及设计参数,对粉末冶金锻造及冷温锻造凸轮进行了材料配比和选择,对粉末冶金凸轮的精密锻造工艺进行了重点研究,探讨了碳素钢的冷温精密锻造成型工艺。应用该技术生产滚花装配式凸轮轴的凸轮,可以节材、节能、降低成本、提高生产效率及产品精度。 展开更多

关键词 凸轮 精密锻造 粉末冶金 冷温锻造

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电控高压泵凸轮机构从动部异常磨损分析及试验研究 被引量：1

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作者 谭笛 欧阳光耀 吴欣颖 《车用发动机》 北大核心 2008年第B06期110-113,共4页

针对高压、高转速工况下高压泵滚轮工作表面出现异常磨损的现象,利用ANSYS软件对不同偏心轮转角下的偏心轮与滚轮进行了三维弹塑性摩擦接触有限元分析,在此基础上提出了解决方案。试验结果表明方案可行。这对提高高压泵的工作可靠性具... 针对高压、高转速工况下高压泵滚轮工作表面出现异常磨损的现象,利用ANSYS软件对不同偏心轮转角下的偏心轮与滚轮进行了三维弹塑性摩擦接触有限元分析,在此基础上提出了解决方案。试验结果表明方案可行。这对提高高压泵的工作可靠性具有重要的意义。为同类问题的解决提供了一条有效途径。 展开更多

关键词 高压泵 滚轮 磨损 有限元法 接触分析

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湖羊和美利奴羊多胎遗传差异的内分泌学基础 被引量：2

13

作者 郑亦辉 张德福 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 1992年第8期1-4,共4页

本试验研究了湖羊和美利奴羊的生殖内分泌学,旨在探测其多胎机理。用RIA(放射免疫)测定FSH(促卵泡素)、LH(促黄体素)、17β-E_2(雌二醇)、P(前列腺素)、T(甲状腺素)、CAMP(环状腺苷酸):用ELISA(酶免)测定了Calmodulin(钙调素)。结果表... 本试验研究了湖羊和美利奴羊的生殖内分泌学,旨在探测其多胎机理。用RIA(放射免疫)测定FSH(促卵泡素)、LH(促黄体素)、17β-E_2(雌二醇)、P(前列腺素)、T(甲状腺素)、CAMP(环状腺苷酸):用ELISA(酶免)测定了Calmodulin(钙调素)。结果表明生殖激素和第二信使物质均有差异,并认为这可能是湖羊多胎机理之一。 展开更多

关键词 湖羊 美利奴羊 多台 遗传差异 羊

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柱塞式两次喷油泵驱动凸轮的设计及其运动特性分析

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作者 邓飞中 《拖拉机与农用运输车》 2014年第4期52-54,58,共4页

参考一次喷油泵的设计手册,进行了两次喷油泵的驱动凸轮的改型设计,对凸轮的运动特性进行了分析,驱动凸轮能两次推动柱塞完成两次喷油的过程。

关键词 部分均质压燃 喷油泵凸轮 柱塞式二次喷油泵

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