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采用Cell-SELEX技术的核酸适配体在肿瘤靶向治疗的研究进展
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作者 成志云 陈佳怡 +3 位作者 白如玉 杨会勇 MOHSAN Ullah 刁勇 《华侨大学学报(自然科学版)》 CAS 2024年第4期439-444,共6页
阐述细胞-配体指数富集系统进化(Cell-SELEX)技术特点,以及通过该技术筛选得到的核酸适配体在肿瘤靶向治疗中的应用进展和挑战,通过查阅近年的相关文献,综述核酸适配体作为药物及药物载体在肿瘤靶向治疗中的应用研究进展。结果表明:基于... 阐述细胞-配体指数富集系统进化(Cell-SELEX)技术特点,以及通过该技术筛选得到的核酸适配体在肿瘤靶向治疗中的应用进展和挑战,通过查阅近年的相关文献,综述核酸适配体作为药物及药物载体在肿瘤靶向治疗中的应用研究进展。结果表明:基于Cell-SELEX技术筛选得到的核酸适配体在肿瘤靶向治疗中的疗效显著,可开发成为肿瘤靶向治疗的潜力药物及良好的药物载体。 展开更多
关键词 核酸适配体 细胞-配体指数富集系统进化(cell-selex)技术 肿瘤 靶向治疗
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基于Cell-SELEX技术对人B细胞淋巴瘤SU-DHL细胞适配体的筛选与构建
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作者 于文莹 王梦主 +3 位作者 杜冰洋 王昶 高丽君 夏薇 《北华大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第4期449-453,共5页
目的筛选与淋巴瘤SU-DHL-8细胞特异性结合的适配体,用于淋巴瘤的早期诊断.方法利用76 bp的随机单链DNA文库,以SU-DHL-8细胞为靶细胞、Ramos细胞为消减细胞,采用以细胞为靶标的指数富集配体系统进化(cell based systematic evolution of ... 目的筛选与淋巴瘤SU-DHL-8细胞特异性结合的适配体,用于淋巴瘤的早期诊断.方法利用76 bp的随机单链DNA文库,以SU-DHL-8细胞为靶细胞、Ramos细胞为消减细胞,采用以细胞为靶标的指数富集配体系统进化(cell based systematic evolution of ligands exponential enrichment,Cell-SELEX)技术筛选富集与靶细胞结合的适配体;利用PCR及生物素-链霉亲和素层析技术制备次级文库,经多轮筛选,最终筛选出与SU-DHL-8细胞特异性结合的适配体.结果经过11轮正向筛选及2轮反向筛选,次级ssDNA文库与SU-DHL-8细胞的亲和力逐渐增高,第12轮和第13轮的荧光曲线基本重合,说明SU-DHL-8细胞的特异适配体构建成功.结论应用Cell-SELEX技术可成功筛选出淋巴瘤SU-DHL-8细胞的特异适配体,为淋巴瘤的精确诊断和早期诊断提供依据. 展开更多
关键词 SU-DHL-8细胞 淋巴瘤 适配体 SELEX技术
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Cell-SELEX技术研究进展 被引量:2
3
作者 赵仲麟 李燕 袁超 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期52-56,共5页
适配子是通过SELEX技术,即指数富集配体系统进化技术,经反复放大筛选得到的、与目标分子有高度亲和性的分子。SELEX技术常使用纯化的靶分子,目前活细胞也可用于筛选目标,这种技术称为细胞指数富集配体系统进化技术(CellSELEX),其优点是... 适配子是通过SELEX技术,即指数富集配体系统进化技术,经反复放大筛选得到的、与目标分子有高度亲和性的分子。SELEX技术常使用纯化的靶分子,目前活细胞也可用于筛选目标,这种技术称为细胞指数富集配体系统进化技术(CellSELEX),其优点是产生的适配子可以与活细胞中的靶分子的天然构象发生作用。细胞表面的跨膜蛋白也可作为适配子的目标。此外,在不知道任何细胞表面分子的情况下也可以得到细胞特异性适配子。对Cell-SELEX技术的应用及研究进展进行综述。 展开更多
关键词 cell-selex 生物标记物 癌症研究 核酸 适配子
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Cell-SELEX筛选人骨肉瘤细胞MG-63核酸适配体的实验研究 被引量:2
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作者 翁艳 陈冬冬 +2 位作者 涂少臣 周燕芸 张韬 《福建医药杂志》 CAS 2018年第2期111-114,共4页
目的获取人骨肉瘤细胞MG-63的核酸适配体,并对核酸适配体克隆进行测序。方法通过细胞指数富集的配基系统进化(Cell-SELEX)技术建立人骨肉瘤细胞核酸适配体筛选平台,对筛选过程中的文库PCR退火温度、PCR循环扩增次数进行优化和改进,获取... 目的获取人骨肉瘤细胞MG-63的核酸适配体,并对核酸适配体克隆进行测序。方法通过细胞指数富集的配基系统进化(Cell-SELEX)技术建立人骨肉瘤细胞核酸适配体筛选平台,对筛选过程中的文库PCR退火温度、PCR循环扩增次数进行优化和改进,获取人骨肉瘤细胞MG-63的核酸适配体,并对核酸适配体克隆进行测序。结果在其他条件不变的情况下,文库PCR退火温度56.2℃、循环扩增15次能获得足量的扩增产物,挑选20个克隆进行测序,得到5条核酸适配体序列。结论应用Cell-SELEX技术可成功筛选人骨肉瘤细胞MG-63核酸适配体,为后期骨肉瘤循环肿瘤细胞的分离检测奠定实验基础。 展开更多
关键词 核酸适配体 cell-selex 人骨肉瘤细胞
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Cell-SELEX技术为基础的靶向药物递送系统研究进展
5
作者 宁宇 李章华 邹季 《生物技术通讯》 CAS 2018年第1期141-147,共7页
Cell-SELEX技术是在指数富集的配体系统进化(SELEX)技术的基础上,获取能与特定靶细胞结合的适配体的方法。将Cell-SELEX技术获得的适配体与各类药物分子或分子纳米材料等相结合构成复合物,可构建不同的靶向药物递送系统。这类药物递送... Cell-SELEX技术是在指数富集的配体系统进化(SELEX)技术的基础上,获取能与特定靶细胞结合的适配体的方法。将Cell-SELEX技术获得的适配体与各类药物分子或分子纳米材料等相结合构成复合物,可构建不同的靶向药物递送系统。这类药物递送系统利用适配体的靶向性,将药物分子等特异地递送到相应的靶细胞,从而达到诊断、治疗疾病、提高药物浓度或者降低毒副作用等目的。本文简要介绍了Cell-SELEX技术的发展现状及目前主要的靶向药物递送系统的应用。 展开更多
关键词 cell-selex 适配体 靶向药物递送系统 纳米材料
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Cell-SELEX技术在肿瘤诊治中的应用进展 被引量:4
6
作者 吕彬 张骏 +1 位作者 杜文琪 刘杰 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期227-232,238,共7页
核酸适配体是运用指数富集的配体系统进化(systematic evolution of ligand by exponential enrichment,SELEX)技术从人工体外合成的随机寡核苷酸序列库中,经过多轮筛选后得到的单链DNA或单链RNA,具有靶标广泛、制备方便、稳定性好、无... 核酸适配体是运用指数富集的配体系统进化(systematic evolution of ligand by exponential enrichment,SELEX)技术从人工体外合成的随机寡核苷酸序列库中,经过多轮筛选后得到的单链DNA或单链RNA,具有靶标广泛、制备方便、稳定性好、无免疫原性等优点。细胞SELEX(cell-SELEX)是指将整个细胞作为靶标筛选特异性DNA适配体的技术,尤其适用于肿瘤细胞的核酸适配体筛选。本文简要介绍cell-SELEX技术获得的核酸适配体在肿瘤标记发现、肿瘤成像、肿瘤治疗及与纳米材料结合后用于肿瘤靶向研究的应用进展。 展开更多
关键词 核酸适配体 cell-selex 肿瘤 纳米材料
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基于Cell-SELEX的核酸适配体在生化分析与生物成像中的应用 被引量:4
7
作者 堵玉林 莫柳婷 +2 位作者 易娅莎 邱丽萍 谭蔚泓 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1757-1765,共9页
基于Cell-SELEX的核酸适配体是指以活细胞为靶标物,通过指数富集的配基系统进化技术(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)从人工合成的DNA/RNA文库中筛选得到的单链寡核苷酸。它能够与靶标细胞高亲和性... 基于Cell-SELEX的核酸适配体是指以活细胞为靶标物,通过指数富集的配基系统进化技术(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)从人工合成的DNA/RNA文库中筛选得到的单链寡核苷酸。它能够与靶标细胞高亲和性、高特异性结合,具有分子量低、合成简单、化学稳定性好、免疫原性低、易于功能化修饰等优点,已广泛应用于生命科学研究领域。本文综述了基于Cell-SELEX技术筛选的核酸适配体在肿瘤细胞检测、分析和成像方面的研究进展,并对核酸适配体研究的发展前景和趋势进行了展望。 展开更多
关键词 核酸适配体 cell-selex 生化分析 生物成像 肿瘤细胞
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CELL-SELEX筛选膀胱癌核酸适配体的细胞学研究
8
作者 平秦榕 李翀 +4 位作者 梁剑伟 刘杨文易 雷容 王剑松 颜汝平 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2020年第7期708-714,共7页
目的基于膀胱癌标志物的早期诊断和术后复发监测方法是目前的研究热点。文中利用CELL-SELEX技术筛选出可特异性识别膀胱癌细胞系(EJ、T24、BIU87)的核酸适配体。方法以人膀胱癌细胞系EJ、T24和BIU87为阳性质控细胞,以HCV29(人正常尿路... 目的基于膀胱癌标志物的早期诊断和术后复发监测方法是目前的研究热点。文中利用CELL-SELEX技术筛选出可特异性识别膀胱癌细胞系(EJ、T24、BIU87)的核酸适配体。方法以人膀胱癌细胞系EJ、T24和BIU87为阳性质控细胞,以HCV29(人正常尿路上皮细胞系)、293T(人胚肾细胞系)、huh7(人肝癌细胞系)为阴性质控细胞,进行CELL-SELEX筛选。PCR上游引物5’端标记FITC,下游引物5’端标记Biotin,将每一轮次筛选得到的ssDNA作为模板进行PCR扩增、纯化。利用生物素-链亲和素磁珠分离法将PCR纯化产物进行分离后获得次级FITC-ssDNA用于下一轮次的筛选,流式细胞仪监测CELL-SELEX筛选进程。选取与膀胱癌细胞系EJ、T24和BIU87结合率最高轮次的ssDNA文库进行PCR扩增、产物纯化、分子克隆和测序;根据测序结果,利用Dnaman软件模拟核酸适配体的二级结构。体外合成FITC标记的适配体,流式细胞仪检测适配体与EJ、T24和BIU87的结合率。结果随着CELL-SELEX流程的推进,FITC-ssDNA与EJ、T24和BIU87细胞的结合率逐渐增加;第15轮FITC-ssDNA与EJ结合率最高,文库中apt1富集度最高;第18轮FITC-ssDNA与T24、BIU87结合率最高,文库中apt2和apt3富集度最高。DNA结构预测分析显示apt1、apt2和apt3的二级结构主要为茎环结构。流式细胞仪检测:FITC-apt1可特异性识别EJ细胞,阳性率达71.5%。FITC-apt2与T24细胞的结率明显高于BIU87细胞。FITC-apt3与BIU87细胞的结合率明显高于T24细胞。FITC-apt2可特异性识别T24细胞,阳性率达63.9%。FITC-apt3可特异性识别BIU87细胞,阳性率达74.7%。结论利用CELL-SELEX技术筛选出可识别膀胱癌细胞系的适配体。其中适配体apt1可特异性识别EJ细胞,适配体apt2可特异性识别T24细胞,适配体apt3可特异性识别BIU87细胞,为膀胱癌早期诊断和靶向治疗技术的研发提供了实验依据。 展开更多
关键词 cell-selex 膀胱癌 适配体
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结直肠癌细胞靶向适配体的Cell-SELEX筛选研究
9
作者 朱秋连 陈亦清 +5 位作者 林彩燕 陈连娣 王仲萍 邹端 谢丽珍 严鹏科 《广州医科大学学报》 2017年第6期6-10,共5页
目的:筛选特异性靶向早期结肠癌高亲和力的适配体,为结肠癌的诊断和治疗提供新的手段。方法:利用结肠癌细胞HCT116作为正筛细胞,非瘤细胞系作为反筛细胞,通过Cell-SELEX的方法筛选一组靶向结肠癌的适配体,并通过confocal和ELONA法验证... 目的:筛选特异性靶向早期结肠癌高亲和力的适配体,为结肠癌的诊断和治疗提供新的手段。方法:利用结肠癌细胞HCT116作为正筛细胞,非瘤细胞系作为反筛细胞,通过Cell-SELEX的方法筛选一组靶向结肠癌的适配体,并通过confocal和ELONA法验证特异性和亲和力。结果:得到100个靶向结肠癌细胞的适配体序列,能特异性靶向结肠癌细胞HCT116,其结合亲和力在8~22 nmol/L,其中适配体AptH8与HCT116细胞的结合Kd值为(8.81±0.36)nmol/L。结论:筛选得到的适配体能特异性靶向HCT116细胞并具有很高的亲和力,可作为进一步研究的靶分子。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 适配体 cell-selex
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基于Cell-SELEX技术的去势抵抗性前列腺癌细胞核酸适配体的筛选与鉴定 被引量:3
10
作者 仲津漫 丁健科 +3 位作者 邓蕾 向颖 刘朵朵 杨全新 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期687-692,共6页
目的利用细胞指数富集配基的系统进化技术(Cell-SELEX)筛选去势抵抗性前列腺癌(CRPC)细胞特异性核酸适配体。方法以人CRPC细胞C4-2基因组作为正筛选细胞,以激素依赖性前列腺癌细胞LNCap基因组作为负筛选细胞进行Cell-SELEX筛选。PCR上... 目的利用细胞指数富集配基的系统进化技术(Cell-SELEX)筛选去势抵抗性前列腺癌(CRPC)细胞特异性核酸适配体。方法以人CRPC细胞C4-2基因组作为正筛选细胞,以激素依赖性前列腺癌细胞LNCap基因组作为负筛选细胞进行Cell-SELEX筛选。PCR上游引物的5’端标记FITC,下游引物的5’端标记生物素,将每一轮次筛选得到的DNA产物为模板进行PCR扩增、纯化。用生物素-链霉亲和素磁珠分离法将PCR产物分离后获得的产物用于下一轮次的筛选,用流式细胞仪监测Cell-SELEX筛选进程;将最后一轮次筛选所得的DNA产物行PCR扩增纯化、克隆及测序,预测核酸适配体的二级结构,计算适配体的平衡解离常数。用流式细胞术、细胞免疫荧光及组织免疫荧光检测适配体对CRPC组织细胞的特异性结合。结果随着Cell-SELEX的筛选进程,DNA产物与CRPC细胞的结合率逐渐增加,至第14轮达到最高。DNA结构预测分析显示,核酸适配体CRPC-1和CRPC-2的二级结构主要为茎环结构。流式细胞术和细胞免疫荧光实验显示,CRPC-1和CRPC-2可特异性靶向CRPC细胞C4-2;组织免疫荧光实验显示,CRPC-1能特异性识别并结合CRPC组织。结论Cell-SELEX可筛选CRPC细胞特异性核酸适配体,对靶向诊断技术的研发和及时调整临床治疗方案、改善患者预后具有重要意义。 展开更多
关键词 前列腺癌 去势抵抗性前列腺癌 细胞SELEX 适配体
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cell-SELEX筛选的适配子在肿瘤诊断和治疗中的应用 被引量:1
11
作者 吴红艳 汪付兵 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期93-96,共4页
抗肿瘤治疗发展迅速,但仍然存在许多问题,例如早期诊断困难及化疗的副反应。为解决这些问题,适配子、包括单链DNA或RNA寡核苷酸受到越来越多的关注。适配子具有高度选择性、亲和力及稳定性。通过指数富集细胞配体系统进化技术(cell-SEL... 抗肿瘤治疗发展迅速,但仍然存在许多问题,例如早期诊断困难及化疗的副反应。为解决这些问题,适配子、包括单链DNA或RNA寡核苷酸受到越来越多的关注。适配子具有高度选择性、亲和力及稳定性。通过指数富集细胞配体系统进化技术(cell-SELEX)筛选到的寡核苷酸在识别病变细胞方面具有很大优势,因此,它具有应用于诊断和治疗的巨大潜力。该文综述了适配子在生物标记物的发现、肿瘤细胞富集和检测、靶向肿瘤治疗中的作用。 展开更多
关键词 cell-selex 适配子 靶向肿瘤治疗
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Cell-SELEX技术在肿瘤研究中的应用
12
作者 梁惠玉 高宇博 张兴梅 《生命的化学》 CAS CSCD 2013年第2期106-110,共5页
基于细胞的指数富集配基系统进化(cell-based systematic evolution of ligands by exponentialenrichment,cell-SELEX)是一项筛选能特异识别靶细胞的适配子的技术。适配子是以高度特异性及亲合力结合靶标的单链RNA或DNA分子,在生命医... 基于细胞的指数富集配基系统进化(cell-based systematic evolution of ligands by exponentialenrichment,cell-SELEX)是一项筛选能特异识别靶细胞的适配子的技术。适配子是以高度特异性及亲合力结合靶标的单链RNA或DNA分子,在生命医学的许多领域具有广阔的应用前景。因此有必要综述cell-SELEX技术及其适配子在肿瘤生物标记发现、细胞分子识别、诊断和治疗中的应用。 展开更多
关键词 cell-selex 适配子 肿瘤研究
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基于cell-SELEX的核酸适配体-纳米材料复合物用于癌细胞检测研究进展 被引量:1
13
作者 孔荣梅 陈卓 +2 位作者 叶茂 张晓兵 谭蔚泓 《中国科学:化学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1659-1659,共1页
发展高灵敏、高选择性的癌细胞检测方法是实现癌症的早期诊断和治疗的关键.基于cell-SELEX(指数富集配体系统进化法)新技术筛选出的核酸适配体,因其对癌细胞的高亲和力和高特异性,以及体积小、免疫原性小、易于进行化学修饰等优点,已被... 发展高灵敏、高选择性的癌细胞检测方法是实现癌症的早期诊断和治疗的关键.基于cell-SELEX(指数富集配体系统进化法)新技术筛选出的核酸适配体,因其对癌细胞的高亲和力和高特异性,以及体积小、免疫原性小、易于进行化学修饰等优点,已被广泛应用于癌细胞的检测.此外,核酸适配体与纳米材料,包括金属纳米粒子、量子点、纳米二氧化硅和碳纳米材料等结合后,将会增强其对癌细胞的识别能力.本文综述了近年来基于cell-SELEX技术筛选出的核酸适配体与纳米材料结合所形成的复合物作为新型分子工具用于增强癌细胞识别和检测的研究进展,并对此领域的未来发展作了展望. 展开更多
关键词 cell-selex 核酸适配体 纳米材料 癌细胞 识别
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基于Cell-SELEX技术鉴别肿瘤标志物的研究进展
14
作者 赵一帆 孙洋 +3 位作者 张慧 韩冬梅 李江林 叶茂 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期3598-3604,共7页
新的肿瘤标志物的鉴别对推进研究肿瘤发生发展机制以及早期诊断具有极其重要的意义。而基于Cell-SELEX(细胞指数富集配体系统进化)方法得到的核酸适体具有特异性区分肿瘤细胞、非肿瘤细胞以及肿瘤干细胞、不同分化程度的肿瘤细胞的特... 新的肿瘤标志物的鉴别对推进研究肿瘤发生发展机制以及早期诊断具有极其重要的意义。而基于Cell-SELEX(细胞指数富集配体系统进化)方法得到的核酸适体具有特异性区分肿瘤细胞、非肿瘤细胞以及肿瘤干细胞、不同分化程度的肿瘤细胞的特性。本篇概述了近年来基于Cell-SELEX技术筛选得到的核酸适体进行肿瘤标志物鉴别的系统方法,探讨了Cell-SELEX技术用于鉴别潜在肿瘤标志物的可行性,回顾了近年来基于该方法鉴别肿瘤标志物的发展进程,并总结了目前此方法面临的困难与挑战及可能的改善方法。 展开更多
关键词 肿瘤标志物 cell-selex 核酸适体
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基于Cell-SELEX的核酸适体在肿瘤中的应用研究进展
15
作者 林薇 孙洋 +1 位作者 龙禹乾 叶茂 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期4556-4561,共6页
核酸适体是运用指数富集的配体系统进化(systematic evolution of ligand and byexponential enrichment,SELEX)技术从人工体外合成的随机寡核苷酸序列库中,经过多轮筛选后得到的单链DNA或RNA,具有识别靶标范围广、亲和力高和稳定性好... 核酸适体是运用指数富集的配体系统进化(systematic evolution of ligand and byexponential enrichment,SELEX)技术从人工体外合成的随机寡核苷酸序列库中,经过多轮筛选后得到的单链DNA或RNA,具有识别靶标范围广、亲和力高和稳定性好等优势。Cell-SELEX技术是指将整个细胞作为靶标筛选特异性核酸适体的技术,近年来已经广泛应用于肿瘤细胞特异的核酸适体筛选。本研究综述了Cell-SELEX技术的筛选过程以及通过cell-SELEX技术产生的核酸适体在肿瘤标志物、肿瘤靶向治疗和循环肿瘤细胞的识别与检测等方面的应用研究进展。 展开更多
关键词 cell-selex 核酸适体 肿瘤
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核酸适配体在肿瘤学中的应用研究进展 被引量:3
16
作者 胡燕 杨先达 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第3期345-348,共4页
核酸适配体是一类通过指数级富集的配体进化技术(SELEX)获得的能以较高的亲和力与各类生物靶标特异性相结合的单链DNA或RNA。利用细胞-SELEX(Cell-SELEX)技术筛选出来的核酸适配体越来越多的作为靶向分子应用在肿瘤细胞检测、靶向药物... 核酸适配体是一类通过指数级富集的配体进化技术(SELEX)获得的能以较高的亲和力与各类生物靶标特异性相结合的单链DNA或RNA。利用细胞-SELEX(Cell-SELEX)技术筛选出来的核酸适配体越来越多的作为靶向分子应用在肿瘤细胞检测、靶向药物载体和siRNA的研究中。体内外研究证明,核酸适配体作为靶向分子能用于肿瘤细胞的体外检测和肿瘤组织的体内成像,并能显著提高药物或siRNA对肿瘤细胞的杀伤作用。 展开更多
关键词 核酸适配体 cell-selex 肿瘤细胞检测 靶向药物载体 SIRNA
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人骨肉瘤细胞适配体的早期筛选
17
作者 王华 梁骥 +4 位作者 高远 孙娜 马艳 高丽君 夏薇 《北华大学学报(自然科学版)》 CAS 2015年第3期311-315,共5页
目的体外随机合成单链寡核苷酸备选文库,以骨肉瘤U-2 OS完整细胞作为靶点,筛选出与其结合的高特异性、高亲和性单链DNA(ss DNA).方法将体外合成随机碱基序列的单链DNA文库与人骨肉瘤U-2 OS细胞相结合,收获与靶细胞结合的单链DNA,通过优... 目的体外随机合成单链寡核苷酸备选文库,以骨肉瘤U-2 OS完整细胞作为靶点,筛选出与其结合的高特异性、高亲和性单链DNA(ss DNA).方法将体外合成随机碱基序列的单链DNA文库与人骨肉瘤U-2 OS细胞相结合,收获与靶细胞结合的单链DNA,通过优化PCR条件进行大量扩增后,应用生物素-链霉亲和素亲和层析柱分离出正链DNA.结果以10,14以及18个循环时扩增ds DNA产物最理想;应用生物素-链霉亲和素磁珠分离法制备的正链ss DNA纯度高,可有效保证次级文库的筛选.结论应用Cell-SELEX技术可成功筛选早期ss DNA文库,为后续获得针对人骨肉瘤U-2 OS细胞的高特异性适配体奠定实验基础. 展开更多
关键词 人骨肉瘤 cell-selex技术 适配体
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适配子在肿瘤研究中的应用进展
18
作者 甘晓云 伍锡栋 +1 位作者 刘涛 张五萍 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第7期979-981,共3页
在20世纪90年代初,美国的Tuerk等在实验室中发明了一种叫做指数富集配基的系统进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)技术,由此技术筛选出来的寡核苷酸命名为适配子(aptamers)。适配子可以和抗体... 在20世纪90年代初,美国的Tuerk等在实验室中发明了一种叫做指数富集配基的系统进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)技术,由此技术筛选出来的寡核苷酸命名为适配子(aptamers)。适配子可以和抗体媲美,甚至优于抗体。 展开更多
关键词 适配子 cell-selex 肿瘤 应用
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探索人高转移胃癌细胞HGC-27适配体的靶标蛋白 被引量:1
19
作者 刘浩波 刘涛 +1 位作者 王亚雷 罗昭锋 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第10期1570-1573,共4页
目的探索可以特异性识别高转移胃癌细胞(HGC-27)的核酸适配体LW-25的靶标蛋白。方法合成已知的可以特异性识别HGC-27而不识别无转移能力的胃腺癌细胞的LW-25。首先,通过胰蛋白酶消化细胞来确定核酸适配体结合的靶标类型是蛋白质,然后通... 目的探索可以特异性识别高转移胃癌细胞(HGC-27)的核酸适配体LW-25的靶标蛋白。方法合成已知的可以特异性识别HGC-27而不识别无转移能力的胃腺癌细胞的LW-25。首先,通过胰蛋白酶消化细胞来确定核酸适配体结合的靶标类型是蛋白质,然后通过裂解细胞提取出蛋白质。用核酸适配体介导的亲和富集实验富集出LW-25所结合的蛋白,经电泳分离后,找到潜在靶标蛋白所在的差异条带。最后利用质谱技术分析差异条带内的蛋白质,通过分析比对质谱结果得到潜在的靶标蛋白。结果十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)找到差异条带,经质谱分析,不含POU结构域的八聚核苷酸结合蛋白(p54nrb/NONO)在核酸适配体LW-25样品组中量极高,在文库对照样品组中蛋白量很少,在琼脂糖凝胶珠样品组中几乎没有,因此判定NONO是最明显的差异蛋白。结论NONO是LW-25潜在的靶标蛋白并很可能是引起胃癌转移的重要蛋白。 展开更多
关键词 cell-selex 核酸适配体 胃癌 转移 靶标蛋白
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慢性髓细胞性白血病K562细胞适体的筛选与鉴定 被引量:9
20
作者 刘玲玲 韩跃武 +4 位作者 祝凯华 李真真 韩亚萍 路艳 王春霞 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第13期1157-1160,共4页
目的:筛选并鉴定出慢性髓细胞性白血病(CML)K562细胞的寡核苷酸适体.方法:体外合成长度为88个碱基的随机单链DNA(ssDNA)文库,采用生物素-链霉亲和素磁珠法制备次级文库,以正常人血液中提取的中性粒细胞为反筛细胞,利用指数富集的配基系... 目的:筛选并鉴定出慢性髓细胞性白血病(CML)K562细胞的寡核苷酸适体.方法:体外合成长度为88个碱基的随机单链DNA(ssDNA)文库,采用生物素-链霉亲和素磁珠法制备次级文库,以正常人血液中提取的中性粒细胞为反筛细胞,利用指数富集的配基系统进化(SELEX)技术筛选出与CMLK562细胞特异结合的适体.将筛选得到的适体回收纯化后连接pGEM-T质粒载体,经蓝白筛选后,随机挑选24个克隆子进行序列测定.采用荧光标记引物法检测ssDNA文库与K562细胞的亲和力,并用Clustal 2.05和DNA sis V2.5软件对适体序列进行一级结构同源性分析和二级结构预测.结果:经过13轮循环筛选,CML K562细胞适体的A值从0.12上升到1.25,至第13轮A值无明显增高.一级结构分析无同源序列,但可分为6个家族,其中5个家族各自具有保守序列,家族6无保守序列.二级结构分析表明,适体形成的茎环、凸环结构可能是与K562细胞特异性结合的结构基础.结论:利用SELEX技术成功筛选出高亲和性的CML K562细胞适体. 展开更多
关键词 白血病 髓样 慢性 K562细胞 SELEX 适体
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