目的探讨血清丛生蛋白(Clusterin)及趋化因子受体5(CCR5)在慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure,ACLF)患者中的表达以及两者联合检测对ACLF患者预后的预测价值。方法选取2018年1月~2020年12月唐山市传染病医院收治的84例ACL...目的探讨血清丛生蛋白(Clusterin)及趋化因子受体5(CCR5)在慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure,ACLF)患者中的表达以及两者联合检测对ACLF患者预后的预测价值。方法选取2018年1月~2020年12月唐山市传染病医院收治的84例ACLF患者作为观察组,同期选择在该院体检的80例健康体检者作为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定患者血清中Clusterin和CCR5水平;根据患者预后28天情况,将其分为存活组(n=48)和死亡组(n=36)。采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析血清Clusterin与CCR5联合检测对ACLF患者预后的预测价值;Spearman相关性分析血清Clusterin和CCR5水平与终末期肝病模型(model for end-stage liver disease,MELD)评分、慢性肝衰竭-序贯器官衰竭评分(chronic liver failure-sequential organ failure assessment,CLIF-SOFA)的相关性;采用多因素Logistic回归分析ACLF患者预后的影响因素。结果与对照组相比,观察组Clusterin(87.37±9.99μg/ml vs 104.85±15.14μg/ml)及CCR5(11.55±2.86μg/ml vs 15.68±3.01μg/ml)水平降低,差异具有统计学意义(t=8.767,9.010,均P<0.05)。与存活组相比,死亡组Clusterin(77.40±9.26μg/ml vs94.85±10.54μg/ml)及CCR5(8.58±1.98μg/ml vs 13.78±3.52μg/ml)水平降低,差异具有统计学意义(t=7.904,7.962,均P<0.05)。ROC曲线显示,血清Clusterin与CCR5联合预测的曲线下面积(area under curve,AUC)(0.927)最大,其敏感度和特异度分别为88.90%和83.30%。经Spearman相关性分析Clusterin与MELD,CLIF-SOFA评分呈负相关(r=-0.524,-0.457,均P<0.05),CCR5与MELD,CLIF-SOFA评分呈负相关(r=-0.611,-0.358,均P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,血清Clusterin,CCR5及IL-6为ACLF患者预后不良的影响因素(均P<0.05)。结论Clusterin及CCR5在ACLF患者血清中表达下调,且联合检测二者在预测ACLF患者短期预后方面具有良好的参考价值。展开更多
目的通过RNA干扰技术抑制卵巢癌SKOV3细胞分泌型clusterin(sCLU)基因的表达,研究其对卵巢癌细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法通过脂质体介导靶向sCLU基因的siRNA转染卵巢癌SKOV3细胞,实验分为4组:实验组(sCLU-siRNA+脂质体)、阴性...目的通过RNA干扰技术抑制卵巢癌SKOV3细胞分泌型clusterin(sCLU)基因的表达,研究其对卵巢癌细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法通过脂质体介导靶向sCLU基因的siRNA转染卵巢癌SKOV3细胞,实验分为4组:实验组(sCLU-siRNA+脂质体)、阴性对照组Ⅰ(negative control siRNA+脂质体)、阴性对照组Ⅱ(sCLU-siRNA)、空白对照组(等体积的完全培养液)。RT-PCR和蛋白质印迹分析法检测sCLU表达;利用MTT法、Transwell小室体外侵袭实验及流式细胞仪AnnexinⅤ/PI法检测评价sCLU基因抑制后对卵巢癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。结果靶向sCLU基因的siRNA明显、特异性地抑制了sCLU mRNA和蛋白的表达水平;MTT实验结果显示实验组细胞增殖能力较各对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪AnnexinⅤ/PI法检测结果显示实验组细胞凋亡率较各对照组明显升高,达到(15.84±1.53)%,较空白对照组升高了约9%,差异有统计学意义(P<0.01)。侵袭实验结果提示实验组细胞侵袭能力受到明显抑制,实验组穿膜细胞数量为(26.52±6.22)个/视野,较各对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 sCLU基因沉默明显抑制了卵巢癌SKOV3细胞的增殖、侵袭能力,并增加了其凋亡率,sCLU基因有望成为卵巢癌治疗的新靶点。展开更多
文摘目的探讨血清丛生蛋白(Clusterin)及趋化因子受体5(CCR5)在慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure,ACLF)患者中的表达以及两者联合检测对ACLF患者预后的预测价值。方法选取2018年1月~2020年12月唐山市传染病医院收治的84例ACLF患者作为观察组,同期选择在该院体检的80例健康体检者作为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定患者血清中Clusterin和CCR5水平;根据患者预后28天情况,将其分为存活组(n=48)和死亡组(n=36)。采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析血清Clusterin与CCR5联合检测对ACLF患者预后的预测价值;Spearman相关性分析血清Clusterin和CCR5水平与终末期肝病模型(model for end-stage liver disease,MELD)评分、慢性肝衰竭-序贯器官衰竭评分(chronic liver failure-sequential organ failure assessment,CLIF-SOFA)的相关性;采用多因素Logistic回归分析ACLF患者预后的影响因素。结果与对照组相比,观察组Clusterin(87.37±9.99μg/ml vs 104.85±15.14μg/ml)及CCR5(11.55±2.86μg/ml vs 15.68±3.01μg/ml)水平降低,差异具有统计学意义(t=8.767,9.010,均P<0.05)。与存活组相比,死亡组Clusterin(77.40±9.26μg/ml vs94.85±10.54μg/ml)及CCR5(8.58±1.98μg/ml vs 13.78±3.52μg/ml)水平降低,差异具有统计学意义(t=7.904,7.962,均P<0.05)。ROC曲线显示,血清Clusterin与CCR5联合预测的曲线下面积(area under curve,AUC)(0.927)最大,其敏感度和特异度分别为88.90%和83.30%。经Spearman相关性分析Clusterin与MELD,CLIF-SOFA评分呈负相关(r=-0.524,-0.457,均P<0.05),CCR5与MELD,CLIF-SOFA评分呈负相关(r=-0.611,-0.358,均P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,血清Clusterin,CCR5及IL-6为ACLF患者预后不良的影响因素(均P<0.05)。结论Clusterin及CCR5在ACLF患者血清中表达下调,且联合检测二者在预测ACLF患者短期预后方面具有良好的参考价值。
文摘目的通过RNA干扰技术抑制卵巢癌SKOV3细胞分泌型clusterin(sCLU)基因的表达,研究其对卵巢癌细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法通过脂质体介导靶向sCLU基因的siRNA转染卵巢癌SKOV3细胞,实验分为4组:实验组(sCLU-siRNA+脂质体)、阴性对照组Ⅰ(negative control siRNA+脂质体)、阴性对照组Ⅱ(sCLU-siRNA)、空白对照组(等体积的完全培养液)。RT-PCR和蛋白质印迹分析法检测sCLU表达;利用MTT法、Transwell小室体外侵袭实验及流式细胞仪AnnexinⅤ/PI法检测评价sCLU基因抑制后对卵巢癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。结果靶向sCLU基因的siRNA明显、特异性地抑制了sCLU mRNA和蛋白的表达水平;MTT实验结果显示实验组细胞增殖能力较各对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪AnnexinⅤ/PI法检测结果显示实验组细胞凋亡率较各对照组明显升高,达到(15.84±1.53)%,较空白对照组升高了约9%,差异有统计学意义(P<0.01)。侵袭实验结果提示实验组细胞侵袭能力受到明显抑制,实验组穿膜细胞数量为(26.52±6.22)个/视野,较各对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 sCLU基因沉默明显抑制了卵巢癌SKOV3细胞的增殖、侵袭能力,并增加了其凋亡率,sCLU基因有望成为卵巢癌治疗的新靶点。
