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Establishment of Event-specific Qualitative PCR Method for Genetically Modified Soybean MON 89788 被引量:4
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作者 李飞武 李葱葱 +2 位作者 董立明 邢珍娟 张明 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2010年第3期82-86,共5页
[Objective] The aim was to establish an event-specific qualitative PCR method for transgenic soybean MON89788.[Method] Firstly,the 3′-junction sequence between host plant DNA and integrated DNA of transgenic MON89788... [Objective] The aim was to establish an event-specific qualitative PCR method for transgenic soybean MON89788.[Method] Firstly,the 3′-junction sequence between host plant DNA and integrated DNA of transgenic MON89788 soybean was isolated using thermal asymmetric interlaced-PCR (TAIL-PCR),and the specific PCR primers were designed based on the 3′-junction sequence.Secondly,the specificity and sensitivity of the qualitative PCR detection methods employing these primers were tested.[Result] 1 142-bp 3′-junction sequence was obtained.According to the sequence,event-specific qualitative PCR method was established,amplifying a 170-bp product specifically from MON89788 event,and the limit of detection was 0.05%,approximately 40 initial template copies.[Conclusion] The method was highly specific,sensitive,and suitable for detection of MON89788 event. 展开更多
关键词 Transgenic soybean MON89788 event qualitative pcr 3′-junction sequence
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抗逆大豆IND-ØØ41Ø-5转化体特异性定性PCR检测方法的建立及其标准化
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作者 肖芳 李允静 +5 位作者 武玉花 李俊 高鸿飞 翟杉杉 吴刚 梁晋刚 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1148-1156,共9页
抗逆大豆IND-ØØ41Ø-5已经批准获得我国进口用作加工原料的安全证书,含有外源HaHB4基因和bar标记基因。本研究根据抗逆大豆IND-ØØ41Ø-5转化体5′端和3′端插入位点旁侧序列信息,设计19对引物,结合罗萨里... 抗逆大豆IND-ØØ41Ø-5已经批准获得我国进口用作加工原料的安全证书,含有外源HaHB4基因和bar标记基因。本研究根据抗逆大豆IND-ØØ41Ø-5转化体5′端和3′端插入位点旁侧序列信息,设计19对引物,结合罗萨里奥农业生物技术学院公司的1对引物,针对20对引物组合利用定性PCR技术进行引物特异性筛选,结果显示5′端的14号引物特异性良好,优化后获得最佳反应体系和反应程序;经测试,该引物特异性好、稳定性高,检出限达0.1%,扩增片段大小248 bp。经8家有资质实验室对本方法的特异性、检出限、重复性和再现性进行验证,各项参数均达到国家标准要求。本研究成功建立了抗逆大豆IND-ØØ41Ø-5转化体定性PCR检测方法,为IND-ØØ41Ø-5转化体在国内的安全监管提供技术支撑。 展开更多
关键词 转基因 抗逆大豆IND-ØØ41Ø-5 转化体特异性 定性pcr
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基于荧光PCR方法鉴定市售烧烤羊肉制品的动物源性成分 被引量:1
3
作者 刘杰 孔庆岩 +3 位作者 庞婕 吴亮 胥小荣 董建锋 《食品安全导刊》 2024年第3期62-64,共3页
在食品安全问题中肉制品掺假现象时有发生,烧烤羊肉制品又易于掺假,本文通过实时荧光PCR法对C市市区随机抽取的54份市售烧烤羊肉制品进行羊源性成分、猪源性成分、鸡源性成分和鸭源性成分的定性分析。结果发现,C市市区销售的烧烤羊肉制... 在食品安全问题中肉制品掺假现象时有发生,烧烤羊肉制品又易于掺假,本文通过实时荧光PCR法对C市市区随机抽取的54份市售烧烤羊肉制品进行羊源性成分、猪源性成分、鸡源性成分和鸭源性成分的定性分析。结果发现,C市市区销售的烧烤羊肉制品中存在用鸭肉和猪肉冒充羊肉的现象。从样品来源方面进行分析,餐馆所售卖的烧烤羊肉制品较为可靠,其次是大排档,而路边摊所售卖的烧烤羊肉制品需要引起注意,建议监管部门加强对路边摊烧烤羊肉制品的监管,希望通过此次调查研究,为市场监管部门提供监管依据,促进市场健康发展,保护消费者的合法权益。 展开更多
关键词 荧光pcr 烧烤羊肉 动物源性成分 定性分析
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PC饮用水桶中粪链球菌快速定性检测实时荧光PCR方法的建立
4
作者 赵彤彤 李娜 +6 位作者 王一村 郗丹 张宇鑫 高静静 周莉莉 王智 温展 《齐鲁工业大学学报》 CAS 2024年第4期55-59,共5页
开发了一种针对PC饮用水桶中粪链球菌快速定性检测的实时荧光PCR方法,该方法基于粪链球菌23S rDNA基因序列,使用特异性引物和探针进行扩增和检测。对其特异性和重复性进行评估,并分别应用该方法和国标方法对PC饮用水桶样品进行了检测。... 开发了一种针对PC饮用水桶中粪链球菌快速定性检测的实时荧光PCR方法,该方法基于粪链球菌23S rDNA基因序列,使用特异性引物和探针进行扩增和检测。对其特异性和重复性进行评估,并分别应用该方法和国标方法对PC饮用水桶样品进行了检测。结果表明,该方法能够对PC饮用水桶中粪链球菌进行快速定性检测,可有效缩短检测时间并减少实验操作,具有较高的特异性和重复性。 展开更多
关键词 PC饮用水桶 桶装饮用水 粪链球菌 快速定性检测 实时荧光pcr
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转基因玉米ND207转化事件特异性定性PCR检测方法及其标准化 被引量:2
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作者 常丽娟 梁晋刚 +6 位作者 宋君 刘文娟 付成平 代晓航 王东 魏超 熊梅 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1818-1828,共11页
转基因玉米ND207是中国农业大学研发的转mCry1Ab和mCry2Ab基因的抗虫玉米,本研究的目的是建立ND207转化事件特异性定性PCR检测方法。根据研发者提供的引物进行PCR扩增,PCR产物测序分析,获得了5’端旁侧序列262 bp,包括109 bp的载体序列... 转基因玉米ND207是中国农业大学研发的转mCry1Ab和mCry2Ab基因的抗虫玉米,本研究的目的是建立ND207转化事件特异性定性PCR检测方法。根据研发者提供的引物进行PCR扩增,PCR产物测序分析,获得了5’端旁侧序列262 bp,包括109 bp的载体序列和153 bp的玉米基因组序列, 3’端旁侧序列316 bp,包括76 bp的载体序列和240bp的玉米基因组序列。针对两端旁侧序列设计14条引物,组成25对引物组合进行引物筛选,选中3’端一对最佳引物优化PCR反应体系及反应条件,建立ND207的转化事件特异性定性PCR检测方法, PCR产物片段大小为166 bp。经过测试,该方法的检出限为0.1%,相当于20个拷贝的ND207特异分子片段。国内8家转基因生物安全检测机构对本方法进行了特异性测试、检出限测试和再现性测试,循环验证报告显示:该方法符合国家标准方法的各项要求,可在检测行业推广应用。ND207转化事件特异性定性PCR检测方法的建立,为我国ND207及其衍生品系的安全监管提供技术支撑。 展开更多
关键词 转基因玉米 ND207 旁侧序列 转化事件特异性 定性pcr
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转基因玉米MON87419实时荧光PCR定性检测方法的建立
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作者 李凌燕 肖冰 +4 位作者 王颢潜 乌兰 邓志峰 陈红 梁晋刚 《种子》 北大核心 2023年第8期16-20,共5页
转基因玉米MON87419是孟山都远东有限公司研发的转化体,转入了dom和pat基因,能够耐受麦草畏和草铵膦两种除草剂。本研究以转基因耐除草剂玉米MON874193′端特异性序列为靶标设计引物和探针,经特异性测试、体系优化、灵敏度测试及检出限(... 转基因玉米MON87419是孟山都远东有限公司研发的转化体,转入了dom和pat基因,能够耐受麦草畏和草铵膦两种除草剂。本研究以转基因耐除草剂玉米MON874193′端特异性序列为靶标设计引物和探针,经特异性测试、体系优化、灵敏度测试及检出限(LOD)测试,建立了MON87419的实时荧光PCR定性检测方法。结果表明,该方法能检测出转基因耐除草剂玉米MON87419转化体成分,具有稳定性好、特异性强、灵敏度高的特点,检出限可达0.05%。该方法主要技术参数全部符合相关标准的要求,可为转基因玉米的安全监管提供有效的技术支撑。 展开更多
关键词 耐除草剂玉米 MON87419 定性pcr 实时荧光pcr 安全监管
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耐盐转基因大豆事件AtARA6-A001外源插入片段侧翼序列及其应用
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作者 孙星邈 侯云龙 +3 位作者 王英哲 关诗宇 邱红梅 张玲 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期29-34,共6页
转基因大豆AtARA6-A001事件采用农杆菌介导大豆遗传转化法获得,其受体为沈农9号,具有耐盐特性,目前已经进入环境释放阶段。为明确该转基因大豆材料的分子特征及其转基因检测方法,推进该转基因事件生物安全评价工作。本研究以转基因大豆A... 转基因大豆AtARA6-A001事件采用农杆菌介导大豆遗传转化法获得,其受体为沈农9号,具有耐盐特性,目前已经进入环境释放阶段。为明确该转基因大豆材料的分子特征及其转基因检测方法,推进该转基因事件生物安全评价工作。本研究以转基因大豆AtARA6-A001为研究对象,利用Southern杂交方法及基因组重测序技术鉴定了外源基因的拷贝数及插入位点的位置和方向。同时利用PCR扩增技术获得了外源T-DNA的左右侧翼序列,并基于左右旁侧序列,建立了转AtARA6基因耐盐大豆A001事件的特异性定性PCR检测方法。此方法能特异性检测转基因大豆植株AtARA6-A001根、茎、叶、花和种子样品,并且能够特异性识别转基因大豆事件的身份,这为后续转基因大豆及其产品的检测和监管提供技术支持。 展开更多
关键词 大豆 转基因 侧翼序列 重测序 定性pcr检测
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转基因大豆MON89788转化体特异性定性PCR检测 被引量:17
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作者 李飞武 李葱葱 +2 位作者 董立明 邢珍娟 张明 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第13期6679-6682,共4页
[目的]建立MON89788大豆转化体特异性定性PCR检测方法。[方法]利用TAIL-PCR技术分离MON89788大豆的3′端旁侧序列,据此序列设计特异性引物进行PCR检测,并对该方法的特异性和灵敏度进行测试。[结果]获得了1142bp的3′端旁侧序列;依据该... [目的]建立MON89788大豆转化体特异性定性PCR检测方法。[方法]利用TAIL-PCR技术分离MON89788大豆的3′端旁侧序列,据此序列设计特异性引物进行PCR检测,并对该方法的特异性和灵敏度进行测试。[结果]获得了1142bp的3′端旁侧序列;依据该序列建立的PCR检测方法能特异性从MON89788大豆中扩增出170bp的产物,检测灵敏度达到0.05%,约为40个起始模板拷贝。[结论]该研究建立的方法特异性强、灵敏度高,可适用于MON89788大豆检测。 展开更多
关键词 转基因大豆 MON89788转化体 定性pcr
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转Cry1Ab基因水稻分子特征及其特异性PCR检测方法 被引量:8
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作者 汪小福 陈笑芸 +5 位作者 张小明 周育 张焕春 缪青梅 方敬 徐俊锋 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期208-214,共7页
转Cry1Ab基因水稻Bt01为一种新型的转基因水稻,文章首先利用Southern blotting验证了外源基因Cry1Ab转入了Bt01中,且为单拷贝,再利用TAIL-PCR方法获得了其插入位点信息,根据获得的Bt01的5′端插入位点序列,设计了相应的定性与定量PCR检... 转Cry1Ab基因水稻Bt01为一种新型的转基因水稻,文章首先利用Southern blotting验证了外源基因Cry1Ab转入了Bt01中,且为单拷贝,再利用TAIL-PCR方法获得了其插入位点信息,根据获得的Bt01的5′端插入位点序列,设计了相应的定性与定量PCR检测体系的引物及探针,实验结果显示,定性PCR检测体系的最低检测极限(LOD)为10个拷贝,定量PCR检测体系的LOD为5拷贝,最低定量极限(LOQ)为10拷贝。同时为了验证建立的定量PCR体系的准确性,利用该体系检测已知转基因水稻Bt01含量分别为3%和0.5%的样品,定量结果分别为2.7%和0.47%。研究结果表明,该转化体特异性定性与定量检测方法具有高度的特异性和良好的灵敏性,为转基因水稻Bt01的身份识别和检测提供了有效的方法。 展开更多
关键词 分子特征 转基因 CRY1AB 定性与定量pcr 特异性检测
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转基因玉米MON88017旁侧序列分析及定性PCR检测 被引量:18
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作者 袁磊 孙红炜 +3 位作者 杨崇良 尚佑芬 路兴波 赵蕾 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期361-364,共4页
采用基因组步移法和巢式PCR方法研究转基因玉米MON88017外源基因插入位点旁侧序列特征,获得了外源基因插入位点的左边界旁侧序列504bp,包括336bp的插入载体序列和168bp的玉米基因组序列。根据此旁侧序列,设计MON88017转化事件特异性引... 采用基因组步移法和巢式PCR方法研究转基因玉米MON88017外源基因插入位点旁侧序列特征,获得了外源基因插入位点的左边界旁侧序列504bp,包括336bp的插入载体序列和168bp的玉米基因组序列。根据此旁侧序列,设计MON88017转化事件特异性引物并进行定性PCR扩增,扩增片段为446bp,建立了转基因玉米MON88017转化体特异性检测方法。该方法特异性强、灵敏度高(0.1%),为转基因玉米品种MON88017进出口检测和标识检测提供了技术基础。 展开更多
关键词 转基因生物 事件特异性检测 定性pcr MON88017转化事件 左边界旁侧序列
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特异性检测植物乳杆菌的多重PCR方法 被引量:6
11
作者 陈臣 周方方 +2 位作者 任婧 刘振民 陈卫 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1076-1080,共5页
【目的】建立特异性检测植物乳杆菌的方法,排除近缘菌的干扰。【方法】利用SMM系统筛选植物乳杆菌种特异序列,根据特异序列设计引物进行不同乳制品的多重PCR检测。【结果】设计的7对引物具有良好的种特异性,其中3对引物可以排除戊糖乳... 【目的】建立特异性检测植物乳杆菌的方法,排除近缘菌的干扰。【方法】利用SMM系统筛选植物乳杆菌种特异序列,根据特异序列设计引物进行不同乳制品的多重PCR检测。【结果】设计的7对引物具有良好的种特异性,其中3对引物可以排除戊糖乳杆菌和副植物乳杆菌的干扰,可扩增获得植物乳杆菌的特异条带101bp(引物LP-1和LP-2)、189bp(引物LP-5和LP-6)、378bp(引物LP-9和LP-10)。该方法的检测限为2.2×10CFU/mL。采用多重PCR检测与琼脂糖凝胶电泳图谱分析对自制含有各种乳酸菌酸奶产品、自然发酵产品及市售酸乳产品中植物乳杆菌进行定性检测,可以特异性检测出植物乳杆菌,准确区分植物乳杆菌的近缘菌株。【结论】该多重PCR方法成本低、步骤简单、耗时短、灵敏度高,具有特异性,可作为快速检测植物乳杆菌种的方法在生产中使用。 展开更多
关键词 植物乳杆菌 SMM系统 多重pcr 定性检测
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转Cry1Ab水稻纯合体快速准确的PCR鉴定方法 被引量:6
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作者 张焕春 汪小福 +3 位作者 李玥莹 陈笑芸 缪青梅 徐俊锋 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第4期549-554,共6页
转Cry1Ab基因水稻Bt22为一种新型的转基因抗虫水稻,本研究介绍了一种筛选纯合转基因植株Bt22的PCR方法。根据外源序列在Bt22中插入位点的两侧旁邻序列设计引物,建立了转基因抗虫水稻Bt22品系特异的定性PCR检测方法,该方法灵敏度可达0.01... 转Cry1Ab基因水稻Bt22为一种新型的转基因抗虫水稻,本研究介绍了一种筛选纯合转基因植株Bt22的PCR方法。根据外源序列在Bt22中插入位点的两侧旁邻序列设计引物,建立了转基因抗虫水稻Bt22品系特异的定性PCR检测方法,该方法灵敏度可达0.01 ng,在此基础上组合各引物建立了筛选转基因水稻Bt22纯合体的多重PCR方法,结果表明该方法简单高效,便于操作。 展开更多
关键词 转基因水稻 特异性定性pcr 多重pcr 纯合性检测
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植酸酶基因定性PCR检测方法及阳性质粒分子的构建 被引量:5
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作者 李俊 刘信 +5 位作者 曹应龙 武玉花 厉建萌 吴刚 张丽 卢长明 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期639-647,共9页
植酸酶基因在农业生产中具有很高的应用价值,正被广泛用于农作物的基因工程研究。为了满足转植酸酶基因作物安全监管的需要,通过优化PCR检测条件,建立了植酸酶基因特异性定性PCR检测方法。该方法具有良好的扩增特异性和检测灵敏度,可以... 植酸酶基因在农业生产中具有很高的应用价值,正被广泛用于农作物的基因工程研究。为了满足转植酸酶基因作物安全监管的需要,通过优化PCR检测条件,建立了植酸酶基因特异性定性PCR检测方法。该方法具有良好的扩增特异性和检测灵敏度,可以满足我国植酸酶转基因作物监管需要。此外,我们将6种主要农作物(小麦、水稻、棉花、大豆、玉米和油菜)的内标准基因和植酸酶基因克隆到同一载体上,构建成了阳性质粒分子pBS Endogenous-phytase。该质粒分子适用于这6种作物中植酸酶基因的筛查检测。本研究为转植酸酶基因作物的安全监管提供了阳性材料和检测方法。 展开更多
关键词 转基因检测 植酸酶基因 定性pcr 阳性质粒分子
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抗病转基因水稻M12及其产品成分的定性、定量PCR检测方法 被引量:2
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作者 李鹏 张琳 +4 位作者 叶吉妮 贺诗瑶 贾军伟 潘爱虎 唐雪明 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期949-955,共7页
通过定性PCR扩增了转基因水稻M12转化体特异性片段和水稻内标基因(sps)片段,将PCR产物酶切连接后构建到T载体,得到适于转基因水稻M12品系特异性PCR检测的质粒分子p M12,建立了事件特异性定性、定量PCR检测方法。定性PCR结果表明,本方法... 通过定性PCR扩增了转基因水稻M12转化体特异性片段和水稻内标基因(sps)片段,将PCR产物酶切连接后构建到T载体,得到适于转基因水稻M12品系特异性PCR检测的质粒分子p M12,建立了事件特异性定性、定量PCR检测方法。定性PCR结果表明,本方法可特异性检测出M12,检测限可达100拷贝单倍体水稻基因组;定量PCR结果表明,M12和sps定量PCR标准曲线R2为0.998和0.997,扩增效率为95.3%和108.4%,重复性分析标准偏差范围为0.043~0.276,定量极限和检测极限可达100和10拷贝。对转基因含量为1.0%的混合样品定量结果的相对偏差在8.0%以内。本研究建立的方法可用于转基因水稻M12及其加工产品成分的检测。 展开更多
关键词 品系特异性 定性pcr 定量pcr M12
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食品中马源性成分的实时荧光PCR检测 被引量:6
15
作者 王玮 吕青骎 +4 位作者 朱卢玺 李春保 陈颖 葛毅强 周光宏 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期961-964,共4页
针对马线粒体DNA细胞色素b基因设计特异性引物和探针,建立食品中马源性成分实时荧光PCR检测方法,并经特异性和灵敏度试验验证其可行性。结果表明:该体系可扩增马DNA片段,长度为127 bp,其他常见畜、禽肉成分均无法正常扩增。该体系的检... 针对马线粒体DNA细胞色素b基因设计特异性引物和探针,建立食品中马源性成分实时荧光PCR检测方法,并经特异性和灵敏度试验验证其可行性。结果表明:该体系可扩增马DNA片段,长度为127 bp,其他常见畜、禽肉成分均无法正常扩增。该体系的检测灵敏度为1.25 pg马DNA和质量分数0.001%马肉粉。经市售食品的检测验证,表明所建立的马引物探针体系具有特异性好、灵敏度高、快速、高效等优点,可用于对食品中马源性成分的掺假鉴别检测。 展开更多
关键词 马线粒体DNA细胞色素b基因 实时荧光pcr方法 定性检测
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定性PCR技术及卡那霉素对8个番茄品种的转基因检测 被引量:2
16
作者 许爽 褚云霞 +2 位作者 张辉 朱龙英 朱为民 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期765-769,共5页
本研究利用定性PCR技术对8个不同番茄品种中外源基因35S启动子、NPTⅡ基因和NOS终止子进行检测。实验结果表明,阳性对照可以稳定扩增到预期的大小片段,而待检测品种和阴性对照则没有扩增到预期产物。利用100mg/L的卡那霉素对8个不同番... 本研究利用定性PCR技术对8个不同番茄品种中外源基因35S启动子、NPTⅡ基因和NOS终止子进行检测。实验结果表明,阳性对照可以稳定扩增到预期的大小片段,而待检测品种和阴性对照则没有扩增到预期产物。利用100mg/L的卡那霉素对8个不同番茄品种的种子进行萌发试验,再用50mg/L的卡那霉素对番茄外植体(子叶和下胚轴)进行抗性验证,结果显示卡那霉素抗性筛选实验结果与定性PCR结果一致。本文通过对这两种检测方法的优缺点进行研究分析及比较,初步建立了一个对不同品种番茄进行转基因检测的体系。 展开更多
关键词 定性pcr 卡那霉素抗性 番茄 转基因检测
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荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA和乙肝病毒标志物检测的临床价值分析 被引量:6
17
作者 陈海雁 张桂花 +1 位作者 罗锦彬 黄舒婷 《实用临床医药杂志》 CAS 2014年第19期108-110,共3页
目的探讨荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测乙肝病毒DNA(HBV-DNA)和乙肝病毒标志物(HBV-M)ELISA法检测的临床价值。方法选取本院收治的乙肝患者653例,先采用ELISA法对其血液标本进行HBV-M模式定性检测,再采用FQ-PCR法进行HBV-DNA定量检测,观察... 目的探讨荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测乙肝病毒DNA(HBV-DNA)和乙肝病毒标志物(HBV-M)ELISA法检测的临床价值。方法选取本院收治的乙肝患者653例,先采用ELISA法对其血液标本进行HBV-M模式定性检测,再采用FQ-PCR法进行HBV-DNA定量检测,观察不同HBV-M模式检测结果。结果大三阳(1、3、5模式)和1、3模式的HBVDNA阳性率分别为97.97%和94.74%,显著高于其他模式(P<0.05)。大三阳(1、3、5模式)的HBV-DNA表达水平为(5.59×106±2.42×105),显著高于其他模式(P<0.05)。结论不同HBV-M模式的HBV-DNA表达水平及阳性率存在显著差异,联合HBV-M定性及HBV-DNA定量检测对临床早期诊断及用药具有重要指导价值。 展开更多
关键词 定性 荧光定量pcr HBV-M 乙肝病毒
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抗虫转CpTI基因植物定性PCR检测技术的建立 被引量:4
18
作者 朱珠 王永 +4 位作者 兰青阔 赵新 余景会 郭永泽 程奕 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第5期56-60,共5页
为建立CpTI基因定性PCR检测方法,通过数据库查询和测序获得CpTI基因序列,设计特异性定性PCR引物,对引物、PCR反应条件和反应体系进行优化,并对检测方法的特异性、灵敏度等进行分析试验。结果表明,CpTI基因特异性定性PCR检测方法选择退... 为建立CpTI基因定性PCR检测方法,通过数据库查询和测序获得CpTI基因序列,设计特异性定性PCR引物,对引物、PCR反应条件和反应体系进行优化,并对检测方法的特异性、灵敏度等进行分析试验。结果表明,CpTI基因特异性定性PCR检测方法选择退火温度为58℃,引物浓度为0.4μmol/L较好,该方法能够特异性检测样品中CpTI基因,检测灵敏度达0.05%(质量比)。该方法符合农业转基因生物产品成分检测标准对特异性、灵敏度、重复性的要求,可为抗虫转CpTI基因植物生物安全管理提供技术支撑。 展开更多
关键词 豇豆胰蛋白酶抑制剂 基因特异性检测 定性pcr
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9种大豆制品中转基因成分定性PCR检测 被引量:6
19
作者 孙红炜 路兴波 +3 位作者 杨崇良 尚佑芬 赵玖华 王升吉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第2期234-237,共4页
本研究从豆粕、豆粉、豆腐等9种大豆产品中提取到高质量的DNA,在对内标准基因Lectin进行扩增的基础上,设计相应的特异性引物,建立了稳定的定性PCR反应体系,对35S启动子基因、外源目的基因Cp4-epsps基因进行了扩增,发现豆粕、豆奶粉、豆... 本研究从豆粕、豆粉、豆腐等9种大豆产品中提取到高质量的DNA,在对内标准基因Lectin进行扩增的基础上,设计相应的特异性引物,建立了稳定的定性PCR反应体系,对35S启动子基因、外源目的基因Cp4-epsps基因进行了扩增,发现豆粕、豆奶粉、豆腐、豆皮、豆豉中含有转基因成分,而其它产品中未发现转基因成分存在。 展开更多
关键词 大豆制品 转基因成分定性检测 Lectin基因 CaMV35S基因 Cp4-epsps基因
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实时定量PCR在植物真菌病原体定量检测中的应用 被引量:3
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作者 李凤兰 李学湛 +4 位作者 闵凡祥 韩峰 魏琪 冯艳忠 郭梅 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期151-155,共5页
实时定量PCR(Real-time Quantitative PCR,RQ-PCR)凭借其特异性强、定量准确和速度快等优点已经成为快速检测和研究植物真菌病害的重要工具。文章就这项技术在植物真菌病原菌定性和定量检测、土壤栖息的植物真菌病原体和寄主组织中真菌... 实时定量PCR(Real-time Quantitative PCR,RQ-PCR)凭借其特异性强、定量准确和速度快等优点已经成为快速检测和研究植物真菌病害的重要工具。文章就这项技术在植物真菌病原菌定性和定量检测、土壤栖息的植物真菌病原体和寄主组织中真菌DNA的定量检测等方面的应用研究进行了综述。大量研究表明,快速发展的实时定量PCR技术正在开创一个植物真菌病害的诊断学、传染病学和寄主-病原体相互作用研究的新领域。 展开更多
关键词 实时定量pcr 定性和定量检测 植物真菌病害 土壤栖息真菌
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