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氯化钴预处理在培养分化的人神经母细胞瘤细胞株缺氧损伤中的保护作用 被引量：4
1
作者 孙胜 高文祥 +1 位作者 蒋春华 高钰琪 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1010-1012,共3页
目的探讨氧化钴(CoCl2)对体外培养分化的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞株的缺氧损伤保护作用及缺氧诱导因子1、2和其调节基因产物血管内皮生长因子在其中的作用。方法分化的SH-SY5Y细胞分为对照组、化学缺氧预处理组(细胞用50μmol/LCoCl2... 目的探讨氧化钴(CoCl2)对体外培养分化的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞株的缺氧损伤保护作用及缺氧诱导因子1、2和其调节基因产物血管内皮生长因子在其中的作用。方法分化的SH-SY5Y细胞分为对照组、化学缺氧预处理组(细胞用50μmol/LCoCl2预处理3h,换液后常氧培养1h,然后在2%的低氧孵箱内缺氧28h)、缺氧组(无CoCl2预处理过程,其余同化学缺氧预处理组)。用Westernblotting法测细胞HIF-1α、HIF-2α和VEGF的蛋白表达,通过乳酸脱氢酶释放率测定、MTT细胞活力测定判断细胞损伤程度。结果化学缺氧预处理组细胞HIF-2α和VEGF的蛋白表达显著高于缺氧组(P<0.01),HIF-1α蛋白表达在两组之间没有显著性差异(P>0.05),化学缺氧预处理组细胞较缺氧组细胞存活率高、乳酸脱氢酶释放率减少(P<0.01)。结论CoCl2化学预缺氧可保护分化的SH-SY5Y细胞对缺氧产生耐受,缺氧预处理可能通过HIF-2促进VEGF的表达而产生保护作用。 展开更多
关键词 化学缺氧预处理 缺氧诱导因子1 缺氧诱导因子2 血管内皮生长因子 人神经母细胞瘤
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加兰他敏抗β淀粉样蛋白的神经保护机制研究 被引量：6
2
作者 李倩倩 杨珊珊 +3 位作者 黄硕 赵婷婷 孙莉娜 柴丽 《脑与神经疾病杂志》 2017年第2期110-115,共6页
目的观察加兰他敏(Gal)对β淀粉样蛋白(Aβ)损伤人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)后β淀粉样前体蛋白(APP)代谢通路的影响,探讨Gal的神经保护机制。方法采用5μMAβ_(1-40)作用于SH-SY5Y细胞制备体外细胞损伤模型,0.3μM加兰他敏对Aβ_(1-40... 目的观察加兰他敏(Gal)对β淀粉样蛋白(Aβ)损伤人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)后β淀粉样前体蛋白(APP)代谢通路的影响,探讨Gal的神经保护机制。方法采用5μMAβ_(1-40)作用于SH-SY5Y细胞制备体外细胞损伤模型,0.3μM加兰他敏对Aβ_(1-40)处理的细胞进行干预并与正常细胞进行对照研究。倒置显微镜下观察细胞形态,应用噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞活力,Western-blot技术定量检测各组APP,sAPPα,β-淀粉样前体蛋白剪切酶-1(BACE1)表达水平。结果 Aβ_(1-40)孵育细胞24h之后,细胞损伤明显,存活率从95.78.±2.5%降到62.93±2.1%,与对照组相比差异显著(P<0.01);Western-blot显示细胞内BACE1表达增加,APP表达无明显改变,细胞分泌sAPPα降低;在Aβ_(1-40)孵育之前给予加兰他敏作用24h,细胞损伤程度减轻,细胞的存活率上升(85.26±5.3%)(P<0.01),细胞内BACE1表达较Aβ组下降,APP表达无明显改变,细胞分泌sAPPα升高。结论加兰他敏通过抑制Aβ_(1-40)诱导的APP的异常代谢发挥神经保护作用。 展开更多
关键词 加兰他敏 Β淀粉样蛋白 人神经母细胞瘤细胞 Β淀粉样前体蛋白 淀粉样前体蛋白 β位分解酶
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帕金森病细胞模型的构建及氨基酸表达观察
3
作者 李双 李双双 +2 位作者 张晓莹 郭春燕 王治宝 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第15期21-25,共5页
目的建立帕金森病(PD)人神经母细胞瘤细胞模型,并筛选PD细胞中的氨基酸标志物。方法将人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y分为正常组、溶媒组、鱼藤酮组。鱼藤酮组分别加入0.15、0.25μmol/L的鱼藤酮,溶媒组加入二甲基亚砜(DMSO),正常组不加药... 目的建立帕金森病(PD)人神经母细胞瘤细胞模型,并筛选PD细胞中的氨基酸标志物。方法将人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y分为正常组、溶媒组、鱼藤酮组。鱼藤酮组分别加入0.15、0.25μmol/L的鱼藤酮,溶媒组加入二甲基亚砜(DMSO),正常组不加药物。分别于给药24、48 h后采用MTT法测算细胞存活率,倒置显微镜观察细胞形态,选择对细胞存活、形态影响较小的鱼藤酮作用浓度及作用时间(0.15μmol/L、24 h),采用Western blotting法检测SH-SY5Y细胞中的α-突触核蛋白以验证PD模型。采用高效液相色谱法检测PD细胞中的谷氨酸(Glu)、丝氨酸(Ser)、谷氨酰胺(Gln)、组氨酸(His)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)、色氨酸(Trp)、苯丙氨酸(Phe)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、赖氨酸(Lys),对鱼藤酮组和溶媒组差异有统计学意义的氨基酸进入偏最小二乘判别分析,选择P<0.05且变量重要性投影值(VIP)>1的氨基酸为PD的标志物。结果鱼藤酮组细胞中α-突触核蛋白相对表达量高于溶媒组(P均<0.05),表明SH-SY5Y细胞PD模型制作成功。给药24 h时,鱼藤酮组细胞中Glu、Ser、Gln、His、Gly、Pro、Phe、Ile、Leu、Lys水平低于溶媒组(P均<0.05);给药48 h时,鱼藤酮组除Gln外,其余11种氨基酸水平均低于溶媒组(P均<0.05)。筛选氨基酸标志物为Glu、Ser、Gly、Pro(给药24 h时VIP值分别为1.016、1.016、1.016、1.009,给药48 h时VIP值均为1.001)。结论利用鱼藤酮诱导成功建立了PD细胞模型,筛选出Glu、Ser、Gly、Pro可能为PD的潜在标志物。 展开更多
关键词 帕金森病 鱼藤酮 人神经母细胞瘤细胞 氨基酸
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