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血清lncRNA T342620联合AFP对肝癌的诊断价值
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作者 陈敏 张卫云 +4 位作者 徐宗琴 肖斌 刘娟子 李晓 孙朝晖 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第21期2594-2599,共6页
目的探究肝癌患者血清长链非编码RNA(lncRNA)T342620的表达水平,及其单独或联合甲胎蛋白(AFP)诊断肝癌的临床应用价值。方法采用病例对照研究,收集2021年4月至2023年5月在中国人民解放军南部战区总医院治疗的69例原发性肝癌患者(肝癌组)... 目的探究肝癌患者血清长链非编码RNA(lncRNA)T342620的表达水平,及其单独或联合甲胎蛋白(AFP)诊断肝癌的临床应用价值。方法采用病例对照研究,收集2021年4月至2023年5月在中国人民解放军南部战区总医院治疗的69例原发性肝癌患者(肝癌组)、32例乙型肝炎患者(乙肝组)、20例肝硬化患者(肝硬化组)、30例原发性肝癌经导管肝动脉化疗栓塞术(TACE)术后患者(肝癌术后组)和同期进行体检的50例健康者(健康体检组)的血清,提取血清总RNA,采用实时荧光定量PCR技术,检测血清中lncRNA T342620的相对表达量;结合患者临床诊疗资料,分析其表达水平与病理特征和血清学相关指标的相关性;运用受试者工作特征(ROC)曲线分析lncRNA T342620单独及联合AFP对肝癌诊断的特异度和灵敏度。根据ROC曲线下面积(AUC)判断诊断效能,评估其在肝癌诊断中的应用价值。各组间比较采用χ^(2)检验,相关性分析采用Spearman法。结果lncRNA T342620在肝癌组和肝癌术后组血清表达水平较健康体检组、乙肝组、肝硬化组高,差异均具有统计学意义(P<0.001);临床病理和血清学相关指标分析显示:肿瘤越大,血清lncRNAT342620表达水平越高,肝癌组血清lncRNA T342620表达水平与白蛋白(ALB)和白球比(A/G)呈负相关(P<0.05),与α-L-岩藻糖苷酶(AFU)和HBV-DNA呈正相关(P<0.05),肝癌术后组患者血清lncRNA T342620表达水平与总胆汁酸(TBA)呈正相关(P<0.05);ROC曲线分析显示:血清lncRNA T342620用于区别肝癌患者与健康者、乙肝和肝硬化患者时,其灵敏度和特异度分别为55.1%和94.1%,具有较好的诊断价值;和AFP联合检测时,灵敏度和特异度分别为91.3%和91.2%,其灵敏度高于各单项指标诊断的灵敏度,且联合检测诊断效能最高,AUC为0.954,与AFP和lncRNA-T342620单独检测的AUC(0.906、0.758)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清lncRNA T342620有可能成为肝癌辅助诊断的新型血清分子标志物。 展开更多
关键词 肝癌 长链非编码RNA 甲胎蛋白 血清分子标志物 实时荧光定量聚合酶链反应
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lncRNA Gm44981抑制心脏衰老的作用和机制研究
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作者 李洁 李林淋 曹慧霞 《现代医药卫生》 2024年第5期745-749,共5页
目的分析小鼠心脏衰老过程中长链非编码(lnc)RNA Gm44981的表达水平,探索其抑制心脏衰老的机制。方法选取3月龄年轻和24月龄年老小鼠各5只,提取心肌组织RNA后,采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测Gm44981的表达水平。另选取4月龄... 目的分析小鼠心脏衰老过程中长链非编码(lnc)RNA Gm44981的表达水平,探索其抑制心脏衰老的机制。方法选取3月龄年轻和24月龄年老小鼠各5只,提取心肌组织RNA后,采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测Gm44981的表达水平。另选取4月龄快速老化小鼠10只,分为对照组和Gm44981过表达组(构建Gm44981过表达快速老化小鼠模型),各5只。采用qRT-PCR检测对照组和Gm44981过表达组小鼠Gm44981和衰老相关分泌表型(SASP)表达水平,β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色检测SA-β-gal活性,蛋白质免疫印迹试验检测p53和Sirt1衰老相关蛋白表达水平。采用qRT-PCR检测miRNA-34a表达水平。结果Gm44981在年老小鼠的心肌组织中表达水平较年轻小鼠低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,Gm44981过表达组小鼠Gm44981表达上调,白细胞介素(IL)-1α和IL-6等SASP和SA-β-gal表达下调,p53表达下调,Sirt1表达上调,miRNA-34a表达下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论lncRNA Gm44981在心脏衰老过程中表达下调,其可能通过作用于miRNA-34a/Sirt1抑制心脏衰老。 展开更多
关键词 心脏 衰老 长链非编码RNA 衰老相关蛋白 实时定量聚合酶链式反应 小鼠
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Expression signatures of long non-coding RNA and mRNA in human traumatic brain injury 被引量:8
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作者 Li-Xiang Yang Li-Kun Yang +3 位作者 Jie Zhu Jun-Hui Chen Yu-Hai Wang Kun Xiong 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2019年第4期632-641,共10页
Long non-coding RNAs(lncRNAs) play a key role in craniocerebral disease, although their expression profiles in human traumatic brain injury are still unclear. In this regard, in this study, we examined brain injury ti... Long non-coding RNAs(lncRNAs) play a key role in craniocerebral disease, although their expression profiles in human traumatic brain injury are still unclear. In this regard, in this study, we examined brain injury tissue from three patients of the 101 st Hospital of the People's Liberation Army, China(specifically, a 36-year-old male, a 52-year-old female, and a 49-year-old female), who were diagnosed with traumatic brain injury and underwent brain contusion removal surgery. Tissue surrounding the brain contusion in the three patients was used as control tissue to observe expression characteristics of lncRNAs and mRNAs in human traumatic brain injury tissue. Volcano plot filtering identified 99 lncRNAs and 63 mRNAs differentially expressed in frontotemporal tissue of the two groups(P < 0.05, fold change > 1.2). Microarray analysis showed that 43 lncRNAs were up-regulated and 56 lncRNAs were down-regulated. Meanwhile, 59 mRNAs were up-regulated and 4 mRNAs were down-regulated. Gene Ontology(GO) and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG) analyses revealed 27 signaling pathways associated with target genes and, in particular, legionellosis and influenza A signaling pathways. Subsequently, a lncRNA-gene network was generated, which showed an absolute correlation coefficient value > 0.99 for 12 lncRNA-mRNA pairs. Finally, quantitative real-time polymerase chain reaction confirmed different expression of the five most up-regulated mRNAs within the two groups, which was consistent with the microarray results. In summary, our results show that expression profiles of mRNAs and lncRNAs are significantly different between human traumatic brain injury tissue and surrounding tissue, providing novel insight regarding lncRNAs' involvement in human traumatic brain injury. All participants provided informed consent. This research was registered in the Chinese Clinical Trial Registry(registration number: ChiCTR-TCC-13004002) and the protocol version number is 1.0. 展开更多
关键词 nerve REGENERATION HUMAN TRAUMATIC brain injuries long noncoding RNA messenger RNA GO ANALYSIS real-time quantitative polymerase chain reaction biomarkers microarray ANALYSIS biological processes medical informatics neural REGENERATION
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Substitution of Nitrite Reductase of Thermosynechococcus elongatus BP-1 by the Homologous Gene of Phormidium laminosum 被引量:1
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作者 Maite Buxens Juan L. Serra María J. Llama 《Advances in Microbiology》 2013年第6期69-79,共11页
Even though the nitrate assimilation operon has been extensively studied in Phormidium laminosum, some aspects still remain unclear. The genetic manipulation of this cyanobacterium is problematic that hinders the eluc... Even though the nitrate assimilation operon has been extensively studied in Phormidium laminosum, some aspects still remain unclear. The genetic manipulation of this cyanobacterium is problematic that hinders the elucidation of further aspects of nitrogen metabolism. To circumvent this, Thermosynechococcus elongatus BP-1 was selected as a surrogate host and its nirA gene was substituted by the homologous gene of P. laminosum. This process, based on Long Flanking Homology Polymerase Chain Reaction and the natural competence of T. elongatus BP-1, required an intermediate T. elongatus BP-1 ΔnirA::kat mutant, which carries a gene encoding a thermostable kanamycin nucleotidyl transferase in place of nirA_Te. In the presence of nirA_Pl, nirA defective mutants of T. elongatus BP-1 recovered the ability to grow with nitrate as the sole nitrogen source, and showed a phenotype similar to that observed in wild-type cells. The procedure could be useful to substitute other genes from T. elongatus BP-1 with the homologues from P. laminosum in order to study this particular operon. Furthermore, it may be used as a general tool to explore phenotypic changes due to the exchange of a single gene between cyanobacteria. 展开更多
关键词 THERMOPHILIC Cyanobacteria long flanking homology polymerase chain reaction NITRITE REDUCTASE Gene TRANSFERENCE
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急性胰腺炎病人血清长链非编码RNA核富集转录体1、Toll样受体2表达变化及临床意义研究
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作者 刘会雪 牛立远 +2 位作者 张佩佩 安江科 魏贯南 《安徽医药》 CAS 2023年第9期1814-1818,共5页
目的探讨急性胰腺炎(AP)病人血清长链非编码RNA核富集转录体1(LncRNA NETA1)、Toll样受体2(TLR2)表达及临床意义。方法选取2017年5月至2020年12月石家庄平安医院收治的AP病人125例为研究对象,根据急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ(APACHE... 目的探讨急性胰腺炎(AP)病人血清长链非编码RNA核富集转录体1(LncRNA NETA1)、Toll样受体2(TLR2)表达及临床意义。方法选取2017年5月至2020年12月石家庄平安医院收治的AP病人125例为研究对象,根据急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ(APACHEⅡ)对AP病人进行评分,并将病人分为轻症组56例,重症组69例;根据住院期间重症组AP病人预后情况,将病人分为预后不良25例,预后良好44例。同期选取该院健康体检者130例为健康组。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清LncRNA NETA1水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清TLR2水平;Pearson相关性分析探索AP病人血清LncRNA NEAT1、TLR2水平相关性及二者与病人APACHEⅡ评分的关系;受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清LncRNA NEAT1、TLR2对AP病人重症的评估价值。结果与健康组比较,AP组血清LncRNA NEAT1(2.16±0.31比1.00±0.00)、TLR2水平[(6.43±1.05)µg/L比(0.59±0.24)µg/L]升高(P<0.05);与轻症组比较,重症组AP病人血清LncRNA NEAT1(2.31±0.33比1.98±0.27)、TLR2水平[(6.89±1.16)µg/L比(5.86±0.92)µg/L]升高(P<0.05);与预后良好组比较,预后不良组重症AP病人血清LncRNA NEAT1(2.43±0.36比2.14±0.27)、TLR2水平[(7.12±1.24)µg/L比(6.45±1.02)µg/L]升高(P<0.05);Pearson相关性分析结果表明,AP病人血清LncRNA NEAT1、TLR2呈正相关(r=0.65,P<0.05),二者与病人APACHEⅡ评分均呈正相关(r=0.50、0.52,P<0.05);ROC曲线结果显示,血清LncRNA NEAT1水平、TLR2单独及联合评估AP病人重症的曲线下面积(AUC)分别为0.73[95%CI:(0.64,0.82)]、0.75[95%CI:(0.67,0.84)]、0.88[95%CI:(0.82,0.94)],血清LncRNA NEAT1联合TLR2水平预测AP病人重症的AUC明显大于二者单独预测(P<0.05)。结论AP病人血清LncRNA NEAT1、TLR2表达水平显著升高,且与病人严重程度和预后有关,临床上检测LncRNA NEAT1、TLR2表达可能有助于AP病人的病情评估。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 长链非编码RNA核富集转录体1 TOLL样受体2 逆转录聚合酶链反应 表达 临床意义
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LncRNAGAS5在缺血性脑卒中的表达及临床价值
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作者 杨挲挲 韩鹏飞 +3 位作者 赵乐 李梦真 查江杰 程铭 《中国实用医药》 2023年第19期17-20,共4页
目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)生长阻滞特异转录物5(GAS5)在缺血性脑卒中(IS)患者血清中的表达及临床价值。方法选取90例IS患者作为病例组,按照IS严重程度分为轻度组、中度组、重度组,每组30例;另选取同期健康体检者45例作为健康对照... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)生长阻滞特异转录物5(GAS5)在缺血性脑卒中(IS)患者血清中的表达及临床价值。方法选取90例IS患者作为病例组,按照IS严重程度分为轻度组、中度组、重度组,每组30例;另选取同期健康体检者45例作为健康对照组。收集血清标本,提取总RNA,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)测定逆转录LncRNA GAS5,分析IS患者LncRNA GAS5相对表达水平与美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的相关性以及LncRNA GAS5对IS的诊断效能。结果qRT-PCR结果表明:LncRNA GAS5在健康对照组以及轻度组、中度组、重度组中的表达水平分别为(1.12±0.97)、(2.17±1.16)、(3.20±1.24)、(5.07±1.97),轻度组、中度组、中度组LncRNA GAS5表达水平高于健康对照组,且重度组LncRNA GAS5表达水平高于中度组和轻度组,中度组高于轻度组,差异均具有统计学意义(P<0.001)。经Pearson相关性分析表明,病例组患者LncRNA GAS5相对表达水平与NIHSS评分呈正相关(r=0.63,P<0.01)。通过受试者工作特征(ROC)曲线分析,LncRNA GAS5的曲线下面积(AUC)为0.893(0.836~0.950),灵敏度为93.3%,特异度为68.9%,截断值为1.18。结论IS患者与健康体检者取新鲜血清检测后发现,LncRNA GAS5表达在IS患者血清中出现明显升高,且患者病情越严重表达水平越高,因此可以将LncRNA GAS5表达水平作为IS的辅助生物诊断指标。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 生长阻滞特异转录物5 缺血性脑卒中 实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应
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肺炎链球菌dnaJ基因缺陷菌株的构建及毒力变化的初步研究 被引量:5
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作者 崔瑾 张群 +6 位作者 董杰 姜慧 周爱娥 董姗姗 张雪梅 尹一兵 王虹 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第19期2000-2003,共4页
目的构建肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)dnaJ基因缺陷菌株,并对其毒力作初步研究。方法采用长臂同源多聚酶链式反应(long flanking homology polymerase chain reaction,LFH-PCR)技术将dnaJ基因替换为红霉素耐药基因(erm)... 目的构建肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)dnaJ基因缺陷菌株,并对其毒力作初步研究。方法采用长臂同源多聚酶链式反应(long flanking homology polymerase chain reaction,LFH-PCR)技术将dnaJ基因替换为红霉素耐药基因(erm)后同源重组于肺炎链球菌,在含红霉素的血平板上筛选出dnaJ缺陷菌株。用PCR鉴定缺陷菌株,以细菌的吸光度值D(600 nm)观察体外缺陷菌株生长情况。将44只BALB/c小鼠采用随机数字表法分为2组,分别用野生菌株和缺陷菌株处理,腹腔攻毒100μl高(2×108cfu)、低(2×106cfu)剂量的菌液,各处理组的不同剂量组均有11只小鼠。记录小鼠死亡时间,计算存活率。60只BALB/c小鼠采用随机数字表分为2组,分别鼻腔滴注含菌量为2×107 cfu的30μl D39菌液和△dnaJ菌液,感染后6、12、24、36、48 h处死每组中的5只小鼠,分别取鼻咽灌洗液、肺组织(匀浆)和心脏血培养,根据每组平均菌落计数结果绘制细菌在宿主体内的定植曲线。结果 PCR结果显示dnaJ基因完全被erm基因所替代,构建dnaJ缺陷菌成功;单个菌落培养基生长情况表明体外热休克状态抑制dnaJ缺陷菌生长;小鼠毒力实验显示腹腔感染缺陷菌株的小鼠存活率可达到100%,而感染野生菌株的小鼠全部死亡,两者比较有统计学差异(P<0.01)。小鼠鼻腔感染模型中,缺陷菌株在各时间点鼻咽灌洗液和肺部的细菌载量均显著低于野生菌株,而且入血后可在感染24 h内被宿主清除,上述差异有统计学意义(P<0.01)。结论采用LFH-PCR技术作基因突变完全替代dnaJ基因,方法简便快捷;dnaJ的缺陷影响细菌在体外应激条件下的生长,并显著降低细菌在宿主体内的毒力和定植。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 DNAJ 长臂同源多聚酶链式反应 毒力
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新肝炎病毒TTV在各类高危人群中的感染状况和分子流行病学研究 被引量:5
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作者 郑煜煌 胡维新 +1 位作者 黄力 何艳 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2001年第3期149-152,共4页
目的 观察新肝炎病毒 TTV在各类高危人群中的感染状况、基因分型及其在肝病发生和发展过程中的作用。方法 在日本株 TTV ORF1 保守区设计了两对套式引物 ,采用巢式聚合酶链反应扩增血清 TTV DNA,并对产物进行分子克隆和部分基因序列... 目的 观察新肝炎病毒 TTV在各类高危人群中的感染状况、基因分型及其在肝病发生和发展过程中的作用。方法 在日本株 TTV ORF1 保守区设计了两对套式引物 ,采用巢式聚合酶链反应扩增血清 TTV DNA,并对产物进行分子克隆和部分基因序列分析。结果 在非甲 -戊型和非庚型肝炎病人、血清HBs A g阳性的肝炎病人、正常献血员、肝炎肝硬化病人、原发性肝癌病人、静脉内吸毒者和女性与男性性乱者中 ,血清 TTV DNA 阳性率分别为 43.2 % (16 /37)、2 8.8% (15 /5 2 )、9.3% (4/4 3)、5 1.9% (14/2 7)、38.5 % (5 /13)、35 .0 % (14/4 0 )、17.3% (8/4 5 )和 18.8% (3/16 )。其中非甲 -戊型和非庚型肝炎病人、血清HBSAg阳性肝炎病人的 AL T平均为 (472± 2 76 ) u· L- 1 和 (385± 2 18) u· L- 1 ;肝炎肝硬化病人 TTV DNA阳性率显著高于 HBSAg阳性肝炎病人。同时 ,从非甲 -戊型和非庚型肝炎病人、血清 HBSAg阳性肝炎病人、正常献血员、静脉内吸毒者和女性性乱者中 ,分别获得 6份 TTV DNA ORF1 克隆 ,其基因序列与日本株TTV ORF1 部分基因核苷酸序列同源性为 97%~ 99% ,均属于 TTV 1a型。结论  TTV感染和 AL T升高存在一定的关系 ;我国各类高危人群感染 TTV以 1a型为主 。 展开更多
关键词 肝炎病毒 聚合酶链反应 感染 DNA序列分析 TTV
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ERIC-PCR技术在鲍曼不动杆菌基因分型中的应用评估 被引量:14
9
作者 李永丽 应春妹 陈艺升 《检验医学》 CAS 2013年第7期621-624,共4页
目的了解仁济医院鲍曼不动杆菌的基因同源性,验证肠杆菌科基因间重复序列(ERIC)-聚合酶链反应(PCR)在鲍曼不动杆菌基因分型中的实用性。方法采用琼脂稀释法检测临床分离的81株鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);采用ER... 目的了解仁济医院鲍曼不动杆菌的基因同源性,验证肠杆菌科基因间重复序列(ERIC)-聚合酶链反应(PCR)在鲍曼不动杆菌基因分型中的实用性。方法采用琼脂稀释法检测临床分离的81株鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);采用ERIC-PCR对81株鲍曼不动杆菌进行基因分型;使用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对其中的43株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌进一步分型,以PFGE分型为参考标准,验证ERIC-PCR在基因分型中的实用性。结果 81株鲍曼不动杆菌对临床常用的13种抗菌药物普遍耐药,只对米诺环素耐药率最低,为30.9%,其次是亚胺培南,为53.1%,对其他抗菌药物的耐药率均>60%。81株鲍曼不动杆菌ERIC-PCR分型主要为A、B、C、D、E、F 6型,其中A、B、C型为主要的流行株。43株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌分型为A型41株(A1型29株,A2型12株)、B型1株、C型1株。PFGE分型将其分为5型,A型34株(A1型31株,A2型3株),B型6株,C、D、E分型各1株。结论仁济医院鲍曼不动杆菌存在克隆播散,且主要为耐亚胺培南鲍曼不动杆菌。ERIC-PCR分辨力较强,结果可靠,与PFGE结果具有一定的相关性,是一种简便、快捷的基因分型技术。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 肠杆菌科基因间重复序列 聚合酶链反应 脉冲场凝胶电泳 同源性
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活性污泥中硝化细菌16S rDNA鉴定方法研究 被引量:3
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作者 黄正 赵芳 +2 位作者 刘红艳 徐伟斌 周宜开 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期269-272,共4页
目的 以活性污泥为材料 ,研究其中硝化细菌的分离及 16SrDNA鉴定方法。方法 采用氨氧化细菌与亚硝酸氧化细菌富集、分离技术从武汉某啤酒厂曝气池活性污泥中分离得到 2株纯培养菌株N1和N2 。分别提取 2株细菌的总DNA ,利用氨氧化细菌... 目的 以活性污泥为材料 ,研究其中硝化细菌的分离及 16SrDNA鉴定方法。方法 采用氨氧化细菌与亚硝酸氧化细菌富集、分离技术从武汉某啤酒厂曝气池活性污泥中分离得到 2株纯培养菌株N1和N2 。分别提取 2株细菌的总DNA ,利用氨氧化细菌与亚硝酸氧化细菌的 16SrDNA特异性引物进行多聚酶链反应 (PCR)扩增 ;扩增产物经 2 %琼脂糖凝胶电泳和Sanger末端终止法测序分析 ,用NCBI Blast软件将测序结果在Genbank等数据库中进行同源性检索。结果 N1和N2 的DNA扩增产物片断大小分别为 5 2 6bp和 391bp ,测序结果经检索证实N1、N2 分别与标准菌株Nitrosomonassp DYS317和Nitrobactersp R6的保守性片段有 99%、 10 0 %的同源性。 结论 可以判定所分离得到的N1和N2 菌株分别为亚硝化单胞菌属和硝化杆菌属。 展开更多
关键词 索证 Blast软件 测序 多聚酶链反应 方法研究 DNA扩增 琼脂糖凝胶电泳 活性污泥 氨氧化细菌 硝化细菌
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SYBR Green实时定量PCR检测人脑原发胶质瘤中LATS1和LATS2基因的表达 被引量:3
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作者 姜政 胡锦 +2 位作者 李新钢 卢大儒 江玉泉 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第12期1289-1293,共5页
目的:运用实时定量PCR检测肿瘤抑制基因LATS1和LATS2的mRNA在人脑原发胶质瘤组织中的表达情况,并进一步分析其表达变化与临床资料之间的关系。方法:建立SYBR Green实时定量PCR的检测方法;通过标准曲线法对肿瘤抑制基因LATS1和LATS2的mRN... 目的:运用实时定量PCR检测肿瘤抑制基因LATS1和LATS2的mRNA在人脑原发胶质瘤组织中的表达情况,并进一步分析其表达变化与临床资料之间的关系。方法:建立SYBR Green实时定量PCR的检测方法;通过标准曲线法对肿瘤抑制基因LATS1和LATS2的mRNA在30例原发胶质瘤(WHO分级:Ⅱ级10例,Ⅲ级10例,Ⅳ级10例)和10例正常脑组织中的表达进行定量检测;统计学分析不同级别胶质瘤及正常脑组织间的表达差异,并进一步结合临床资料分析不同性别和不同年龄组的表达差异。结果:与正常脑组织相比,在各病理级别胶质瘤中LATS1和LATS2的mRNA表达均下调(P<0.05),但胶质瘤不同级别组之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。LATS1和LATS2在不同性别组和年龄组胶质瘤中的表达差异也无统计学意义(P>0.05)。结论:①成功地建立了SYBR Green实时定量PCR检测LATS1和LATS2基因表达的方法;②胶质瘤中LATS1和LATS2的mRNA表达水平均低于正常脑组织,但不同病理分级间的表达无明显差异。 展开更多
关键词 LATS1 LATS2 神经胶质瘤 实时定量聚合酶链反应 SYBR Green
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原发性胆汁性肝硬化患者单个核细胞中lncRNA AK053349表达增高及意义 被引量:5
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作者 张蕾 黄元兰 +6 位作者 王慧 孔伟 叶辛 陈燕 刘挺挺 秦琴 邓安梅 《国际检验医学杂志》 CAS 2013年第20期2656-2657,2659,共3页
目的研究lncRNA AK053349是否参与了原发性胆汁性肝硬化(PBC)的发病机制。方法采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测了42例PBC患者及40例健康者外周血单个核细胞(PBMC)中lncRNA AK053349的相对表达量,分析了其与疾病特... 目的研究lncRNA AK053349是否参与了原发性胆汁性肝硬化(PBC)的发病机制。方法采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测了42例PBC患者及40例健康者外周血单个核细胞(PBMC)中lncRNA AK053349的相对表达量,分析了其与疾病特征的关系。结果 PBC患者外周血PBMC中lncRNA AK053349表达较健康对照组明显增高(P<0.01),且随疾病分期的不同其表达量有明显变化(P<0.05);lncRNA AK053349表达与Mayo危险评分呈正相关(r2=0.33,P<0.01)。结论 lncRNA AK053349可能参与了PBC的发病机制,同时还是PBC的潜在标志物。 展开更多
关键词 肝硬化 胆汁性 长链非编码RNA 逆转录聚合酶链反应
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医院环境中物体表面碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌污染及同源性分析 被引量:18
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作者 秦瑾 闻海丰 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2015年第6期366-369,共4页
目的调查某院重点部门物体表面碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌污染情况及其同源性。方法对该院重症监护室(ICU)、急诊重症监护室(EICU)、血液透析室、手术室进行环境卫生学监测,采用肠杆菌科基因间重复序列聚合酶链反应(ERIC-PCR),对ICU、EIC... 目的调查某院重点部门物体表面碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌污染情况及其同源性。方法对该院重症监护室(ICU)、急诊重症监护室(EICU)、血液透析室、手术室进行环境卫生学监测,采用肠杆菌科基因间重复序列聚合酶链反应(ERIC-PCR),对ICU、EICU环境中污染的条件致病菌鲍曼不动杆菌进行扩增分型。结果除EICU医务人员手卫生结果达标外,ICU及EICU各检测项目细菌计数均不达标;血液透析室及手术室采样标本均合格。ICU、EICU物体表面共采集标本53份,检出鲍曼不动杆菌7株,检出率为13.21%;此7株菌均为碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌,其中6株基因型相同,与患者痰中分离的鲍曼不动杆菌基因型相同。结论该院重点部门环境中物体表面分离的碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌具有同源性,应加强其环境物体表面清洁与消毒,降低医院感染的发生。 展开更多
关键词 物体表面 重症监护室 鲍曼不动杆菌 重复序列聚合酶链反应 同源性
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线粒体DNA与人精子活力间的相关性分析 被引量:3
14
作者 郑英 周作民 沙家豪 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期34-38,共5页
目的 探讨线粒体 DNA与人精子活力间的关系。 方法 用长链 PCR技术 ,对 6 0例精子活力正常和 40例精子活力异常不育患者的精子线粒体 DNA(mt DNA)进行了多重缺失的分析。 结果 两组不育患者中共有 8例具有 m t DNA的多重缺失 (其... 目的 探讨线粒体 DNA与人精子活力间的关系。 方法 用长链 PCR技术 ,对 6 0例精子活力正常和 40例精子活力异常不育患者的精子线粒体 DNA(mt DNA)进行了多重缺失的分析。 结果 两组不育患者中共有 8例具有 m t DNA的多重缺失 (其中精子活力正常不育患者 6名 ,精子活力异常不育患者 2名 ) ,但缺失型 mt D-NA(S5除外 )在总 mt DNA中所占比例很小 (0 .16 %~ 1.85 % ) ,1例精子活力正常的不育患者 (S5 )具有 2 .6 kb的缺失型 mt DNA,且缺失型 mt DNA占总 m t DNA的 91.0 2 % ,其序列分析发现 mt DNA编码区域大部分缺失。 结论 精子活力与 mt DNA的多重缺失间无相关性。 展开更多
关键词 线粒体 DNA 精子活力 长链 聚合酶链反应
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碳青霉烯类耐药大肠埃希菌耐药基因型检测及同源性分析 被引量:5
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作者 胡志军 吴希静 +4 位作者 潘晓龙 崇慧峰 朱娟娟 赵哲 唐吉斌 《安徽医药》 CAS 2020年第7期1464-1467,共4页
目的检测临床分离碳青霉烯类耐药大肠埃希菌的耐药基因型,并对其同源性进行分析,研究其流行情况。方法收集铜陵市人民医院2012年9月至2016年10月临床分离碳青霉烯类耐药大肠埃希菌,采用VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定仪进行鉴定,改良H... 目的检测临床分离碳青霉烯类耐药大肠埃希菌的耐药基因型,并对其同源性进行分析,研究其流行情况。方法收集铜陵市人民医院2012年9月至2016年10月临床分离碳青霉烯类耐药大肠埃希菌,采用VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定仪进行鉴定,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型,EDTA双纸片协同试验进行金属酶初筛,聚合酶链反应(PCR)检测碳青霉烯酶基因(bla KPC、bla IMP、bla VIM、bla NDM和bla OXA-48),并对阳性扩增产物进行基因测序;同源性分析采用肠杆菌科基因间重复一致序列聚合酶链反应技术(ERIC-PCR)。结果共收集碳青霉烯类耐药大肠埃希菌25株,8株改良Hodge试验阳性,13株金属酶初筛试验阳性,其中4株携带bla NDM-1基因,1株携带bla IMP-4基因,1株携带bla KPC-2基因;ERIC-PCR检测分为10种型别。结论碳青霉烯类耐药大肠埃希菌的耐药机制主要是产金属酶,携带NDM-1型碳青霉烯酶大肠埃希菌需重点监测;碳青霉烯类耐药大肠埃希菌未在医院引起克隆流行。 展开更多
关键词 埃希氏菌属 序列同源性 基因 MDR 大肠埃希菌 碳青霉烯酶 基因间重复一致序列聚合酶链反应技术(ERIC-PCR)
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抑制长链非编码RNA FAL1表达对上皮性卵巢癌细胞生物学行为的影响及其分子机制 被引量:13
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作者 王晓彤 谭文华 刘巍 《国际妇产科学杂志》 CAS 2018年第2期221-225,共5页
目的:探索上皮性卵巢癌细胞与正常人卵巢细胞中长链非编码RNA(lncRNA)FAL1的表达差异及沉默卵巢癌细胞株SKVO3中lncRNA FAL1的表达对卵巢癌细胞侵袭、迁移及凋亡的影响。方法:利用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测组织中lncRN... 目的:探索上皮性卵巢癌细胞与正常人卵巢细胞中长链非编码RNA(lncRNA)FAL1的表达差异及沉默卵巢癌细胞株SKVO3中lncRNA FAL1的表达对卵巢癌细胞侵袭、迁移及凋亡的影响。方法:利用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测组织中lncRNA FAL1表达水平;设计并合成FAL1-siRNA引物序列转染SKVO3,通过细胞划痕试验检测卵巢癌细胞的迁移能力,Transwell侵袭实验检测卵巢癌细胞的侵袭能力,流式细胞术检测卵巢癌细胞的凋亡,蛋白质印迹(Western blotting)检测磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)和磷酸化丝裂原细胞外激酶1/2(p-MEK1/2)蛋白的表达水平。结果:lncRNA FAL1在卵巢癌组织中的表达高于正常卵巢组织([15.04±2.24)vs.(2.93±0.39),P<0.05]。沉默lnc RNA FAL1的表达后,卵巢癌细胞的凋亡能力显著增强([18.38±0.73)%vs.(2.86±0.09)%,P<0.05],而卵巢癌细胞迁移、侵袭能力均降低([6.68±1.49)μm vs.(12.85±2.56)μm,(25.80±2.59)个vs.(145.6±5.23)个,均P<0.05],MEK/ERK通路MEK1/2和ERK1/2蛋白磷酸化水平明显降低(P<0.05)。结论:lncRNA FAL1通过激活MEK/ERK通路影响上皮性卵巢癌细胞的侵袭、迁移及凋亡,其表达异常增高可能是卵巢癌发生发展的重要分子机制。 展开更多
关键词 FAL1 长链非编码RNA 卵巢肿瘤 聚合酶链反应 丝裂原激活蛋白激酶激酶类
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长链非编码RNA IRAIN在肝癌组织中的表达及意义 被引量:5
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作者 赵炎斌 夏兵祥 +5 位作者 李凡 袁振华 陆保成 郑苏文 张园 张业伟 《中国肿瘤外科杂志》 CAS 2017年第2期96-98,共3页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)IRAIN在肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织中的表达及临床意义。方法采用实时定量PCR检测lncRNA IRAIN在36例肝癌组织和对应癌旁组织及24例正常肝组织中的表达,结合患者临床病理特征,分析二者之间的关系。... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)IRAIN在肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织中的表达及临床意义。方法采用实时定量PCR检测lncRNA IRAIN在36例肝癌组织和对应癌旁组织及24例正常肝组织中的表达,结合患者临床病理特征,分析二者之间的关系。结果肝癌组织中,lncRNA IRAIN表达水平明显低于癌旁组织和正常肝组织,差异有统计学意义(均P<0.05);lncRNA IRAIN表达与肝癌患者性别、年龄及有无肝炎病史间比较,差异无统计学意义(均P>0.05),但与肿瘤大小、分化程度以及临床分期间比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论 lncRNA IRAIN可能抑制肝癌的发生发展,有望成为肝癌早期诊断和判断预后的指标之一。 展开更多
关键词 肝肿瘤 组织 实时聚合酶链反应 长链非编码RNA IRAIN
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耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药基因检测及同源性 被引量:11
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作者 黄峰 许元元 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2018年第1期21-25,共5页
目的探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药基因型及同源性。方法收集某院2015年9月—2016年2月临床标本分离的38株CRKP,采用聚合酶链反应(PCR)方法检测耐药基因型,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源性。结果 38株CRKP主要来源于重症... 目的探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药基因型及同源性。方法收集某院2015年9月—2016年2月临床标本分离的38株CRKP,采用聚合酶链反应(PCR)方法检测耐药基因型,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源性。结果 38株CRKP主要来源于重症监护病房(ICU)及外科重症监护病房(SICU),分别占39.48%、34.21%。38株CRKP均检出blaKPC和blaSHV耐药基因,6株检出blaCTX耐药基因。PFGE显示共分成A、B、C、D4个谱型,其中以C型为主(65.78%,25/38)。A型菌株中菌株14、15、16携带blaKPC-2型、blaSHV型、blaCTX-M-15耐药基因,此3株细菌均是SICU患者分离的,菌株14和15分离自同一天,菌株16分离时间延后一周;C型菌株中,菌株10、18、25、28的同源性为100%,菌株10、18分离自ICU患者,菌株25、28分离自神经内一科患者(均从ICU转出),均是在ICU住院期间检出,且分离时间相差1 d。结论该院CRKP耐药基因型以blaKPC及blaSHV为主,存在克隆株医院内流行。 展开更多
关键词 耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌 药基因型 合酶链反应 冲场凝胶电泳 源性
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一株亚硝酸盐降解菌的分离鉴定 被引量:2
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作者 周冬仁 沈锦玉 +3 位作者 潘晓艺 叶雪平 徐洋 尹文林 《农学学报》 2011年第2期49-53,共5页
为寻找对亚硝酸盐具有高效降解能力、稳定和安全的优良菌株,采用亚硝酸盐氧化细菌(Nitrite-oxidizing bacteria,NOB)富集、分离技术从湖州某水域淤泥中分离得到一株纯培养菌株N3。提取细菌的总DNA,利用细菌16S rDNA特异性引物进行多聚... 为寻找对亚硝酸盐具有高效降解能力、稳定和安全的优良菌株,采用亚硝酸盐氧化细菌(Nitrite-oxidizing bacteria,NOB)富集、分离技术从湖州某水域淤泥中分离得到一株纯培养菌株N3。提取细菌的总DNA,利用细菌16S rDNA特异性引物进行多聚酶链反应(PCR)扩增;扩增产物经琼脂糖凝胶电泳和Sanger末端终止法测序分析,用NCBI-Blast软件将测序结果在Genbank等数据库中进行同源性检索。结果表明,N3的DNA扩增产物片断大小为1441bp,测序结果经检索证实N3与标准菌株Cellulosimicrobium cellulans(AY665978.1)16S rDNA保守性片段有100%的同源性,可以判定所分离得到的N3菌株为纤维单胞菌属的纤维化纤维单胞菌(Cellulosimicrobium cellulans)。 展开更多
关键词 亚硝酸氧化细菌 16S RDNA 聚合酶链反应 同源性分析
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长链非编码RNA UC001kfo表达水平与宫颈癌病人预后的相关性研究 被引量:3
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作者 田丹 李新 +1 位作者 尚学琴 罗雁 《安徽医药》 CAS 2019年第10期1971-1974,共4页
目的探究长链非编码RNA UC001kfo在宫颈癌病人中的表达情况及其临床指导意义。方法收集整理2012年4月2日至2017年2月2日云南省第二人民医院不同国际妇产科协会(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期手术切... 目的探究长链非编码RNA UC001kfo在宫颈癌病人中的表达情况及其临床指导意义。方法收集整理2012年4月2日至2017年2月2日云南省第二人民医院不同国际妇产科协会(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期手术切除的宫颈癌及其癌旁组织标本共81例,采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(qPCR)技术检测UC001kfo表达水平,分析UC001kfo的表达水平与临床病理特征和预后的关系。结果全组病人宫颈癌组织中UC001kfo的表达水平(4.694±1.378)明显高于癌旁组织(1.543±0.598)(P<0.01)。UC001kfo表达水平与宫颈癌病人的FIGO分期、淋巴结转移和肿瘤侵袭关系密切(P<0.05)。Kaplan?Meier分析显示UC001kfo高表达病人的总生存时间明显低于低表达病人(P<0.05)。Cox回归多因素分析显示UC001kfo表达水平、FIGO分期、淋巴结转移和肿瘤侵袭为影响宫颈癌病人总生存时间的独立因素(P<0.05)。结论UC001kfo在宫颈癌组织中高表达,UC001kfo高表达与宫颈癌病人的预后不良有关,UC001kfo或可成为宫颈癌病人潜在的预后标志物。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 长链非编码RNA 多重聚合酶链式反应 流式细胞术 预后
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