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NKX2-1-AS1介导miR-96-5p/PRDM16轴对未分化甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
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作者 郭宏鹏 李尤 +3 位作者 刘奇 张睿 孙成林 潘星合 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第6期547-554,共8页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)NK2同源异形盒1-反义RNA 1(NKX2-1-AS1)介导微RNA(miR)-96-5p/含有PR结构域的蛋白16(PRDM16)轴对未分化甲状腺癌(ATC)细胞体外增殖、迁移和侵袭以及体内移植瘤生长的影响。方法基于生物信息学筛选ATC组织... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)NK2同源异形盒1-反义RNA 1(NKX2-1-AS1)介导微RNA(miR)-96-5p/含有PR结构域的蛋白16(PRDM16)轴对未分化甲状腺癌(ATC)细胞体外增殖、迁移和侵袭以及体内移植瘤生长的影响。方法基于生物信息学筛选ATC组织及细胞中差异表达的lncRNA NKX2-1-AS1,并进一步筛选其靶基因miR-96-5p和下游靶基因PRDM16。双荧光素酶报告基因实验验证NKX2-1-AS1与miR-96-5p以及miR-96-5p与PRDM16之间的关系。Western blotting检测过表达miR-96-5p对NKX2-1-AS1过表达的CAL-62细胞PRDM16表达的影响。平板克隆形成实验、划痕实验和Transwell实验分别检测敲减PRDM16对过表达NKX2-1-AS1的CAL-62细胞增殖、迁移和侵袭的影响。裸鼠皮下注射CAL-62细胞,观察敲减PRDM16对NKX2-1-AS1过表达的CAL-62细胞移植瘤生长的影响。结果基于生物信息学筛选出参与调节ATC发展的NKX2-1-AS1/miR-96-5p/PRDM16轴。双荧光素酶报告基因实验验证结果显示NKX2-1-AS1与miR-96-5p、miR-96-5p与PRDM16结合。过表达NKX2-1-AS1上调CAL-62细胞中PRDM16蛋白表达;而过表达miR-96-5p可逆转此上调作用。过表达NKX2-1-AS1抑制CAL-62细胞体外增殖、迁移和侵袭以及体内移植瘤生长;而敲减PRDM16可逆转此抑制作用。结论NKX2-1-AS1可能作为竞争性内源性RNA与miR-96-5p竞争结合下游靶基因PRDM16,上调PRDM16表达,从而抑制ATC细胞体外增殖、迁移和侵袭以及体内移植瘤生长。 展开更多
关键词 NKX2-1-AS1 mir-96-5p PRDM16 未分化甲状腺癌
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miR-96对牦牛颗粒细胞凋亡和增殖的影响
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作者 贾跃宁 彭巍 +6 位作者 徐尚荣 刘海婷 黄荣 舒适 王国文 付长其 张君 《青海大学学报》 2024年第1期50-56,共7页
为研究牦牛卵巢组织内miR-96对颗粒细胞凋亡、增殖及激素分泌的影响,本试验通过采集成年牦牛卵巢内颗粒细胞,分离培养后将其分为4个处理组,分别转染miR-96模拟物(mimics)和抑制物(inhibitor)及两者的阴性对照(NC)后培养并检测颗粒细胞... 为研究牦牛卵巢组织内miR-96对颗粒细胞凋亡、增殖及激素分泌的影响,本试验通过采集成年牦牛卵巢内颗粒细胞,分离培养后将其分为4个处理组,分别转染miR-96模拟物(mimics)和抑制物(inhibitor)及两者的阴性对照(NC)后培养并检测颗粒细胞受到的影响。使用流式细胞术和CCK-8法对细胞凋亡和增殖情况进行检测,采用qPCR和Western Blot检测凋亡相关基因表达情况,ELISA检测转染后类固醇激素分泌情况。结果表明:miR-96-mimics使颗粒细胞凋亡发生抑制促进细胞增殖,并促使凋亡相关基因Bcl-2表达极显著升高,Bax表达极显著降低;ELISA检测类固醇激素水平变化显示,与mimics NC组相比miR-96-mimics组细胞培养液中孕酮(P4)分泌水平极显著降低,雌二醇(E_(2))分泌水平极显著升高;与inhibitor NC组相比miR-96-inhibitor组孕酮(P4)分泌水平极显著升高,雌二醇(E_(2))分泌水平显著降低。miR-96可促进颗粒细胞增殖并抑制凋亡,同时会对生殖激素分泌产生影响,从而参与调控牦牛卵泡发育与闭锁的过程。 展开更多
关键词 牦牛 mir-96 颗粒细胞 凋亡 增殖
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miR-96联合HMGB1检测在胃癌病情及预后评估中的临床价值
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作者 皮远涛 王鹏 +1 位作者 艾晓燕 张万里 《湖北科技学院学报(医学版)》 2024年第3期234-237,241,共5页
目的研究miR-96联合HMGB1检测在胃癌病情及预后评估中的临床价值。方法选择胃癌患者(GAC组)及胃良性疾病患者(CON组)为研究对象,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-96及HMGB1表达,比较不同临床病理因素中miR-96、HMGB1表达的差异。采... 目的研究miR-96联合HMGB1检测在胃癌病情及预后评估中的临床价值。方法选择胃癌患者(GAC组)及胃良性疾病患者(CON组)为研究对象,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-96及HMGB1表达,比较不同临床病理因素中miR-96、HMGB1表达的差异。采用ROC曲线分析HMGB1联合miR-96预测胃癌1年预后不良的敏感度和特异度。多因素Logistics回归分析胃癌死亡的危险因素。分析miR-96、HMGB1表达与生存期的关系。结果GAC组肿瘤组织miR-96、HMGB1表达均高于癌旁组织和CON组活检组织(P<0.05)。低分化、肿瘤最大径≥5cm、T3-T4、有淋巴结转移及Ⅲ-Ⅳ期胃癌患者miR-96、HMGB1表达显著高于中-高分化、肿瘤最大径<5cm、T1-T2、无淋巴结转移及Ⅰ-Ⅱ期患者。HMGB1联合miR-96预测胃癌1年预后不良敏感度、特异度均高于miR-96、HMGB1、肿瘤分化程度、肿瘤最大径、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期(P<0.05)。miR-96≥1.15、HMGB1≥0.87为胃癌死亡的独立危险因素(P<0.05)。miR-96≥1.15且HMGB1≥0.87胃癌患者中位生存期显著低于其它患者(miR-96<1.15或HMGB1<0.87)[中位生存期(31.4±4.7)月vs(42.4±5.8)月,P<0.05]。结论胃癌患者HMGB1和miR-96表达显著升高,可作为胃癌病情及预后评估的标志物,两者联合检测时可提高预测胃癌预后不良的敏感度及特异度。 展开更多
关键词 胃癌 mir-96 HMGB1 临床价值
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miR-2467、miR-96-5p在妊娠期糖尿病中的临床意义
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作者 胡丽芳 李岚 严倩 《内科急危重症杂志》 2024年第2期134-137,共4页
目的:探讨微小核糖核酸-2467(miR-2467)、miR-96-5p在妊娠期糖尿病(GDM)中的临床意义。方法:纳入108例GDM住院患者作为GDM组,另选取同期产检的糖耐量正常孕妇82例为对照组。比较2组血清miR-2467、miR-96-5p相对表达量以及空腹血糖(FBG)... 目的:探讨微小核糖核酸-2467(miR-2467)、miR-96-5p在妊娠期糖尿病(GDM)中的临床意义。方法:纳入108例GDM住院患者作为GDM组,另选取同期产检的糖耐量正常孕妇82例为对照组。比较2组血清miR-2467、miR-96-5p相对表达量以及空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2hFBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),分析miR-2467、miR-96-5p与上述血糖指标的相关性。采用Logistic多元回归模型分析GDM发生的危险因素,绘制受试者工作特征曲线,分析miR-2467、miR-96-5p评估GDM的曲线下面积(AUC)。结果:GDM组血清miR-2467表达、FBG、2hPG、HbA1c水平及HOMA-IR高于对照组,miR-96-5p表达低于对照组(P均<0.05)。Pearson相关性分析显示血清miR-2467表达与FBG、2hPG、HbA1c、HOMA-IR呈正相关,血清miR-96-5p表达与上述4项指标呈负相关(P均<0.05)。Logistic多元回归分析示孕早期BMI增长≥1.73kg/m^(2)、孕中期BMI增长≥4.88kg/m^(2)、糖尿病家族史、miR-2467≥3.44是GDM发生的危险因素,miR-96-5p≥1.95是GDM发生的保护因素(P<0.05)。血清miR-2467联合miR-96-5p评估GDM的AUC为0.865,敏感度、特异度分别为91.50%、81.50%。结论:miR-2467、miR-96-5p与GDM患者血糖指标及HOMA-IR存在相关性,对评估GDM具有一定意义。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 mir-2467 mir-96-5p 微小核糖核酸 血糖 胰岛素抵抗指数
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非酒精性脂肪性肝病患者血清miR-183-5p和miR-96-5p水平变化及其临床意义探讨 被引量:1
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作者 刘岗 张浩 胡峻 《实用肝脏病杂志》 CAS 2023年第2期197-201,共5页
目的 探讨非酒精性脂肪肝病(NAFLD)患者血清miR-183-5p和miR-96-5p水平变化及其临床意义。方法 2019年11月~2022年1月我院诊治的NAFLD患者62例和同期性别和年龄相匹配且无过量饮酒史的健康体检者80例,采用实时荧光定量RT-PCR法检测血清m... 目的 探讨非酒精性脂肪肝病(NAFLD)患者血清miR-183-5p和miR-96-5p水平变化及其临床意义。方法 2019年11月~2022年1月我院诊治的NAFLD患者62例和同期性别和年龄相匹配且无过量饮酒史的健康体检者80例,采用实时荧光定量RT-PCR法检测血清miR-183-5p和miR-96-5p水平,应用多因素Logistic回归分析NAFLD发生的危险因素,应用受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC)评估指标诊断严重脂肪性肝病的效能。结果 NAFLD患者BMI、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、空腹血糖(FPG)和血脂水平显著高于健康人(P<0.05),血清miR-183-5p和miR-96-5p水平分别为(0.8±0.2)和(1.2±0.3),显著低于健康人【分别为(1.4±0.4)和(2.3±0.6),P<0.05】;17例重度NAFLD患者血清miR-183-5p和miR-96-5p水平分别为(0.4±0.1)和(0.8±0.2),显著低于21例中度患者【分别为(0.8±0.2)和(1.2±0.3),P<0.05】或24例轻度患者【分别为(1.1±0.3)和(1.5±0.4),P<0.05】;经Logistic回归分析结果显示,BMI、HOMA-IR、FPG、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇以及血清miR-183-5p和miR-96-5p低水平是NAFLD发生的独立危险因素(P<0.05);应用血清miR-183-5p和miR-96-5p联合检测评估重度NAFLD发生的AUC为0.821,显著高于两项指标单独评估的0.713或0.718(P<0.05),其准确度、灵敏度和特异度分别达到77.4%、76.5%和77.8%。结论NAFLD患者血清miR-183-5p和miR-96-5p呈低水平,其水平越低,可能预示着肝内脂肪变程度越重,即它们的血清水平可在一定程度上反映疾病的严重程度,可作为诊断和评估病情的分子标志物,值得进一步研究。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 微小RNA-183-5p mir-96-5p 诊断
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新生儿脓毒血症血清miR-16-5p、miR-96-5p水平与疾病严重程度和机体炎性反应的相关性研究 被引量:1
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作者 刘延霞 麦菁芸 +1 位作者 林则彬 蒙晶 《中国急救复苏与灾害医学杂志》 2023年第9期1185-1188,1210,共5页
目的探讨血清微小RNA-16-5p(miR-16-5p)和微小RNA-96-5p(miR-96-5p)水平与新生儿脓毒血症(NS)疾病严重程度和机体炎性反应的相关性。方法选择2020年3月—2022年3月海南现代妇女儿童医院收治的52例NS患儿作为脓毒血症组,同时选择同期住院... 目的探讨血清微小RNA-16-5p(miR-16-5p)和微小RNA-96-5p(miR-96-5p)水平与新生儿脓毒血症(NS)疾病严重程度和机体炎性反应的相关性。方法选择2020年3月—2022年3月海南现代妇女儿童医院收治的52例NS患儿作为脓毒血症组,同时选择同期住院的52例非脓毒血症患儿作为对照组。定量检测两组血清miR-16-5p、miR-96-5p、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)和白介素6(IL-6)含量,收集两组基线资料与入院24 h内临床检查结果。采用双变量Pearson相关性检验分析血清miR-16-5p、miR-96-5p水平与疾病严重程度和炎性反应指标的相关性。结果脓毒血症组格拉斯哥昏迷评分(GCS)、急性生理学和慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)、序贯器官衰竭估计评分(SOFA)、白细胞计数(WBC)、血肌酐、PCT、CRP和IL-6水平显著高于对照组,而血清白蛋白水平显著低于对照组(均P<0.05)。脓毒血症组血清miR-16-5p表达水平显著高于对照组,而miR-96-5p表达水平显著低于对照组(均P<0.05)。miR-16-5p高表达者的GCS评分、APACHEⅡ评分、SOFA评分、WBC、PCT、CRP和IL-6水平均显著高于miR-16-5p低表达者(均P<0.05)。miR-96-5p高表达者的APACHEⅡ评分、SOFA评分、WBC、PCT、CRP和IL-6水平均显著低于miR-96-5p低表达者(均P<0.05)。脓毒血症组血清miR-16-5p水平与GCS评分、APACHEⅡ评分、SOFA评分、WBC、PCT、CRP和IL-6水平呈正相关(均P<0.05),而血清miR-96-5p水平与APACHEⅡ评分、SOFA评分、WBC、PCT、CRP和IL-6水平呈负相关(均P<0.05)。结论NS患儿血清miR-16-5p水平升高,miR-96-5p水平降低,与疾病严重程度和机体炎性反应相关,提示miR-16-5p和miR-96-5p可作为NS早期诊断和病情评估的标志物。 展开更多
关键词 mir-16-5p mir-96-5p 新生儿脓毒血症 炎性反应 相关性
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高糖环境下miR-96-5p对人角质形成细胞的影响及相关机制研究
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作者 朱艳 江芳芳 +3 位作者 熊累累 盛霞 秦淑兰 宗明 《河北医药》 CAS 2023年第24期3722-3725,3730,共5页
目的探讨高糖环境下miR-96-5p对人角质形成细胞的影响及相关机制。方法分离人角质形成细胞以50 mmol/L葡萄糖终浓度模拟高糖环境。通过转染miR-96-5p模拟物和抑制剂构建miR-96-5p过表达和抑制组,分为空白组、正常培养组、高糖培养组、... 目的探讨高糖环境下miR-96-5p对人角质形成细胞的影响及相关机制。方法分离人角质形成细胞以50 mmol/L葡萄糖终浓度模拟高糖环境。通过转染miR-96-5p模拟物和抑制剂构建miR-96-5p过表达和抑制组,分为空白组、正常培养组、高糖培养组、高糖培养+miR-96-5p minic组、高糖培养+miR-96-5p inhibitor组。采用划痕实验观察细胞迁移水平,采用CCK-8实验观察细胞增殖水平,采用Transwell实验检测细胞侵袭能力。采用Western blot检测BNIP3、FAK、FAK磷酸化蛋白(p-F AK)蛋白的表达水平。结果50 mmol/L高糖处理后角质细胞折光性降低,同时细胞中出现空洞。与空白组和正常培养组比较,高糖培养组、高糖培养+miR-96-5p minic组和高糖培养+miR-96-5p inhibitor组的各时间点细胞迁移量明显更低(P<0.05),且高糖培养+miR-96-5p inhibitor组细胞迁移量明显高于高糖培养组和高糖培养+miR-96-5p minic组(P<0.05);与空白组和正常培养组比较,高糖培养组、高糖培养+miR-96-5p minic组和高糖培养+miR-96-5p inhibitor组的各时间点细胞增殖量明显更低(P<0.05),且高糖培养+miR-96-5p inhibitor组细胞增殖明显高于高糖培养组和高糖培养+miR-96-5p minic组(P<0.05);与空白组和正常培养组比较,高糖培养组、高糖培养+miR-96-5p minic组和高糖培养+miR-96-5p inhibitor组的各时间点细胞侵袭量明显更低(P<0.05),且高糖培养+miR-96-5p inhibitor组细胞侵袭明显高于高糖培养组和高糖培养+miR-96-5p minic组(P<0.05);与空白组和正常培养组比较,高糖培养组、高糖培养+miR-96-5p minic组和高糖培养+miR-96-5p inhibitor组的各时间点BNIP3、FAK、p-F AK蛋白表达量明显更低(P<0.05),且高糖培养+miR-96-5p inhibitor组的BNIP3、FAK、p-F AK蛋白表达量明显高于高糖培养组和高糖培养+miR-96-5p minic组(P<0.05)。结论miR-96-5p可通过靶向调控BNIP3/FAK信号通路的表达从而影响角质细胞的增殖、侵袭和迁移能力,进而发挥影响糖尿病足创面愈合的作用。 展开更多
关键词 高糖环境 mir-96-5p 人角质形成细胞 增殖 侵袭 迁移
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miR-96-5p靶向PTEN激活PI3K-Akt信号通路抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭实验研究 被引量:3
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作者 滕鑫 杨正轩 +5 位作者 王媛 倪云峰 陈德凤 王艳 贠俊茹 王娟 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第11期1511-1516,共6页
目的:探讨miR-96-5p对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移、侵袭和增殖的作用及分子机制。方法:在人NSCLC细胞系A549中转染miR-96-5p类似物(miR-96-5p mimics)、阴性对照(NC mimics)或miR-96-5p抑制剂(miR-96-5p inhibitor)、阴性对照(NC inhi... 目的:探讨miR-96-5p对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移、侵袭和增殖的作用及分子机制。方法:在人NSCLC细胞系A549中转染miR-96-5p类似物(miR-96-5p mimics)、阴性对照(NC mimics)或miR-96-5p抑制剂(miR-96-5p inhibitor)、阴性对照(NC inhibitor),通过CCK-8法检测细胞的增殖能力,通过划痕实验和Transwell迁移实验检测细胞的迁移侵袭能力;采用荧光素酶报告基因实验检测miR-96-5p与磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)启动子区DNA的结合;采用蛋白质免疫印迹实验检测miR-96-5p对PTEN/PI3K/Akt信号通路的调控作用。结果:抑制miR-96-5p, NSCLC细胞的迁移、侵袭和增殖能力降低,过表达miR-96-5p促进NSCLC细胞的迁移、侵袭和增殖(均P<0.05)。荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-96-5p能与PTEN启动子区DNA结合;蛋白质免疫印迹实验结果表明,抑制miR-96-5p, PTEN表达升高、p-Akt的表达降低,过表达miR-96-5p后,PTEN表达降低、p-Akt的表达升高(均P<0.05),且沉默PTEN的表达后,逆转了敲低miR-96-5p对p-Akt的抑制作用(均P<0.05)。结论:miR-96-5p通过抑制PTEN,激活PI3K-Akt信号通路,促进NSCLC细胞的迁移、侵袭和增殖。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 mir-96-5p 磷酸酯酶与张力蛋白同源物 细胞迁移 细胞侵袭 细胞增殖
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大黄素通过miR-96-5p靶向叉头蛋白K2减轻狼疮性肾炎肾小球系膜细胞的损伤
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作者 施珊红 林威远 +1 位作者 张杰群 郑燕玲 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2023年第12期1331-1338,共8页
目的:探讨大黄素通过miR-96-5p靶向叉头蛋白K2(FOXK2)减轻狼疮性肾炎肾小球系膜细胞(MCs)损伤。方法:检测MRL/faslpr小鼠(狼疮性肾炎肾组)和MRL/MPJ小鼠(对照组)24 h尿蛋白以及血清尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr)含量。MCs分离纯化后分为:MCs... 目的:探讨大黄素通过miR-96-5p靶向叉头蛋白K2(FOXK2)减轻狼疮性肾炎肾小球系膜细胞(MCs)损伤。方法:检测MRL/faslpr小鼠(狼疮性肾炎肾组)和MRL/MPJ小鼠(对照组)24 h尿蛋白以及血清尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr)含量。MCs分离纯化后分为:MCs组(未做任何处理的MCs);L-EMO组(10μmol/L大黄素处理MCs)、M-EMO组(25μmol/L大黄素处理MCs)、H-EMO组(50μmol/L大黄素处理MCs)、H-EMO+miR-96-5p-NC组(50μmol/L大黄素处理MCs后转染miR-96-5p-NC)、HEMO+miR-96-5p-minic组(50μmol/L大黄素处理MCs后转染miR-96-5p-minic)。双荧光素酶报告基因实验验证miR-96-5p和FOXK2的靶向关系;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测miR-96-5p表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测FOXK2以及凋亡相关蛋白表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测MCs炎性因子水平;细胞计数试剂盒8(CCK-8)测定MCs活力;Annexin-V FITC/PI双染法检测MCs凋亡情况。结果:与对照组相比,狼疮性肾炎组24 h尿蛋白含量、血清BUN和Scr水平显著升高(P<0.05);与MCs组相比,L-EMO组、MEMO组、H-EMO组miR-96-5p的表达量、白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平、A450值、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白水平依次显著下降(P<0.05),FOXK2水平、细胞凋亡率、Bcl-2相关的X基因(Bax)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)蛋白水平依次显著升高(P<0.05),大黄素作用效果呈现剂量依赖性;与H-EMO组、H-EMO+miR-96-5p-NC组相比,H-EMO+miR-96-5p-minic组显著升高miR-96-5p的表达量、炎性因子水平、A450值以及Bcl-2蛋白水平(P<0.05),显著降低FOXK2水平以及细胞凋亡率(P<0.05)。结论:大黄素通过下调miR-96-5p进而上调FOXK2,从而减轻狼疮性肾炎MCs损伤。 展开更多
关键词 大黄素 mir-96-5p 叉头蛋白K2 狼疮性肾炎 肾小球系膜细胞
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miR-96-5p通过下调肌动蛋白结合蛋白1促进卵巢癌干细胞顺铂耐药性
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作者 王咏 胡蓉蓉 李芳 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期629-636,共8页
目的 探索微小核糖核酸(miRNA)miR-96-5p通过调控肌动蛋白结合蛋白1(profilin 1,PFN1)对卵巢癌干细胞(SiHa细胞)顺铂耐药的分子机制。方法 采用RT-qPCR检测miR-96-5p表达水平;将SiHa细胞置于不同浓度顺铂的培养基中,构建顺铂耐药细胞SiH... 目的 探索微小核糖核酸(miRNA)miR-96-5p通过调控肌动蛋白结合蛋白1(profilin 1,PFN1)对卵巢癌干细胞(SiHa细胞)顺铂耐药的分子机制。方法 采用RT-qPCR检测miR-96-5p表达水平;将SiHa细胞置于不同浓度顺铂的培养基中,构建顺铂耐药细胞SiHa/DDP;采用Western blot检测蛋白的表达水平;双荧光素酶报告实验验证miR-96-5p与PFN1的靶向关系;MTT、Transwell和流式细胞术检测细胞增殖、侵袭和凋亡;成球实验检测细胞的成球能力。结果 miR-96-5p在SiHa细胞中高表达,且在SiHa/DDP细胞中的表达最高;敲降miR-96-5p可抑制SiHa/DDP细胞增殖、侵袭和干细胞成球能力并促进细胞凋亡;PFN1是miR-96-5p的潜在靶基因,过表达miR-96-5p通过下调PFN1促进SiHa/DDP细胞增殖、侵袭和干细胞成球,抑制细胞凋亡。结论 miR-96-5p通过靶向调控PFN1,促进SiHa/DDP细胞增殖、侵袭及其干细胞成球并抑制凋亡,从而增强SiHa/DDP细胞对顺铂的耐药性。 展开更多
关键词 卵巢癌 干细胞 mir-96-5p 肌动蛋白结合蛋白1 增殖 侵袭 凋亡
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MiR-96靶向调控Sox6促进小鼠β细胞胰岛素合成与分泌 被引量:3
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作者 杨靖 吴丽 +5 位作者 周灵芝 赵志波 项孙敏 颜斌 吕运成 肖新华 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第2期196-200,共5页
目的探索miR-96对小鼠胰岛β细胞胰岛素合成与分泌的影响及其作用机制。方法将小鼠胰岛β细胞系(MIN6细胞)分为四组,通过脂质体LipfectamineTM2000介导将miR-96 mimics、mimicsNC、miR-96 inhibitor、inhibitor NC瞬时转染至4组细胞,荧... 目的探索miR-96对小鼠胰岛β细胞胰岛素合成与分泌的影响及其作用机制。方法将小鼠胰岛β细胞系(MIN6细胞)分为四组,通过脂质体LipfectamineTM2000介导将miR-96 mimics、mimicsNC、miR-96 inhibitor、inhibitor NC瞬时转染至4组细胞,荧光定量PCR和ELISA方法分别检测Ins1、Ins2mRNA的表达及细胞上清液中的胰岛素浓度,生物信息学分析miR-96与Sox6 3UTR的结合关系,荧光素酶报告基因检测miR-96与Sox6的结合情况,Western blot检测Sox6蛋白水平。结果与对照组比较,miR-96 mimics能增加葡萄糖刺激下MIN6细胞胰岛素的合成与分泌(P <0.01),而miR-96 inhibitor可下调胰岛素的合成与分泌(P <0.01)。miR-96与Sox6 3UTR的553-561位点结合。过表达miR-96可显著抑制Sox6荧光素酶活性及MIN6细胞中Sox6蛋白的表达。结论 miR-96靶向沉默Sox6进而促进β细胞胰岛素的合成与分泌。 展开更多
关键词 mir-96 Sox6基因 胰岛素 胰岛Β细胞
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miR-96在人乳腺癌中表达及其对乳腺癌细胞侵袭和迁移活性的影响 被引量:6
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作者 吴正升 吴强 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1686-1689,共4页
目的研究miR-96在人乳腺上皮细胞株和乳腺病变组织中表达状况及其对人乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法抽提4株人乳腺上皮细胞系和28例人乳腺病变新鲜组织总miRNA,实时定量PCR方法检测它们miR-96的表达状况;脂质体介导的转染方法... 目的研究miR-96在人乳腺上皮细胞株和乳腺病变组织中表达状况及其对人乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法抽提4株人乳腺上皮细胞系和28例人乳腺病变新鲜组织总miRNA,实时定量PCR方法检测它们miR-96的表达状况;脂质体介导的转染方法将miR-96抑制物转染人乳腺癌MCF-7细胞株;通过MTS试剂盒检测细胞增殖能力,Transwell侵袭和迁移实验检测细胞侵袭及迁移能力。结果miR-96在高侵袭乳腺癌细胞株中表达较低侵袭乳腺细胞明显下调(P<0.01);人乳腺癌组织中miR-96表达较乳腺良性病变组织明显下调(P<0.01);miR-96抑制物转染乳腺癌MCF-7后,乳腺癌细胞侵袭和迁移活力较阴性对照组细胞明显增强(P<0.05),而细胞增殖活力改变无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-96在人乳腺癌细胞株和乳腺癌组织中存在表达下调,并对人乳腺癌细胞的侵袭及迁移能力可能存在一定负性调控作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 MIRNA mir-96 增殖 侵袭 迁移
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miR-96-5p上调抑制肺腺癌细胞A549的增殖 被引量:3
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作者 刘德纲 彭江洲 +1 位作者 李军 郑少强 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第16期2625-2628,共4页
目的探讨miR-96-5p上调对A549增殖的影响。方法 miR-96-5p干扰和高表达载体、shR-NA-mTOR分别转染二甲双胍干预和未干预的A549后,观察细胞增殖和p21、cyclin D1、p-4E-BP、p-S6K的表达,萤光素酶试验鉴定miR-96-5p的靶点mTOR。结果上调mi... 目的探讨miR-96-5p上调对A549增殖的影响。方法 miR-96-5p干扰和高表达载体、shR-NA-mTOR分别转染二甲双胍干预和未干预的A549后,观察细胞增殖和p21、cyclin D1、p-4E-BP、p-S6K的表达,萤光素酶试验鉴定miR-96-5p的靶点mTOR。结果上调miR-96-5p可单独通过mTOR/p-4E-BP/p-S6K通路或协同二甲双胍抑制A549增殖。上调miR-96-5p可增加p21、降低cyclin D1表达,这可能与miR-96诱导的G1期阻滞有关。mTOR野生型3′UTR组萤光比值显著低于空白对照组和突变型组。结论miR-96-5p通过靶向mTOR抑制A549增殖。 展开更多
关键词 肺腺癌 mir-96 A549 MTOR 增殖
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miR-96与miR-103在肝癌组织中的表达及其与预后的关系 被引量:2
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作者 肖维 李泉 +1 位作者 张洪昌 韦杨年 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2020年第6期446-450,共5页
目的探讨miR-96与miR-103在肝癌组织中的表达及其与预后的关系。方法选取122例肝细胞癌患者作为本研究对象。聚合酶链式反应检测miR-96和miR-103表达水平,采用单因素和多因素Cox回归模型,探讨肝癌患者中位生存时间的危险因素并建立预测... 目的探讨miR-96与miR-103在肝癌组织中的表达及其与预后的关系。方法选取122例肝细胞癌患者作为本研究对象。聚合酶链式反应检测miR-96和miR-103表达水平,采用单因素和多因素Cox回归模型,探讨肝癌患者中位生存时间的危险因素并建立预测模型。结果肝癌组织中miR-96和miR-103相对表达水平均显著高于癌旁正常组织;肝癌组织中miR-96和miR-103的表达与肿瘤直径、淋巴结转移、临床分期及分化程度均有关(均P<0.05),而与性别、年龄及合并肝硬化等无关(P>0.05);所有患者随访60月,中位生存时间为37.8月。单因素分析结果显示:肝细胞癌患者中位生存时间与肿瘤直径、淋巴结转移、TNM分期、病理分化程度、miR-96和miR-103表达水平差异均有统计学意义(均P<0.05)。多因素分析结果显示:TNM分期为Ⅲ~Ⅳ、低分化、淋巴结转移、miR-96和miR-103高表达是肝癌患者中位生存时间独立危险因素。结论肝癌组织中miR-96和miR-103的高表达是患者预后差的独立影响因素,可作为原发性肝癌患者预后评估指标。 展开更多
关键词 mir-96 mir-103 肝细胞癌 预后
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猪miR-96-5p组织表达谱及其关键靶基因分析 被引量:2
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作者 杨敏 滚双宝 +7 位作者 闫尊强 王鹏飞 杨巧丽 黄晓宇 唐于然 石海霞 马艳萍 赵进 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2021年第5期18-27,共10页
【目的】在前期感染C型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens type C,C.perfringens type C)攻毒组及对照组仔猪回肠组织高通量测序结果的基础上,为研究猪miR-96-5p在不同组织中的表达,分析其关键靶基因在仔猪感染C型产气荚膜梭菌导致... 【目的】在前期感染C型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens type C,C.perfringens type C)攻毒组及对照组仔猪回肠组织高通量测序结果的基础上,为研究猪miR-96-5p在不同组织中的表达,分析其关键靶基因在仔猪感染C型产气荚膜梭菌导致腹泻过程中的调控作用.【方法】采用RT-qPCR方法检测miR-96-5p在仔猪各组织的表达量,构建组织表达谱,并检测对照组(IC)、易感组(IS)和耐受组(IR)回肠组织中miR-96-5p及其靶基因的表达量;利用生物信息学软件对miR-96-5p进行保守性分析、靶基因预测、GO功能和KEGG信号通路富集分析.【结果】miR-96-5p成熟体序列在不同物种间高度保守;预测到靶基因179个;预测获得与免疫炎症反应相关的信号通路有ErbB和MAPK;筛选到与仔猪抵抗C型产气荚膜梭菌感染相关的靶基因有FOXO1、MAP2K1;RT-qPCR结果显示,miR-96-5p在回肠组织中高表达,且其在IC、IS、IR组回肠组织中的表达量与高通量测序结果趋势一致,其靶基因FOXO1、MAP2K1在IR和IS组的表达量均极显著低于IC组(P<0.01),IS组极显著低于IR组(P<0.01).【结论】miR-96-5p可能靶向调控FOXO1、MAP2K1参与仔猪感染C型产气荚膜梭菌性腹泻的过程. 展开更多
关键词 C型产气荚膜梭菌 mir-96-5p 仔猪 腹泻
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骨肉瘤miR-96的表达与细胞增殖和凋亡 被引量:2
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作者 吴德明 刘翔 +1 位作者 江川 戴闽 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期285-291,共7页
背景与目的:微小RNA(microRNA,miRNA)是一类内源性的非编码小分子RNA,其主要通过与靶mRNA作用抑制转录后的翻译。miR-96是在多类肿瘤细胞中高表达的小RNA分子。本研究旨在检测miR-96在骨肉瘤组织中的表达,并研究其在骨肉瘤细胞的增殖、... 背景与目的:微小RNA(microRNA,miRNA)是一类内源性的非编码小分子RNA,其主要通过与靶mRNA作用抑制转录后的翻译。miR-96是在多类肿瘤细胞中高表达的小RNA分子。本研究旨在检测miR-96在骨肉瘤组织中的表达,并研究其在骨肉瘤细胞的增殖、细胞周期及凋亡中的意义。方法:运用TagMan MGB探针法检测40例骨肉瘤组织及对应的骨组织中miR-96的表达;应用反义技术降低骨肉瘤细胞(U2-OS和MG-63)中miR-96的表达;采用MTT比色法检测细胞增殖的改变;应用流式细胞技术检测骨肉瘤细胞细胞周期和凋亡情况。结果:在40例骨肉瘤组织中,62.5%(25/40)的骨肉瘤组织miR-96表达明显高于对应骨组织(P<0.05);反义miR-96转染骨肉瘤细胞U2-OS和MG-63后,miR-96的表达明显降低,U2-OS和MG-63骨肉瘤细胞生长受到明显抑制,其生长主要停滞在G0/G1期,而S期和G2/M期细胞的比例下降。另外,降低miR-96的表达,U2-OS和MG-63骨肉瘤细胞早期凋亡明显增加。结论:miR-96在骨肉瘤组织中表达明显上调,降低其表达能明显抑制U2-OS和MG-63骨肉瘤细胞的生长,并诱导细胞早期凋亡增加,miR-96可能成为骨肉瘤基因表达调控的新靶点。 展开更多
关键词 骨肉瘤 mir-96 反义单核苷酸 肿瘤抑制
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miR-96对胃癌细胞侵袭迁移的影响 被引量:2
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作者 毛盛勋 周智勇 +2 位作者 何楠 尹成龙 曹家庆 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2013年第34期3775-3782,共8页
目的:分析MicroRNA-96(miR-96)在胃癌组织中的表达情况;体外研究miR-96反义寡核酸技术(antisense oligonucleotide,ASO)对胃癌细胞侵袭和迁移的影响.方法:运用荧光定量PCR检测122例胃癌组织及对应正常组织中miR-96的表达;通过miR-96 AS... 目的:分析MicroRNA-96(miR-96)在胃癌组织中的表达情况;体外研究miR-96反义寡核酸技术(antisense oligonucleotide,ASO)对胃癌细胞侵袭和迁移的影响.方法:运用荧光定量PCR检测122例胃癌组织及对应正常组织中miR-96的表达;通过miR-96 ASO降低胃癌细胞中miR-96的表达,采用Transwell实验和划痕实验观察miR-96ASO对胃癌细胞侵袭和迁移能力的影响,同时运用Western blot的方法检测侵袭相关蛋白的表达变化.结果:在122例胃癌病例中,62.30%(76/122)的胃癌组织miR-96表达明显高于对应正常组织(P<0.05);与空白对照组和转染无义ASO组相比,miR-96 ASO可以显著降低miR-96的表达(P<0.05);Transwell实验和划痕实验结果显示转染miR-96 ASO后,胃癌细胞的侵袭迁移能力明显下降,同时相关侵袭蛋白基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)和MMP9表达下降(P<0.05).结论:miR-96在胃癌组织中表达上调,降低miR-96的表达可有效抑制胃癌细胞的侵袭和迁移.miR-96有可能成为胃癌侵袭转移调控的新靶点. 展开更多
关键词 mir-96 胃癌 侵袭 迁移 反义单核苷酸
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前列腺癌miRNA表达谱及miR-96在氧化应激信号通路中的作用 被引量:1
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作者 朱宝益 李小娟 +5 位作者 黄怀球 蔡燚 叶春伟 陶奕然 高新 温星桥 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期567-570,共4页
【目的】检测miRNA在前列腺癌与正常前列腺组织的表达差异,并探讨表达异常的miRNA在前列腺癌发病中的作用。【方法】前列腺癌和正常前列腺组织样品(100 mg),Trizol法提取RNA,应用聚合酶链反应(PCR)芯片检测miRNA的表达;同时以250μmol/... 【目的】检测miRNA在前列腺癌与正常前列腺组织的表达差异,并探讨表达异常的miRNA在前列腺癌发病中的作用。【方法】前列腺癌和正常前列腺组织样品(100 mg),Trizol法提取RNA,应用聚合酶链反应(PCR)芯片检测miRNA的表达;同时以250μmol/L的过氧化氢(H2O2)刺激前列腺癌PC-3细胞4 h,继续正常培养12 h。检测不同时间点细胞内活性氧(ROS)水平,以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-96在各组细胞中的表达。【结果】与正常前列腺组织相比,前列腺癌组织中miR-144、miR-216a上调5.9倍,miR-96上调30.4倍,miR-488、miR-873下调到4.9%,差异有统计学意义(P<0.05)。PC-3细胞内ROS为RWPE-1细胞的5.2倍(P<0.05),miR-96在PC-3细胞中的表达为RWPE-1细胞的15.4倍(P<0.05)。H2O2刺激PC-3细胞1、4 h后,胞内ROS为对照组的4.3、6.4倍(P均<0.05),miR-96表达水平为对照组的10.2、18.9倍(P均<0.05);10、16 h组胞内ROS为对照组的2.5倍、1.2倍,miR-96表达水平为对照组的2.7、1.9倍(P均>0.05)。【结论】在前列腺癌组织中发现了若干有表达差异的miRNA;miR-96参与前列腺癌细胞的氧化应激信号途径,可能是防治前列腺癌的重要分子靶点。 展开更多
关键词 前列腺癌 MIRNA PCR芯片 氧化应激 mir-96
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miR-96与转移抑制因子1是前列腺癌骨转移潜在的生物学标志物 被引量:2
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作者 吴兴成 周毅 +1 位作者 郑国洋 肖雨 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第7期1010-1013,共4页
目的探讨miR-96和转移抑制因子1(MTSS1)在前列腺癌(PCa)组织中的表达及其临床意义。方法收集PCa患者标本89例,癌旁组织作为正常对照,分别用原位杂交及免疫组化检测PCa组织及癌旁组织中miR-96和MTSS1的表达水平,并对二者进行相关性分析... 目的探讨miR-96和转移抑制因子1(MTSS1)在前列腺癌(PCa)组织中的表达及其临床意义。方法收集PCa患者标本89例,癌旁组织作为正常对照,分别用原位杂交及免疫组化检测PCa组织及癌旁组织中miR-96和MTSS1的表达水平,并对二者进行相关性分析。结果 89例PCa组织中miR-96阳性表达率为87.64%,显著高于癌旁组织(P<0.01);而MTSS1蛋白阳性表达率为16.85%,显著低于癌旁组织(P<0.01);miR-96的表达随着Gleason评分和临床分期演进而增加(P<0.05),有骨转移的miR-96的表达高于无骨转移组(P<0.05);MTSS1的表达随着Gleason评分和临床分期演进而下调,且有骨转移的MTSS1的表达显著低于无骨转移组(P<0.01);miR-96表达与MTSS1的表达呈显著负相关(P<0.01)。结论 miR-96与MTSS1可能是PCa骨转移的重要生物学标志。 展开更多
关键词 mir-96 转移抑制因子1 前列腺癌 骨转移
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Let-7a和miR-96对胰腺癌K-RAS基因的调节作用 被引量:2
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作者 于双妮 孟云霄 +2 位作者 马怡晖 卢朝辉 陈杰 《协和医学杂志》 2012年第1期26-29,共4页
目的探讨miRNA分子Let-7a和miR-96对胰腺癌系K-RAS基因的抑制作用及其致病机制。方法通过检测胰腺癌细胞系miRNA分子(Let-7a和miR-96)水平、K-RAS基因mRNA和蛋白质表达水平,观察Let-7a和miR-96水平与K-RAS蛋白表达的关系;并通过升高胰... 目的探讨miRNA分子Let-7a和miR-96对胰腺癌系K-RAS基因的抑制作用及其致病机制。方法通过检测胰腺癌细胞系miRNA分子(Let-7a和miR-96)水平、K-RAS基因mRNA和蛋白质表达水平,观察Let-7a和miR-96水平与K-RAS蛋白表达的关系;并通过升高胰腺癌细胞Let-7a和miR-96水平,检测其对K-RAS蛋白表达水平的影响。结果胰腺癌细胞系K-RAS的mRNA与蛋白质表达均保持在一个较高的水平;胰腺癌细胞系miRNA分子Let-7a和miR-96水平均较低;升高胰腺癌细胞Let-7a或miR-96水平会降低K-RAS蛋白表达水平。结论正常状态下,Let-7a和miR-96通过调控K-RAS基因发挥对肿瘤的抑制作用,胰腺癌细胞的Let-7a和miR-96水平呈一定程度的降低,削弱了对K-RAS基因的抑制作用,进而参与肿瘤的致病过程。 展开更多
关键词 胰腺癌 Let-7a mir-96 K-RAS
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