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rhIGF-1对成骨细胞增殖、分化及骨保护素、骨保护素配体基因mRNA表达的影响 被引量:6
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作者 石义刚 陶天遵 +5 位作者 陶树清 刘枫晨 徐强 王立春 吉光荣 吴丽萍 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2003年第1期31-34,共4页
目的 观察不同剂量rhIGF 1对成骨细胞增殖、分化及骨保护素、骨保护素配体mRNA基因表达的影响 ,为明确骨保护素、骨保护素配体在骨质疏松症发病的作用机理及rhIGF 1在临床中的应用提供实验依据。方法 取 2代培养的大鼠成骨细胞 ,在rhI... 目的 观察不同剂量rhIGF 1对成骨细胞增殖、分化及骨保护素、骨保护素配体mRNA基因表达的影响 ,为明确骨保护素、骨保护素配体在骨质疏松症发病的作用机理及rhIGF 1在临床中的应用提供实验依据。方法 取 2代培养的大鼠成骨细胞 ,在rhIGF 1为 0ng/ml,10ng/ml,2 0ng/ml,5 0ng/ml的浓度中培养。观察细胞的生长及钙结节的形成 ,MTT法、碱性磷酸酶 (ALP)、骨钙素 (OCN)测定细胞增殖和分化 ,RT PCR测定rhIGF 1对成骨细胞骨保护素、骨保护素配体基因mRNA表达的影响。结果 成骨细胞在 7d可铺满瓶壁 ,3 0d可形成钙结节 ,rhIGF 1可促进成骨细胞的增殖、ALP和OGN的分泌 ,促进骨保护素、骨保护素配体基因的表达 ,以促进骨保护素表达明显 ,在rhIGF 1为 10ng/ml时作用明显。结论rhIGF 1可促进大鼠成骨细胞的增殖、分化 ,及骨保护素、骨保护素配体基因mRNA的表达 ,骨保护素mRNA表达显著。rhIGF 1可能通过影响骨保护素、骨保护素配体而调节成骨细胞、破骨细胞的平衡 ,使骨重建 。 展开更多
关键词 rhigf-1 成骨细胞增殖 骨保护素 骨保护素配体 MRNA 骨质疏松 成骨细胞分化 基因表达
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蛋内注射rhIGF-IGF-1对高邮鸭骨骼肌发育的影响 被引量:1
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作者 朱春红 陶志云 +4 位作者 宋卫涛 徐文娟 章双杰 乔龙山 李慧芳 《中国家禽》 北大核心 2017年第24期5-8,共4页
胰岛素样生长因子1(IGF-1)是重要的生长因子,参与机体生长发育的多个进程。研究利用蛋内注射技术处理孵化前高邮鸭受精蛋,以揭示外源注射IGF-1对雏鸭发育及骨骼肌生长的影响;同时在细胞水平分析外源重组人类胰岛素样生长因子1(rhIGF-1)... 胰岛素样生长因子1(IGF-1)是重要的生长因子,参与机体生长发育的多个进程。研究利用蛋内注射技术处理孵化前高邮鸭受精蛋,以揭示外源注射IGF-1对雏鸭发育及骨骼肌生长的影响;同时在细胞水平分析外源重组人类胰岛素样生长因子1(rhIGF-1)对成肌细胞活性影响和内源IGF-1/IGFR mRNA表达影响。结果显示:孵化前蛋清内注射rhIGF-1显著增加育雏期6~21日龄雏鸭体重水平,骨骼肌解剖后称重发现,14日龄处理组胸肌增重显著高于对照组(P<0.05);细胞水平试验结果显示,细胞培养体系中添加不同浓度rhIGF-1,随着培养时间的延长,处理组和对照组细胞活性差异不显著(P>0.05);但成肌细胞处理组和对照组IGF-1/IGFR mRNA表达水平差异显著(P<0.05)。研究结果揭示,孵化前蛋清内注射rhIGF-1增加高邮鸭出壳前后的体重,显著提高育雏中期胸肌增重水平,影响成肌细胞中IGF-1/IGFR mRNA表达。 展开更多
关键词 蛋内注射 rhigf-1 高邮鸭 骨骼肌 发育
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rhIGF-1等电点的测定
3
作者 莫继先 高学军 +1 位作者 刘晓飞 李春 《生物技术》 CAS CSCD 2008年第3期38-40,共3页
目的:通过测定rhIGF-1等电点为例,建立一种快速测定蛋白质等电点的方法。方法:采用等电聚焦电泳(isoelectric focusing,IEF)和高效液相色谱(HPLC)连用的方法,主要以7.5%的凝胶浓度、3%的交联度及6%的两性电解质浓度配置凝胶,电泳后的凝... 目的:通过测定rhIGF-1等电点为例,建立一种快速测定蛋白质等电点的方法。方法:采用等电聚焦电泳(isoelectric focusing,IEF)和高效液相色谱(HPLC)连用的方法,主要以7.5%的凝胶浓度、3%的交联度及6%的两性电解质浓度配置凝胶,电泳后的凝胶经凝胶成像系统和HPLC分析确定目的条带及其pI值。结果:rhIGF-1的等电点为pI=8.20,pH梯度曲线线形回归方程为Y=0.0664X+3.8217,相关系数r达0.9956,说明等电聚焦电泳测定结果准确。 展开更多
关键词 rhigf-1 等电聚焦电泳(IEF) HPLC
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鸭胚卵内注射rhIGF-1对其出壳后卵泡抑素基因表达及胸肌发育的影响 被引量:4
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作者 丁庆峰 刘贺贺 +5 位作者 陈禧 张荣萍 万一 李林森 李亮 王继文 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1101-1106,共6页
本研究通过卵内注射技术,注射120、100、80和0(对照组)ng.mL-1的重组人胰岛素样生长因子(rhIGF-1)到孵化中的鸭胚蛋白中,并检测2日龄雏鸭胸肌发育和卵泡抑素(FST)表达的情况,探讨不同浓度rhIGF-1对FST表达及鸭胸肌发育的影响。结果表明... 本研究通过卵内注射技术,注射120、100、80和0(对照组)ng.mL-1的重组人胰岛素样生长因子(rhIGF-1)到孵化中的鸭胚蛋白中,并检测2日龄雏鸭胸肌发育和卵泡抑素(FST)表达的情况,探讨不同浓度rhIGF-1对FST表达及鸭胸肌发育的影响。结果表明,卵内注射不同浓度的rhIGF-1对雏鸭体质量的影响不显著(P>0.05);但雏鸭胸肌质量、胸肌率随rhIGF-1注射浓度的增加而升高,120 ng.mL-1处理组胸肌质量、胸肌率相对对照组有显著差异(P<0.05);120 ng.mL-1的rhIGF-1处理组肌纤维直径和横切面积最大,显著高于对照组(P<0.05);FST基因在雏鸭胸肌中的表达水平也随rhIGF-1的浓度增大而升高,其中以120 ng.mL-1处理组FST基因表达量最高,显著高于其它各处理组(P<0.05)。结果表明IGF-1对FST的调控作用以浓度依赖的方式进行,高浓度的IGF-1导致FST高表达并促进肌肉发育。 展开更多
关键词 雏鸭 卵内注射 rhigf-1 肌纤维 FOLLISTATIN
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rhIGF-1对成骨细胞增殖、BMP-2及Cbfa1基因表达的影响 被引量:5
5
作者 张艳红 董进 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2010年第3期157-160,共4页
目的通过重组人胰岛素样生长因子(rhIGF-1)对体外成骨细胞增殖、骨形态蛋白-2(BMP-2)及核心结合因子1(Cbfa1)基因表达的影响,探讨rhIGF-1对骨代谢影响的可能机制。方法不同浓度的rhIGF-1(0、10、50、100ng/ml)刺激体外培养的大鼠成骨细... 目的通过重组人胰岛素样生长因子(rhIGF-1)对体外成骨细胞增殖、骨形态蛋白-2(BMP-2)及核心结合因子1(Cbfa1)基因表达的影响,探讨rhIGF-1对骨代谢影响的可能机制。方法不同浓度的rhIGF-1(0、10、50、100ng/ml)刺激体外培养的大鼠成骨细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,用半定量RT-PCR法检测成骨细胞BMP-2、Cbfa1基因的表达。结果rhIGF-1可明显促进成骨细胞增殖(P<0.05),并促进成骨细胞BMP-2、Cbfa1基因的表达(P<0.01),具有浓度依赖性。结论rhIGF-1可促进成骨细胞的增殖、分化及成熟,可能是通过增强BMP-2、Cbfa1基因的表达来实现的。 展开更多
关键词 重组人胰岛素样生长因子1 成骨细胞 增殖 骨形态蛋白-2 核心结合因子1
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人重组胰岛素样生长因子1对慢性阻塞性肺疾病大鼠膈肌细胞凋亡的保护作用及机制探讨 被引量:1
6
作者 欧阳晓平 孙丽华 +2 位作者 谷伟 谭焰 高景蓬 《国际呼吸杂志》 2009年第19期1153-1155,共3页
目的探讨人重组胰岛素样生长因子1(rhIGF-1)对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)大鼠膈肌细胞凋亡的保护作用及其可能机制。方法雄性Wistar大鼠45只,随机分为对照组(A组),COPD模型组(B组),COP... 目的探讨人重组胰岛素样生长因子1(rhIGF-1)对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)大鼠膈肌细胞凋亡的保护作用及其可能机制。方法雄性Wistar大鼠45只,随机分为对照组(A组),COPD模型组(B组),COPD模型+rhIGF-1干预组(C组),每组15只。第1天、第14天和第28天各组处死5只,取完整膈肌称重后用原位末端标记法测定各组膈肌细胞凋亡率,免疫组织化学法测定膈肌细胞Fas蛋白表达情况,RT-PCR检测各组膈肌细胞Fas基因表达水平。结果第28天后B、C组膈肌质量均小于A组,C组大于B组(P〈0.05)。同一时间点B、C组膈肌细胞凋亡率,Fas蛋白阳性细胞率及Fas基因表达水平均大于A组,C组小于B组(P〈0.05)。结论Fas/FasL介导的凋亡途径参与了膈肌凋亡的发生,rhIGF-1可能通过干预Fas/FasL途径减少了膈肌凋亡,对COPD大鼠的膈肌凋亡产生保护作用。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 人重组胰岛素样生长因子1 膈肌 凋亡
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胰岛素样生长因子-1对大鼠血肿周围缺氧诱导因子及脑水肿动态观察的影响 被引量:1
7
作者 孙晓培 朱永舜 刘超 《医学动物防制》 2012年第8期880-882,共3页
目的研究重组人胰岛素样生长因子(rhIGF-1)对大鼠血肿周围缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在21d内变化的影响。方法采用自体鼠尾血脑内注射法建立动物模型,动物的实验脑出血模型,应用免疫组化方法检测脑出血后的HI... 目的研究重组人胰岛素样生长因子(rhIGF-1)对大鼠血肿周围缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在21d内变化的影响。方法采用自体鼠尾血脑内注射法建立动物模型,动物的实验脑出血模型,应用免疫组化方法检测脑出血后的HIF-1α蛋白表达情况,并应用干湿比重法测定脑组织含水量。结果出血后,HIF-1α蛋白阳性表达率随时间逐渐增加,72h达高点,此后逐渐下降,脑出血后各时间点阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05),脑出血IGF-1干预组较脑出血组及假手术组各时间点脑组织含水量低,HIF-1α蛋白阳性率较低。结论胰岛素样生长因子能显著降低HIF-1α表达,对脑出血后脑组织有良好的保护作用。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子 缺氧诱导因子 脑水肿 脑出血
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重组胰岛素样生长因子-1的制备 被引量:2
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作者 王照林 冯军 +2 位作者 黄宗庆 马洁 赵文杰 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期749-754,共6页
本文建立大肠埃希菌高效表达重组人胰岛素样生长因子-1(recombinant human insulin-like growth factor-1,rhIGF-1)的制备工艺。应用本实验室构建的基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET28a-Sp1-IGF-1,对其进行高密度发酵和IPTG 诱导表达,发... 本文建立大肠埃希菌高效表达重组人胰岛素样生长因子-1(recombinant human insulin-like growth factor-1,rhIGF-1)的制备工艺。应用本实验室构建的基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET28a-Sp1-IGF-1,对其进行高密度发酵和IPTG 诱导表达,发酵液经双水相萃取获得包涵体,产量为3 g/L;对包涵体进行变性和复性,建立反相HPLC 法监测复性过程,复性正确率可达60%;复性液经过柱色谱纯化和冷冻干燥,样品纯度大于98%,总收率为35%。本工艺得到的rhIGF-1,分子质量与理论值一致,其HPLC 保留时间、肽图和生物活性均与参比制剂一致。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-1 重组表达 包涵体 复性
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